一种壳聚糖海绵体医用敷料及其制备方法.pdf

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1、(10)申请公布号 CN 103341202 A (43)申请公布日 2013.10.09 CN 103341202 A *CN103341202A* (21)申请号 201310237008.5 (22)申请日 2013.06.17 A61L 15/28(2006.01) A61L 15/42(2006.01) C08J 9/28(2006.01) (71)申请人 江苏迪沃生物制品有限公司 地址 225300 江苏省泰州市中国医药城三期 G22栋办公区东厂房3-4楼江苏迪沃生 物制品有限公司 (72)发明人 贾峻峰 (54) 发明名称 一种壳聚糖海绵体医用敷料及其制备方法 (57) 摘要 本。

2、发明公开了一种壳聚糖海绵体医用敷料及 其制备方法， 所述壳聚糖海绵体医用敷料包括 ： 水溶性壳聚糖或其盐、 发泡剂及保湿剂三种组分， 所述三种组分按质量百分比分别为 ： 0.1%-10% 的水溶性壳聚糖或其盐， 0.001%-5% 的发泡剂， 0.05%-8% 的保湿剂。本发明壳聚糖海绵体医用敷 料发泡效果好、 吸附能力高、 保湿性强、 柔软可塑 性强， 填补了优良医用敷料的空白。 (51)Int.Cl. 权利要求书 2 页 说明书 11 页 附图 2 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书2页 说明书11页 附图2页 (10)申请公布号 CN 103341。

3、202 A CN 103341202 A *CN103341202A* 1/2 页 2 1. 一种壳聚糖海绵体医用敷料， 其特征在于， 它包括 ： 水溶性壳聚糖或其盐、 发泡剂及 保湿剂三种组分， 所述三种组分的含量按质量百分比分别为 ： 水溶性壳聚糖或其盐 0.1%-10% ； 发泡剂 0.001%-5% ； 保湿剂 0.05%-8%。 2. 根据权利要求 1 所述的壳聚糖海绵体医用敷料， 其特征在于， 所述三种组分的含量 按质量百分比分别为 ： 水溶性壳聚糖或其盐 2%-7% ； 发泡剂 0.1%-2% ； 保湿剂 1%-5%。 3. 根据权利要求 2 所述的壳聚糖海绵体医用敷料， 其特征。

4、在于， 所述水溶性壳聚糖或 其盐选自羧化壳聚糖、 羧甲基壳聚糖、 壳聚糖盐酸盐、 壳聚糖醋酸盐、 壳聚糖谷氨酸盐中的 至少一种。 4. 根据权利要求 3 所述的壳聚糖海绵体医用敷料， 其特征在于， 所述医用发泡剂选自 吐温、 泊洛沙姆、 司盘、 甘油脂肪酸酯、 山梨醇脂肪酸酯中的至少一种。 5. 根据权利要求 4 所述的壳聚糖海绵体医用敷料， 其特征在于， 所述保湿剂选自甘油、 丙二醇、 聚乙二醇中的至少一种。 6. 根据权利要求 5 所述的壳聚糖海绵体医用敷料， 其特征在于， 包括如下质量百分比 的组分 ： 羧甲基壳聚糖 2%-7% 泊洛沙姆 1%-2% 聚乙二醇 2%-5%。 7. 根据权。

5、利要求 5 所述的壳聚糖海绵体医用敷料， 其特征在于， 包括如下质量百分比 的组分 ： 羧甲基壳聚糖 2%-7% 吐温 1%-2% 聚乙二醇 2%-5%。 8. 一种壳聚糖海绵体医用敷料的制备方法， 其特征在于， 操作步骤如下 ： 步骤 1 ： 制备溶液 ： 取适量的发泡剂充分浸泡后， 置于搅拌器内以转速 100-180 r/ min 的低速搅拌均匀， 然后向发泡剂溶液内加入保湿剂， 在搅拌器内以 180-400r/min 的中 速搅拌均匀， 边搅拌边向其中加入水溶性壳聚糖或其盐至其溶解均匀， 再使搅拌器以转速 400-700 r/min 的高速搅拌， 使溶液发泡膨胀， 得发泡好的溶液 ； 步。

6、骤2 ： 预冻 ： 将上述发泡好的溶液注入硅胶模具盘里， 置于-70-20的速冻箱内 预冻 1h 24h， 得海绵半成品 ； 步骤 3 ： 将步骤 2 中的海绵半成品， 放入真空冷冻干燥机里， 使所述海绵半成品在温 度 -20 +50之间、 真空度小于 30 帕的条件下， 分段进行升华及保温， 并且升华及保温 总时间不小于 10 小时。 9.根据权利要求8所述的壳聚糖海绵体医用敷料的制备方法， 其特征在于， 步骤3中所 述的分段进行升华及保温， 包括依次进行的一次升华及保温、 二次升华及保温、 三次升华及 权 利 要 求 书 CN 103341202 A 2 2/2 页 3 保温 ； 将步骤2。

