双苄基四氢异喹啉衍生物及其制备方法和应用.pdf

1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 (10)授权公告号 (45)授权公告日 (21)申请号 201210414435.1 (22)申请日 2012.10.25 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 103772404 A (43)申请公布日 2014.05.07 (73)专利权人 上海医药工业研究院 地址 200040 上海市静安区北京西路1320 号 专利权人 中国医药工业研究总院 (72)发明人 杨义芳赖龙吴春珍胡晓 雷荣荣 (74)专利代理机构 北京市金杜律师事务所 11256 代理人 陈长会谢燕军 (51)Int.Cl. C07D 491/18(200

2、6.01) A61K 31/4748(2006.01) A61P 1/16(2006.01) 审查员 黄凯 (54)发明名称 双苄基四氢异喹啉衍生物及其制备方法和 应用 (57)摘要 本发明公开如下通式I所示的化合物或其药 学上可接受的盐：其 中R1、 R2、 R3、 R4和R5如说明书中所定义。 本发明还 公开制备所述式I化合物的方法。 本发明所述式I 化合物可用于抑制PDGF激活的肝星状细胞从而 逆转肝纤维化。 权利要求书1页 说明书27页 CN 103772404 B 2016.11.23 CN 103772404 B 1.5-(4-甲基苯基)-汉防己甲素、 5-(4-三氟甲基苯基)-汉

3、防己甲素、 5-(2-噻吩基)-汉 防己甲素或其药学上可接受的盐。 2.制备权利要求1所述化合物或其药学上可接受的盐的方法， 包括使5-溴代双苄基四 氢异喹啉在有机磷配体和碱存在下， 利用钯催化剂在有机溶剂中进行Sonogashira偶联或 Suzuki偶联反应的步骤。 3.根据权利要求2所述的方法， 其特征在于所述有机磷配体选自三苯基膦、 1， 1 -双(二 苯基膦)二茂铁、 ()-2， 2 -双-(二苯膦基)-1， 1 -联萘或1， 4-双二苯基膦丁烷。 4.根据权利要求2所述的方法， 其特征在于所述有机磷配体的用量为0.01-1当量。 5.根据权利要求2所述的方法， 其特征在于所述钯催化

4、剂选自零价钯催化剂或二价钯 催化剂。 6.根据权利要求2所述的方法， 其特征在于所述催化剂的用量为0.01-1当量。 7.根据权利要求2所述的方法， 其特征在于所述碱选自碳酸钠、 碳酸钾、 碳酸铯、 氢氧化 钠、 氢氧化钾、 三乙胺或氢氧化钡。 8.根据权利要求2所述的方法， 其特征在于所述碱的用量为至少1个当量。 9.根据权利要求2所述的方法， 其特征在于所述有机溶剂选自二甲基亚砜、 二甲基甲酰 胺、 四氢呋喃、 甲苯、 二氧六环或乙腈。 10.根据权利要求2所述的方法， 其特征在于所述反应的温度为60-150。 11.权利要求1所述化合物或其药学上可接受的盐在制备抑制PDGF激活的肝星状细

5、胞 从而逆转肝纤维化的药物中的用途。 权利要求书 1/1 页 2 CN 103772404 B 2 双苄基四氢异喹啉衍生物及其制备方法和应用 技术领域 0001 本发明属于药物化学领域， 具体涉及一类具有逆转肝纤维化作用的双苄基四氢异 喹啉衍生物及其制备方法和医药用途。 背景技术 0002 肝纤维化是各种致病原因引起细胞外基质(extracellularmatrix， ECM)在肝内 过多沉积的病理过程。 我国是病毒性肝炎高发区， 仅乙型肝炎病毒(HBV)携带者就达1.2亿， 其中慢性乙型肝炎患者3000万以上。 全球慢性HBV感染者3.5亿， 约25慢性乙肝患者最终 将发为肝硬化(hepat

6、iccirrhosis)， 甚至肝癌丙型肝炎病毒(HCV)感染慢性化达50- 85， 10-30发展为肝硬化， 3-10演变为肝癌。 其他如乙醇性肝病、 非乙醇性脂肪性 肝炎(nonalcoholicsteatohepatitis， NASH)、 自身免疫性肝炎及原发性胆汁性肝硬化 (primarybiliarycirrhosis， PBC)等疾病亦可发生肝纤维化肝硬化， 而这些疾病在我国 亦不少见。 在细胞和分子发病机制方面的研究显示， 细胞因子作用于窦周间隙静止的肝星 状细胞(hepaticstellatecell， HSC)使其转变为激活状态， 继而增殖， 合成细胞外基质.因 此认为激活

