用于压迫性尿失禁治疗的芳基偶氮-取代的咪唑 【发明领域】
本发明涉及一种已知化合物的新的应用。
【发明背景】
芳基偶氮-取代的咪唑是已知的。例如，US-A-4315003公开了下式的2-[(2-甲氧基苯基)偶氮]-1H-咪唑
其中X是H或卤素，及它们在水肿、低血压、心功能不全和黏膜hypermia中的治疗应用。Ohnishi et al，Arzneim.Forsch/DrugResearch 31(ii)：1425-1429，公开了这样一种化合物，即，2-[(5-氯-2甲氧基苯基)偶氮]-1H-咪唑。它被描述为一种产生直接的肾上腺素α刺激的拟交感神经药，且Ohnishi et al总结它具有对低血压疾病的潜在应用价值。
2-[(5-氯-2甲氧基苯基)偶氮]-1H-咪唑被普遍认为是一种非亚型选择性的α1肾上腺素能受体激动剂(此后称“α激动剂”，参见Tocriscatalogue 2001 of Tocris Cookson Ltd.，Bristol，UK，Table 1，page 20)。在该目录中，该化合物被称为一种高血压药(243页)，且作为一种研究工具可从Tocris购得。关于化合物的选择性的考虑是基于已公布的使用实验动物的研究。
α1激动剂通常引起平滑肌收缩并因而增加平滑肌紧张性，例如，在脉管中或下泌尿道中。α1受体通常分为4个亚型，它们是α1A、α1L(可能的一种相关受体)、α1B和α1D。在一个物种中，不同的组织可以显现一种特别的α1受体亚型的优势。还知道，在肾上腺素能的α1亚型的组织分布中有一种显著的种族依赖性。
对于压迫性尿失禁的临床治疗，需要有效的药物，它们对增加下泌尿道肌肉地紧张性有选择性，且对心血管系统没有相关作用。近期科学研究指出，这要在临床中实现，一种化合物需要对存在于下泌尿道(LUT)的α1A(和或1L)受体的选择性超过对α1B受体(存在于人的血管中)的选择性。非选择性的激动剂会有副作用(特别是心血管的)，由于α1B受体的激活，导致血管紧张性的增加和不希望有的血压的增高。
因为上面谈到的种族差异，普遍需要用人类组织的研究以观察一种化合物是否有效的对抗人LUT平滑肌且在此作用中，与对人的血管的作用相比，是否有选择性。就从已得到的数据能够或应该得出的任何一种结论来说，2-[(5-氯-2甲氧基苯基)偶氮]-1H-咪唑对人LUT组织的任何功效将与一种不希望有的血压升高相关联。
本发明的概要
使人吃惊地，现在发现2-[(5-氯-2甲氧基苯基)偶氮]-1H-咪唑具有所需要的选择性活性，因为它在增加人LUT紧张性方面是活跃的，同时在增加人动脉血管的紧张性方面非常不活跃。这些数据指出该化合物会对人类压迫性尿失禁的治疗有帮助。更普遍地说，根据本发明，具有肾上腺素能α刺激活性的芳基偶氮-取代的咪唑在压迫性尿失禁的治疗中是有帮助的。
本发明的说明
任何一种芳基偶氮-取代的咪唑可用于本发明中，假如它具有需要的活性。其肾上腺素能α刺激活性可以用已知的方法确定，且优选地，至少实质上是关于去甲肾上腺素的。此活性优选是2-[(5-氯-2甲氧基苯基)偶氮]-1H-咪唑显示活性的至少50％。
本发明中使用的优选药物具有上面所示式的一个或多个特征。最优选地，该化合物是2-[(5-氯-2-甲氧基苯基)偶氮]-1H-咪唑(X＝Cl)。
依靠本发明，人们的压迫性尿失禁能够被治疗，例如，被控制或防止。为此目的，该活性化合物可以被制备成任何合适的形式(与常规的稀释剂或载体一起)，例如，作为片剂或胶囊，或作为持续释放剂型。该活性化合物可以通过任何合适的途径给药，例如阴道内的给药(为此，可使用阴道药栓或环状装置)，且优选通过口服给药。
适合于口服的组合物包括片剂、锭剂、糖锭、水或油的混悬液、可分散的散剂或颗粒剂、乳剂、硬或软胶囊、糖浆剂和酏剂。合适的添加物包括甜味剂、增香剂、着色剂和防腐剂。片剂包含该活性成分和无毒的药学可接受的赋形剂，例如，惰性的稀释剂如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；粒化和崩解剂，例如玉米淀粉或褐藻酸；粘合剂例如淀粉、明胶或阿拉伯树胶，和润滑剂例如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石。片剂可以是无涂覆的，或可以是利用已知技术涂覆的以延迟在胃肠道内的崩解和吸收，且因而提供经历较长时期的持续作用。例如，时间延迟物质如硬脂酸甘油酯或甘油二硬脂酸酯可被使用。它们还可以是涂覆的，以形成用于控制释放的渗透性的治疗片剂。硬的明胶胶囊可包括一种惰性固体稀释剂，例如碳酸钙、磷酸钙或高岭土；软的明胶胶囊可包括水或一种油性介质，例如椰子油、液体石蜡或橄榄油。
