二芳基亚甲基哌啶衍生物及其作为Δ阿片样受体激动剂的用途.pdf

本发明制备了下列通式化合物(式(I))，其中R1、R2、R3、R4和R5同说明书中的定义，及其盐、对映异构体和含有所述化合物的药物组合物。它们可用于治疗，尤其可用于治疗疼痛和焦虑。

1.  式I化合物、其可药用盐、非对映异构体、对映异构体或其混合物：

其中，
R¹选自氢、C_1-6烷基-O-C(＝O)-、任选取代的C_1-6烷基、任选取代的C_3-6环烷基、任选取代的C_6-10芳基、任选取代的C_2-9杂环基、任选取代的C_6-10芳基-C_1-3烷基、任选取代的C_2-9杂环基-C_1-3烷基，和其中，D是二价基团，其选自任选取代的C_1-6亚烷基、任选取代的亚苯基、任选取代的亚苯基-C_1-3烷基、任选取代的C_3-5亚杂芳基和任选取代的C_3-5亚杂芳基-C_1-3烷基；
R²和R³独立地选自氢、任选取代的C_1-6烷基和任选取代的C_3-6环烷基；和
R⁴和R⁵独立地选自-H、任选取代的C_1-6烷基、任选取代的C_3-8环烷基、任选取代的C_6-10芳基、任选取代的C_2-9杂环基、任选取代的C_6-10芳基-C_1-6烷基、任选取代的C_2-9杂环基-C_1-6烷基、-C(＝O)-NR⁸R⁹和-C(＝O)-R⁸，其中R⁸和R⁹独立地选自-H、任选取代的C_1-6烷基、任选取代的C_3-8环烷基、任选取代的C_6-10芳基、任选取代的C_2-9杂环基、任选取代的C_6-10芳基-C_1-6烷基和任选取代的C_2-9杂环基-C_1-6烷基。

2.  根据权利要求1的化合物，
其中，R¹选自氢、C_1-6烷基-O-C(＝O)-、C_1-6烷基、C_3-6环烷基、苯基、苯基-C_1-3烷基、C_3-5杂环基、和C_3-5杂环基-C_1-3烷基，其中所述C_1-6烷基、C_3-6环烷基、苯基、苯基-C_1-3烷基、C_3-5杂环基和C_3-5杂环基-C_1-3烷基任选被一个或多个选自下列的基团所取代：C_1-6烷基、卤代C_1-6烷基、-OH、-NO₂、-CF₃、C_1-6烷氧基、氯、氟、溴和碘；
R²和R³是乙基；和
R⁴和R⁵独立地选自-H、任选取代的苯基、任选取代的C_3-5杂环基、任选取代的苯基-C_1-3烷基、任选取代的C_3-5杂环基-C_1-3烷基、任选取代的C_1-6烷基、任选取代的C_3-6环烷基、任选取代的C_3-6环烷基-C_1-3烷基、-C(＝O)-N-R⁸R⁹和-C(＝O)-R⁸，其中R⁸和R⁹独立地选自-H、任选取代的苯基、任选取代的C_3-5杂环基、任选取代的苯基-C_1-3烷基、任选取代的C_3-5杂环基-C_1-3烷基、任选取代的C_1-6烷基、任选取代的C_3-6环烷基、任选取代的C_3-6环烷基-C_1-3烷基。

3.  根据权利要求1的化合物，
其中R¹选自氢、C_1-6烷基-O-C(＝O)-、C_1-6烷基、C_3-6环烷基、苯基-C_1-3烷基和C_3-5杂芳基-C_1-3烷基，其中所述C_1-6烷基、C_3-6环烷基、苯基-C_1-3烷基和C_3-5杂芳基-C_1-3烷基任选被一个或多个选自下列的基团所取代：C_1-6烷基、卤代C_1-6烷基、-OH、-NO₂、-CF₃、C_1-6烷氧基、氯、氟、溴和碘；
R²和R³是乙基；和
R⁴和R⁵是氢。

4.  根据权利要求1的化合物，其中
R¹选自C_2-4烷基、苄基、噻唑基甲基、呋喃基甲基、吡啶基甲基和噻吩基甲基，其中所述C_2-4烷基、苄基、噻唑基甲基、呋喃基甲基、吡啶基甲基和噻吩基甲基任选被一个或多个选自下列的基团所取代：C_1-3烷基、-OH、-CF₃、C_1-3烷氧基、氯和氟；
R²和R³是乙基；和
R⁴和R⁵是氢。

5.  根据权利要求1的化合物，
其中R¹是R⁶-CH₂-，其中R⁶选自2-吡啶基、2-噻吩基、2-呋喃基、5-氯-2-呋喃基、5-甲基-2-呋喃基、3-甲基-2-噻吩基、3-氯-2-噻吩基、5-氯-2-噻吩基、5-甲基-2-噻吩基、6-氯-3-吡啶基、2-羟基乙基、2-甲氧基-乙基、甲氧基甲基、3-吡啶基、4-吡啶基、4-噻唑基、5-噻唑基、正丙基和6-甲基-2-吡啶基；
R²和R³是乙基；和
R⁴和R⁵是氢。

6.  化合物，其选自：
4-[[4-[(二乙基氨基)羰基]苯基][1-(2-吡啶基甲基)-4-哌啶亚基]甲基]苯甲酰胺；
4-[[4-[(二乙基氨基)羰基]苯基][1-(2-噻吩基甲基)-4-哌啶亚基]甲基]苯甲酰胺；
4-[[4-[(二乙基氨基)羰基]苯基][1-(2-呋喃基甲基)-4-哌啶亚基]甲基]苯甲酰胺；
4-[[1-[(5-氯-2-呋喃基)甲基]-4-哌啶亚基][4-[(二乙基氨基)羰基]苯基]甲基]苯甲酰胺；
4-[[4-[(二乙基氨基)羰基]苯基][1-[(5-甲基-2-呋喃基)甲基]-4-哌啶亚基]甲基]苯甲酰胺；
4-[[4-[(二乙基氨基)羰基]苯基][1-[(3-甲基-2-噻吩基)甲基]-4-哌啶亚基]甲基]苯甲酰胺；
4-[[1-[(3-氯-2-噻吩基)甲基]-4-哌啶亚基][4-[(二乙基氨基)羰基]苯基]甲基]苯甲酰胺；
4-[[1-[(5-氯-2-噻吩基)甲基]-4-哌啶亚基][4-[(二乙基氨基)羰基]苯基]甲基]苯甲酰胺；
4-[[4-[(二乙基氨基)羰基]苯基][1-[(5-甲基-2-噻吩基)甲基]-4-哌啶亚基]甲基]苯甲酰胺；
4-[[1-[(6-氯-3-吡啶基)甲基]-4-哌啶亚基][4-[(二乙基氨基)羰基]苯基]甲基]-苯甲酰胺；
4-[[4-[(二乙基氨基)羰基]苯基][1-(3-羟基丙基)-4-哌啶亚基]甲基]苯甲酰胺；
4-[[4-[(二乙基氨基)羰基]苯基][1-(2-甲氧基乙基)-4-哌啶亚基]甲基]苯甲酰胺；
4-[[4-[(二乙基氨基)羰基]苯基][1-(3-吡啶基甲基)-4-哌啶亚基]甲基]苯甲酰胺；
4-[[4-[(二乙基氨基)羰基]苯基][1-(4-吡啶基甲基)-4-哌啶亚基]甲基]苯甲酰胺；
4-[[4-[(二乙基氨基)羰基]苯基][1-[(6-甲基-2-吡啶基)甲基]-4-哌啶亚基]甲基]苯甲酰胺；
4-[[4-[(二乙基氨基)羰基]苯基][1-(3-甲氧基丙基)-4-哌啶亚基]甲基]苯甲酰胺；
4-[[4-[(二乙基氨基)羰基]苯基][1-(苯基甲基)-4-哌啶亚基]甲基]-苯甲酰胺；
4-[[4-[(二乙基氨基)羰基]苯基][1-(4-噻唑基甲基)-4-哌啶亚基]甲基]苯甲酰胺；
3-[[4-[(二乙基氨基)羰基]苯基][1-(5-噻唑基甲基)-4-哌啶亚基]甲基]苯甲酰胺；
4-[[4-(氨基羰基)苯基](1-丁基哌啶-4-亚基)甲基]-N，N-二乙基苯甲酰胺；及其可药用盐。

7.  用作药物的根据权利要求1-6中任一项的化合物。

8.  根据权利要求1-6中任一项的化合物在制备用于治疗疼痛、焦虑或功能性胃肠道病症的药物中的用途。

9.  药物组合物，其含有根据权利要求1-6中任一项的化合物和可药用载体。

10.  治疗温血动物疼痛的方法，所述方法包括对需要所述治疗的所述动物给药治疗有效量的根据权利要求1-6中任一项的化合物的步骤。

11.  治疗温血动物焦虑的方法，所述方法包括对需要所述治疗的所述动物给药治疗有效量的根据权利要求1-6中任一项的化合物的步骤。

12.  制备式II化合物的方法，

其包括：使式III化合物与R⁷-CH₂X或R⁷-CHO反应，

其中，
R²和R³是乙基；
X选自Cl、I、Br、-OTs和-OMs；
R⁴和R⁵独立地选自-H、任选取代的苯基、任选取代的C_3-5杂环基、任选取代的苯基-C_1-3烷基、任选取代的C_3-5杂环基-C_1-3烷基、任选取代的C_1-6烷基、任选取代的C_3-6环烷基、任选取代的C_3-6环烷基-C_1-3烷基、-C(＝O)-N-R⁸R⁹和-C(＝O)-R⁸，其中R⁸和R⁹独立地选自-H、任选取代的苯基、任选取代的C_3-5杂环基、任选取代的苯基-C_1-3烷基、任选取代的C_3-5杂环基-C_1-3烷基、任选取代的C_1-6烷基、任选取代的C_3-6环烷基、任选取代的C_3-6环烷基-C_1-3烷基；
R⁷选自C_1-6烷基、C_3-6环烷基、苯基、苯基-C_1-3烷基、C_3-5杂芳基和C_3-5杂芳基-C_1-3烷基，其中所述C_1-6烷基、C_3-6环烷基、苯基、苯基-C_1-3烷基、C_3-5杂芳基和C_3-5杂芳基-C_1-3烷基任选被一个或多个选自下列的基团所取代：C_1-6烷基、卤代C_1-6烷基、-OH、-NO₂、-CF₃、C_1-6烷氧基、氯、氟、溴和碘；和
D为选自下列的二价基团：任选取代的C_1-6亚烷基、任选取代的亚苯基、任选取代的亚苯基-C_1-3烷基、任选取代的C_3-5亚杂芳基和任选取代的C_3-5亚杂芳基-C_1-3烷基。

13.  制备式I化合物的方法，

其包括：使式IV化合物与式V化合物反应，

其中，
其中，R¹选自C_1-6烷基-O-C(＝O)-、C_1-6烷基、C_3-6环烷基、苯基、苯基-C_1-3烷基、C_3-5杂环基和C_3-5杂环基-C_1-3烷基，其中所述C_1-6烷基、C_3-6环烷基、苯基、苯基-C_1-3烷基、C_3-5杂环基和C_3-5杂环基-C_1-3烷基任选被一个或多个选自下列的基团所取代：C_1-6烷基、卤代C_1-6烷基、-OH、-NO₂、-CF₃、C_1-6烷氧基、氯、氟、溴和碘；
D是选自下列的二价基团：任选取代的C_1-6亚烷基、任选取代的亚苯基、任选取代的亚苯基-C_1-3烷基、任选取代的C_3-5亚杂芳基和任选取代的C_3-5亚杂芳基-C_1-3烷基；
X选自I、Br和Cl；
R¹⁰选自H和C_1-6烷基，或(R¹⁰O)₂B-是
R²和R³是乙基；和
R⁴和R⁵独立地选自-H、任选取代的苯基、任选取代的C_3-5杂环基、任选取代的苯基-C_1-3烷基、任选取代的C_3-5杂环基-C_1-3烷基、任选取代的C_1-6烷基、任选取代的C_3-6环烷基、任选取代的C_3-6环烷基-C_1-3烷基、-C(＝O)-N-R⁸R⁹和-C(＝O)-R⁸，其中R⁸和R⁹独立地选自-H、任选取代的苯基、任选取代的C_3-5杂环基、任选取代的苯基-C_1-3烷基、任选取代的C_3-5杂环基-C_1-3烷基、任选取代的C_1-6烷基、任选取代的C_3-6环烷基、任选取代的C_3-6环烷基-C_1-3烷基。

