技术领域
本发明属于药物化学领域，具体涉及一类具有逆转肝纤维化作用的双苄基四氢异喹啉衍生物及其制备方法和医药用途。
背景技术
肝纤维化是各种致病原因引起细胞外基质(extracellular matrix，ECM)在肝内过多沉积的病理过程。我国是病毒性肝炎高发区，仅乙型肝炎病毒(HBV)携带者就达1.2亿，其中慢性乙型肝炎患者3000万以上。全球慢性HBV感染者3.5亿，约25％慢性乙肝患者最终将发为肝硬化(hepaticcirrhosis)，甚至肝癌丙型肝炎病毒(HCV)感染慢性化达50％-85％，10％-30％发展为肝硬化，3％-10％演变为肝癌。其他如乙醇性肝病、非乙醇性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis，NASH)、自身免疫性肝炎及原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis，PBC)等疾病亦可发生肝纤维化肝硬化，而这些疾病在我国亦不少见。在细胞和分子发病机制方面的研究显示，细胞因子作用于窦周间隙静止的肝星状细胞(hepatic stellatecell，HSC)使其转变为激活状态，继而增殖，合成细胞外基质.因此认为激活的HSC是产生细胞外基质的主要细胞。在众多的细胞因子中，血小板衍化生长因子(platelet-derived growth factor，PDGF)是肝纤维化发生过程中最重要的细胞因子。PDGF可刺激HSC分裂增殖，上调肝纤维化的发生。PDGF可以激活HSC的细胞外信号调节激酶(ERK1/2)和FAK-PI3K-Akt通路而引起HSC增殖及致纤维化作用。
近年发现双苄基四氢异喹啉类生物碱汉防己甲素具有抗肝纤维化作用(Journal of Ethnopharmacology 100(2005)299-305、Mitochondrion6(2006)176-185等)。但尚未见到对双苄基四氢异喹啉进行结构修饰后的衍生物用于抗肝纤维化的应用。
发明内容
本发明基于目前对双苄基四氢异喹啉类生物碱抗肝纤维化活性的广泛研究，但这类化合物多局限于天然产物，结构修饰和构效关系研究报告甚少。本发明以先导化合物汉防己甲素为原料，设计并制备了一系列化合物，通过体外实验筛选逆转PDGF激活的肝星状细胞，以期获得活性更高的化合物供进一步开发成新药。
因此，第一方面，本发明提供一种通式I所示的化合物或其药学上可接受的盐：
其中：
R1、R2独立地为甲基或氢；
R3、R4独立地为甲氧基、羟基或含1-10个碳原子的直链或支链的烷基、烷氧基或酰氧基；
R5独立地为H或含1-20个碳原子的直链或支链的饱和或不饱和的烷基、环烷基、硅烷基、烷氧基或酰氧基，或者为芳香苯环或芳香杂环，其中所述苯环或杂环任选被一个或多个取代基取代；其中取代基为含1-20个碳原子的直链或支链的饱和或不饱和的烷基、环烷基、硅烷基、烷氧基或酰氧基或卤素原子；
其中排除R1和R2为CH3或氢；R3为OCH3或OH；R4为OCH3或OH以及R5为H、OH或OCH3的式I化合物及其盐。
根据本发明一个优选的实施方式，所述R5独立地为苯乙炔基、3，3-二甲基-丁-1-炔基、己-1-炔基、3-环戊烷-丙-1-炔基、1-氟-4-苯基乙炔基、1-叔丁基-4-苯基乙炔基、(2-吡啶基)-乙炔基、辛-1，7-二炔基、环戊基乙炔基、葵-1-炔基、3-环己烷-丙-炔基、1-甲氧基-4-苯乙炔基、苯基、4-三氟甲基苯基、4-叔丁基苯基、4-甲氧基苯基、4-氯基苯基、4-甲基苯基、2-噻吩基或5-甲氧基-2-吡啶基。
根据本发明一个优选的实施方式，通式I中C(1)和C(1’)构型为RR、SS、1S1’R或1R1’S。
根据本发明一个优选的实施方式，本发明所述的药学可接受的盐包括但不限于无机酸如盐酸、硝酸、硫酸、磷酸、氢溴酸，或者有机酸如马来酸、富马酸、柠檬酸、酒石酸、乳酸、乙酸、甲磺酸、对甲苯磺酸、己二酸、棕榈酸、单宁酸组成的盐以及通过碘或溴代烷烃在2和2′位衍生化的季铵盐。
本发明中的术语“烷基”是指C1-C20，优选C1-C10的直链或支链烷基。烷基的实例是甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基等以及它们可能的异构体。
本发明中的术语“环烷基”是指C3-C20，优选C3-C10的环烷基。环烷基的实例是环丙基、环丁基、环戊基等以及它们可能的异构体。
本发明中的术语“烷氧基”是指C1-C20，优选C1-C10的烷氧基。烷氧基的实例是甲氧基、乙氧基、丙氧基等以及它们可能的异构体。
本发明中的术语“酰氧基”是指C2-C20，优选C2-C10的酰氧基。酰氧基的实例是乙酰氧基、丙酰氧基、丁酰氧基等以及它们可能的异构体。
本发明中的术语“硅烷基”是指C1-C10直链或直链取代氢的硅烷，如三甲基硅烷、三叔丁基硅烷等以及它们可能的异构体。
本发明中的术语“芳香苯环”是指C6-C14的芳基。芳基的实例是苯基或萘基。
本发明中的术语“芳香杂环”是指C3-C10的芳香杂环。芳香杂环的实例是吡啶基、噻吩基、哌嗪基、咪唑基、哌啶基、呋喃基、嘧啶基、吲哚基等。
第二方面，本发明提供制备所述通式I化合物或其药学上可接受的盐的方法，包括使5-溴代双苄基四氢异喹啉在有机磷配体和碱存在下，利用钯催化剂在有机溶剂中进行Sonogashira偶联或Suzuki偶联反应的步骤。
本发明所述的5-溴代双苄基四氢异喹啉(式II化合物)通过本领域已知方法按照以下具体步骤获得：
由式III化合物通过卤原子取代得到式II所示的中间体化合物，其中制备条件为在-15至0摄氏度冰盐浴中，缓慢将1M的溴的乙酸溶液滴入汉防己甲素的三氟乙酸水溶液中，反应时间为4小时，反应完毕用2M的氢氧化钠水溶液调PH至中性，以二氯甲烷提取并以饱和食盐水洗涤三次后无水硫酸钠干燥，以乙醚/甲醇重结晶得白色晶体。产率为95％。
上述反应的反应路线如下路线1表示：
路线1：
其中R1、R2独立地为甲基或氢；
R3、R4独立地为甲氧基、羟基或含1-10个碳原子的直链或支链的烷基、烷氧基或酰氧基；
然后5-溴代双苄基四氢异喹啉(式II化合物)可以在有机磷配体和碱存在下，利用钯催化剂在有机溶剂中进行Sonogashira偶联或Suzuki偶联反应，所述Sonogashira偶联及Suzuki偶联反应的反应路线分别如下路线2和3表示：
路线2：
上式中，R5＝R+乙炔基。
R1、R2独立地为甲基或氢；
R3、R4独立地为甲氧基、羟基或含1-10个碳原子的直链或支链的烷基、烷氧基或酰氧基；
R独立地为H或含1-20个碳原子的直链或支链的饱和或不饱和的烷基、环烷基、硅烷基、烷氧基或酰氧基，或者为芳香苯环或芳香杂环，其中所述苯环或杂环任选被一个或多个取代基取代；其中取代基为含1-20个碳原子的直链或支链的饱和或不饱和的烷基、环烷基、硅烷基、烷氧基或酰氧基或卤素原子；
路线3：
R1、R2独立地为甲基或氢；
R3、R4独立地为甲氧基、羟基或含1-10个碳原子的直链或支链的烷基、烷氧基或酰氧基；
R5独立地为H或含1-20个碳原子的直链或支链的饱和或不饱和的烷基、环烷基、硅烷基、烷氧基或酰氧基，或者为芳香苯环或芳香杂环，其中所述苯环或杂环任选被一个或多个取代基取代；其中取代基为含1-20个碳原子的直链或支链的饱和或不饱和的烷基、环烷基、硅烷基、烷氧基或酰氧基或卤素原子；
根据本发明一个优选的实施方式，所述有机磷配体可以选自三苯基膦(PPh3)、1，1′-双(二苯基膦)二茂铁(dppf)、(±)-2，2′-双-(二苯膦基)-1，1′-联萘(BINAP)或1，4-双二苯基膦丁烷(dppb)，其用量可以为0.01-1当量。
根据本发明一个优选的实施方式，所述钯催化剂可以选自零价钯催化剂或二价钯催化剂，其用量为0.01-1当量。