7、中的海绵半成品在温度为-18-10的条件下进行一次升华及保温， 其中 升华 20min-90min， 保温 5h-10h ； 经过一次升华及保温后再连续进行二次升华及保温， 二次 升华及保温时的温度在-8+3之间， 其中升华15min70min， 保温1h-3h ； 在二次升华 及保温后连续进行三次升华及保温， 三次升华及保温时的温度在 +30 +50之间， 其中 升华 10min-70min， 保温 1h-3h ； 所述分段进行升华及保温的温度、 时间均通过所述真空冷冻干燥机的电脑控制系统预 设完成。 权 利 要 求 书 CN 103341202 A 3 1/11 页 4 一种壳聚糖海绵体医。

8、用敷料及其制备方法 技术领域 0001 本发明涉及于组织工程支架材料的交联技术， 特别是一种壳聚糖海绵体医用敷料 及其制备方法。 背景技术 0002 敷料是一种用来暂时性覆盖伤口用的医用材料， 其最主要的功能是控制伤口的渗 出液及保护伤口， 以免受细菌及尘粒的污染， 提供有利于伤口愈合的环境。 选择合适的敷料 覆盖在伤口上， 可协助控制出血、 防止感染并吸收分泌物， 从而促进伤口快速愈合。此时敷 料起到保护创面、 防止体液和蛋白质流失、 防止细菌侵入引起炎症的作用， 并对增殖细胞提 供支撑。 皮肤的创伤为临床常见疾病， 当皮肤出现大面积缺损或短时间难于愈合的情况下， 在创口表面覆盖敷料极其重要。

9、。在相当长一段时间内， 使用最普遍的外科创伤敷料是医用 脱脂棉和纱布。 它对创伤的治疗能起到一定的促进作用， 但是存在很大的不足。 例如其使用 时， 创面肉芽组织向敷料内生长而引起粘连 ； 解除时， 易造成二次创伤 ； 由于创面积液而易 引起细菌感染。随着时代的进步和科技的发展， 由传统的纱布逐步发展为今天的高科技组 分含量的创伤敷料， 敷料的组分及种类在近十几年中发生了突破性的变化。临床的需要给 敷料的研发提出了更高要求， 也成为进行新型敷料开发的动力。因此， 开发一种新型敷料， 使其不仅能覆盖创面， 还能帮助伤口愈合， 防止细菌侵袭， 减少伤口区域的超高代谢和营养 不良， 减轻伤口疼痛， 。

10、加快伤口愈合， 成了科研人员的主攻方向。 因此， 对敷料的交联处理以 提高其质量和吸水性能非常重要。通常用于敷料的基体材料有两类 ： 天然高分子材料和合 成高分子材料。 天然高分子材料主要有胶原、 明胶、 壳聚糖、 淀粉、 硫酸软骨素、 海藻酸、 纤维 素等。常用的人工高分子材料包括聚乙二醇 （PEG） 、 聚氨酯 （PU） 、 聚乙烯吡咯烷酮 （PVP） 等。 一般来说， 天然高分子具有优异的生物相容性和降解性， 而合成高分子具有良好的物理机 械性能、 加工性能及化学稳定性。 这些材料可控性好， 实用性高， 具有各自的优点和特点， 因 此作为生物材料在组织工程与再生医学领域得到了广泛地应用。。

11、 0003 天然多聚糖分子 （如壳聚糖、 淀粉、 海藻酸等） 是医用敷料的理想材料， 一方面它们 具有很好的生物相容性， 另一方面其分子链上具有多种可反应的活性官能团， 可轻易通过 接枝等改性手段进行化学修饰， 能有效改善材料的性能和质量。目前很多海绵体敷料都基 于这类材料， 如能避免使用有毒化学试剂进行交联， 比如采用双分子共轭反应交联法， 则有 望得到高溶胀率和生物相容性好的多聚糖海绵体医用敷料。 壳聚糖、 淀粉、 海藻酸类物质为 天然生物材料， 可以在人体内降解为安全无毒的氨基葡萄糖， 也不会引发免疫原性反应， 因 而具有优良的生物相容性 ； 同时壳聚糖是自然界中唯一带正电荷的氨基葡萄糖。

12、， 因其独特 的理化结构， 使得壳聚糖物质能通过与红细胞膜之间的电荷作用凝集红细胞而止血， 而且 止血机理无须依赖于凝血机制， 所以还能介导肝素化病人血液的凝固， 这对于外科手术中 止血具有独特的效果。 壳聚糖具有良好的生物相容性， 生物黏附性和多种生物活性， 无毒无 免疫原型， 可被体内多种酶生物降解， 降解产物无毒且能被人体完全吸收， 是药物缓释的理 想载体。此外， 壳聚糖还具有抑菌、 促进创面愈合的性能。 说 明 书 CN 103341202 A 4 2/11 页 5 0004 壳聚糖以其具有良好的生物相容性， 生物可降解性， 止血和促进伤口愈合等特点， 正成为国内外研究止血材料的热点。。

13、 目前单纯壳聚糖止血材料存在韧性差和止血效果不显 著的问题。 这可通过与其他材料或药物复合从而改善韧性和缩短止血时间， 如关静等 新型 战创伤急救敷料的制备研究 （医疗卫生装备 ,2007,28(9):1-3.） 中报道了壳聚糖与海藻 酸钙盐复合纤维止血材料止血时间为 127.8+33.6s（家兔背部两侧 2cm2cm 伤口） ； 申请 号 200610048015.0、 发明名称为 一种新型高效中药 / 壳聚糖复合止血材料 公开的壳聚 糖与中药 （三七或白芨） 复合止血材料的平均止血时间为 165 177s （鼠股部内侧动脉敷压 止血） 。现有技术中也有利用壳聚糖的生物相容性、 止血性来制作。