二芳基亚甲基哌啶衍生物及其作为δ阿片样受体激动剂的用途
发明领域
本发明涉及新化合物、它们的制备方法、用途以及含有所述新化合物的药物组合物。该新化合物可用于治疗，尤其可用于治疗疼痛、焦虑和功能性胃肠道病症(functional gastrointestinal disorders)。
发明背景
现已证实，受体在诸如循环和痛觉系统的许多身体机能中起作用。因此，发现δ受体配体作为镇痛药和/或抗高血压药可能具有潜在的用途。δ受体配体还显示出具有免疫调节活性。
目前已经确定了至少三种不同的阿片样受体(μ、δ和κ)，并且，所有这三种受体均明显存在于包括人在内的许多物种的中枢和外周神经系统中。在各种动物模型中，当激活一种或多种这些受体时，观察到痛觉缺失。
极少有例外，目前可获得的选择性阿片样δ配体在性质上均为肽类，且不适合全身途径(systemic routes)给药。非肽类δ-激动剂的一个实例是SNC80(Bilsky E.J.等，Journal of Pharmacology and ExperimentalTherapeutics，273(1)，pp.359-366(1995))。
现有技术中已确定的许多δ激动剂化合物具有很多缺点，这是因为，它们的药物动力学差，在通过全身途径给药时无止痛作用。此外，现还证明，当全身给药时，许多这些δ激动剂化合物显示出明显的惊厥作用。
Delorme等人在美国专利号6,187,792中描述了一些δ-激动剂。
然而，仍需要改进的δ-激动剂。
发明内容
因此，本发明的问题是寻找新的镇痛药，这种镇痛药具有改善的镇痛作用，而且具有优于现有μ激动剂的改善的副作用模式并能够增强的全身性效力(systemic efficacy)。
我们现已发现某些化合物具有惊人的改善特性，即，具有改善的δ-激动剂效力、体内效力、药物动力学、生物利用度、体外稳定性和/或低毒性。
因此，本发明某些实施方案的目的是提供改进的δ受体配体。
除非本说明书中另有说明，本说明书中使用的命名法普遍遵循在Nomenclature of Organic Chemistry，Sections A，B，C，D，E，F，and H，PergamonPress，Oxford，1979中规定的实例和规则，由于其中提供了示范性化学结构命名和化学结构命名规则，因此引入本发明作为参考。任选地，用下述化学命名程序也可以得到化合物名称：ACD/ChemSketch，Version5.09/September 2001，Advanced Chemistry Development，Inc.，Toronto，Canada。
单独或作为前缀使用的术语“C_m-n”或“C_m-n基团”是指具有m至n个碳原子的任何基团。
单独或作为后缀或前缀使用的术语“烃”是指最多具有14个碳原子且仅含碳和氢原子的任何结构。
单独或作为后缀或前缀使用的术语“烃基”是指从烃中去掉一个或多个氢后得到的任何结构。
单独或作为后缀或前缀使用的术语“烷基”是指含有约1至12个碳原子的直链或支链一价烃基。除非另有说明，“烷基”一般包括饱和烷基和不饱和烷基。
单独或作为后缀或前缀使用的术语“亚烷基”是指含有约1至12个碳原子的直链或支链二价烃基，该基团用于将两个结构连接在一起。
单独或作为后缀或前缀使用的术语“链烯基”是指具有至少一个碳-碳双键且含有至少2个至最多约12个碳原子的直链或支链的一价烃基。
单独或作为后缀或前缀使用的术语“炔基”是指具有至少一个碳-碳三键且含有至少2个至最多约12个碳原子的直链或支链一价烃基。
单独或作为后缀或前缀使用的术语“环烷基”是指含有至少3个至最多约12个碳原子的含一价环的烃基。
单独或作为后缀或前缀使用的术语“环烯基”是指具有至少一个碳-碳双键且含有至少3个至最多约12个碳原子的含一价环的烃基。
单独或作为后缀或前缀使用的术语“环炔基”是指具有至少一个碳-碳三键且含有约7个至最多约12个碳原子的含一价环的烃基。
单独或作为后缀或前缀使用的术语“芳基”是指具有一个或多个多不饱和芳香碳环(例如，4n+2个非定域电子)，且含有5个至最多约14个碳原子的一价烃基。
单独或作为后缀或前缀使用的术语“亚芳基”是指具有一个或多个多不饱和芳香碳环(例如，4n+2个非定域电子)，且含有5个至最多约14个碳原子的二价烃基，该基团用于将两个结构连接在一起。
单独或作为后缀或前缀使用的术语“杂环”是指含环结构或分子，其具有一个或多个独立选自N、O和S的多价杂原子作为环的一部分，且环上包括至少3个至最多约20个原子。杂环可以是饱和的或不饱和的，含有一个或多个双键的杂环，并且该杂环可以含有多于一个环。当杂环含有不止一个环时，所述环可以是稠环或非稠合环。稠合环一般是指至少两个环之间共享两个原子。杂环可以具有芳香性或可以没有芳香性。
单独或作为后缀或前缀使用的术语“杂烷基”是指用一个或多个选自N、O和S的杂原子替代烷基的一个或多个碳原子所得到的基团。
单独或作为后缀或前缀使用的术语“杂芳族”是指具有一个或多个独立选自N、O和S的多价杂原子作为环结构的一部分且环上含有至少3个至最多约20个原子的含环结构或分子，其中该含环结构或分子具有芳香性(例如，4n+2个非定域电子)。
单独或作为后缀或前缀使用的术语“杂环基团”、“杂环部分”、“杂环的”或“杂环并”是指从杂环上除去一个或多个氢原子所得到的基团。
单独或作为后缀或前缀使用的术语“杂环基”是指从杂环上除去一个氢原子所得到的一价基团。
单独或作为后缀或前缀使用的术语“亚杂环基”是指从杂环上除去两个氢原子所得到地二价基团，其用于将两个结构连接在一起。
单独或作为后缀或前缀使用的术语“杂芳基”是指具有芳香性的杂环基。
单独或作为后缀或前缀使用的术语“杂环烷基”是指没有芳香性的杂环基。
单独或作为后缀或前缀使用的术语“亚杂芳基”是指有芳香性的亚杂环基。
单独或作为后缀或前缀使用的术语“亚杂环烷基”是指没有芳香性的亚杂环基。
用作前缀的术语“6-员”是指具有环的基团，所述环含有6个环原子。
用作前缀的术语“5-员”是指具有环的基团，所述环含有5个环原子。
5-员环杂芳基是指环中具有5个环原子的杂芳基，其中1、2或3个环原子独立地选自N、O和S。
5-员环杂芳基的实例是噻吩基、呋喃基、吡咯基、咪唑基、噻唑基、噁唑基、吡唑基、异噻唑基、异噁唑基、1，2，3-三唑基、四唑基、1，2，3-噻二唑基、1，2，3-噁二唑基、1，2，4-三唑基、1，2，4-噻二唑基、1，2，4-噁二唑基、1，3，4-三唑基、1，3，4-噻二唑基和1，3，4-噁二唑基。
6-员环杂芳基是环中具有6个环原子的杂芳基，其中1、2或3个环原子独立地选自N、O和S。
6-员环杂芳基的实例是吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、三嗪基和哒嗪基。
作为前缀的术语“取代的”是指一个结构、分子或基团中的一个或多个氢被一个或多个C_1-12烃基替代或被一个或多个含有一个或多个杂原子的化学基团替代，所述杂原子选自N、O、S、F、Cl、Br、I和P。含有一个或多个杂原子的化学基团的实例包括杂环基、-NO₂、-OR、-Cl、-Br、-I、-F、-CF₃、-C(＝O)R、-C(＝O)OH、-NH₂、-SH、-NHR、-NR₂、-SR、-SO₃H、-SO₂R、-S(＝O)R、-CN、-OH、-C(＝O)OR、-C(＝O)NR₂、-NRC(＝O)R、氧代(＝O)、亚氨基(＝NR)、硫代(＝S)和肟基(＝N-OR)，其中，各个“R”是C_1-12烃基。例如，取代苯基可以是指硝基苯基、吡啶基苯基、甲氧基苯基、氯代苯基、氨基苯基等，其中，硝基、吡啶基、甲氧基、氯和氨基可以代替苯环上任何合适的氢。
用作第一个结构、分子或基团的后缀，随后接一个或多个化学基团名称的术语“取代的”是指用一个或多个指定的化学基团替代第一个结构、分子或基团中的一个或多个氢而得到的第二个结构、分子或基团。例如，“被硝基取代的苯基”是指硝基苯基。
术语“任选取代的”是指被取代的和未被取代的基团、结构或分子。
杂环包括例如单环杂环，例如，氮杂环丙烷(aziridine)、环氧乙烷、硫杂丙环、氮杂环丁烷、氧杂环丁烷、硫杂环丁烷(thietane)、吡咯烷、吡咯啉、咪唑烷、吡唑烷、吡唑啉、二氧戊环、环丁砜、2，3-二氢呋喃、2，5-二氢呋喃、四氢呋喃、四氢噻吩、哌啶、1，2，3，6-四氢-吡啶、哌嗪、吗啉、硫代吗啉、吡喃、噻喃、2，3-二氢吡喃、四氢吡喃、1，4-二氢吡啶、1，4-二氧杂环己烷、1，3-二氧杂环己烷、二氧杂环己烷、高哌啶(homopiperidine)、2，3，4，7-四氢-1H-氮杂、高哌嗪、1，3-二氧杂环庚烷(dioxepane)、4，7-二氢-1，3-二氧杂庚英(dioxepin)和环六亚甲基氧化物(hexamethylene oxide)。
另外，杂环包括芳香杂环，例如，吡啶、吡嗪、嘧啶、哒嗪、噻吩、呋喃、呋咱、吡咯、咪唑、噻唑、噁唑、吡唑、异噻唑、异噁唑、1，2，3-三唑、四唑、1，2，3-噻二唑、1，2，3-噁二唑、1，2，4-三唑、1，2，4-噻二唑、1，2，4-噁二唑、1，3，4-三唑、1，3，4-噻二唑和1，3，4-噁二唑。
此外，杂环包括多环杂环，例如，吲哚、二氢吲哚、异二氢吲哚、喹啉、四氢喹啉、异喹啉、四氢异喹啉、1，4-苯并二噁烷、香豆素、二氢香豆素、苯并呋喃、2，3-二氢苯并呋喃、异苯并呋喃、苯并吡喃、苯并二氢吡喃、异苯并二氢吡喃、呫吨、吩氧硫杂环己二烯(phenoxathiin)、噻蒽、吲嗪、异吲哚、吲唑、嘌呤、酞嗪、萘啶、喹喔啉、喹唑啉、噌啉、蝶啶、菲啶、萘嵌间二氮杂苯、菲咯啉、吩嗪、吩噻嗪、吩噁嗪、1，2-苯并异噁唑、苯并噻吩、苯并噁唑、苯并噻唑、苯并咪唑、苯并三唑、噻吨(thioxanthine)、咔唑、咔啉、吖啶、双吡咯烷(pyrolizidine)和喹嗪(quinolizidine)。
除了上述多环杂环之外，杂环还包括多环杂环，其中，两个或多个环之间的环稠合包括两个环共用不止一个键和两个环共用不止两个原子。这种桥杂环实例包括奎宁环、二氮杂二环[2.2.1]庚烷和7-氧杂二环[2.2.1]庚烷。
杂环基包括，例如，单环杂环基，例如，氮杂环丙烷基、环氧乙烷基、硫杂丙环基、氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、硫杂环丁烷基、吡咯烷基、吡咯啉基、咪唑烷基、吡唑烷基、吡唑啉基、二氧戊环基、环丁砜基、2，3-二氢呋喃基、2，5-二氢呋喃基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、哌啶基、1，2，3，6-四氢-吡啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、吡喃基、噻喃基、2，3-二氢吡喃基、四氢吡喃基、1，4-二氢吡啶基、1，4-二氧杂环己烷基、1，3-二氧杂环己烷基、二氧杂环己烷基、高哌啶基、2，3，4，7-四氢-1H-氮杂基、高哌嗪基、1，3-二氧杂环庚烷基(dioxepanyl)、4，7-二氢-1，3-二氧杂庚英基(dioxepinyl)和环六亚甲基氧化物基团(hexamethylene oxidyl)。
另外，杂环基包括芳香杂环基或杂芳基，例如，吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、噻吩基、呋喃基、呋咱基、吡咯基、咪唑基、噻唑基、噁唑基、吡唑基、异噻唑基、异噁唑基、1，2，3-三唑基、四唑基、1，2，3-噻二唑基、1，2，3-噁二唑基、1，2，4-三唑基、1，2，4-噻二唑基、1，2，4-噁二唑基、1，3，4-三唑基、1，3，4-噻二唑基和1，3，4-噁二唑基。
此外，杂环基包括多环杂环基(包括芳香性或非芳香性)，例如，吲哚基、二氢吲哚基、异二氢吲哚基、喹啉基、四氢喹啉基、异喹啉基、四氢异喹啉基、1，4-苯并二噁烷基、香豆素基、二氢香豆素基、苯并呋喃基、2，3-二氢苯并呋喃基、异苯并呋喃基、苯并吡喃基、苯并二氢吡喃基、异苯并二氢吡喃基、呫吨基、吩氧硫杂环己二烯基(phenoxathiinyl)、噻蒽基、吲嗪基、异吲哚基、吲唑基、嘌呤基、酞嗪基、萘啶基、喹喔啉基、喹唑啉基、噌啉基、蝶啶基、菲啶基、萘嵌间二氮杂苯基、菲咯啉基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁嗪基、1，2-苯并异噁唑基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、苯并三唑基、噻吨基(thioxanthinyl)、咔唑基、咔啉基、吖啶基、双吡咯烷基(pyrolizidinyl)和喹嗪基(quinolizidinyl)。
除上述多环杂环基之外，杂环基还包括多环杂环基，其中两个或多个环之间的环稠合包括两个环共用不止一个键和两个环共用不止两个原子。所述桥杂环基的实例包括奎宁环基、二氮杂二环[2.2.1]庚基和7-氧杂二环[2.2.1]庚基。
单独或作为后缀或前缀使用的术语“烷氧基”是指通式-O-R所示的基团，其中R选自烃基。烷氧基的实例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、叔丁氧基、异丁氧基、环丙基甲氧基、烯丙氧基和炔丙氧基。
单独或作为后缀或前缀使用的术语“胺”或“氨基”是指通式-NRR’基团，其中R和R’独立地选自氢或烃基。
单独或作为后缀或前缀使用的术语“酰基”是指-C(＝O)-R，其中R是任选被取代的烃基、氢、氨基或烷氧基。例如，酰基包括乙酰基、丙酰基、苯甲酰基、苯乙酰基、乙氧基羰基和二甲基氨基甲酰基。
卤素包括氟、氯、溴和碘。
用作一个基团的前缀的“卤代”表示该基团上的一个或多个氢被一个或多个卤素替代。
“RT”或“rt”表示室温。
第一个环基与第二个环基“稠合”是指第一个环基和第二个环基之间共享至少两个原子。
除非另有说明，“连接”或“连接的”表示共价连接或键合。
一方面，本发明提供了式I化合物、其可药用盐、其溶剂合物、其非对映异构体、其对映异构体和其混合物：