根据本发明一个优选的实施方式，所述碱可以选自碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯、氢氧化钠、氢氧化钾、三乙胺或氢氧化钡，其用量为至少1个当量。
根据本发明一个优选的实施方式，本发明在有机溶剂例如DMSO、DMF、THF、甲苯、二氧六环或乙腈中进行。反应的温度可以为60-150℃。
根据本发明一个特别优选的实施方式，Sonogashira偶联反应条件及方法主要是：将式II溶于DMSO中，加入1.2个当量的Cs2CO3(CAS：534-17-8)、2个当量的端基炔试剂，0.03个当量双三苯基膦二氯化钯(CAS：13965-03-2)，在氮气保护下，100℃反应10小时，过滤后加入20倍当量氨水，饱和食盐水洗涤三次后无水硫酸钠干燥后以乙醚甲醇重结晶得产物。
根据本发明一个特别优选的实施方式，Suzuki偶联反应反应条件及方法主要是：将式II溶于甲苯或1，4-二氧六环中，加入溶剂等量的2M的碳酸钠水溶液，2个当量的硼酸试剂，加入0.03当量的Pd(dppf)Cl2([1，1’-双(二苯基磷)二茂铁]二氯化钯，(CAS：72287-26-4)，在氮气保护下90℃反应10小时，过滤后加入20倍当量氨水，饱和食盐水洗涤三次后无水硫酸钠干燥后以乙醚甲醇重结晶得产物。
第三方面，本发明提供所述通式I化合物或其药学上可接受的盐在制备抑制PDGF激活的肝星状细胞从而逆转肝纤维化的药物中的用途。因此，本发明所述的通式I化合物或其药学上可接受的盐可用于治疗肝纤维化。
具体实施方式
下面给出的优选实施例，旨在进一步阐明本发明的化合物及其制备方法，而非限定所举例的化合物的范围，也并非限定本发明权利要求中提出的技术方法，即是说通过这些实施例所述的方法可以和很容易地制得通式II、I化合物。对本发明的方法互换或改动，及使用类似原料、试剂和溶剂，对于本专业的普通技术人员是不需要创造性劳动的。本发明所选用的优选案例原料均是采用汉防己甲素(CAS：518-34-3)进行，但并不代表本发明只限于该原料，对于汉防己乙素等如说明书列举的化合物均适合。汉防己甲素购于武汉顶辉化工有限公司，批号：20110913。
实施例1：5-(3，3-二甲基-丁-1-炔基)-汉防己甲素的制备
称取5-溴-汉防己甲素700mg(1mmol)溶于10mlDMSO中，加入CsCO3651.6mg(2mmol、2eq)、3，3-二甲基-1-丁炔(CAS：917-92-0)164mg(2mmol、2eq)、PdCl2(PPh3)221mg(0.03mmol、0.03eq)。在氮气保护下，100℃搅拌反应10小时。反应完毕过滤，加入氨水5ml后再加入30ml乙酸乙酯，饱和食盐水洗涤3次，无水硫酸钠干燥，硅胶柱层析或乙醚∶甲醇(2∶1)重结晶，得5-(3，3-二甲基-丁-1-炔基)-汉防己甲素576mg。收率：82％。
性状：无色针晶。
5-(3，3-二甲基-丁-1-炔基)-汉防己甲素
C44H50N2O6
MS(ESI)：703.35.[M+H]+.
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.32(d，J＝8.1Hz，1H)，7.12(dd，J＝8.1，2.1Hz，1H)，6.84(m，2H)，6.79(dd，J＝8.2，2.1Hz，1H)，6.52(s，1H)，6.50(s，1H)，6.29(d，J＝8.3Hz，1H)，6.00(s，1H)，3.91(s，3H)，3.90-3.86(m，1H)，3.80(s，3H)，3.79-3.73(m，1H)，3.59-3.38(m，2H)，3.37(s，3H)，3.32-3.17(m，1H)，3.16(s，3H)，3.04-2.64(m，7H)，2.64-2.60(m，1H，overlap)，2.63(s，3H)，2.58-2.38(m，1H)，2.31(s，3H)，1.35(s，9H).
13C NMR(101MHz，CDCl3)δ153.83(s)，152.86(s)，149.38(s)，148.39(s)，148.28(s)，147.10(s)，143.64(s)，141.62(s)，135.07(s)，134.71(s)，132.64(s)，130.82(s)，130.11(s)，128.11(s)，126.11(s)，122.82(s)，121.97(s)，121.92(s)，120.41(s)，116.27(s)，112.27(s)，111.59(s)，107.08(s)，73.08(s)，63.83(s)，61.43(s)，60.59(s)，60.42(s)，56.15(s)，55.53(s)，45.23(s)，43.73(s)，42.59(s)，42.21(s)，41.57(s)，38.17(s)，31.22(s)，28.46(s)，25.25(s)，20.65(s).
实施例2：5-(己-1-炔基)-汉防己甲素的制备
称取5-溴-汉防己甲素700mg(1mmol)溶于10mlDMSO中，加入CsCO3651.6mg(2mmol、2eq)、1-已炔(CAS：693-02-7)164mg(2mmol、2eq)、PdCl2(PPh3)235mg(0.05mmol、0.03eq)、BINAP20mg(0.03mmol，0.03eq)。在氮气保护下，100℃搅拌反应10小时。反应完毕过滤，加入氨水5ml后再加入30ml乙酸乙酯，饱和食盐水洗涤3次，无水硫酸钠干燥，硅胶柱层析或乙醚∶甲醇(2∶1)重结晶，得5-(己-1-炔基)-汉防己甲素527mg，收率：75％。
性状：白色无定形粉末。
5-(己-1-炔基)-汉防己甲素
C44H50N2O6
MS(ESI)：703.35.[M+H]+.
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.34(dd，J＝8.3，1.8Hz，1H)，7.13(dd，J＝8.2，2.5Hz，1H)，6.86(s，2H)，6.80(dd，J＝8.3，2.4Hz，1H)，6.53(s，1H)，6.51(s，1H)，6.30(dd，J＝8.3，2.0Hz，1H)，6.01(s，1H)，3.92(s，3H)，3.90-3.82(m，1H)，3.79(s，3H)，3.73(d，J＝9.9Hz，1H)，3.64-3.39(m，2H)，3.37(s，3H)，3.31-3.20(m，1H)，3.18(s，3H)，3.06-2.66(m，7H)，2.63(s，3H)，2.49(m，4H)，2.30(s，3H)，1.65-1.46(m，4H)，0.95(t，J＝7.2Hz，3H).
13C NMR(101MHz，CDCl3)δ153.84(s)，152.95(s)，149.38(s)，148.38(s)，148.28(s)，147.12(s)，143.63(s)，141.63(s)，134.99(s)，134.64(s)，132.64(s)，130.95(s)，130.12(s)，128.03(s)，126.09(s)，122.84(s)，121.99(s)，121.93(s)，120.34(s)，116.23(s)，112.28(s)，111.71(s)，111.59(s)，98.61(s)，74.47(s)，63.83(s)，61.45(s)，60.74(s)，60.35(s)，56.15(s)，55.50(s)，45.20(s)，43.79(s)，42.55(s)，42.24(s)，41.56(s)，38.08(s)，38.08(s)，31.09(s)，25.23(s)，22.02(s)，20.86(s)，19.52(s)，13.65(s).
