技术领域
本发明属于药物制剂领域，具体涉及一种修复止痒贻贝粘蛋白凝胶剂及其制备方法。
背景技术
贻贝粘蛋白(Mussel adhesive protein MAP),也叫紫贻贝足丝蛋白(Mytilus edulis foot protein Mefp)来自海洋贝类紫贻贝，Mytilus edulis,它有在近海耐受波浪影响的能力，它 在特殊腺体内生成和储存一种蛋白胶，通过足丝足丝释放到岩石一类的固体表面上，形成抗 水的结合，从而将自己固定。在玻璃上的研究显示，蛋白胶形成的斑，从斑延伸开，有很强 的抗张强度(106-107mewton/meter2)，而斑内物质包含了贻贝粘蛋白MAP。
贻贝粘蛋白(MAP)中Lys含量20％，DOPA含量11％，。贻贝粘蛋白通过形成隔水粘附带 正电荷的微观生物支架促进愈合。贻贝粘的等电点是9.5，在生理PH值，因赖氨酸的存在具 有很高载量的正电荷，在创面形成微观支架，吸引带负电荷的细胞，例如表皮细胞、成纤维 细胞、血管内皮细胞、神经细胞等快速贴壁、爬行替代和生长，促进创面愈合。同时氧化的 DOPA和未氧化的DOPA在氧存在的环境中交联形成微观非连续网状生物支架，加固了隔水黏 附。贻贝粘蛋白中含有赖氨酸基团和L-DOPA基团是分子中重要的活性基团，贻贝粘蛋白质分 子中大量的赖氨酸基团使其在人体生理环境中带有大量正电荷由于电位差的原因可以起到止 痒作用，并且L-DOPA本身为神经递质，可能参与神经活动，达到止痒的效果。
目前贻贝粘蛋白创面修复止痒材料为喷剂剂型，但在临床应用中喷剂不能满足各临床科 室的要求，如妇科等，因此需要在保持贻贝粘蛋白促愈合及止痒活性基础上开发更多的剂型。 凝胶剂是目前广泛使用的一种剂型，它能较长时间与作用部位发生紧密接触，有较好放入生 物粘附性，并可提高活性成分从接触部位的吸收，避开肝脏首过效应及肠胃道破坏，提高活 性成分的生物利用度。
目前，缺乏一种与人体生物相容性好的修复止痒贻贝粘蛋白凝胶剂及其制备方法。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种与人体生物相容性好的修复止痒贻贝粘蛋白凝胶 剂及其制备方法。
为了实现上述目的，本发明通过如下技术方案实现：本发明提供了一种修复止痒贻贝粘 蛋白凝胶剂，所述修复止痒贻贝粘蛋白凝胶剂按质量百分比由以下组分组成：
进一步地，所述修复止痒贻贝粘蛋白凝胶剂的PH值为3.8-5.8。
进一步地，所述高分子基质材料为卡波姆-940、羟丙基甲基纤维素、甲基纤维素、羟甲 基纤维素中的一种或几种的组合。
更进一步地，所述保湿剂为甘油、乙二醇、山梨醇、丙三醇中的一种或几种的组合。
进一步地，所述表面活性剂为吐温80、脂肪酸山梨坦、十二烷基磺酸钠中的一种或几种 的组合。
进一步地，所述防腐剂为羟基苯甲酸乙酯；所述稳定剂为低分子右旋糖酐、乙二胺四乙 酸、乙二胺四乙酸二钠、乙二胺四乙酸钠钙中的一种或几种的组合。
更进一步地，所述抑菌剂为羟基苯甲酸乙酯、富马酸二甲酯、低级脂肪酸酯中的一种或 几种的组合；所述的PH调节剂为柠檬酸、山梨酸、碳酸氢三钠中的一种或几种的组合。
本发明所述的修复止痒贻贝粘蛋白凝胶剂的制备方法，包括如下步骤：
(1)器具准备：将将所有器具洗净、灭菌；
