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1、(10)申请公布号 CN 104255898 A (43)申请公布日 2015.01.07 CN 104255898 A (21)申请号 201410397791.6 (22)申请日 2014.08.14 A22C 29/02(2006.01) A23J 1/04(2006.01) (71)申请人 淮阴工学院 地址 223005 江苏省淮安市经济开发区高教 园区枚乘东路 1 号 (72)发明人 赵希荣 (74)专利代理机构 淮安市科翔专利商标事务所 32110 代理人 韩晓斌 (54) 发明名称 淡水小龙虾分离蛋白的制备方法 (57) 摘要 本发明公开了一种淡水小龙虾分离蛋白的制 备方法， 该。
2、提取方法依次包括以下步骤 ：（1） 鲜活 龙虾预处理 ；（2） 淡水小龙虾蛋白粉的制备 ；（3） 脱脂 ；（4）一次碱提 ；（5） 二次碱提 ；（6） 一次分 离 ；（7） 酸沉淀 ；（8） 二次分离 ；（9） 打浆 ；（10） 干 燥。本发明原料易得， 工艺简单， 分离蛋白具有良 好功能性质。 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 4 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书4页 (10)申请公布号 CN 104255898 A CN 104255898 A 1/1 页 2 1. 淡水小龙虾分离蛋白的制备方法， 其特征是该制备方法包。
3、括以下步骤 ： （1） 鲜活龙虾预处理 ： 购买鲜活原料淡水小龙虾， 并对淡水小龙虾及时挑选， 剔除老壳 虾、 死虾及混有的杂质 ； 将挑选后的新鲜淡水小龙虾放在含有少量食盐和柠檬酸的溶液中 浸泡一段时间， 使其吐出肠腺及胃中的污物， 再将龙虾表面的污物刷洗干净 ； 将清洗后的活 淡水小龙虾首尾分离， 虾仁肉与虾壳剥离 ； （2） 淡水小龙虾蛋白粉的制备 ： 经匀浆机将虾仁肉粉碎为肉浆 ； 肉浆在 150160旋转 滚筒干燥器中干燥至水分含量为4%的龙虾干 ； 粉碎机粉碎龙虾干过60目筛， 得淡水小龙虾 蛋白粉 ； （3） 脱脂 ： 淡水小龙虾蛋白粉以固液比 1g:10mL 投入正己烷中进行水。
4、浴蒸发脱脂， 水浴 温度为60， 脱脂时间60min， 残留物室温干燥， 粉碎过60目筛， 得脱脂虾蛋白粉， 脱脂虾蛋 白粉于 4储存备用 ； （4） 一次碱提 ： 将脱脂虾蛋白粉分散于水中， 制成 10% w/v 的分散液， 用质量浓度 25% 的氢氧化钠调节 pH 至 9.0-9.5， 分散液在 40、 50r/min 搅拌 50-60min， 经振动筛或滤筒分 离， 得蛋白质提取液和残渣 ； （5） 二次碱提 ： 将一次碱提得到的残渣分散于水中， 制成 10% w/v 的分散液， 用质量浓 度 25% 的氢氧化钠调节 pH 至 9.0-9.5， 分散液在 40、 50r/min 搅拌 5。
