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1、(10)申请公布号 CN 104262425 A (43)申请公布日 2015.01.07 CN 104262425 A (21)申请号 201410402940.3 (22)申请日 2014.08.15 C07H 15/256(2006.01) C07H 1/08(2006.01) (71)申请人 桂林莱茵生物科技股份有限公司 地址 541199 广西壮族自治区桂林市临桂县 西城南路秧塘工业园 (72)发明人 赵军 杨文国 李元元 罗勇为 黄华凤 (74)专利代理机构 北京轻创知识产权代理有限 公司 11212 代理人 杨立 (54) 发明名称 一种提取甜茶苷的新方法 (57) 摘要 本发明。
2、涉及一种提取甜茶苷的新方法， 包括 ： 原料粉碎、 溶剂提取、 膜浓缩、 离心、 调 pH 值、 大孔 树脂纯化、 碱酸处理、 洗脱、 浓缩、 复合离子交换树 脂层析、 浓缩、 结晶、 干燥后得到成品， 本方法能够 得到纯度 99的甜茶苷产品， 并且产品雪白， 无 苦味， 溶剂残留少， 无农药残留。同时本方法大大 减少了生产工序， 节约生产成本， 工艺稳定性好。 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 4 页 附图 1 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书4页 附图1页 (10)申请公布号 CN 104262425 A CN 104。
3、262425 A 1/1 页 2 1. 一种提取甜茶苷的新方法， 其特征在于， 包括 ： 1) 取甜茶叶干燥品， 粉碎到 10 目， 用纯水于 95浸提 2 次， 第一次加水量是甜茶叶原 料用量的 13 倍， 提取 2H 后分离出滤液备用， 滤渣加纯水继续浸提， 第二次加水量是甜茶叶 原料用量的 11 倍， 提取 2H 后分离出滤液， 合并两次提取的滤液， 得到总滤液 ； 2) 将总滤液过膜浓缩到甜茶叶原料用量的 5 倍量得浓缩液， 膜的参数为 ： 进溶液压力 0.9Mpa, 出溶液压力 0.45Mpa， 冷却浓缩液到 25， 用台式布袋离心进行高速和低速的组合 离心， 离心沉淀弃去， 离心液。
4、用酸调 pH 4-5， 搅拌均匀， 使 pH 值不变 ； 3) 将 2) 调好 pH 值的溶液进大孔树脂柱， 流出液用 0.5 3 w/w 的 NaOH 调 pH 7， 尝有甜味和检测甜茶苷含量 2为进柱终点， 进液完毕后， 首先用纯水洗柱， 洗至流出液 无色， 澄清， 再用碱液洗柱， 第三用纯水洗柱， 洗至流出液 pH 7， 第四用酸液洗柱， 最后用 水洗柱， 洗至流出液 pH 7 ； 4) 用 4 倍树脂柱体积的 48乙醇解吸， 流出液从有甜味和检测甜茶苷 2时开始收 集， 到无甜味和检测甜茶苷 7 时为止， 得洗脱液 ； 6)将洗脱液减压浓缩回收乙醇， 制成12波美度的稠膏， 加入稠膏4。
5、倍量的溶剂， 搅拌均 匀， 在 4下结晶 24H， 得晶体 ； 7)将晶体用80纯水溶解到固形物30， 100-200目过滤后， 取滤液喷雾干燥， 得到甜 茶苷。 2. 根据权利要求 1 所述的新方法， 其特征在于， 在 2) 中， 所述组合离心为先经 950R/ min 高速离心 1H 后， 再经 450r/min 低速离心 20 分钟。 3. 根据权利要求 1 所述的新方法， 其特征在于， 在 2) 中， 所述酸为 0.5 3 w/w 的 盐酸水溶液或 0.5 3 w/w 的硫酸水溶液。 4. 根据权利要求 1 所述的新方法， 其特征在于， 在 3) 中， 所述大孔树脂种类是 HP-20B。