7、的HSC是产生细胞外基质的主要细胞。 在众多的细胞因子中， 血小板衍化生长因 子(platelet-derivedgrowthfactor， PDGF)是肝纤维化发生过程中最重要的细胞因子。 PDGF可刺激HSC分裂增殖， 上调肝纤维化的发生。 PDGF可以激活HSC的细胞外信号调节激酶 (ERK1/2)和FAK-PI3K-Akt通路而引起HSC增殖及致纤维化作用。 0003 近年发现双苄基四氢异喹啉类生物碱汉防己甲素具有抗肝纤维化作用(Journal ofEthnopharmacology100(2005)299-305、 Mitochondrion6(2006)176-185等)。 但尚未

8、见 到对双苄基四氢异喹啉进行结构修饰后的衍生物用于抗肝纤维化的应用。 发明内容 0004 本发明基于目前对双苄基四氢异喹啉类生物碱抗肝纤维化活性的广泛研究， 但这 类化合物多局限于天然产物， 结构修饰和构效关系研究报告甚少。 本发明以先导化合物汉 防己甲素为原料， 设计并制备了一系列化合物， 通过体外实验筛选逆转PDGF激活的肝星状 细胞， 以期获得活性更高的化合物供进一步开发成新药。 0005 因此， 第一方面， 本发明提供一种通式I所示的化合物或其药学上可接受的盐： 说明书 1/27 页 3 CN 103772404 B 3 0006 0007 其中： 0008 R1、 R2独立地为甲基或

9、氢； 0009 R3、 R4独立地为甲氧基、 羟基或含1-10个碳原子的直链或支链的烷基、 烷氧基或酰 氧基； 0010 R5独立地为H或含1-20个碳原子的直链或支链的饱和或不饱和的烷基、 环烷基、 硅 烷基、 烷氧基或酰氧基， 或者为芳香苯环或芳香杂环， 其中所述苯环或杂环任选被一个或多 个取代基取代； 其中取代基为含1-20个碳原子的直链或支链的饱和或不饱和的烷基、 环烷 基、 硅烷基、 烷氧基或酰氧基或卤素原子； 0011 其中排除R1和R2为CH3或氢； R3为OCH3或OH； R4为OCH3或OH以及R5为H、 OH或OCH3的式I 化合物及其盐。 0012 根据本发明一个优选的实

10、施方式， 所述R5独立地为苯乙炔基、 3， 3-二甲基-丁-1- 炔基、 己-1-炔基、 3-环戊烷-丙-1-炔基、 1-氟-4-苯基乙炔基、 1-叔丁基-4-苯基乙炔基、 (2- 吡啶基)-乙炔基、 辛-1， 7-二炔基、 环戊基乙炔基、 葵-1-炔基、 3-环己烷-丙-炔基、 1-甲氧 基-4-苯乙炔基、 苯基、 4-三氟甲基苯基、 4-叔丁基苯基、 4-甲氧基苯基、 4-氯基苯基、 4-甲基 苯基、 2-噻吩基或5-甲氧基-2-吡啶基。 0013 根据本发明一个优选的实施方式， 通式I中C(1)和C(1 )构型为RR、 SS、 1S1 R或 1R1 S。 0014 根据本发明一个优选的实

11、施方式， 本发明所述的药学可接受的盐包括但不限于无 机酸如盐酸、 硝酸、 硫酸、 磷酸、 氢溴酸， 或者有机酸如马来酸、 富马酸、 柠檬酸、 酒石酸、 乳 酸、 乙酸、 甲磺酸、 对甲苯磺酸、 己二酸、 棕榈酸、 单宁酸组成的盐以及通过碘或溴代烷烃在2 和2 位衍生化的季铵盐。 0015 本发明中的术语 “烷基” 是指C1-C20， 优选C1-C10的直链或支链烷基。 烷基的实例 是甲基、 乙基、 丙基、 丁基、 戊基、 己基等以及它们可能的异构体。 0016 本发明中的术语 “环烷基” 是指C3-C20， 优选C3-C10的环烷基。 环烷基的实例是环 丙基、 环丁基、 环戊基等以及它们可能的

