β-肾上腺素能兴奋剂 本发明涉及下述通式(I)的一些化合物，这些化合物是β-肾上腺素能受体兴奋剂，因此，它们可作为降血糖和抗肥胖药物。本发明还涉及该化合物的使用方法以及含有该化合物的药物组合物。本发明的化合物还具有增加可食用性动物，即蹄行动物和家禽，的瘦肉积蓄和/或改善瘦肉与脂肪比率的作用。
本发明的化合物还具有治疗肠蠕动失调、抑郁症、前列腺疾病、异常脂质血症(dyslipidemia)、和气管炎病变如哮喘和阻塞性肺病的用途。
糖尿病这种疾病的特征是碳水化合物的产生和利用出现代谢性缺陷，结果导致不能维持合适的血糖浓度。这种缺陷的结果是升高血中的葡萄糖或血糖过高。对糖尿病治疗的研究一直集中在设法使空腹和饭后血中葡萄糖的含量正常。目前的治疗方法包括给予外原性胰岛素，口服药物和控制饮食疗法。
糖尿病被分为两种主要类型。I型糖尿病，或胰岛素依赖性糖尿病，是胰岛素调节碳水化合物利用的激素的绝对缺乏所致。II型糖尿病，或非胰岛素依赖性糖尿病，经常出现在胰岛素水平正常或甚至升高的情况下，并且是组织不能对胰岛素作出适当反应的结果。绝大多数II型糖尿病也是肥胖症。
本发明的化合物及其药学上的活性盐在对有高血糖和糖尿病地哺乳动物口服给药时可有效的降低血中葡萄糖含量。
当口服给哺乳动物给药时，本发明的化合物还可以减少体重或降低体重的增加。这些化合物能够对体重增加产生影响是由于激活了能刺激脂肪组织代谢的β-肾上腺素能受体。
β-肾上腺素能受体被分成β1、β2和β3亚型。β受体的兴奋剂促进了腺苷酸环化酶的激活。β1-受体的激活可以引起心率的增加，而β2-受体的激活可以引起骨骼肌组织的松弛，从而导致血压下降和平滑肌开始震颤。已知β3-受体的激活可以激发脂肪分解(脂肪组织甘油三酯分解为甘油和游离脂肪酸)和代谢速度(能量消耗)，并且从而促进脂肪组织的减少。因此，能激活β-受体的化合物可以用作抗肥胖药，并且还可以用来增加可食用性动物的瘦肉量。另外，作为β3-受体兴奋剂的化合物具有降血糖或抗糖尿病的活性，但是这种作用的机理尚不清楚。
直到最近才发现β3-肾上腺素能受体主要存在于脂肪组织中。β3-受体目前被认为存在于肠(J.Clin.Invest.，91，344(1993))和脑组织(Eur.J.pharm.，219，193(1992))这些不同组织中。刺激β3-受体已证实可以引起结肠、气管和支气管中的平滑肌松弛(LifeSciences，44(19)，1411(1989)；Br.J.Pharm.，112，55(1994)；Br.J.Pharmacol.，110，1311(1993)。例如，已发现刺激β3-受体可以引起组织胺收缩的豚鼠回肠的松弛(J.Pharm.Exp.Thr.，260，1，192(1992)。
在人的前列腺中也表达β3-受体。由于刺激β3-受体可以引起那些已表明表达β3-受体的平滑肌(如，肠)的松弛，本领域的普通技术人员可以预料到也能松弛前列腺平滑肌。因此，β3-兴奋剂可以用来治疗或预防前列腺疾病。
1992年12月2日公开的欧洲专利公开说明书516，349是指具有抗肥胖、降血糖和相关用途的一些2-羟苯乙基胺类。
美国专利4,358,455涉及通式为Het-CHOH-CH2-NH-芳烷基的一些杂环化合物，可用于治疗青光眼和心血管疾病。
美国专利5,030,640涉及一些α-杂环乙醇氨基烷基吲哚，可用作生长促进剂，支气管扩张药，抗抑郁药和抗肥胖药。
美国专利5,019,578涉及用作生长促进剂的一些α-杂环乙醇胺。
本发明涉及具有通式I的化合物，其药用前药，这些化合物和其前药的药用盐，
其中：
R1，R2，R4和R5分别是氢或(C1-C6)烷基；
R3，R6和R7分别是氢，卤素，(C1-C6)烷基，硝基，氰基，三氟甲基，SO2R8，SO2NR9R10，NR9R10，COR11，CO2R9，(C1-C6)烷氧基，NR9SO2R8，NR9COR11，NR9CO2R9或OR9；
R8分别是(C1-C6)烷基或(C1-C6)烷氧基(C1-C6)烷基；
R9和R10分别是氢，(C1-C6)烷基，(C3-C8)环烷基，或(C1-C6)烷氧基(C1-C6)烷基；
R11分别是氢，(C1-C6)烷基，NR9R10，(C3-C8)环烷基，或(C1-C6)烷氧基(C1-C6)烷基，其中R9和R10的定义如上；
W是N，CH，或当R3连接到W上时，是CR3，其中R3除可以是氢外，还可以是上述R3所列举的任何值；
X和Y分别是一种直链(即，共价键)，氧，硫，或NR1，其中R1定义如上；
Z是(CH2)mOR9，(CH2)nCO2H，(CH2)nCOR11，(CH2)nSO2NR9R10，(CH2)n-NR9SO2R8，(CH2)nP(O)(OR1)(OR2)，(CH2)n-O-(CH2)mCO2H，(CH2)n-O-(CH2)mCOR11，(CH2)n-O-(CH2)mP(O)(OR1)(OR2)，(CH2)n-O-(CH2)mSO2NR9R10，或(CH2)n-O-(CH2)m-NR9SO2R8，其中R1，R2，R8，R9，R10和R11的定义同上。
m是1至6；
n是0至6，但如果Y是O或S，则n不是0。根据本发明的化合物是β-肾上腺素能受体兴奋剂。一般来说，那些Y-Z基团末端是游离羧酸(COOH)基团的化合物构成优选的亚组，因为它们是β3-亚型肾上腺素能受体的选择性兴奋剂。对β3-亚型的选择性是需要的，因为这种选择性可以减少或避免不需要的β1-和/或β2-兴奋作用，如增加心率，平滑肌震颤，和降低血压。这一特定亚组在下面称之为“游离羧酸”。
另一优选亚组的化合物包括那些X是氧时的式I游离羧酸。
另一优选亚组包括那些X是氧而W是CH时，式I的游离羧酸。
另一优选亚组包括那些X是氧而W是CH，且R1，R2，R3，R4，R5，R6和R7分别是氢时，式I的游离羧酸。
另一优选亚组包括那些式I中X是氧而W是CH，且R1，R2，R3，R4，R5，R6和R7分别是氢，Y是氧或直键时，式I的化合物。
具体的化合物包括下列化合物：
(4-(2-(2-(6-氨基吡啶-3-基)-2(R)-羟乙基氨基)乙氧基)苯基)乙酸；
(4-(2-(2-(6-氨基吡啶-3-基)-2(R)-羟乙基氨基)乙氧基)苯氧基)乙酸；
(4-(2-(2-(6-氨基吡啶-3-基)-2(R)-羟乙基氨基)乙氧基)苯甲酸；和
(4-(2-(2-(6-氨基吡啶-3-基)-2(R)-羟乙基氨基)乙氧基)苯基)丙酸；
盐形式的上述化合物也是优选的。
本发明还涉及一种治疗用组合物，其适用于治疗哺乳动物中的症状、疾病或失调。包括本发明公开的任何症状、疾病和/或失调。该组合物包括治疗这些症态、疾病或失调的有效量的式I化合物，或其前药，或所说化合物或前药的药学上可接受的盐，以及一种药学上可接受的载体。可以用这些组合物治疗的具体症状、疾病或失调包括糖尿病、高血糖、肥胖症、肠蠕动失调、气管炎、抑郁症、前列腺疾病，和异常脂质血症。
本发明还涉及治疗选自哺乳动物的糖尿病、高血糖症和肥胖一组中任何一种疾病的方法，包括给需要这种治疗的哺乳动物给予能治疗这些疾病的有效量的式I化合物，或其前药，或所说化合物或前药的药学上可接受的盐。
本发明还涉及适用于增加可食用动物中瘦肉量的组合物，包括一种能增加所说瘦肉量的有效量的式I化合物，或其前药，或所说化合物或前药药学上可接受的盐，以及一种药学上可接受的载体。
本发明还涉及一种增加可食用动物中瘦肉量的方法，包括给可食用动物给药一种能增加所说瘦肉量的有效量的式I化合物，或其前药，或所说化合物或前药药学上可接受的盐。
本发明还涉及一种治疗哺乳动物，优选是人类，前列腺疾病的方法，包括给需要这种治疗的哺乳动物给予能治疗该疾病的有效量的式I化合物，或其前药，或所说化合物或前药的药学上可接受的盐。
本发明还涉及一种治疗选自下列一组中的一种疾病的方法，这些疾病是哺乳动物，尤其是人类，的肠蠕动失调，如，应激性肠道综合症，消化性溃疡，食管炎，胃炎和十二指肠炎，(包括由H.pylori引起的那些疾病)，肠道溃疡(包括炎性肠道泄泻疾病，溃疡性结肠炎，节段性回肠炎和直肠炎)和胃肠道溃疡，该方法包括给需要这种治疗的哺乳动物给予能治疗这些疾病的有效量的式I化合物，或其前药，或所说化合物或前药的药学上可接受的盐。
本发明还涉及一种治疗哺乳动物，优选是人类，抑郁症的方法，包括给需要这种治疗的哺乳动物给予能治疗抑郁症的有效量的式I化合物，或其前药，或所说化合物或前药的药学上可接受的盐。
本发明还涉及一种治疗哺乳动物，优选是人类，的异常脂质血症的方法，包括给需要这种治疗的哺乳动物给予能治疗异常脂质血症的有效量的式I化合物，或其前药，或所说化合物或前药的药学上可接受的盐。
本发明还涉及一种治疗气管炎，特别是哮喘，的方法，包括给需要这种治疗的哺乳动物给药能治疗这种疾病的有效量的式I化合物，或其前药，或所说化合物或前药的药学上可接受的盐。