(2)基质溶胀及灭菌：按照上述质量百分比的比例称取高分子基质材料、保湿剂、表面 活性剂、防腐剂、稳定剂和抑菌剂，然后将其进行混合后，加入纯化水自然溶胀24h，搅拌 均匀用PH值调节剂调节溶液PH值为3.8-5.8，在0.1-0.15MPa压力，120-130℃条件下，30min 高压灭菌，冷却后备用；
(3)蛋白除菌过滤：在经处理后的贻贝粘蛋白原料料液中1％-2％的蛋白保护剂，然后用 纯化水将其稀释至原来浓度的1％-2％，在无菌条件下用0.22μm滤膜过滤除菌，得到贻贝粘 蛋白溶液待用；
(4)凝胶剂制备：在无菌条件下将步骤(2)和步骤(3)的产物充分混合，制得修复止 痒贻贝粘蛋白凝胶剂。
进一步地，在步骤(1)中，搅拌均匀用PH值调节剂调节溶液PH值为4.8，在0.12MPa 压力，125℃条件下，30min高压灭菌，冷却后备用。
本发明所述的修复止痒贻贝粘蛋白凝胶剂在创面修复止痒治疗当中的应用。
有益效果：本发明具有很好的生物粘附性，快速有效粘附创面，迅速止痒止痛，具有低 免疫原性，与人体生物相容性好、使用方便、不导致过敏、耐受性强、无皮肤刺激、安全无 毒、无不良反应。弥补了喷剂型的的不足，满足更多的临床应用需求，可以较长时间与作用 部位发生紧密接触，可与其他产品共同使用。将贻贝粘蛋白制成凝胶剂，性质稳定，降解周 期长，可持久发挥促进愈合、止痒止痛的作用。
(1)贻贝粘蛋白具有低免疫原性、与人体生物相容性好，不导致过敏、无皮肤刺激。降 解后分解成小分子氨基酸，安全、无毒、无依赖性和耐受性。适用于都安全性要求高的特殊 人群。贻贝粘蛋白凝制成的凝胶剂疗效与安全性优于其他常用外用剂型。
(2)克服了局部用膏剂渗透性差的不足，并且经处理后的活性蛋白制剂克服了需要冷冻 干燥才能稳定保存的缺陷，以天然来源的植酸类物质为蛋白保护剂，有利于蛋白稳定环境的 维护，并且植酸本身就是对人体有益的物质，分解后产生的磷脂是人体细胞的重要组成部分。 丰富了给药剂型，满足广大患者的用药需求。
具体实施方式
下面将通过具体实施例对本发明做进一步的具体描述，但不能理解为是对本发明保护范 围的限定。
本发明提供了一种修复止痒贻贝粘蛋白凝胶剂，所述修复止痒贻贝粘蛋白凝胶剂按质量 百分比由以下组分组成：
所述修复止痒贻贝粘蛋白凝胶剂的PH值为3.8-5.8。
所述高分子基质材料为卡波姆-940、羟丙基甲基纤维素、甲基纤维素、羟甲基纤维素中 的一种或几种的组合。
所述保湿剂为甘油、乙二醇、山梨醇、丙三醇中的一种或几种的组合。
所述表面活性剂为吐温80、脂肪酸山梨坦、十二烷基磺酸钠中的一种或几种的组合。
所述防腐剂为羟基苯甲酸乙酯；所述稳定剂为低分子右旋糖酐、乙二胺四乙酸、乙二胺 四乙酸二钠、乙二胺四乙酸钠钙中的一种或几种的组合。
所述抑菌剂为羟基苯甲酸乙酯、富马酸二甲酯、低级脂肪酸酯中的一种或几种的组合； 所述的PH调节剂为柠檬酸、山梨酸、碳酸氢三钠中的一种或几种的组合。
本发明的修复止痒贻贝粘蛋白凝胶剂的制备方法，包括如下步骤：
(1)器具准备：将将所有器具洗净、灭菌；
(2)基质溶胀及灭菌：按照上述质量百分比的比例称取高分子基质材料、保湿剂、表面 活性剂、防腐剂、稳定剂和抑菌剂，然后将其进行混合后，加入纯化水自然溶胀24h，搅拌 均匀用PH值调节剂调节溶液PH值为3.8-5.8，在0.1-0.15MPa压力，120-130℃条件下，30min 高压灭菌，冷却后备用；