14、医用敷料的技术方案。在 实际应用中， 壳聚糖一般经过交联发泡后制成海绵用于止血， 如专利 CN1071587A 公开了一 种用乙酸溶解壳聚糖， 混合胶原后用甲醛交联成海绵的生产工艺 ； 专利 CN131021A 公开了 一种用酸溶解壳聚糖， 戊二醛交联成海绵后冷冻干燥后真空干燥而成的生产工艺 ； 中国专 利 CN 200510024503.3 公开了一种 “采用羧甲基壳聚糖加甘油后， 用环保型离子交换剂交 联成海绵后冷冻干燥” 的生产工艺。 这些工艺所生产出的产品均使用了交联剂， 其残留对人 体有一定的毒性， 而不发泡成海绵又不能应用到止血、 吸血及吸液等用途。 0005 然而， 壳聚糖不能在。

15、中性水溶液中溶解， 发泡性能欠佳， 用其制备海绵往往需要将 其溶解在酸性溶液中， 在海绵生产过程中再进行调节 pH 值， 洗涤等操作。壳聚糖在水中的 溶解性限制了其应用范围。 羧甲基壳聚糖作为壳聚糖的衍生物， 既保留了壳聚糖的优点， 又 极大的改善了水溶性， 同时由于引入了羧甲基基团， 使得其具备了更多生物活性和更为良 好的生物相容性， 在医药等领域有多种用途。 故也有文献披露了对于壳聚糖衍生物的应用， 如 ： 中国专利 CN 200510024503 公开了一种具有吸水膨胀性能的羧甲基壳聚糖海绵， 该发 明公开的技术方案中利用含有羧甲基壳聚糖、 壳聚糖粉或甲壳素粉、 甘油增塑剂和环保型 离子。

16、交联剂的羧甲基壳聚糖水溶液来制备海绵， 但该技术方案中海绵由于发泡不充分， 孔 隙少而不稳定， 易板结， 吸附能力差， 且使用中易发硬发脆 ； 申请号为 20110136324.4 的中 国申请专利公开了一种止血海绵， 该海绵由分子筛与壳聚糖复合得到， 技术方案中利用了 壳聚糖较好的止血性能。 但上述技术方案中仅从壳聚糖的生物相容性、 生物可降解性着手， 并未切实考虑到医用生物敷料使用时的吸附性能及柔软可塑性能。 发明内容 0006 本发明目的在于提供一种发泡效果好、 吸附能力高、 保湿性强、 柔软可塑性强的壳 聚糖海绵体医用敷料， 以解决现有技术中医用生物敷料的不足。 0007 为实现上述目。

17、的， 本发明公开的技术方案如下 ： 一种壳聚糖海绵体医用敷料， 包 括 ： 水溶性壳聚糖或其盐、 发泡剂及保湿剂三种组分， 所述三种组分的含量按质量百分比分 别为 ： 水溶性壳聚糖或其盐 0.1%-10% ； 发泡剂 0.001%-5% ； 保湿剂 0.05%-8%。 0008 优选的， 所述三种组分的含量按质量百分比分别为 ： 水溶性壳聚糖或其盐 2%-7% ； 发泡剂 0.1%-2% ； 说 明 书 CN 103341202 A 5 3/11 页 6 保湿剂 1%-5%。 0009 优选的， 本发明中所述水溶性壳聚糖或其盐选自羧化壳聚糖、 羧甲基壳聚糖、 壳聚 糖盐酸盐、 壳聚糖醋酸盐、 。

18、壳聚糖谷氨酸盐中的至少一种。 其中， 在制备过程中， 以羧甲基壳 聚糖为最佳。 传统的医用海绵多采用甲壳素为原料制成， 甲壳素由于存在乙酰氨基和羧基， 分子间的氢键较强， 水溶性差， 制作医用海绵时需加入化学助溶剂， 不利于人体使用 ； 本发 明中采用溶解性较好的水溶性壳聚糖为主要原料制成医用海绵， 制作过程中， 无需加入助 溶剂， 减少医用海绵中残留的化学物质对人体造成的伤害。 0010 优选的， 本发明中所述医用发泡剂选自吐温、 泊洛沙姆、 司盘、 甘油脂肪酸酯、 山梨 醇脂肪酸酯中的至少一种。本发明中所述的泊洛沙姆作为乳化剂和稳定剂， 与壳聚糖相 溶乳化， 产生的乳粒少， 吸收率高， 乳。

