技术领域
本发明涉及一种芦丁衍生物及其制备方法，尤其涉及一种羟丁基芦丁衍生物及其制 备方法，属于医药领域。
背景技术
芦丁又名芸香甙、维生素P，具有降低毛细血管脆性，改善微循环的作用。可用于 治疗毛细血管脆性引起的出血症和高血压辅助治疗剂。
芦丁在水中的溶解性差(冷水中的溶解度为万分之一)，性质不稳定，暴露在空气 中会缓缓氧化，在碱性条件下更容易被氧化分解。因此，芦丁在临床上很少单独使用。 因此，芦丁进行化学结构改造受到重视，目前，已有芦丁衍生物-羟乙基芦丁(即曲克 芦丁)，羟乙基芦丁是预防和治疗心脑血管疾病常用的一种药物。具有防止血管通透性 异常升高，抑制红细胞和血小板凝结，改善微循环等作用。可用于闭塞性脑血管病、中 心性视网膜炎、动脉硬化、冠心病、梗塞前综合症、血栓性静脉炎等疾病。
但是，经检索，除羟乙基芦丁以外的芦丁衍生物，特别是羟丁基芦丁衍生物及其制 备，还未见报道。
发明内容
针对现有芦丁衍生物及其相关技术上的不足，本发明的目的是提供羟丁基芦丁衍生 物及其制备方法。
本发明涉及的羟丁基芦丁衍生物用下述通式(I)表示。
其中：R1是芸香糖；
R2是H或-CH3或-C2H5或-CH2CH2OH或-CH2CH(OH)CH3或-CH2CH(OH)CH2CH3或 -CH(CH3)CH(OH)CH3；
R3是H或-CH3或-C2H5或-CH2CH2OH或-CH2CH(OH)CH3或-CH2CH(OH)CH2CH3或 -CH(CH3)CH(OH)CH3；
R4是H或-CH3或-C2H5或-CH2CH2OH或-CH2CH(OH)CH3或-CH2CH(OH)CH2CH3或 -CH(CH3)CH(OH)CH3；
R5是H或-CH3或-C2H5或-CH2CH2OH或-CH2CH(OH)CH3或-CH2CH(OH)CH2CH3或 -CH(CH3)CH(OH)CH3；
且所述R2、R3、R4、R5中至少有一项是-CH2CH(OH)CH2CH3或-CH(CH3)CH(OH)CH3。
上述的化合物中：R1是芸香糖；R2、R3、R4、R5优选是H或-CH2CH(OH)CH2CH3或 -CH(CH3)CH(OH)CH3，且所述R2、R3、R4、R5中至少有一项是-CH2CH(OH)CH2CH3或 -CH(CH3)CH(OH)CH3。
上述的化合物中：R1是芸香糖；R2最优选是H；R3、R4、R5最优选是-CH2CH(OH)CH2CH3或-CH(CH3)CH(OH)CH3。
本发明涉及的羟丁基芦丁衍生物的制备方法，由以下步骤组成：
(1)芦丁或芦丁衍生物1份重量溶于1.0-50份重量pH值为9.0-12的碱性溶液中；
(2)加入0.5-30份重量的1，2-环氧丁烷或2，3-环氧丁烷，搅拌反应0.5-32小时；
(3)用酸中和至中性，得粗产品溶液；
(4)采用常规色谱、萃取、超滤、离子交换、电渗析、反渗透之一方法除去盐；
(5)经喷雾干燥或常规浓缩、真空干燥，得黄色或淡黄色粉状羟丁基芦丁衍生物。
其中：步骤(1)所述的芦丁衍生物是甲基-芦丁、乙基-芦丁、羟乙基-芦丁之一。
其中：步骤(1)所述的碱性溶液是NaOH、KOH、Na2CO3、K2CO3、NaH、Na之一的碱 溶于水、乙醇、吡啶、DMF(N，N-二甲基甲酰胺)之一的溶液。
其中：步骤(2)所述的环氧丁烷与芦丁或芦丁衍生物的配比不同，制得的羟丁基 芦丁及其衍生物的取代度不同；环氧丁烷与芦丁或芦丁衍生物的重量配比决定羟丁基芦 丁及其衍生物的取代度。
其中：步骤(2)所述环氧丁烷与芦丁或芦丁衍生物的重量配比优选是0.10～0.60 ∶1。
