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1、(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201410673824.5 (22)申请日 2014.11.24 C12N 1/04(2006.01) (71)申请人 雷印平 地址 271600 山东省泰安市肥城市孙伯镇泰 东路 16 号 1 号楼 6102 (72)发明人 雷印平 (54) 发明名称 半固体琼脂穿刺菌种保存法 (57) 摘要 本发明公开了一种半固体琼脂穿刺菌种保存 法， 包含有如下步骤 ：（1） 制作半固体培养基 ；（2） 将细菌培养物用穿刺接种法接种于半固体培养基 内， 在37摄氏度下培养18-24小时后， 加一层无菌 液体石蜡， 厚度为 0.5-2cm， 放于 。
2、4 摄氏度的冰箱 中保存， 一般可保存 3-6 个月。本发明其操作简 便， 不需要特殊设备， 效果较好。 (51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书2页 CN 105695331 A 2016.06.22 CN 105695331 A 1/1 页 2 1. 一种半固体琼脂穿刺菌种保存法， 其特征在于 ： 包含有如下步骤 ： （1） 制作半固体培养基 ； （2） 将细菌培养物用穿刺接种法接种于半固体培养基内， 在37度下培养18-24小时后， 加一层无菌液体石蜡， 厚度为 0.5-2cm， 放于 4 度的冰箱中保存， 一般可保存 3。
3、-6 个月。 2. 根据权利要求 1 所述的一种半固体琼脂穿刺菌种保存法， 其特征在于 ： 所述半固体 培养基采用 PDA 培养基的制作方法。 3. 根据权利要求 1 所述的一种半固体琼脂穿刺菌种保存法， 其特征在于 ： 加无菌液体 石蜡前， 细菌的生长程度为 10CFU。 权 利 要 求 书 CN 105695331 A 2 1/2 页 3 半固体琼脂穿刺菌种保存法 技术领域 0001 本发明涉及菌种保存领域， 具体为一种半固体琼脂穿刺菌种保存法。 背景技术 0002 菌种是微生物学实验教学中一个必不可少的实验用物， 离开它微生物学实验就无 法开展。 因此， 实验室长期保存有各种教学常用的菌。
4、种， 但是这些菌种因受到外界环境及自 身代谢的影响， 如细菌在培养基上移种 3 次后， 其形态、 菌落、 毒力等均易发生变异， 而成为 不典型的菌株甚至死亡。因此， 保存菌种时要针对不同的菌种选用不同的培养基及不同的 保存方法， 使菌种的保存时间延长， 并且其主要的生物学性状基本无改变， 以用于微生物学 的实验教学。 发明内容 0003 本发明针对以上不足之处， 提供了一种半固体琼脂穿刺菌种保存法， 其操作简便， 不需要特殊设备， 效果较好。 0004 本发明解决其技术问题所采用的技术方案是 ： 一种半固体琼脂穿刺菌种保存法， 包含有如下步骤 ： （1） 制作半固体培养基 ； （2） 将细菌培。
5、养物用穿刺接种法接种于半固体培养基内， 在37度下培养18-24小时后， 加一层无菌液体石蜡， 厚度为 0.5-2cm， 放于 4 度的冰箱中保存， 一般可保存 3-6 个月。 0005 所述半固体培养基采用 PDA 培养基的制作方法。 0006 进一步的， 加无菌液体石蜡前， 细菌的生长程度为 10CFU。 0007 本发明的有益效果是 ： 此法可用于所有抵抗力较强， 对营养要求不高的菌种 （如金 黄色葡萄球菌、 大肠埃希菌、 志贺菌、 沙门菌、 霍乱弧菌、 变形杆菌、 铜绿假单胞菌等， 其操作 简便， 不需要特殊设备， 效果较好。 具体实施方式 0008 实施例 1 一种半固体琼脂穿刺菌种。
6、保存法， 包含有如下步骤 ： （1） 制作半固体培养基， 采用 PDA 培养基的制作方法 ； （2） 将细菌培养物用穿刺接种法接种于半固体培养基内， 在 37 度下培养 18 小时后， 待 细菌的生长程度为 10CFU 时， 加一层无菌液体石蜡， 厚度为 0.5cm， 放于 4 度的冰箱中保存， 一般可保存 3 个月。 0009 实施例 2 一种半固体琼脂穿刺菌种保存法， 包含有如下步骤 ： （1） 制作半固体培养基， 采用 PDA 培养基的制作方法 ； （2） 将细菌培养物用穿刺接种法接种于半固体培养基内， 在 37 度下培养 24 小时后， 待 说 明 书 CN 105695331 A 3 2/2 页 4 细菌的生长程度为 10CFU 时， 加一层无菌液体石蜡， 厚度为 2cm， 放于 4 度的冰箱中保存， 一 般可保存 6 个月。 0010 实施例 3 一种半固体琼脂穿刺菌种保存法， 包含有如下步骤 ： （1） 制作半固体培养基， 采用 PDA 培养基的制作方法 ； （2） 将细菌培养物用穿刺接种法接种于半固体培养基内， 在 37 度下培养 21 小时后， 待 细菌的生长程度为 10CFU 时， 加一层无菌液体石蜡， 厚度为 1cm， 放于 4 度的冰箱中保存， 一 般可保存 5 个月。 说 明 书 CN 105695331 A 4 。