19、化效果突出， 理化性质稳定， 能够耐受 -65低温冷冻 和 +50高温干燥， 而成型为疏松多孔、 结构稳定的海绵形状。本发明中所述的司盘可作 为乳化剂、 稳定剂、 分散剂、 润湿剂、 助溶剂、 柔软剂， 在溶解的壳聚糖中， 司盘作为高级乳化 剂， 同时起到分散均匀壳聚糖的作用。 司盘的稳定性、 润湿性、 柔软功效， 在经受低温冷冻和 高温干燥后， 理化性质不改性， 使壳聚糖海绵成形好， 同时又柔软多孔稳定。本发明中所述 的吐温， 中文名称为聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯， 易溶于水。吐温具有乳化扩散、 增溶、 润湿和稳定剂的功效， 对人体无伤害， 没有刺激性， 在壳聚糖的溶解和海绵成型中起到柔软 。

20、剂、 稳定剂、 发泡剂、 润湿剂等功效， 经过高低温后不改理化性质。 本发明中所述的甘油脂肪 酸酯， 具有乳化、 润滑功能， 对皮肤和粘膜无刺激， 安全可靠， 生物降解无毒。本发明中所述 的山梨醇脂肪酸酯为非离子表面活性剂、 柔软助剂、 乳化剂、 分散剂、 助溶剂。 上述发泡剂都 能使海绵发泡多孔， 经高低温差不改性， 结构稳定。 0011 经过本发明实验研究表明上述发泡剂中， 较优选的为泊洛沙姆。 0012 优选的， 本发明中所述的保湿剂选自甘油、 丙二醇、 聚乙二醇中的至少一种。本发 明中所述的甘油， 无色， 透明无臭， 是一种有机物， 可作为软化剂、 溶解剂、 保湿剂、 干燥剂。 甘油的。

21、吸湿和保湿性能， 保证壳聚糖海绵成形后不发干不发脆， 柔软有弹性。 本发明中所述 的聚乙二醇， 无毒无刺激， 良好的水溶性， 与许多有机物组份有良好的相容性， 是优良的润 滑剂、 保湿剂、 分散剂、 黏粘剂、 抗静电剂、 增溶剂及柔软剂， 对冷热稳定， 加热至 150时很 安全稳定。同时略具备吸水性。是很好的辅助剂， 使海绵的互通网状结构稳定， 经冷热不 改性， 成形后的海绵疏松多孔， 柔软富弹性。 本发明中所述的丙二醇， 无毒， 刺激性比甘油更 小， 溶解性能好， 粘性、 吸湿性好， 互溶性好， 乳化效果好。 能使壳聚糖海棉疏松多孔， 更具弹 性。 0013 上述各组分经过一定的配比可制成壳。

22、聚糖海绵体医用敷料， 但经过长期试验发 现， 水溶性壳聚糖、 发泡剂及保湿剂三种组分按一定比例可达到较佳的产品效果。 根据上述 各组分的各详细成分的介绍， 本发明所述的壳聚糖海绵体医用敷料， 优选的， 包括如下质量 百分比的组分 ： 羧甲基壳聚糖 2%-7% 泊洛沙姆 1%-2% 聚乙二醇 2%-5%。 0014 优选的， 本发明中所述的壳聚糖海绵体医用敷料， 可包括如下质量百分比的组 分 ： 说 明 书 CN 103341202 A 6 4/11 页 7 羧甲基壳聚糖 2%-7% 吐温 1%-2% 聚乙二醇 2%-5%。 0015 上述提供了一种壳聚糖海绵体医用敷料的配比， 本发明还公开了一。

23、种壳聚糖海绵 体医用敷料的制备方法， 其特征在于， 操作步骤如下 ： 步骤 1 ： 制备溶液 ： 取适量的发泡剂充分浸泡后， 置于搅拌器内以转速 100-180 r/ min 的低速搅拌均匀， 然后向发泡剂溶液内加入保湿剂， 在搅拌器内以 180-400r/min 的中 速搅拌均匀， 边搅拌边向其中加入水溶性壳聚糖或其盐至其溶解均匀， 再使搅拌器以转速 400-700 r/min 的高速搅拌， 使溶液发泡膨胀， 得发泡好的溶液 ； 步骤2 ： 预冻 ： 将上述发泡好的溶液注入硅胶模具盘里， 并置于-70-20的速冻箱 内预冻 1h 24h， 得海绵半成品 ； 步骤 3 ： 将步骤 2 中的海绵。

24、半成品， 放入真空冷冻干燥机里， 使所述海绵半成品在温 度 -20 +50之间、 真空度小于 30 帕的条件下， 分段进行升华及保温， 并且升华及保温 总时间不小于 10 小时。 0016 上述制备步骤 3 中所述分段进行升华及保温， 包括依次进行的一次升华及保温、 二次升华及保温、 三次升华及保温 ； 将步骤2中的海绵半成品在温度为-18-10的条件下进行一次升华及保温， 其中 升华 20min-90min， 保温 5h-10h ； 经过一次升华及保温后再连续进行二次升华及保温， 二次 升华及保温时的温度在-8+3之间， 其中升华15min70min， 保温1h-3h ； 在二次升华 及保温。

