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1、10申请公布号CN104069142A43申请公布日20141001CN104069142A21申请号201410314334622申请日20140704A61K36/195200601A61K36/315200601A61P31/16200601A61P31/1420060171申请人河北万通金牛药业有限公司地址073000河北省保定市定州市兴华中路25号72发明人郝秋实郝炳水74专利代理机构石家庄新世纪专利商标事务所有限公司13100代理人杨钦祥董金国54发明名称生物催化法提高板蓝根浸膏中有效成分表告依春含量的方法57摘要本发明公开了一种生物催化法提高板蓝根浸膏中有效成分表告依春含量的方法。
2、，其采用了三酶法，即纤维素酶、蛋白酶和淀粉酶，使板蓝根浸膏中有效成分表告依春的含量较传统的水提醇沉法提高了一倍以上，出膏率也有大幅提高。51INTCL权利要求书1页说明书4页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书4页10申请公布号CN104069142ACN104069142A1/1页21一种生物催化法提高板蓝根浸膏中有效成分表告依春含量的方法，其特征在于包括如下步骤（1）取板蓝根饮片，加水浸润；（2）加入纤维素酶和蛋白酶进行酶解；（3）加热煎煮灭活，过滤；（4）滤渣加水煎煮，过滤；（5）合并步骤（3）和（4）的滤液，加入淀粉酶进行液化，再加热灭活，过滤，将滤液浓。
3、缩成浸膏即得。2根据权利要求1所述的一种生物催化法提高板蓝根浸膏中有效成分表告依春含量的方法，其特征在于步骤（1）中加入所述板蓝根饮片8倍质量的水浸润1小时。3根据权利要求1所述的一种生物催化法提高板蓝根浸膏中有效成分表告依春含量的方法，其特征在于步骤（2）的具体步骤为加热至3050，调PH值2560，以板蓝根饮片的质量计，分别按1050U/G和510U/G加入纤维素酶和蛋白酶，恒温搅拌，酶解3090分钟。4根据权利要求3所述的一种生物催化法提高板蓝根浸膏中有效成分表告依春含量的方法，其特征在于步骤（2）中加热至4050，调PH值3550。5根据权利要求1所述的一种生物催化法提高板蓝根浸膏中有。
4、效成分表告依春含量的方法，其特征在于步骤（3）中是在100下煎煮灭活1小时。6根据权利要求1所述的一种生物催化法提高板蓝根浸膏中有效成分表告依春含量的方法，其特征在于步骤（4）中加入所述板蓝根饮片6倍质量的水在100下煎煮1小时。7根据权利要求1所述的一种生物催化法提高板蓝根浸膏中有效成分表告依春含量的方法，其特征在于步骤（5）的具体步骤为合并步骤（3）和（4）的滤液，加热至5075，调PH值5575，以板蓝根饮片的质量计，按68U/G加入淀粉酶，液化1小时，再加热至100灭活1020分钟，过滤，将滤液浓缩至相对密度为106110，过滤，将滤液在10冷置1524小时，取上清液，再次过滤后浓缩至。
5、相对密度为125135的浸膏。8根据权利要求7所述的一种生物催化法提高板蓝根浸膏中有效成分表告依春含量的方法，其特征在于步骤（5）中加热至6070，调PH值6070，所述淀粉酶为中温淀粉酶、高温淀粉酶或淀粉酶。9根据权利要求8所述的一种生物催化法提高板蓝根浸膏中有效成分表告依春含量的方法，其特征在于所述淀粉酶为中温淀粉酶。权利要求书CN104069142A1/4页3生物催化法提高板蓝根浸膏中有效成分表告依春含量的方法技术领域0001本发明涉及中药提取领域，具体涉及一种生物催化法提高板蓝根浸膏中有效成分表告依春含量的方法。技术背景0002众所周知，板蓝根是我国传统治疗病毒性感冒及腮腺炎的理想药物。
6、，板蓝根性寒，味苦，具有清热、解毒、凉血、利咽之功效，为中药的广谱抗菌药。过去认为靛蓝、靛玉红等成分为其抗病毒的有效成分，但现在的研究表明，靛蓝、靛玉红没有抗病毒活性，抗病毒作用的有效部位为总生物碱，其中表告依春是板蓝根体内产生的含硫生物碱，其为板蓝根抗流感的主要成分之一。见文献1板蓝根抗病毒有效成分研究进展中医药信息2005年第22卷第5期PAGES37402板蓝根抗病毒物质基础研究思路中草药第39卷第4期PAGES616618；3板蓝根不同提取物中抗病毒成分表告依春在大鼠体内的药代动力学中国科技大学学报第37卷第6期PAGES519522；4板蓝根总生物碱中表告依春在发热大鼠体内的药动学药。
