三唑衍生物及其盐 本发明涉及具有优良的抗真菌作用和高安全性的三唑衍生物及其盐，以及含有该三唑衍生物作为有效成分的药物组合物。
真菌症包括以各种白癣、顽癣、皮肤念珠菌病等为代表的皮肤病以及、真菌性髓膜炎、真菌性呼吸系统感染疾病、真菌血液疾病、尿路真菌感染疾病等为代表的深度真菌感染疾病。由于癌症化疗剂、免疫抑制剂等的频繁使用、感染艾滋病等引起的生体内自身免疫机能的降低等因素，近年来念珠菌症及曲霉病等深度真菌疾病的发病有增加的趋势，所以希望能开发对这些细菌有效的药剂。作为以往公知的治疗深度真菌疾病的治疗药剂，例如两性霉素B、唑系的氟康唑以及伊曲康唑等，都存在着安全性或抗真菌作用等方面的问题，希望能开发对曲霉菌以及念珠菌有效的抗真菌制剂。现在，已经开发了比较有效的唑系制剂，例如特开平6-247944号公报等记载的具有羟乙基的化合物、特开昭59-163374号公报、特开平5-163269号公报记载地关于具有二氟亚甲基的化合物。另外，作为具有叔羟基的化合物有特开平8-217778号公报及特开平8-333367号公报等记载的环状化合物、特开平8-104676号公报及特开平9-183769号公报等记载的具有酰基的化合物，但还不十分充分。
所以，本发明的目的，是提供安全性高、具有有效的抗曲霉菌以及念珠菌的抗真菌作用的化合物。
在这种现状下，本发明者通过合成大量的三唑衍生物以及其盐，来探讨其抗曲霉菌以及念珠菌的抗真菌作用的有效性，结果发现下述通式(1)表示的三唑衍生物及其盐，对包括曲霉菌及念珠菌在内的真菌类具有优良的抗菌作用，而且具有高度安全性，从而完成本发明。
即，本发明提供了由下面通式(1)表示的三唑衍生物或其盐，
〔式中，R1表示低级烷基或芳烷基，R2表示氢原子、低级烷基、芳烷基或酰基，X1、X2可以相同也可以不同，表示氢原子、卤素原子或三氟甲基，n表示0～2的整数，m表示1～5的整数。〕
另外，本发明提供了以上述三唑衍生物(1)或其盐为有效成分的药物。
另外，本发明提供了含有上述三唑衍生物(1)或其盐、以及药学上允许的载体组成的药物组合物。
另外，本发明提供了上述三唑衍生物(1)或其盐作为药物使用的用途。
再有，本发明提供了真菌感染症的治疗方法，是对患者给以有效量的三唑衍生物(1)或其盐。
在本发明的三唑衍生物(1)中，作为R1以及R2中的低级烷基，例如碳原子数为1～6的直链或支链烷基，具体如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、戊基、己基等。其中，优选碳原子数1～4的烷基，最优选甲基。
另外，作为X1以及X2的卤素原子，例如氟原子、氯原子、溴原子、碘原子。
作为R1以及R2的芳烷基，例如碳原子数为7～11的芳烷基，其中优选苯基-C1-5-烷基，具体例如苄基、苯乙基等。
作为R2的酰基，为碳原子数为2～10的酰基，例如乙酰基、丙酰基、辛酰基等碳原子数为2～10的烷酰基以及苯甲酰基等碳原子数为7～10芳酰基，其中本发明中优选碳原子数为2～10的烷酰基，最优选乙酰基。
在本发明的三唑衍生物(1)中，作为R1优选甲基、乙基、苄基，特别优选甲基。作为R2优选氢原子、甲基、苄基、乙酰基，最优选甲基。作为X1、X2，优选卤素原子，特别优选氟原子。n优选0或2。m优选1～3，最优选2。
作为本发明的三唑衍生物(1)的盐，如果是药学允许的盐则没有特别的限制，例如盐酸盐、硝酸盐、氢溴酸盐、对甲苯磺酸盐、甲磺酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、乳酸盐等。
在本发明的三唑衍生物(1)中，由于存在着手性碳原子产生的光学活性，所以也包含其外消旋体、光学活性体。另外也包括这些化合物的水合物。
本发明的三唑衍生物(1)及其盐，可以按照下列反应式制得。
〔式中，R1、R2、X1、X2、以及m与上述含义相同〕。
