《六倍体藏红花种质资源的创制方法.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《六倍体藏红花种质资源的创制方法.pdf（4页珍藏版）》请在专利查询网上搜索。
1、10申请公布号CN104054576A43申请公布日20140924CN104054576A21申请号201410283227122申请日20140623A01H4/0020060171申请人上海交通大学地址200240上海市闵行区东川路800号72发明人王贵荣李斌连唐克轩74专利代理机构上海科盛知识产权代理有限公司31225代理人杨元焱54发明名称六倍体藏红花种质资源的创制方法57摘要一种六倍体藏红花种质资源的创制方法将藏红花无菌苗进行超声、秋水仙素浸泡、离心沉降等处理后，转入出芽诱导培养基中，镜检筛选获得的六倍体材料用流式细胞仪进一步检测确认，最终得到纯合的六倍体藏红花材料。所得六倍体藏红。
2、花材料可以用来诱导藏红花的开花结实，从而得到无病毒种源，生产上有巨大的应用价值。51INTCL权利要求书1页说明书2页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书2页10申请公布号CN104054576ACN104054576A1/1页21一种六倍体藏红花种质资源的创制方法，其特征在于，包括如下步骤步骤一，将藏红花球根表面消毒后接种到MS空培养基中，得到无菌苗；步骤二，无菌苗生长4060天后，取其下部球根上的顶芽和侧芽进行超声处理；步骤三，将超声处理后的材料在0510的秋水仙溶液素中浸泡1020分钟；步骤四，将秋水仙素溶液浸泡过的材料进行离心操作；步骤五，将离心后的材料。
3、转入出芽诱导培养基中培养3040天；步骤六，从步骤五中所得丛生芽上切取生长点进行压片镜检；步骤七，将镜检初步筛选为六倍体的幼芽用流式细胞仪进一步检测筛选，最终得到纯合的藏红花六倍体植物材料。2根据权利要求1所述的六倍体藏红花种质资源的创制方法，其特征在于步骤二中所述的超声处理为将材料装在无菌离心管内，超声仪中处理810分钟，超声功率为80W。3根据权利要求1所述的六倍体藏红花种质资源的创制方法，其特征在于步骤四中所述的离心处理为50008000转/分钟，离心510分钟。4根据权利要求1所述的六倍体藏红花种质资源的创制方法，其特征在于步骤五中所述的出芽诱导培养基的配方为MS6BA0210MGL1。
4、TDZ0110MGL1。权利要求书CN104054576A1/2页3六倍体藏红花种质资源的创制方法技术领域0001本发明涉及的是一种生物技术，具体是一种六倍体藏红花种质资源的创制方法。背景技术0002藏红花又名西红花、番红花，属名贵紧缺中药材，因含有藏红花素而备受关注，被誉为世界上最贵的药用植物、世界上最好的染料、世界上最高档的香料。国家中医药管理局列为重点发展的中药材品种。近年来藏红花在医疗、保健、化工等方面的价值被全面开发，由于用量巨大，市场供不应求，主要依赖进口。藏红花为三倍体，不结实，所以采用无性繁殖，“种球”在繁殖过程中很容易感染植物病毒，一经染毒很难去除而且会越来越严重，极大降低了。
5、藏红花的产量和质量。经对现有技术的检索发现，藏红花脱毒后增产效果明显。可是，像其它单子叶植物一样，藏红花没有普通意义上的茎，叶片与球茎直接相连，生长点位于叶与球茎的交叉处。由于叶与球茎的交叉的面积比较大，所以在显微镜下寻找并剥离生长点如“大海捞针”般困难；另外无菌苗诱导出来的微型球根生长缓慢，不能快速繁殖。所以藏红花脱毒研究至今尚未取得实质性进展。发明内容0003本发明的目的，就是为了解决上述问题，提供一种六倍体藏红花种质资源的创制方法。0004为了达到上述目的，本发明采用了以下技术方案一种六倍体藏红花种质资源的创制方法，包括如下步骤0005步骤一，将藏红花球根表面消毒后接种到MS空培养基中，。
6、得到无菌苗；0006步骤二，无菌苗生长4060天后，取其下部球根上的顶芽和侧芽进行超声处理；0007步骤三，将超声处理后的材料在0510的秋水仙溶液素中浸泡1020分钟；0008步骤四，将秋水仙素溶液浸泡过的材料进行离心操作；0009步骤五，将离心后的材料转入出芽诱导培养基中培养3040天；0010步骤六，从步骤五中所得丛生芽上切取生长点进行压片镜检；0011步骤七，将镜检初步筛选为六倍体的幼芽用流式细胞仪进一步检测筛选，最终得到纯合的藏红花六倍体植物材料。0012本发明所得六倍体藏红花材料可以用来诱导藏红花的开花结实，从而得到无病毒种源，生产上有巨大的应用价值。具体实施方式0013下面对本发。
7、明的实施例作详细说明，该实施例以本发明中的技术方案为前提，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。0014本实施例的藏红花球形根来自上海交通大学。0015实施例的步骤如下说明书CN104054576A2/2页400161将藏红花球根表面消毒后接种到MS空培养基中，得到无菌苗；00172无菌苗生长60天后，取其下部球根上的顶芽和侧芽，超声80W处理10分钟；00183超声处理后的材料在0510的秋水仙溶液素中浸泡20分钟；00194秋水仙素溶液浸泡过的材料5000转/分钟的条件下离心5分钟；00205将离心后的植物材料转入出芽诱导培养基基中，配方为MS6BA0210MGL1TDZ0110MGL1；00216培养40天后出现了丛生芽，将新生芽生长点进行压片镜检后发现六倍体的材料；00227将镜检初步筛选为六倍体的幼芽用流式细胞仪进一步检测，最终得到纯合的藏红花六倍体植物材料。0023本实施例中，共获得了4棵六倍体藏红花植株，正在进行开花结实试验。说明书CN104054576A。