12、异构体。 说明书 2/27 页 4 CN 103772404 B 4 0017 本发明中的术语 “烷氧基” 是指C1-C20， 优选C1-C10的烷氧基。 烷氧基的实例是甲 氧基、 乙氧基、 丙氧基等以及它们可能的异构体。 0018 本发明中的术语 “酰氧基” 是指C2-C20， 优选C2-C10的酰氧基。 酰氧基的实例是乙 酰氧基、 丙酰氧基、 丁酰氧基等以及它们可能的异构体。 0019 本发明中的术语 “硅烷基” 是指C1-C10直链或直链取代氢的硅烷， 如三甲基硅烷、 三叔丁基硅烷等以及它们可能的异构体。 0020 本发明中的术语 “芳香苯环” 是指C6-C14的芳基。 芳基的实例是苯基

13、或萘基。 0021 本发明中的术语 “芳香杂环” 是指C3-C10的芳香杂环。 芳香杂环的实例是吡啶基、 噻吩基、 哌嗪基、 咪唑基、 哌啶基、 呋喃基、 嘧啶基、 吲哚基等。 0022 第二方面， 本发明提供制备所述通式I化合物或其药学上可接受的盐的方法， 包括 使5-溴代双苄基四氢异喹啉在有机磷配体和碱存在下， 利用钯催化剂在有机溶剂中进行 Sonogashira偶联或Suzuki偶联反应的步骤。 0023 本发明所述的5-溴代双苄基四氢异喹啉(式II化合物)通过本领域已知方法按照 以下具体步骤获得： 0024 由式III化合物通过卤原子取代得到式II所示的中间体化合物， 其中制备条件为

14、在-15至0摄氏度冰盐浴中， 缓慢将1M的溴的乙酸溶液滴入汉防己甲素的三氟乙酸水溶液 中， 反应时间为4小时， 反应完毕用2M的氢氧化钠水溶液调PH至中性， 以二氯甲烷提取并以 饱和食盐水洗涤三次后无水硫酸钠干燥， 以乙醚/甲醇重结晶得白色晶体。 产率为95。 0025 上述反应的反应路线如下路线1表示： 0026 路线1： 0027 0028 其中R1、 R2独立地为甲基或氢； 0029 R3、 R4独立地为甲氧基、 羟基或含1-10个碳原子的直链或支链的烷基、 烷氧基或酰 氧基； 0030 然后5-溴代双苄基四氢异喹啉(式II化合物)可以在有机磷配体和碱存在下， 利用 钯催化剂在有机溶剂中

15、进行Sonogashira偶联或Suzuki偶联反应， 所述Sonogashira偶联及 Suzuki偶联反应的反应路线分别如下路线2和3表示： 0031 路线2： 说明书 3/27 页 5 CN 103772404 B 5 0032 0033 上式中， R5R+乙炔基。 0034 R1、 R2独立地为甲基或氢； 0035 R3、 R4独立地为甲氧基、 羟基或含1-10个碳原子的直链或支链的烷基、 烷氧基或酰 氧基； 0036 R独立地为H或含1-20个碳原子的直链或支链的饱和或不饱和的烷基、 环烷基、 硅 烷基、 烷氧基或酰氧基， 或者为芳香苯环或芳香杂环， 其中所述苯环或杂环任选被一个或多

16、 个取代基取代； 其中取代基为含1-20个碳原子的直链或支链的饱和或不饱和的烷基、 环烷 基、 硅烷基、 烷氧基或酰氧基或卤素原子； 0037 路线3： 0038 0039 R1、 R2独立地为甲基或氢； 0040 R3、 R4独立地为甲氧基、 羟基或含1-10个碳原子的直链或支链的烷基、 烷氧基或酰 氧基； 0041 R5独立地为H或含1-20个碳原子的直链或支链的饱和或不饱和的烷基、 环烷基、 硅 烷基、 烷氧基或酰氧基， 或者为芳香苯环或芳香杂环， 其中所述苯环或杂环任选被一个或多 个取代基取代； 其中取代基为含1-20个碳原子的直链或支链的饱和或不饱和的烷基、 环烷 基、 硅烷基、 烷

17、氧基或酰氧基或卤素原子； 0042 根据本发明一个优选的实施方式， 所述有机磷配体可以选自三苯基膦(PPh3)、 1， 1 -双(二苯基膦)二茂铁(dppf)、 ()-2， 2 -双-(二苯膦基)-1， 1 -联萘(BINAP)或1， 4-双 二苯基膦丁烷(dppb)， 其用量可以为0.01-1当量。 0043 根据本发明一个优选的实施方式， 所述钯催化剂可以选自零价钯催化剂或二价钯 催化剂， 其用量为0.01-1当量。 0044 根据本发明一个优选的实施方式， 所述碱可以选自碳酸钠、 碳酸钾、 碳酸铯、 氢氧 化钠、 氢氧化钾、 三乙胺或氢氧化钡， 其用量为至少1个当量。 说明书 4/27