本发明包括具有游离氨基，酰氨基，羟基或羧基的式I化合物的前药。前药被理解为含有一个氨基酸残基，或一个由两个或多个(如，两个、三个或四个)氨基酸组成的多肽，它们通过肽键与式I化合物的游离氨基，羟基，羧酸基团共价结合。氨基酸残基包括通常由三字符表示的20个天然存在的氨基酸，并且包括，例如但不限于，4-羟脯氨酸，羟赖氨酸，锁链素，异锁链素，3-甲基组氨酸，正颉氨酸，β-丙氨酸，γ-氨基丁酸，瓜氨酸，高半胱氨酸，高丝氨酸，鸟氨酸和蛋氨酸砜。前药还被理解为包括碳酸酯，氨基甲酸酯，酰胺和烷基酯，它们通过羰基碳前药侧链与式I的上述取代基共价结合。前药还包括这样一些化合物，其中的仲胺及其β-羟基一起形成一种下式的基团其中R3，R4，R5和X如上述式I所定义，q是0至6，而U和V分别是羰基，亚甲基，SO2或SO3，其中亚甲基可选择性的被羟基取代。
本发明还进一步包括下列结构的中间体：其中：
PG是一个惯用的保护基团，
R是烷基；
R1，R4和R5分别是氢或(C1-C6)烷基；
R3，R6和R7分别是氢，卤素，(C1-C6)烷基，硝基，氰基，三氟甲基，SO2R8，SO2NR9R10，NR9R10，COR11，CO2R9，(C1-C6)烷氧基，NR9SO2R8，NR9COR11，NR9CO2R9或OR9；
R8分别是(C1-C6)烷基或(C1-C6)烷氧基(C1-C6)烷基；
R9和R10分别是氢，(C1-C6)烷基，环烷基(C3-C8)，或(C1-C6)烷氧基(C1-C6)烷基；
R11分别是氢，(C1-C6)烷基，NR9R10，(C3-C8)环烷基，或(C1-C6)烷氧基(C1-C6)烷基，其中R9和R10的定义如上；
W是N，CH，或当R3连接到W上时，是CR3，其中R3除可以是氢外，还可以是上述R3所列举的任何值；
X和Y分别是一种直链，氧，硫，或NR1，其中R1定义如上；
Z是(CH2)mOR9，(CH2)nCOR11，(CH2)nSO2NR9R10，(CH2)n-NR9SO2R8，(CH2)nP(O)(OR1)(OR2)，(CH2)n-O-(CH2)mCOR11，(CH2)n-O-(CH2)mP(O)(OR1)(OR2)，(CH2)n-O-(CH2)mSO2NR9R10，或(CH2)n-O-(CH2)m-NR9SO2R8，其中R1，R2，R8，R9，R10和R11的定义同上。
m是1至6；和
n是0至6，但如果Y是O或S，则n不是0；
下文将进一步详细描述。
本领域熟练技术人员可以预料到式I的化合物含有至少一个手性中心，而且当R4和R5不同时可能含有两个手性中心。因此，式I的化合物可以以旋光和外消旋形式存在和分离。有些化合物可以表现出多形性。应当指出的是本发明的化合物包括了任何的消旋的，旋光的，多形的或立体异构体形式，或它们的混合物，其具有本发明所说治疗作用的用途，在本领域中公知如何通过下述的常规实验来制备旋光形式(例如，通过重结晶技术使外消旋形式的化合物拆开，由旋光起始物质合成，通过手性合成，或通过使用手性固定相进行色谱分离)和如何测定所说治疗作用的效果。一般来说，(R)-立体化学在本发明化合物中的所有手性中心是优选的。
在本发明说明书中，该术语“烷基”或“烷氧基”包括直链和侧链基团，但是应当明白的是在特指单个基团如“丙基”或“丙氧基”时只包括直链(“常用”)基团，带侧链的同分异构体为如特指的“异丙基”或“异丙氧基”。
本文所用术语“卤素”，除了另有说明之外，包括氯、氟、溴和碘。
本文所用术语“治疗”包括预防和疾病的恢复治疗。(C1-C6)烷基的特定值包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔-丁基、戊基、异戊基、和己基。
(C1-C6)烷氧基的特定值包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、叔-丁氧基、戊氧基、异戊氧基、和己氧基。
(C3-C8)环烷基的特定值包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、和环庚基。
(C1-C6)烷基的更优选值包括(C1-C3)烷基的值，包括甲基、乙基、丙基、和异丙基。
(C1-C6)烷氧基的更优选值包括(C1-C3)烷氧基的值，包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基。
可以通过包括化学领域中其他化合物制备中的已知方法在内的方法制备式I化合物。用于生产上述定义的式I化合物的这些方法作为本发明的进一步特征进行描述，并且通过下述步骤进行解释，其中同类基团的含义除另有说明外定义同上。一般可通过下述步骤完成该方法：
(a)对于式I化合物中W是CH及R1和R2是氢的化合物，通过用一种合适的还原剂还原式II的化合物制备。
使用本领域中已知的一种还原剂如氯化亚锡、氯化锌、或氢，在披钯木碳催化剂的存在下(例如，10％)进行反应。该反应典型的是在一种极性溶剂如低级醇，例如甲醇或乙醇中回流进行。
(b)对于式I化合物中R1和R2是氢的化合物，通过使式III的化合物脱保护制备：其中PG是一种本领域中已知的(惯用)保护基团，优选(C1-C6)酰基(例如，乙酰基)，苄氧基羰基(Cbz)或叔-丁氧基羰基(BOC)基团。可以通过加氢反应，或用一种脱保护剂如一种酸(例如，三氟乙酸或无机酸如盐酸)在水/醇溶媒中按常规进行反应。
(c)对于式I化合物中Z末端是羧酸基团(即，游离酸)的化合物，通过将一种相应的(C1-C6)烷基酯的式I化合物水解成所说的游离酸来制备。
可以通过使用一种至少反应量的，优选是过量的(例如，碱：化合物的摩尔比达到5∶1)碱如一种碱金属氢氧化物，在水/低级醇溶媒中或用一种过量的无机酸水溶液按常规进行反应。
(d)对于式I化合物中Z末端是一种单-或双-取代的酰胺基团的化合物，通过用一种相应的单-或双-取代的胺处理一种相应(C1-C6)烷基酯的式I化合物制备。可以在水/低级醇溶媒中回流按常规一步置换进行反应。
(e)对于式I化合物中R1和/或R2不是氢的化合物，通过用一种式HNR1R2的相应胺处理式XXX的化合物制备，其中L是一种可置换的基团。该反应典型是在低级醇中回流进行。
在下述的反应步骤5中还将进一步讨论方法(c)和(d)。
如果在商业上得不到，用于上述步骤所必需的起始物质可以通过选自于常规有机化学方法的步骤制备，这些方法类似于已知化合物的合成方法，或类似于上述步骤或实施例中所述步骤的方法。特别是，本发明的方法和产品在下述的反应步骤中进行了解释，其中所有可变基团除另有说明外均定义同前。
路线1
路线2
路线3
路线4
路线5
路线6
路线7
路线8
路线9
在下述讨论中，使用了常用的化学首字母缩略语和缩写：BOC(叔-丁氧基羰基)；Cbz(苄氧基羰基)；THF(四氢呋喃)；DMF(二甲基甲酰胺)；DMSO(二甲基亚砜)；TFA(三氟乙酸)；本文所用“低级”(例如，特指低级烷基或低级烷醇时)是指(C1-C3)。
路线I说明的是式II四唑的制备(及其向式I化合物转换)。使氨基醇，其中PG是一种常规的保护基团如BOC，Cbz，或一种(C1-C6)烷基羰基基团，首先与化合物V在所谓的Mitsunobo反应中进行脱水偶联制备(保护的)产物胺VI。典型的是在一种脱水剂如一种反应量的二乙基偶氮二羧酸盐和一种膦，例如，三苯膦存在下，室温(或更高，如果是优选)下搅拌进行反应。该反应可以在任何惰性溶剂中，如THF，苯，甲苯，卤代烃，DMF，或DMSO进行。
然后按照本领域已知的方法将保护的胺VI与，例如，一种无机酸或有机酸如TFA在一种惰性溶剂如卤代烃(例如，氯仿或二氯甲烷)中，于室温下典型的反应大约2至8小时，使其脱保护得到胺VII。或者，也可以在惰性溶剂如低级醇或DMF中，在钯披木炭催化剂存在下通过使用氢进行氢解反应除去保护基团PG。氢解反应典型的是可以在室温至大约90℃的任何地方进行。
然后用偶氮保护的式VIII的环氧化物处理式VIII的胺得到化合物II。典型的是使式VII的胺与式VIII的环氧化物在一种极性非质子传递溶剂如二甲亚砜，二甲基甲酰胺，乙腈，或一种低级烷醇如乙醇，异丙醇或丁醇中，于大约-10℃至125℃的温度下进行反应。
对上述反应的优选改进包括用一种N-(三烷基甲硅烷基)乙酰胺，例如，N-(三甲基甲硅烷基)乙酰胺，对式VII的胺进行预处理形成式VIIa的甲硅烷化的化合物。
其中R典型的是一种低级烷基。典型的是在一种极性非质子传递溶剂如DMSO，DMF，或乙腈中，于大约-10℃至125℃的温度下进行反应。优选的，在大约25℃下进行甲硅烷基化反应，并且在大约60℃下完成与环氧化物的反应。完成甲硅烷基化反应之后，按照如上所述使VIIa的化合物与式VIII的环氧化物进行反应形成式IIa的中间体。