实施例3：5-(辛-1，7-二炔基)-汉防己甲素的制备
称取5-溴-汉防己甲素700mg(1mmol)溶于10mlDMSO中，加入Ba(OH)2513mg(3mmol、2eq)、1，7-辛二炔(CAS：871-84-1)212mg(2mmol、2eq)、PdCl2(PPh3)235mg(0.05mmol、0.03eq)。在氮气保护下，100℃搅拌反应10小时。反应完毕过滤，加入氨水5ml后再加入30ml乙酸乙酯，饱和食盐水洗涤3次，无水硫酸钠干燥，硅胶柱层析或乙醚∶甲醇(2∶1)重结晶，得5-(辛-1，7-二炔基)-汉防己甲素566mg，收率：75％。
性状：无色针晶。
5-(辛-1，7-二炔基)-汉防己甲素
C46H50N2O6
MS(ESI)：727.35.[M+H]+.
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.34(dd，J＝8.2，2.0Hz，1H)，7.13(dd，J＝8.1，2.5Hz，1H)，6.85(m，2H)，6.80(dd，J＝8.3，2.5Hz，1H)，6.53(s，1H)，6.51(s，1H)，6.30(dd，J＝8.3，2.0Hz，1H)，6.01(s，1H)，3.92(s，3H)，3.88(m，1H)，3.79(s，3H)，3.76(d，J＝10.2Hz，1H)，3.58-3.41(m，2H)，3.37(s，3H)，3.26(m，1H)，3.18(s，3H)，2.98-2.67(m，7H)，2.63(s，3H)，2.59-2.39(m，4H)，2.31(s，3H)，2.29-2.22(m，2H)，1.96(t，J＝2.6Hz，1H)，1.75(m，4H).
13C NMR(75MHz，CDCl3)δ153.69(s)，152.84(s)，149.26(s)，148.30(s)，148.22(s)，146.98(s)，143.46(s)，141.52(s)，134.97(s)，134.55(s)，132.53(s)，131.40(s)，130.88(s)，130.01(s)，128.00(s)，126.08(s)，122.69(s)，121.88(s)，121.83(s)，120.21(s)，116.10(s)，112.14(s)，111.44(s)，97.65(s)，84.06(s)，74.84(s)，68.42(s)，63.68(s)，61.30(s)，60.68(s)，60.24(s)，56.03(s)，55.38(s)，45.07(s)，43.60(s)，42.47(s)，42.11(s)，41.45(s)，37.92(s)，27.78(s)，27.46(s)，25.18(s)，20.73(s)，19.24(s)，17.89(s).
实施例4：5-(3-环戊烷-丙-1-炔基)-汉防己甲素的制备
称取5-溴-汉防己甲素700mg(1mmol)溶于10mlDMSO中，加入Ba(OH)2513mg(3mmol、2eq)、3-环戊基-1-丙炔(CAS：116279-08-4)216mg(2mmol、2eq)、PdCl2(PPh3)228mg(0.04mmol、0.03eq)BINAP20mg(0.03mmol，0.03eq)。在氮气保护下，100℃搅拌反应10小时。反应完毕过滤，加入氨水5ml后再加入30ml乙酸乙酯，饱和食盐水洗涤3次，无水硫酸钠干燥，硅胶柱层析或乙醚∶甲醇(2∶1)重结晶，得5-(3-环戊烷-丙-1-炔基)-汉防己甲素517mg，收率：71％。
性状：白色无定形粉末。
5-(3-环戊烷-丙-1-炔基)-汉防己甲素
C46H52N2O6
MS(ESI)：729.35.[M+H]+.
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.37(dd，J＝8.2，2.4Hz，1H)，δ7.09(dd，J＝8.2，2.4Hz，1H)，δ7.03(d，J＝8.0Hz，1H)，δ6.83(d，J＝8.0Hz，1H)，，δ6.70(dd，J＝8.2，2.4Hz，1H)，δ6.54(s，1H)，δ6.45(d，J＝8.0Hz，1H)，δ6.26(dd，J＝8.2，2.4Hz，1H)，δ5.99(s，1H)，4.18(dd，J＝5.6，11.2Hz，1H)，3.92(d，J＝8.0Hz，1H)，3.86(s，3H)，3.75(s，3H)，3.68-3.52(m，3H)，3.37(s，3H)，3.20-3.17(m，1H)，3.16(s，3H)，3.06-2.8(m，7H)，2.80(s，3H)，2.55-2.50(m，1H)，2.44(d，J＝16.0Hz，2H)，2.37(s，3H)，.2.11(quint，1H)，1.84-1.76(m，2H)，1.63-1.51(m，4H)，1.37-1.21(m，2H).
13C NMR(101MHz，CDCl3)δ153.85(s)，153.00(s)，149.36(s)，148.43(s)，148.21(s)，147.14(s)，143.64(s)，141.64(s)，134.86(s)，134.53(s)，132.63(s)，130.92(s)，130.13(s)，127.91(s)，127.76(s)，125.97(s)，122.88(s)，121.98(s)，121.93(s)，120.33(s)，116.20(s)，112.27(s)，111.79(s)，111.60(s)，98.16(s)，74.48(s)，63.84(s)，61.47(s)，60.76(s)，60.35(s)，56.13(s)，55.51(s)，45.16(s)，43.85(s)，42.49(s)，42.25(s)，41.52(s)，40.98(s)，39.39(s)，38.07(s)，32.12(s)，25.68(s)，25.33(s)，25.12(s)，20.94(s).
实施例5：5-(环戊基乙炔基)-汉防己甲素的制备
称取5-溴-汉防己甲素700mg(1mmol)溶于10mlDMSO中，加入Ba(OH)2684mg(4mmol、2eq)、环戊基乙炔(CAS：930-51-8)188mg(2mmol、2eq)、PdCl2(PPh3)250mg(0.07mmol、0.03eq)。在氮气保护下，100℃搅拌反应10小时。反应完毕过滤，加入氨水5ml后再加入30ml乙酸乙酯，饱和食盐水洗涤3次，无水硫酸钠干燥，硅胶柱层析或乙醚∶甲醇(2∶1)重结晶，得5-(环戊基乙炔基)-汉防己甲素528mg，收率：74％。
性状：白色无定形粉末。
5-(环戊基乙炔基)-汉防己甲素
C45H50N2O6
MS(ESI)：715.35.[M+H]+.
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.33(dd，J＝8.2，2.1Hz，1H)，7.13(dd，J＝8.1，2.5Hz，1H)，6.95-6.82(m，2H)，6.79(dd，J＝8.3，2.5Hz，1H)，6.53(d，J＝0.9Hz，1H)，6.51(s，1H)，6.30(dd，J＝8.3，2.1Hz，1H)，6.01(s，1H)，3.93(s，3H)，3.92-3.86(m，1H)，3.80(s，3H)，3.76(d，J＝10.2Hz，1H)，3.57-3.39(m，2H)，3.37(s，3H)，3.27(dd，J＝12.4，5.6Hz，1H)，3.18(s，3H)，3.04-2.66(m，9H)，2.63(s，3H)，2.47(d，J＝13.6Hz，1H)，2.31(s，3H)，2.06-1.96(m，2H)，1.84-1.72(m，4H)，1.65-1.57(m，2H).
13C NMR(101MHz，CDCl3)δ153.83(s)，152.85(s)，149.38(s)，148.38(s)，148.25(s)，147.12(s)，143.64(s)，141.63(s)，135.03(s)，134.66(s)，132.64(s)，130.87(s)，130.11(s)，128.07(s)，126.09(s)，122.83(s)，121.98(s)，121.93(s)，120.37(s)，116.24(s)，112.28(s)，111.74(s)，111.59(s)，103.09(s)，74.06(s)，63.84(s)，61.45(s)，60.69(s)，60.38(s)，56.15(s)，55.51(s)，45.22(s)，43.78(s)，42.58(s)，42.23(s)，41.56(s)，38.12(s)，34.21(s)，34.20(s)，31.28(s)，29.70(s)，25.26(s)，25.00(s)，20.76(s).
实施例6：5-(葵-1-炔基)-汉防己甲素的制备
称取5-溴-汉防己甲素700mg(1mmol)溶于10mlDMSO中，加入CsCO3651.6mg(2mmol、2eq)、1-癸炔(CAS：764-93-2)276mg(2mmol、2eq)、PdCl2(PPh3)221mg(0.03mmol、0.03eq)。在氮气保护下，100℃搅拌反应10小时。反应完毕过滤，加入氨水5ml后再加入30ml乙酸乙酯，饱和食盐水洗涤3次，无水硫酸钠干燥，硅胶柱层析或乙醚∶甲醇(2∶1)重结晶，得5-(葵-1-炔基)-汉防己甲素652mg，收率：86％。
性状：白色无定形粉末。
5-(葵-1-炔基)-汉防己甲素
C48H58N2O6
MS(ESI)：759.40.[M+H]+.