5、0-60min， 经振动筛或 滤筒分离， 得蛋白质提取液和残渣 ； （6） 一次分离 ： 将一次碱提和二次碱提得到的蛋白质提取液合离心机于 900g、 4、 离心 25min， 保留上清液 ； （7） 酸沉淀 ： 将一次分离后的上清液用 6 mol/L 的食用盐酸调节 pH 至 3.0-3.6， 静置 20min， 得大颗粒的沉淀物 ； （8） 二次分离 ： 用离心机将酸沉淀的沉淀物于 9000g、 4、 离心 10min， 弃去上清液， 并用 50温水冲洗沉淀物， 得凝乳蛋白质沉淀物 ； （9） 打浆 ： 将凝乳蛋白质沉淀物加水搅打或研磨成蛋白质浓度 1220% 的均匀浆液， 其 间用质量浓。
6、度 25% 的 NaOH 回调 pH 至 6.57.0， 搅拌速度为 85r/min ； （10） 干燥 ： 将浆液采用喷雾干燥法进行干燥， 得淡水小龙虾分离蛋白 ； 喷雾干燥条件 是 ： 进风温度 160170， 塔体温度 95100， 排风温度 8590。 权 利 要 求 书 CN 104255898 A 2 1/4 页 3 淡水小龙虾分离蛋白的制备方法 技术领域 0001 本发明涉及分离蛋白质的制备方法， 具体涉及一种淡水小龙虾分离蛋白的制备方 法。 背景技术 0002 分离蛋白作为蛋白质的一种， 具有蛋白质应有的功能性质 ： 如水合性质包括水的 吸附与保留、 湿润性、 膨胀性、 粘合、。
7、 分散性和溶解性等 ； 如结构性质如沉淀、 胶凝作用、 组织 化和面团的形成等 ； 如表面性质主要有蛋白质的起泡、 乳化等方面的性质 ； 如感官性质， 蛋 白质在食品中产生的浑浊度、 色泽、 风味组合、 咀嚼性、 爽滑感等。 分离蛋白质的功能性质影 响食品的感官性质， 也对食品和食品成分在制备、 加工或贮藏过程中的物理特性起主要的 作用。分离蛋白在食品、 饲料、 化工等工业有着广泛的用途。 0003 目前对分离蛋白研究得比较多的是植物分离蛋白， 如大豆分离蛋白。分离蛋白提 取的方法主要是碱提酸沉法。 淡水小龙虾是一种低脂肪、 高蛋白的营养食品， 其蛋白质含量 高于大多数的淡水海水鱼虾。国内有关。
8、淡水小龙虾虾肉分离蛋白的研究并不多。 发明内容 0004 本发明的目的在于 ： 提供一种淡水小龙虾分离蛋白的制备方法， 原料易得， 工艺简 单， 提取得到的分离蛋白具有良好功能性质。 0005 本发明的技术解决方案是该淡水小龙虾分离蛋白的制备方法包括以下步骤 ： （1） 鲜活龙虾预处理 ： 购买鲜活原料淡水小龙虾， 并对淡水小龙虾及时挑选， 剔除老壳 虾、 死虾及混有的杂质 ； 将挑选后的新鲜淡水小龙虾放在含有少量食盐和柠檬酸的溶液中 浸泡一段时间， 使其吐出肠腺及胃中的污物， 再将龙虾表面的污物刷洗干净 ； 将清洗后的活 淡水小龙虾首尾分离， 虾仁肉与虾壳剥离 ； （2） 淡水小龙虾蛋白粉的。
9、制备 ： 经匀浆机将虾仁肉粉碎为肉浆 ； 肉浆在 150160旋转 滚筒干燥器中干燥至水分含量为4%的龙虾干 ； 粉碎机粉碎龙虾干过60目筛， 得淡水小龙虾 蛋白粉 ； （3） 脱脂 ： 淡水小龙虾蛋白粉以固液比 1g:10mL 投入正己烷中进行水浴蒸发脱脂， 水浴 温度为60， 脱脂时间60min， 残留物室温干燥， 粉碎过60目筛， 得脱脂虾蛋白粉， 脱脂虾蛋 白粉于 4储存备用 ； （4） 一次碱提 ： 将脱脂虾蛋白粉分散于水中， 制成 10% w/v 的分散液， 用质量浓度 25% 的氢氧化钠调节 pH 至 9.0-9.5， 分散液在 40、 50r/min 搅拌 50-60min， 。