在反应完成之后或被终止之后，可以通过常规方法如通过适当的酸或碱水解除去甲硅烷基。
注意到在许多情况下也产生了作为主要异构体的下式的甲硅烷基化衍生物。
也可以通过相同的方法使上述异构体脱保护。
在除去三烷基甲硅烷基保护基团之后，通过用一种合适的还原剂，如上述(a)中所述的还原剂，处理化合物II使其还原，将分子的四唑部分转换为相应的吡啶基胺。
路线2描述了使用式III的前体化合物制备一种式I的化合物。可以将式X的环氧化物(其中W和保护基团PG定义同前)与胺VII在标准条件下反应，例如，使用一种极性溶剂如一种低级醇，并且典型的是在2到8小时的时间内进行回流反应。这一个优选方案中，首先将胺VII按照上述甲硅烷基化，在用环氧化物X对其处理之前形成一种式VIIa的甲硅烷基化胺化合物。
路线3描述的是制备一式XVI的化合物，它与式II和III的中间体属于同一类(当Y是O，S，或NH时)。如同所述的氨基醇IV与步骤1的化合物V进行反应，首先使氨基醇IV与化合物Va反应。如果X与Y相同，那么YH基团不需要预先与保护试剂反应进行保护。如果X与Y不同，那么优选通过标准方法保护YH基团，例如使其与一种芳香族或脂肪族的羧酸预先反应。如下所述，基本上在与化合物XV(JZ)反应之前的任何时间可以通过常规方法(例如，碱性水解)进行脱保护。如同对步骤1中的化合物VI所述，使产物-化合物VIa，脱保护，从而产生化合物IX。如同对步骤1的化合物VII和VIII的反应所述，使化合物IX与偶氮保护的环氧化物VIII反应，然后使化合物XIV与XV反应来制备化合物XVI，其中J是一种离去基团，如氯、溴或碘。应当理解为，对于化合物XIV来说，当W是CH时，连接在氨基上的“保护”基团是一种保护偶氮基团，构成一种稠合的四唑基团，并且化合物XVI与化合物II相同。或者，当W是CH或N时，“保护”基团可以是另外的任何惯用保护基团，前面定义为“PG”，并且结构XVI与化合物III相同。在任何一种情况下，化合物XIV和XV可以在惰性非质子传递溶剂如DMF，DMSO或甲苯中，在一种碱如碱金属氢化物或碳酸盐(例如氢化钠或碳酸钾)存在下发生反应。该反应一般在环境温度下进行1到8小时。
路线4叙述了通过还原胺化制备化合物XVIa，它是通式XVI的一个亚单位，其中至少R4和R5中有一个是H，R4和R5中即另一个是H或(C1-C6)烷基。使胺XVII和酮(或R4为H时是醛)反应产生一种XVIa的化合物。该反应典型的是在还原剂如氰基硼氢化钠，三乙氧基硼氢化钠，硼氢化钠，氢和金属催化剂，锌和盐酸或甲硼烷二甲硫化物的存在下进行，然后用甲酸处理。一般在大约-60℃至50℃的温度下进行反应。适用于该反应的惰性溶剂包括低级醇(例如，甲醇，乙醇和异丙醇)，乙酸，氯化烃溶剂(例如，二氯甲烷，氯仿，1，2-二氯乙烷)和THF。优选的是，溶剂为1，2-二氯乙烷，温度为大约25℃，和还原剂是三乙氧基硼氢化钠。
路线5叙述了如上述(c)和(d)中所述由式I的化合物制备式Ib和式Ic的游离酸和酰胺。步骤5中所用式Ia，Ib，和Ic是举例而言，式Ib，和Ic的化合物分别是式I的化合物，其中Z是(CH2)nCO2H和(CH2)nCOR11，其中R11是NR9R10，步骤5同样适用于式Ib的化合物类似物，其中Z是(CH2)n-O-(CH2)mCO2H，和适用于式Ic的化合物类似物，其中Z是(CH2)n-O-(CH2)mCOR11，其中的R11是NR9R10，和R9，R10，n和m定义如前。式Ia的化合物是对应于式I的中间体，例外的只是对应于Z的值是(CH2)nCOR12，R12是一个烷基，典型的是(C1-C6)烷基，不过也可以使用其他的可取代基如(C3-C8)环烷基。式I中除了对应于Z的是(CH2)n-O-(CH2)m-CO2R12的化合物之外的中间体也适用于制备本发明的化合物。通过路线1、2和3的方法制备式Ia的中间体化合物。可通过本领域中熟练技术人员公知的方法完成步骤5中所述的转变。应注意可以对反应条件进行调节以利于逆反应，虽然由于优选游离酸，实现这些反应条件是不太可能的。
在上述关于路线5的讨论中，式Ia的化合物被表示为中间体。需要指出的是式Ia的化合物为本身就是活性化合物的酯。这种式Ia的酯已经在与本申请相同的日期另外分别进行申请(案卷号PC9139JTJ)。
就路线5而言，可以通过用一种酸或碱处理将式Ia的化合物转变为式Ib的羧酸。适用于该反应的碱的例子是：氢氧化钠(NaOH)，氢氧化钾(KOH)，和氢氧化锂。适用于该反应的酸包括：盐酸(HCL)，氢溴酸和硫酸。优选的是，碱是氢氧化钾，适用于前述方法的溶剂典型的是低级醇，己烷，DMF，甲苯和/或水。低级醇可以是甲醇，乙醇，丙醇或丁醇。反应温度的范围可以是大约0℃至大约100℃。优选反应温度是大约25℃。
或者，也可以用式R9R10NH的胺处理式Ia的一种酯将式Ia的化合物转变成Ic的酰胺。通常，使用一种极性非质子传递溶剂如低级醇，反应是在大约0℃至125℃的温度范围内进行0.5至大约24小时。合适的溶剂包括低级醇，和它们与甲苯，环己烷，DMF及二氯甲烷的混合物。优选的是，反应在甲醇中于大约65℃进行大约3至24小时。
路线6叙述的是式VII的化合物的制备，其中R4和R5中的至少一个是H，和式XVIII化合物的制备，其中X是O或S。其中R4和R5中的至少一个是H的式VII的化合物在路线6中标记为VIIc。仅就举例而言，R4和被解释为一个可变值，它可以是除H以外的值，但是应当理解为R5也是一个可变值。式VIIc和XVIII的化合物分别是合成路线1和2中的式II和III中间体及路线4中式XVIa的中间体的起始物质，这些中间体又可被用来制备式I的化合物。
就路线6而言，可通过式XVIII的化合物的还原胺化作用制备式VIIc的化合物。还原胺化作用的条件如上述路线4中将式XVIII的酮(或醛，较合适)转变为式XVIa的化合物所用条件，不同的是所用的胺为氨或它的一种酸加成盐，而不是式XVII的胺。
可以用式XX的化合物起始通过三个步骤制备式XVIII的化合物。
首先通过用三溴化硼处理式XX的醚(当X是O时)或硫醚(当X是S时)将式XX的化合物转变成式XXI的硫醇类或酚类。适用于上述反应的溶剂是非极性非质子传递溶剂如二氯甲烷，甲苯，氯仿，或四氯化碳、优选的溶剂是二氯甲烷。在与三溴化硼的反应过程中温度范围可以是大约-78℃至大约20℃。优选是大约0℃。
在碱存在下通过用下式
的化合物处理将式XXI的硫醇或酚转变成式XXII的缩酮或缩醛，上式中J是氯，溴，或碘。优选的是，首先通过与一种碱反应将式XXI的硫醇或酚转变成一种阴离子。合适的碱的例子包括氢化钠和叔丁氧化钠。优选的碱是氢化钠(NaH)。适用于上述方法的溶剂的例子包括极性非质子传递溶剂如二甲基甲酰胺，二甲亚砜，和四氢噻吩砜。优选的溶剂是二甲基甲酰胺。
上述反应的温度是在大约-10℃至大约100℃的范围内。优选的温度是30℃。
通过与一种酸反应将形成的式XXII的一种缩酮或缩醛转变成相应于式XVIII的化合物。典型的是，该反应在大约10℃至100℃的温度范围内进行。用于前述方法的合适的酸的例子是盐酸，氢溴酸和硫酸。优选的酸是盐酸。适用于前述方法的溶剂包括极性溶剂如丙酮和/或水。优选的溶剂是丙酮。
路线7叙述的是式VIIc化合物和式XVIII化合物的制备，其中X是直键，而R4和R5中的至少一个是H，R4和R5中的另一个是H或(C1-C6)烷基。再者，为了说明给出了单个的可变值R4。如同路线1，2和4中所述，式VIIc和XVIII的化合物是用于合成用于本发明的相应中间体的起始物质。
可以根据路线4的方法用其中X是直键的式XVIII的化合物形成式XVIa的中间体。
可以根据路线1和2的方法用其中X是直键的式VIIc的化合物形成式I的相应化合物。
就路线7而言(其中X是直键)，可以按照上述路线6所述，通过用氨将式XVIII的化合物进行还原胺化，使式XVIII的化合物转变成式VIIc的化合物。
可以在乙酸钯(II)和3-o-甲苯基膦的存在下用式R4COCH2Sn(CH3CH2CH2CH3)3的锡试剂处理式XXIII化合物，由式XXIII的相应化合物制备式XVIII化合物。通过使甲氧化三丁基锡与下式化合物反应形成该锡试剂，R4COCH2Sn(CH3CH2CH2CH3)3。
适用于前述反应方法的溶剂包括非极性溶剂如甲苯，苯和己烷。优选的溶剂是甲苯。前述反应的温度一般在大约10℃至150℃的范围内，并且优选温度是95℃。
