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1、(10)申请公布号 CN 102181371 A (43)申请公布日 2011.09.14 CN 102181371 A *CN102181371A* (21)申请号 201110046123.5 (22)申请日 2011.02.25 CCTCC M 2011021 2011.01.14 C12N 1/16(2006.01) C12R 1/645(2006.01) (71)申请人 浙江深友生物技术有限公司 地址 313000 浙江省湖州市经济开发区紫荆 路 501 号 (72)发明人 茅惠忠 何成保 冯年群 宋明根 (74)专利代理机构 湖州金卫知识产权代理事务 所 ( 普通合伙 ) 3323。
2、2 代理人 纪元 赵卫康 (54) 发明名称 一种酵母及利用该酵母生产富硒酵母的方法 (57) 摘要 本发明涉及一种酵母及利用该酵母生产富硒 酵母的方法， 属于发酵技术领域。一种酵母， 它的 保藏编号为 ： CCTCCM2011021。本发明生产富硒酵 母的方法它的硒转化率为 95 99%， 在生产过程 中， 经过步骤的发酵罐中的混合液体， 每升含酵 母60g100g， 具有硒转化率、 有机硒产率高的优 点。 (83)生物保藏信息 (51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书 1 页 说明书 4 页 CN 102181373 A1/1 页 2 。
3、1. 一种酵母， 它的保藏编号为 ： CCTCC M 2011021。 2. 利用上述酵母生产富硒酵母 （也称酵母硒或硒酵母） 的方法， 包括以下步骤 ： 发酵培养 ： 将培养基投入到发酵罐中， 灭菌， 然后将保藏编号为 CCTCC M 2011021 的 酵母制成发酵种子接种至发酵罐中的培养基上进行培养 ； 反馈控制流加培养 ： 控制发酵温度 28 32， PH5.0 5.4 ； 发酵初始， 在发酵罐 中， 以呼吸熵为依据反馈控制流加可发酵还原糖水溶液， 控制发酵呼吸熵在 0.9 1.0 之 间 ； 发酵 16 22 小时后， 以发酵罐中无机硒含量为依据反馈控制流加无机硒盐水溶液， 控 制发。
4、酵罐中的混合液体中无机硒盐含量在 50 200mg/L ； 无机硒盐流加结束后， 继续培养 2 4 小时 ； 酵母泥制备 ： 将经过上述步骤的发酵罐中的混合液体通过离心、 洗涤、 过滤， 制得酵 母泥。 3. 根据权利要求 2 所述的一种生产富硒酵母的方法， 其特征在于 ： 所述培养基包括以 下组分 ： 可发酵还原糖 400 500 重量份， 含氨基氮的有机氮源 50 60 重量份， 磷酸氢二铵 7 8 重量份， 硫酸镁 4 5 重量份。 4. 根据权利要求 2 或 3 所述的一种生产富硒酵母的方法， 其特征在于 ： 在流加无机硒 盐水溶液过程中， 每隔 5 10 小时补加一次含氨基氮的有机氮。
5、源 ； 所述无机硒盐水溶液为 硒酸盐水溶液、 亚硒酸盐水溶液或硒酸盐与亚硒酸盐的混合物的水溶液 ； 所述含氨基氮的 有机氮源为蛋白胨、 酵母提取物、 植物蛋白、 氨基酸中的一种或多种。 5. 根据权利要求 2 或 3 所述的一种生产富硒酵母的方法， 其特征在于 ： 它还包括步 骤成品制备 ： 将所述酵母泥调浆， 然后通过干燥的方式制得粉末 ； 所述干燥具体为， 采用 160200的温度进行喷雾干燥或在46Kpa的压力下进行蒸汽压力滚筒干燥， 干燥后 制得淡黄色粉末， 该淡黄色粉末水分含量小于 6wt%。 6. 根据权利要求 2 或 3 所述的一种生产富硒酵母的方法， 其特征在于 ： 它还包括步。