10、经振动筛或滤筒分 离， 得蛋白质提取液和残渣 ； （5） 二次碱提 ： 将一次碱提得到的残渣分散于水中， 制成 10% w/v 的分散液， 用质量浓 度 25% 的氢氧化钠调节 pH 至 9.0-9.5， 分散液在 40、 50r/min 搅拌 50-60min， 经振动筛或 滤筒分离， 得蛋白质提取液和残渣 ； （6） 一次分离 ： 将一次碱提和二次碱提得到的蛋白质提取液合离心机于 900g、 4、 说 明 书 CN 104255898 A 3 2/4 页 4 离心 25min， 保留上清液 ； （7） 酸沉淀 ： 将一次分离后的上清液用 6 mol/L 的食用盐酸调节 pH 至 3.0-3。
11、.6， 静置 20min， 得大颗粒的沉淀物 ； （8） 二次分离 ： 用离心机将酸沉淀的沉淀物于 9000g、 4、 离心 10min， 弃去上清液， 并用 50温水冲洗沉淀物， 得凝乳蛋白质沉淀物 ； （9） 打浆 ： 将凝乳蛋白质沉淀物加水搅打或研磨成蛋白质浓度 1220% 的均匀浆液， 其 间用质量浓度 25% 的 NaOH 回调 pH 至 6.57.0， 搅拌速度为 85r/min ； （10） 干燥 ： 将浆液采用喷雾干燥法进行干燥， 得淡水小龙虾分离蛋白 ； 喷雾干燥条件 是 ： 进风温度 160170， 塔体温度 95100， 排风温度 8590。 0006 本发明的优点是 ：。
12、 1、 成功地制备了淡水小龙虾分离蛋白， 扩大了龙虾的应用范围 ； 2、 制备方法易于操作， 成本低， 得率高 ； 3、 龙虾分离蛋白的功能性质优越， 可开发为食品配 料应用于各种食品中。 具体实施方式 0007 下面结合具体实施例进一步说明本发明的技术解决方案， 这些实施例不能理解为 是对技术方案的限制。 0008 实施例 1 ： 依以下步骤制备淡水小龙虾分离蛋白 （1） 鲜活龙虾预处理 ： 购买鲜活原料淡水小龙虾， 并对淡水小龙虾及时挑选， 剔除老壳 虾、 死虾及混有的杂质 ； 将挑选后的新鲜淡水小龙虾放在含有少量食盐和柠檬酸的溶液中 浸泡一段时间， 使其吐出肠腺及胃中的污物， 再将龙虾表。
13、面的污物刷洗干净 ； 将清洗后的活 淡水小龙虾首尾分离， 虾仁肉与虾壳剥离 ； （2） 淡水小龙虾蛋白粉的制备 ： 经匀浆机将虾仁肉粉碎为肉浆 ； 肉浆在 150旋转滚筒 干燥器中干燥至水分含量为4%的龙虾干 ； 粉碎机粉碎龙虾干过60目筛， 得淡水小龙虾蛋白 粉 ； 经分析龙虾蛋白粉组成为 64% 蛋白质、 19% 脂肪、 13% 灰分和 4% 水分 ； （3） 脱脂 ： 淡水小龙虾蛋白粉以固液比 1g:10mL 投入正己烷中进行水浴蒸发脱脂， 水浴 温度为60， 脱脂时间60min， 残留物室温干燥， 粉碎过60目筛， 得脱脂虾蛋白粉， 脱脂虾蛋 白粉于 4储存备用 ； （4） 一次碱提 。
14、： 将脱脂虾蛋白粉分散于水中， 制成10% w/v的分散液， 用质量浓度25%的 氢氧化钠调节 pH 至 9.0， 分散液在 40、 50r/min 搅拌 50min， 经振动筛或滤筒分离， 得蛋白 质提取液和残渣 ； （5） 二次碱提 ： 将一次碱提得到的残渣分散于水中， 制成 10% w/v 的分散液， 用质量浓 度 25% 的氢氧化钠调节 pH 至 9.0， 分散液在 40、 50r/min 搅拌 50min， 经振动筛或滤筒分 离， 得蛋白质提取液和残渣 ； （6） 一次分离 ： 将一次碱提和二次碱提得到的蛋白质提取液合离心机于 900g、 4、 离心 25min， 保留上清液 ； （。