18、页 6 CN 103772404 B 6 0045 根据本发明一个优选的实施方式， 本发明在有机溶剂例如DMSO、 DMF、 THF、 甲苯、 二 氧六环或乙腈中进行。 反应的温度可以为60-150。 0046 根据本发明一个特别优选的实施方式， Sonogashira偶联反应条件及方法主要是： 将式II溶于DMSO中， 加入1.2个当量的Cs2CO3(CAS： 534-17-8)、 2个当量的端基炔试剂， 0.03 个当量双三苯基膦二氯化钯(CAS： 13965-03-2)， 在氮气保护下， 100反应10小时， 过滤后 加入20倍当量氨水， 饱和食盐水洗涤三次后无水硫酸钠干燥后以乙醚甲醇重

19、结晶得产物。 0047 根据本发明一个特别优选的实施方式， Suzuki偶联反应反应条件及方法主要是： 将式II溶于甲苯或1， 4-二氧六环中， 加入溶剂等量的2M的碳酸钠水溶液， 2个当量的硼酸试 剂， 加入0.03当量的Pd(dppf)Cl2(1， 1 -双(二苯基磷)二茂铁二氯化钯， (CAS： 72287-26- 4)， 在氮气保护下90反应10小时， 过滤后加入20倍当量氨水， 饱和食盐水洗涤三次后无水 硫酸钠干燥后以乙醚甲醇重结晶得产物。 0048 第三方面， 本发明提供所述通式I化合物或其药学上可接受的盐在制备抑制PDGF 激活的肝星状细胞从而逆转肝纤维化的药物中的用途。 因此，

20、 本发明所述的通式I化合物或 其药学上可接受的盐可用于治疗肝纤维化。 具体实施方式 0049 下面给出的优选实施例， 旨在进一步阐明本发明的化合物及其制备方法， 而非限 定所举例的化合物的范围， 也并非限定本发明权利要求中提出的技术方法， 即是说通过这 些实施例所述的方法可以和很容易地制得通式II、 I化合物。 对本发明的方法互换或改动， 及使用类似原料、 试剂和溶剂， 对于本专业的普通技术人员是不需要创造性劳动的。 本发明 所选用的优选案例原料均是采用汉防己甲素(CAS： 518-34-3)进行， 但并不代表本发明只限 于该原料， 对于汉防己乙素等如说明书列举的化合物均适合。 汉防己甲素购于

21、武汉顶辉化 工有限公司， 批号： 20110913。 0050 实施例1： 5-(3， 3-二甲基-丁-1-炔基)-汉防己甲素的制备 0051 称取5-溴-汉防己甲素700mg(1mmol)溶于10mlDMSO中， 加入CsCO3651.6mg(2mmol、 2eq)、 3， 3-二甲基-1-丁炔(CAS： 917-92-0)164mg(2mmol、 2eq)、 PdCl2(PPh3)221mg (0.03mmol、 0.03eq)。 在氮气保护下， 100搅拌反应10小时。 反应完毕过滤， 加入氨水5ml后 再加入30ml乙酸乙酯， 饱和食盐水洗涤3次， 无水硫酸钠干燥， 硅胶柱层析或乙醚

22、甲醇(2 1)重结晶， 得5-(3， 3-二甲基-丁-1-炔基)-汉防己甲素576mg。 收率： 82。 0052 性状： 无色针晶。 说明书 5/27 页 7 CN 103772404 B 7 0053 0054 5-(3， 3-二甲基-丁-1-炔基)-汉防己甲素 0055 C44H50N2O6 0056 MS(ESI)： 703.35.M+H+. 0057 1HNMR(300MHz， CDCl3) 7.32(d， J8.1Hz， 1H)， 7.12(dd， J8.1， 2.1Hz， 1H)， 6.84 (m， 2H)， 6.79(dd， J8.2， 2.1Hz， 1H)， 6.52(s，

23、1H)， 6.50(s， 1H)， 6.29(d， J8.3Hz， 1H)， 6.00(s， 1H)， 3.91(s， 3H)， 3.90-3.86(m， 1H)， 3.80(s， 3H)， 3.79-3.73(m， 1H)， 3.59-3.38(m， 2H)， 3.37(s， 3H)， 3.32-3.17(m， 1H)， 3.16(s， 3H)， 3.04-2.64(m， 7H)， 2.64-2.60(m， 1H， overlap)， 2.63(s， 3H)， 2.58-2.38(m， 1H)， 2.31(s， 3H)， 1.35(s， 9H). 0058 13CNMR(101MHz， CD