25、后连续进行三次升华及保温， 三次升华及保温时的温度在 +30 +50之间， 其中 升华 10min-70min， 保温 1h-3h ； 所述分段进行升华及保温的温度、 时间均通过所述真空冷 冻干燥机的电脑控制系统预设完成。 本发明中通过对预冻后的泡液脱模进行不同温度下的 升华及保温， 使海绵逐步得到升华及保温， 产品疏松多孔， 且孔径均匀， 孔数密集， 产品的脆 性及韧性均较佳。 0017 本发明所述的壳聚糖海绵体医用敷料主要是指生物海绵。 0018 上述制备方法中， 制备时把发泡剂、 纯化水按比例加入容器内， 根据不同类型的发 泡剂， 确定不同的侵泡时间， 如泊洛沙姆， 按比例加入纯化水后，。

26、 浸泡 1 个小时。制备时采用 的的不锈钢搅拌器应备高、 中、 底 3-5 档调速器 （低速运转时转速 100-180r/min、 中速运转 时转速 180-400r/min、 高速运转时转速 400-700r/min） ， 加入发泡剂搅拌均匀 ； 待发泡剂完 全溶解后， 将溶液中加入保湿剂， 中速搅拌待 2-3 次至溶液均匀， 边搅拌边向溶液中加入水 溶性壳聚糖至溶解均匀成为发泡液， 再高速搅拌， 待发泡液的体积膨大至原来的 2-8 倍时， 将发泡液注入硅胶模具盘里， 尽快放入速冻箱， 使其快速预冻 1 小时以上 ； 将预冻完全的泡 液脱模后， 立即将其放入真空冷冻干燥机里进行升华及保温， 。

27、升华干燥 10 小时以上。本发 明生产过程中增加预冻后脱模的环节， 显著的节省了升华干燥的时间， 节约了能源， 提高了 生产率 ； 产品出模后完整， 不易破损碎裂 ； 产品不粘模具盘， 使出模速度较快， 提高劳动效 率。 0019 本发明与现有技术相比具有如下优势 ： 首先， 传统的生物海绵产品的制备， 一般使用不锈钢模具盘制备海绵， 速冻后难以脱 模， 且脱模后冷冻的制品冰脆易断裂， 干燥后因生物海绵的弹性差， 按压后不易回弹复位， 说 明 书 CN 103341202 A 7 5/11 页 8 很难裁切， 费工费时费料， 很难做到大生产。并且随着医疗水平的提高， 一些生物海绵产品 根据手术。

28、需要需要制成各种造型， 如中空圆柱形等， 若利用不锈钢模具盘的话则无法加工。 本发明中在制备生物海绵时使用挤注成形的可控技术， 利用不粘黏、 无毒的硅胶加工成所 需产品造型的模具， 必要时用压缩空气将发泡液挤压注模， 然后再冷冻成型， 取出硅胶模， 由于硅胶模的不粘黏特性， 成品能轻松脱模。 对于无特殊要求的扁平块状产品， 可将溶解搅 拌发泡好的水溶性壳聚糖直接倒入所需块状结构硅胶模具盘， 冷冻后脱模即可。 0020 其次， 本发明中利用水溶性壳聚糖与发泡剂结合形成更强大的互通网状多孔结 构， 在一定的配比下， 产品具备更好的吸附性， 使产品的吸液能力成倍提高 ； 利用合适配比 的保湿剂， 使。

29、产品具备更优良的弾性和柔软性， 产品贴敷创伤口， 吸附能力持久， 同时更具 舒适性。 采用硅胶模具盘可控注模技术， 在产品真空冷冻干燥过程中， 更能耐受超低的低温 和更高的高温干燥不改性， 同时产品成形好， 形成稳定的的互通网状多孔结构， 在医护或表 面创伤使用时， 更贴服， 吸附能力更强 ； 手术使用中能更好的包裹及支撑血管或组织器官， 可塑性更强。 0021 最后， 通过试验将利用本发明技术制备的生物海绵与现有技术制备的生物海绵相 比较， 发现， 本发明制备的生物海绵具有如下优点 ： 稳定性好， 久放不易变色、 变形 ； 发泡性 能好， 产品疏松多孔， 互通网状结构稳定 ； 更具弹性、 更。

30、柔软， 产品的支撑性及韧性得以提 高 ； 更好的物理稳定性， 能耐受超低温冷冻和高温干燥而不改性， 形成更稳定的网状多孔 结构 ； 具备抗静电性。 0022 总之， 本发明的有益效果是 ： 本发明壳聚糖海绵体医用敷料发泡效果好、 吸附能力 高、 保湿性强、 柔软可塑性强。 附图说明 0023 图 1(a) 为试验例一生物海绵的吸液倍率相比中对照组一的电镜扫描照片 ； 图 1(b) 为试验例一生物海绵的吸液倍率相比中对照组二的电镜扫描照片 ； 图 1(c) 为试验例一生物海绵的吸液倍率相比中试验组的电镜扫描照片 ； 图 2 为不同比例的壳聚糖 - 海藻酸钠海绵体医用敷料的细胞粘附性。 具体实施方。