7、效学结合模型研究中草药第38卷第10期PAGES15141519等。故表告依春的含量，是反映板蓝根质量的一个重要指标。0003目前板蓝根制剂多采用板蓝根浸膏制成，而板蓝根浸膏一般是将板蓝根饮片用水提醇沉的方法进行提取制得，用该方法得到的板蓝根浸膏，抗病毒成分表告依春的含量不够理想，从而影响板蓝根制剂的治疗作用。发明内容0004本发明所要解决的技术问题是提供一种生物催化法提高板蓝根浸膏中有效成分表告依春含量的方法。0005本发明解决上述技术问题采取的技术方案一种生物催化法提高板蓝根浸膏中有效成分表告依春含量的方法，包括如下步骤（1）取板蓝根饮片，加水浸润；（2）加入纤维素酶和蛋白酶进行酶解；（3。
8、）加热煎煮灭活，过滤；（4）滤渣加水煎煮，过滤；（5）合并步骤（3）和（4）的滤液，加入淀粉酶进行液化，再加热灭活，过滤，将滤液浓缩成浸膏即得。0006其中，步骤（1）中加入所述板蓝根饮片8倍质量的水浸润1小时；步骤（2）的具体步骤为加热至3050，调PH值2560，以板蓝根饮片的质量计，分别按1050U/G和510U/G加入纤维素酶和蛋白酶，恒温搅拌，酶解3090分钟；优选加热至4050，调PH值3550；说明书CN104069142A2/4页4步骤（3）中是在100下煎煮灭活1小时；步骤（4）中加入所述板蓝根饮片6倍质量的水在100下煎煮1小时；步骤（5）的具体步骤为合并步骤（3）和（4）。
9、的滤液，加热至5075，调PH值5575，以板蓝根饮片的质量计，按68U/G加入淀粉酶，液化1小时，再加热至100灭活1020分钟，过滤，将滤液浓缩至相对密度为106110，过滤，将滤液在10冷置1524小时，取上清液，再次过滤后浓缩至相对密度为125135的浸膏。0007优选地，步骤（5）中加热至6070，调PH值6070，所述淀粉酶为中温淀粉酶、高温淀粉酶或淀粉酶，优选中温淀粉酶。0008本发明创造性地将纤维素酶、蛋白酶和淀粉酶应用到板蓝根浸膏的提取工艺中，方法工艺简单，易于操作，用料价廉易得，得到的板蓝根浸膏中有效成分表告依春的含量较传统的水提醇沉法提高了一倍以上，出膏率也有大幅提高。药。
10、代动力学研究发现，表告依春单体的口服生物利用度明显高于板蓝根总提取物，因此用本发明得到的板蓝根浸膏制成的板蓝根制剂，其抗病毒作用要明显优于传统板蓝根浸膏制剂。具体实施方式0009下面用具体实施例对本发明的技术方案做进一步说明。0010实施例1取板蓝根饮片100KG，投料至提取罐内，加水800L浸润1小时，加热至45，用碳酸钠和醋酸调PH值为45，加入纤维素酶（购于山东泰安信得利生物工程有限公司，食品级，100000U/ML）3106U，加入蛋白酶（购于山东泰安信得利生物工程有限公司，食品级，50000U/ML）8105U，恒温，搅拌，酶解1小时，继续加热至100煎煮（灭活）1小时，滤过，出药汁。
11、；加水600L，100煎煮1小时，滤过，出药汁。合并两次药汁至双效浓缩罐，调温至70，用碳酸钠和醋酸调PH值为65，加入中温淀粉酶（购于山东省安丘市酶制剂厂，食品级，2000U/ML）8105U，液化1小时，加热至100，灭活10分钟，浓缩至相对密度为108，滤过，得药液160KG，冷置16小时，提取上清液，浓缩至相对密度127（20测），收得浸膏566KG，出膏率为566，溶化性合格，测得表告依春含量0171。0011实施例2取板蓝根饮片100KG，投料至提取罐内，加水800L浸润1小时，加热至40，用碳酸钠和醋酸调PH值为6，加入纤维素酶（购于山东泰安信得利生物工程有限公司，食品级，100。