其中，
R¹选自氢、C_1-6烷基-O-C(＝O)-、任选取代的C_1-6烷基、任选取代的C_3-6环烷基、任选取代的C_6-10芳基、任选取代的C_2-9杂环基、任选取代的C_6-10芳基-C_1-3烷基、任选取代的C_2-9杂环基-C_1-3烷基，和其中，D是二价基团，其选自任选取代的C_1-6亚烷基、任选取代的亚苯基、任选取代的亚苯基-C_1-3烷基、任选取代的C_3-5亚杂芳基和任选取代的C_3-5亚杂芳基-C_1-3烷基；
R²和R³独立地选自氢、任选取代的C_1-6烷基和任选取代的C_3-6环烷基；和
R⁴和R⁵独立地选自-H、任选取代的C_1-6烷基、任选取代的C_3-8环烷基、任选取代的C_6-10芳基、任选取代的C_2-9杂环基、任选取代的C_6-10芳基-C_1-6烷基、任选取代的C_2-9杂环基-C_1-6烷基、-C(＝O)-NR⁸R⁹和-C(＝O)-R⁸，其中R⁸和R⁹独立地选自-H、任选取代的C_1-6烷基、任选取代的C_3-8环烷基、任选取代的C_6-10芳基、任选取代的C_2-9杂环基、任选取代的C_6-10芳基-C_1-6烷基和任选取代的C_2-9杂环基-C_1-6烷基。
特别是，本发明化合物选自那些式I化合物，其中，R¹选自氢、C_1-6烷基-O-C(＝O)-、C_1-6烷基、C_3-6环烷基、苯基、苯基-C_1-3烷基、C_3-5杂环基和C_3-5杂环基-C_1-3烷基，其中，所述C_1-6烷基、C_3-6环烷基、苯基、苯基-C_1-3烷基、C_3-5杂环基和C_3-5杂环基-C_1-3烷基任选被一个或多个选自下列的基团所取代：C_1-6烷基、卤代C_1-6烷基、-OH、-NO₂、-CF₃、C_1-6烷氧基、氯、氟、溴和碘；
R²和R³是乙基；和
R⁴和R⁵独立地选自-H、任选取代的苯基、任选取代的C_3-5杂环基、任选取代的苯基-C_1-3烷基、任选取代的C_3-5杂环基-C_1-3烷基、任选取代的C_1-6烷基、任选取代的C_3-6环烷基、任选取代的C_3-6环烷基-C_1-3烷基、-C(＝O)-N-R⁸R⁹和-C(＝O)-R⁸，其中，R⁸和R⁹独立地选自-H、任选取代的苯基、任选取代的C_3-5杂环基、任选取代的苯基-C_1-3烷基、任选取代的C_3-5杂环基-C_1-3烷基、任选取代的C_1-6烷基、任选取代的C_3-6环烷基、任选取代的C_3-6环烷基-C_1-3烷基。
更特别的，本发明化合物选自那些式I化合物，其中，R¹选自氢、C_1-6烷基-O-C(＝O)-、C_1-6烷基、C_3-6环烷基、苯基-C_1-3烷基和C_3-5杂芳基-C_1-3烷基，其中，所述C_1-6烷基、C_3-6环烷基、苯基-C_1-3烷基和C_3-5杂芳基-C_1-3烷基任选被一个或多个选自下列的基团所取代：C_1-6烷基、卤代C_1-6烷基、-OH、-NO₂、-CF₃、C_1-6烷氧基、氯、氟、溴和碘；
R²和R³是乙基；和
R⁴和R⁵是氢。
甚至更特别的是，本发明化合物选自那些式I化合物，其中
R¹选自C_2-4烷基、苄基、噻唑基甲基、呋喃基甲基、吡啶基甲基和噻吩基甲基，其中，所述C_2-4烷基、苄基、噻唑基甲基、呋喃基甲基、吡啶基甲基和噻吩基甲基任选被一个或多个选自下列的基团所取代：C_1-3烷基、-OH、-CF₃、C_1-3烷氧基、氯和氟；
R²和R³是乙基；和
R⁴和R⁵是氢。
最特别的是，本发明化合物选自那些式I化合物，其中
R¹是R⁶-CH₂-，其中R⁶选自2-吡啶基、2-噻吩基、2-呋喃基、5-氯-2-呋喃基、5-甲基-2-呋喃基、3-甲基-2-噻吩基、3-氯-2-噻吩基、5-氯-2-噻吩基、5-甲基-2-噻吩基、6-氯-3-吡啶基、2-羟基乙基、2-甲氧基-乙基、甲氧基甲基、3-吡啶基、4-吡啶基、4-噻唑基、5-噻唑基、正丙基和6-甲基-2-吡啶基；
R²和R³是乙基；和
R⁴和R⁵是氢。
应当理解，当本发明化合物含有一个或多个手性中心时，本发明化合物可以存在于对映异构体或非对映异构体或外消旋混合物中，并可作为对映异构体或非对映异构体或作为外消旋混合物分离出来。本发明包括式I化合物的任何可能的对映异构体、非对映异构体、外消旋体或其混合物。例如，通过外消旋体的手性色谱分离、通过光学活性原料合成或通过基于下述方法的不对称合成，可以制得本发明化合物的旋光形式。
还可以理解的是，某些本发明化合物能够以几何异构体的形式存在，例如，烯烃的E和Z异构体。本发明包括式I化合物的任何几何异构体。此外，应当理解本发明包括式I化合物的互变异构体。
还应当理解，某些本发明化合物可以溶剂合物(例如，水合物)和非溶剂合物形式存在。此外，还应当理解本发明包括所有上述式I化合物的溶剂合物的形式。
式I化合物的盐也包括在本发明范围内。一般，使用本领域公知的标准方法可以制得本发明化合物的可药用盐，例如，将诸如烷基胺的足够碱性的化合物与诸如HCl或乙酸的合适酸反应，制得生理上可接受的阴离子。在水性介质中，用一当量碱金属或碱土金属氢氧化物或醇盐(例如，乙醇盐或甲醇盐)，或用合适的碱性有机胺(例如，胆碱或葡甲胺)处理具有合适酸性质子如羧酸或苯酚的本发明化合物，然后用常规技术提纯，还可以制得相应的碱金属(例如，钠、钾或锂)或碱土金属(例如，钙)盐。
在一个实施方案中，上述式I化合物可转化成可药用盐或溶剂合物，尤其是酸加成盐，例如，盐酸盐、氢溴酸盐、磷酸盐、乙酸盐、延胡索酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、甲磺酸盐或对甲苯磺酸盐。
本发明的新化合物可用于治疗，特别是用于治疗各种疼痛病症，例如，慢性痛、神经性疼痛、急性痛、癌痛、类风湿性关节炎引起的疼痛、偏头痛、内脏痛等。当然，该列举不是穷举。
本发明化合物可用于治疗腹泻；抑郁；焦虑和与压力有关的疾病，如创伤后应激障碍、惊恐性障碍、泛化性焦虑症、社交恐怖症和强迫性障碍；尿失禁；早泄；各种精神疾病；咳嗽；肺水肿；各种胃肠道病症，如便秘、机能性胃肠道病症，如过敏性肠综合征和机能性消化不良；帕金森氏病和其他运动障碍；创伤性脑损伤；中风；心肌梗塞后的心脏保护；脊髓损伤和药物成瘾，包括酒精、尼古丁、阿片样药物和其他药物滥用的治疗；以及用于治疗交感神经系统疾病，如高血压。
本发明化合物可用作免疫调节剂，尤其用于诸如关节炎的自身免疫疾病、皮肤移植、器官移植和类似的外科手术需求、胶原病和各种变态反应，以及可用作抗肿瘤剂和抗病毒剂。
本发明化合物可用于在范例中存在或涉及阿片样受体变性或机能障碍的疾病状态。包括在诊断技术和成像应用(如，正电子发射断层扫描(PET))中使用同位素标记的本发明化合物变体。
在全身性麻醉和监控麻醉护理过程中，本发明化合物可用作镇痛药。不同性质药剂的联合药物(combinations)经常用于实现保持麻醉状态(例如，记忆缺失、痛觉缺失、肌肉松弛和镇静)所需的平衡作用。该联合药物包括吸入麻醉剂、安眠药、抗焦虑药、神经肌肉阻滞剂和阿片样药物。
上文定义的任何式I化合物用于制备药物的用途包括在本发明范围内。
上文定义的任何式I化合物用于制备治疗疼痛的药物中的用途也包括在本发明范围内，所述疼痛包括，但不限于，急性痛、慢性痛、神经性疼痛、背痛、癌痛和内脏痛。
上文定义的任何式I化合物在制备治疗焦虑的药物中的用途也包括在本发明范围内。
上文定义的任何式I化合物在制备治疗上述任何疾病的药物中的用途也包括在本发明范围内。
本发明另一方面是治疗患上述任何疾病的患者的方法，该方法是对需要上述治疗的患者施用有效量的本发明化合物。
因此，本发明提供了上文定义的用于治疗的式I化合物、其可药用盐或溶剂合物。
在本说明书上下文中，除非另有特定说明，术语“治疗”也包括“预防”。术语“治疗的”和“治疗学的”也应当具有相应的理解。本发明上下文中的术语“治疗”还包括施用有效量的本发明化合物，以减缓在先存在的急性或慢性疾病状态或减轻复发症状。上述定义还包括防止复发疾病的预防治疗和对慢性疾病的连续治疗。
在对诸如人类的温血动物的治疗的使用中，本发明化合物可以常规药物组合物的形式经任何途径给药，包括通过口服、肌内、皮下、局部、鼻内、腹膜内、胸内、静脉内、硬膜外、鞘内、脑室内和注射到关节内给药。
在本发明的一个实施方案中，给药途径可以是经口、静脉内或肌内给药。
剂量将取决于给药途径、疾病严重程度、患者年龄和体重以及主治医师在决定最适于特定患者的个体治疗方案和剂量水平时通常考虑的其它因素。
此外，本发明提供了含有式I化合物、其溶剂合物或其可药用盐以及可药用载体的药物组合物。
特别地，本发明提供了用于治疗，尤其是用于治疗疼痛和焦虑的含有式I化合物、其溶剂合物或其可药用盐以及可药用载体的药物组合物。
此外，本发明提供了用于治疗上述任何疾病的含有式I化合物、其溶剂合物或其可药用盐以及可药用载体的药物组合物。
对于用本发明化合物制备药物组合物而言，惰性可药用载体可以是固体或液体。固体制剂包括粉剂、片剂、可分散颗粒剂、胶囊、扁囊剂和栓剂。
固体载体可以是一种或多种物质，也可以起到稀释剂、调味剂、助溶剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂或片剂崩解剂的作用；它也可以是包封物质。
在粉剂中，载体是与细碎的本发明化合物或活性组分混合的细碎固体。在片剂中，活性组分以适当比例与具有必需粘合性的载体混和，并压制成所需形状和大小。
为了制备栓剂组合物，首先将低熔点蜡(例如，脂肪酸甘油酯与可可脂的混合物)熔化，通过例如搅拌，将活性组分分散在其中。然后将熔化的均匀混合物注入适当大小的模子中，并冷却和固化。
合适的载体是碳酸镁、硬脂酸镁、滑石、乳糖、糖、果胶、糊精、淀粉、西黄蓍胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、低熔点蜡、可可脂等。
术语组合物还包括活性组分与作为载体提供胶囊的包封物形成的制剂，其中，活性组分(含或不含其它载体)被与之结合的载体包封。类似地，术语组合物还包括扁囊剂。
片剂、粉剂、扁囊剂和胶囊可用作适于口服给药的固体剂型。
液体形式的组合物包括溶液、悬浮液和乳剂。例如，活性化合物的无菌水或水-丙二醇溶液可以作为适于肠胃外给药的液体制剂。液体组合物还可以配制成聚乙二醇水溶液的溶液。
将活性组分溶解在水中，并按照需要加入合适的着色剂、调味剂、稳定剂和增稠剂，可以制得口服给药的水溶液。将细碎的活性组分与粘性材料(例如，天然合成树胶、树脂、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和制药领域已知的其它助悬剂)一起分散在水中，可以制得用于口服使用的水性悬浮液。
根据给药方式，药物组合物优选含有0.05-99％w(重量百分比)，更优选0.10-50％w本发明化合物，所有重量百分比都基于组合物的总重量。
本领域熟练技术人员使用已知的标准，包括个别患者的年龄、体重和响应，可以确定本发明的实际治疗有效量，并在所要治疗或预防的疾病的背景中阐明。
另一方面，本发明提供了制备本发明化合物的方法。
在一个实施方案中，本发明提供了制备式II化合物的方法，所述方法包括：

使式III化合物与R⁷-CH₂X或R⁷-CHO反应：

其中，
R²和R³是乙基；
X选自Cl、I、Br、-OTs(甲苯磺酰基)和-OMs(甲磺酰基)；
R⁴和R⁵独立地选自-H、任选取代的苯基、任选取代的C_3-5杂环基、任选取代的苯基-C_1-3烷基、任选取代的C_3-5杂环基-C_1-3烷基、任选取代的C_1-6烷基、任选取代的C_3-6环烷基、任选取代的C_3-6环烷基-C_1-3烷基、-C(＝O)-N-R⁸R⁹和-C(＝O)-R⁸，其中，R⁸和R⁹独立地选自-H、任选取代的苯基、任选取代的C_3-5杂环基、任选取代的苯基-C_1-3烷基、任选取代的C_3-5杂环基-C_1-3烷基、任选取代的C_1-6烷基、任选取代的C_3-6环烷基、任选取代的C_3-6环烷基-C_1-3烷基；
R⁷选自C_1-6烷基、C_3-6环烷基、苯基、苯基-C_1-3烷基、C_3-5杂芳基和C_3-5杂芳基-C_1-3烷基，其中，所述C_1-6烷基、C_3-6环烷基、苯基、苯基-C_1-3烷基、C_3-5杂芳基和C_3-5杂芳基-C_1-3烷基任选被一个或多个选自下列的基团所取代：C_1-6烷基、卤代C_1-6烷基、-OH、-NO₂、-CF₃、C_1-6烷氧基、氯、氟、溴和碘；和
其中D是选自下述的二价基团：任选取代的C_1-6亚烷基、任选取代的亚苯基、任选取代的亚苯基-C_1-3烷基、任选取代的C_3-5亚杂芳基(heteroarylene)和任选取代的C_3-5亚杂芳基-C_1-3烷基。
特别是，本发明提供了上述式II化合物的制备方法，其中
R²和R³是乙基；
X是Br；
R⁴和R⁵是氢；
R⁷选自C_1-6烷基、苯基、噻唑基、呋喃基、吡啶基和噻吩基，其中，所述C_1-6烷基、苯基、呋喃基、吡啶基、噻吩基任选被一个或多个选自下列的基团所取代：C_1-6烷基、卤代C_1-6烷基、-OH、-NO₂、-CF₃、C_1-6烷氧基、氯、氟、溴和碘；和
其中D是C_1-6亚烷基。
在第二个实施方案中，本发明提供了制备式I化合物的方法，所述方法包括：