6、、 ADS-7 或 X-6 树脂。 5. 根据权利要求 1 所述的新方法， 其特征在于， 在 3) 中， 所述碱液为 0.5 3 w/w 的氢氧化钠水溶液或 0.5 3 w/w 的氢氧化钾水溶液， 所述碱液的用量为 3 倍树脂柱重 量。 6. 根据权利要求 1 所述的新方法， 其特征在于， 在 3) 中， 所述酸液为 0.5 3 w/w 的盐酸水溶液或 0.5 3 w/w 的硫酸水溶液， 所述酸液的用量为 3 倍树脂柱重量。 7. 根据权利要求 1 所述的新方法， 其特征在于， 在 5) 中， 所述阴离子树脂种类是 700B 离子交换树脂或 700A 离子交换树脂， 所述阳离子树脂种类是 73。
7、2 离子交换树脂或 D204 离 子交换树脂。 8. 根据权利要求 1 所述的新方法， 其特征在于， 在 6) 中， 所述溶剂为甲醇、 乙醇、 丙酮、 乙酸乙酯中的一种， 上述溶剂均为分析纯。 权 利 要 求 书 CN 104262425 A 2 1/4 页 3 一种提取甜茶苷的新方法 技术领域 0001 本发明涉及一种提取甜茶苷的新方法， 属于化学领域。 背景技术 0002 甜茶为广西四大名品， 在广东、 湖南、 江西等省也有种植， 甜茶含有大量的生物类 黄铜， 具备普通绿茶的功效外， 同时还具有防治心血管疾病、 预防中风、 防癌作用、 预防牙齿 疾病等药效， 极高的药用价值。 0003 目。
8、前国内的大规模生产的甜茶的厂家很少， 主要还是受工艺复杂和操作的困难， 以及关键生产点不好控制影响。生产出来的产品都有苦味， 颜色不够白等问题。质量未能 达到高品质。 发明内容 0004 本发明所要解决的技术问题是提供一种提取甜茶苷的新方法， 本方法能够得到纯 度大于99的甜茶苷产品， 并且产品雪白， 无苦味， 溶剂残留少， 无农药残留。 同时本方法大 大减少了生产工序， 节约生产成本， 工艺稳定性好。 0005 本发明解决上述技术问题的技术方案如下 ： 一种提取甜茶苷的新方法， 包括 ： 0006 1) 取甜茶叶干燥品， 粉碎到 10 目， 用纯水于 95浸提 2 次， 第一次加水量是甜茶 。
9、叶原料用量的 13 倍， 提取 2H 后分离出滤液备用， 滤渣加纯水继续浸提， 第二次加水量是甜 茶叶原料用量的 11 倍， 提取 2H 后分离出滤液， 合并两次提取的滤液， 得到总滤液 ； 0007 2) 将总滤液过膜浓缩到甜茶叶原料用量的 5 倍量得浓缩液， 膜的参数为 ： 进溶液 压力0.9Mpa,出溶液压力0.45Mpa， 冷却浓缩液到25， 用台式布袋离心进行高速和低速的 组合离心， 离心沉淀弃去， 离心液用酸调 pH 4-5， 搅拌均匀， 使 pH 值不变 ； 0008 3) 将 2) 调好 pH 值的溶液进大孔树脂柱， 流出液用 0.5 3 w/w 的 NaOH 调 pH 7， 。
10、尝有甜味和检测甜茶苷含量 2为进柱终点， 进液完毕后， 首先用纯水洗柱， 洗至流 出液无色， 澄清， 再用碱液洗柱， 第三用纯水洗柱， 洗至流出液 pH 7， 第四用酸液洗柱， 最 后用水洗柱， 洗至流出液 pH 7 ； 0009 4)用4倍树脂柱体积的48乙醇解吸， 流出液从有甜味和检测甜茶苷2时开始 收集， 到无甜味和检测甜茶苷 7 时为止， 得洗脱液 ； 0011 6)将洗脱液减压浓缩回收乙醇， 制成12波美度的稠膏， 加入稠膏4倍量的溶剂， 搅 拌均匀， 在 4下结晶 24H， 得晶体 ； 0012 7)将晶体用80纯水溶解到固形物30(质量分数)， 100-200目过滤后， 取滤液 。
11、喷雾干燥， 得到甜茶苷。 说 明 书 CN 104262425 A 3 2/4 页 4 0013 在上述技术方案的基础上， 本发明还可以做如下改进。 0014 进一步， 在 2) 中， 所述组合离心为先经 950R/min 高速离心 1H 后， 再经 450r/min 低速离心 20 分钟。 0015 进一步， 在 2) 中， 所述酸为 0.5 3 w/w 的盐酸水溶液或 0.5 3 w/w 的 硫酸水溶液。 0016 进一步， 在 3) 中， 所述大孔树脂种类是 HP-20B、 ADS-7 或 X-6 树脂 ； 0017 进一步， 在 3) 中， 所述碱液为 0.5 3 w/w 的氢氧化钠水。
