本发明涉及吲哚衍生物，包含所述吲哚衍生物的药物组合物，以 及这些吲哚衍生物的治疗用途、特别是在治疗疼痛中的用途。
疼痛治疗通常受到目前可用的药物治疗的副作用的限制。对于中 到重度疼痛，广泛使用阿片样物质(opioids)。这些药物便宜且有效， 但是受到严重的并可能危及生命的副作用的困扰，最值得注意的副作 用是呼吸抑制和肌强直。另外，阿片样物质的可给药剂量受到恶心、 呕吐、便秘、搔痒和尿潴留的限制，通常导致患者选择与其遭受这些 痛苦的副作用还不如接受低于最佳的疼痛控制。阿片样物质非常容易 成瘾并且在许多地域是计划用药。因此需要新的镇痛药，其与阿片样 物质相比在同等镇痛剂量下具有改善的副作用特性。目前对于神经性 疼痛的治疗，包括阿片样物质、三环类抗抑郁药、5-羟色胺和去甲肾 上腺素摄取抑制剂以及抗惊厥药在内，具有有限的效力。因此需要新 的镇痛药，其具有改善的用于治疗神经性疼痛的效力。
正在积累的证据表明大麻素(cannabinoid)激动剂作为镇痛药和 抗炎药具有潜力。牵涉了两类大麻素受体，大麻素CB1受体和大麻素 CB2受体，大麻素CB1受体主要位于中枢神经系统内，但是其还由周 围神经元表达并且在其它的周围组织内以更低程度表达，大麻素CB2 受体主要位于免疫细胞内(Howlett，A.C.等人：International Union of Pharmacology.XXVII.Classification of Cannabinoid Receptors.Pharmacol.Rev.54，161-202，2002)。尽管所述CB2 受体已牵涉调节大麻素类的免疫应答和抗炎应答，但是大麻素受体激 动剂，特别是在CB1受体处起作用的那些已被提议可用于治疗疼痛(参 见Iversen，L.and Chapman，V.Current Opinion in Pharmacology， 2，50-55，2002以及其中的参考文献)。
WIN 55，212-2，(R)-(+)-[2，3-二氢-5-甲基-[(吗啉基)-甲基]吡 咯并[1，2，3-de]-1，4-苯并噁嗪基]-(1-萘基)甲酮的甲磺酸盐作为镇 痛药被公开于美国专利4,939,138(Sterling Drug Inc.)中。该化合 物是氨基烷基吲哚类化合物的原型(Eissenstat，M.A.等人，J.Med. Chem.38，3094-3105，1995)，其是有效力的大麻素CB1受体激动剂， 在急性疼痛、持久性炎性疼痛和神经性疼痛的动物模型中可产生与吗 啡具有相当效力的抗痛作用。
具有类大麻素性质的氨基烷基吲哚类的关键结构特征(Adam，J. 和Cowley，P.Expert Opin.Ther.Patents，12，1475-1489，2002) 是在吲哚部分的1-位上的氨基烷基取代基，和在吲哚环的3-位上的另 一个大体积的取代基，诸如示例为在美国专利4,939,138(Sterling Drug Inc.)和在更近的WO02060447(University of Connecticut)所 公开的氨基烷基吲哚类中的芳酰基或在WO0158869(Bristol-Myers Squibb)所公开的化合物中的被取代的酰氨基。在3-位具有被取代的 噁二唑-5-基环的1-(氨基烷基)吲哚衍生物作为大麻素受体调节剂被 公开于WO0236590(Amrad Operations PTY Ltd.)中并可用作镇痛药。
在WO2004000832、WO2005058327和WO2005089754(Akzo Nobel N.V.)中，公开了作为调节大麻素受体的镇痛药的1-[(吲哚-3-基)羰 基]哌嗪衍生物和1-(吲哚-3-基)杂环衍生物。
仍然需要具有改善的性质诸如增加的水溶性的大麻素激动剂用作 治疗剂。
为此目的，本发明提供了具有通式I结构的吲哚衍生物：
其中
A表示5元芳族杂环，其中X1、X2和X3独立地选自N、O、S和CH；
Y表示CH2、O、S或SO2；
R1是H、(C1-4)烷基、(C1-4)烷基氧基、CN或卤素；
R2、R2′、R3、R3′、R4、R4′、R5和R5′独立地是氢、(C1-4)烷基(任选 被OH取代)或CO-OR8；或者
取成对取代基R3和R3′或R5和R5′中的一对合起来表示酮基，并且 其它全部是氢或(C1-4)烷基；或者
R2和R5合起来表示亚甲基或亚乙基桥，和R2′、R3、R3′、R4、R4′ 和R5′是氢；
n是1或2；
R6是H、(C1-4)烷基(任选被OH、(C1-4)烷基氧基、CO-NR9R10、CO-OR11或1，2，4-噁二唑-3-基取代)、SO2NR12R13或COOR14；
R7是H或卤素；
R8是(C1-4)烷基；
R9和R10独立地是氢、(C1-4)烷基或(C3-7)环烷基，所述烷基任选被 OH或(C1-4)烷基氧基取代；
R11是H或(C1-4)烷基；
R12和R13独立地是H或(C1-4)烷基；
R14是(C1-6)烷基；
或其药学可接受的盐，作为大麻素CB1受体的激动剂，其可用于 治疗疼痛诸如例如手术期间的疼痛、慢性疼痛、神经性疼痛、癌性疼 痛和与多发性硬化有关的疼痛和痉挛。