即，将化合物(2)羟烷基硫化成为化合物(3)，再烷基化、芳烷基化或酰基化成为化合物(4)，将烷基硫化的化合物(3)或化合物(4)氟化成为化合物(5)，将化合物(5)环氧化成为化合物(6)以后，化合物(6)通过三唑化，可以制成化合物(7)。另外，化合物(4)还可以通过将化合物(2)直接烷氧基烷基硫化，芳烷氧烷基硫化或酰氧基烷基硫化制得。如果将化合物(7)烷基化，可以得到本发明化合物(1a)，再将其氧化，可以得到本发明化合物(1b)。
比较具体的化合物(3)，例如通过将市售的阿尔德里希(アルド リツチ)公司的2-氯-2’,4’-二氟苯乙酮(2)羟烷基硫化而制得。作为羟烷基硫化的试剂，例如可以使用2-巯基乙醇等ω-巯基醇。作为碱，可以使用氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钡、碳酸钠、碳酸钾、氢化钠等。作为溶剂，可以使用甲醇、乙醇等醇溶剂、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)等非水性极性溶剂及1,4-二噁烷、四氢呋喃(THF)等醚溶剂，优选甲醇。反应温度为-40℃～溶剂的沸点，优选20～60℃。
化合物(4)可以通过将化合物(3)在溶剂中烷基化、芳烷基化或酰基化制得。作为烷基化剂，可以使用甲基碘、丙基碘等烷基卤化物及硫酸二甲酯等硫酸酯类。作为芳烷基化剂，可以使用苄基溴及苯乙基氯等芳烷基卤化物等。作为酰基化试剂，例如乙酰氯、丙酸氯等酰基卤化物及乙酸酐等酸酐。作为溶剂，可以单独使用吡啶等碱性溶剂，也可以在碳酸钾、氢氧化钠为代表的碱存在下，使用苯、甲苯等烃系溶剂或乙醚、四氢呋喃等醚系溶剂。反应温度为-40℃-溶剂的沸点，优选20～60℃。
化合物(4)可以通过将2-氯-2’,4’-二氟苯乙酮(2)直接、烷氧基烷基硫化、芳烷氧基烷基硫化或酰氧基烷基硫化而制得。例如，可以通过在氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钡、碳酸钠、碳酸钾、氢化钠等碱的存在下，在甲醇、乙醇等醇系溶剂、N,N-二甲基甲酰胺等非水性极性溶剂及1,4-二噁烷、四氢呋喃等醚系溶剂中，将2-氯-2’,4’-二氟苯乙酮(2)与2-甲氧基乙烷硫醇(J.Med.Chem.,39,1253(1996).)等烷氧基烷基硫醇、同样合成的苄氧基乙烷硫醇等芳氧烷烷基硫醇或2-乙酸基乙硫醇(J.Chem.Soc.,1952,817.)等酰氧基烷基硫醇反应合成而制得。作为碱优选碳酸钾，溶剂优选甲醇。反应温度为-40℃～溶剂的沸点，优选20～60℃。
化合物(5)可以通过将化合物(3)及(4)在溶剂中与卤化试剂反应反应制得。作为卤化试剂，优选氟化试剂，作为氟化试剂，例如氟气、高氯氧基氟、氟化钾、喷雾干燥氟化钾、冷冻干燥氟化钾、四烷基氟化铵、三(二甲胺基)硫代(三甲基甲硅烷基)二氟化物、N-氟吡啶酮、N-氟-N-烷基-芳磺胺、N-氟奎宁鎓盐、N-氟高氟烷基磺酰亚胺、N-氟磺内酰胺、氟化氙、N-氟吡啶鎓盐、N-氟吡啶鎓磺酸酯等，作为市售品，例如才ノダ.フロリネイトFP-T300、同FP-T500、同FP-T700、同FP-B300、同FP-B500、同FP-B700、同FP-B800(以上为秩父小野田(株)制)、MEC-01、MEC-02、MEC-03、MEC-04、MEC-05(以上为大金工业(株)制)等。氟化试剂的使用量，优选相对于1摩尔化合物(4)使用2～20当量。作为溶剂，例如1,2-二氯乙烷、1,1,2-三氯乙烷、氯仿、二氯甲烷、乙醚、乙酸乙酯、四氢呋喃等，特别优选1,2-三氟乙烷。反应温度为-78℃～溶剂沸点，优选80～100℃。另外，为了提高收率，可以使用路易斯酸或碱。作为路易斯酸，例如氯化铵、氯化锌、氯化锡等。作为碱，例如氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钡、碳酸钠、碳酸钾、氢化钠、叔丁醇钾、二异丙氨基锂、六甲基二硅氨烷钾等。