使式IV化合物与式V化合物反应：

其中，
其中，R¹选自C_1-6烷基-O-C(＝O)-、C_1-6烷基、C_3-6环烷基、苯基、苯基-C_1-3烷基、C_3-5杂环基和C_3-5杂环基-C_1-3烷基，其中，所述C_1-6烷基、C_3-6环烷基、苯基、苯基-C_1-3烷基、C_3-5杂环基和C_3-5杂环基-C_1-3烷基任选被一个或多个选自下列的基团所取代：C_1-6烷基、卤代C_1-6烷基、-OH、-NO₂、-CF₃、C_1-6烷氧基、氯、氟、溴和碘；
D是二价基团，其选自任选取代的C_1-6亚烷基、任选取代的亚苯基、任选取代的亚苯基-C_1-3烷基、任选取代的C_3-5亚杂芳基和任选取代的C_3-5亚杂芳基-C_1-3烷基；
X选自I、Br和Cl；
R¹⁰选自H和C_1-6烷基，或(R¹⁰O)₂B-是
R²和R³是乙基；和
R⁴和R⁵独立地选自-H、任选取代的苯基、任选取代的C_3-5杂环基、任选取代的苯基-C_1-3烷基、任选取代的C_3-5杂环基-C_1-3烷基、任选取代的C_1-6烷基、任选取代的C_3-6环烷基、任选取代的C_3-6环烷基-C_1-3烷基、-C(＝O)-N-R⁸R⁹和-C(＝O)-R⁸，其中，R⁸和R⁹独立地选自-H、任选取代的苯基、任选取代的C_3-5杂环基、任选取代的苯基-C_1-3烷基、任选取代的C_3-5杂环基-C_1-3烷基、任选取代的C_1-6烷基、任选取代的C_3-6环烷基、任选取代的C_3-6环烷基-C_1-3烷基。
特别地，本发明提供了上述式I化合物的制备方法，其中，
其中R¹选自氢、C_1-6烷基-O-C(＝O)-、C_1-6烷基、C_3-6环烷基、苯基-C_1-3烷基和C_3-5杂芳基-C_1-3烷基，其中，所述C_1-6烷基、C_3-6环烷基、苯基-C_1-3烷基和C_3-5杂芳基-C_1-3烷基任选被一个或多个选自下列的基团所取代：C_1-6烷基、卤代C_1-6烷基、-OH、-NO₂、-CF₃、C_1-6烷氧基、氯、氟、溴和碘；
D是C_1-6亚烷基；
X是Br；
R¹⁰是H；
R²和R³是乙基；和
R⁴和R⁵是氢。
更特别的是，本发明化合物和用于制备本发明化合物的中间体可以根据方案1-4所示的合成路径制备。
                          方案1

                     方案2

化合物1：R＝2-吡啶基
化合物2：R＝2-噻吩基
化合物3：R＝2-呋喃基
化合物4：R＝5-氯-2-呋喃基
化合物5：R＝5-甲基-2-呋喃基
化合物6：R＝3-甲基-2-噻吩基
化合物7：R＝3-氯-2-噻吩基
化合物8：R＝5-氯-2-噻吩基
化合物9：R＝5-甲基-2-噻吩基
化合物10：R＝6-氯-3-吡啶基
化合物11：R＝3-羟乙基
化合物12：R＝2-甲氧基甲基
化合物13：R＝3-吡啶基
化合物14：R＝4-吡啶基
化合物15：R＝6-甲基-2-吡啶基
化合物18：R＝4-噻唑基
化合物19：R＝5-噻唑基
化合物20：R＝正丙基
                        方案3

                      方案4

生物学评价
现发现，本发明化合物对诸如人类的温血动物体内的δ受体具有活性。尤其发现，本发明化合物是有效的δ受体配体。下述体外试验证明了这些惊人活性，尤其是关于激动剂效力和功效(正如大鼠脑功能试验和/或人类δ受体功能试验(低)所证明的那样)。该特征可能与体内活性有关，并可能与结合亲和力不成线性关系。在这些体外试验中，测定化合物对δ受体的活性，并获得IC₅₀以决定特定化合物对δ受体的选择性活性。在本文中，IC₅₀通常是指观察到50％标准放射性δ受体配体置换时的化合物浓度。
使用类似试验，也可测定化合物对κ和μ受体的活性。
体外模型
细胞培养
在37℃和5％CO₂下，在装有无钙DMEM10％FBS、5％BCS、0.1％Pluronic F-68和600μg/ml遗传霉素的摇瓶内，在悬浮液中生长人类293S细胞，该细胞表达克隆的人μ、δ和κ受体和对新霉素耐药性。
称重大鼠脑，并在冰冷的PBS(含有2.5mM EDTA、pH7.4)中洗涤。在冰冷的溶胞缓冲液(含有50mM Tris、pH7.0、2.5mM EDTA、临用前在0.5M的DMSO：乙醇贮备液中加入苯甲磺酰氟至浓度为0.5MmM)中，用polytron将脑匀化30秒(大鼠)。
膜制备
使细胞形成片状并重新悬浮在溶胞缓冲液(50mM Tris，pH7.0，2.5mMEDTA，临用前在0.1M乙醇贮备液中加入PMSF至浓度为0.1mM)中，在冰上培养15分钟，然后用polytron匀化30秒。将悬浮液在4℃以1000g(最大)旋转10分钟。在冰上保存上清液，重新悬浮片状物并如前进行旋转。将两次旋转得到的上清液合并，并以46,000g(最大)旋转30分钟。将片状物重新悬浮在冷Tris缓冲液(50mM Tris/Cl，pH7.0)中，并再次旋转。将最终的片状物重新悬浮在膜缓冲液(50mM Tris，0.32M蔗糖，pH7.0)中。将聚丙烯试管中的等份试样(1ml)在干冰/乙醇中冷冻，在-70℃贮藏直至使用。通过改进的劳里试验，用十二烷基硫酸钠测定蛋白浓度。
结合测定
将膜在37℃融化，在冰上冷却(或者，若不立即使用，则保存于冰上)，通过25-号规格针3次，并稀释到结合缓冲液(50mM Tris，3mM MgCl₂，1mg/ml BSA(Sigma A-7888)，pH7.4，经0.22m滤器过滤后在4℃贮藏，向其中新鲜地加入5μg/ml抑肽酶，10μM苯丁抑制素和10μM diprotin A(如果从组织得到膜)(大鼠、小鼠和猴子，无DTT))中。将100μl等份试样加到冰冷的12×75mm聚丙烯试管中，该试管中含有100μl适宜放射性配体和100μl不同浓度的测试化合物。分别在有和没有10μM纳洛酮的情况下，测定总(TB)结合和非特异性(NS)结合。将试管涡旋，并在25℃培养60-75分钟，然后，通过在0.1％聚乙烯亚胺中预浸泡至少2小时的GF/B滤器(filters)(Whatman)，将内容物迅速真空过滤同时用大约12ml/管的冰冷洗涤缓冲液(50mM Tris，pH7.0，3mM MgCl₂)洗涤。将滤器在含有6-7ml闪烁液体的小瓶中浸泡至少12小时，用β计数器测定保留在滤器上的放射性(dpm)。如果测定是在96-深孔板中进行，则过滤是在96-位PEI浸泡的单滤器(unifilter)上进行，该滤器用3×1ml洗涤缓冲液洗涤，并在55℃烘箱中干燥2小时。加入50μl MS-20闪烁液体/孔后，将滤板在TopCount(Packard)中计数。当在96深孔板中进行测定时，化合物的IC50从10-点置换曲线(在δ的情况下)和5-点置换曲线(在μ和κ的情况下)评估。该测定在300μl中进行，其中含有适量膜蛋白(在δ、μ和κ的情况下，分别为2μg、35μg和1μg)和50000-80000dpm/孔的适当示踪剂(对于δ、μ和κ，分别为125I-δ啡肽II、125I-FK33824和125I-DPDYN)。在有和没有10μM纳洛酮条件下，测定总结合和非特异性结合。
功能测定
对化合物受体复合体激活GTP结合受体偶联G-蛋白的程度进行测定，以检测化合物的激动剂活性。在GTP结合鉴定中，将GTP[γ]³⁵S与试验化合物和来自HEK-293S细胞或来自匀化大鼠或小鼠脑的膜混和，其中所述HEK-293S细胞表达克隆的人阿片样受体。激动剂刺激GTP[γ]³⁵S在这些膜中的结合。由剂量-应答曲线确定化合物的EC₅₀和E_max值。δ激动剂naltrindole使剂量-应答曲线右移，证实了激动剂活性由δ受体介导。对于人类δ受体功能实验，在与测定EC₅₀(高)使用的人类δ受体相比，当在此测定中使用的人类δ受体以低浓度表达时，测定EC₅₀(低)。相对于标准δ激动剂SNC80测定E_max值，即，高于100％表明化合物的效力优于SNC80。
用于大鼠脑GTP的方法
将大鼠脑膜在37℃融化，通过25-号规格平头针3次，并在GTPγS结合液(50mM Hepes，20mM NaOH，100mM NaCl，1mM EDTA，5mM MgCl₂，pH7.4，加入新鲜的：1mM DTT，0.1％BSA)中稀释。最后将120μM GDP加到膜稀释液中。使用300μl，其中含适量膜蛋白(20μg/孔)和100000-130000dpm GTPγ³⁵S/孔(0.11-0.14μM)，得到10点剂量-应答曲线，从而确定化合物的EC50和Emax值。在有或没有3μM SNC-80的情况下，确定基础刺激结合和最大刺激结合。在稍有不同的缓冲液(50mM Hepes，20mM NaOH，200mM NaCl，1mM EDTA，5mM MgCl₂，pH7.4，加入新鲜的：0.5％BSA，无DTT)中，在GDP最终浓度为3μM条件下，在稳定表达克隆的δ受体的HEK 293s细胞上进行测定。
数据分析
以TB-NS计算特异性结合(SB)，并以对照SB的百分数表示不同试验化合物存在下的SB。由对数图或曲线拟合程序，例如，Ligand、GraphPadPrism、SigmaPlot或ReceptorFit，来计算置换特异性结合放射性配体中的配体的IC₅₀值和希尔系数(n_H)。用Cheng-Prussoff公式计算K_i值。报道了在至少3条置换曲线中检验的配体的IC₅₀、K_i和n_H的平均值±S.E.M.。
使用上述试验方法进行测定，本发明大多数化合物对人类δ受体的IC₅₀通常为0.30nM-34.4nM。这些化合物对人类δ受体的EC₅₀和％E_max通常分别为15.6nM-1853nM和31.1-93.3。这些化合物对人类κ和μ受体的IC₅₀通常分别为2449nM-10000nM和521nM-7282nM。
受体饱和试验
使用合适的放射性配体在细胞膜上进行结合试验，以测定放射性配体K_δ值，其中放射性配体的浓度是估算的K_δ的0.2至5倍(如果所需放射性配体的量适宜，则最高可达10倍)。特异性放射性配体结合用μmol/mg膜蛋白表示。根据单一部位(one-site)模型，将特异性结合(B)对nM游离(F)放射性配体进行非线性拟合，得到各试验的K_δ和B_max值。
使用Von Frey试验测定机械-异常性疼痛
使用Chaplan等人(1994)描述的方法，在08:00-16:00之间进行测试。将大鼠置于有机玻璃笼中，有机玻璃笼底为丝网，该丝网允许触及鼠爪，让大鼠适应环境10-15分钟。试验部位是左后爪底中部(mid-plantar)，避开较不敏感的足垫。用硬度呈对数递增(0.41、0.69、1.20、2.04、3.63、5.50、8.51和15.14克；Stoelting，III，USA)的8根Von Frey毛发触及鼠爪。在丝网底下方，以足以使鼠爪轻微屈曲的力量，用Von Frey毛发垂直接触足底表面，并保持约6-8秒。如爪急剧缩回则为阳性反应。毛发移开立即缩回也认为是阳性反应。走开是不明确反应，需要重复刺激。
试验记录
在FCA处理组手术后1天，对动物进行试验。使用Dixon上-下法(1980)测定50％退缩阈值。试验从毛发系列的中间硬度2.04g开始。不管增加还是减少，总以连续方式进行刺激。如果爪子对于开始选择的毛发没有缩回反应，则给予更强的刺激；当存在爪缩回反应时，则下次选择较弱的刺激。用该方法计算最佳阈值需要在紧靠50％阈值附近有6次反应，并且，当反应发生第一次变化时，例如，当第一次越过该阈值时，开始计数这6次反应。当阈值落在刺激范围之外时，分别赋值15.14(正常敏感性)或0.41(最大异常性疼痛)。将所得阳性和阴性反应模式按常规制成表，X＝无缩回；O＝缩回，并且，使用下式插入50％缩回阈值：
50％g阈值＝10^(Xf+kδ)/10,000
其中Xf＝最后使用的Von Frey毛发的值(对数单位)；k＝阳性/阴性反应模式表值(来自Chaplan等人(1994))；且δ＝刺激之间的平均差(对数单位)。此处δ＝0.224。
根据Chaplan等人(1994)的方法，将Von Frey阈值转化成最大可能效力百分比(％MPE)。使用下述公式计算％MPE：