本发明的吲哚衍生物由于存在(高)哌嗪部分而与 WO2005089754(Akzo Nobel N.V.)所公开的(吲哚-3-基)-杂环衍生物 是不同的。
在式I的定义中使用的5元芳族杂环A表示包含1-3个选自N、O 和S的杂原子的5元芳族杂环。这意味着用于限定杂环A的X1、X2和 X3中的至少一个不能是CH。代表性的杂环A是得自噻吩、呋喃、噻唑、 噻二唑、噁唑、噁二唑以及它们的包括异噻唑、异噻二唑、异噁唑和 异噁二唑在内的异构体的那些。优选的杂环A是1，2，4-噁二唑(X1是N、 X2是O、X3是N)和1，2，4-噻二唑(X1是N、X2是S、X3是N)。
在式I的定义中使用的术语(C1-4)烷基是指含1-4个碳原子的支链 或非支链的烷基，诸如丁基、异丁基、叔丁基、丙基、异丙基、乙基 和甲基。
术语(C1-6)烷基同样地是指含1-6个碳原子的支链或非支链的烷 基，诸如己基、戊基、丁基、异丁基、叔丁基、丙基、异丙基、乙基 和甲基。
术语(C3-7)环烷基是指含3-7个碳原子的环烷基，诸如环庚基、环 己基、环戊基、环丁基和环丙基。
在术语(C1-4)烷基氧基中，(C1-4)烷基具有与上述定义相同的含义。
术语卤素是指F、Cl、Br或I。
术语n可表示整数1或2，从而分别限定了式I的哌嗪和高哌嗪 衍生物。本发明的优选的吲哚衍生物是其中n是1的那些。
其中R2和R5合起来表示亚甲基或亚乙基桥的式I的吲哚衍生物 包括桥接的哌嗪或高哌嗪基团，诸如例如2，5-二氮杂双环并[2，2，2] 辛烷-2-基或2，5-二氮杂双环并[2.2.1]庚烷-2-基。优选其中Y是O 或SO2的式I的吲哚衍生物。进一步优选其中R6是被CO-NR9R10或 1，2，4-噁二唑-3-基取代的(C1-4)烷基的化合物。
特别优选的本发明的吲哚衍生物是：
-3-({5-[4-(氨甲酰基甲基)-哌嗪-1-基]甲基}-[1，2，4]-噻二唑 -3-基)-7-氯-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚；
-7-氯-3-({5-[4-(乙基氨甲酰基甲基)哌嗪-1-基]甲 基}-[1，2，4]-噻二唑-3-基)-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚；
-7-氯-3-({5-[4-氨磺酰基哌嗪-1-基]甲基}-[1，2，4]-噻二唑 -3-基)-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚；
-7-乙基-3-({5-[4-(N-异丙基氨甲酰基甲基)哌嗪-1-基]甲 基}-[1，2，4]-噻二唑-3-基)-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚；
-7-乙基-3-({5-[4-(甲氧基羰基甲基)哌嗪-1-基]甲 基}-[1，2，4]-噻二唑-3-基)-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚；
-3-({5-[4-(氨甲酰基甲基)哌嗪-1-基]甲基}-[1，2，4]-噻二唑 -3-基)-7-甲氧基-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚；
-3-({5-[4-(氨甲酰基甲基)哌嗪-1-基]甲基}-[1，2，4]-噻二唑 -3-基)-7-氯-1-(1，1-二氧代-六氢噻喃-4-基)甲基-1H-吲哚；
-3-({5-[4-(氨甲酰基甲基)哌嗪-1-基]甲基}-[1，2，4]-噁二唑 -3-基)-7-氯-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚；
-7-氯-3-({5-[4-([1，2，4]-噁二唑-3-基甲基)哌嗪-1-基]甲 基}-[1，2，4]-噁二唑-3-基)-1-(1，1-二氧代-六氢噻喃-4-基)甲基 -1H-吲哚；
-3-[5-[4-(叔丁氧基羰基)-顺式-2，6-二甲基哌嗪-1-基甲 基]-[1，2，4]-噁二唑-3-基]-7-氯-1-[(四氢吡喃-4-基)甲基]-1H-吲 哚；
-3-{5-[4-(氨甲酰基甲基)高哌嗪-1-基甲基]-[1，2，4]-噁二唑 -3-基}-7-氯-1-[(四氢吡喃-4-基)甲基]-1H-吲哚；
-(S)-7-氯-3-[5-[3-羟基甲基-4-(甲基氨甲酰基甲基)哌嗪-1-基 甲基]-[1，2，4]-噁二唑-3-基]-1-[(四氢吡喃-4-基)甲基]-1H-吲哚； 和
-3-({4-[4-(氨甲酰基甲基)哌嗪-1-基]甲基}-[1，3]-噻唑-2- 基)-7-氯-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚，或其药学可接受的盐。
一般而言，本发明的吲哚衍生物可通过有机化学领域已知的方法 制备。
式I的吲哚衍生物例如可从其中L是离去基团诸如卤素或烷基磺 酸酯基的式II的化合物通过使用下式所示的任选被取代的哌嗪或高 哌嗪亲核取代离去基团来制备：
其中n、R2、R2′、R3、R3′、R4、R4′、R5、R5′和R6具有与上述定 义相同的含义。