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.34(dd，J＝8.2，2.0Hz，1H)，7.14(dd，J＝8.1，2.5Hz，1H)，6.91-6.84(m，2H)，6.80(dd，J＝8.3，2.5Hz，1H)，6.53(d，J＝4.4Hz，1H)，6.51(s，1H)，6.30(dd，J＝8.3，2.0Hz，1H)，6.01(s，1H)，3.92(s，3H)，3.91-3.87(m，1H)，3.80(s，3H)，3.76(d，J＝10.4Hz，1H)，3.54-3.39(m，2H)，3.37(s，3H)，3.29-3.21(m，1H)，3.18(s，3H)，3.04-2.68(m，7H)，2.63(s，3H)，2.61-2.58(m，1H)，2.50(t，J＝7.0Hz，2H)，2.47-2.36(m，1H)，2.31(s，3H)，1.68-1.59(m，2H)，1.55-1.44(m，2H)，1.35-1.26(m，8H)，0.88(t，J＝6.7Hz，3H).
13C NMR(101MHz，CDCl3)δ153.82(s)，152.92(s)，149.37(s)，148.33(s)，148.31(s)，147.10(s)，143.61(s)，141.62(s)，135.08(s)，134.70(s)，132.64(s)，130.97(s)，130.10(s)，128.19(s)，128.11(s)，126.16(s)，122.83(s)，121.96(s)，121.90(s)，120.32(s)，116.25(s)，112.29(s)，111.69(s)，111.59(s)，98.65(s)，74.54(s)，63.81(s)，61.43(s)，60.73(s)，60.33(s)，56.13(s)，55.49(s)，45.21(s)，43.74(s)，42.60(s)，42.22(s)，41.57(s)，38.01(s)，31.84(s)，29.25(s)，29.13(s)，29.01(s)，28.93(s)，25.32(s)，22.67(s)，20.87(s)，19.83(s)，14.11(s).
实施例7：5-(3-环己烷-丙-炔基)-汉防己甲素的制备
称取5-溴-汉防己甲素700mg(1mmol)溶于10mlDMSO中，加入CsCO3651.6mg(2mmol、2eq)、3-环己基-1-丙炔(CAS：17715-00-3)244mg(2mmol、2eq)、PdCl2(PPh3)221mg(0.03mmol、0.03eq)。在氮气保护下，100℃搅拌反应10小时。反应完毕过滤，加入氨水5ml后再加入30ml乙酸乙酯，饱和食盐水洗涤3次，无水硫酸钠干燥，硅胶柱层析或乙醚∶甲醇(2∶1)重结晶，得5-(3-环己烷-丙-炔基)-汉防己甲素630mg，收率：85％。
性状：白色无定形粉末。
5-(3-环己烷-丙-炔基)-汉防己甲素
C47H54N2O6
MS(ESI)：743.40.[M+H]+.
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.33(dd，J＝8.1，2.3Hz，1H)，7.13(dd，J＝8.1，2.3Hz，1H)，6.84m，2H)，6.79(dd，J＝8.2，2.2Hz，1H)，6.53(s，1H)，6.50(s，1H)，6.30(dd，J＝8.1，2.3Hz，1H)，6.01(s，1H)，3.92(s，3H)，3.91-3.83(m，1H)，3.79(s，3H)，3.75(d，J＝10.1Hz，1H)，3.67-3.39(m，2H)，3.36(s，3H)，3.28-3.22(m，1H)，3.18(s，3H)，3.03-2.69(m，7H)，2.62(s，3H)，2.61-2.54(m，1H)，2.47(d，J＝13.8Hz，1H)，2.40(d，J＝6.5Hz，2H)，2.30(s，3H)，1.84-1.46(m，5H)，1.32-1.05(m，6H).
13C NMR(101MHz，CDCl3)δ153.80(s)，152.96(s)，149.37(s)，148.32(s)，148.26(s)，147.09(s)，143.59(s)，141.63(s)，135.08(s)，134.69(s)，132.62(s)，130.92(s)，130.10(s)，128.19(s)，128.11(s)，126.15(s)，122.81(s)，121.95(s)，121.90(s)，120.32(s)，116.23(s)，112.28(s)，111.78(s)，111.57(s)，97.44(s)，75.34(s)，63.81(s)，61.41(s)，60.74(s)，60.33(s)，56.13(s)，55.50(s)，45.22(s)，43.76(s)，42.60(s)，42.24(s)，41.56(s)，38.03(s)，37.68(s)，32.77(s)，27.68(s)，26.32(s)，26.18(s)，25.31(s)，20.93(s).
实施例8：5-(苯乙炔基)-汉防己甲素的制备
称取5-溴-汉防己甲素700mg(1mmol)溶于10mlDMF中，加入CsCO3651.6mg(2mmol、2eq)、苯乙炔(CAS：536-74-3)204mg(2mmol、2eq)、PdCl2(PPh3)221mg(0.03mmol、0.03eq)BINAP20mg(0.03mmol，0.03eq)。在氮气保护下，100℃搅拌反应10小时。反应完毕过滤，加入氨水5ml后再加入30ml乙酸乙酯，饱和食盐水洗涤3次，无水硫酸钠干燥，硅胶柱层析或乙醚∶甲醇(2∶1)重结晶，得5-(苯乙炔基)-汉防己甲素519mg，收率：72％。
性状：无色针晶。
5-(苯乙炔基)-汉防己甲素
C46H46N2O6
MS(ESI)：723.30.[M+H]+.
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.58-7.49(m，2H)，7.39-7.29(m，4H)，7.15(dd，J＝8.2，2.5Hz，1H)，6.86(m，2H)，6.81(dd，J＝8.3，2.5Hz，1H)，6.54(s，1H)，6.53(s，1H)，6.32(dd，J＝8.3，2.1Hz，1H)，6.03(s，1H)，3.97-3.90(m，4H)，3.88(s，3H)，3.79(d，J＝10.0Hz，1H)，3.60-3.43(m，2H)，3.40(s，3H)，3.33-3.24(m，1H)，3.22(s，3H)，3.07-2.88(m，4H)，2.82-2.68(m，4H)，2.65(s，3H)，2.50(d，J＝13.5Hz，1H).2.34(s，3H).
13C NMR(101MHz，CDCl3)δ153.87(s)，153.09(s)，149.40(s)，149.16(s)，148.36(s)，147.16(s)，143.53(s)，141.74(s)，135.04(s)，134.61(s)，132.67(s)，131.35(s)，131.27(s)，130.15(s)，128.35(s)，128.21(s)，128.12(s)，128.05(s)，126.36(s)，123.83(s)，122.89(s)，122.01(s)，121.97(s)，120.28(s)，116.26(s)，112.28(s)，111.64(s)，110.95(s)，97.63(s)，83.95(s)，63.88(s)，61.45(s)，61.02(s)，60.47(s)，56.16(s)，55.53(s)，45.24(s)，43.69(s)，42.62(s)，42.26(s)，41.55(s)，38.06(s)，25.32(s)，20.81(s).
实施例9：5-(1-叔丁基-4-(苯基乙炔基))-汉防己甲素的制备
称取5-溴-汉防己甲素700mg(1mmol)溶于10mlDMSO中，加入CsCO3651.6mg(2mmol、2eq)、4-叔丁基苯乙炔(CAS：772-38-3)316mg(2mmol、2eq)、PdCl2(PPh3)221mg(0.03mmol、0.03eq)。在氮气保护下，100℃搅拌反应10小时。反应完毕过滤，加入氨水5ml后再加入30ml乙酸乙酯，饱和食盐水洗涤3次，无水硫酸钠干燥，硅胶柱层析或乙醚∶甲醇(2∶1)重结晶，得5-(1-叔丁基-4-(苯基乙炔基))-汉防己甲素606mg，收率：78％。
性状：白色无定形粉末。
5-(1-叔丁基-4-(苯基乙炔基))-汉防己甲素
C50H54N2O6
MS(ESI)：779.40.[M+H]+.