6、骤 成品制备 ： 将所述酵母泥通过挤压造粒制成颗粒， 再采用温度分级段流化干燥， 制得淡黄 色颗粒， 该颗粒的水分含量小于 6wt%。 7. 根据权利要求 2 或 3 所述的一种生产富硒酵母的方法， 其特征在于 ： 所述培养基中 还含有 Zn2+、 Cu2+、 Fe2+、 Mn2+。 8. 根据权利要求 4 所述的一种生产富硒酵母的方法， 其特征在于 ： 所述无机硒水溶液 的浓度为 300 500g/L ； 所述培养基中的可发酵还原糖以水溶液的形式存在， 并且该可发 酵还原糖水溶液的浓度为 400 700g/L。 9. 根据权利要求 3 所述的一种生产富硒酵母的方法， 其特征在于 ： 在整个步。
7、骤阶段， 控制发酵温度为 28.0 32.0。 10. 根据权利要求 3 所述的一种生产富硒酵母的方法， 其特征在于 ： 经过步骤的发酵 罐中的混合液体， 每升含酵母 60g 100g ； 经过步骤的发酵罐中的混合液体中， 无机硒转 化率为 95 99%， 硒代蛋氨酸占有机硒总量的 65 70wt%。 权 利 要 求 书 CN 102181371 A CN 102181373 A1/4 页 3 一种酵母及利用该酵母生产富硒酵母的方法 技术领域 0001 本发明涉及一种酵母及利用该酵母生产富硒酵母 （也称酵母硒或硒酵母） 的方法， 属于发酵技术领域。 背景技术 0002 硒 是 生 物 体 中 。
8、重 要 的 微 量 元 素， 是 谷 胱 甘 肽 过 氧 化 物 酶 (glutathione peroxidase ,GSHPX) 的辅助因子 , 具有抗癌、 抗糖尿病、 抗氧化、 提高机体免疫力、 促进生 长等多种生物功能。 但是使用无机硒作为药品或者保健品不仅不容易被机体吸收还会对机 体产生副作用。富硒酵母作为最常用的有机硒产品， 能更好地被机体利用。 0003 所谓富硒酵母是利用酵母在生长过程中对硒的自主吸收和转化， 使硒与酵母体内 的蛋白质和多糖结合， 从而消除了无机硒对生物体的毒副作用， 使硒能够更高效， 更安全地 被机体吸收利用。另外酵母中有丰富的蛋白质， 维生素等营养成分， 利。
9、于机体的生长。目前 国内外对富硒酵母的研究和生产中普遍存在着硒转化率低、 产率低等问题。 发明内容 0004 本发明的目的是为解决上述技术问题， 提供一种酵母。 0005 本发明的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的 ： 一种酵母， 它的保藏编号为 ： CCTCC M 2011021。 该酵母为酿酒酵母 SY32， 拉丁名称为 Saccharomyces cerevisiae SY32。该酵母保藏 于中国典型培养物保藏中心。保藏日期为 2011 年 1 月 14 日。 0006 本发明的另一个目的是提供一种利用上述酵母生产富硒酵母的方法， 它包括以下 步骤 ： 发酵培养 ： 将培养基投入到。