技术人员能容易地确定将要给予的活性剂的量，其依赖于通常的因素，如给药频率、患者的年龄和病情、主诉的性质和程度、给药进度、联合用药等。典型的日剂量可以是0.1-1000，例如1-100mg。
现在将说明本发明所依据的资料。
测试系统
测定由对人LUT和血管平滑肌的激动剂效力组成。组织来源：经用于良性前列腺肥大的前列腺手术的经尿道的切除术，从患者得到的人下泌尿道平滑肌条(前列腺的/尿道的)。从因癌行肠切除术的患者得到的人肠系膜动脉(内部直径500-700μm)。组织保存于4℃ Kerbs-碳酸氢盐溶液中，自手术时间至用于功能实验不超过24小时。
方案
肠系膜动脉片段(长5mm)在以轻柔地擦拭去掉内皮后架在不锈钢镫之间。前列腺的/尿道的平滑肌条(3×10mm)和肠系膜动脉在1g静止拉力下架起在组合物(mM)(NaCl 118.4；KCl 4.7；CaCl2 1.9；NaHCO3 25.0；MgSO4 1.2；KH2PO4 1.2；葡萄糖11.7)的Krebs溶液中，通入含5％CO2的O2，并在37℃维持。所有组织发生的拉力利用等量的力传感器(Lectromed UF1 57G sensitivity)来测量，通过CambridgeElectronic Design 1401模拟-数字转换器用CHART软件记录于计算机。在开始给药前，组织用更换几次洗涤介质来平衡60分钟。所有实验在可卡因(10μM)和肾上腺酮(10μM)存在下操作，以防止药物的神经元的和神经元外的摄取，并要有propanolol(1μM)的存在，以阻断B肾上腺素受体。
激动剂反应
得到对2-[(5-氯-2-甲氧基苯基)偶氮]-1H-咪唑累积浓度-反应曲线和作为对比的去甲肾上腺素的累积浓度-反应曲线。
对于记录对去甲肾上腺素或2-[(5-氯-2-甲氧基苯基)偶氮]-1H-咪唑的最终药物反应后的LUT组织，加入100μM KCl以显示组织反应的最大能力。
对于记录对2-[(5-氯-2-甲氧基苯基)偶氮]-1H-咪唑的最终药物反应后的肠系膜动脉制备物，加入超大的浓度的去甲肾上腺素作为对部分激动作用的进一步测试。
数据分析
将发生的拉力的增加对激动剂绘图，且测定单独的EC50的值。从这些数据，对每个实验确定pEC50(EC50的负对数)值，并从中计算其适当的伴有这些均数的标准误差的均数值。
2-[(5-氯-2-甲氧基苯基)偶氮]-1H-咪唑对LUT(与去甲肾上腺素相比表现出完全的激动作用)组织有活性和对血管(与去甲肾上腺素相比表现出部分的激动作用)的较小活性。
对LUT，两药物都产生浓度-相关的拉力的增加，表明组织的收缩。去甲肾上腺素的pEC50为5.4±0.39，并产生等同于对100mM氯化钾的反应的63.7±4.8％的最大反应(n＝3)。2-[(5-氯-2-甲氧基苯基)偶氮]-1H-咪唑的pEC50为5.7，有同于对100mM氯化钾的反应的62.5％的最大反应。这些数据说明对于人LUT，2-[(5-氯-2-甲氧基苯基)偶氮]-1H-咪唑至少具有与去甲肾上腺素一样的有效，伴随相似的最大效应。
对于肠系膜动脉，两药物产生浓度-相关的拉力增加，表明组组的收缩。去甲肾上腺素的pEC50为6.18±0.32，伴平均最大收缩为4.22±2.21g(n＝10)。2-[(5-氯-2-甲氧基苯基)偶氮]-1H-咪唑的pEC50为5.3±0.1，伴平均最大收缩(发生于20微摩尔)为1.1±0.7g(n＝3)。在较高浓度2-[(5-氯-2-甲氧基苯基)偶氮]-1H-咪唑时没有进一步的平均拉力的增加发生。这些数据显示2-[(5-氯-2-甲氧基苯基)偶氮]-1H-咪唑弱于去甲肾上腺素对血管的作用，且具有非常低的最大效应，与2-[(5-氯-2-甲氧基苯基)偶氮]-1H-咪唑作为该组织的部分激动剂一致。进一步得到与去甲肾上腺素相比2-[(5-氯-2-甲氧基苯基)偶氮]-1H-咪唑是一种部分增进剂的证据。一旦给予了最高浓度的2-[(5-氯-2-甲氧基苯基)偶氮]-1H-咪唑并定义了最大效应，就向器官浴中加入已知能产生最大反应的一定浓度的去甲肾上腺素(160-210μM)。在全部实验例中，去甲肾上腺素产生拉力的另外的大的增加，伴平均再增加2.7±0.9g(n＝3)。