其中L是烷基磺酸酯基的式II的化合物可以从其中L是羟基的式 II的化合物通过与烷基磺酰基卤化物在碱诸如三乙胺存在的条件下 反应来制备。
式I的吲哚衍生物可从式III的化合物通过使用任选被取代的哌 嗪或高哌嗪在还原剂诸如三乙酰氧基硼氢化钠存在的条件下进行还原 氨化来制备。
本领域公知的是，其中L是羟基的式II的化合物可通过使用适当 的氧化剂和还原剂进行氧化和还原而与式III的化合物进行互变，如 Burke D.S.，Danheiser，R.L.，Handbook of Reagents for Organic Synthesis：Oxidising and Reducing agents(Wiley：New York，1999) 所述。同样地，其中L是羟基的式II的化合物可从其中R15是氢或(C1-4) 烷基的式IV的化合物通过使用适当的还原剂进行还原来制备。
式I、式II、式III或式IV的化合物可从包括式V到式XII在内 的化合物通过使用本领域公知的构成杂环的方法来制备。这些方法描 述于一般参考文献Katritzky，A.R.：Comprehensive heterocyclic chemistry(第1版，Pergamon Press，1984，特别参见第4卷，第3 部分，含一个氧、硫或氮原子的5元环，以及第6卷，第4B部分，含 两个或更多个氧、硫或氮原子的5元环)。
包括其中R1、R7、L和Y具有与上述定义相同的含义和R15是H或 (C1-4)烷基的式V到式XII在内的化合物，可通过本领域技术人员已知 的文献方法或文献方法的变体来制备。例如，式VI的化合物可从式V 的化合物或其活化衍生物通过与氨在适当的溶剂中反应来制备。
式VII的化合物可从式VI的化合物通过使用硫化试剂诸如五硫化 二磷或Lawesson′s试剂来制备。作为选择，式VII的化合物可从式 VIII的化合物通过与硫代乙酰胺在溶剂诸如二甲基甲酰胺中反应来 制备。
式VIII的化合物可从式VI的化合物通过例如使用三氟醋酐在碱 诸如三乙胺存在的条件下进行脱水反应来制备。式X的化合物可从式 IX的化合物通过与羟胺在适当的溶剂中反应来制备。
其中L是NH2的式XI的化合物可从式V的化合物或其活化衍生物 通过与氰化物阴离子反应形成氧代乙腈(oxoacetonitrile)，然后通过 使用还原剂诸如氢气在催化剂诸如炭载钯存在的条件下将腈还原为伯 胺来制备。
式XII的化合物可从式VIII的化合物通过与羟胺在适当的溶剂中 反应来制备。
式V的化合物和式XI的化合物可通过式XIII的化合物的酰基化 来制备。例如，其中R15是氢的式V的化合物可通过使用三氟醋酐在溶 剂诸如二甲基甲酰胺中进行式XIII的化合物的酰基化，然后使用氢氧 化钠水溶液在高温下进行水解来制备。其中L是氯的式XI的化合物可 使用氯乙酰氯在碱诸如吡啶存在的条件下进行式XIII的化合物的酰 基化来制备。
式IX的化合物可从式XIII的化合物通过甲酰化来制备，例如使 用Vilsmeier反应(关于综述请参见Jutz，C.Adv.Org.Chem.9，pt. 1，225-342，1976)。
作为选择，式V的化合物可从式XIV的化合物使用Wijngaarden 等人(J.Med.Chem.36，3693-3699，1993)或Hwu等人(J.Org.Chem. 59，1577-1582，1994)所述方法或这些方法的变体来制备。
式XIII的化合物可通过本领域技术人员已知的文献方法或文献 方法的变体来制备。例如，式XIII的化合物可通过式XV的化合物用 碱诸如氢化钠处理，然后与其中Y具有与上述定义相同的含义且L是 离去基团诸如卤素或烷基磺酸酯基的式XVI的烷化剂进行烷基化反应 来制备。式XV的化合物可购自商业来源，通过本领域技术人员已知的 文献方法或文献方法的变体来制备。
作为选择，式XIII的化合物可从式XIV的化合物使用Fischer 吲哚合成法或其变体来制备(Chem.Rev.69，227-250，1969)。
式XIV的化合物可通过本领域技术人员已知的文献方法或文献方 法的变体来制备。
式I、式II、式III或式IV的化合物可选择性地从式XVII的化 合物使用过渡金属催化的偶合反应来制备，如一般参考文献Hegedus， L.S.，Transition Metals in the Synthesis of Complex Organic Molecules(第2版，University Science：Sausalito 1999)中所述。
例如，式III的化合物可通过其中Y1是卤素的式XVII的化合物 与其中Y2是硼酸或硼酸酯的式XVIII的化合物进行Suzuki反应(Chem. Rev.95，2457-2483，1995)或其变体来制备。
式XVII的化合物和式XVIII的化合物可购自商业来源，通过本领 域技术人员已知的文献方法或文献方法的变体来制备。例如，其中Y1是溴的式XVII的化合物可从式XIII的化合物通过使用溴在溶剂诸如 二甲基甲酰胺中进行溴化来制备。