化合物(6)可以通过在溶剂中，在的2～5当量的碱的存在下，将化合物(5)与1～2当量的三甲基氧化锍碘化物或三甲基锍碘化物等环氧甲基化剂反应制得。作为溶剂，例如二甲基亚砜(DMSO)及四氢呋喃等。碱，例如氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钡、碳酸钠、碳酸钾、氢化钠、甲醇钠等，特别优选氢化钠。反应温度为-100℃～溶剂沸点，优选-40～50℃。
化合物(7)可以通过在溶剂中，碱存在下，将化合物(6)与1,2,4-三唑或其碱金属盐反应制得。作为溶剂例如N,N-二甲基甲酰胺、乙腈、N,N-二甲替乙酰胺、二甲基亚砜等。作为碱，例如氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钡、碳酸钠、碳酸钾、叔丁醇钾等。反应温度为0℃～溶剂沸点，优选20～60℃。
化合物(1a)可以通过在溶剂中，使用烷基卤化物等在碱存在下将化合物(7)烷基化制得。作为使用的烷基卤化物，例如碘甲烷、碘乙烷、碘丙烷、苄基氯等。作为碱，例如氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钡、碳酸钠、碳酸钾、氢化钠等。溶剂例如甲醇、乙醇等醇溶剂、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)等非水性极性溶剂及、1,4-二噁烷、四氢呋喃(THF)等醚系溶剂，优选DMF。反应温度为-40℃～溶剂沸点，优选-20℃。
化合物(1b)可以通过将化合物(1a)在2当量以上，优选2.2～2.3当量的氧化剂作用下氧化制得。作为氧化剂，例如间-氯过苯甲酸、过氧化氢溶液、过乙酸、四丙基铵过钌酸盐、四氧化锇、高锰酸钾、过硫酸氢钾等。作为溶剂例如氯仿、二氯甲烷、乙酸、甲醇、水、乙腈、四氯化碳、或其混合溶剂。反应温度为-40℃～溶剂沸点，优选0～50℃。另外，为了提高收率，最好使用三氯化钌、二氧化硒、钨酸钠、钼酸钠、氧化钒等催化剂。
从上述反应中的反应混合物中分离目的产物的方法没有特别的限制，例如可以通过重结晶、各种色谱法等方法。另外，可以通过常法将目的化合物改变成所希望的盐。
如此得到的本发明化合物(1)及其盐，通过体内及体外培养显示出对包括霉菌以及念珠菌在内的真菌类具有优良的抗菌作用，并且安全性很高，作为对预防以及治疗各种真菌感染症的药物非常有效。
本发明化合物可以与药学上允许的载体配合使用，按通常方法制得片剂、颗粒剂、散剂、胶囊剂、混悬剂、注射剂、栓剂、外用制剂等各种剂型的医药组合物。在制造固体制剂时，必要时在本发明化合物中加入粘和剂、崩解剂、增量剂、包衣剂、糖衣剂等赋形剂后，按常法制得片剂、颗粒剂、胶囊剂、栓剂等。在调制注射剂时，可以将本发明化合物预先在注射用蒸馏水等水性载体中溶解、分散、乳化，或制成注射用粉末，在使用时再溶解。注射剂的给药方法例如静脉内给药、动脉内给药、腹腔内给药、皮下给药、静脉滴注等。
本发明化合物的给药剂量，根据给药方法、症状、患者年龄、体重等不同而不同，优选成人1日剂量为0.1～100mg。
实施例
下面通过列举的实施例详细说明本发明，但本发明并不局限于此。
参考例1
2’,4’-二氟-2-(2-甲氧基乙基)硫代苯乙酮的合成
在2-氯-2’,4’-二氟苯乙酮(2.7g,0.014mol)以及2-甲氧基乙硫醇(J.Med.Chem.,39,1253(1996)(1.4g,0.015mol)的甲醇(50ml)溶液中，冰浴下加入碳酸钾(2.3g,0.016mol)，在室温下搅拌30分钟。反应结束后，滤除不溶物，减压馏去溶剂。将得到的残渣用乙醚稀释，水洗后，硫酸镁干燥，减压蒸馏，得到无色油状的2’,4’-二氟-2-(2-甲氧基乙基)硫代苯乙酮(2.3g，收率67.0％)。1H-NMR(CDCl3)δ:2.71(2H,t,J=6.4Hz),3.38(3H,s),3.56(2H,t,J=6.4Hz),3.84(2H,d,J=2.4Hz),6.7-7.1(2H,m),7.7-8.1(1H,m).