(3)蛋白除菌过滤：在经处理后的贻贝粘蛋白原料料液中1％-2％的蛋白保护剂，然后用 纯化水将其稀释至原来浓度的1％-2％，在无菌条件下用0.22μm滤膜过滤除菌，得到贻贝粘 蛋白溶液待用；
(4)凝胶剂制备：在无菌条件下将步骤(2)和步骤(3)的产物充分混合，制得修复止 痒贻贝粘蛋白凝胶剂。
本发明所述的修复止痒贻贝粘蛋白凝胶剂在创面修复止痒治疗当中的应用。
本发明具有很好的生物粘附性，快速有效粘附创面，迅速止痒止痛，具有低免疫原性， 与人体生物相容性好、使用方便、不导致过敏、耐受性强、无皮肤刺激、安全无毒、无不良 反应。弥补了喷剂型的的不足，满足更多的临床应用需求，可以较长时间与作用部位发生紧 密接触，可与其他产品共同使用。将贻贝粘蛋白制成凝胶剂，性质稳定，降解周期长，可持 久发挥促进愈合、止痒止痛的作用。
(1)贻贝粘蛋白具有低免疫原性、与人体生物相容性好，不导致过敏、无皮肤刺激。降 解后分解成小分子氨基酸，安全、无毒、无依赖性和耐受性。适用于都安全性要求高的特殊 人群。贻贝粘蛋白凝制成的凝胶剂疗效与安全性优于其他常用外用剂型。
(2)克服了局部用膏剂渗透性差的不足，并且经处理后的活性蛋白制剂克服了需要冷冻 干燥才能稳定保存的缺陷，以天然来源的植酸类物质为蛋白保护剂，有利于蛋白稳定环境的 维护，并且植酸本身就是对人体有益的物质，分解后产生的磷脂是人体细胞的重要组成部分。 丰富了给药剂型，满足广大患者的用药需求。
实施例1
生产5000g修复止痒贻贝粘蛋白凝胶剂，所述修复止痒贻贝粘蛋白凝胶剂按质量百分比 由以下组分组成：
所述修复止痒贻贝粘蛋白凝胶剂的PH值为3.8。
所述高分子基质材料为卡波姆-940和羟丙基甲基纤维素。
所述保湿剂为甘油和乙二醇。
所述表面活性剂为吐温80。
所述防腐剂为羟基苯甲酸乙酯；所述稳定剂为低分子右旋糖酐和乙二胺四乙酸。
所述抑菌剂为羟基苯甲酸乙酯和富马酸二甲酯；所述的PH调节剂为柠檬酸、山梨酸、碳 酸氢三钠。
本发明的修复止痒贻贝粘蛋白凝胶剂的制备方法，包括如下步骤：
(1)器具准备：将将所有器具洗净、灭菌；
(2)基质溶胀及灭菌：按照上述质量百分比的比例称取高分子基质材料、保湿剂、表面 活性剂、防腐剂、稳定剂和抑菌剂，然后将其进行混合后，加入纯化水自然溶胀24h，搅拌 均匀用PH值调节剂调节溶液PH值为3.8，在0.1MPa压力，120℃条件下，30min高压灭菌， 冷却后备用；
(3)蛋白除菌过滤：在经处理后的贻贝粘蛋白原料料液中1％的蛋白保护剂，然后用纯 化水将其稀释至原来浓度的1％，在无菌条件下用0.22μm滤膜过滤除菌，得到贻贝粘蛋白溶 液待用；
(4)凝胶剂制备：在无菌条件下将步骤(2)和步骤(3)的产物充分混合，制得修复止 痒贻贝粘蛋白凝胶剂。
本发明所述的修复止痒贻贝粘蛋白凝胶剂在创面修复止痒材料中的应用。
实施例2
实施例2与实施例1的区别在于：生产5000g修复止痒贻贝粘蛋白凝胶剂，所述修复止 痒贻贝粘蛋白凝胶剂按质量百分比由以下组分组成：
所述修复止痒贻贝粘蛋白凝胶剂的PH值为5.8。
所述高分子基质材料为甲基纤维素和羟甲基纤维素。所述保湿剂为山梨醇和丙三醇。所 述表面活性剂为脂肪酸山梨坦和十二烷基磺酸钠。所述稳定剂为乙二胺四乙酸二钠和乙二胺 四乙酸钠钙。所述抑菌剂为低级脂肪酸酯；所述的PH调节剂为柠檬酸。