本领域技术人员可理解的是，吲哚氮可在进行上述转化期间使用 保护基诸如芳基磺酰基暂时保护起来，并且在后面的合成阶段被脱保 护和烷基化。另外可理解的是，这些保护基可用于调节中间体的稳定 性和吲哚环对亲电子试剂的反应性。适当的保护基描述于Kocienski， P.J.：Protecting Groups，Thieme，Stuttgart；New York，1994 中。
本领域技术人员同样可理解的是，多种式I的吲哚衍生物可以通 过与取代基R2-R6中的一些取代基相对应的官能团进行适当的转化反 应而获得。
例如，其中R6是(C1-4)烷基(任选被OH、(C1-4)烷基氧基、CO-NR9R10、 CO-OR11或1，2，4-噁二唑-3-基取代)的式I的化合物可以通过其中R6是氢的式I的化合物与(C1-4)烷基卤化物或官能化的(C1-4)烷基卤化物 在碱诸如碳酸钾存在的条件下进行反应来制备。
其中R6是SO2NR12R13的式I的化合物可通过其中R6是氢的式I的 化合物与磺酰胺或官能化氨磺酰氯在碱诸如吡啶存在的条件下进行反 应来制备。其中R2、R2′、R3、R3′、R4、R4′、R5或R5′是CH2OH的式I 的化合物可从其中R2、R2′、R3、R3′、R4、R4′、R5或R5′是CO-OR8的式 I的化合物通过使用适当的还原剂进行还原来制备。
式I的吲哚衍生物及其盐可包含至少一个手性中心，并因此作为 立体异构体(包括对映体和非对映体在内)存在。本发明在其范围内 包括上述的立体异构体，以及基本上是游离的式I化合物的单独的R 和S对映体中的每一个及其盐(即另一对映体低于5％、优选低于2％、 特别地低于1％)，以及以任何比例存在的这些对映体的混合物(包括 包含基本上等量的两种对映体的外消旋混合物)。
用于不对称合成或手性分离从而获得纯的立体异构体的方法是本 领域公知的，例如，使用手性诱导或从市售的手性底物开始合成，或 者例如使用在手性介质上的色谱法或采用手性抗衡离子进行结晶进行 立体异构体的分离。
药学可接受的盐可通过使用无机酸或有机酸处理式I化合物的游 离碱获得，所述无机酸诸如盐酸，氢溴酸，磷酸和硫酸，所述有机酸 诸如例如抗坏血酸，柠檬酸，酒石酸，乳酸，马来酸，丙二酸，富马 酸，羟基乙酸，琥珀酸，丙酸，乙酸和甲磺酸。
本发明的化合物可以非溶剂化的形式以及与药学可接受的溶剂诸 如水、乙醇等形成的溶剂化的形式存在。通常，为了本发明的目的， 溶剂化形式被认为等价于非溶剂化形式。
本发明另外提供了包括与药学可接受的助剂以及任选的其它治疗 剂混合的通式I的吲哚衍生物或其药学可接受的盐的药物组合物。术 语“可接受的”是指与组合物中的其它组分相容并且对其接受者无害。 组合物包括例如适于经口、舌下、皮下、静脉内、硬膜外、鞘内、肌 内、透皮、经肺、局部或直肠给药等途径的那些组合物，所有都是以 单位剂型给药。优选的给药途径是经口途径。
对于经口给药，活性成分可作为非连续单位诸如片剂、胶囊、粉 剂、粒剂、溶液剂、悬浮剂等形式存在。
对于非肠道给药，本发明的药物组合物可存在于单位剂量或多剂 量容器中，例如以预定量存在的注射液，例如存在于密封的小瓶和安 瓿中，并且还可被储存在在使用前仅要求加入无菌液体载体如水的冷 冻干燥(冻干)条件下。与这种药学可接受的助剂混合，例如，如标准 参考文献Gennaro，A.R.等人，Remington：The Science and Practice of Pharmacy(20th Edition，Lippincott Williams & Wilkins，2000， 特别参见第5部分：制药)所述，活性剂可被压制成固体剂量单位，诸 如丸剂、片剂，或被加工成胶囊、栓剂或贴剂。借助于药学可接受的 液体，活性剂可作为液体组合物形式，诸如作为注射剂，为溶液剂、 悬浮剂、乳剂形式，或作为喷雾剂如鼻喷雾剂被施用。
为了制备固体剂量单位，考虑使用常规的添加剂诸如填料、着色 剂、聚合物粘合剂等。通常，可使用不干扰活性化合物的功能的任何 药学可接受的添加剂。可与本发明的活性剂一起作为固体组合物被给 予的，并以适当的量被使用的适当的载体包括乳糖、淀粉、纤维素衍 生物等或其混合物。对于非肠道给药，可使用含水悬浮液、等渗盐溶 液和无菌注射液，其包含药学可接受的分散剂和/或润湿剂，诸如丙二 醇或丁二醇。
本发明另外包括如上所述的药物组合物与适合所述组合物的包装 材料相结合，所述包装材料包括该组合物用于上述应用的说明书。
如采用CHO细胞进行的人CB1受体试验所测定的，发现本发明的 吲哚衍生物是CB1受体的激动剂。用于测定大麻素受体调节剂的受体 结合以及体外生物活性的方法是本领域公知的。通常，将表达的受体 与供试化合物接触并测量结合或功能应答的刺激或抑制。为了测量功 能应答，在适当的宿主细胞中表达编码CB1受体基因(优选人受体)的 DNA分离物。这种细胞可以是中国仓鼠卵巢细胞，但是其它细胞也是 合适的。细胞优选是哺乳动物来源的。