12、000U/ML）1106U，加入蛋白酶（购于山东泰安信得利生物工程有限公司，食品级，50000U/ML）10105U，恒温，搅拌，酶解1小时，继续加热至100煎煮（灭活）1小时，滤过，出药汁；加水600L，100煎煮1小时，滤过，出药汁。合并两次药汁至双效浓缩罐，调温至60，用碳酸钠和醋酸调PH值为6，加入中温淀粉酶（购于山东省安丘市酶制剂厂，食品级，2000U/ML）7105U，液化1小时，加热至100，灭活20分钟，滤过，将滤液浓缩至相对密度134（20测），收得浸膏547KG，出膏率为547，溶化性合格，测得表告依春含量0169。0012实施例3取板蓝根饮片100KG，投料至提取罐内，加。
13、水800L浸润1小时，加热至30，用碳酸钠和醋酸调PH值为35，加入纤维素酶（购于山东泰安信得利生物工程有限公司，食品说明书CN104069142A3/4页5级，100000U/ML）5106U，加入蛋白酶（购于山东泰安信得利生物工程有限公司，食品级，50000U/ML）5105U，恒温，搅拌，酶解1小时，继续加热至100煎煮（灭活）1小时，滤过，出药汁；加水600L，100煎煮1小时，滤过，出药汁。合并两次药汁至双效浓缩罐，调温至65，用碳酸钠和醋酸调PH值为7，加入中温淀粉酶（购于山东省安丘市酶制剂厂，食品级，2000U/ML）6105U，液化1小时，加热至100，灭活15分钟，浓缩至相对。
14、密度为110，滤过，得药液160KG，冷置20小时，提取上清液，浓缩至相对密度132（20测），收得浸膏55KG，出膏率为55，溶化性合格，测得表告依春含量017。0013实施例4取板蓝根饮片100KG，投料至提取罐内，加水800L浸润1小时，加热至45，用碳酸钠和醋酸调PH值为5，加入纤维素酶（购于山东泰安信得利生物工程有限公司，食品级，100000U/ML）4106U，加入蛋白酶（购于山东泰安信得利生物工程有限公司，食品级，50000U/ML）7105U，恒温，搅拌，酶解1小时，继续加热至100煎煮（灭活）1小时，滤过，出药汁；加水600L，100煎煮1小时，滤过，出药汁。合并两次药汁至双。
15、效浓缩罐，调温至50，用碳酸钠和醋酸调PH值为75，加入中温淀粉酶（购于山东省安丘市酶制剂厂，食品级，2000U/ML）6105U，液化1小时，加热至100，灭活15分钟，浓缩至相对密度为106，滤过，得药液172KG，冷置24小时，提取上清液，浓缩至相对密度1314（20测），收得浸膏554KG，出膏率为554，溶化性合格，测得表告依春含量0169。0014实施例5取板蓝根饮片100KG，投料至提取罐内，加水800L浸润1小时，加热至50，用碳酸钠和醋酸调PH值为25，加入纤维素酶（购于山东泰安信得利生物工程有限公司，食品级，100000U/ML）3106U，加入蛋白酶（购于山东泰安信得利生。
16、物工程有限公司，食品级，50000U/ML）8105U，恒温，搅拌，酶解1小时，继续加热至100煎煮（灭活）1小时，滤过，出药汁；加水600L，100煎煮1小时，滤过，出药汁。合并两次药汁至双效浓缩罐，调温至70，用碳酸钠和醋酸调PH值为55，加入中温淀粉酶（购于山东省安丘市酶制剂厂，食品级，2000U/ML）8105U，液化1小时，加热至100，灭活10分钟，浓缩至相对密度为108，滤过，得药液160KG，冷置16小时，提取上清液，浓缩至相对密度127（20测），收得浸膏56KG，出膏率为56，溶化性合格，测得表告依春含量0168。0015实施例6本实施例选用高温淀粉酶（购于山东省安丘市酶制。
17、剂厂，食品级，20000U/ML），其他条件同实施例1，制得相对密度为127的浸膏545KG，出膏率545，溶化性合格，表告依春含量0169。0016实施例7本实施例选用淀粉酶，其他条件同实施例1，制得相对密度为127的浸膏396KG，出膏率396，溶化性合格，表告依春含量0142。0017对比例1取板蓝根饮片100KG，投料至提取罐内，加水800L浸润1小时，加热至100煎煮2小时，滤过，出药汁；加水600L，100煎煮1小时，滤过，出药汁。合并两次药汁，浓缩至相对密度为120（50下测得），重160KG，放至室温，加乙醇使含醇量60，10冷置24小时，提取上清液，浓缩至相对密度125（20测），收得流浸膏232KG，出膏率为232，溶化性合说明书CN104069142A4/4页6格，测得表告依春含量0061。说明书CN104069142A。