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.48(d，J＝8.1Hz，2H)，7.41-7.32(m，3H)，7.15(d，J＝8.2Hz，1H)，6.94-6.84(m，2H)，6.82(d，J＝8.3Hz，1H)，6.55(s，1H)，6.53(s，1H)，6.32(d，J＝8.4Hz，1H)，6.03(s，1H)，3.96(s，3H)，4.01-3.91(m，1H，overlap)，3.87(s，3H)，3.81(d，J＝12.6Hz，1H)，3.53(m，2H)，3.40(s，3H)，3.27(m，1H)，3.21(s，3H)，3.08-2.67(m，8H)，2.64(s，3H)，2.50(d，J＝13.9Hz，1H)，2.34(s，3H)，1.33(s，9H).
13C NMR(75MHz，CDCl3)δ153.69(s)，152.88(s)，151.24(s)，149.28(s)，148.89(s)，148.22(s)，147.00(s)，143.41(s)，141.60(s)，135.01(s)，134.51(s)，132.56(s)，131.09(s)，131.00(s)，130.04(s)，129.23(s)，128.11(s)，126.21(s)，125.25(s)，122.73(s)，121.92(s)，121.87(s)，120.69(s)，120.19(s)，116.10(s)，112.13(s)，111.44(s)，111.04(s)，97.67(s)，83.07(s)，63.72(s)，61.32(s)，60.89(s)，60.37(s)，56.03(s)，55.41(s)，45.10(s)，43.55(s)，42.52(s)，42.14(s)，41.43(s)，37.95(s)，34.69(s)，31.10(s)，25.22(s)，20.67(s).
实施例10：5-(1-氟-4-(苯基乙炔基))-汉防己甲素的制备
称取5-溴-汉防己甲素700mg(1mmol)溶于10mlDMF中，加入CsCO3651.6mg(2mmol、2eq)、4-氟苯乙炔(CAS：766-98-3)240mg(2mmol、2eq)、PdCl2(PPh3)221mg(0.03mmol、0.03eq)、dppb15mg(0.03mmol、0.03eq)。在氮气保护下，100℃搅拌反应10小时。反应完毕过滤，加入氨水5ml后再加入30ml乙酸乙酯，饱和食盐水洗涤3次，无水硫酸钠干燥，硅胶柱层析或乙醚∶甲醇(2∶1)重结晶，得5-(1-氟-4-(苯基乙炔基))-汉防己甲素488mg，收率：66％。
性状：无色针晶。
5-(1-氟-4-(苯基乙炔基))-汉防己甲素
C46H45FN2O6
MS(ESI)：741.30.[M+H]+.
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.51(dd，J＝8.2，5.5Hz，2H)，7.35(dd，J＝8.1，2.0Hz，1H)，7.15(dd，J＝8.1，2.0Hz，1H)，7.04(dd，J＝8.2，5.5Hz，2H)，6.87(s，2H)，6.81(dd，J＝8.3，2.3Hz，1H)，6.54(s，1H)，6.53(s，1H)，6.33(dd，J＝8.3，2.3Hz，1H)，6.03(s，1H)，3.93(s，3H)，3.90(m，1H)，3.87(s，3H)，3.78(d，J＝9.6Hz，1H)，3.64-3.42(m，2H)，3.40(s，3H)，3.27(m，1H)，3.21(s，3H)，3.02-2.72(m，7H)，2.64(s，3H)，2.49(d，J＝13.7Hz，1H)，2.33(s，3H)，2.29(m，1H).
13C NMR(101MHz，CDCl3)δ163.64(s)，161.16(s)，153.92(s)，153.08(s)，149.40(s)，149.14(s)，148.45(s)，147.20(s)，143.55(s)，141.75(s)，134.80(s)，133.22(s)，133.14(s)，132.65(s)，131.19(s)，130.16(s)，128.02(s)，122.89(s)，122.04(s)，122.01(s)，120.28(s)，119.91(s)，119.88(s)，116.19(s)，115.75(s)，115.53(s)，112.25(s)，111.63(s)，110.81(s)，96.48(s)，83.55(s)，63.88(s)，61.47(s)，61.02(s)，60.46(s)，56.16(s)，55.52(s)，45.14(s)，43.76(s)，42.48(s)，42.27(s)，41.50(s)，38.06(s)，25.15(s)，20.86(s).
实施例11：5-(1-甲氧基-4-苯乙炔基)-汉防己甲素的制备
称取5-溴-汉防己甲素700mg(1mmol)溶于10mlDMSO中，加入CsCO3651.6mg(2mmol、2eq)、4-甲氧基苯乙炔(CAS：768-60-5)264mg(2mmol、2eq)、PdCl2(PPh3)221mg(0.03mmol、0.03eq)。在氮气保护下，100℃搅拌反应10小时。反应完毕过滤，加入氨水5ml后再加入30ml乙酸乙酯，饱和食盐水洗涤3次，无水硫酸钠干燥，硅胶柱层析或乙醚∶甲醇(2∶1)重结晶，得5-(1-甲氧基-4-苯乙炔基)-汉防己甲素608mg，收率：81％。
性状：无色针晶。
5-(1-甲氧基-4-苯乙炔基)-汉防己甲素
C47H48N2O6
MS(ESI)：752.30.[M+H]+.
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.48(s，1H)，7.45(s，1H)，7.35(dd，J＝8.2，2.0Hz，1H)，7.15(dd，J＝8.2，2.5Hz，1H)，6.88(m，4H)，6.81(dd，J＝8.3，2.5Hz，1H)，6.55(s，1H)，6.52(s，1H)，6.31(dd，J＝8.3，2.0Hz，1H)，6.02(s，1H)，3.95-3.89(m，1H，overlap)，3.93(s，3H)，3.87(s，3H)，3.82(s，3H)，3.80-3.76(m，1H)，3.691-3.42(m，2H)，3.39(s，3H)，3.30-3.24(m，1H)，2.81(s，3H)，3.04-2.69(m，8H)，2.64(s，3H)，2.52-2.48(m，1H)，2.33(s，3H).
13C NMR(101MHz，CDCl3)δ159.51(s)，153.84(s)，152.87(s)，149.40(s)，148.87(s)，148.34(s)，147.14(s)，143.55(s)，141.72(s)，135.08(s)，134.64(s)，132.77(s)，132.67(s)，131.02(s)，130.14(s)，128.19(s)，126.31(s)，122.87(s)，121.99(s)，121.94(s)，120.29(s)，116.24(s)，115.97(s)，114.01(s)，112.30(s)，111.61(s)，111.26(s)，97.61(s)，82.50(s)，63.84(s)，61.45(s)，60.96(s)，60.45(s)，56.16(s)，55.52(s)，55.31(s)，45.22(s)，43.69(s)，42.61(s)，42.24(s)，41.54(s)，38.01(s)，25.33(s)，20.82(s).
实施例12：5-((2-吡啶基)-乙炔基)-汉防己甲素的制备
称取5-溴-汉防己甲素700mg(1mmol)溶于10mlDMF中，加入Ba(OH)2684mg(4mmol、2eq)、2-乙炔基吡啶(CAS：1945-84-2)206mg(2mmol、2eq)、PdCl2(PPh3)221mg(0.03mmol、0.03eq)dppb15mg(0.03mmol、0.03eq)。在氮气保护下，100℃搅拌反应10小时。反应完毕过滤，加入氨水5ml后再加入30ml乙酸乙酯，饱和食盐水洗涤3次，无水硫酸钠干燥，硅胶柱层析或乙醚∶甲醇(2∶1)重结晶，得5-((2-吡啶基)-乙炔基)-汉防己甲素376mg，收率：52％。
性状：褐色粉末。
5-((2-吡啶基)-乙炔基)-汉防己甲素
C45H45N2O6
MS(ESI)：724.30.[M+H]+.