用于构建表达重组CB1的细胞系的方法是本领域公知的 (Sambrook等人，Molecular Cloning：a Laboratory Manual，Cold Spring Harbor Laboratory Press，Cold Spring Harbor，最新版)。 受体的表达通过编码所需蛋白质的DNA的表达来获得。用于连接附加 序列和构建适当表达系统的技术到目前为止都是本领域公知的。编码 所需蛋白质的DNA的一部分或全部可采用标准的固相技术以合成方式 构建，优选引入便于连接的限制性位点。可向DNA编码序列提供用于 被引入的编码序列的转录和翻译的适当的控制元件。众所周知，表达 系统目前是可获得的，其与包括原核生物宿主诸如细菌和真核生物宿 主诸如酵母、植物细胞、昆虫细胞、哺乳动物细胞、鸟类细胞等在内 的多种宿主是相容的。
然后将表达所述受体的细胞与供试化合物接触，以观察结合、或 功能应答的刺激或抑制。
作为选择，可使用包含所表达的CB1(或CB2)受体的细胞膜分离物 来测量化合物的结合。
为了测量结合，可使用放射性标记化合物或荧光标记化合物。最 广泛被使用的放射性标记大麻素探针是[3H]CP55940，其与CB1和CB2 结合部位具有大约相等的亲合性。
通过测定第二信使应答，诸如例如测量在cAMP或MAP激酶通路中 由受体介导的改变，可测量功能性CB1受体激动剂的活性。因此，这 种方法包括CB1受体在宿主细胞的细胞表面上的表达和将所述细胞暴 露于供试化合物下。然后测量第二信使应答。第二信使的水平会降低 或升高，取决于供试化合物在与受体结合时的作用。
除了直接测量例如在暴露的细胞中的cAMP水平之外，还可使用除 了用编码受体的DNA进行转染之外还用编码报告基因的第二DNA(其 表达与受体活化相关)进行转染的细胞。通常，报告基因表达可受到 任何的对第二信使的变化水平作出反应的应答元件的控制。适当的报 告基因例如是LacZ、碱性磷酸酶、荧光虫荧光素酶和绿色荧光蛋白。 这种转活(transactivation)试验的原则是本领域公知的并且例如描 述于Stratowa，C.A.等人，Curr.Opin.Biotechnol.6，574(1995) 中。为了选择作用于CB1受体的活性激动剂化合物，EC50值必需＜10-5 M，优选＜10-7M。
所述化合物可作为镇痛药用于治疗诸如例如手术期间的疼痛、慢 性疼痛、神经性疼痛、癌性疼痛和与多发性硬化有关的疼痛和痉挛。
本发明的大麻素激动剂还可能用于治疗其它的病症，包括多发性 硬化、痉挛、炎症、青光眼、恶心和呕吐、食欲不振、睡眠紊乱、呼 吸障碍、变态反应、癫痫症、偏头痛、心血管疾病、神经变性疾病、 焦虑症、创伤性脑损伤和中风。
所述化合物还可与其它药物例如镇痛药，例如阿片样物质和包括 COX-2选择性抑制剂在内的非甾体抗炎药(NSAID)联合使用。
本发明的化合物可以足够的量被给予至人达足够的时间以缓解症 状。作为示例，人用剂量水平可为0.001-50毫克/千克体重，优选剂 量为0.01-20毫克/千克体重。
通过以下实施例阐述本发明。
一般方法
-微波反应采用Emrys OptimizerTM(Personal Chemistry)进行， 除非另有说明。
-快速柱色谱在硅胶上进行。
-半制备性高压液相色谱法(半制备性HPLC)采用下述方法进行：
方法(i)：Waters Xterra(RP18，5μm)30mmx100mm；10-100％ 乙腈-水，在25分钟内梯度；25ml/min；0.1％三氟乙酸缓冲液；在 254nm进行UV检测。
方法(ii)：Waters Xterra(RP18，5μm)30mmx100mm；10-100％ 乙腈-水，在25分钟内梯度；25ml/min；5mM碳酸氢铵缓冲液，用 氨水调节至pH 10；在254nm进行UV检测。
1H NMR偶合常数用Hz表示。
中间体的制备。
I：甲苯-4-磺酸四氢吡喃-4-基甲酯中间体
将对甲苯磺酰氯(29.8g，157mmol)分份加入到四氢-2H-吡喃-4- 基-甲醇(20.0g，172mmol)和吡啶(25.2ml，313mmol)在二氯甲烷 (200ml)中的混合物中。将混合物在室温下搅拌17小时，然后用盐酸 水溶液(2M；100ml)淬灭。分层，水层用二氯甲烷萃取两次(2×100 ml)。有机层经合并和真空浓缩。从二氯甲烷∶正庚烷(5∶1)重结晶，得 到甲苯-4-磺酸四氢-吡喃-4-基甲酯。母液另外进行硅胶柱色谱纯化， 采用含50％二氯甲烷的正庚烷洗脱，获得更多量的甲苯-4-磺酸四氢吡 喃-4-基甲酯(共收获41.6g，154mmol)。
II：甲苯-4-磺酸1，1-二氧代-六氢-1-噻喃-4-基甲酯中间体
步骤A：四氢-噻喃-4-甲腈
将四氢-噻喃-4-酮(75g，646mmol)和甲苯磺酰基甲基异氰化物 (138.6g，710mmol)在二甲氧基乙烷(2.5L)中的混合物冷却到0℃， 并滴加叔丁醇钾(145g，1.29mol)在叔丁醇(1.3L)中的溶液。然后 使混合物回温到室温并搅拌3小时，然后用乙醚(3L)稀释，用饱和碳 酸氢钠(2×1.5L)洗涤并用硫酸镁干燥，真空除去溶剂，得到四氢- 噻喃-4-甲腈，为浅褐色油状物(88.3g，646mmol)。
步骤B：四氢-噻喃-4-甲酸
将四氢-噻喃-4-甲腈(646mmol)在乙醇(600ml)中的溶液一次性 加入到快速搅拌的氢氧化钠(258.4g，6.46mol)在水(1.1L)中的混 合物中。然后将混合物加热到90℃达2小时，冷却到0℃，并用浓盐 酸溶液将pH调整到2。然后真空除去乙醇，并将悬浮液萃取到二氯甲 烷(3×1L)中，合并的有机萃取物用硫酸镁干燥，并真空蒸发，得到 四氢-噻喃-4-甲酸，为褐色固体(96g，646mmol)。
