二苯乙烯苷药物组合物及其制备方法 【技术领域】
本发明属于医药技术领域， 具体地涉及一种二苯乙烯苷药物组合物及其制备方法。 背景技术
自然界中存在的茋类化合物， 被称为植物抗毒素， 是植物免疫系统受到外界侵害 ( 如细菌、 病毒、 光辐射等 ) 时进行特殊免疫应答所产生的， 由于其多样化的生理活性， 一直 备受关注。二苯乙烯苷又称茋多酚， 属多羟基茋类化合物， 广泛存在于藓类和高级植物中。 近年来多篇文献报道， 二苯乙烯苷具有多种生理活性和药用价值， 在降血脂、 抑制肿瘤、 抗 氧化、 治疗缺血性心脑血管疾病等方面显示出良好的活性。
天然的二苯乙烯苷主要以反式二苯乙烯苷元侧链结合一个单糖基的形式存在 ( 结构式见式 I)， 化学名为 2， 3， 5， 4’ - 四羟基二苯乙烯 -2-O-β-D- 葡萄糖苷。二苯乙烯苷 中存在 3 个酚羟基， 且结构中整个苷元为一个大共轭体系， 由其结构可知该化合物具有极 强的还原性。强还原性使二苯乙烯苷具有强大的清除自由基功能， 但也导致了化合物自身 的不稳定性， 给制备稳定、 质量可靠的二苯乙烯苷制剂， 尤其是供静脉注射用的二苯乙烯苷 制剂带来了极大的困难。
式I不合适的 pH 值、 不合适的辅料、 高温、 空气中的氧气等多种因素都可能导致二苯 乙烯苷制剂在制备或存储过程中发生氧化反应， 使二苯乙烯苷变质， 在制剂中引入杂质。 特 别是二苯乙烯苷水溶液在室温保存时氧化速度很快， 如需静脉注射给药， 必需配置后立即 给药。
二苯乙烯苷的极易氧化性使得制备稳定的二苯乙烯苷药物组合物非常困难， 阻碍 了其开发成药的步伐。 目前， 现有技术中只报道了何首乌二苯乙烯总苷片， 以及二苯乙烯苷 口服液两种药物组合物。 对于二苯乙烯苷在抗肿瘤、 抗氧化、 治疗缺血性心脑血管疾病方面 的应用， 尤其是心脑血管疾病的抢救用药而言， 注射用制剂能使药物直达病灶， 较口服制剂 更加迅速有效， 更为合适。而供静脉注射的二苯乙烯苷制剂目前还是空白， 因此， 制备可用 于注射用的稳定的二苯乙烯苷制剂， 对于实现其临床广泛应用有至关重要的意义。
发明内容
本发明的目的是提供一种含有二苯乙烯苷的稳定的药物组合物。
本发明所述的二苯乙烯苷药物组合物包括二苯乙烯苷、 抗氧化剂、 金属络合剂、 碳水化合物和能够将 pH 值调节到 4.0-5.0 的酸或缓冲剂。
其中抗氧化剂选自焦亚硫酸钠、 亚硫酸氢钠、 维生素 C、 D- 异抗坏血酸、 L- 半胱氨 酸盐酸盐。
金属络合剂选自依地酸二钠、 依地酸钙钠。
碳水化合物选自糖类或者氨基酸， 优选乳糖、 甘露醇、 羟乙基淀粉、 右旋糖酐、 葡萄 糖、 蔗糖、 甘氨酸， 最优选乳糖。
所述的酸或缓冲剂选自盐酸、 枸橼酸 - 枸橼酸盐、 醋酸 - 醋酸盐或磷酸 - 磷酸盐 ； 优选一定浓度的盐酸、 枸橼酸 - 枸橼酸钠、 醋酸 - 醋酸钠、 磷酸 - 磷酸二氢钠、 磷酸 - 磷酸氢 钠或磷酸 - 磷酸钠。
本发明所述的药物组合物可以优选的是液体制剂或冻干粉针剂， 更优选冻干粉针 剂。
当本发明药物组合物是冻干粉针剂时， 其 pH 值指的是冷冻干燥前溶液的 pH 值或 用药学上可接受的稀释剂复溶后溶液的 pH 值。