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.59(dd，J＝1.2，4Hz，1H)，7.67-7.63(ddd，J＝1.2，8，8Hz，1H)，7.495(d，J＝8Hz，1H)，7.42(dd，J＝2，8Hz，1H)，7.22-7.19(m，1H)，7.13(dd，J＝2.4，8Hz，1H)，7.08(d，J＝6.4Hz，1H)，6.87(d，J＝8Hz，1H)，6.80(dd，J＝2.4，8Hz，1H)，6.59(s，1H)，6.47(d，J＝2Hz，1H)，6.30(dd，J＝2.4，8Hz，1H)，6.03(s，1H)，4.30(dd，J＝0.8，15.2Hz，1H)，3，98-3.93(m，1H)，3.90(s，3H)，3.88(s，3H)，3.86-3.77(m，2H)，3.63-3.48(m，2H)，3.43(s，3H)，3.32-3.25(m，1H)，3.23(s，3H)，3.19-2.93(m，5H)，2.89(s，3H)，2.85(d，J＝12Hz，1H)，2.68(d，J＝14Hz，1H)，2.49(s，3H).
13C NMR(101MHz，CDCl3)δ153.86(s)，153.67(s)，150.12(s)，149.81(s)，149.39(s)，148.32(s)，147.15(s)，143.97(s)，143.43(s)，141.68(s)，136.05(s)，135.00(s)，134.53(s)，132.66(s)，132.02(s)，130.14(s)，128.23(s)，127.02(s)，126.38(s)，122.87(s)，122.48(s)，122.03(s)，121.99(s)，120.19(s)，116.18(s)，112.24(s)，111.60(s)，109.98(s)，96.84(s)，84.12(s)，63.86(s)，61.43(s)，61.20(s)，60.48(s)，56.15(s)，55.49(s)，45.16(s)，43.57(s)，42.56(s)，42.23(s)，41.50(s)，37.99(s)，25.29(s)，20.81(s).
实施例13：5-苯基-汉防己甲素的制备
称取5-溴-汉防己甲素700mg(1mmol，1eq)溶于10ml1，4-二氧六环后，加入2M Na2CO3水溶液5ml、苯硼酸(CAS：98-80-6)244mg(2mmol、2eq)、Pd(dppf)Cl2([1，1’-双(二苯基磷)二茂铁]二氯化钯CAS：72287-26-4)25mg(0.03mmol、0.03eq)。在氮气保护下，90℃搅拌反应10小时。反应完毕过滤，加入氨水5ml后再加入30ml乙酸乙酯，饱和食盐水洗涤3次，无水硫酸钠干燥，硅胶柱层析或乙醚∶丙酮(1∶1)重结晶，得5-苯基-汉防己甲素593mg，收率：85％。
性状：无色针晶。
5-苯基-汉防己甲素
C44H46N2O6
MS(ESI)：699.35.[M+H]+.
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.46-7.30(m，5H)，7.16(dd，J＝8.1，2.5Hz，2H)，6.92-6.85(m，2H)，6.82(dd，J＝8.2，2.3Hz，1H)，6.59(d，J＝1.4Hz，1H)，6.55(s，1H)，6.34(dd，J＝8.4，2.0Hz，1H)，6.06(s，1H)，3.95-3.93(m，1H)，3.92(s，3H)，3.87(d，J＝10.5Hz，1H)，3.48(d，J＝4.8Hz，1H)，3.44(s，3H)，3.42(s，3H)，3.41-3.33(m，2H)，3.30(d，J＝5.5Hz，2H)，3.24(s，3H)，3.07-2.70(m，6H)，2.64(s，3H)，2.55-2.46(m，1H)，2.30(s，3H).
13C NMR(75MHz，CDCl3)δ153.70(s)，149.32(s)，148.98(s)，148.33(s)，147.56(s)，147.01(s)，143.77(s)，141.69(s)，136.94(s)，135.04(s)，134.68(s)，132.54(s)，130.07(s)，129.83(s)，129.62(s)，128.28(s)，128.00(s)，127.84(s)，126.84(s)，126.69(s)，126.02(s)，122.77(s)，121.87(s)，121.84(s)，120.23(s)，116.05(s)，112.62(s)，111.46(s)，63.75(s)，61.78(s)，60.59(s)，60.06(s)，56.04(s)，55.62(s)，45.15(s)，44.61(s)，42.54(s)，42.08(s)，37.88(s)，29.60(s)，25.24(s)，21.18(s).
实施例14：5-(4-甲基苯基)-汉防己甲素的制备
称取5-溴-汉防己甲素700mg(1mmol，1eq)溶于10ml1，4-二氧六环后，加入2M Na2CO3水溶液5ml、4-甲基苯硼酸(CAS：5720-05-8)272mg(2mmol、2eq)、Pd(dppf)Cl2([1，1’-双(二苯基磷)二茂铁]二氯化钯CAS：72287-26-4)25mg(0.03mmol、0.03eq)dppb15mg(0.03mmol、0.03eq)。在氮气保护下，90℃搅拌反应10小时。反应完毕过滤，加入氨水5ml后再加入30ml乙酸乙酯，饱和食盐水洗涤3次，无水硫酸钠干燥，硅胶柱层析或乙醚∶丙酮(1∶1)重结晶，得5-(4-甲基苯基)-汉防己甲素498mg，收率：70％。
性状：无色针晶。
5-(4-甲基苯基)-汉防己甲素
C45H48N2O6
MS(ESI)713.35.[M+H]+.
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.65-7.39(m，2H)，7.35(dd，J＝8.2，1.9Hz，1H)，7.22-7.13(m，3H)，6.94-6.77(m，2H)，6.82(dd，J＝8.3，2.2Hz，1H)，6.59(s，1H)，6.55(s，1H)，6.33(dd，J＝8.3，1.9Hz，1H)，6.05(s，1H)，3.92(s，3H)，3.91-3.82(m，2H)，3.45(s，3H)，3.41(s，3H)，3.40-3.27(m，2H)，3.23(s，3H)，3.03-2.72(m，7H)，2.64(s，3H)，2.61-2.45(m，2H)，2.39(s，3H)，2.35(d，J＝5.2Hz，1H)，2.29(s，3H).
13C NMR(101MHz，CDCl3)δ153.79(s)，149.40(s)，149.19(s)，148.43(s)，147.52(s)，147.10(s)，143.90(s)，141.76(s)，136.29(s)，135.11(s)，134.77(s)，133.92(s)，132.62(s)，131.33(s)，131.23(s)，130.15(s)，129.74(s)，128.83(s)，128.33(s)，128.20(s)，127.89(s)，127.04(s)，126.01(s)，122.85(s)，121.96(s)，121.92(s)，120.34(s)，116.14(s)，112.73(s)，111.55(s)，63.84(s)，61.90(s)，60.68(s)，60.11(s)，56.13(s)，55.72(s)，45.25(s)，44.80(s)，42.63(s)，42.42(s)，42.20(s)，38.00(s)，25.31(s)，21.35(s)，21.25(s).
实施例15：5-(4-叔丁基苯基)-汉防己甲素的制备
称取5-溴-汉防己甲素700mg(1mmol，1eq)溶于10ml甲苯，加入2MK2CO3水溶液6ml、4-叔丁基苯硼酸(CAS：123324-71-0)272mg(2mmol、2eq)、Pd(dppf)Cl2([1，1’-双(二苯基磷)二茂铁]二氯化钯CAS：72287-26-4)37mg(0.05mmol、0.03eq)。在氮气保护下，90℃搅拌反应10小时。反应完毕过滤，加入氨水5ml后再加入30ml乙酸乙酯，饱和食盐水洗涤3次，无水硫酸钠干燥，硅胶柱层析或乙醚∶丙酮(1∶1)重结晶，得5-(4-叔丁基苯基)-汉防己甲素467mg，收率：62％。
性状：白色无定形粉末。
5-(4-叔丁基苯基)-汉防己甲素
MS(ESI)755.35.[M+H]+.
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.48(d，J＝8.4Hz，1H)，δ7.38(d，J＝7.2Hz，2H)，7.27-7.23(m，1H)，7.12-7.10(m，3H)，6.88(d，J＝8.4Hz，1H)，6.80(d，J＝8.4Hz，1H)，6.60(s，1H)，6.51(s，1H)，6.32(d，J＝8.4Hz，1H)，6.06(s，1H)，4.34(d，J＝6.0Hz，1H)，4.18(d，J＝9.2Hz，1H)，3.88(s，3H)，3.70-3.60(m，1H)，3.56-3.54(m，2H)，3.45(s，3H)，3.40(s，3H)，3.37-3.27(m，1H)，3.23(s，3H)，3.12-3.02(m，4H)，2.91(s，3H)，2.86(d，J＝12.0Hz，1H)，2.75(d，J＝14.0Hz，1H)，2.63-2.59(m，2H)，2.51(s，3H)，1.30(s，9H).