本发明所述的修复止痒贻贝粘蛋白凝胶剂的制备方法，包括如下步骤：本发明的修复止 痒贻贝粘蛋白凝胶剂的制备方法，包括如下步骤：
在步骤(2)中，基质溶胀及灭菌：按照上述质量百分比的比例称取高分子基质材料、保 湿剂、表面活性剂、防腐剂、稳定剂和抑菌剂，然后将其进行混合后，加入纯化水自然溶胀 24h，搅拌均匀用PH值调节剂调节溶液PH值为5.8，在0.15MPa压力，130℃条件下，30min 高压灭菌，冷却后备用。
实施例3
实施例3与实施例1的区别在于：生产5000g修复止痒贻贝粘蛋白凝胶剂，本发明提供 了一种修复止痒贻贝粘蛋白凝胶剂，所述修复止痒贻贝粘蛋白凝胶剂按质量百分比由以下组 分组成：
所述修复止痒贻贝粘蛋白凝胶剂的PH值为4.2。
所述高分子基质材料为羟甲基纤维素。所述保湿剂为丙三醇。所述表面活性剂为十二烷 基磺酸钠。所述稳定剂为低分子右旋糖酐、乙二胺四乙酸二钠和乙二胺四乙酸钠钙。
所述抑菌剂为羟基苯甲酸乙酯和低级脂肪酸酯；所述的PH调节剂为碳酸氢三钠。
本发明所述的修复止痒贻贝粘蛋白凝胶剂的制备方法，包括如下步骤：在步骤(2)中， 基质溶胀及灭菌：按照上述质量百分比的比例称取高分子基质材料、保湿剂、表面活性剂、 防腐剂、稳定剂和抑菌剂，然后将其进行混合后，加入纯化水自然溶胀24h，搅拌均匀用PH 值调节剂调节溶液PH值为4.8，在0.2MPa压力，125℃条件下，30min高压灭菌，冷却后备 用。
试验1
止痒实验
取豚鼠20只随机分为两组，每组10只，雌雄各半，分别为基质组和修复止痒贻贝粘蛋 白凝胶剂。实验前24h，给各组豚鼠右后足剃毛，涂药1次。实验当日，用粗砂纸擦伤右后 足剃毛处，面积1cm2.局部再涂药一次，10min后开始再创面处滴0.01％磷酸组织胺0.05ml/ 只，此后每隔3min依0.02％，0.03％递增浓度，每次均为0.05ml/只。直至豚鼠回头舔右 后足时所给予的磷酸组织胺总量(μg)为致痒阀。记录并比较各组的致痒阀，结果表明：修 复止痒贻贝粘蛋白凝胶剂组致痒阀(348-400.2)μg，与基质组(47.2-55)μg比较，P＜ 0.01可见修复止痒贻贝粘蛋白凝胶剂有明显的对抗磷酸组织胺所致瘙痒的作用。
创面愈合实验
取豚鼠10只，分为A组和B组两组，每组5只，将豚鼠背部剪毛，酒精消毒，在背部切 除2×2cm的全层皮肤，A组将修复止痒贻贝粘蛋白凝胶剂涂抹于创面上，B涂抹基质。手术 后1天、3天、5天、7天、14天观察修复止痒贻贝粘蛋白凝胶剂对创面的修复情况记录创面 愈合时间。(见表1)
术后14天两组创口全部愈合，无肿胀现象。A组皮肤颜色正常，有轻微疤痕。B组皮肤 颜色淡淡发红，有较大疤痕。A组创口愈合情况明显强于B组，A组(贻贝粘蛋白凝胶剂)样 品具有促进伤口愈合，减少疤痕的功效。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应 该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原 理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，本发明要求保护 范围由所附的权利要求书、说明书及其等效物界定。