试验物质的给药
在von Frey试验前，给大鼠注射(经皮下、腹膜内、静脉内或口服)试验物质，试验化合物给药与von Frey试验之间的时间根据试验化合物的性质改变。
扭曲试验
当腹膜内对小鼠给药时，乙酸会引起腹部收缩。这使得小鼠以典型的方式伸展身体。当施用镇痛药时，则很少观察到上述动作，因此，该药物被选作可能的优良候选对象。
只有在出现下列要素时，才认为是完全和典型的扭曲反射：动物不处于运动中；下背微微凹陷；可观察到两个爪子的足底面。在该试验中，在口服1-100μmol/kg剂量后，本发明化合物对扭曲反应显示出明显的抑制作用。
(i)溶液制备
乙酸(AcOH)：将120μL乙酸加到19.88ml蒸馏水中，以获得最终体积为20ml，最终浓度为0.6％AcOH的溶液。然后将该溶液混和(涡旋)，并备用于注射。
化合物(药物)：制备各化合物，根据标准方法，将其溶解在最合适的载体中。
(ii)溶液给药
在试验前20、30或40分钟(根据化合物类型及其特性)，将化合物(药物)以10ml/kg剂量(考虑小鼠平均体重)经口服、腹膜内(i.p.)、皮下(s.c.)或静脉内(i.v.)给药。当中央递送(delivered centrally)化合物时：心室内(i.c.v.)或鞘内(i.t.)给药5μL的体积。
在临试验之前，将AcOH以10ml/kg剂量(考虑小鼠平均体重)在两个部位经腹膜内给药(i.p.)。
(iii)试验
观察动物(小鼠)20分钟，记录反应(扭曲反射)次数，并在试验结束时汇总。将小鼠保存于带有接触衬垫的独立“鞋盒”笼中。通常同时观察4只小鼠：1只对照小鼠，3只给药小鼠。
对于焦虑和焦虑样适应症，在大鼠geller-seifter冲突试验中已证实了其效力。
对于功能性胃肠道病症适应征，采用Coutinho SV等人在AmericanJournal of Physiology-Gastrointestinal & Liver Physiology.282(2)：G307-16，2002 Feb中描述的大鼠试验，可以确认其效力。
其他体内试验方法
被试者和居留环境
将雄性Sprague-Dawley大鼠(175-200g)按每组5只置于温控室(22℃，40-70％湿度，12-小时明/暗循环)中。试验在循环明亮期进行。动物随意摄食和饮水，并在获得数据后立即处死。
样本
化合物(药物)试验包括不进行任何处理的大鼠组和用大肠杆菌脂多糖(LPS)处理的其他大鼠组。对于用LPS处理的试验，将4组大鼠注射LPS，然后将其中一组用赋形剂处理，而将其它3组注射药物和其赋形剂。另一组试验的进行涉及5组大鼠；它们都不接受LPS处理。组不接受化合物(药物)或赋形剂；其它4组用带有或不带有药物的赋形剂处理。进行上述试验，以确定能降低USV的药物的抗焦虑或镇静效力。
LPS的给药
在处理前，让大鼠适应试验室环境15-20分钟。施用LPS(革兰氏阴性大肠杆菌血清型0111:B4内毒素，Sigma)诱发炎症。在异氟烷麻醉下，使用标准立体定位外科技术，在脑室内(i.c.v.)注射10μl LPS(2.4μg)。将耳间皮肤拉向嘴侧，切约1cm纵向切口，以暴露头颅表面。根据下述坐标确定穿刺位置：前囟后0.8mm，人字缝尖(矢状缝)外侧(左侧)1.5mm，和侧脑室中头骨表面下方(垂直)5mm。经5mm长无菌不锈钢针(26-G 3/8)注射LPS，所述无菌不锈钢针通过聚乙烯管(PE20；10-15cm)与100-μl哈密顿注射器连接。用硅酮胶将由短针(cut needle)(20-G)制得的4mm塞放置并固定到26-G针上，形成所需5mm深度。
注射LPS后，再适当停留针10秒，使化合物扩散，然后除去针。闭合切口，将大鼠送回其原来的笼中，在试验前使其最少休息3.5小时。
空气-喷雾(air-puff)刺激试验方案
对大鼠注射LPS和施用化合物(药物)后，将大鼠放入试验室中。试验时，取出全部大鼠并置于试验室外。每次一只大鼠带入试验室，并将其置于干净的盒(9×9×18cm)中，然后将该盒置于62(w)×35(d)×46(h)cm的声音衰减通风小隔室(BRS/LVE，Div.Tech-Serv Inc)中。经0.32cm空气排出喷口递送由系统(AirStim，San Diego Intruments)控制的空气-喷雾，该系统能够以固定持续时间(0.2s)和固定强度递送空气喷雾，且频率为每10秒喷1次。最多进行10次喷雾，或直至开始发出声音，其总是首次发生。第一次空气喷雾标记为记录开始。
超声记录试验方案
用放置在各小隔间中的麦克风(G.R.A.S.sound and vibrations，Vedbaek，Denmark)记录发声10分钟，麦克风由LMS(LMS CADA-X 3.5B，DataAcquisition Monitor，Troy，Michigan)软件控制。用相同软件(LMS CADA-X3.5B，Time Data Processing Monitor and UPA(User Programming and Analysis))记录、保存和分析0-32000Hz之间的频率。
化合物(药物)
调节所有化合物(药物)pH至6.5-7.5，并按4ml/kg给药。施用化合物(药物)后，将动物送回原来的笼中直至试验开始。
分析
通过一系列统计和付里叶分析进行记录，以过滤(20-24kHz之间)并计算感兴趣的参量。数据用平均±SEM表示。用T-检验法(用于在首次用于试验的大鼠与LPS处理过的大鼠之间比较)和单向方差分析及随后的Dunnett多重比较检验法(post-hoc)(用于药物效力)，来评估统计有效性。当最小p值≤0.05时，认为各组之间的差异显著。试验至少重复两次。
使用Hargreaves足底检验法测定热痛觉过敏
FCA或角叉菜胶给药
弗氏完全佐剂(FCA)：SIGMA cat.#F 5881，Mycabacterium tuberculosis(H37Ra，ATCC 25177)，1mg/ml，热杀菌，干燥，0.85ml石蜡，0.15ml二缩甘露醇一油酸酯。或角叉菜胶λ型IV(Cg)：SIGMA cat.#C-3889，(Gelatin，vegetable；Irish moss)，(1.0％NaCl溶液)。
用带有26G5/8无菌针头的哈密顿注射器进行注射。处理大鼠并置于麻醉室中用异氟烷麻醉。当达到所需效果时，取出大鼠并取腹卧位放置(胸骨位)。抓住左后爪，在#2和#3指爪垫之间，在腹面经皮下插入针，并伸到爪中间(跖骨区)。最后，将100μl FCA或100μl角叉菜胶溶液缓慢注射至爪中，取出针后，轻压3-4秒。
如果在操作过程中动物醒来，则将动物送回吸入室，直至达到所需效果。在足底内注射后，在受观察条件下，使动物在笼中醒来。
对于FCA处理，使大鼠炎性作用发展48小时。对于角叉菜胶处理，使大鼠炎性作用发展3小时。在试验早期，将大鼠(在笼中)置于试验室中。使它们适应环境至少30分钟。
试验部位
在足垫之间的足底表面中央进行热刺激。试验部位必须与玻璃接触，为了保持从玻璃到皮肤的合适热传递性能，其中间不得有尿或粪便。
足底装置由具有玻璃盖/平台的盒子构成，通过内部反馈机械保持玻璃表面温度为30℃。该玻璃平台下面是安装在活动臂上的灯泡，灯泡下面放置一面镜使灯光定位于大鼠爪下面。当激活光源时，其通过～2mm直径的小孔发光。试验者激活光源，当爪离开时，自动传感器会关闭光源；如果大鼠未能移开其爪，则应中断20.48秒以确保不发生组织损伤。试验者也可以随时关闭光源。计时器将记录光源激活的持续时间。
通量计：当激活光源时，对通量/cm2进行检测。其应当保持为在～97-98；通过调节足底装置可改变通量，但在试验过程中绝对不能改变通量。
时程
在诱发炎症后，可以在改变时间长度后进行试验。在注射FCA 48小时后或注射角叉菜胶3小时后，测定痛觉过敏。
检验方法
大鼠：对于建立剂量应答曲线的方法，将一组(7只大鼠)用作对照组；它们与其佘的28只大鼠一起麻醉，但不进行任何注射。在试验开始之前或者在试验之后马上就以尽可能最小的压力进行组检验，将大鼠放在位于足底装置顶部的独立有机玻璃盒(14×21×9cm)中；使它们熟悉环境30分钟。当准备用动物试验时，将光源直接置于试验部位下方并激活光源，记录等待缩回的时间。5-8分钟后，使皮肤温度恢复正常，进行第二次记录，然后将大鼠移开并放回它们的笼中。
基线值：将已注射FCA(或角叉菜胶)的其余28只大鼠(分成4组)置于机器上的单独的盒中，并熟悉环境30分钟。试验者应当查验爪的炎性程度和检查变色。将热刺激物置于试验部位下方，并记录等待缩回的时间；如上记录两次。正是这些动物基线值的比较确立了是否存在痛觉过敏。
给药后检验：一旦确认痛觉过敏，对大鼠注射感兴趣的化合物。根据标准方法，制备各化合物并将其溶解在最适宜赋形剂中。化合物(或化合物种类)的给药途径、剂量、体积和注射后的试验时间是特定的。在注射(例如，i.v.或s.c.注射)试验化合物20-30分钟后，放置大鼠并使其在足底装置上熟悉环境，同时药物产生作用。在注射试验化合物60分钟或更长时间后，将大鼠与其最初的笼配偶一起放回原来的笼中。大鼠总是与其最初的笼配偶一起放回原来的笼中，以便将一组大鼠内重新建立社会结构所带来的压力降至最低。30分钟后，将1只大鼠放在足底机上，并让其熟悉足底机30分钟。如上进行试验。记录两次。
试验条件：
动物必须镇静、安静，但尚有意识，并处于正确的位置上，在爪皮肤和机器的玻璃表面之间无尿或粪便。如果存在下述情况，则不能进行动物试验：
-动物正在运动，包括嗅、梳理和探究；
-动物处于睡眠中；
-动物发出明显的压力信号(紧张性不动、发声、耳低垂)，除非它们是化合物副作用不可避免的可能结果；
-动物所取的姿势使得爪与玻璃不直接接触(爪搁在尾上)；
-由于不良注射导致动物爪呈蓝色。在这种情况下，动物完全不能用于试验(在开始时)。
当存在尿或粪便时，移开动物，将玻璃表面擦拭干净，然后重新放回动物。当动物睡眠或紧张性不动时，试验者可以轻轻地移动盒子或在盒子前面移动手，以引起短期注意状态。在整个试验过程中，应当紧密观察动物的行为。
再-试验：
在试验过程中的任何时间，如果试验者不能确定爪缩回反应不是对热刺激的反应，则在5-8分钟后可以用该动物再．试验。在进行刺激时，动物突然移动或排尿或排便可以导致这种现象发生。
可接受的反应：
下列任何一项被认为是对热刺激的反应
-爪离开玻璃的缩回运动(通常在对爪轻轻拍打之后)；
-(被刺激的爪的对侧)身体的侧方运动
-趾离开玻璃；
-发炎的爪中心(中部爪)面远离玻璃。
分析
数据用平均±SEM表示。用T-检验法(用于在首次用于试验的大鼠与发炎的大鼠之间比较)和单向方差分析及随后的Dunnett多重比较检验法(post-hoc)(用于药物效力)，来评估统计有效性。当最小p值≤0.05时，认为各组之间的差异显著。
实施例
通过下述实施例更详细地说明本发明，所述实施例描述了本发明化合物的制备、提纯、分析和生物测定方法，其对本发明不构成限制。
中间体1：4-[(二甲氧基磷酰基)甲基]苯甲酸甲酯
在N₂气氛下，将4-(溴甲基)苯甲酸甲酯(11.2g，49mmol)和亚磷酸三甲酯(25mL)的混合物回流5小时。与甲苯共蒸馏除去过量亚磷酸三甲酯，以定量收率得到中间体1。¹HNMR(CDCl₃)δ3.20(d，2H，J＝22Hz，CH₂)，3.68(d，3H 10.8Hz，OCH₃)，3.78(d，3H，11.2Hz，OCH₃)，3.91(s，3H，OCH₃)，7.38(m，2H，Ar-H)，8.00(d，2H，J＝8Hz，Ar-H)。
中间体2：4-(4-甲氧基羰基-亚苄基)-哌啶-1-甲酸叔丁酯
在-78℃，向中间体1的无水THF(200mL)溶液中滴加二异丙基氨基化锂(32.7mL 1.5M己烷溶液，49mmol)。使反应混合物升至室温，然后加入N-叔丁氧基羰基-4-哌啶酮(9.76g，49mmol，在100mL干燥THF中)。12小时后，用水(300mL)淬灭反应混合物，并用乙酸乙酯(3×300mL)萃取。合并的有机相用MgSO₄干燥并蒸发得到粗产物，将该粗产物用快速色谱法提纯，得到白色固状中间体2(5.64g，35％)。IR(NaCl)3424，2974，2855，1718，1688，1606，1427，1362，1276cm^-1；¹H NMR(CDCl₃)δ1.44(s，9H)，2.31(t，J＝5.5Hz，2H)，2.42(t，J＝5.5Hz，2H)，3.37(t，J＝5.5Hz，2H)，3.48(t，J＝5.5Hz，2H)，3.87(s，3H，OCH₃)，6.33(s，1H，CH)，7.20(d J＝6.7Hz，2H，Ar-H)，7.94(d，J，＝6.7Hz，2H，Ar-H)；¹³C NMR(CDCl₃)δ28.3，29.2，36.19，51.9，123.7，127.8，128.7，129.4，140.5，142.1，154.6，166.8。
中间体3：4-溴-4-[溴-(4-甲氧基羰基-苯基)-甲基]-哌啶-1-甲酸叔丁基酯
在0℃，向中间体2(5.2g，16mmol)和K₂CO₃(1.0g)在干燥二氯甲烷(200mL)中的混合物中加入溴(2.9g，18mmol)的CH₂Cl₂(30mL)溶液。在室温1.5小时后，将滤除了K₂CO₃的溶液浓缩。将残余物溶解在乙酸乙酯(200mL)中，用水(200mL)、0.5M HCl(200mL)和盐水(200mL)洗涤，用MgSO₄干燥。除去溶剂得到粗产物，从甲醇中重结晶，得到白色固状中间体3(6.07g，78％)。IR(NaCl)3425，2969，1725，1669，1426，1365，1279，1243cm^-1；¹HNMR(CDCl₃)δ1.28(s，9H)，1.75(m，1H)，1.90(m，1H)，2.1(m，2H)，3.08(br，2H)，3.90(s，3H，OCH₃)，4.08(br，3H)，7.57(d，J＝8.4Hz，2H，Ar-H)7.98(d，J＝8.4Hz，2H，Ar-H)；¹³C NMR(CDCl₃)δ28.3，36.6，38.3，40.3，52.1，63.2，72.9，129.0，130.3，130.4，141.9，154.4，166.3。
中间体4：4-[溴-(4-羧基-苯基)-亚甲基]-哌啶-1-甲酸叔丁酯
在40℃，将中间体3(5.4g 11mmol)在甲醇(300mL)和2.0M NaOH(100mL)中的溶液加热3小时。过滤收集固体，并真空干燥过夜。将干燥的盐溶解在40％乙腈/水中，用浓HCl调节pH至2。过滤分离出白色粉末状中间体4(3.8g，87％)。¹H NMR(CDCl₃)δ1.45(s，9H，^tBu)，2.22(dd，J＝5.5Hz，6.1Hz，2H)，2.64(dd，J＝5.5Hz，6.1Hz，2H)，3.34(dd，J＝5.5Hz，6.1Hz，2H)，3.54(dd，J＝5.5Hz，6.1Hz，2H)，7.35(d，J＝6.7Hz，2H，Ar-H)，8.08(d，J＝6.7Hz，2H，Ar-H)；¹³C NMR(CDCl₃)δ28.3，31.5，34.2，44.0，115.3，128.7，129.4，130.2，137.7，145.2，154.6，170.3。
中间体5：4-[溴-(4-二乙基氨基甲酰基-苯基)-亚甲基]-哌啶-1-甲酸叔丁酯
在-20℃，向中间体4(1.0g，2.5mmol)的干燥二氯甲烷(10mL)溶液中加入氯甲酸异丁酯(450mg，3.3mmol)。在-20℃保持20分钟后，加入二乙胺(4mL)并使反应升至室温。1.5小时后，蒸发溶剂，将残余物在乙酸乙酯和水之间分配。用盐水洗涤有机相并用MgSO₄干燥。除去溶剂得到粗产物，用快速色谱法提纯，得到白色针状中间体5(800mg，73％)。IR(NaCl)3051，2975，1694，1633，1416，1281，1168，1115cm^-1；¹H NMR(CDCl₃)δ1.13(br，3H，CH₃)，1.22(br，3H，CH₃)，1.44(s，9H，^tBu)，2.22(t，J＝5.5Hz，2H)，2.62(t，J＝5.5Hz，2H)，3.33(m，4H)，3.55(m，4H)，7.31(d，J＝8.0Hz，2H，Ar-H)，7.36(d，J＝8.0Hz，2H，Ar-H)；¹³C NMR(CDCl₃)δ12.71，14.13，28.3，31.5，34.2，39.1，43.2，79.7，115.9，126.3，129.3，136.8，137.1，140.6，154.6，170.5。
中间体6：4-((4-氰基苯基){4-[(二乙基氨基)羰基]苯基亚甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
向含有中间体5(23.3g，51.6mmol)的烧瓶中加入甲苯(240mL)、乙醇(24mL)、4-氰基苯基硼酸(9.87g，69.5mmol)和2N碳酸钾水溶液(24ml，48mmol)。用氮气将混合物脱气30分钟。然后加入四三苯基膦合钯(5.97g，5.1mmol)。在80℃加热反应混合物过夜。冷却反应，用饱和碳酸氢钠溶液稀释，分离有机层。然后将水相用乙酸乙酯萃取3次。用无水硫酸钠干燥合并的有机萃取液，过滤并浓缩。残余物用快速色谱法提纯，用40/60-60/40乙酸乙酯/庚烷洗脱，得到白色固体状中间体6(11.8g，48％)。
中间体7：4-([4-(氨基羰基)苯基]{4-[(二乙基氨基)羰基]苯基}亚甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在烧瓶中，向中间体6(9.81g，20.7mmol)与90ml叔丁醇的混合物中加入磨细的氢氧化钾(2.9g，51.8mmol)。在80℃加热反应3小时，然后浓缩。将混合物在水和二氯甲烷之间分配。分离有机层，并将水层用二氯甲烷萃取四次。合并的有机层用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物用快速色谱法提纯，用90/10乙酸乙酯/庚烷洗脱，得到白色固体中间体7(9.0g，88.4％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)1.09-1.16(br s，3H)，1.20-1.26(brs，3H)，1.46(s，9H)，2.29-2.37(m，4H)，3.24-3.32(br s，2H)，3.43-3.49(m，4H)，3.50-3.57(br s，2H)，5.49-5.66(br s，1H)，5.97-6.12(br s，1H)，7.11(d，J＝8.4Hz，2H)，7.19(d，J＝8.4Hz，2H)，7.32(d，J＝8.4Hz，2H)，7.75(d，J＝8.4Hz，2H)。
中间体8：4-[[4-[(二乙基氨基)羰基]苯基]-4-哌啶亚基甲基]苯甲酰胺
向中间体7(4g，8.4mmol)的二氯甲烷(40ml)溶液中加入三氟乙酸(10ml)。在40℃加热反应4小时，然后浓缩至干。将得到的油状物转移至二氯甲烷中并用1N氢氧化钠溶液中和。分离有机层，水层用二氯甲烷萃取5次。合并的有机层用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到中间体8(2.9g，87.7％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)1.07-1.17(br s，3H)，1.19-1.28(br s，3H)，2.29-2.38(m，4H)，2.89-2.96(m，4H)，3.22-3.32(br s，2H)，3.48-3.59(br s，2H)，5.53-5.67(br s，1H)，6.01-6.14(br s，1H)，7.12(d，J＝8.4Hz，2H)，7.20(d，J＝8.4Hz，2H)，7.31(d，J＝8.4Hz，2H)，7.74(d，J＝8.4Hz，2H)。
化合物1：4-[[4-[(二乙基氨基)羰基]苯基][1-(2-吡啶基甲基)-4-哌啶亚基(piperidinylidene)]甲基]苯甲酰胺