31、式 0024 下面结合附图对本发明的较佳实施例进行详细阐述， 以使本发明的优点和特征能 更易于被本领域技术人员理解， 从而对本发明的保护范围做出更为清楚明确的界定。 0025 本发明下述实施例制备中所用的试剂来源 ： 羧甲基壳聚糖、 壳聚糖醋酸盐、 羧化壳 聚糖、 泊洛沙姆、 吐温、 山梨醇脂肪酸酯、 聚乙二醇、 甘油、 丙二醇 ： 分析纯， 购于中国医药集 团 ； 所用的仪器 ： 不锈钢高速搅拌器、 扫描电子显微镜 （INCAX-AC T250） 。 0026 实施例一 ： 一种壳聚糖海绵体医用敷料， 具体为医用海绵， 其包括如下质量百分比 的组分 ： 2% 的羧甲基壳聚糖、 1% 的泊洛沙。

32、姆、 2% 的聚乙二醇。其制备方法为 ： 将泊洛沙姆 加入纯化水后， 浸泡 1 个小时 ； 然后将浸泡好的泊洛沙姆利用不锈钢搅拌器以转速 100 r/ min 的低速搅拌 2 次， 再降为以转速 180 r/min 的低速搅拌 2 次 ； 待泊洛沙姆完全溶解后， 将溶液中加入聚乙二醇， 以 300r/min 的中速搅拌 3 次至溶液均匀， 然后边搅拌边向溶液中 说 明 书 CN 103341202 A 8 6/11 页 9 加入羧甲基壳聚糖至溶解均匀制得发泡液， 再使不锈钢搅拌器以 700r/min 的高速搅拌， 待 发泡液的体积膨大至原来的 4-5 倍时， 将发泡液注入硅胶模具盘里， 尽快放。

33、入速冻箱， 使其 快速预冻 2 小时 ； 将预冻完全的泡液脱模后， 立即将其放入真空冷冻干燥机里， 依次进行一 次升华及保温、 二次升华及保温、 三次升华及保温 ； 通过电脑控制系统将真空冷冻干燥机的 一次升华温度预设为 -10， 升华时间 90min， 保温 10h ； 二次升华温度预设为 -8， 升华时 间 70min， 保温 1h ； 三次升华温度预设为 +50， 升华时间 70min， 保温 1h。 0027 实施例二 ： 一种壳聚糖海绵体医用敷料， 具体为医用海绵， 其包括如下质量百分比 的组分 ： 7% 的羧甲基壳聚糖、 2% 的泊洛沙姆、 5% 的聚乙二醇。其制备方法为 ： 将泊。

34、洛沙姆加 入纯化水后， 浸泡3个小时 ； 然后将浸泡好的泊洛沙姆利用不锈钢搅拌器在150 r/min的速 度下搅拌 ； 待泊洛沙姆完全溶解后， 将溶液中加入聚乙二醇， 在 400 r/min 的速度下搅拌至 溶液均匀， 然后边搅拌边向溶液中加入羧甲基壳聚糖至溶解均匀制得发泡液， 再在 700 r/ min 的速度下搅拌， 待发泡液的体积膨大至原来的 4-5 倍时， 将发泡液注入硅胶模具盘里， 尽快放入速冻箱， 使其快速预冻 5 小时 ； 将预冻完全的泡液脱模后， 立即将其放入真空冷冻 干燥机里， 依次进行一次升华及保温、 二次升华及保温、 三次升华及保温 ； 通过电脑控制系 统将真空冷冻干燥机。

35、的一次升华温度预设为 -15， 升华时间 20min， 保温 5h ； 二次升华温 度预设为 -5， 升华时间 15min， 保温 2h ； 三次升华温度预设为 +30， 升华时间 10min， 保 温 3h。 0028 实施例三 ： 一种壳聚糖海绵体医用敷料， 具体为医用海绵， 其包括如下质量百分比 的组分 ： 3.5% 的羧甲基壳聚糖、 1% 的泊洛沙姆、 2.5% 的聚乙二醇。其制备方法为 ： 将泊洛 沙姆加入纯化水后， 浸泡 3 个小时 ； 然后将浸泡好的泊洛沙姆利用不锈钢搅拌器在 180 r/ min 的速度下搅拌 ； 待泊洛沙姆完全溶解后， 将溶液中加入聚乙二醇， 在 300 r/。

36、min 的速度 下搅拌至溶液均匀， 然后边搅拌边向溶液中加入羧甲基壳聚糖至溶解均匀制得发泡液， 再 在600 r/min的速度下搅拌， 待发泡液的体积膨大至原来的4-5倍时， 将发泡液注入硅胶模 具盘里， 尽快放入速冻箱， 使其快速预冻 15 小时 ； 将预冻完全的泡液脱模后， 立即将其放入 真空冷冻干燥机里， 依次进行一次升华及保温、 二次升华及保温、 三次升华及保温 ； 通过电 脑控制系统将真空冷冻干燥机的一次升华温度预设为 -18， 升华时间 80min， 保温 8h ； 二 次升华温度预设为 -8， 升华时间 50min， 保温 1h ； 三次升华温度预设为 +40， 升华时间 70m。

37、in， 保温 2h。 0029 实施例四 ： 一种壳聚糖海绵体医用敷料， 具体为医用海绵， 其包括如下质量百分比 的组分 ： 2% 的羧甲基壳聚糖， 1% 的吐温， 5% 的聚乙二醇。其制备方法为 ： 将泊洛沙姆加入纯 化水后， 浸泡 3 个小时 ； 然后将浸泡好的吐温利用不锈钢搅拌器在 160 r/min 的速度下搅 拌 ； 待吐温完全溶解后， 将溶液中加入聚乙二醇， 在 200 r/min 的速度下搅拌至溶液均匀， 然后边搅拌边向溶液中加入羧甲基壳聚糖至溶解均匀制得发泡液， 再在 700 r/min 的速度 下搅拌， 待发泡液的体积膨大至原来的 4-5 倍时， 将发泡液注入硅胶模具盘里， 。