当本发明的药物组合物是冻干粉针剂时， 可使用药学上可接受的稀释剂复溶， 稀 释剂选自注射用水、 葡萄糖溶液、 氯化钠溶液或者一定浓度的低级醇的水溶液， 如 10％丙二 醇， 复溶后所得的均匀溶液可与静脉滴注用溶液如 0.9％氯化钠溶液， 5％葡萄糖溶液等混 合均匀， 供静脉注射使用。 本发明的药物组合物也包括冷冻干燥前制备的溶液， 其中包含二苯乙烯苷、 抗氧 化剂、 金属络合剂、 碳水化合物、 酸或缓冲剂和注射用水， 其 pH 值为 4.0-5.0， 该溶液稳定性 良好， 在冷冻干燥前可以存放较长时间， 为药物组合物的制备过程提供更大灵活性。
本发明提供一种冷冻干燥的二苯乙烯苷药物组合物， 其包括二苯乙烯苷、 亚硫酸 氢钠、 依地酸钙钠、 乳糖和能够将 pH 值调节到 4.0-5.0 的酸或缓冲剂。
本发明提供一种冷冻干燥的二苯乙烯苷药物组合物， 其包括二苯乙烯苷、 维生素 C、 依地酸钙钠、 乳糖和能够将 pH 值调节到 4.0-5.0 的酸或缓冲剂。
本发明还提供一种二苯乙烯苷药物组合物的制备方法中， 其包括将二苯乙烯苷、 抗氧化剂、 金属络合剂、 碳水化合物溶解在水中制成溶液， 通过酸或缓冲剂调节溶液的 pH 值至 4.0-5.0。本发明提供的二苯乙烯苷药物组合物的制备方法， 其还包括将溶液冷冻干 燥， 以生成冻干粉或冻干块的步骤。
当二苯乙烯苷与适当的碳水化合物、 抗氧化剂、 金属络合剂在水中制成溶液时， 可 以使用能充分溶解在注射用水中的任何固体状态的二苯乙烯苷， 如二苯乙烯苷粉末， 二苯 乙烯苷结晶等。
本发明的药物组合物可以制成单剂量给药的形式。一经冷冻干燥， 用任何药学上 可接受的塞子将装有本发明的药物组合物的容器封口， 便于运输使用。
当使用时， 可向容器中加入足量的稀释剂， 得到均匀的复溶溶液。 稀释剂可以使用 任何药学上可接受的组分， 包括注射用水、 葡萄糖溶液 ( 如 5％葡萄糖溶液 )、 氯化钠溶液 ( 如 0.9％氯化钠溶液 ) 或者一定浓度的低级醇水溶液 ( 如 10％的丙二醇溶液 )。复溶得 到的均匀溶液可与静脉滴注溶液 ( 如 0.9％氯化钠溶液， 5％葡萄糖溶液 ) 混合均匀， 供静脉 滴注使用。
由于二苯乙烯苷为多羟基酚化合物， 而酚类易于氧化是有机化学领域中众所周知
的。将二苯乙烯苷溶于水 (pH 约 7 左右 ) 或者弱碱性溶液中时， 酚羟基脱去质子， 更易于氧 化。 而本发明提供的二苯乙烯苷药物组合物， 其制备过程在酸性条件下进行， 将二苯乙烯苷 溶液的 pH 值调节至弱酸性， 低于其酚羟基的 pKa 值时， 虽然氧化反应会发生， 但是可将其降 低到最低的程度， 有助于进一步增加二苯乙烯苷的稳定性。
发明人经过多次试验出人意料地发现， 在 p H 值为 4.0-5.0 的二苯乙烯苷溶液中 加入抗氧剂和金属络合物以及碳水化合物， 如乳糖等， 能最大程度地使二苯乙烯苷溶液稳 定， 从而便于储存和运输。特别是冻干粉针剂更增加了存储过程的稳定性。
本发明所提供的含有二苯乙烯苷的药物组合物及其制备方法， 使二苯乙烯苷在固 体和液体状态下的稳定性都得到大大提高， 制得的产品可供静脉注射使用， 且制备方法方 便可行， 适合工业化生产， 使其在临床上的广泛应用成为可能。 具体实施方式
下列实施例的目的是更好的说明本发明的内容， 但并不意味着对本发明的内容进 行限制。
本发明中使用的二苯乙烯苷由申请人从中药材何首乌中提取分离制得， 二苯乙烯 苷的含量测定采用本领域公知的高效液相色谱法 (HPLC) 测定， 具体参考申请人已经公开 的专利申请 CN101255180。
实施例 1 碳水化合物对二苯乙烯苷药物组合物稳定性的影响
以二苯乙烯苷为活性成份 ( 含量 99.46％ ) 按如下方法制备 6 批二苯乙烯苷冻干 粉针。