向中间体8(400mg，1.02mmol)的1，2-二氯乙烷(6ml)悬浮液中加入2-吡啶甲醛(136μL；1.43mmol，1.4当量)和三乙酰氧基硼氢化钠(303mg；1.54mmol，1.4当量)。在氮气气氛下，室温搅拌反应过夜。将反应用二氯甲烷稀释，并用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤。水相用二氯甲烷萃取4次，并将合并的有机物用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。所得油状物用反相色谱法提纯，用含有0.1％三氟乙酸的10％-45％乙腈水溶液洗脱，以三氟乙酸盐的形式得到产物，冻干得到白色固体化合物1(475mg，收率：65％)。M.S.(理论值)：483.3(MH⁺)，M.S.(测定值)：483.2(MH⁺).HPLC：k’：2.37；纯度：＞99％(215nm)，＞99％(254nm)，＞99％(280nm)。条件：Zorbax C-18，梯度10-95％B25分钟，流速：1mL/分钟，30℃，A：0.05％TFA的水溶液，B：0.05％TFA的CH₃CN溶液。¹H NMR(400MHz，CD₃OD)：δ1.12(m，3H)，1.23(m，3H)，2.70(m，4H)，3.29(m，2H)，3.42(br s，4H)，3.54(m，2H)，4.51(s，2H)，7.28(m，4H)，7.37(d，J＝8.0Hz，2H)，7.44(dd，J＝5.3Hz，7.2Hz，1H)，7.49(d，J＝7.8Hz，1H)，7.86(d，J＝8.4Hz，2H)，7.89(m，1H)，8.68(d，J＝4.5Hz，1H).测定值：C，58.37；H，5.26；N，8.19。C₃₀H₃₄N₄O₂×1.80 C₂HF₃O₂×0.2 H₂O理论值(has)：C，58.36；H，5.28；N，8.10％。
化合物2：4-[[4-[(二乙基氨基)羰基]苯基][1-(2-噻吩基甲基)-4-哌啶亚基]甲基]苯甲酰胺

用化合物1的制备方法，通过中间体8(400mg，1.02mmol)和2-噻吩甲醛(134μL，1.43mmol)，得到白色固状的化合物2的三氟乙酸盐(424mg，69％)。M.S.(理论值)：488.2(MH⁺)，M.S.(测定值)：488.2(MH⁺)。HPLC：k’：2.73；纯度：＞99％(215nm)，＞99％(254nm)，＞99％(280nm)。条件：Zorbax C-18，梯度10-95％B 25分钟，流速：1mL/分钟，30℃，A：0.05％TFA的水溶液，B：0.05％TFA的CH₃CN溶液。¹H NMR(400MHz，CD₃OD)：δ1.09(m，3H)，1.20(m，3H)，2.51(br s，2H)，2.73(br s，2H)，3.09(br s，2H)，3.26(m，2H)，3.53(m，4H)，4.58(s，2H)，7.12dd，J＝3.5Hz，5.1Hz，1H)，7.24(m，4H)，7.31(dd，J＝1.0Hz，3.5Hz，1H)，7.34(d，J＝8.4Hz，2H)，7.61(dd，J＝1.0Hz，5.1Hz，1H)7.83(d，J＝8.4Hz，2H)。测定值：C，56.55；H，5.24；N，6.17。C₂₉H₃₃N₃O₂S×1.70C₂HF₃O₂×0.4 H₂O理论值：C，56.51；H，5.20；N，6.10％。
化合物3：4-[[4-[(二乙基氨基)羰基]苯基][1-(2-呋喃基甲基)-4-哌啶亚基]甲基]苯甲酰胺

用化合物1的制备方法，通过中间体8(400mg，1.02mmol)与2-糠醛(134μL，1.43mmol)，得到白色固状的化合物3的三氟乙酸盐(441mg，63％)。M.S.(理论值)：472.3(MH⁺)，M.S.(测定值)：472.2(MH⁺)。HPLC：k’：2.55；纯度：＞99％(215nm)，＞99％(254nm)，＞99％(280nm)。条件：Zorbax C-18，梯度10-95％B 25分钟，流速：1mL/分钟，30℃，A：0.05％TFA水溶液，B：0.05％TFA的CH₃CN溶液。¹H NMR(400MHz，CD₃OD)：δ1.12(m，3H)，1.23(m，3H)，2.53(br s，2H)，2.75(br s，2H)，3.13(br s，2H)，3.29(m，2H)，3.54(m，4H)，4.43(s，2H)，6.53dd，J＝1.8Hz，3.1Hz，1H)，6.72(d，3.3Hz，1H)，7.27(m，4H)，7.37(d，J＝8.2Hz，2H)，7.68(dd，J＝0.6Hz，1.8Hz，1H)，7.86(d，J＝8.4Hz，2H)。测定值：C，59.42；H，5.38；N，6.59。C₂₉H₃₃N₃O₃×1.50 C₂HF₃O₂×0.2 H₂O理论值：C，59.48；H，5.44；N，6.50％。
化合物4：4-[[1-[(5-氯-2-呋喃基)甲基]-4-哌啶亚基][4-[(二乙基氨基)羰基]苯基]甲基]苯甲酰胺

用化合物1的制备方法，通过中间体8(340mg，0.87mmol)和5-氯-2-糠醛(158mg，1.21mmol)，得到白色固状的化合物4的三氟乙酸盐(341mg，63％)。M.S.(理论值)：506.2(MH⁺)，M.S.(测定值)：506.2(MH⁺)。HPLC：k’：2.93；纯度：＞99％(215nm)，＞99％(254nm)，＞99％(280nm)。条件：Zorbax C-18，梯度10-95％B 25分钟，流速：1mL/分钟，30℃，A：0.05％TFA的水溶液，B：0.05％TFA的CH₃CN溶液。¹H NMR(400MHz，CD₃OD)：δ1.12(m，3H)，1.23(m，3H)，2.66(br s，4H)，3.17(br s，2H)，3.30(m，2H)，3.54(m，2H)，4.41(s，2H)，6.41(d，J＝3.3Hz，1H)，6.77(d，J＝3.3Hz，1H)，7.27(m，4H)，7.37(d，J＝8.4Hz，2H)，7.86(d，J＝8.4Hz，2H)。测定值：C，55.48；H，4.86；N，6.03。C₂₉H₃₂N₃O₃Cl×1.70 C₂HF₃O₂×0.1 H₂O理论值：C，55.46；H，4.87；N，5.99％。
化合物5：4-[[4-[(二乙基氨基)羰基]苯基][1-[(5-甲基-2-呋喃基)甲基]-4-哌啶亚基]甲基]苯甲酰胺

用化合物1的制备方法，通过中间体8(340mg，0.87mmol)与5-甲基糠醛(121μL，1.21mmol)，得到白色固体的化合物5的三氟乙酸盐(344mg，66％)。M.S.(理论值)：486.3(MH⁺)，M.S.(测定值)：486.2(MH⁺)。HPLC：k’：2.86；纯度：＞99％(215nm)，＞99％(254nm)，＞99％(280nm)。条件：Zorbax C-18，梯度10-95％B 25分钟，流速：1mL/分钟，30℃，A：0.05％TFA的水溶液，B：0.05％TFA的CH₃CN溶液。¹H NMR(400MHz，CD₃OD)：δ1.12(m，3H)，1.23(m，3H)，2.31(s，3H)，2.52(br s，2H)，2.76(br s，2H)，3.09(br s，2H)，3.29(m，2H)，3.54(m，4H)，4.46(s，2H)，6.11(dd，J＝1.0Hz，3.1Hz，1H)，6.58(dd，J＝1.0Hz，3.1Hz，1H)，7.27(m，4H)，7.37(d，J＝8.4Hz，2H)，7.85(d，J＝8.4Hz，2H)。测定值：C，60.71；H，5.69；N，6.55。C₃₀H₃₅N₃O₃×1.40 C₂HF₃O₂×0.2H₂O理论值：C，60.72；H，5.72；N，6.48％。
化合物6：4-[[4-[(二乙基氨基)羰基]苯基][1-[(3-甲基-2-噻吩基)甲基]-4-哌啶亚基]甲基]苯甲酰胺