15、7） 酸沉淀 ： 将一次分离后的上清液用6 mol/L的食用盐酸调节pH至3.0， 静置20min， 得大颗粒的沉淀物 ； （8） 二次分离 ： 用离心机将酸沉淀的沉淀物于 9000g、 4、 离心 10min， 弃去上清液， 并用 50温水冲洗沉淀物， 得凝乳蛋白质沉淀物 ； 说 明 书 CN 104255898 A 4 3/4 页 5 （9） 打浆 ： 将凝乳蛋白质沉淀物加水搅打或研磨成蛋白质浓度 12% 的均匀浆液， 其间用 质量浓度 25% 的 NaOH 回调 pH 至 6.5， 搅拌速度为 85r/min ； （10） 干燥 ： 将浆液采用喷雾干燥法进行干燥， 得淡水小龙虾分离蛋白 。
16、； 喷雾干燥条件 是 ： 进风温度 160， 塔体温度 95， 排风温度 85。 0009 实施例 2 ： 依以下步骤制备淡水小龙虾分离蛋白 （1） 鲜活龙虾预处理 ： 购买鲜活原料淡水小龙虾， 并对淡水小龙虾及时挑选， 剔除老壳 虾、 死虾及混有的杂质 ； 将挑选后的新鲜淡水小龙虾放在含有少量食盐和柠檬酸的溶液中 浸泡一段时间， 使其吐出肠腺及胃中的污物， 再将龙虾表面的污物刷洗干净 ； 将清洗后的活 淡水小龙虾首尾分离， 虾仁肉与虾壳剥离 ； （2） 淡水小龙虾蛋白粉的制备 ： 经匀浆机将虾仁肉粉碎为肉浆 ； 肉浆在 155旋转滚筒 干燥器中干燥至水分含量为4%的龙虾干 ； 粉碎机粉碎龙虾。
17、干过60目筛， 得淡水小龙虾蛋白 粉 ； 经分析龙虾蛋白粉组成为 64% 蛋白质、 19% 脂肪、 13% 灰分和 4% 水分 ； （3） 脱脂 ： 淡水小龙虾蛋白粉以固液比 1g:10mL 投入正己烷中进行水浴蒸发脱脂， 水浴 温度为60， 脱脂时间60min， 残留物室温干燥， 粉碎过60目筛， 得脱脂虾蛋白粉， 脱脂虾蛋 白粉于 4储存备用 ； （4） 一次碱提 ： 将脱脂虾蛋白粉分散于水中， 制成10% w/v的分散液， 用质量浓度25%的 氢氧化钠调节 pH 至 9.25， 分散液在 40、 50r/min 搅拌 55min， 经振动筛或滤筒分离， 得蛋 白质提取液和残渣 ； （5）。
18、 二次碱提 ： 将一次碱提得到的残渣分散于水中， 制成 10% w/v 的分散液， 用质量浓 度 25% 的氢氧化钠调节 pH 至 9.25， 分散液在 40、 50r/min 搅拌 55min， 经振动筛或滤筒分 离， 得蛋白质提取液和残渣 ； （6） 一次分离 ： 将一次碱提和二次碱提得到的蛋白质提取液合离心机于 900g、 4、 离心 25min， 保留上清液 ； （7） 酸沉淀 ： 将一次分离后的上清液用6 mol/L的食用盐酸调节pH至3.3， 静置20min， 得大颗粒的沉淀物 ； （8） 二次分离 ： 用离心机将酸沉淀的沉淀物于 9000g、 4、 离心 10min， 弃去上清液。
19、， 并用 50温水冲洗沉淀物， 得凝乳蛋白质沉淀物 ； （9） 打浆 ： 将凝乳蛋白质沉淀物加水搅打或研磨成蛋白质浓度 16% 的均匀浆液， 其间用 质量浓度 25% 的 NaOH 回调 pH 至 6.75， 搅拌速度为 85r/min ； （10） 干燥 ： 将浆液采用喷雾干燥法进行干燥， 得淡水小龙虾分离蛋白 ； 喷雾干燥条件 是 ： 进风温度 165， 塔体温度为 97.5， 排风温度 87.5。 0010 实施例 3 ： 依以下步骤制备淡水小龙虾分离蛋白 （1） 鲜活龙虾预处理 ： 购买鲜活原料淡水小龙虾， 并对淡水小龙虾及时挑选， 剔除老壳 虾、 死虾及混有的杂质 ； 将挑选后的新鲜。