13C NMR(101MHz，CDCl3)δ154.18(s)，150.09(s)，149.85(s)，149.42(s)，149.39(s)，147.84(s)，146.59(s)，144.00(s)，142.10(s)，132.56(s)，132.48(s)，131.80(s)，130.55(s)，130.04(s)，129.65(s)，129.31(s)，126.13(s)，125.89(s)，124.94(s)，123.68(s)，122.71(s)，122.01(s)，121.85(s)，120.35(s)，115.51(s)，112.49(s)，112.12(s)，64.27(s)，63.13(s)，60.57(s)，60.13(s)，56.02(s)，55.96(s)，55.66(s)，47.40(s)，45.03(s)，43.28(s)，41.58(s)，38.63(s)，34.34(s)，31.19(s)，23.05(s)，22.34(s).
实施例16：5-(4-甲氧基苯基)-汉防己甲素的制备
称取5-溴-汉防己甲素700mg(1mmol，1eq)溶于10ml甲苯，加入2MNaOH水溶液6ml、4-甲氧基苯硼酸(CAS：5720-07-0)304mg(2mmol、2eq)、Pd(dppf)Cl2([1，1’-双(二苯基磷)二茂铁]二氯化钯52mg(0.07mmol、0.03eq)、BINAP20mg(0.03mmol，0.03eq)。在氮气保护下，90℃搅拌反应10小时。反应完毕过滤，加入氨水5ml后再加入30ml乙酸乙酯，饱和食盐水洗涤3次，无水硫酸钠干燥，硅胶柱层析或乙醚∶丙酮(1∶1)重结晶，得5-(4-甲氧基苯基)-汉防己甲素560mg，收率：77％。
性状：无色针晶。
5-(4-甲氧基苯基)-汉防己甲素
C45H48N2O7
MS(ESI)729.30.[M+H]+.
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.36(dd，J＝8.2，2.1Hz，1H)，7.15(dd，J＝8.2，2.5Hz，2H)，6.99-6.85(m，5H)，6.82(dd，J＝8.4，2.6Hz，1H)，6.58(d，J＝1.4Hz，1H)，6.55(s，1H)，6.33(dd，J＝8.3，2.1Hz，1H)，6.05(s，1H)，3.93(s，3H)，3.92-3.88(m，1H)，3.85(s，3H)，3.82(d，J＝3.2Hz，1H)，3.44(s，3H)，3.41(s，3H)，3.39-3.24(m，3H)，3.23(s，3H)，3.07-2.71(m，7H)，2.64(s，3H)，2.60-2.43(m，2H)，2.30(s，3H).
13C NMR(101MHz，CDCl3)δ158.43(s)，153.80(s)，149.42(s)，149.35(s)，148.46(s)，147.51(s)，147.11(s)，143.90(s)，141.78(s)，135.13(s)，134.78(s)，132.64(s)，131.33(s)，131.23(s)，130.97(s)，130.17(s)，129.29(s)，129.10(s)，128.33(s)，127.91(s)，127.30(s)，126.04(s)，122.88(s)，121.97(s)，121.93(s)，120.34(s)，116.15(s)，113.57(s)，112.74(s)，111.58(s)，63.86(s)，61.92(s)，60.64(s)，60.16(s)，56.14(s)，55.74(s)，55.21(s)，45.26(s)，44.91(s)，42.68(s)，42.63(s)，42.24(s)，38.02(s)，25.31(s)，21.44(s).
实施例17：5-(4-氯基苯基)-汉防己甲素的制备
称取5-溴-汉防己甲素700mg(1mmol，1eq)溶于10ml乙腈，加入2MKOH水溶液6ml、4-氯苯硼酸(CAS：1679-18-1)312mg(2mmol、2eq)、Pd(dppf)Cl2([1，1’-双(二苯基磷)二茂铁]二氯化钯22mg(0.03mmol、0.03eq)。在氮气保护下，90℃搅拌反应10小时。反应完毕过滤，加入氨水5ml后再加入30ml乙酸乙酯，饱和食盐水洗涤3次，无水硫酸钠干燥，硅胶柱层析或乙醚∶丙酮(1∶1)重结晶，得5-(4-氯基苯基)-汉防己甲素454mg，收率：62％。
性状：无色针晶。
5-(4-氯基苯基)-汉防己甲素
C44H45ClN2O6
MS(ESI)733.30.[M+H]+.
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.37(m，3H)，7.15(m，3H)，6.88(m，2H)，6.85-6.79(dd，J＝8.3，2.4Hz，1H)，6.57(s，1H)，6.55(s，1H)，6.34(d，J＝8.3Hz，1H)，6.04(s，1H)，3.93(s，3H)，3.88(m，2H)，3.44(s，3H)，3.42(s，3H)，3.40-3.24(m，3H)，3.23(s，3H)，3.10-2.69(m，7H)，2.65(s，3H)，2.51(m，2H)，2.29(s，3H).
13C NMR(101MHz，CDCl3)δ153.79(s)，149.43(s)，149.08(s)，148.45(s)，147.85(s)，147.14(s)，143.72(s)，141.83(s)，135.40(s)，135.01(s)，134.55(s)，132.77(s)，132.62(s)，131.38(s)，130.19(s)，128.34(s)，128.16(s)，127.91(s)，126.85(s)，126.17(s)，122.87(s)，122.00(s)，121.97(s)，120.29(s)，116.06(s)，112.62(s)，111.55(s)，63.84(s)，61.85(s)，60.69(s)，60.18(s)，56.13(s)，55.70(s)，45.17(s)，44.77(s)，42.66(s)，42.55(s)，42.11(s)，37.92(s)，29.69(s)，25.25(s)，21.39(s).
实施例18：5-(4-三氟甲基苯基)-汉防己甲素的制备
称取5-溴-汉防己甲素700mg(1mmol，1eq)溶于10ml二氧六环，加入2M K2CO3水溶液6ml、4-三氟甲基苯硼酸(CAS：128796-39-4)380mg(2mmol、2eq)、Pd(dppf)Cl2([1，1’-双(二苯基磷)二茂铁]二氯化钯22mg(0.03mmol、0.03eq)。在氮气保护下，90℃搅拌反应10小时。反应完毕过滤，加入氨水5ml后再加入30ml乙酸乙酯，饱和食盐水洗涤3次，无水硫酸钠干燥，硅胶柱层析或乙醚∶丙酮(1∶1)重结晶，得5-(4-三氟甲基苯基)-汉防己甲素575mg，收率：75％。
性状：白色无定形粉末。
5-(4-三氟甲基苯基)-汉防己甲素
C45H45F3N2O6
MS(ESI)767.30.[M+H]+.
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.65(s，2H)，7.36(m，3H)，7.15(dd，J＝8.3，2.4Hz，1H)，6.87(s，2H)，6.74(dd，J＝8.3，2.4Hz，1H)，6.57(s，1H)，6.56(s，1H)，6.34(dd，J＝8.3，2.4Hz，1H)，6.05(s，1H)，3.93(s，3H)，3.91-3.84(m，1H)，3.70(m，1H)，3.45(s，3H)，3.44(s，3H)，3.42-3.27(m，3H)，3.24(s，3H)，3.10-2.74(m，7H)，2.65(s，3H)，2.62-2.48(m，2H)，2.30(s，3H).
13C NMR(101MHz，CDCl3)δ153.81(s)，149.45(s)，148.97(s)，148.45(s)，148.11(s)，147.16(s)，143.67(s)，141.87(s)，141.01(s)，135.05(s)，134.57(s)，132.63(s)，130.44(s)，130.19(s)，129.21(s)，128.89(s)，128.26(s)，128.20(s)，128.01(s)，126.69(s)，126.36(s)，125.69(s)，125.03(s)，122.87(s)，122.03(s)，121.99(s)，120.29(s)，116.08(s)，112.61(s)，111.56(s)，63.86(s)，61.81(s)，60.75(s)，60.19(s)，56.15(s)，55.71(s)，45.19(s)，44.63(s)，42.64(s)，42.58(s)，42.11(s)，37.88(s)，25.31(s)，21.34(s).