12、溶液或 0.5 3 w/w 的氢氧化钾水溶液， 所述碱液的用量为 3 倍树脂柱重量。 0018 进一步， 在 3) 中， 所述酸液为 0.5 3 w/w 的盐酸水溶液或 0.5 3 w/w 的硫酸水溶液， 所述酸液的用量为 3 倍树脂柱重量。 0019 进一步， 在 5) 中， 所述阴离子树脂种类是 700B 离子交换树脂或 700A 离子交换树 脂， 所述阳离子树脂种类是 732 离子交换树脂或 D204 离子交换树脂。 0020 进一步， 在 6) 中， 所述溶剂为甲醇、 乙醇、 丙酮、 乙酸乙酯中的一种， 上述溶剂均为 分析纯。 0021 本发明的有益效果是 ： 0022 本发明提供一种。
13、提取甜茶苷的新方法， 本方法工艺简单， 工序好控制， 生产成本 低， 甜茶苷的回收率高， 含量高， 生产出来的甜茶苷产品雪白， 无苦味， 甜度高， 解决了企业 规模化大生产的技术难点， 填补市场在 99甜茶苷高回收率这方面的空白。 附图说明 0023 图 1 为本发明实施例 1 制得产品的 HPLC 谱图 ； 0024 图 2 为本发明实施例 2 制得产品的 HPLC 谱图 ； 0025 图 3 为本发明实施例 3 制得产品的 HPLC 谱图 ； 具体实施方式 0026 以下对本发明的原理和特征进行描述， 所举实例只用于解释本发明， 并非用于限 定本发明的范围。 0027 实施例 1 0028。
14、 1) 取甜茶叶干燥品 100KG( 经 HPLC 检测甜茶苷的含量为 5.5 )， 粉碎到 10 目， 用纯水于 95浸提 2 次， 第一次加水量是甜茶叶原料用量的 1300L， 提取 2H 后分离出滤液 备用， 滤渣加纯水继续浸提， 第二次加水量是甜茶叶原料用量的 1100L， 提取 2H 后分离出滤 液， 合并两次提取的滤液， 得到总滤液 ； 0029 2) 将总滤液过膜浓缩到 500Kg， 膜的参数为 ： 进溶液压力 0.9Mpa, 出溶液压力 0.45Mpa， 倒出使浓缩液冷到 25， 用台式布袋离心进行高速和低速的组合离心， 所述组合 离心为先经 950R/min 高速离心 1H 。
15、后， 再经 450r/min 低速离心 20 分钟， 离心沉淀弃去， 离 心液用 0.5 w/w 的盐酸调 pH 4.1， 搅拌均匀， 使 pH 值不变 ； 0030 3) 将 2) 调好 pH 值的溶液进 300KG 大孔树脂柱 HP-20B， 流出液用 0.5 w/w 的 NaOH 调 pH 7， 尝有甜味和检测甜茶苷含量 2为进柱终点， 进液完毕后， 首先用纯水洗 柱， 洗至流出液无色， 澄清， 再用 0.5w/w氢氧化钠洗柱， 用量为 3 倍树脂柱重量， 第三用纯 说 明 书 CN 104262425 A 4 3/4 页 5 水洗柱， 洗至流出液 pH 7， 第四用 0.5w/w的盐酸。
16、洗柱， 用量为 3 倍树脂柱重量， 最后用 水洗柱， 洗至流出液 pH 7 ； 0031 4) 用 1200L48乙醇解吸， 流出液从有甜味和检测甜茶苷 2时开始收集， 到无 甜味和检测甜茶苷 7 时为止， 得 900L 洗脱 液 ； 0033 6) 将洗脱液减压浓缩回收乙醇， 制成 12 波美度的稠膏， 加入稠膏 4 倍量的乙醇 ( 分析纯 )， 搅拌均匀， 在 4下结晶 24H， 得晶体 ； 0034 7) 将晶体用 80纯水溶解到固形物 30， 100 目过滤后， 滤液喷雾干燥后得 5.312KG产品， 产品的HPLC谱图见图1， 其中， 甜茶苷的纯度为99.6， 原料中甜茶苷的回收 率。
17、为 96.2。 0035 实施例 2 0036 1) 取甜茶叶干燥品 200KG( 经 HPLC 检测甜茶苷的含量为 5.8 )， 粉碎到 10 目， 用纯水于 95浸提 2 次， 第一次加水量是甜茶叶原料用量的 2600L， 提取 2H 后分离出滤液 备用， 滤渣加纯水继续浸提， 第二次加水量是甜茶叶原料用量的 2200L， 提取 2H 后分离出滤 液， 合并两次提取的滤液， 得到总滤液 ； 0037 2) 将总滤液过膜浓缩到 1000L， 膜的参数为 ： 进溶液压力 0.9Mpa, 出溶液压力 0.45Mpa， 倒出使浓缩液冷到 25， 用台式布袋离心进行高速和低速的组合离心， 所述组合 。