参考例2
2,2-二氟-2’,4’-二氟-2-(2-甲氧基乙基)硫代苯乙酮的合成
在2’,4’-二氟-2-(2-甲氧基乙基)硫代苯乙酮(1.00g,0.004mol)的1,1,2-三氯乙烷(50ml)溶液中，内温85℃条件下少量持续加入N-氟-4-甲基吡啶鎓-2-磺酸酯(大金工业(株)制、MEC-02)(2.17g,0.011mol)，在内温100～110℃下搅拌2小时。反应结束后，将反应液用乙醚稀释，滤除不溶物，用水洗涤乙醚溶液，硫酸镁干燥，减压蒸馏。将得到的残渣通过硅胶柱色谱法，用氯仿洗脱得到淡黄色油状的2,2-二氟-2’,4’-二氟-2-(2-甲氧基乙基)硫代苯乙酮(0.43g，收率39.0％)。1H-NMR(CDCl3)δ:3.08(2H,t,J=6.2Hz),3.46(3H,s),3.64(2H,t,J=6.2Hz),6.7-7.1(2H,m),7.7-8.1(1H,m).
参考例3
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-〔(2-甲氧基乙基)硫代〕-2,3-环氧丙烷的合成
将60％NaH(2.2g,0.055mol)的THF(60ml)-DMSO(120ml)悬浮液加温至外温50℃，持续少量加入三甲基氧化锍碘化物(12.1g,0.055mol)，在相同温度下搅拌15分钟后，冷却至-20℃，滴加2,2-二氟-2’,4’-二氟-2-(2-甲氧基乙基)硫代苯乙酮(13.0g,0.046mol)的THF(60ml)溶液。在室温下搅拌1.5小时后，将反应液注入冰水，用乙醚萃取。将醚溶液用水洗涤，硫酸镁干燥，减压蒸馏，得到淡黄色油状的2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-〔(2-甲氧基乙基)硫代〕-2,3-环氧丙烷(13.0g，收率95.4％)。1H-NMR(CDCl3)δ:
2.6-2.8(1H,m),3.01(2H,t,J=6.4Hz),
3.35(3H,s),3.4-3.7(3H,m),
6.6-7.1(2H,m),7.4-7.7(1H,m).
参考例4
2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-〔(2-甲氧基乙基)硫代〕-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-丙醇的合成
在2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-〔(2-(2-甲氧基乙基)硫代〕-2,3-环氧丙烷(13.0g,0.044mol)的DMSO(100ml)溶液中，加入1,2,4-三唑(7.6g,0.11mol)以及碳酸钾(15.2g,0.11mol)，在室温下搅拌12小时，然后在外温为50℃下搅拌1小时。反应结束后，用乙醚稀释，滤除不溶物，将乙醚溶液用水洗涤后，硫酸镁干燥，减压蒸馏。得到的残渣通过异丙醚-乙酸乙酯重结晶，得到无色结晶的2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-〔(2-甲氧基乙基)硫代〕-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-丙醇(2.0g，收率12.0％)。
熔点：80-81℃。
IR(KBr)νmaxcm-1；1130
MS(FAB)；366(M+H)
1H-NMR(CDCl3)δ:
3.01(2H,t,J=6.6Hz),3.35(3H,s),
3.58(2H,t,J=6.6Hz),
4.81(1H,d,J=14.5Hz),
5.29(1H,d,J=14.5Hz),5.8(1H,s),
6.5-6.9(2H,m),7 6-7.9(1H,m),
7.80(1H,s),8.09(1H,s).