38、尽快放入速 冻箱， 使其快速预冻 10 小时 ； 将预冻完全的泡液脱模后， 立即将其放入真空冷冻干燥机里， 依次进行一次升华及保温、 二次升华及保温、 三次升华及保温 ； 通过电脑控制系统将真空 冷冻干燥机的一次升华温度预设为 -12， 升华时间 50min， 保温 6h ； 二次升华温度预设为 +1， 升华时间 60min， 保温 3h ； 三次升华温度预设为 +45， 升华时间 30min， 保温 2h。 0030 实施例五 ： 一种壳聚糖海绵体医用敷料， 具体为医用海绵， 其包括如下质量百分比 说 明 书 CN 103341202 A 9 7/11 页 10 的组分 ： 4% 的壳聚糖醋。

39、酸盐， 2% 的吐温， 8% 的聚乙二醇。其制备方法为 ： 将泊洛沙姆加入纯 化水后， 浸泡 3 个小时 ； 然后将浸泡好的吐温利用不锈钢搅拌器在 170 r/min 的速度下搅 拌 ； 待吐温完全溶解后， 将溶液中加入聚乙二醇， 在 300 r/min 的速度下搅拌至溶液均匀， 然后边搅拌边向溶液中加入壳聚糖醋酸盐至溶解均匀制得发泡液， 再在 400 r/min 的速度 下搅拌， 待发泡液的体积膨大至原来的 4-5 倍时， 将发泡液注入硅胶模具盘里， 尽快放入速 冻箱， 使其快速预冻 10 小时 ； 将预冻完全的泡液脱模后， 立即将其放入真空冷冻干燥机里， 依次进行一次升华及保温、 二次升华。

40、及保温、 三次升华及保温 ； 通过电脑控制系统将真空 冷冻干燥机的一次升华温度预设为 -16， 升华时间 40min， 保温 7h ； 二次升华温度预设为 +2， 升华时间 50min， 保温 2h ； 三次升华温度预设为 +35， 升华时间 50min， 保温 2h。 0031 实施例六 ： 一种壳聚糖海绵体医用敷料， 其包括如下质量百分比的组分 ： 0.1% 的 水溶性壳聚， 0.001% 的发泡剂， 0.05% 的保湿剂。其制备方法参考实施例一。 0032 实施例七 ： 一种壳聚糖海绵体医用敷料， 其包括如下质量百分比的组分 ： 10% 的水 溶性壳聚糖， 5% 的发泡剂， 8% 的保湿。

41、剂。其制备方法参考实施例一。 0033 实施例八 ： 一种壳聚糖海绵体医用敷料， 其包括如下质量百分比的组分 ： 5% 的水 溶性壳聚糖， 3% 的发泡剂， 4% 的保湿剂。其制备方法参考实施例一。 0034 实施例九 ： 一种壳聚糖海绵体医用敷料， 其包括如下质量百分比的组分 ： 8% 的水 溶性壳聚糖， 1.5% 的发泡剂， 6% 的保湿剂。其制备方法参考实施例一。 0035 实施例十 ： 一种壳聚糖海绵体医用敷料， 其包括如下质量百分比的组分 ： 7% 的水 溶性壳聚糖， 0.1% 的发泡剂， 1% 的保湿剂。其制备方法参考实施例一。 0036 实施例十一 ： 一种壳聚糖海绵体医用敷料，。

42、 其包括如下质量百分比的组分 ： 2% 的 水溶性壳聚糖， 2% 的发泡剂， 5% 的保湿剂。其制备方法参考实施例一。 0037 实施例十二 ： 一种壳聚糖海绵体医用敷料， 具体为医用海绵， 其包括如下质量百分 比的组分 ： 6% 的壳聚糖醋酸盐， 4% 的斯盘， 7% 的甘油。其制备方法参考实施例一。 0038 实施例十三 ： 一种壳聚糖海绵体医用敷料， 具体为医用海绵， 其包括如下质量百分 比的组分 ： 3% 的羧化壳聚糖， 1.5% 的山梨醇脂肪酸酯， 1% 的丙二醇。其制备方法参考实施 例一。 0039 实施例十四 ： 一种壳聚糖海绵体医用敷料， 具体为医用海绵， 其包括如下质量百分 。

43、比的组分 ： 9% 的壳聚糖谷氨酸盐， 4.5% 的甘油脂肪酸酯， 3% 的丙二醇。其制备方法参考实 施例一。 0040 以下为采用本发明所公开的技术方案制备的产品与现有技术制备的产品的对比 试验例 ： 1 试验例一 ： 生物海绵的吸液倍率相比 1.1 试验步骤 ： 试验组 ： 按上述实施例一制备的医用海绵， 对照组一 ： 不加泊洛沙姆， 其余组分不变， 仍按实施例一制备的医用海绵 ； 对照组二 ： 不加聚乙二醇， 其余组分不变， 仍按实施例一制备的医用海绵 ； 对照组三 ： 按照 CN 200510024503 中的实施例二制备的医用海绵。 试验方法 ： 按离心法测定上述各组医用海绵的吸液量。