24、Cl3) 153.83(s)， 152.86(s)， 149.38(s)， 148.39(s)， 148.28 (s)， 147.10(s)， 143.64(s)， 141.62(s)， 135.07(s)， 134.71(s)， 132.64(s)， 130.82(s)， 130.11(s)， 128.11(s)， 126.11(s)， 122.82(s)， 121.97(s)， 121.92(s)， 120.41(s)， 116.27 (s)， 112.27(s)， 111.59(s)， 107.08(s)， 73.08(s)， 63.83(s)， 61.43(s)， 60.59(s)，

25、60.42 (s)， 56.15(s)， 55.53(s)， 45.23(s)， 43.73(s)， 42.59(s)， 42.21(s)， 41.57(s)， 38.17(s)， 31.22(s)， 28.46(s)， 25.25(s)， 20.65(s). 0059 实施例2： 5-(己-1-炔基)-汉防己甲素的制备 0060 称取5-溴-汉防己甲素700mg(1mmol)溶于10mlDMSO中， 加入CsCO3651.6mg(2mmol、 2eq)、 1-已炔(CAS： 693-02-7)164mg(2mmol、 2eq)、 PdCl2(PPh3)235mg(0.05mmol、 0.03

26、eq)、 BINAP20mg(0.03mmol， 0.03eq)。 在氮气保护下， 100搅拌反应10小时。 反应完毕过滤， 加入 氨水5ml后再加入30ml乙酸乙酯， 饱和食盐水洗涤3次， 无水硫酸钠干燥， 硅胶柱层析或乙醚 甲醇(2 1)重结晶， 得5-(己-1-炔基)-汉防己甲素527mg， 收率： 75。 0061 性状： 白色无定形粉末。 说明书 6/27 页 8 CN 103772404 B 8 0062 0063 5-(己-1-炔基)-汉防己甲素 0064 C44H50N2O6 0065 MS(ESI)： 703.35.M+H+. 0066 1HNMR(300MHz， CDCl3

27、) 7.34(dd， J8.3， 1.8Hz， 1H)， 7.13(dd， J8.2， 2.5Hz， 1H)， 6.86(s， 2H)， 6.80(dd， J8.3， 2.4Hz， 1H)， 6.53(s， 1H)， 6.51(s， 1H)， 6.30(dd， J8.3， 2.0Hz， 1H)， 6.01(s， 1H)， 3.92(s， 3H)， 3.90-3.82(m， 1H)， 3.79(s， 3H)， 3.73(d， J9.9Hz， 1H)， 3.64-3.39(m， 2H)， 3.37(s， 3H)， 3.31-3.20(m， 1H)， 3.18(s， 3H)， 3.06-2.66(m

28、， 7H)， 2.63(s， 3H)， 2.49(m， 4H)， 2.30(s， 3H)， 1.65-1.46(m， 4H)， 0.95(t， J7.2Hz， 3H). 0067 13CNMR(101MHz， CDCl3) 153.84(s)， 152.95(s)， 149.38(s)， 148.38(s)， 148.28 (s)， 147.12(s)， 143.63(s)， 141.63(s)， 134.99(s)， 134.64(s)， 132.64(s)， 130.95(s)， 130.12(s)， 128.03(s)， 126.09(s)， 122.84(s)， 121.99(s)，

29、121.93(s)， 120.34(s)， 116.23 (s)， 112.28(s)， 111.71(s)， 111.59(s)， 98.61(s)， 74.47(s)， 63.83(s)， 61.45(s)， 60.74 (s)， 60.35(s)， 56.15(s)， 55.50(s)， 45.20(s)， 43.79(s)， 42.55(s)， 42.24(s)， 41.56(s)， 38.08(s)， 38.08(s)， 31.09(s)， 25.23(s)， 22.02(s)， 20.86(s)， 19.52(s)， 13.65(s). 0068 实施例3： 5-(辛-1， 7-二

30、炔基)-汉防己甲素的制备 0069 称取5-溴-汉防己甲素700mg(1mmol)溶于10mlDMSO中， 加入Ba(OH)2513mg(3mmol、 2eq)、 1， 7-辛二炔(CAS： 871-84-1)212mg(2mmol、 2eq)、 PdCl2(PPh3)235mg(0.05mmol、 0.03eq)。 在氮气保护下， 100搅拌反应10小时。 反应完毕过滤， 加入氨水5ml后再加入30ml 乙酸乙酯， 饱和食盐水洗涤3次， 无水硫酸钠干燥， 硅胶柱层析或乙醚 甲醇(2 1)重结晶， 得 5-(辛-1， 7-二炔基)-汉防己甲素566mg， 收率： 75。 0070 性状： 无色