路线8描述的是式VIII环氧化物的制备，它可以用来制备式II中间体，并进而可以用来制备式I的化合物，其中W是CH。该制备方法一般是按照美国专利4,358,455和5,019,578中所公开的方法进行。在酸如任何常用无机酸(例如，HCL)的存在下且在一种非质子传递溶剂如醇水溶液中回流下用叠氮化钠处理式XXIV的酮生成式XXV的四唑。然后，优选用卤化剂如溴处理四唑XXV生成式XXVI的相应化合物，其中J是一种离去基团如溴基。可以在标准条件下进行溴化反应，如在已用HBr饱和的冰醋酸溶剂中进行。一般该反应是在冷却条件下(例如，冰浴)进行。可以在标准条件下，例如，用温和的还原剂(如，硼氢化钠，硼氢化锂)在室温下于一种惰性溶剂如THF中处理化合物XXVI，然后用一种碱如碱金属氢氧化物在一种非质子传递溶剂如醇中处理，将式XXVI的化合物转化成相应的环氧己烷VIII。可以用一种立体有择还原剂，如(R)-alpine-甲硼烷制备基本上不含S-异构体的环氧己烷R-异构体。
路线9描述了式I化合物的合成，其中R1和/或R2是除H之外的基团。首先用一种卤化剂如溴处理式XXVII的酮(其中L是一种可以被伯胺或仲胺取代的基团如F或CL)以产生式XXVIII的相应化合物，其中J是一种离去基团如溴基。可以在标准条件下完成溴化反应，例如，按照路线8中有关四唑XXV转换成化合物XXVI所述的条件。也按照路线8中所述的标准方法将式XXVIII的化合物转换成相应的环氧己烷XXIX。然后用式VII的化合物在一种极性溶剂如DMSO，DMF或乙腈中于典型的温度范围-10℃至125℃内直接处理环氧己烷XXIX，从而生成式XXX的化合物。使式XXX中间体在低级醇中回流条件下(或在压力下，例如，在胺是气体情况下)与式HNR1R2的胺反应产生式I的相应化合物。
可以用本领域中熟练技术人员已知的惯用纯化和分离方法和1或技术来分离本发明的化合物。这些技术包括全部类型的色谱层析法(HPLC，使用普通吸附剂如硅胶的柱层析，和薄层层析)，重结晶，和微分(即，液-液)萃取技术。
式I的一些化合物，例如那些具有游离羧酸官能度的化合物，通过使游离酸形式与合适的碱，通常是一当量，在助溶剂中反应形成药学上可接受的阳离子盐。典型的碱是氢氧化钠，甲醇钠，乙醇钠，氢化钠，甲醇钾，氢氧化镁，氢氧化钙，苄星(benzathine)，胆碱，二乙醇胺，哌嗪和氨基丁三醇。通过浓缩至干或加入一种非溶剂来分离这种盐。在许多情况下，优选通过混合一种酸溶液与一种不同的阳离子盐溶液(例如乙基己酸钠或钾，油酸镁)，使用一种可以从中沉淀所需盐的溶剂(例如，乙酸乙酯)来制备盐，或者通过浓缩和/或加入一种非溶剂来分离。通过使本发明化合物的碱形式与合适的酸反应可以容易地制备本发明化合物的酸加成盐。如果这种盐是一价酸(例如，盐酸，氢溴酸，对-甲苯磺酸盐，乙酸盐)的盐，含一个氢的二价酸盐(如，硫酸氢盐，琥珀酸盐)，或含两个氢的三价酸盐(例如，磷酸二氢盐，柠檬酸盐)，则至少使用1摩尔当量并且通常是超过1摩尔的酸。尽管如此，但是，如果希望得到硫酸盐，半琥珀酸盐，磷酸氢盐或磷酸盐这样的盐，一般使用合适和实际化学当量的酸。通常使游离碱和酸在一种可以沉淀所需盐的助溶剂中结合，或通过浓缩和/或加入一种非溶剂分离。
可以通过常规的肽偶联反应使式I化合物的游离氨基或羧基与一个氨基酸或多肽链，如，二肽，偶联制备本发明的氨基酸前药。该偶联反应一般在大约-30℃至大约80℃的温度范围内进行。优选是大约0℃至大约25℃。通常要使用合适的偶联剂，如，二环己基碳二亚胺与羟基苯并三唑(HBT)，N-3-二甲基氨基丙基-N′-乙基碳二亚胺与HBT，2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1，2-二氢喹啉，羰基二咪唑与HBT，或二乙基磷酰基氰化物。该反应一般是在一种惰性溶剂中进行，如在乙腈，二氯甲烷，氯仿，二甲基甲酰胺，二恶烷，四氢呋喃，二甲氧基乙烷，或水，或这些溶剂的两种或多种的混合物中进行。
可以通过使式I化合物的游离羟基或氨基与一种合活化羰基的分子如乙酰氨或氯甲酸乙酯反应来制备本发明的酯，碳酸酯或氨基甲酸酯前药。该反应可以于大约-78℃至大约100℃的温度下不加任何溶剂进行或在一种反应惰性溶剂如二氯甲烷存在下进行。也可以使醇与氯化氰在路易斯酸存在下反应形成氨基甲酸酯。
通过使用与美国专利4,593,023,1984年7月21日公开的欧洲专利申请170，135A和美国专利4,607,033中所说方法类似的方法形成一种前药，其中仲胺及其β-羟基一起形成一种下式的基团
当通过口服或非肠道途径给哺乳动物(包括人)给药式(I)的化合物，其前药，或其药学上可接受的盐(以后本发明也称之“活性成分或化合物”)治疗本发明前述的任何病症、失调和/或疾病时，一般可获得满意的效果。优选是口服途径给药，它给药更方便，并且可以避免注射带来的疼痛和刺激。尽管如此，但是，在由于疾病或其他异常而导致病人不能吞咽药物或口服给药之后吸收不好的情况下，基本上是非肠道给药。不论使用何种给药途径，剂量是在每人每天大约0.01至大约100毫克/公斤体重范围内，优选是每天大约0.1至大约50毫克/公斤体重，可以单剂量或分剂量给药。不过，对于所治疗的个体患者来说最佳剂量由负责治疗的人确定，一般开始剂量较小，然后加大剂量以确定最佳剂量。
本发明的化合物可以和药学上可以接受的载体或稀释剂结合使用。合适的药学上可以接受的载体包括惰性固体填充剂或稀释剂和无菌水或有机溶液。活性化合物在这种药物组合物中的含量要足以提供上述范围内所需剂量。因此，对于口服来说，该化合物可以与合适的固体或液体载体或稀释剂结合使用形成胶囊，片剂，粉剂，糖浆，溶液，混悬剂等。如果需要该药物组合物可以含有其他的成分，如调味剂，甜味剂，赋形剂等。
片剂，丸剂，胶囊等也可以含有粘合剂，如西黄耆胶，阿拉伯胶，玉米淀粉或明胶；赋形剂如磷酸氢钙；崩解剂，如玉米淀粉，马铃薯淀粉，藻酸；润滑剂，如硬脂酸镁；和甜味剂，如蔗糖，乳糖或糖精。当剂量单位是胶囊时，除了以上类型的物质之外，还可以含有一种液体载体如脂肪油。
可以用各种其他的物质作为包衣剂或用来修饰剂量单位的物理形状。例如，可以用虫胶、糖或二者给片剂包衣。糖浆或酏剂除了含有活性成分之外还含有蔗糖作为甜味剂，对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯作为防腐剂，色素和调味剂如樱桃或桔子调味剂。
这些活性化合物也可以非肠道给药。对于非肠道给药来说，该化合物可以与无菌水或有机溶媒结合使用形成可注射的溶液或混悬液。可以将这些化合物与一种表面活性剂如羟丙基纤维素在水中适当混合制备这些化合物的溶液或混悬液。也可以在芝麻油或花生油，乙醇，水，多元醇(例如，甘油，丙二醇和液体聚乙二醇)，它们的合适混合物，植物油，N-甲基葡萄糖胺，聚烯吡酮和它们与油以及该化合物的水溶性药学上可接受盐的水溶液的混合物中制备分散液。在正常储存和使用的条件下，这些制剂含有一种防腐剂以防止微生物的生长。以这种方式制备的可注射用溶液可以静脉内、腹膜内、皮下、或肌内给药，肌内给药是人类的优选非肠道给药途径。
适合于注射用的药物剂型包括无菌水溶液或分散液和可以即时制备成无菌可注射溶液或分散液的无菌粉末。在所有情况下，该剂型必须是无菌的和必须是液体的以达到容易注射的程度。它必须是在生产和储存条件下稳定的，并且能防止微生物如细菌和真菌的污染。
由于具有减少身体脂肪(脂解)的作用，本发明化合物可用于增加可食用性动物，包括蹄行动物和家禽如猪，牛，绵羊和山羊，的瘦肉积蓄和/或改善瘦肉与脂肪比率。式(I)的化合物还可以用来治疗肥胖的家养宠物，例如，陪伴动物如狗和猫。式(I)化合物的给药可以是口服或非口服，例如，注射给药。式(I)化合物的给药剂量应为获取的有效剂量，一般是每天的剂量当口服给药时通常在大约0.01至大约100毫克/公斤体重范围内，优选是大约0.1至大约50毫克/公斤体重。方便起见，可以在饮水中加入药物以便在每天的水摄入时摄取治疗量的药剂。可以直接计量将药物加入水中，优选以一种液体形式，水溶性浓缩物(如水溶性盐的水溶液)的形式加入。
方便的是，也可以将活性成分直接加入食物本身中，或以动物饲料的形式提供，也称之为预混合物或浓缩物。在载体中含有治疗剂的预混合物或浓缩物更为普遍的被用于将药剂包括在食物中。合适的载体是所需的液体或固体，如水，各种粉如苜蓿粉，大豆粉，棉籽油粉，亚麻籽油粉，玉米芯粉和玉米粉，糖蜜，脲，骨粉食物，无机混合物如家禽饲料中通常使用的混合物。特别有效的载体是动物饲料本身，也就是说，一小部分这种饲料。载体有助于使活性物质均匀的分布于加入预混合物后而制成的最终饲料中。重要的是要把化合物充分的搅拌在预混合物中，并且，进一步搅拌在饲料中。在这种情况下，可以将试剂分散于或溶于一种合适的油性载体中，如大豆油，玉米油，棉籽油，等等，或溶于一种挥发性有机溶剂中，然后与载体拌匀。合适的是使活性物质在浓缩物中的比例能够较大范围的变化，因为这样可以提供将合适比例的预混合物与饲料混合来调整最终饲料中试剂的量，以获得所需含量的治疗剂。