其中：步骤(3)所述的酸是盐酸、硫酸、磷酸、醋酸之一。
其中：步骤(4)所述除去盐的方法优选采用常规色谱或离子交换法。
其中，步骤(4)所述色谱法的色谱柱优选是硅胶色谱、凝胶色谱、聚酰胺色谱、 反向硅胶色谱之一。
其中，步骤(4)所述的萃取优选萃取剂是正丁醇、乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷、 乙醚之一。
其中，步骤(4)所述的超滤优选是非对称超滤膜。
其中，步骤(4)所述的离子交换取优选是弱酸性阳离子交换树脂和强碱性阴离子 交换树脂。
其中，步骤(4)所述的电渗析优选是阳膜：磺酸基阳离子交换树脂膜；阴膜：胺 基阴离子交换树脂膜。
利用本发明的方法得到的羟丁基芦丁衍生物经实验证明：具有芦丁的生物活性，具 有良好的水溶性和稳定性，可用作预防和治疗心脑血管疾病等的药物，也可用于保健品、 功能性食品等领域，具有广泛的市场开发前景。
本发明涉及的羟丁基芦丁衍生物的制备方法简便、实用、产率高、成本低，且易于 实现工业化生产。
附图说明
图1羟丁基芦丁薄层色谱图
其中：1为芦丁，2为羟丁基芦丁。
图2羟丁基芦丁高效液相色谱图
具体实施方式
实施例1
在500mL的烧瓶中，加5.5gNaOH，250mL水，搅拌溶解。之后加入45g芦丁，并搅 拌1.0小时。在搅拌下滴加26mL1，2-环氧丁烷，再继续反应30小时。用2mol/L的盐酸 中和反应液至中性，并用离子交换树脂脱盐，再经减压(20kPa)、加热(70℃)浓缩、喷 雾干燥(不高于80℃)，得34.6g羟丁基芦丁。
实施例2
在250mL的烧瓶中，加2.5gNaH，200mL DMF，搅拌溶解。之后加入13g部分甲基化 的芦丁，搅拌至溶解。在搅拌下滴加7mL1，2-环氧丁烷，再继续反应24小时。用1mol/L 的硫酸中和反应液至中性，经减压浓缩，并用凝胶色谱柱脱盐、脱DMF，真空(20kPa) 干燥，得8.3g含羟丁基组分的甲基-芦丁。
实施例3
在250mL的烧瓶中，加1.5gKOH，100mL水，搅拌溶解。之后加入6g部分乙基化的 芦丁，搅拌至溶解。在搅拌下滴加3mL2，3-环氧丁烷，再继续反应12小时。用2mol/L 的醋酸中和反应液至中性，经正丁醇萃取除水相，正丁醇相减压(5kPa)加热(低于80 ℃)回收正丁醇，再经真空干燥，得4.2g含羟丁基组分的乙基-芦丁。
实施例4
在250mL的烧瓶中，加0.5gNa2CO3，50mL吡啶，搅拌溶解。之后加入4.2g部分羟 乙基化的芦丁，搅拌至溶解。在搅拌下滴加2.2mL2，3-环氧丁烷，再继续反应8小时。 用1mol/L的磷酸中和反应液至中性，经电渗析脱盐，减压加热(70℃)浓缩后喷雾干燥， 可得3.2g含羟丁基组分的芦丁。
实施例5
在100mL的烧瓶中，加0.5g K2CO3，30mL水，搅拌溶解。之后加入2.2g部分羟丙 基化的芦丁，搅拌至溶解。在搅拌下滴加0.8mL1，2-环氧丁烷，再继续反应3小时。用 1mol/L的盐酸中和反应液至中性，经非对称超滤膜脱盐，减压加热(70℃)浓缩， 真空干燥，可得1.3g含羟丁基组分的芦丁。
实施例6
本例借助TLC(薄层色谱)和HPLC(高效液相色谱仪)表征羟丁基芦丁。
取实施例1制备的羟丁基芦丁，用甲醇溶解，展开剂为氯仿∶甲醇＝5∶1，在聚酰胺薄 膜上展开，显色剂为AlCl3，呈黄色荧光斑点，Rf值为0.68(见图1，其中：2为羟丁基 芦丁，1为芦丁)。
取实施例1制备的羟丁基芦丁进行高效液相色谱仪测定(Agilent 1100，DAD检测器) 结果见图2。