步骤C：(四氢-噻喃-4-基)-甲醇
在15分钟内将硼烷二甲硫醚复合物(73.5ml，775mmol)在无水 四氢呋喃(1.5L)中的溶液经滴加四氢-噻喃-4-甲酸(646mmol)在无水 四氢呋喃(300ml)中的溶液的处理。然后将混合物加热到70℃达2小 时，冷却到室温并通过滴加水进行淬灭直到停止冒泡。然后加入另一 份水(500ml)，并真空除去四氢呋喃。然后将残余物用稀盐酸溶液酸 化，并萃取到二氯甲烷(3×500ml)中。合并的有机层然后用硫酸钠干 燥，真空除去溶剂，得到(四氢-噻喃-4-基)-甲醇，为褐色油状物(90.2 g，646mmol)。
步骤D：(1，1-二氧代-六氢-1-噻喃-4-基)-甲醇
高碘酸钠(304g，1.42mol)在水(3L)中的溶液用(四氢-噻喃-4- 基)-甲醇在甲醇(1.7L)中的溶液处理并将混合物加热到60℃达3小 时。然后加入高碘酸钠(10g)，并继续加热另外1小时，然后真空除 去所有的挥发物。所得的粒状残余物然后连续与乙醚(2×500ml)、二 氯甲烷(2×500ml)和含50％(v/v)二氯甲烷的甲醇(2×500ml)振摇。 然后将剩余的残余物用二氯甲烷连续萃取18小时，并将溶剂与先前的 溶剂萃取物合并，用硫酸钠干燥并真空蒸发，得到(1，1-二氧代-六氢 -1-噻喃-4-基)-甲醇，为橙色油状物(106.2g，646mmol)，其静置 时结晶。
步骤E：甲苯-4-磺酸1，1-二氧代-六氢-1-噻喃-4-基甲酯
在15分钟内通过分份加入对甲苯磺酰氯(244g，1.28mol)对 (1，1-二氧代-六氢-1-噻喃-4-基)-甲醇(105g，640mmol)、吡啶(155 ml，1.92mol)和4-二甲基氨基吡啶(2.5g，20.5mmol)在氯仿(1.5L) 中的溶液进行处理。混合物搅拌72小时，用水(2×1L)、饱和氯化钠 溶液(1L)洗涤，并用硫酸钠干燥。真空除去有机溶剂，并将油状残余 物与含60％(v/v)正庚烷的乙酸乙酯振摇，过滤时获得褐色固体。将其 溶于最小量的二氯甲烷中，通过硅藻土垫，用乙酸乙酯(4L)洗脱。然 后真空除去溶剂直到溶液体积为750ml，并加入正庚烷(1.5L)。所 得悬浮液然后经过滤以得到标题化合物，为沙状固体(130g，408 mmol)。1H NMR(400MHz，CDCl3)：1.80-2.00(3H，m)，2.07-2.15(2H， m)，2.46(3H，s)，2.90-3.09(4H，m)，3.90(2H，d，J 6.3)，7.36(2H， d，J 8.1)和7.78(2H，d，J 8.2)。
实施例1
3-({5-[4-(氨甲酰基甲基)哌嗪-1-基]甲基}-[1，2，4]-噻二唑 -3-基)-7-氯-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚，二盐酸盐
步骤A：7-氯-1H-吲哚-3-甲酸
将在氮气气氛下的7-氯吲哚(7.1g，47.0mmol)在二甲基甲酰胺 (60ml)中的溶液冷却到5℃并在10分钟内加入三氟醋酐(7.6ml， 54.0mmol)，保持温度低于10℃。将混合物在5-10℃搅拌2小时，然 后将其倾入到水(600ml)中。所得悬浮液搅拌15分钟，然后滤出7- 氯-3-[(三氟甲基)羰基]-1H-吲哚沉淀物，用水洗涤至中性。将潮湿固 体悬浮在4M的氢氧化钠水溶液(500ml)中并在搅拌下加热回流1小 时。将混合物冷却并用乙醚洗涤(2×100ml)。然后使用5M盐酸将水 相酸化到pH1，所得细沉淀物被滤出，用水洗涤至中性并干燥，得到 7-氯-1H-吲哚-3-甲酸，为粉色固体(7.5g，38.0mmol)。
步骤B：7-氯-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚-3-甲酸
在10分钟内向在10℃和氮气下的7-氯-1H-吲哚-3-甲酸(7.5g， 38.0mmol)在二甲基甲酰胺(100ml)中的溶液中分份加入氢化钠(60％ 分散体，在矿物油中，3.1g，76.0mmol)，保持温度低于15℃。除 去冷却浴并将悬浮液搅拌90分钟。加入甲苯-4-磺酸四氢吡喃-4-基甲 酯(14.6g，53.0mmol)。将混合物在50℃下搅拌加热6小时。蒸发 除去二甲基甲酰胺，将残余物溶于水(500ml)。乳液用二氯甲烷(2× 100ml)洗涤。使用5M盐酸将水相酸化至pH 1，并滤出沉淀物，用 水洗涤至中性并干燥，得到7-氯-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚 -3-甲酸(15.0g，51.0mmol)，为白色固体。
步骤C：7-氯-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚-3-甲酰胺