饲料生产者可以将高效浓缩物与蛋白载体如大豆油粉和上述的其他粉一起混合，生产出适合于直接喂养动物的浓缩供养物。在这种情况下，可以允许动物食用一般饮食。或者，可以将这种浓缩的供养物直接加入到饲料中以生产一种营养平衡的、含有治疗有效量的本发明化合物的最终饲料。通过常规方法，如在双叶搅拌器中，充分搅拌混合物，以确保其均匀性。
如果这种供养物被用于作为饲料的添加剂，它可能有助于保证活性物质在添加饲料表面的分布均匀性。
一般可以制备能有效增加瘦肉沉积和改善瘦肉与脂肪比的饮用水和饲料，方法一般是将本发明的化合物与足量的动物饲料混合以在饲料或水中提供大约10-3至500ppm的化合物。
优选的加药的猪，牛，绵羊和山羊饲料一般每吨饲料含有大约1至400克的活性成分，对于这些动物来说最佳量通常是每吨饲料大约50至300克。
优选的家禽和家养宠物饲料一般每吨饲料含有大约1至400克活性成分，优选含有10至400克。
对于动物中的非肠道给药来说，可以将本发明的化合物制备成糊剂或丸剂形式，以一种植入物的形式给药，通常是在动物的头皮或耳的皮肤下埋植，这样可以获得瘦肉沉积的增加和瘦肉与脂肪比例的改善。
一般来说，非肠道给药包括注射足够量的本发明化合物以提供给动物每天每公斤体重0.01至100毫克的活性成分。对于家禽，猪，牛，绵羊，山羊和家养宠物来说优选的剂量是每天每公斤体重0.1至50毫克的活性成分。
可以将活性化合物分散于一种药学上可接受的油如花生油，芝麻油，玉米油等中制备糊剂。
可以通过将本发明的化合物与一种稀释剂如碳腊，巴西棕榈腊等混合制备含有有效量本发明化合物的丸剂，并且还可以加入一种润滑剂如硬脂酸镁或硬脂酸钙以改善成丸过程。
当然，应当认可的是给一种动物的给药可以是超过一丸以达到增加瘦肉沉积和改善瘦肉与脂肪所需比例的所需剂量。而且，还发现在动物治疗期间可以定期的制备植入物以保持动物体内的合适药物含量。
本发明具有几个突出的兽医学上的优点。对于试图增加宠物的瘦肉而消除其不需要脂肪的宠物主人或兽医医生来说，本发明提供了实现这一目的的手段。对于家禽和猪的饲养者来说，本发明的方法可以生产瘦肉型动物，以在肉类工业上获得较高价格。
根据下列方法可以测试本发明化合物的降血糖活性。
在标准动物饲养操作规程下以每笼5个小鼠的方法饲养5至8周龄的C57 BL/6J-ob/ob小鼠。在一周的气候适应阶段之后，将动物称重，在治疗之前通过眼球取血采集25毫升血液。立即用含2％肝素钠的盐水将血样稀释至1∶5，并置于冰上用于葡萄糖分析。然后将动物重新分组，每组5只，以便使得每组的葡萄糖平均值近似，用测试药物(0.01-100mg/kg)，阳性对照药物如englitazole或ciglitazole(50mg/kg p.o.)(美国专利4,467,902；sohda等人，Chem.Pharm.Bull.，32卷，第4460-4465，1984)，或载体每天给药，共给药5天。所有药物均以口服管饲法通过含有0.25％w/v甲基纤维素的载体给药。在第5天时，对动物再次称重，并通过(眼球)取血进行血中葡萄糖含量测定。将新鲜采集的样本以10,000xg室温下离心2分钟。通过，例如，ABA200 BichromaticAnalyzerTM1(1：Abbott Lab Oratories注册的商标，DiagnosticDivision，820 Mission Street，So，Pasadena，CA91030)使用A-gentTM葡萄糖UV试剂系统2(对Richte-rich和Dauwalder方法的改进，Schweizerische Medizinische Wochenschrift，101，860(1971)(己糖激酶方法)以20，60和100mg/dl标准分析上清液的葡萄糖含量。然后由公式计算出血浆葡萄糖。
血浆葡萄糖(mg/dl)＝样本值×5×1.67＝8.35×样本值
其中5是稀释因子而1.67是血浆血细胞比容调节(假设血细胞比容是40％)。
用载体给药的动物基本上未变化的保持高血糖葡萄糖含量(例如，250mg/dl)，而阳性对照动物葡萄糖含量下降(例如，130mg/dl)。测试化合物的降低葡萄糖活性以％葡萄糖正常化的术语表示。例如，与阳性对照相同的葡萄糖含量表示为100％。
可以使用下述方法确定化合物对β3-受体而不是对β2、β1受体的选择性。
通过测定中国仓鼠卵巢细胞中环腺苷酸(cAMP)的蓄积量来确定其体外选择性。使仅用人β1，β2或β3受体基因转染的中国仓鼠卵巢细胞在含有10％胎牛血清，500μg/ml遗传素(Geneticin)，100U/ml青霉素，100μg/ml链霉素和250ng/ml二性霉素的Ham′sF12培养基中生长达到融合。将化合物制备成10mM的DMSO原液(0.1％DMSO，最终浓度)，用Ham′sF12培养基稀释，并以10-10-10-5M与异丁基甲基黄嘌呤一起加入到细胞中以抑制磷酸二酯酶活性。然后将培养基和细胞于37℃下孵育5分钟。在此之后，抽吸出培养基并在0.01N HCl中溶解细胞。然后使用从New England Nuclear获得的试剂盒通过放射测定(RIA)来测定cAMP的细胞含量。cAMP的细胞含量与β1，β2或β3受体的兴奋之间存在着直接相关性。使用10-5M的非选择性肾上腺素能兴奋剂，去甲肾上腺素，作为阳性对照。该数据表示为相对于基础值的增长倍数。
通过测定雄性Sprague-Dawley鼠的耗氧量和活动能力来测定其体内效果。使用一种开放式循环，间接测热仪(OxymaxTM，购自Columbus Instruments)测定全部动物的氧消耗。在每项实验之前用氮气(N2)和混合气(0.5％的二氧化碳(CO2)，20.5％的氧气(O2)，79％N2；Linde Specialty气体)校准Oxymax气体传感器。将鼠(雄性，Sprague-Dawley，体重300-380克)置于封闭的测热仪室内(43×43×10厘米)，并将测热仪室置于活动监测仪中。把通过室内的空气流速设定在1.6-1.7升/分钟。根据通过室内的空气流速和入口与出口之间的含氧量差用Oxymax测热仪软件计算耗氧量(ml/kg/l)。活动监测仪有15个分别相距1英寸的红外光束；当两个相邻的光束被打断(同一光束被重复打断不计算)时记录其活动能力，并以数据形式记录结果。可以每10分钟记录一次基础氧耗量和活动能力，共记录2.5至3小时。在基础阶段之末，打开测热仪室，通过口服管给予动物待测化合物(0.01至100毫克/公斤，配制在水或其他合适的载体中)或等量的载体。给药后每10分钟记录一次氧耗量和活动能力，记录3小时。通过将给药后2.5小时的平均值，并除以基础氧耗量(除第一小时外的给药前数值的平均值)来计算氧耗量的百分比变化。在活动能力超过100计数期间获得的氧耗量值不计入在内。因此，该值代表了静态氧耗量的百分比变化。
通过测定从插入导管的清醒鼠(雄性，Sprague-Dawley，体重300-380克)采集的血浆的钾浓度以及心率，血压来测定对β1和β2肾上腺素能受体的体内选择性。为了插入导管，用戊巴比妥(50-60mg/kg，腹膜内给药)麻醉鼠，并用PE50插管在左颈动脉插套管。将插管埋入皮下，使开口置于颈背部，灌入聚乙烯吡咯烷酮的肝素化盐水，火焰密封并加盖。手术7天后进行实验。在实验那天，将导管盖打开，并用盐水冲洗。至少30分钟之后，通过将导管连接到压力换能器上测定其心率和血压的基础值，并在Grass Model7多种波动描记仪上记录结果，从动脉导管采集基础血样(0.5毫升)。获得基础值之后，通过口服管给予测试化合物或载体，在15，30，45和60分钟时测定血压(测定β2活性)和心率(测定β1活性)，并于30和60分钟时采集用于钾测定的(β2)的血样。可以以0.01至1毫克/公斤范围剂量的异丙肾上腺素(以盐水为载体皮下注射)，一种非选择性β-兴奋剂，为阳性对照进行测试。用火焰分光光度计测定血浆钾。为了测定变化值，从给药后的平均值中减去基础值。
式I的化合物还具有降低肠蠕动的作用，因此发现可有助于治疗各种胃肠道疾病，如应激性肠道综合症，消化性溃疡，食管炎，胃炎和十二指肠炎，(包括由H.pylori引起的那些疾病)，肠道溃疡(包括炎性肠道腹泻疾病，溃疡性结肠炎，节段性回肠炎和直肠炎)和胃肠道溃疡。一直认为非括约肌平滑肌收缩的能动性由β3肾上腺素能受体的活性调节。使用对β3有特异性而对β1和β2受体无活性的兴奋剂，可有助于对肠蠕动的药物控制而没有伴随的心血管作用。可以根据下述步骤测定式I化合物治疗或预防肠蠕动疾病的体内活性。给禁食18小时的雄性Sprague-Dawley派生(CD)鼠(175-225克)以0.01至100毫克/公斤的剂量经口给药化合物或载体(蒸馏水)。给药后30分钟，给鼠经口给药一种0.25毫升含有大约20,000cpm51Cr(放射性比度350mCi/mgCr)的铬酸钠0.9％盐水溶液。20分钟之后，将鼠处死，结扎胃食管、幽门、回盲肠的连接处，并取下胃和小肠。然后将小肠分成10个等长的段，用γ计数器分析胃和每段小肠的放射活性。然后通过将小肠中的放射活性量与小肠和胃中的总放射活性量进行比较，来确定每只鼠的胃排空速度。另外，用放射活性标记物的分布几何中心作为对通过胃和小肠的总通过速度的测定。通过将每段中51Cr的分数与段数相乘的积相加来计算几何中心：几何中心＝∑((每段中51Cr的分数)×(段数))。在这种计算中，胃的段数可以被认为是0，10个小肠片断依次为1至10。因此，0.0的几何中心表示全部的51Cr都存在于胃中。收集两次实验的数据，用Dunnett′s多次比较检验进行统计学评估。