10、发酵罐中， 灭菌， 然后以保藏编号为 CCTCC M 2011021 的 酵母为发酵种子接种至发酵罐中的培养基上进行培养 ； 反馈控制流加培养 ： 控制发酵温度 28 32， PH5.0 5.4 ； 发酵初始， 在发酵罐 中， 以呼吸熵为依据反馈控制流加可发酵还原糖水溶液， 控制发酵呼吸熵在 0.9 1.0 之 间 ； 发酵 16 22 小时后， 以发酵罐中无机硒含量为依据反馈控制流加无机硒盐水溶液， 控 制发酵罐中的混合液体中无机硒盐含量在 50 200mg/L ； 无机硒盐流加结束后， 继续培养 2 4 小时 ； 酵母泥制备 ： 将经过上述步骤的发酵罐中的混合液体通过离心、 洗涤、 过滤，。
11、 制得酵 母泥。 0007 作为上述技术方案的优选， 所述培养基包括以下组分 ： 可发酵还原糖 400 500 重量份， 含氨基氮的有机氮源 50 60 重量份， 磷酸氢二铵 7 8 重量份， 硫酸镁 4 5 重量份。 说 明 书 CN 102181371 A CN 102181373 A2/4 页 4 0008 作为上述技术方案的优选， 在流加无机硒盐水溶液过程中， 每隔 5 10 小时补加 一次含氨基氮的有机氮源 ； 所述无机硒盐水溶液为硒酸盐水溶液、 亚硒酸盐水溶液或硒酸 盐与亚硒酸盐的混合物的水溶液 ； 所述含氨基氮的有机氮源为蛋白胨、 酵母提取物、 植物蛋 白、 氨基酸中的一种或多种。
12、。 0009 作为上述技术方案的优选， 它还包括步骤成品制备 ： 将所述酵母泥调浆， 然后通 过干燥的方式制得粉末 ； 所述干燥具体为， 采用 160 200的温度进行喷雾干燥或在 4 6Kpa 的压力下进行蒸汽压力滚筒干燥， 干燥后制得淡黄色粉末， 该淡黄色粉末水分含 量小于 6wt%。 0010 作为上述技术方案的优选， 它还包括步骤成品制备 ： 将所述酵母泥通过挤压造 粒制成颗粒， 再采用温度分级段流化干燥， 制得淡黄色颗粒， 该颗粒的水分含量小于 6wt%。 0011 作为上述技术方案的优选， 所述培养基中还含有 Zn2+、 Cu2+、 Fe2+、 Mn2+。 0012 作为上述技术方。
13、案的优选， 所述无机硒水溶液的浓度为 300 500g/L ； 所述培养 基中的可发酵还原糖以水溶液的形式存在， 并且该可发酵还原糖水溶液的浓度为 400 700g/L。 0013 作为上述技术方案的优选， 在整个步骤阶段， 控制发酵温度为 28.0 32.0。 0014 作为上述技术方案的优选， 经过步骤的发酵罐中的混合液体， 每升含酵母 60g 100g ； 经过步骤的发酵罐中的混合液体中， 无机硒转化率为 95 99%， 硒代蛋氨酸 占有机硒总量的 65 70wt%。 0015 本发明具有以下有益效果 ： 本发明生产富硒酵母的方法它的硒转化率为 95 99%， 在生产过程中， 经过步骤的。
14、 发酵罐中的混合液体， 每升含酵母 60g 100g， 具有硒转化率、 有机硒产率高的优点。使 用本发明方法制得的产品经江南大学分析测试中心检测， 富硒酵母产品硒含量 2239mg/ kg( 粉状 ) 和 2106 mg/kg( 颗粒 ) ； 经法国国家科学研究院检测， 富硒酵母硒含量 3.06 mg/ g （即 3060 mg/kg） ， 同时法国国家科学研究院还检测到该富硒酵母蛋白水解后， 硒代蛋氨酸 及硒代半胱氨酸的含量分别为2.05 mg/g和0.31 mg/g， 因此可推断出硒蛋氨酸占有机硒总 量的 65 70wt%， 这也是本发明的一大特点， 另外， 样品中未检出无机硒。 0016。