31、针晶。 说明书 7/27 页 9 CN 103772404 B 9 0071 0072 5-(辛-1， 7-二炔基)-汉防己甲素 0073 C46H50N2O6 0074 MS(ESI)： 727.35.M+H+. 0075 1HNMR(300MHz， CDCl3) 7.34(dd， J8.2， 2.0Hz， 1H)， 7.13(dd， J8.1， 2.5Hz， 1H)， 6.85(m， 2H)， 6.80(dd， J8.3， 2.5Hz， 1H)， 6.53(s， 1H)， 6.51(s， 1H)， 6.30(dd， J8.3， 2.0Hz， 1H)， 6.01(s， 1H)， 3.92(s

32、， 3H)， 3.88(m， 1H)， 3.79(s， 3H)， 3.76(d， J10.2Hz， 1H)， 3.58-3.41(m， 2H)， 3.37(s， 3H)， 3.26(m， 1H)， 3.18(s， 3H)， 2.98-2.67(m， 7H)， 2.63(s， 3H)， 2.59-2.39(m， 4H)， 2.31(s， 3H)， 2.29-2.22(m， 2H)， 1.96(t， J2.6Hz， 1H)， 1.75(m， 4H). 0076 13CNMR(75MHz， CDCl3) 153.69(s)， 152.84(s)， 149.26(s)， 148.30(s)， 148.

33、22 (s)， 146.98(s)， 143.46(s)， 141.52(s)， 134.97(s)， 134.55(s)， 132.53(s)， 131.40(s)， 130.88(s)， 130.01(s)， 128.00(s)， 126.08(s)， 122.69(s)， 121.88(s)， 121.83(s)， 120.21 (s)， 116.10(s)， 112.14(s)， 111.44(s)， 97.65(s)， 84.06(s)， 74.84(s)， 68.42(s)， 63.68 (s)， 61.30(s)， 60.68(s)， 60.24(s)， 56.03(s)， 55

34、.38(s)， 45.07(s)， 43.60(s)， 42.47(s)， 42.11(s)， 41.45(s)， 37.92(s)， 27.78(s)， 27.46(s)， 25.18(s)， 20.73(s)， 19.24(s)， 17.89 (s). 0077 实施例4： 5-(3-环戊烷-丙-1-炔基)-汉防己甲素的制备 0078 称取5-溴-汉防己甲素700mg(1mmol)溶于10mlDMSO中， 加入Ba(OH)2513mg(3mmol、 2eq)、 3-环戊基-1-丙炔(CAS： 116279-08-4)216mg(2mmol、 2eq)、 PdCl2(PPh3)228mg (

35、0.04mmol、 0.03eq)BINAP20mg(0.03mmol， 0.03eq)。 在氮气保护下， 100搅拌反应10小时。 反应完毕过滤， 加入氨水5ml后再加入30ml乙酸乙酯， 饱和食盐水洗涤3次， 无水硫酸钠干 燥， 硅胶柱层析或乙醚 甲醇(2 1)重结晶， 得5-(3-环戊烷-丙-1-炔基)-汉防己甲素517mg， 收率： 71。 0079 性状： 白色无定形粉末。 说明书 8/27 页 10 CN 103772404 B 10 0080 0081 5-(3-环戊烷-丙-1-炔基)-汉防己甲素 0082 C46H52N2O6 0083 MS(ESI)： 729.35.M+H+

36、. 0084 1HNMR(400MHz， CDCl3) 7.37(dd， J8.2， 2.4Hz， 1H)， 7.09(dd， J8.2， 2.4Hz， 1H)， 7.03(d， J8.0Hz， 1H)， 6.83(d， J8.0Hz， 1H)， ， 6.70(dd， J8.2， 2.4Hz， 1H)， 6.54(s， 1H)， 6.45(d， J8.0Hz， 1H)， 6.26(dd， J8.2， 2.4Hz， 1H)， 5.99(s， 1H)， 4.18 (dd， J5.6， 11.2Hz， 1H)， 3.92(d， J8.0Hz， 1H)， 3.86(s， 3H)， 3.75(s， 3H