在冰水冷却条件下将草酰氯(9.0ml，102mmol)滴加到7-氯 -1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚-3-甲酸(15.0g，51.0mmol)和二 氯甲烷(300ml)的混合物中，所得混合物在室温下搅拌18小时。蒸发 除去二氯甲烷和过量的草酰氯，所得残余物与二氯甲烷(300ml)混合。 加入氨水溶液(200ml)，然后加入碳酸钾(13.5g，102mmol)。所得 混合物搅拌1小时。沉淀物被滤出并干燥，得到7-氯-1-(四氢吡喃-4- 基)甲基-1H-吲哚-3-甲酰胺(8.0g，27.0mmol)，为白色固体。剩余 的滤液用水(2×100ml)洗涤，用硫酸钠干燥并真空浓缩，得到7-氯 -1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚-3-甲酰胺(5.0g，17.0mmol)， 为褐色固体。
步骤D：7-氯-3-([1，3，4]-噁噻唑(oxathiazol)-2-酮-5- 基)-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚
向7-氯-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚-3-甲酰胺(8.0g， 27.0mmol)在四氢呋喃(100ml)中的悬浮液中加入氯羰基亚磺酰氯 (4.7ml，55.0mmol)，反应混合物加热回流3小时并冷却。沉淀物被 滤出并干燥，得到7-氯-3-([1，3，4]-噁噻唑-2-酮-5-基)-1-(四氢吡 喃-4-基)甲基-1H-吲哚(5.3g，15.0mmol)，为白色固体。滤液经真 空浓缩，所得固体用含5％乙酸乙酯的正庚烷洗涤，然后干燥，得到另 一批7-氯-3-([1，3，4]-噁噻唑-2-酮-5-基)-1-(四氢吡喃-4-基)甲基 -1H-吲哚(2.6g，7.0mmol)，为粉色固体。
步骤E：7-氯-3-({5-乙氧基羰基}-[1，2，4]噻二唑-3-基))-1-(四 氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚
向7-氯-3-([1，3，4]-噁噻唑-2-酮-5-基)-1-(四氢吡喃-4-基)甲 基-1H-吲哚(0.79g，2.0mmol)在间二甲苯(10ml)中的悬浮液中加 入氰基甲酸乙酯(2.2ml，23mmol)，使用Emrys Optimizer EXPTM使 反应经历在180℃下的微波辐射达15分钟。反应在同一规模下重复10 次，合并，真空除去溶剂，得到7-氯-3-({5-乙氧基羰基}-([1，2，4] 噻二唑-3-基))-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚(7.1g，17mmol)， 为白色固体。
步骤F：7-氯-3-({5-羟基甲基}-[1，2，4]噻二唑-3-基))-1-(四氢 吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚
向7-氯-3-({5-乙氧基羰基}-([1，2，4]噻二唑-3-基))-1-(四氢 吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚(7.1g，17.0mmol)在四氢呋喃(80ml)和 甲醇(80ml)中的冷却(冰/甲醇浴)的溶液中分份加入硼氢化钠(1.9g， 50.0mmol)。将反应搅拌18小时，然后用1M盐酸(20ml)淬灭。真 空除去甲醇和四氢呋喃，加入二氯甲烷(200ml)和2M盐酸(50ml)。 分离有机物并用盐水(50ml)洗涤，用硫酸钠干燥，真空除去溶剂。所 得残余物使用含20％-50％(v/v)乙酸乙酯的正庚烷进行快速色谱纯化， 得到7-氯-3-({5-羟基甲基}-([1，2，4]噻二唑-3-基))-1-(四氢吡喃 -4-基)甲基-1H-吲哚(3.6g，10.0mmol)，为浅粉色固体。
步骤G：甲磺酸3-(1-{四氢吡喃-4-基}甲基-7-氯-1H-吲哚-3- 基)-[1，2，4]噻二唑-5-基甲酯
向7-氯-3-({5-羟基甲基}-([1，2，4]噻二唑-3-基))-1-(四氢吡 喃-4-基)甲基-1H-吲哚(3.6g，10.0mmol)在二氯甲烷(150ml)中的 冷却(冰/甲醇浴)的溶液中顺序地加入二氯甲烷(0.97ml，12.0mmol) 和三乙胺(2.6ml，20.0mmol)。将反应搅拌1小时，然后将其倾入到 分液漏斗中。有机物用5％的碳酸钠水(2×100ml)、盐水(1×100ml) 洗涤，用硫酸钠干燥，真空除去溶剂，得到甲磺酸3-(1-{四氢吡喃-4- 基}甲基-7-氯-1H-吲哚-3-基)-[1，2，4]噻二唑-5-基甲酯(4.6g， 10.0mmol)，其不经另外纯化即可使用。
步骤H：3-[{5-[4-(氨甲酰基甲基)哌嗪-1-基]甲基}[1，2，4]-噻 二唑-3-基]-7-氯-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚，二盐酸盐