实施例1
1-{2-(2,4-二氟苯基)-3,3-二氟-2-甲氧基-3-〔(2-甲氧基乙基)硫代〕丙基}-1H-1,2,4-三唑的合成
将2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-〔(2-甲氧基乙基)硫代〕-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-丙醇(1.0g,2.74mmol)在冰浴下滴加至60％氢化钠(131mg,3.29mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(50ml)溶液中，室温下搅拌30分钟。然后在冰浴下，滴加碘甲烷(516mg,3.56mmol)，在室温下搅拌1小时。在反应液中加水，用乙酸乙酯萃取。将乙酸乙酯溶液用水洗涤后，无水硫酸钠干燥，减压蒸馏，得到的残渣通过硅胶柱色谱法(氯仿∶正己烷=50∶1)分离纯化，得到黄色油状物1-{2-(2,4-二氟苯基)-3,3-二氟-2-甲氧基-3-〔(2-甲氧基乙基)硫代〕丙基}-1H-1,2,4-三唑(894mg,收率86.0％)。MS(FAB)；380(M+H)1H-NMR(CDCl3)δ:2.97(2H,t,J=7Hz),3.34(3H,s),3.56(2H,t,J=7Hz),3.73(3H,t,J=2Hz),5.09(2H,t,J=15Hz),6.6-6.9(2H,m),7.4-7.7(1H,m),7.79(1H,s),7.99(1H,s).
实施例2
1-〔3-{〔2-(苄氧基)乙基〕硫代}-2-(2,4-二氟苯基)-3,3-二氟-2-甲氧丙基〕-1H-1,2,4-三唑
用1-{〔2-(苄氧基)乙基〕硫代}-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-丙醇，代替2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-〔(2-甲氧基乙基)硫代〕-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-丙醇，其余按实施例1同样，得到无色油状的1-〔3-{〔2-(苄氧基)乙基〕硫代}-2-(2,4-二氟苯基)-3,3-二氟-2-甲氧基丙基〕-1H-1,2,4-三唑。MS(FAB)；456(M+H)1H-NMR(CDCl3)δ:
2.99(2H,t,J=6Hz),3.64(2H,t,J=6Hz),
3.71(3H,s),4.50(2H,s),5.07(2H,br.s),
6.64-6.90(2H,m),7.64(5H,s),
7.47-7.64(1H,m),7.77(1H,s),
7.98(1H,s).
实施例3
2-{〔2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-甲氧基-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)丙基〕硫代}-1-乙醇
用2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-〔(2-羟乙基)硫代〕-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-丙醇，代替2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-〔(2-甲氧基乙基)硫代〕-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-丙醇，其余按实施例1同样反应，得到无色结晶的2-{〔2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-甲氧基-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)丙基〕硫代}-1-乙醇。
熔点：76-79℃IR(KBr)νmaxcm-1；3111,1612,1506,1132.MS(FAB)；366(M+H)1H-NMR(CDCl3)δ:
2.98(2H,t,J=5.9Hz),3.5-4.0(5H,m),
5.09(2H,s),6.6-7.0(2H,m),
7.4-7.8(1H,m),7.81(1 H,s),
7.99(1H,s).
实施例4
2-{〔2-(2,4-二氟苯基)-2-乙氧基-1,1-二氟-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)丙基〕硫代}-1-乙醇
用2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-〔(2-羟乙基)硫代〕-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-丙醇，代替2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-〔(2-甲氧基乙基)硫代〕-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-丙醇，用碘乙烷代替碘甲烷，其余按实施例1同样反应，得到无色油状的2-{〔2-(2,4-二氟苯基)-2-乙氧基-1,1-二氟-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)丙基〕硫代}-1-乙醇。MS(FAB)；380(M+H)1H-NMR(CDCl3)δ:
1.32(3H,t,J=6.8Hz),
2.95(2H,t,J=6.4Hz),3.7-4.2(5H,m),
4.96(1H,d,J=14.0Hz),
5.23(1H,d,J=14.0Hz),6.6-7.0(2H,m),
7.5-7.8(1H,m),7.77(1H,s),7.97(1H,s).