或者，在8个小组中，用甲氧氟烷麻醉禁食过夜的雄性Sprague-Dawley(CD)鼠(175-225克)。然后在腹部切一小口，结扎幽门。结扎之后，立即向近端十二指肠注射化合物溶液或载体(蒸馏水)。所用药物剂量是0.01至100毫克/公斤。然后关闭切口，使鼠从麻醉中醒来。结扎两小时后将鼠处死，收集胃液，并离心澄清。由胃液重量确定总分泌量，并且用一种自动滴定计(Ridiometer TTT85)以0.1N NaOH滴定到pH7.0来测定酸度。然后收集两次实验的数据。每次实验中包括一组用10mg/kg的抗分泌组织胺H2-受体拮抗剂西米替丁(cimetidine)治疗的鼠作为阳性对照。用Student′s t-检验进行统计学评估。
根据下述方法测定对从豚鼠回肠分离的收缩回肠的体外松弛活性。将新鲜分离的豚鼠回肠段(大约1.5厘米长)置于30℃的含有泰洛氏生理盐水溶液的组织浴液中，并连续通入O2∶CO2(95％∶5％)。然后将组织在4.0克张力下平衡60-90分钟以达到稳定的基线。然后以累积方式向浴液中加入组织胺，浓度范围是1nM至10μM。在Grass Physiogrph上记录每次加入组织胺后产生的最大张力。之后用几种不同的泰洛溶液洗涤组织。将基础张力调节到4.0克，然后再次获得稳定的基线。将每个组织暴露于一个浓度的测试化合物(1nM至10μM)或载体，在30分钟的平衡阶段之后，可以重复出组织胺剂量反应曲线。使多次实验的结果标准化(0-100％)为对照组织的最大反应，并且以有和无药物存在下绘出最大张力百分比对组织胺浓度log值的曲线。
可以根据下述方法测定式I化合物的体内抗抑郁活性。
从美国的Charles River获得体重20至25克的雄性CD1小鼠和体重200-250克的Sprague-Dawley鼠。将式I的化合物溶于水中。化合物的给药剂量对小鼠是10毫升kg-1，而大鼠是2毫升kg-1，对照动物给予载体。下述数据的阳性测试结果表明了其抗抑郁活性。
I.对利血平诱导的低温的拮抗：
给小鼠给药利血平(2.5mg kg-1，腹膜内给药，溶于1％柠檬酸)。3.5小时之后测定其直肠温度。将小鼠分成不同的组以便每组获得相同的平均直肠温度。半小时以后(即，利血平给药后4小时)，给小鼠给药载体或测试药物。90分钟之后(即，注射利血平之后5小时30分钟之后)再次测定直肠温度。(Bourin等人，The Value of the Reserpine Test inPsychopharmacology，Arzneim.Forsch.33，1173，(1983)).
II.对阿朴吗啡诱导的低温的拮抗：
将小鼠置于单个的笼中半小时之后，记录其直肠温度。对小鼠的分组应当使得每组小鼠的平均直肠温度相同。在测试化合物或其载体给药30分钟之后给药阿朴吗啡(16mg kg-1皮下给药)。在阿朴吗啡治疗之后的30分钟再次测定直肠温度(Puech等人，Antagonism of Hypothermia And Behavioural Response ToApomorphine；A Simple，Rapid And Discriminating Test ForScreening Antidepressants And Neuroleptics，Psychopharmacology75，84，(1981))。
III.对训练的无助行为的影响：
本实验基本上按照Giral等人Reversal Of Helpless BehaviourIn Rats By Putative 5-HTIAAgonist.Biol.Psychiat.23，237.(1988)所述进行。给置于带有PlexiglassR壁和盖的室(20×10×10厘米)内的雄性白化体Sprague-Dawley鼠脚上施一电刺激。该室的底面由不锈钢网栅制成(1.5厘米网眼)。向网栅底面通以60变频的，随机不可逃脱的持续电流冲击(每60＋15秒，15秒的波期，0.8mA)。然后将对照组鼠置于相同的室内1小时，但不施加电刺激。在第1天的上午9至11时进行所有的先决条件试验。在带有PlexiglassR壁和由相膈1.0厘米的不锈钢棒组成的底面的自动双通道穿梭盒子(60×21×30厘米)中于不可逃避的电刺激之后48小时(3天)开始躲避训练以评估躲避缺陷。每个穿梭盒子由一个不锈钢分隔层分成两个相同大小的室，并有一个门，以提供可穿过7×7厘米空间到达邻近室的途径。连续3天(3，4和5)进行穿梭盒子周期训练。将动物单个置于穿梭盒子中使其熟悉环境5分钟(只限于第一周期)，然后进行30次试验。每次试验间膈应当是30秒。在每次试验的前30秒给一灯光信号，用作条件刺激。在这种只有灯光刺激的期间穿过门进入盒子的另一个室(称作躲避反应)可以使鼠躲避电刺激。如果不发生躲避反应，可以给以条件刺激加脚电刺激(0.8A)的阶段。在这种条件刺激加电刺激阶段穿过门进入盒子的另一个室称作逃避反应。在3秒的条件刺激加电刺激阶段不出现逃避反应称作是逃避失败。
根据下述方案对鼠(n＝10每组)随机处理：对照组，不接受电刺激，并给以载体；对于试验动物接受不可逃避的电刺激，每天给以载体或药物处理。应当连续5天，即，在第1天电刺激预处理之后6小时口服治疗动物，然后每天两次，早上半剂量(在穿梭盒子训练前30分钟)和下午半剂量(第5天除外)。使用双变量分析(主体×期间)然后进行Dunnett′s检验对逃避失败的平均数进行统计学分析。
式I的化合物还具有支气管松弛作用和增加睫状运动的作用，因此可用于治疗气管炎疾病如哮喘和阻塞性肺病。可以根据下述步骤通过测定豚鼠支气管的松弛来测定化合物治疗气管炎疾病的体外活性。
从用乌拉坦(1.25g kg-1，腹膜内给药)麻醉的任何性别的(250-350克)三色标记的豚鼠获得豚鼠主支气管环，并在2.0克起始张力下悬浮于37℃的Krebs溶液中，通以95％O2∶5％CO2。平衡1小时后，用乙酰胆碱(10-3M)收缩豚鼠支气管环，并用二甲基黄嘌呤(3×10-3M)松弛到最大松弛程度，然后使其再平衡60分钟，同时每15分钟用Krebs溶液洗涤。
用应变仪和放大仪等比例的测定张力变化，并在记录仪上显示出来。Krebs溶液的组成是(mM)：NaCL118.0，KCL5.4，CaCL22.5，KH2PO41.2，MgSO41.2，NaHCO325.0和葡萄糖11.7。
为了测定测试化合物对环张力的影响，每10-20分钟加入测试化合物(10-9M-10-6M)直至达到稳定而获得累积浓度-反应曲线。该化合物的松弛作用表示为二甲基黄嘌呤(3×10-3M)诱导的最大松弛程度的百分比。
可以根据下述步骤测定式I化合物对前列腺疾病的体外效果。快速切下用二乙醚麻醉的雄性Sprague-Dawley鼠(300-400克)的腹侧前列腺，并置于充氧的Krebs溶液。在这种缓冲液中室温下保存的同时，除去粘连的脂肪和相连组织。然后将前列腺悬浮于加温到37℃的含有Krebs溶液的10毫升器官浴液中，并通入95％O2和5％CO2的混合气体。Krebs溶液的组成是：118.4mMNaCL，4.7mM KCL，1.2mM MgSO4，2.5mMCaCL2，11.1mM葡萄糖，25.0mM NaHCO3和1.2mMKH2PO4，其溶于蒸馏水和去离子水中。将组织连接到一种等比例力量转换仪上，并在0.5克的负荷张力下记录等比例收缩。在加入测试化合物之前1或2小时进行平衡。通过重复浓度的1×10-6M脱氢肾上腺素首先激发次最大收缩直至获得恒定反应。在不同制剂中进行对照和测试化合物处理的实验。确定相对于脱氢肾上腺素或乙酰胆碱累积浓度(10-9M-10-4M)的浓度-反应曲线。对于测试化合物，在β兴奋剂存在下确定相对于脱氢肾上腺素或乙酰胆碱的浓度-反应曲线。
也可以按照下述测定测试化合物对人前列腺特异性效果的体外活性。