37、)， 3.68-3.52(m， 3H)， 3.37(s， 3H)， 3.20-3.17(m， 1H)， 3.16(s， 3H)， 3.06-2.8(m， 7H)， 2.80(s， 3H)， 2.55-2.50 (m， 1H)， 2.44(d， J16.0Hz， 2H)， 2.37(s， 3H)， .2.11(quint， 1H)， 1.84-1.76(m， 2H)， 1.63- 1.51(m， 4H)， 1.37-1.21(m， 2H). 0085 13CNMR(101MHz， CDCl3) 153.85(s)， 153.00(s)， 149.36(s)， 148.43(s)， 148.21

38、(s)， 147.14(s)， 143.64(s)， 141.64(s)， 134.86(s)， 134.53(s)， 132.63(s)， 130.92(s)， 130.13(s)， 127.91(s)， 127.76(s)， 125.97(s)， 122.88(s)， 121.98(s)， 121.93(s)， 120.33 (s)， 116.20(s)， 112.27(s)， 111.79(s)， 111.60(s)， 98.16(s)， 74.48(s)， 63.84(s)， 61.47 (s)， 60.76(s)， 60.35(s)， 56.13(s)， 55.51(s)， 45.1

39、6(s)， 43.85(s)， 42.49(s)， 42.25(s)， 41.52(s)， 40.98(s)， 39.39(s)， 38.07(s)， 32.12(s)， 25.68(s)， 25.33(s)， 25.12(s)， 20.94 (s). 0086 实施例5： 5-(环戊基乙炔基)-汉防己甲素的制备 0087 称取5-溴-汉防己甲素700mg(1mmol)溶于10mlDMSO中， 加入Ba(OH)2684mg(4mmol、 2eq)、 环戊基乙炔(CAS： 930-51-8)188mg(2mmol、 2eq)、 PdCl2(PPh3)250mg(0.07mmol、 0.03eq)

40、。 在氮气保护下， 100搅拌反应10小时。 反应完毕过滤， 加入氨水5ml后再加入30ml 乙酸乙酯， 饱和食盐水洗涤3次， 无水硫酸钠干燥， 硅胶柱层析或乙醚 甲醇(2 1)重结晶， 得 5-(环戊基乙炔基)-汉防己甲素528mg， 收率： 74。 0088 性状： 白色无定形粉末。 说明书 9/27 页 11 CN 103772404 B 11 0089 0090 5-(环戊基乙炔基)-汉防己甲素 0091 C45H50N2O6 0092 MS(ESI)： 715.35.M+H+. 0093 1HNMR(400MHz， CDCl3) 7.33(dd， J8.2， 2.1Hz， 1H)，

41、7.13(dd， J8.1， 2.5Hz， 1H)， 6.95-6.82(m， 2H)， 6.79(dd， J8.3， 2.5Hz， 1H)， 6.53(d， J0.9Hz， 1H)， 6.51(s， 1H)， 6.30(dd， J8.3， 2.1Hz， 1H)， 6.01(s， 1H)， 3.93(s， 3H)， 3.92-3.86(m， 1H)， 3.80(s， 3H)， 3.76(d， J10.2Hz， 1H)， 3.57-3.39(m， 2H)， 3.37(s， 3H)， 3.27(dd， J12.4， 5.6Hz， 1H)， 3.18(s， 3H)， 3.04-2.66(m， 9H)

42、， 2.63(s， 3H)， 2.47(d， J13.6Hz， 1H)， 2.31(s， 3H)， 2.06- 1.96(m， 2H)， 1.84-1.72(m， 4H)， 1.65-1.57(m， 2H). 0094 13CNMR(101MHz， CDCl3) 153.83(s)， 152.85(s)， 149.38(s)， 148.38(s)， 148.25 (s)， 147.12(s)， 143.64(s)， 141.63(s)， 135.03(s)， 134.66(s)， 132.64(s)， 130.87(s)， 130.11(s)， 128.07(s)， 126.09(s)， 12

43、2.83(s)， 121.98(s)， 121.93(s)， 120.37(s)， 116.24 (s)， 112.28(s)， 111.74(s)， 111.59(s)， 103.09(s)， 74.06(s)， 63.84(s)， 61.45(s)， 60.69 (s)， 60.38(s)， 56.15(s)， 55.51(s)， 45.22(s)， 43.78(s)， 42.58(s)， 42.23(s)， 41.56(s)， 38.12(s)， 34.21(s)， 34.20(s)， 31.28(s)， 29.70(s)， 25.26(s)， 25.00(s)， 20.76(s). 0