实施例5
2-{〔2-(苄氧基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)丙基〕硫代}-1-乙醇
用2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-〔(2-羟乙基)硫代〕-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-丙醇，代替2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-〔(2-甲氧基乙基)硫代〕-3-(1H-1,2,4三唑-1-基)-2-丙醇，用苄基氯代替碘甲烷，其余按实施例1同样反应，得到无色油状的2-{〔2-(苄氧基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)丙基〕硫代}-1-乙醇。MS(FAB)；442(M+H)1H-NMR(CDCl3)δ:
2.99(2H,t,J=6.4Hz),3.6-3.9(2H,m),
4.9-5.2(4H,m),6.6-7.0(2H,m),
7.2-7.5(5H,m),7.5-7.8(1H,m),
7.79(1H,s),7.94(1H,s).
实施例6
2-{〔2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-甲氧基-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)丙基〕硫代}乙酸乙酯
用2-{〔2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-羟基-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)丙基〕硫代}乙酸乙酯，代替2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-1-〔(2-甲氧基乙基)硫代〕-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-丙醇，其余按实施例1同样反应，得到无色油状的2-{〔2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-甲氧基-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)丙基〕硫代}乙酸乙酯。MS(FAB)；408(M+H)1H-NMR(CDCl3)δ:
2.08(3H,s),3.42-3.54(2H,m),
3.75(3H,s),4.54(2H,t,J=6Hz),
5.16(1H,d,J=15Hz),5.31(1H,d,J=15Hz),
6.78-6.91(2H,m),7.26-7.58(1H,m),
7.78(1H,s),8.05(1H,s)
实施例7
1-{2-(2,4-二氟苯基)-3,3-二氟-2-甲氧基-3-〔(2-甲氧基乙基)磺酰基〕丙基}-1H-1,2,4-三唑的合成
在1-{2-(2,4-二氟苯基)-3,3-二氟-2-甲氧基-3-〔(2-甲氧基乙基)硫代〕丙基}-1H-1,2,4-三唑(800mg,2.12mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液中，在室温下加入85％的间氯过苯甲酸(1.25g,5.09mmol)，在室温下搅拌3小时。反应结束后，在反应液中加入饱和硫代硫酸钠水溶液以及饱和碳酸氢钠水溶液，搅拌。将二氯甲烷溶液分液、水洗后，硫酸镁干燥，减压蒸馏。得到的残渣通过硅胶柱纯化，用氯仿洗脱得到黄色油状物的1-{2-(2,4-二氟苯基)-3,3-二氟-2-甲氧基-3-〔(2-甲氧基乙基)磺酰基〕丙基}-1H-1,2,4-三唑700mg(收率81％)。MS(FAB)；412(M+H)1H-NMR(CDCl3)δ:
3.39(3H,s),3.4-3.5(2H,m),3.75(3H,s),
3.88(2H,t,J=6.0Hz),
5.18(1H,d,J=15.0Hz),
5.31(1H,d,J=15.0Hz),6.8-7.0(2H,m),
7.5-7.6(1H,m),7.79(1H,s),
8.06(1H,s).
实施例8
1-〔3-{〔2-(苄氧基)乙基〕磺酰基}-2-(2,4-二氟苯基)-3,3-二氟-2-甲氧基丙基〕-1H-1,2,4-三唑
用1-〔3-{〔2-(苄氧基)乙基〕硫代}2-(2,4-二氟苯基)-3,3-二氟-2-甲氧基丙基〕-1H-1,2,4-三唑，代替1-{2-(2,4-二氟苯基)-3,3-二氟-2-甲氧基-3-〔(2-甲氧基乙基)硫代〕丙基}-1H-1,2,4-三唑，按实施例7同样反应，得到无色油状的1-〔3-{〔2-(苄氧基)乙基〕磺酰基}-2-(2,4-二氟苯基)-3,3-二氟-2-甲氧基丙基〕-1H-1,2,4-三唑。MS(FAB)；488(M+H)1H-NMR(CDCl3)δ:
3.46(2H,t,J=6Hz),3.73(3H,s),
3.94(2H,t,J=6Hz),4.56(2H,s),
5.18(2H,d,J=15Hz),
5.35(2H,d,J=15Hz),6.67-6.95(2H,m),
7.33(5H,s),7.51-7.75(1H,m),
7.77(1H,s),8.05(1H,s).
实施例9
2-{〔2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-甲氧基-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)丙基〕磺酰基}-1-乙醇
用2-{〔2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-甲氧基-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)丙基〕硫代}-1-乙醇，代替1-{2-(2,4-二氟苯基)-3,3-二氟-2-甲氧基-3-〔(2-甲氧基乙基)硫代〕丙基}-1H-1,2,4-三唑，按实施例7同样反应，得到无色结晶的2-{〔2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-甲氧基-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)丙基〕磺酰基}-1-乙醇。
熔点：108-110℃
IR(KBr)νmaxcm-1；3200,1614,1500,1336.