18、离心为先经 950R/min 高速离心 1H 后， 再经 450r/min 低速离心 20 分钟， 离心沉淀弃去， 离 心液用 1.5 w/w 的盐酸调 pH 4.3， 搅拌均匀， 使 pH 值不变 ； 0038 3)将2)调好pH值的溶液进600KG大孔树脂柱ADS-7， 流出液用1.5w/w的NaOH 调 pH 7， 尝有甜味和检测甜茶苷含量 2为进柱终点， 进液完毕后， 首先用纯水洗柱， 洗 至流出液无色， 澄清， 再用 2.5w/w氢氧化钠洗柱， 用量为 3 倍树脂柱重量， 第三用纯水洗 柱， 洗至流出液 pH 7， 第四用 1.5w/w的盐酸洗柱， 用量为 3 倍树脂柱重量， 最后用。
19、水洗 柱， 洗至流出液 pH 7 ； 0039 4) 用 2400L48乙醇解吸， 流出液从有甜味和检测甜茶苷 2时开始收集， 到无 甜味和检测甜茶苷 7 时为止， 得 1500L 洗 脱液 ； 0041 6) 将洗脱液减压浓缩回收乙醇， 制成 12 波美度的稠膏， 加入稠膏 4 倍量的丙酮 ( 分析纯 )， 搅拌均匀， 在 4下结晶 24H， 得晶体 ； 0042 7) 将晶体用 80纯水溶解到固形物 30， 200 目过滤后， 取滤液喷雾干燥后得 11.4KG 产品， 产品的 HPLC 谱图见图 2， 其中， 甜茶苷的纯度为 99.5， 原料中甜茶苷的回收 率为 97.8。 0043 实施。
20、例 3 说 明 书 CN 104262425 A 5 4/4 页 6 0044 1) 取甜茶叶干燥品 200KG( 经 HPLC 检测甜茶苷的含量为 5.7 )， 粉碎到 10 目， 用纯水于 95浸提 2 次， 第一次加水量是甜茶叶原料用量的 2600L， 提取 2H 后分离出滤液 备用， 滤渣加纯水继续浸提， 第二次加水量是甜茶叶原料用量的 2200L， 提取 2H 后分离出滤 液， 合并两次提取的滤液， 得到总滤液 ； 0045 2) 将总滤液过膜浓缩到 1000L， 膜的参数为 ： 进溶液压力 0.9Mpa, 出溶液压力 0.45Mpa， 倒出使浓缩液冷到 25， 用台式布袋离心进行高。
21、速和低速的组合离心， 所述组合 离心为先经 950R/min 高速离心 1H 后， 再经 450r/min 低速离心 20 分钟， 离心沉淀弃去， 离 心液用 2.5 w/w 的盐酸调 pH 4， 搅拌均匀， 使 pH 值不变 ； 0046 3) 将 2) 调好 pH 值的溶液进 600KG 大孔树脂柱 X-6， 流出液用 2.5 w/w 的 NaOH 调 pH 7， 尝有甜味和检测甜茶苷含量 2为进柱终点， 进液完毕后， 首先用纯水洗柱， 洗 至流出液无色， 澄清， 再用 3w/w氢氧化钠洗柱， 用量为 3 倍树脂柱重量， 第三用纯水洗柱， 洗至流出液 pH 7， 第四用 3w/w的盐酸洗柱。
22、， 用量为 3 倍树脂柱重量， 最后用水洗柱， 洗 至流出液 pH 7 ； 0047 4) 用 2400L48乙醇解吸， 流出液从有甜味和检测甜茶苷 2时开始收集， 到无 甜味和检测甜茶苷 7 时为止， 得 1550L 洗 脱液 ； 0049 6) 将洗脱液减压浓缩回收乙醇， 制成 12 波美度的稠膏， 加入稠膏 4 倍量的乙酸乙 酯 ( 分析纯 )， 搅拌均匀， 在 4下结晶 24H， 得晶体 ； 0050 7) 将晶体用 80纯水溶解到固形物 30， 100 目过滤后， 滤液喷雾干燥后得 11.1KG 产品， 产品的 HPLC 谱图见图 3， 其中， 甜茶苷的纯度为 99.8， 原料中甜茶苷的回收 率为 97.2。 0051 以上所述仅为本发明的较佳实施例， 并不用以限制本发明， 凡在本发明的精神和 原则之内， 所作的任何修改、 等同替换、 改进等， 均应包含在本发明的保护范围之内。 说 明 书 CN 104262425 A 6 1/1 页 7 图 1 图 2 图 3 说 明 书 附 图 CN 104262425 A 7 。