15、 本发明发酵工艺通过反馈控制， 因此本发明还具有操作易于实现、 控制精度高、 发 酵水平稳定的优点。 具体实施方式 0017 本具体实施例仅仅是对本发明的解释， 其并不是对本发明的限制， 本领域技术人 员在阅读完本说明书后可以根据需要对本实施例做出没有创造性贡献的修改， 但只要在本 发明的权利要求范围内都受到专利法的保护。 0018 实施例一 发酵培养 ： 将培养基投入到 50 吨发酵罐中， 高压 105 121灭菌 30 分钟 ； 将保藏 编号为 CCTCC M 2011021 的酵母制成种子， 然后通过事先灭好菌的管道利用压差接入发酵 罐中进行培养 ； 培养基用量如下 ： 可发酵还原糖 9。
16、000kg 说 明 书 CN 102181371 A CN 102181373 A3/4 页 5 含氨基氮 5wt% 的有机氮源 （蛋白胨或酵母提取物） 1000kg 含量 98wt% 的磷酸氢二铵 120kg 含量 98wt% 硫酸镁 50kg 含量 20wt% 的碱液 1000kg 反馈控制流加培养 ： 发酵温度 29.0 29.5， PH4.5 5.5 ； 发酵前期， 以呼吸熵 依据反馈控制流加葡萄糖水溶液， 使酵母快速繁殖增长， 控制控制呼吸熵 RQ 在 0.9 1.0 ； 发酵 22 小时开始流加亚硒酸钠硒酸盐或亚硒酸盐水溶液， 同时以以呼吸熵依据反馈控制 流加葡萄糖水溶液， 以发酵。
17、液中硒无机硒含量为依据， 控制流加硒酸盐或亚硒酸盐水溶液 的速度， 控制发酵液中无机硒含量在 50 100mg/L， 亚硒酸钠流加结束后， 培养 2 小时 ； 补加氮源 ： 在流加硒酸盐或亚硒酸盐水溶液过程中， 每隔 8 小时补加一次有机氮源 （蛋白胨、 酵母提取物、 植物蛋白、 单一或复合氨基酸） ， 补加量 1g/L ； 酵母泥制备 ： 将步骤经过上述步骤制得的发酵液通过碟片离心机离心， 洗涤， 板框压 滤机压滤或真空吸滤， 制得酵母泥 ； 干燥 ： 将酵母泥调浆， 采用 180喷雾干燥， 干燥后制得淡黄色粉末状产品， 该产品 水分小于 6wt% ； 包装 ： 得到的富硒酵母产品采用铝箔袋。
18、、 塑料袋和纸桶等多种包装， 包装成不同规格 的各类富硒酵母产品。 0019 所得发酵液富硒酵母干重达到 100g/L， 得到的每 kg 富硒酵母产品含有机硒 1000mg， 其中硒蛋氨酸含量大于 67%， 无机硒含量不超过总硒含量 2%。富硒酵母产品以单一 形式或预混料形式用于食品、 保健品或饲料添加剂。 0020 实施例二 发酵培养 ： 将培养基投入到 50 吨发酵罐中， 高压 105 121灭菌 30 分钟 ； 将保藏 编号为 CCTCC M 2011021 的酵母制成种子， 然后通过事先灭好菌的管道利用压差接入发酵 罐中进行培养 ； 培养基用量如下 ： 可发酵还原糖 8500kg 含氨。
19、基氮 5wt% 的有机氮源 （蛋白胨或酵母提取物） 1000kg 含量 98wt% 的磷酸氢二铵 120kg 含量 98wt% 硫酸镁 50kg 含量 20wt% 的碱液 1000kg 反馈控制流加培养 ： 发酵温度 29.0 29.5， PH4.5 5.5 ； 发酵前期， 以呼吸熵 依据反馈控制流加葡萄糖水溶液， 使酵母快速繁殖增长， 控制控制呼吸熵 RQ 在 0.9 1.0 ； 发酵 18 小时开始流加硒酸盐或亚硒酸盐水溶液， 同时以以呼吸熵依据反馈控制流加葡萄 糖水溶液， 以发酵液中硒无机硒含量为依据， 控制流加硒酸盐或亚硒酸盐水溶液的速度， 控 制发酵液中无机硒含量在 80 120mg。