44、。 利用扫描电镜扫描各组医用海 绵结构， 附图 1 表示扫描电镜放大 200 倍的医用海绵照片， 图中标尺表示 100m。 说 明 书 CN 103341202 A 10 8/11 页 11 0041 将试验组及各对照组医用生物海绵剪取边长约 1cm 的小方块， 约重 0.028g， 分别 放入装有约 25、 2ml 纯化水的烧杯中， 放置 5 分钟， 然后放入离心机中， 在 500rpm 的转速 下离心 10min 后取出样品， 将残液分别测量， 每个样品试验 5 次， 计算重每 0.1g 样品的残液 平均值。 0042 1.2 试验结果 ： 表 1 本发明医用海绵的吸液率试验数据 与对照组。

45、一比较 :*P0.05， 有显著性差异 ； 与对照组二比较， P0.05， 有显著性差异 ； 与对照组三比较 ： P0.05， 有显著性差异。 0043 从上述试验数据中可以看出， 试验组与对照组一、 对照组二及对照组三各组相比， 试验组的吸液倍率具有显著性差异。 利用本发明制备的医用海绵的吸液倍率比现有技术制 备的对照组三的医用海绵的吸液率佳， 相差最大倍率达 2.05 倍。图 1(a) 为对照组一的电 镜扫描照片， 图 1(b) 为对照组二的电镜扫描照片， 图 1(c) 为试验组的电镜扫描照片， 通过 图 1(a)、 图 1(b) 及图 1(c) 三组电镜扫描照片的观察及表 1 中数据分析。

46、可得 ： 试验组的医 用海绵的网状结构稳定， 疏松多孔， 故吸水均匀， 吸附量大 ； 对照组一、 对照组二及对照组三 的医用海绵的网状结构不够均匀， 孔隙大小不均、 不稳定， 故吸附不够均匀， 吸附能力稍差。 0044 试验例二 ： 生物海绵的稳定性试验 2.1 试验方法 ： 试验组 ： 按上述实施例二制备的医用海绵， 对照组一 ： 不加聚乙二醇， 其余组分不变， 仍按实施例二制备的医用海绵 ； 对照组二 ： 市购医用壳聚糖生物海绵。 0045 分别取各组医用海绵等量， 进行加速稳定性试验， 稳定性考察数据如表 2 所示。 2.1.1 加速稳定性试验条件及检测步骤 ： 加速试验 ： 壳聚糖生物。

47、海绵敷料 （下称海绵） 加速条件 ： 401、 湿度 ： 60%10%RH、 考 察时间 =RT/Q10（40-25） /10=212/21.5=8.48 个月 =8 个半月。 0046 检测 ： 所用设备为pHS-25C型酸度计， 检测时先用pH=6.86的磷酸盐标准缓冲溶液 进行定位， 然后用 pH=4.00 的邻苯二甲酸氢钾标准缓冲溶液进行调斜率， 最后测待测溶液 的 pH 值。 0047 干燥失重检测 ： 所用设备为烘箱， 检测时取样品适量， 在 60干燥至恒重后， 由减 失重量和取样量计算干燥失重。 0048 无菌检验 ： 主要仪器 ： ZW-808A 型集菌仪、 MJ-1608 霉。

48、菌培养箱、 HH.BII-500-BS 电 热恒温培养箱、 YX280A 不锈钢蒸汽灭菌器、 恒温烤箱、 离心机、 生物显微镜、 真空架、 标准 PH 比色器、 全封闭过滤系统等。 0049 无菌检验方法 ： 在 10000 级下的洁净环境， 100 级的单向流空气区域或隔离系统 说 明 书 CN 103341202 A 11 9/11 页 12 中， 首先制备培养基， 检查培养基的适用性、 灭菌性、 灵敏度 ： 制备稀释液、 冲洗液 ： 试验验 证方法， 再判断结果。 然后无菌检验供试品， 处理及接种培养基， 接着培养及观察， 最后判断 结果。本次试验所有样品及对照品， 阳性对照管均生长良好。

49、， 阴性对照管无菌生长， 所有供 试品管均澄清， 无菌生长。 0050 2.2 试验数据记录结果如下 ： 表 2 生物海绵的稳定性试验数据 结论 ： 试验组 ： 海绵贮存在相对湿度不超过80%， 温度为530， 无腐蚀性气体和 通风良好的室内， 产品未发生外观、 pH 值、 干燥失重变化及能保持无菌状态。 0051 对照组1 ： 海绵贮存在相对湿度不超过80%， 温度为530， 无腐蚀性气体和 说 明 书 CN 103341202 A 12 10/11 页 13 通风良好的室内， 产品在允许范围值内产生外观稍微发黄现象、 干燥失重在允许范围值内 有失水现象。产品未发生 pH 值变化及能保持无菌状态。 0052 对照组2 ： 海绵贮存在相对湿度不超过80%。