用化合物1的制备方法，通过中间体8(340mg，0.87mmol)和3-甲基-2-噻吩甲醛(131μL，1.21mmol)，得到白色固体的化合物6的三氟乙酸盐(307mg，57％)。M.S.(理论值)：502.3(MH⁺)，M.S.(测定值)：502.2(MH⁺)。HPLC：k’：2.55；纯度：＞91％(215nm)，＞91％(254nm)，＞92％(280nm)。条件：ZorbaxC-18，梯度10-95％B 25分钟，流速：1mL/分钟，30℃，A：0.05％TFA的水溶液，B：0.05％TFA的CH₃CN溶液。¹H NMR(400MHz，CD₃OD)：δ1.11(m，3H)，1.23(m，3H)，2.33(s，3H)，2.53(br s，2H)，2.78(br s，2H)，3.16(br s，2H)，3.29(m，2H)，3.53(m，2H)，3.60(br s，2H)，4.54(s，2H)，6.99(d，J＝5.2Hz，1H)，7.27(m，4H)，7.37(d，J＝8.4Hz，2H)，7.54(d，J＝5.2Hz，1H)，7.86(d，J＝8.6Hz，2H)。测定值：C，57.13；H，5.15；N，5.88。C₃₀H₃₅N₃O₂S×1.80 C₂HF₃O₂
 理论值：C，57.09；H，5.25；N，5.94％。
化合物7：4-[[1-[(3-氯-2-噻吩基)甲基]-4-哌啶亚基][4-[(二乙基氨基)羰基]苯基]甲基]苯甲酰胺

用化合物1的制备方法，通过中间体8(340mg，0.87mmol)与3-氯噻吩-2-甲醛(177mg，1.21mmol)，得到白色固体的化合物7的三氟乙酸盐(305mg，55％)。M.S.(理论值)：522.2(MH⁺)，M.S.(测定值)：522.2(MH⁺)。HPLC：k’：2.94；纯度：＞97％(215nm)，＞97％(254nm)，＞99％(280nm)。条件：ZorbaxC-18，梯度10-95％B 25分钟，流速：1mL/分钟，30℃，A：0.05％TFA的水溶液，B：0.05％TFA的CH₃CN溶液。¹H NMR游离胺(400MHz，CDCl₃)：δ1.12(br s，3H)，1.23(br s，3H)，2.40(m，4H)，2.59(m，4H)，3.27(br s，2H)，3.53(br s，2H)，3.76(s，2H)，5.61(br s，1H)，6.07(br s，1H)，6.87(d，J＝5.4Hz，1H)，7.11(d，J＝8.4Hz，2H)，7.19(d，J＝8.4Hz，2H)，7.23(d，J＝5.4Hz，1H)，7.30(d，J＝8.4Hz，2H)，7.73(d，J＝8.4Hz，2H)。测定值：C，54.79；H，4.82；N，6.03。C₂₉H₃₂N₃O₂SCl×1.60 C₂HF₃O₂×0.1 H₂O理论值：C，54.75；H，4.82；N，5.95％。
化合物8：4-[[1-[(5-氯-2-噻吩基)甲基]-4-哌啶亚基][4-[(二乙基氨基)羰基]苯基]甲基]苯甲酰胺

用化合物1的制备方法，通过中间体8(400mg，1.02mmol)和5-氯-2-噻吩甲醛(140μL，1.32mmol)，得到白色固体的化合物8的三氟乙酸盐(486mg，75％)。M.S.(理论值)：522.2(MH⁺)，M.S.(测定值)：522.2(MH⁺)。HPLC：k’：3.17；纯度：＞99％(215nm)，＞99％(254nm)，＞99％(280nm)。条件：ZorbaxC-18，梯度10-95％B 25分钟，流速：1mL/分钟，30℃ A：0.05％TFA的水溶液，B：0.05％TFA的CH₃CN溶液。¹H NMR游离胺(400MHz，CDCl₃)：δ1.11(br s，3H)，1.22(br s，3H)，2.40(m，4H)，2.54(m，4H)，3.27(br s，2H)，3.53(br s，2H)，3.66(s，2H)，5.70(br s，1H)，6.12(br s，1H)，6.66(d，J＝3.7Hz，1H)，6.73(d，J＝3.7Hz，1H)，7.10(d，J＝8.4Hz，2H)，7.18(d，J＝8.4Hz，2H)，7.29(d，J＝8.4Hz，2H)，7.73(d，J＝8.4Hz，2H)。测定值：C，53.87；H，4.79；N，5.87。C₂₉H₃₂N₃O₂SCl×1.70 C₂HF₃O₂×0.4 H₂O理论值：C，53.81；H，4.81；N，5.81％。
化合物9：4-[[4-[(二乙基氨基)羰基]苯基][1-[(5-甲基-2-噻吩基)甲基]-4-哌啶亚基]甲基]苯甲酰胺

用化合物1的制备方法，通过中间体8(400mg，1.02mmol)和5-甲基-2-噻吩甲醛(142μL，1.32mmol)，得到白色固体的化合物9的三氟乙酸盐(530mg，84％)。M.S.(理论值)：502.3(MH⁺)，M.S.(测定值)：502.2(MH⁺)。HPLC：k’：3.05；纯度：＞99％(215nm)，＞99％(254nm)，＞99％(280nm)。条件：ZorbaxC-18，梯度10-95％B 25分钟，流速：1mL/分钟，30℃，A：0.05％TFA的水溶液，B：0.05％TFA的CH₃CN溶液。¹H NMR游离胺(400MHz，CDCl₃)：δ1.11(br s，3H)，1.22(br s，3H)，2.39(m，4H)，2.45(s，3H)，2.53(m，4H)，3.27(br s，2H)，3.53(br s，2H)，3.68(s，2H)，5.67(br s，1H)，6.10(br s，1H)，6.57(m，1H)，6.66(d，J＝3.3Hz，1H)，7.10(d，J＝8.4Hz，2H)，7.18(d，J＝8.4Hz，2H)，7.29(d，J＝8.4Hz，2H)，7.72(d，J＝8.4Hz，2H)。测定值：C，57.88；H，5.41；N，6.16。C₃₀H₃₅N₃O₂S×1.60 C₂HF₃O₂×0.3 H₂O：C，57.83；H，5.44；N，6.09％。
化合物10：4-[[1-[(6-氯-3-吡啶基)甲基]-4-哌啶亚基][4-[(二乙基氨基)羰基]苯基]甲基]-苯甲酰胺

向中间体8(400mg，1.02mmol)和2-氯-5-(氯甲基)吡啶(197mg，1.22mmol)的DMF(6ml)溶液中加入碳酸钾(169mg，1.22mmol)。在50℃加热反应过夜。浓缩反应混合物并转移至二氯甲烷和水中。分离有机层。然后将水层用二氯甲烷萃取3次。将合并的有机萃取液用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。得到的油状物用反相色谱法提纯，用含有0.1％三氟乙酸的10％-45％乙腈的水溶液洗脱。以三氟乙酸盐的形式得到产物，冻干得到白色固体的化合物10(513mg，收率：67％)。M.S.(理论值)：517.2(MH⁺)，M.S.(测定值)：517.2(MH⁺)。HPLC：k’：2.63；纯度：＞99％(215nm)，＞99％(254nm)，＞99％(280nm)。条件：Zorbax C-18，梯度10-95％B 25分钟，流速：1mL/分钟，30℃，A：0.05％TFA的水溶液，B：0.05％TFA的CH₃CN溶液。¹H NMR游离胺(400MHz，CDCl₃)：δ1.11(br s，3H)，1.22(br s，3H)，2.37(m，4H)，2.47(m，4H)，3.26(br s，2H)，3.50(s，2H)，3.52(br s，2H)，5.73(br s，1H)，6.13(br s，1H)，7.10(d，J＝8.1Hz，2H)，7.18(d，J＝8.2Hz，2H)，7.29(m，3H)，7.66(dd，J＝2.4，8.2Hz，1H)，7.73(d，J＝8.4Hz，2H)，8.3(d，J＝2.2Hz，1H)。测定值：C，56.07；H，4.94；N，7.88。C₃₀H₃₃N₄O₂Cl×1.70 C₂HF₃O₂×0.2 H₂O理论值：C，56.15；H，4.95；N，7.84％。
化合物11：4-[[4-[(二乙基氨基)羰基]苯基][1-(3-羟基丙基)-4-哌啶亚基]甲基]苯甲酰胺

向中间体8(400mg，1.02mmol)和2-(3-溴丙氧基)四氢-2H-吡喃(207μL，1.22mmol)的DMF(6ml)溶液中加入碳酸钾(169mg，1.22mmol)。在50℃加热反应过夜。浓缩反应混合物，并转移至二氯甲烷和水中。分离有机层。水相用二氯甲烷萃取3次。用无水硫酸钠干燥合并的有机萃取液，过滤并浓缩。将所得油状物转移至甲醇(5ml)和1N HCl(2mL)中，在50℃加热过夜。浓缩反应并用反相色谱法提纯，用含有0.1％三氟乙酸的10％-45％乙腈的水溶液洗脱。以三氟乙酸盐的形式得到产物，冻干得到化合物11(168mg，29％)。M.S.(理论值)：450.3(MH⁺)，M.S.(测定值)：450.2(MH⁺)。HPLC：k’：1.99；纯度：＞99％(215nm)，＞99％(254nm)，＞99％(280nm)。条件：Zorbax C-18，梯度10-95％B 25分钟，流速：1mL/分钟，30℃，A：0.05％TFA的水溶液，B：0.05％TFA的CH₃CN溶液。¹H NMR(400MHz，CD₃OD)：δ1.12(m，3H)，1.23(m，3H)，1.95(m，2H)，2.53(m，2H)，2.77(m，2H)，3.09(m，2H)，3.28(m，4H)，3.54(m，2H)，3.67(m，4H)，7.28(m，4H)，7.37(d，J＝8.4Hz，2H)，7.86(d，J＝8.4Hz，2H)。测定值：C，58.32；H，6.13；N，6.97。C₂₇H₃₅N₃O₃×1.30C₂HF₃O₂×0.6H₂O理论值：C，58.41；H，6.21；N，6.90％。
化合物12：4-[[4-[(二乙基氨基)羰基]苯基][1-(2-甲氧基乙基)-4-哌啶亚基]甲基]苯甲酰胺

用化合物10的制备方法，通过中间体8(220mg，0.55mmol)和2-溴乙基甲基醚(63.4μL，0.67mmol)，得到白色固体的化合物12的三氟乙酸盐(124mg，39％)。M.S.(理论值)：450.3(MH⁺)，M.S.(测定值)：450.2(MH⁺)。HPLC：k’：2.23；纯度：＞94％(215nm)，＞95％(254nm)，＞99％(280nm)。条件：ZorbaxC-18，梯度10-95％B 25分钟，流速：1mL/分钟，30℃，A：0.05％TFA的水溶液，B：0.05％TFA的CH₃CN溶液。¹H NMR(400MHz，CD₃OD)：δ1.12(m，3H)，1.23(m，3H)，2.56(m，2H)，2.75(m，2H)，3.12(m，2H)，3.29(m，2H)，3.37(m，2H)，3.41(s，3H)，3.53(m，2H)，3.64(m，2H)，3.72(m，2H)，7.27(m，4H)，7.37(d，J＝8.4Hz，2H)，7.86(d，J＝8.4Hz，2H)。测定值：C，55.70；H，5.90；N，6.48。C₂₇H₃₅N₃O₃×1.70C₂HF₃O₂×0.7H₂O理论值：C，55.66；H，5.85；N，6.41％。
化合物13：4-[[4-[(二乙基氨基)羰基]苯基][1-(3-吡啶基甲基)-4-哌啶亚基]甲基]苯甲酰胺

用化合物1的制备方法，通过中间体8(200mg，0.50mmol)和3-吡啶甲醛(63μL，0.64mmol)，得到白色固体的化合物13的三氟乙酸盐(255mg，72％)。M.S.(理论值)：483.3(MH⁺)，M.S.(测定值)：483.2(MH⁺)。HPLC：k’：1.86；纯度：＞98％(215nm)，＞98％(254nm)，＞99％(280nm)。条件：Zorbax C-18，梯度10-95％B 25分钟，流速：1mL/分钟，30℃，A：0.05％TFA的水溶液，B：0.05％TFA的CH₃CN溶液。¹H NMR游离胺(400MHz，CDCl₃)：δ1.11(brs，3H)，1.22(br s，3H)，2.38(m，4H)，2.49(m，4H)，3.27(br s，2H)，3.53(s，2H)，3.53(br s，2H)，5.62(br s，1H)，6.09(br s，1H)，7.11(d，J＝8.2Hz，2H)，7.18(d，J＝8.4Hz，2H)，7.25(m，1H)，7.30(d，J＝8.2Hz，2H)，7.67(m，1H)，7.73(d，J＝8.4Hz，2H)，8.51(br s，1H)，8.55(br s，1H)。测定值：C，56.34；H，5.02；N，7.80。C₃₀H₃₄N₄O₂×2.1 C₂HF₃O₂×0.4 H₂O理论值：C，56.33；H，5.10；N，7.68％。
化合物14：4-[[4-[(二乙基氨基)羰基]苯基][1-(4-吡啶基甲基)-4-哌啶亚基]甲基]苯甲酰胺