44、095 实施例6： 5-(葵-1-炔基)-汉防己甲素的制备 0096 称取5-溴-汉防己甲素700mg(1mmol)溶于10mlDMSO中， 加入CsCO3651.6mg(2mmol、 2eq)、 1-癸炔(CAS： 764-93-2)276mg(2mmol、 2eq)、 PdCl2(PPh3)221mg(0.03mmol、 0.03eq)。 在 氮气保护下， 100搅拌反应10小时。 反应完毕过滤， 加入氨水5ml后再加入30ml乙酸乙酯， 饱和食盐水洗涤3次， 无水硫酸钠干燥， 硅胶柱层析或乙醚 甲醇(2 1)重结晶， 得5-(葵-1- 炔基)-汉防己甲素652mg， 收率： 86。 00

45、97 性状： 白色无定形粉末。 说明书 10/27 页 12 CN 103772404 B 12 0098 0099 5-(葵-1-炔基)-汉防己甲素 0100 C48H58N2O6 0101 MS(ESI)： 759.40.M+H+. 0102 1HNMR(400MHz， CDCl3) 7.34(dd， J8.2， 2.0Hz， 1H)， 7.14(dd， J8.1， 2.5Hz， 1H)， 6.91-6.84(m， 2H)， 6.80(dd， J8.3， 2.5Hz， 1H)， 6.53(d， J4.4Hz， 1H)， 6.51(s， 1H)， 6.30(dd， J8.3， 2.0Hz，

46、1H)， 6.01(s， 1H)， 3.92(s， 3H)， 3.91-3.87(m， 1H)， 3.80(s， 3H)， 3.76(d， J10.4Hz， 1H)， 3.54-3.39(m， 2H)， 3.37(s， 3H)， 3.29-3.21(m， 1H)， 3.18(s， 3H)， 3.04-2.68(m， 7H)， 2.63(s， 3H)， 2.61-2.58(m， 1H)， 2.50(t， J7.0Hz， 2H)， 2.47-2.36(m， 1H)， 2.31(s， 3H)， 1.68-1.59(m， 2H)， 1.55-1.44(m， 2H)， 1.35-1.26(m， 8H)，

47、 0.88(t， J 6.7Hz， 3H). 0103 13CNMR(101MHz， CDCl3) 153.82(s)， 152.92(s)， 149.37(s)， 148.33(s)， 148.31 (s)， 147.10(s)， 143.61(s)， 141.62(s)， 135.08(s)， 134.70(s)， 132.64(s)， 130.97(s)， 130.10(s)， 128.19(s)， 128.11(s)， 126.16(s)， 122.83(s)， 121.96(s)， 121.90(s)， 120.32 (s)， 116.25(s)， 112.29(s)， 111.69

48、(s)， 111.59(s)， 98.65(s)， 74.54(s)， 63.81(s)， 61.43 (s)， 60.73(s)， 60.33(s)， 56.13(s)， 55.49(s)， 45.21(s)， 43.74(s)， 42.60(s)， 42.22(s)， 41.57(s)， 38.01(s)， 31.84(s)， 29.25(s)， 29.13(s)， 29.01(s)， 28.93(s)， 25.32(s)， 22.67 (s)， 20.87(s)， 19.83(s)， 14.11(s). 0104 实施例7： 5-(3-环己烷-丙-炔基)-汉防己甲素的制备 0105 称取

49、5-溴-汉防己甲素700mg(1mmol)溶于10mlDMSO中， 加入CsCO3651.6mg(2mmol、 2eq)、 3-环己基-1-丙炔(CAS： 17715-00-3)244mg(2mmol、 2eq)、 PdCl2(PPh3)221mg (0.03mmol、 0.03eq)。 在氮气保护下， 100搅拌反应10小时。 反应完毕过滤， 加入氨水5ml后 再加入30ml乙酸乙酯， 饱和食盐水洗涤3次， 无水硫酸钠干燥， 硅胶柱层析或乙醚 甲醇(2 1)重结晶， 得5-(3-环己烷-丙-炔基)-汉防己甲素630mg， 收率： 85。 0106 性状： 白色无定形粉末。 说明书 11/27 页 13 CN 103772404 B 13 0107 0108 5-(3-环己烷-丙-炔基)-汉防己甲素 0109 C47H54N2O6 0110 MS(ESI)： 743.40.M+H+. 0111 1HNMR(300MHz， CDCl3) 7.33(dd， J8.1， 2.3Hz， 1H)， 7.13(dd， J8.1， 2.3Hz， 1H)， 6.84m， 2H)， 6.79(dd， J8.2， 2.2Hz， 1H)， 6.53(s， 1H)， 6.50(s， 1H)， 6.30(d