20、淡水小龙虾放在含有少量食盐和柠檬酸的溶液中 浸泡一段时间， 使其吐出肠腺及胃中的污物， 再将龙虾表面的污物刷洗干净 ； 将清洗后的活 淡水小龙虾首尾分离， 虾仁肉与虾壳剥离 ； （2） 淡水小龙虾蛋白粉的制备 ： 经匀浆机将虾仁肉粉碎为肉浆 ； 肉浆在 160旋转滚筒 干燥器中干燥至水分含量为4%的龙虾干 ； 粉碎机粉碎龙虾干过60目筛， 得淡水小龙虾蛋白 粉 ； 经分析龙虾蛋白粉组成为 64% 蛋白质、 19% 脂肪、 13% 灰分和 4% 水分 ； 说 明 书 CN 104255898 A 5 4/4 页 6 （3） 脱脂 ： 淡水小龙虾蛋白粉以固液比 1g:10mL 投入正己烷中进行水浴。
21、蒸发脱脂， 水浴 温度为60， 脱脂时间60min， 残留物室温干燥， 粉碎过60目筛， 得脱脂虾蛋白粉， 脱脂虾蛋 白粉于 4储存备用 ； （4） 一次碱提 ： 将脱脂虾蛋白粉分散于水中， 制成10% w/v的分散液， 用质量浓度25%的 氢氧化钠调节 pH 至 9.5， 分散液在 40、 50r/min 搅拌 60min， 经振动筛或滤筒分离， 得蛋白 质提取液和残渣 ； （5） 二次碱提 ： 将一次碱提得到的残渣分散于水中， 制成 10% w/v 的分散液， 用质量浓 度 25% 的氢氧化钠调节 pH 至 9.5， 分散液在 40、 50r/min 搅拌 60min， 经振动筛或滤筒分 。
22、离， 得蛋白质提取液和残渣 ； （6） 一次分离 ： 将一次碱提和二次碱提得到的蛋白质提取液合离心机于 900g、 4、 离心 25min， 保留上清液 ； （7） 酸沉淀 ： 将一次分离后的上清液用6 mol/L的食用盐酸调节pH至3.6， 静置20min， 得大颗粒的沉淀物 ； （8） 二次分离 ： 用离心机将酸沉淀的沉淀物于 9000g、 4、 离心 10min， 弃去上清液， 并用 50温水冲洗沉淀物， 得凝乳蛋白质沉淀物 ； （9） 打浆 ： 将凝乳蛋白质沉淀物加水搅打或研磨成蛋白质浓度 20% 的均匀浆液， 其间用 质量浓度 25% 的 NaOH 回调 pH 至 7.0， 搅拌速度。
23、为 85r/min ； （10） 干燥 ： 将浆液采用喷雾干燥法进行干燥， 得淡水小龙虾分离蛋白 ； 喷雾干燥条件 是 ： 进风温度 170， 塔体温度为 100， 排风温度 90。 0011 实施例 1-3 所得的淡水小龙虾分离蛋白和淡水小龙虾肉的化学组成如下表。 0012 淡水小龙虾肉和分离蛋白的化学组成 成分水分 （%）灰分 （%）蛋白质 （%）脂肪 （%） 龙虾肉7.7413.5364.769.0 淡水小龙虾分离蛋白4.550.123.880.2290.452.100.970.04 实施例 1-3 所得的淡水小龙虾分离蛋白的功能性质如下 ： 持水力为 62.8%， 溶解度为 65.4%， 起泡性为 38%， 起泡稳定性为 78.9%， 乳化度为 50.0%， 乳化稳定性为 66.4%。 说 明 书 CN 104255898 A 6 。