MS(FAB)；398(M+H)
1H-NMR(CDCl3)δ:
2.95(1H,t,J=6.4Hz),3.3-3.6(2H,m),
3.75(3H,s),4.0-4.4(2H,m),
3.18(1H,d,J=15.6Hz),
5.32(1H,d,J=15.6Hz),6.6-7.0(2H,m),
7.4-7.7(1H,m),7.79(1H,s),
8.07(1H,s).
实施例10
2-{〔2-(2,4-二氟苯基)-2-乙氧基-1,1-二氟-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)丙基〕磺酰基}-1-乙醇
用2-{〔2-(2,4-二氟苯基)-2-乙氧基-1,1,-二氟-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)丙基〕硫代}-1-乙醇，代替1-{2-(2,4-二氟苯基)-3,3-二氟-2-甲氧基-3-〔(2-甲氧基乙基)硫代〕丙基}-1H-1,2,4-三唑，按实施例7同样反应，得到无色结晶的2-{〔2-(2,4-二氟苯基)-2-乙氧基-1,1-二氟-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)丙基〕磺酰基}-1-乙醇。
熔点：150-153℃
IR(KBr)νmaxcm-1；3122,1612,1500,1336.
MS(FAB)；412(M+H)
1H-NMR(CDCl3)δ:
1.36(3H,t,J=6.8Hz),2.55(1H,br.s),
3.4-3.5(2H,m),3.9-4.1(2H,m),
4.16(2H,t,J=5.4Hz),
5.21(1H,d,J=15.6Hz),
5.30(1H,d,J=15.6Hz),
6.7-7.9(1H,m),7.5-7.6(1H,m),
7.78(1H,s),8.02(1 H,s).
实施例11
2-{〔2-(苄氧基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)丙基〕磺酰基}-1-乙醇
用2-{〔2-(苄氧基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1,-二氟-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)丙基〕硫代}-1-乙醇，代替1-{2-(2,4-二氟苯基)-3,3-二氟-2-甲氧基-3-〔(2-甲氧基乙基)硫代〕丙基}-1H-1,2,4-三唑，按实施例7同样反应，得到无色结晶的2-{〔2-(苄氧基)-2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)丙基〕磺酰基}-1-乙醇。
熔点：144-145℃
IR(KBr)νmaxcm-1；3191,1614,1500,1340.
MS(FAB)；474(M+H)
1H-NMR(CDCl3)δ:
2.50(1H,br.s),3.3-3.5(2H,m),
4.11(2H,t,J=5.4Hz),
5.05(1H,d,J=9.8Hz),
3.12(1H,d,J=9.8Hz),
5.31(1H,d,J=15.6Hz),
5.46(1H,d,J=15.6Hz),
6.7-7.9(2H,m),7.3-7.5(5H,m),
7.5-7.7(1H,m),7.80(1H,s),
8.03(1H,s).
实施例12
2-{〔2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-甲氧基-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)丙基〕磺酰基}乙酸乙酯
用2-{〔2-(2,4-二氟苯基)-1,1,-二氟-2-甲氧基-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)丙基〕硫代}乙酸乙酯，代替1-{2-(2,4-二氟苯基)-3,3-二氟-2-甲氧基-3-〔(2-甲氧乙基)硫代〕丙基}-1H-1,2,4-三唑，按实施例7同样反应，得到无色油状的2-{〔2-(2,4-二氟苯基)-1,1-二氟-2-甲氧基-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)丙基〕磺酰基}乙酸乙酯。MS(FAB)；440(M+H)1H-NMR(CDCl3)δ:
2.08(3H,s ),3.42-3.54(2H,m),
3.75(3H,s),4.54(2H,t,J=6Hz),
5.16(1H,d,J=15Hz),
5.31(1H,d,J=15Hz),
6.78-6.91(2H,m),7.26-7.58(1H,m),
7.78(1H,s),8.05(1H,s).