实施例19：5-(2-噻吩基)-汉防己甲素的制备
称取5-溴-汉防己甲素700mg(1mmol，1eq)溶于10ml二氧六环，加入三乙胺2ml、2-噻吩硼酸(CAS：6165-68-0)256mg(2mmol、2eq)、Pd(dppf)Cl2([1，1’-双(二苯基磷)二茂铁]二氯化钯22mg(0.03mmol、0.03eq)。在氮气保护下，90℃搅拌反应10小时。反应完毕过滤，加入氨水5ml后再加入30ml乙酸乙酯，饱和食盐水洗涤3次，无水硫酸钠干燥，硅胶柱层析或乙醚∶丙酮(1∶1)重结晶，得5-(2-噻吩基)-汉防己甲素479mg，收率：68％。
性状：黄色无定形粉末。
5-(2-噻吩基)-汉防己甲素
C42H44N2O6S
MS(ESI)：705.25.[M+H]+.
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.41-7.32(m，2H)，7.15(dd，J＝8.2，2.5Hz，1H)，7.09(dd，J＝5.1，3.5Hz，1H)，6.91(dd，J＝3.4，1.0Hz，1H)，6.86(s，2H)，6.82(dd，J＝8.2，2.4Hz，1H)，6.56(s，1H)，6.55(s，1H)，6.33(dd，J＝8.3，2.0Hz，1H)，6.04(s，1H)，3.93(s，3H)，3.86(dd，J＝15.0，7.6Hz，2H)，3.55(s，3H)，3.42(s，3H)，3.39-3.24(m，3H)，3.22(s，3H)，2.86(m，7H)，2.64(s，3H)，2.56(d，J＝13.5Hz，1H)，2.30(s，3H)，2.28-2.25(m，1H).
13C NMR(101MHz，CDCl3)δ153.79(s)，150.44(s)，149.43(s)，148.49(s)，148.47(s)，147.12(s)，143.67(s)，141.82(s)，136.97(s)，135.05(s)，134.60(s)，132.62(s)，130.17(s)，128.86(s)，128.20(s)，128.04(s)，127.46(s)，126.74(s)，126.15(s)，125.55(s)，122.87(s)，122.01(s)，121.98(s)，121.63(s)，120.31(s)，116.08(s)，112.53(s)，111.56(s)，63.87(s)，61.80(s)，61.03(s)，60.14(s)，56.13(s)，55.71(s)，45.21(s)，44.74(s)，42.66(s)，42.60(s)，42.09(s)，38.01(s)，25.28(s)，21.21(s).
实施例20：5-(5-甲氧基-2-吡啶基)-汉防己甲素的制备
称取5-溴-汉防己甲素700mg(1mmol，1eq)溶于10ml1，4-二氧六环后，加入2M Na2CO3水溶液5ml、2-甲氧基-5-吡啶硼酸(CAS：163105-89-3)306mg(2mmol、2eq)、Pd(dppf)Cl2([1，1’-双(二苯基磷)二茂铁]二氯化钯25mg(0.03mmol、0.03eq)。在氮气保护下，90℃搅拌反应10小时。反应完毕过滤，加入氨水5ml后再加入30ml乙酸乙酯，饱和食盐水洗涤3次，无水硫酸钠干燥，硅胶柱层析或乙醚∶丙酮(1∶1)重结晶，得5-(5-甲氧基-2-吡啶基)-汉防己甲素430mg，收率：59％。
性状：无色针晶。
5-(5-甲氧基-2-吡啶基)-汉防己甲素
MS(ESI)：730.25.[M+H]+.
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.01(s，1H)，7.53-7.39(m，1H)，7.36(d，J＝7.5Hz，1H)，7.15(d，J＝7.4Hz，1H)，6.90-6.76(m，4H)，6.57(s，1H)，6.54(s，1H)，6.34(d，J＝8.3Hz，1H)，6.04(s，1H)，3.97(s，3H)，3.93(s，3H)，3.90-3.78(m，2H)，3.46(s，3H)，3.4l(s，3H)，3.39-3.32(m，2H)，3.28(d，J＝5.2Hz，1H)，3.24(s，3H)，3.09-2.69(m，7H)，2.64(s，3H)，2.58(d，J＝13.7Hz，2H)，2.28(s，3H).
13C NMR(101MHz，CDCl3)δ163.08(s)，153.76(s)，149.64(s)，149.46(s)，148.43(s)，148.04(s)，147.31(s)，147.15(s)，143.67(s)，141.90(s)，140.58(s)，135.10(s)，134.61(s)，132.62(s)，130.19(s)，128.32(s)，127.98(s)，127.53(s)，126.37(s)，125.69(s)，125.44(s)，122.86(s)，122.02(s)，121.98(s)，120.25(s)，116.03(s)，112.65(s)，111.54(s)，110.23(s)，63.84(s)，61.81(s)，60.69(s)，60.21(s)，56.15(s)，55.71(s)，53.43(s)，45.17(s)，44.70(s)，42.62(s)，42.58(s)，42.11(s)，37.81(s)，25.32(s)，21.57(s).
实施例21：本发明化合物对肝纤维化的病原细胞肝星状细胞的抗增殖作用以及对PDGF(血小板衍生化生长因子)诱导增殖的肝星状细胞的抑制增殖作用。
体外实验模型为肝星状胶质细胞HSC-T6，其为SV40转染的HSC细胞，表型为活化型，高表达I型胶原。培养条件为GIBCO11965DMEM高糖型培养基含L-谷氨酰胺，细胞消化液为0.25％GIBCO25200-256含EDTA胰蛋白酶，抗菌药为GIBCO100U/ml青霉素和100U/ml链霉素的双抗溶液，缓冲液为GIBCO10010无钙镁离子型PBS(PH＝7.4)。抗增殖实验采用的MTT法测定。
精密称定各待测化合物，置于1.5ml EP管内，加入DMSO至0.02μM，作为储备液-20℃备用，使用时用DMEM培养基稀释至所需浓度。MTT干粉精密称定，加入无EDTA的PBS溶液至5mg/ml，0.22μL微孔滤膜过滤分装，-20℃避光保存，使用时放置4℃冰箱解冻并与一周内用完。PDGF-aa用PBS溶液溶解稀释至2μg/ml，4℃冰箱保存备用。
自-80℃超低温冰箱中取出细胞冻存管，立即放入37℃水浴，边加热边振摇，待完全融化后转移至盛有10ml DMEM完全培养基的无菌离心管中，37℃，1500rpm离心5分钟。弃上清，1ml培养基吹打下层细胞沉淀，并转移至盛有5ml培养基的细胞瓶中。24小时后弃旧培养基，PBS洗涤，加入新培养基，显微镜下观察其贴壁及铺展情况。
待细胞生长状态良好、交联度达90％时，0.25％胰蛋白酶消化1.5min-2.0min，待完全消化后加入1ml完全培养基终止消化，37℃，1500rpm离心5分钟收集细胞。加入适量培养基吹打制备细胞悬液，血球计数板进行细胞计数，培养基稀释至5*104/ml，于96孔板内接种细胞，每孔加入100μL细胞悬液，空白对照孔只加等体积培养基。
24小时后弃去旧培养基，加入新的无血清培养基(考虑细胞生长状态，调整为含2％血清的非完全培养基)。依次加入不同浓度的各待测化合物，使其终浓度依次为50μM，12.5μM，3.125μM，0.781μM，0.195μM，0.049μM，阴性对照孔加入同等浓度的DMSO作为溶剂对照，秋水仙碱组作为阳性对照，每个浓度组设置3个复孔。为避免边缘效应，96孔板四周36个孔加入培养基。
48小时后，每孔加入20μL MTT，37℃继续孵育4小时，弃去旧培养基，每孔加入100μL DMSO，振摇使其充分溶解，570/630nm测定吸光度OD值，计算各浓度条件下的抑制率公式如下：inhibition％＝(1-(测试孔OD值-空白孔OD值)/(阴性对照孔OD值-空白孔OD值))*100，并计算其IC50值。如下表所示：
实验结果表明，除本发明实施例9化合物外，所有本发明化合物对HSC的抑制作用或在PDGF诱导增殖的肝星状细胞的抑制作用IC50值均在10-6数量级，有较好的活性。活性最好的是实施例14、18、19化合物。