从正在进行开放式前列腺切除术的具有症状性BPH的病人身上获得前列腺组织样本。将人前列腺组织切成5至8个条状组织(每条3毫米宽，3毫米厚和15毫米长)。将条状组织垂直的置于含有20毫升Krebs-henseleit溶液的器官浴液中，该溶液的组成为(mM)：NaCL112，KCL5.9，MgCL21.2，CaCL22，NaHCO325，NaHPO41.2，葡萄糖11.5。将培养基保持于37℃和pH7.4下，并用由95％O2和5％CO2组成的混合气体平衡。施加0.5克静态张力，并通过一种力量转换换能器等比例的记录该反应。在开始实验之前使制剂平衡90分钟。
通过以累积方式直接向浴液培养基中加入药物确定脱氢肾上腺素或乙酰胆碱(10-9M-10-4M)的浓度-反应曲线。对于测试化合物来说，在化合物存在下(1至10μM)将前列腺条状组织孵育30分钟，然后向培养基中以累积的方式加入脱氢肾上腺素或乙酰胆碱以获得有测试化合物存在的浓度-反应曲线。
式I的化合物可以降低甘油三酯和胆固醇水平，并且升高高密度脂蛋白水平，因此可用于纠正一些医学状态，其中这种降低(和升高)可以带来益处。因此，它们可用于治疗高甘油三酯血证，高胆固醇血证和低HDL(高密度脂蛋白)水平状态，还可以治疗动脉粥样硬化疾病如冠状动脉粥样硬化，脑血管动脉粥样硬化和外周动脉粥样硬化，心血管疾病和相关状态。
该活性化合物也可以与其他已知可用于治疗动脉粥样硬化和相关状态的活性成分结合使用，例如降血胆固醇药(fibrate)如安妥明，benzafibrate，二甲苯氧庚酸；胆固醇生物合成抑制剂如HMG-CoA还原酶抑制剂，例如洛伐他汀，西伐他停和普伐他停；胆固醇吸收抑制剂例如β-谷固醇和(酰基辅酶A；胆固醇酰基转移酶)抑制剂例如亚油甲苄胺；阴离子交换树脂例如消胆胺，降脂2号树脂或一种交联葡聚糖的二烷基氨基烷基衍生物；烟醇，烟酸或其盐；维生素E；和拟甲状腺素。
可以根据下述步骤测定式I化合物对异常脂质血症(dyslipidemia)的活性。在控制环境的室内以每笼5个小鼠饲养C57BL/6J ob/ob小鼠(雄性，体重30-40克，Jackson Lab，BarHarbor，ME)，通过经口管给予药物(0.01至100毫克/公斤，n＝15每组)或载体(盐水)，每天给药一次，共给药3周。每天测定每只小鼠的体重，并且通过称重槽内剩余食物的重量确定每笼的食物摄取量。在研究结束时，最后剂量的化合物给药之后24小时，通过断头处死小鼠并采集血样。用VP超级系统自动分析仪(Abbott，Irving，TX)测定葡萄糖、游离脂肪酸和甘油三酯的血浆浓度。
可以根据下述步骤测定式I化合物对降低体内脂肪的活性。在控制环境的室内以每笼5个小鼠饲养C57BL/6J ob/ob小鼠(雄性，体重30-40克，Jackson Lab，Bar Harbor，ME)，食物(丸状咀嚼食物)和水任意可得到。通过经口管给予药物或载体(水)，每天给药一次，共给药3周(0.01至100毫克/公斤，n＝15每组)。每天测定每只小鼠的体重，并且通过称重槽内剩余食物的重量确定每笼的食物摄取量。在研究结束时，最后剂量的化合物给药之后24小时，称重小鼠并通过脱颈处死小鼠。从每只小鼠切下附睾的脂肪垫并称重。利用绝对体重和脂肪垫重量测定每只小鼠的脂肪与体重之比。
脂肪垫重量的减少表明总体脂肪的减少。
通过下述实施例对本发明进一步说明。尽管如此，但是，应当指出的是本发明并不局限于这些实施例的具体详细说明。
实施例1
实施例1a(4-(2-叔-丁氧基羰基氨基乙氧基)苯基)乙酸甲酯
在1.5小时内向4-羟苯基乙酸甲酯(4.00g，24.1毫摩尔)和三苯膦(9.50g，36.1毫摩尔)的THF(24毫升)搅拌溶液中同时加入2-(叔-丁氧基羰基氨基)乙醇(5.08g，36.1毫摩尔)和二乙基偶氮二羧酸盐(5.70毫升，36.1毫摩尔)的THF(各6毫升)溶液。再过三小时之后，真空浓缩反应液，并进行闪式色谱(60克硅胶，20％乙酸乙酯/己烷)得到5.78克的金黄色油状物。 1HNMR(CDCl3)δ7.15(d，2H)，6.80(d，2H)，4.95(brs，1H)，3.98(m，2H)，3.65(s，3H)，3.54(s，2H)，3.48(m，2H)1.44(s，9H).
实施例1b(4-(2-氨基乙氧基)苯基)乙酸甲酯
向冷却的(4-(2-叔-丁氧基羰基氨基乙氧基)苯基)乙酸甲酯(5.75g，18.6毫摩尔)的二氯甲烷(20毫升)搅拌溶液中加入三氟乙酸(6毫升)溶液。将所得溶液在环境温度下搅拌2小时，用乙酸乙酯稀释，再用半饱和的碳酸钠，盐水洗涤，干燥(Na2SO4)浓缩得到3.25克橘黄色油状物。
1H NMR(CDCl3)δ7.10(d，2H)，6.77(d，2H)，3.92(t，2H)，3.60(s，3H)，2.49(s，2H)，3.00 (t，2H).
实施例1c(4-(2-(2(R)-羟基-2-四唑并〔1，5-a〕吡啶-6-基乙基氨基)乙氧基)苯基)乙酸甲酯
将在美国专利5,030,640的实施例1中产生的(4-(2-氨基乙氧基)苯基)乙酸甲酯(0.56g，2.71毫摩尔)和(2R)-四唑并〔1，5-a〕吡啶-6-基)环氧己烷(0.40g，2.47毫摩尔)的甲醇溶液(7.5毫升)在回流温度下加热7小时。真空浓缩反应液，得到一种固体，将其进行闪式色谱(30％甲醇/氯仿)得到0.52克无色固体状的标题化合物。 1H NMR(CDCl3)δ8.86(s，1H)，7.92(d，1H)，7.57(d，1H)，7.15(d，2H)，6.81(d，2H)，4.83(dd，1H)，4.06(t，2H)，3.66(s，3H)，3.56(s，2H)，3.20-3.02(m，3H)，2.76(dd，1H).
实施例1d 4-(2-(2-(6-氨基吡啶-3-基)-2(R)-羟基乙氨基)乙氧基)苯基)乙酸甲酯
将(4-(2-(2(R)-羟基-2-四唑并〔1，5-a〕吡啶-6-基乙基氨基)乙氧基)苯基)乙酸甲酯(0.51g，1.37毫摩尔)和氯化亚锡二水和物(0.93g，4.12毫摩尔)的甲醇浆液(7毫升)在60℃下加热3小时。将所得澄清溶液稀释在二氯甲烷中，用半饱和的碳酸钠水溶液，盐水，洗涤，干燥(Na2SO4)和浓缩成一种0.42克泡沫状物质。闪式色谱(10％甲醇/二氯甲烷)产生一种0.22克的无色固体；熔点90-93℃。 1H NMR(CDCl3)δ7.95(s，1H)，7.40(d，1H)，7.10(d，2H)，6.78(d，2H)，6.42(d，1H)，4.54(dd，1H)，4.36(s，2H)，4.00(t，2H)，3.63(s，3H)，3.52(s，2H)，3.06-2.92(m，2H)，2.86(dd，1H)，2.68(dd，1H).
实施例1e(4-(2-(2-(6-氨基吡啶-3-基)-2(R)-羟基乙氨基)乙氧基)苯基)乙酸
向实施例1d的产物，4-(2-(2-(6-氨基吡啶-3-基)-2(R)-羟基乙氨基)乙氧基)苯基)乙酸甲酯(0.11g，0.03毫摩尔)，的甲醇(6毫升)搅拌溶液中加入水(1.5毫升)和氢氧化钾(0.07g，1.3毫摩尔)。将所得溶液在室温下搅拌4小时，并真空浓缩。使所得混合物溶于水中(2毫升)，用1N盐酸水溶液调PH值至+5.5。过滤沉淀物，并在80℃下真空干燥，得到一种0.10克的无色固体；熔点233-235℃。 1H NMR(DMSO-d6)δ7.81(s，1H)，7.33(d，1H)，7.13(d，2H)，6.86(d，2H)，6.40(d，1H)，6.00(brs， 2H)，4.78(dd，1H)，4.23(t，2H)，3.46(s，2H)，3.33(t，2H)，3.09(t，2H).实施例2
实施例2a按照实施例1a的一般方法，由2-(BOC-氨基)乙醇和4-羟基苯甲酸甲酯制备4-(2-叔-丁氧基羰基氨基乙氧基)苯甲酸甲酯；熔点85℃； 1H NMR(CDCl3)δ7.90(d，2H)，6.82(d，2H)，4.92(brs，1H)，4.00(t，2H)，3.82(s，3H)，3.49(m，2H)，1.39(s，9H).实施例2b按照实施例1b的一般方法，由实施例2a的产物制施备4-(2-氨基乙氧基)苯甲酸甲酯；熔点48℃； 1HNMR(DMSO-d6)δ7.84(d，2H)，6.97(d，2H)，3.94(t，2H)，3.77(s，3H)，2.84(t，2H).
实施例2c按照实施例1c的一般方法，由实施例2b的产物和(2R)-(四唑并〔1，5-a〕吡啶-6-基)环氧己烷制备(4-(2-(2-(2(R)-羟基-2-四唑并〔1，5-a〕吡啶-6-基乙基氨基)乙氧基)苯基)苯甲酸甲酯；1H NMR(DMSO-d6)δ9.10(s，1H)，8.10(d，1H)，7.90-7.78(m，3H)，6.96(d，2H)，5.76(d，1H)，4.86-4.77(m，1H)，4.04(t，2H)，3.76(s，3H)，2.91(t，2H)，2.83(d，2H).