试验例1对白假丝酵母(Candida albicans)的作用(体外试验)
在96孔微板的各孔中，分别注入75μl的用10％胎牛血清加MEM(含有谷氨酰胺、碳酸盐)调制的药物稀释溶液，再加入75μl用相同的培养基混悬的4×104cells/ml的C.albicans ATCC 44859，在二氧化碳恒温箱中37℃下培养24小时。培养后，在倒立显微镜下观察C.albicans的形态变化，通过与未加入药物的对照，将明显抑制菌丝型发育的最小药剂浓度作为终点(ng/ml)。
试验例2对烟曲霉(Aspergillus fumigatus)的作用(体外试验)
在96孔微板的各孔中，分别注入100μl的用含有0.165M的MOPS的RPMI1640培养基(含有谷氨酰胺、酚红，不含有碳酸盐；PH7)调制的药物稀释溶液，再加入100μl用相同的培养基混悬的6.0×104conidia/ml的A.fumigatus IFM 40808胞子液，在35℃下培养24小时。培养后，通过与未加入药物的对照，将明显抑制菌丝型发育的最小药剂浓度作为MIC值(μg/ml)。
试验例3对黄曲霉(Aspergillus flavus)的作用(体外试验)
在96孔微板的各孔中，分别注入100μl的用含有0.165M的MOPS的RPMI1640培养基(含有谷氨酰胺、酚红，不含有碳酸盐；PH7)调制的药物稀释溶液，再加入100μl用相同的培养基混悬的6.0×104conidia/ml的A.flavus IFM 41935胞子液，在35℃下培养24小时。培养后，通过与未加入药物的对照，将明显抑制菌丝型发育的最小药剂浓度作为MIC值(μg/ml)。
表1终点(ng/ml)MIC(μg/ml)MIC(μg/ml)被检化合物C.albicans A.fumigatus A.flavus 氟康唑 250 ＞128 ＞128
试验例4对白假丝酵母(Candida albicans)的作用(体内试验)
将ICR系(CRJ:CD-1)4周龄雄鼠禁食6周后，尾静脉接种C.albicansIFM 40009(3.0×106cells/鼠)，成为感染鼠。对照组每组10只、给药组每组5只，在接种菌后1小时给药1次，24小时后每日1次共计4次，每次经口给药1.25mg/kg。比较感染第14天后的生存状况。另外，通过Kaplan-Meier法(Cox mantel test)检定对照组与各给药组的生存天数。
表2 被检化合物生存天数(天)第14天的生存只数 实施例7 14.0*** 5/5 实施例9 14.0*** 5/5 实施例10 13.4*** 4/5 实施例12 14.0*** 4/5 氟康唑 9.6*** 0/5 对照组 4.1 0/10(***:p＜0.001)
实施例13片剂
实施例7的化合物 50mg
结晶纤维素 50mg
乳糖 50mg
羟丙基纤维素 18mg
硬脂酸镁 2mg
计 170mg
通过常法制得上述组成的片剂。必要时，该片剂可制成糖衣片、薄膜衣片。
实施例14胶囊剂
实施例7的化合物 50mg
轻质二氧化硅 25mg
乳糖 100mg
淀粉 50mg
滑石 25mg
计 250mg
将以上成分填充在1号胶囊中，制得胶囊剂。
实施例15颗粒剂
实施例7的化合物 50mg
乳糖 600mg
玉米淀粉 200mg
羧甲基纤维素钠 20mg
羟丙基纤维素 130mg
计 1000mg
通过常法制得上述组成的颗粒剂。
实施例16散剂
实施例7的化合物 50mg
轻质二氧化硅 20mg
沉降性碳酸钙 10mg
乳糖 250mg
淀粉 70mg
计 400mg
通过常法制得上述散剂。
实施例17注射剂
实施例7的化合物 5mg
硬化蓖麻油 85mg
丙二醇 60mg
葡萄糖 50mg
注射用蒸馏水 适量
计 总量1ml
通过常法制得上述组成的注射剂。
实施例18静脉滴注剂
实施例7的化合物 50mg
硬化蓖麻油 5g
丙二醇 10mg
葡萄糖 14.5mg
注射用蒸馏水 适量
计 总量100ml
通过常法制得上述组成的静脉滴注剂。
产业上的实用性
本发明的三唑衍生物及其盐具有较高的抗真菌活性，以此作为有效成分的抗真菌剂对预防以及治疗包括人在内的哺乳动物的真菌感染症有效。