二苯乙烯苷 5.0g， 亚硫酸氢钠 0.1g， 依地酸二钠 0.1g， 乳糖 50.0g， 溶于 500ml 注 射用水中， 形成均匀溶液。500ml 溶液均分为 5 等份， 即样 1 至样 5， 100ml/ 份， 样 1 不加 pH 调节剂盐酸， 样 2 至样 5 用 1N 盐酸调节 pH 值分别至 6.0， 5.0， 4.0， 3.0。
二苯乙烯苷 1.0g， 亚硫酸氢钠 0.02g， 依地酸二钠 0.02g， 溶于 100ml 注射用水中， 用 1N 盐酸调节 pH 值至 4.0， 为样 6。
将各批样品溶液分装入 10ml 西林瓶 (2ml/ 瓶 ) 中， 经冷冻干燥机冻干， 充氮气， 压 盖。
将制得的冻干样品在 40±2℃、 RH 75％ ±5％的条件下进行加速试验， 60 天后， 观 察样品性状， 并用 HPLC 分析样品， 结果见表 1。
表 1. 碳水化合物对二苯乙烯苷药物组合物稳定性的影响数据
由表 1 的数据可知， 乳糖对于增加二苯乙烯苷药物组合物的稳定性作用是很明显 的， 而且合适的 pH 值也能明显增加二苯乙烯苷药物组合物的稳定性， pH 值 4.0-5.0 为较合 适的条件， 以二苯乙烯苷、 亚硫酸氢钠， 依地酸二钠、 乳糖组成的药物组合物稳定性良好。
实施例 2pH 值对二苯乙烯苷药物组合物稳定性的影响
以二苯乙烯苷为活性成份 ( 含量 99.46％ )， 按如下方法制备 5 批二苯乙烯苷冻干 粉针。
二苯乙烯苷 5.0g， 亚硫酸氢钠 0.1g， 依地酸钙钠 0.1g， 甘露醇 30.0g， 溶于 500ml 注射用水中， 形成均匀溶液。500ml 溶液均分为 5 等份， 即样 1 至样 5， 100ml/ 份， 分别用 10％磷酸和 10％磷酸钠溶液调节 pH 值至 5.5， 5.0， 4.5， 4.0， 3.5。
将各批溶液分装入 10ml 西林瓶 (2ml/ 瓶 )， 经冷冻干燥机冻干， 充氮气， 压盖。
将制得的冻干样品在 40±2℃、 RH75％ ±5％条件下进行加速试验， 60 天后， 观察 样品性状， 并用 HPLC 分析样品， 结果见表 2。
表 2.pH 值对二苯乙烯苷药物组合物稳定性的影响数据
由表 2 的数据可知， pH 值 4.0-5.0 时样品稳定性较好， pH 值 4.0-4.5 为最优选的 条件， 以二苯乙烯苷、 亚硫酸氢钠， 依地酸钙钠、 甘露醇组成的药物组合物稳定性良好。
实施例 3 抗氧剂和金属络合物对二苯乙烯苷药物组合物稳定性的影响
以二苯乙烯苷为活性成份 ( 含量 99.46％ )， 按如下方法制备 4 批二苯乙烯苷冻干 粉针。
二苯乙烯苷 3.0g， 维生素 C 0.3g， 依地酸钙钠 0.3g， 乳糖 30.0g， 溶于 300ml 注射 用水中， 形成均匀溶液。300ml 溶液均分为 3 等份， 即样 1 至样 3， 100ml/ 份， 分别用 10％枸 橼酸和 10％枸橼酸钠溶液调节 pH 值至 5.0， 4.5， 4.0。
二苯乙烯苷 1.0g， 乳糖 10.0g， 溶于 100ml 注射用水中， 用 10％枸橼酸和 10％枸橼 酸钠溶液调节 pH 值至 4.5， 为样 4。
将各批溶液分装入 10ml 西林瓶 (2ml/ 瓶 )， 经冷冻干燥机冻干， 充氮气， 压盖。
将制得的冻干样品在 40±2℃、 RH 75％ ±5％条件下进行加速试验， 60 天后， 观察 样品性状， 并用 HPLC 分析样品， 结果见表 3。