实施例2d按照实施例1d的一般方法，由实施例2c的产物制备4-(2-(2-(6-氨基吡啶-3-基)-2(R)-羟基乙氨基)乙氧基)苯基)苯甲酸甲酯。然后将产物与2当量的Hcl气体在醇溶剂中结合形成二盐酸盐。熔222-224℃. 1H NMR(CDCl3)δ9.25(brd，2H)，8.20(brs，2H)，7.96-7.83(m，4H)，7.05(d，2H)，7.01(d，1H)，4.97(dd，1H)，4.37(t，2H)，3.80(s，3H)，3.44-3.10(m，4H).
实施例2e按照实施例1e的一般方法，通过水解实施例2d的产物制备4-(2-(2(6-氨基吡啶-3-基)-2(R)-羟基乙氨基)乙氧基)苯甲酸。熔点218-219℃。
1H NMR(MeOH-d4)δ8.00(d，2H)，7.92(s，1H)，7.59(d，1H)，7.06(d，2H)，6.65(d，1H)，4.96(dd，1H)，4.40(t，2H)，3.58(t，2H)，3.32-3.22(m，2H).
实施例3
实施例3a按照实施例1a的一般方法，由2-(BOC-氨基)乙醇和丙酸4-羟基苯酯制备4-(2-叔-丁氧基羰基氨基乙氧基)苯基)丙酸甲酯；分离出一种无色油状物；
1H NMR(CDCl3)δ7.04(d，2H)，6.74(d，2H)，4.95(brs，1H)，3.94(t，2H)，3.62(s，3H)，3.52-3.40(m，2H)，2.84(t，2H)，2.54(t，2H)，1.40(s，9H).
实施例3b按照实施例1b的一般方法，由实施例3a的产物制备4-(2-氨基乙氧基)苯基)丙酸甲酯；得到一种无色油状物；
1H NMR(CDCl3)δ7.00(d，2H)，6.73(d，2H)，3.87(t，2H)，3.58(s，3H)，2.97(t，2H)，2.80(t，2H)，2.50(t，2H).
实施例3c(4-(2-(2(R)-羟基-2-四唑并〔1，5-a〕吡啶-6-基乙基氨基)乙氧基)苯基)丙酸甲酯
将(4-(2-氨基乙氧基)苯基)丙酸甲酯(0.83g，3.70毫摩尔)和N-三甲基甲硅烷乙酰胺(0.81g，6.2毫摩尔)的甲苯溶液在环境温度下搅拌15分钟，然后加入(2R)-四唑并〔1，5-a〕吡啶-6-基)环氧己烷(0.50g，3.08毫摩尔)，将所得混合物在90℃温度下加热20小时。将反应液冷却到室温，加入1N盐酸水溶液(3毫升)，搅拌30分钟，并用乙酸乙酯稀释。用半饱和的碳酸钠水溶液，水，盐水洗涤乙酸乙酯溶液，干燥(Na2SO4)和真空浓缩得到一种1.2克的黄色胶状。进行闪式色谱(30％甲醇/氯仿)得到0.82克无色固体。
1H NMR(CDCl3)δ8.80(s，1H)，7.90(d，1H)，7.52(d，1H)，7.03(d，2H)，6.73(d，2H)，4.77(dd，1H)，3.98(t，2H)，3.58(s，3H)，3.08(dd，1H)，3.00(t，2H)，2.82(t，2H)，2.70(dd，1H)，2.52(t，2H).
实施例3d按照实施例1d的一般方法，由实施例3c的产物制备4-(2-(2(6-氨基吡啶-3-基)-2(R)-羟基乙氨基)乙氧基)苯基)丙酸甲酯。然后将产物与2当量的Hcl气体在醇溶剂中结合形成二盐酸盐。熔点152-155。
1HNMR(DMSO-d6)δ9.15(brd，2H)，8.12(brs，2H)，7.89(d，1H)，7.88(s，1H)，7.10(d，2H)，6.99(d，1H)，6.85(d，2H)，6.38(brs，1H)，4.95(dd，1H)，4.24(t，2H)，3.53(s，3H)，3.40-3.02(m，4H)，2.76(t，2H)，2.55(t，2H).
实施例2e按照实施例1 e的一般方法，制备4-(2-(2(6-氨基吡啶-3-基)-2(R)-羟基乙氨基)乙氧基)苯基)丙酸。熔点217-218℃。
1H NMR(DMSO-d6)δ7.84(s，1H)，7.36(d，1H)，7.12(d，2H)，6.84(d，2H)，6.42(d，2H)，6.03(brs，2H)，5.92(brs，1H)，4.80(brs，1H)，4.22(t，2H)，3.42-3.23(m，2H)，3.10(t，2H)，2.73(t，2H)，2.46(t，2H).
实施例4a按照实施例1a的一般方法，由2-(Cbz-氨基)乙醇和4-羟基苯基乙酰胺制备4-(2-苄氧基羰基氨基乙氧基)苯基)乙酰胺；熔点161-163℃；
1H NMR(DMSO-d6)δ7.45-7.37(m，1H)，7.30(s，4H)，7.10(d，2H)，6.79(d，2H)，5.00(s，2H)，3.91(t，2H)，3.15(t，2H)，3.24(s，2H).
实施例4b(4-(2-氨基乙氧基)苯基)乙酰胺
用氢(50psi)在一种Parr设备上处理(4-(2-苄氧基羰基氨基乙氧基)苯基)乙酰胺(1.00g，3.04毫摩尔)的DMF溶液(8毫升)和10％披钯木炭的浆液14小时。加热反应混合液，通过硅藻土过滤，用热的DMF(10毫升)洗涤，用乙醚(75毫升)处理合并的滤液，得到一种320克的无色固体，熔点163-165℃；
1H NMR(DMSO-d6)δ7.34(brs，2H)，7.10(d，2H)，6.80(d，2H)，3.84(t，2H)，3.23(s，2H)，2.81(t，2H).
实施例4c按照实施例3c所述，首先用三甲基甲硅烷基在氨基部位阻遏实施例4b产物，与立体有择环氧己烷反应，在酸中去阻遏，并分离，从而得到产物，(4-(2-(2(R)-羟基-2-四唑并〔1，5-a〕吡啶-6-基乙基氨基)乙氧基)苯基)乙酰胺。
实施例4d按照实施例1d所述还原实施例4c的产物，得到4-(2-(2-(6-氨基吡啶-3-基)-2(R)-羟基乙氨基)乙氧基)苯基)乙酰胺。
实施例5
实施例5a使用实施例3c的上述一般条件，由4-(2-氨基乙氧基)苯酚和(2R)-(四唑并〔1，5-a〕吡啶-6-基)环氧己烷制备(4-(2-(2(R)-羟基-2-四唑并〔1，5-a〕吡啶-6-基乙基氨基)乙氧基)苯酚。熔点146-149℃；
1H NMR(DMSO-d6)δ9.10(s，1H)，8.82(brs，1H)，8.11(d，1H)，7.84(d，1H)，6.69(d，2H)，6.60(d，2H)，5.76(s，1H)，4.82(s，1H)，3.87(t，2H)，2.90-2.66(m，4H).
实施例5b-(4-(2-(2(R)-羟基-2-四唑并〔1，5-a〕吡啶-6-基乙基氨基)乙氧基)苯氧基)乙酸甲酯
向冷却的(4-(2-(2(R)-羟基-2-四唑并〔1，5-a〕吡啶-6-基乙基氨基)乙氧基)苯酚(0.90g，2.86毫摩尔)的DMF(12毫升)搅拌溶液中加入氢化钠(60％矿物油混悬液，0.12g，3.00毫摩尔)。将所得混合物在5℃下保持5分钟，然后在环境温度下再搅拌30分钟。将反应液冷却到5℃，加入溴乙酸甲酯(0.30毫升，3.15毫摩尔)，将所得的暗色溶液在环境温度下搅拌2.5小时。反应混合物加入到乙酸乙酯中，用水，盐洗涤，干燥(Na2SO4)和真空浓缩得到一种深色油状物。进行闪式色谱(2-4％甲醇梯度氯仿溶液)得到一种0.49克次白色固体。 1H NMR(CDCl3)δ8.85(s，1H)，7.93(d，1H)，7.56(d，1H)，6.83-6.75(m，4H)，4.80(dd，1H)，4.56(s，2H)，4.00(t，2H)，3.78(s，3H)，3.16-3.00(m，3H)，2.78-2.70(dd，1H).
实施例5c(4-(2-(2-(6-氨基吡啶-3-基)-2(R)-羟基乙氨基)乙氧基)苯氧基)乙酸甲酯的二盐酸盐
按照实施例中所述使实施例5b中产生的甲基酯还原生成标题化合物(非盐)。然后使该产物与2当量的Hcl气体在醇溶剂中结合生成二盐酸盐。熔点145-148℃。
1H NMR(DMSO-d6)δ9.10(brd，2H)，8.10(brs，2H)，7.88(d，1H)，7.87(s，1H)，6.98(d，1H)，6.94-6.80(m，4H)，6.39(brs，1H)，4.95(dd，1H)，4.70(s，2H)，4.20(t，2H)，3.66(s，3H)，3.40-3.04(m，4H).
实施例5d按照实施例1e的一般方法，制备(4-(2-(2-(6-氨基吡啶-3-基)-2(R)-羟基乙氨基)乙氧基)苯氧基)乙酸。熔点203-205℃。
1H NMR(DMSO-d6)δ7.80(s，1H)，7.33(d，1H)，6.76(s，4H)，5.87(brs，2H)，4.67(t，1H)，4.38(s，2H)，4.05(t，2H)，3，15(t，2H)，2.94(t，2H).