用化合物10的制备方法，通过中间体8(200mg，0.50mmol)和4-吡啶甲醛(63μL，0.64mmol)，得到白色固体的化合物14的三氟乙酸盐(244mg，68％)。M.S.(理论值)：483.3(MH⁺)，M.S.(测定值)：483.2(MH⁺)。HPLC：k’：1.80；纯度：＞99％(215nm)，＞98％(254nm)，＞99％(280nm)。条件：Zorbax C-18，梯度10-95％B 25分钟，流速：1mL/分钟，30℃，A：0.05％TFA的水溶液，B：0.05％TFA的CH₃CN溶液。¹HNMR游离胺(400MHz，CDCl₃)：δ1.11(brs，3H)，1.23(br s，3H)，2.40(m，4H)，2.49(m，4H)，3.27(br s，2H)，3.52(s，2H)，3.53(br s，2H)，5.61(br s，1H)，6.09(br s，1H)，7.11(d，J＝8.4Hz，2H)，7.19(d，J＝8.6Hz，2H)，7.29(m，4H)，7.73(d，J＝8.6Hz，1H)，8.54(br s，2H)。测定值：C，55.00；H，5.00；N，7.43。C₃₀H₃₄N₄O₂×2.3C₂HF₃O₂×0.6H₂O理论值：C，54.99；H，5.00；N，7.41％。
化合物15：4-[[4-[(二乙基氨基)羰基]苯基][1-[(6-甲基-2-吡啶基)甲基]-4-哌啶亚基]甲基]苯甲酰胺

用化合物1的制备方法，通过中间体8(300mg，0.77mmol)和6-甲基-2-吡啶甲醛(116mg，0.97mmol)，得到白色固体的化合物15的三氟乙酸盐(291mg，52％)。M.S.(理论值)：497.3(MH⁺)，M.S.(测定值)：497.2(MH⁺)。HPLC：k’：2.49；纯度：＞99％(215nm)，＞99％(254nm)，＞99％(280nm)。条件：ZorbaxC-18，梯度10-95％B 25分钟，流速：1mL/分钟，30℃，A：0.05％TFA的水溶液，B：0.05％TFA的CH₃CN溶液。¹H NMR游离胺(400MHz，CDCl₃)：δ1.11(br s，3H)，1.23(br s，3H)，2.41(m，4H)，2.53(s，3H)，2.56(m，4H)，3.26(br s，2H)，3.53(br s，2H)，3.65(s，2H)，5.60(br s，1H)，6.08(br s，1H)，7.02(d，J＝7.4Hz，1H)，7.12(d，J＝8.2Hz，2H)，7.19(d，J＝8.4Hz，2H)，7.25(d，J＝7.8Hz，1H)，7.29(d，J＝8.4Hz，2H)，7.54(t，J＝7.6Hz，1H)，7.73(d，J＝8.4Hz，2H)。测定值：C，59.19；H，5.51；N，8.12。C₃₁H₃₆N₄O₂×1.70C₂HF₃O₂×0.4H₂O理论值：C，59.22；H，5.56；N，8.03％。
中间体9
向中间体5(1.09g，2.41mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液中加入三氟乙酸(1.37ml，12.08mmol)。在40℃搅拌反应过夜，然后浓缩至干。将所得油状物转移至二氯甲烷中并用1N NaOH中和。分离有机层，水层用二氯甲烷萃取5次。合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。
将该油状物转移至二甲基甲酰胺(25ml)中。向该溶液中加入2-(3-溴丙氧基)四氢-2H-吡喃(490μL，2.89mmol)和碳酸钾(400mg，2.89mmol)。在50℃加热该反应过夜。浓缩反应混合物并转移至二氯甲烷和水中。分离有机层。水相用二氯甲烷萃取3次。将合并的有机萃取物用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。得到的油状物用硅胶快速色谱法提纯，用1％-5％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱，得到中间体9(0.85g，71％)。
中间体10
将中间体9(852mg，1.72mmol)的甲醇(5mL)和1N HCl(2ml)溶液于50℃加热过夜。浓缩反应混合物，并转移至二氯甲烷和饱和碳酸氢钠溶液中。分离有机层，然后水相用二氯甲烷萃取3次。将合并的有机萃取液用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到醇(658mg，93％)，该醇无需进一步提纯而直接烷基化。
向该醇(658mg，1.6mmol)的二甲基甲酰胺(10ml)冰冷溶液中加入氢化钠(60％，在油中)(46mg，1.9mmol)。搅拌该悬浮液30分钟，然后加入碘甲烷(118μL，1.9mmol)。搅拌反应过夜。加入饱和氯化铵溶液并浓缩反应。将混合物在乙酸乙酯和水之间分配。水相用乙酸乙酯萃取4次。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。得到的油状物用反相色谱法提纯，用含有0.1％三氟乙酸的10％-45％乙腈的水溶液洗脱。以三氟乙酸盐的形式得到产物，通过用二氯甲烷和1N氢氧化钠溶液萃取，得到无色油状的中间体10(95mg，收率14％)。
化合物16：4-[[4-[(二乙基氨基)羰基]苯基][1-(3-甲氧基丙基)-4-哌啶亚基]甲基]苯甲酰胺

向含有中间体10(43mg，0.1mmol)的烧瓶中加入甲苯(3mL)、乙醇(0.5mL)、4-氨基羰基苯基硼酸(33mg，0.2mmol)和2N碳酸钾水溶液(0.5mL，1mmol)。将混合物用氮气脱气30分钟。然后加入四三苯基膦化钯(11.6mg，0.01mmol)。在85℃加热反应混合物3小时。冷却反应混合物，并用乙酸乙酯和水稀释。分离有机层，然后将水相用乙酸乙酯萃取4次。将合并的有机萃取液用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将得到的残余物用反相色谱法提纯，用含0.1％三氟乙酸的10％-45％乙腈的水溶液洗脱。以三氟乙酸盐的形式得到产物，冻干得到白色固体的化合物16(31mg，收率54％)。M.S.(理论值)：464.3(MH⁺)，M.S.(测定值)：464.2(MH⁺)。HPLC：k’：4.02；纯度：＞97％(215nm)，＞98％(254nm)，＞99％(280nm)。条件：Zorbax C-18，梯度10-95％B 25分钟，流速：1mL/分钟，30℃，A：0.05％TFA的水溶液，B：0.05％TFA的CH₃CN溶液。¹H NMR(400MHz，CD₃OD)：δ1.12(t，J＝6.2Hz，3H)，1.24(t，J＝6.1Hz，3H)，1.97-2.06(m，2H)，2.47-2.58(m，2H)，2.71-2.82(m，2H)，3.03-3.12(m，2H)，3.22-3.32(m，2H)，3.34(s，3H)，3.48-3.57(m，4H)，3.61-3.68(m，2H)7.25-7.30(m，4H)，7.37(d，J＝8.0Hz，2H)，7.86(t，J＝8.4Hz，2H)。
中间体11：4-[溴[1-(苯基甲基)-4-哌啶亚基]甲基]-N，N-二甲基-苯甲酰胺
向中间体5(1.0g，2.2mmol)的二氯甲烷(15mL)溶液中加入三氟乙酸(2.2mL，22.6mmol)。在室温搅拌反应过夜，然后用氢氧化钠水溶液(1N)洗涤。然后将有机层干燥(MgSO₄)，过滤并浓缩，得到黄色固体(684mg，收率88％)。
将黄色固体溶解在1，2-二氯乙烷(15mL)中，并加入苯甲醛(0.32mL，3.1mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(661mg，3.1mmol)。室温搅拌3天后，将反应用二氯甲烷稀释，并用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤。水层用二氯甲烷洗3次，并将合并的有机萃取液干燥(MgSO₄)，过滤并浓缩。定量得到黄色泡沫状中间体11。
中间体12：4-[(4-氰基苯基)[1-(苯基甲基)-4-哌啶亚基]甲基]-N，N-二甲基-苯甲酰胺
向中间体11的干燥甲苯(15mL)溶液中加入4-氰基苯基硼酸(430mg，2.9mmol)、乙醇(3mL)和碳酸钠水溶液(2N，2.4mL，4.8mmol)。将反应脱气20分钟，然后加入四三苯基膦化钯(225mg，0.2mmol)，并在90℃加热反应20小时。冷却反应并加入乙酸乙酯。将反应用饱和氯化铵溶液洗涤，干燥有机层(MgSO₄)，过滤并浓缩。残余物用快速色谱法提纯，用乙酸乙酯洗脱，得到黄色泡沫状中间体12(616mg，68％)。
化合物17：4-[[4-[(二乙基氨基)羰基]苯基][1-(苯基甲基)-4-哌啶亚基]甲基]-苯甲酰胺

向中间体12(616mg，1.3mmol)的^tBuOH(15mL)溶液中加入粉碎的KOH(186mg，3.3mmol)，加热回流反应。1小时后，冷却反应并浓缩。将残余物用快速色谱法提纯，用6％-10％的甲醇的二氯甲烷溶液洗脱，得到黄色泡沫状化合物17(389.2mg，收率61％)。将该物料溶解在二氯甲烷中，加入HCl的乙醚溶液(1N，1.2mL，1.2mmol)。浓缩该悬浮液，得到化合物17的HCl盐。M.S.(理论值)：482.3(MH⁺)，M.S.(测定值)：482.2(MH⁺)。HPLC：k’：3.78；纯度：＞99％(215nm)，＞99％(254nm)，＞99％(280nm)。条件：ZorbaxC-18，梯度20-50％B 25分钟，流速：1mL/分钟，30℃，A：0.05％TFA的水溶液，B：0.05％TFA的CH₃CN溶液。¹H NMR(400MHz，CD₃OD)：δ1.07-1.21(m，6H)，2.47-2.54(m，2H)，2.66-2.80(m，2H)，3.00-3.18(m，2H)，3.25-3.35(m，2H)，3.45-3.56(m，4H)，4.32(s，2H)，7.20-7.27(m，4H)，7.23(d，J＝7.2Hz，2H)，7.40-7.55(m，5H)，7.82(d，J＝7.4Hz，2H)。测定值：C，68.64；H，7.17；N，7.62。C₃₁H₃₅N₃O₂×1.4 H₂O×1.0HCl理论值：C，68.53；H，7.20N，7.73％。
化合物18：4-[[4-[(二乙基氨基)羰基]苯基][1-(4-噻唑基甲基)-4-哌啶亚基]甲基]苯甲酰胺

用化合物10的制备方法，通过中间体8(170mg，0.45mmol)和4-(氯甲基)噻唑盐酸盐(84mg，0.49mmol)，得到白色固体的化合物18的三氟乙酸盐(98mg，30％)。M.S.(理论值)：489.2(MH⁺)，M.S.(测定值)：489.2(MH⁺)。HPLC：k’：3.31；纯度：＞99％(215nm)，＞99％(254nm)，＞99％(280nm)。条件：Zorbax C-18，梯度10-50％B 25分钟，流速：1mL/分钟，40℃，A：0.1％甲酸的水溶液，B：0.1％甲酸的CH₃CN溶液。¹H NMR(400MHz，CD₃OD)：δ1.12(t，J＝7.1Hz，3H)，1.23(t，J＝6.8Hz，3H)，2.50-2.60(m，2H)，2.69-2.84(m，2H)，3.11-3.23(m，2H)，3.24-3.34(m，2H)，3.49-3.57(m，2H)，3.56-3.65(m，2H)，4.54(s，2H)7.27(m，4H)，7.37(d，J＝8.4Hz，2H)，7.86(m，3H)，9.12(d，J＝1.8Hz，1H)。测定值：C，52.12；H，4.91；N，7.55。C₂₈H₃₂N₄O₂S×2.1C₂HF₃O₂×0.8H₂O理论值：C，52.09；H，4.85；N，7.50％。
化合物19：3-[[4-[(二乙基氨基)羰基]苯基][1-(5-噻唑基甲基)-4-哌啶亚基]甲基]苯甲酰胺

用化合物1的制备方法，通过中间体8(170mg，0.45mmol)和噻唑-5-甲醛(61mg，0.54mmol)，得到白色固体的化合物19的三氟乙酸盐(124mg，38％)。M.S.(理论值)：489.2(MH⁺)，M.S.(测定值)：489.2(MH⁺)。HPLC：k’：3.06；纯度：＞99％(215nm)，＞99％(254nm)，＞99％(280nm)。条件：Zorbax C-18，梯度10-50％B 25分钟，流速：1mL/分钟，40℃，A：0.1％甲酸的水溶液，B：0.1％甲酸的CH₃CN溶液。¹H NMR(400MHz，CD₃OD)：δ1.11(t，J＝6.8Hz，3H)，1.24(t，J＝6.8Hz，3H)，2.51-2.78(br s，4H)，3.25-3.33(m，2H)，3.10-3.62(m，4H)，3.49-3.58(m，2H)，4.73(s，2H)7.28(m，4H)，7.38(d，J＝8.4Hz，2H)，7.86(d，J＝8.6Hz，2H)，8.09(s，1H)，9.20(s，1H)。测定值：C，52.48；H，4.85；N，7.67。C₂₈H₃₂N₄O₂S×2.1 C₂HF₃O₂×0.5H₂O理论值：C，52.47；H，4.80；N，7.60。
化合物20：4-[[4-(氨基羰基)苯基](1-丁基哌啶-4-亚基)亚基]-N，N-二乙基苯甲酰胺

用化合物1的制备方法，通过中间体8(242mg，0.618mmol)和丁醛(84μL，0.93mmol)，得到白色固体的化合物20的三氟乙酸盐(154mg，44％)。M.S.(理论值)：448.3(MH⁺)，M.S.(测定值)：448.2(MH⁺)。HPLC：k’：5.08；纯度：＞99％(215nm)，＞99％(254nm)，＞99％(280nm)。条件：Zorbax C-18，梯度10-50％B 25分钟，流速：1mL/分钟，40℃，A：0.05％TFA的水溶液，B：0.05％TFA的CH₃CN溶液。¹H NMR(400MHz，CD₃OD)：δ1.00(t，J＝7.4Hz，3H)，1.12(br t，J＝6.6Hz，3H)，1.24(br t，J＝6.3Hz，3H)，1.37-1.48(m，2H)，1.67-1.78(m，2H)，2.46-2.60(br m，2H)，2.70-2.83(m，2H)，3.01-3.11(m，2H)，3.11-3.18(m，2H)，3.25-3.33(m，2H)，3.49-3.58(m，2H)，3.63(br d，J＝11.7Hz，2H)，7.24-7.31(m，4H)，7.37(d，J＝8.2Hz，2H)，7.86(d，J＝8.2Hz，2H)。测定值：C，59.97；H，6.46；N，6.72。C₂₈H₃₇N₃O₂×1.40C₂HF₃O₂×0.5H₂O理论值：C，60.03；H，6.44；N，6.82％。