表 3. 抗氧剂和金属络合物对二苯乙烯苷药物组合物稳定性的影响数据
由表 3 的结果可知， 同样条件下， pH 值 4.0-4.5 为最合适的条件， 而且维生素 C、 依 地酸钙钠联合使用能显著提高二苯乙烯苷药物组合物的稳定性， 由二苯乙烯苷、 维生素 C、 依地酸钙钠、 乳糖制备的药物组合物稳定性良好。
实施例 4 不同碳水化合物对二苯乙烯苷药物组合物稳定性的影响
以二苯乙烯苷为活性成份 ( 含量 99.72％ )， 按如下方法制备 8 批二苯乙烯苷冻干 粉针。
样 1-2 ： 二苯乙烯苷 2.0g， 维生素 C 0.2g， 依地酸钙钠 0.2g， 乳糖 18.0g， 溶于 200ml 注射用水中， 形成均匀溶液。200ml 溶液均分为 2 等份， 即 100ml/ 份， 用 10％枸橼酸 和 10％枸橼酸钠溶液调节 pH 值分别至 4.5， 4.0。
样 3-4 ： 二苯乙烯苷 2.0g， 维生素 C 0.2g， 依地酸钙钠 0.2g， 甘露醇 18.0g， 溶于 200ml 注射用水中， 形成均匀溶液。200ml 溶液均分为 2 等份， 即 100ml/ 份， 分别用 10％枸 橼酸和 10％枸橼酸钠溶液调节 pH 值分别至 4.5， 4.0。
样 5-6 ： 二苯乙烯苷 2.0g， 维生素 C 0.2g， 依地酸钙钠 0.2g， 羟乙基淀粉 18.0g， 溶 于 200ml 注射用水中， 形成均匀溶液。200ml 溶液均分为 2 等份， 即 100ml/ 份， 分别用 10％ 枸橼酸和 10％枸橼酸钠溶液调节 pH 值分别至 4.5， 4.0。
样 7-8 ： 二苯乙烯苷 2.0g， 维生素 C 0.2g， 依地酸钙钠 0.2g， 甘氨酸 18.0g， 溶于 200ml 注射用水中， 形成均匀溶液。200ml 溶液均分为 2 等份， 即 100ml/ 份， 分别用 10％枸 橼酸和 10％枸橼酸钠溶液调节 pH 值分别至 4.5， 4.0。
将各批溶液分装入 20ml 西林瓶 (5ml/ 瓶 )， 冷冻干燥机冻干， 充氮气， 压盖。
将制得的冻干样品在 40±2℃、 RH75％ ±5％条件下进行加速试验， 60 天后， 观察 样品性状， 并用 HPLC 分析样品， 结果见表 4。
表 4. 不同碳水化合物对二苯乙烯苷药物组合物稳定性的影响数据
由表 4 的数据可知， 乳糖、 甘露醇、 羟乙基淀粉、 甘氨酸都能起到提高二苯乙烯苷 组合物稳定性的作用， 同样条件下， 乳糖较甘露醇、 羟乙基淀粉、 甘氨酸为更合适的碳水化 合物， 在 pH 值 4.0-4.5 时， 用二苯乙烯苷、 维生素 C、 依地酸钙钠、 乳糖制得的药物组合物稳 定性良好。
实施例 5 二苯乙烯苷药物组合物复溶后的稳定性试验
取实施例 4 中制得的样 1， 分别用注射用水、 0.9 ％氯化钠溶液、 5 ％葡萄糖溶液、 10％丙二醇水溶液 2ml 溶解， 均得到无色透明澄清的溶液， 得到样 a、 b、 c、 d， 连续 48 小时取 样， 用 HPLC 检测样品中二苯乙烯苷的含量， 结果见表 5。
表 5. 二苯乙烯苷药物组合物复溶后的稳定性试验数据
表 5 的数据表明， 本发明的二苯乙烯苷冻干粉针剂， 分别用注射用水、 0.9％氯化 钠溶液、 5％葡萄糖溶液、 10％丙二醇水溶液稀释复溶后， 稳定性依旧良好， 适于临床使用。
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