20、/L， 亚硒酸钠流加结束后， 培养 2 小时 ； 补加氮源 ： 在流加硒酸盐或亚硒酸盐水溶液过程中， 每隔 8 小时补加一次有机氮源 （蛋白胨、 酵母提取物、 、 植物蛋白、 单一或复合氨基酸） ， 补加量 1g/L ； 酵母泥制备 ： 将经过上述步骤制得的发酵液通过碟片离心机离心， 洗涤， 板框压滤机 压滤或真空吸滤， 制得酵母泥 ； 说 明 书 CN 102181371 A CN 102181373 A4/4 页 6 干燥 ： 将酵母泥调浆， 采用 4Kpa 蒸汽压力滚筒干燥， 干燥后粉碎制得淡黄色粉末状 产品， 水分小于 6wt% ； 包装 ： 得到的富硒酵母产品采用铝箔袋、 塑料袋和纸。
21、桶等多种包装， 包装成不同规格 的各类富硒酵母产品。 0021 所得发酵液富硒酵母干重达到 80g/L， 得到的每 kg 富硒酵母产品含有机硒 2000mg， 其中硒蛋氨酸含量大于 67%， 无机硒含量不超过总硒含量 2%。富硒酵母产品以单一 形式或预混料形式用于食品、 保健品或饲料添加剂。 0022 实施例三 发酵培养 ： 将培养基投入到 50 吨发酵罐中， 高压 105 110灭菌 30 分钟 ； 将保藏 编号为 CCTCC M 2011021 的酵母制成种子， 然后通过事先灭好菌的管道利用压差接入发酵 罐中进行培养 ； 培养基用量如下 ： 可发酵还原糖葡萄糖 9000kg 含氨基氮 5w。
22、t% 的有机氮源 （蛋白胨或酵母提取物） 1200kg 含量 98wt% 的磷酸氢二铵 120kg 含量 98wt% 硫酸镁 60kg 含量 20wt% 的碱液 1000kg 反馈控制流加培养 ： 发酵温度 29.0 29.5， PH4.5 5.5 ； 发酵前期， 以呼吸熵 依据反馈控制流加葡萄糖水溶液， 使酵母快速繁殖增长， 控制控制呼吸熵 RQ 在 0.9 1.0 ； 发酵 20 小时开始流加硒酸盐或亚硒酸盐水溶液， 同时以以呼吸熵依据反馈控制流加葡萄 糖水溶液， 以发酵液中硒无机硒含量为依据， 控制流加硒酸盐或亚硒酸盐水溶液的速度， 控 制发酵液中无机硒含量在 80 120mg/L， 亚。
23、硒酸钠流加结束后， 培养 2 小时 ； 补加氮源 ： 在流加硒酸盐或亚硒酸盐水溶液过程中， 每隔 8 小时补加一次有机氮源 （蛋白胨、 酵母提取物、 植物蛋白、 单一或复合氨基酸） ， 补加量 1g/L ； 酵母泥制备 ： 将经过上述步骤制得的发酵液通过碟片离心机离心， 洗涤， 板框压滤机 压滤或真空吸滤， 制得酵母泥 ； 干燥 ： 将酵母泥挤压造粒， 再流化干燥， 干燥后制得淡黄色至黄色颗粒状产品， 该产 品水分小于 6wt% ； 包装 ： 得到的富硒酵母产品采用铝箔袋、 塑料袋和纸桶等多种包装， 包装成不同规格 的各类富硒酵母产品。 0023 所得发酵液富硒酵母干重达到 60g/L， 得到的每 kg 富硒酵母产品含有机硒 3000mg， 其中硒蛋氨酸含量大于 67%， 无机硒含量不超过总硒含量 2%。富硒酵母产品以单一 形式或预混料形式用于食品、 保健品或饲料添加剂。 说 明 书 CN 102181371 A 。