向甲磺酸3-(1-{四氢吡喃-4-基}甲基-7-氯-1H-吲哚-3- 基)-[1，2，4]噻二唑-5-基甲酯(388mg，0.88mmol)在1-甲基-2-吡咯 烷酮(5ml)中的溶液中加入2-哌嗪-1-基乙酰胺(152mg，1.06mmol) 和碳酸钾(174mg，1.26mmol)。将反应在室温下搅拌18小时。将反 应用二氯甲烷(8ml)稀释，过滤通过10g StrataTM SCX giga管。该 管用甲醇洗涤，然后用含2M氨的甲醇洗脱。蒸发甲醇-氨溶液，残余 物通过HPLC[方法(i)]纯化。将产物溶于甲醇中并过滤通过5g StrataTM SCX giga管，用含2M氨的甲醇洗脱，得到标题化合物，为 游离碱。将该游离碱溶于二氯甲烷中并加入氯化氢(2M的乙醚溶液； 1.0ml，2.0mmol)。混合物真空浓缩，得到标题化合物(118mg，0.21 mmol)，为二盐酸盐。EsIMS：m/z 491.1，489.5[M+H]+。
实施例2
7-氯-3-({5-[4-(乙氧基羰基)甲基哌嗪-1-基]甲基}-[1，2，4]- 噻二唑-3-基)-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚，三氟乙酸盐
向甲磺酸3-(1-{四氢吡喃-4-基}甲基-7-氯-1H-吲哚-3- 基)-[1，2，4]噻二唑-5-基甲酯(1.5g，3.4mmol)在1-甲基-2-吡咯烷 酮(10ml)中的溶液中加入N，N-二异丙基乙胺(1.5ml，8.5mmol)和 1-(乙氧基羰基甲基)-哌嗪(879mg，5.1mmol)。反应在室温下搅拌 18小时。然后将混合物在水和乙醚之间分配。分离有机层，干燥(MgSO4) 并蒸发溶剂，得到7-氯-3-[{5-[4-(乙氧基羰基)-甲基哌嗪-1-基]甲 基}-[1，2，4]-噻二唑-3-基]-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚，为游 离碱(1.28g，2.5mmol)。取等份部分进行HPLC[方法(i)]纯化，得 到标题化合物，为三氟乙酸盐。EsIMS：m/z 518.5[M+H]+。
实施例3
7-氯-3-({5-[4-(乙基氨甲酰基)甲基哌嗪-1-基]甲基}[1，2，4]- 噻二唑-3-基)-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚
将7-氯-3-[{5-[4-(乙氧基羰基)甲基哌嗪-1-基]甲 基}-[1，2，4]-噻二唑-3-基]-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚(1.26 g，2.4mmol；根据实施例2的方法制备的游离碱)悬浮在4M的氢氧化 钠水溶液(80ml)中并回流1小时。反应混合物用乙醚(80ml)洗涤， 然后酸化。所得沉淀物被滤出和干燥，然后与甲醇研磨并过滤，得到 3-[{5-[4-羧基甲基哌嗪-1-基]甲基}-[1，2，4]-噻二唑-3-基]-7-氯 -1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚，为白色固体(1.20g，2.4mmol)。 向搅拌的3-[{5-[4-羧基甲基哌嗪-1-基]甲基}-[1，2，4]-噻二唑-3- 基]-7-氯-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚(97mg，0.20mmol)在二 氯甲烷(10ml)中的溶液中加入N，N-二异丙基乙胺(240μl，1.39 mmol)、乙胺(2M的THF溶液；50μl，1.0mmol)和1-丙膦酸环酐(50％ 的乙酸乙酯溶液；630μl，1.0mmol)。将反应搅拌30分钟，然后用 乙酸乙酯(30ml)稀释，并用5％碳酸钠水溶液(2×20ml)、水(2×20ml) 和盐水(2×20ml)洗涤。有机层经干燥(MgSO4)、过滤和浓缩，产物进 行HPLC[方法(ii)]纯化，得到标题化合物，为游离碱(16mg，0.03 mmol)。EsIMS：m/z 517.0[M+H]+。
实施例4
7-氯-3-({5-[4-氨磺酰基哌嗪-1-基]甲基}-[1，2，4]-噻二唑-3- 基)-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚，三氟乙酸盐
向哌嗪(7.8g，90.7mmol)和N，N-二异丙基乙胺(1.2ml，6.81 mmol)在1-甲基-2-吡咯烷酮(10ml)中的溶液中缓慢加入甲磺酸 3-(1-{四氢吡喃-4-基}甲基-7-氯-1H-吲哚-3-基)-[1，2，4]噻二唑 -5-基甲酯(2g，4.54mmol)。混合物在室温下搅拌18小时，然后在 水和乙醚之间分配。分离有机层，干燥(MgSO4)并蒸发溶剂，得到粗的 7-氯-3-[{5-[哌嗪-1-基]甲基}-[1，2，4]-噻二唑-3-基]-1-(四氢吡 喃-4-基)甲基-1H-吲哚(2.36g)。
将一部分(100mg)产物与吡啶(2ml)和磺酰胺(89mg，0.93mmol) 混合，并使混合物经历在180℃的微波辐射达10分钟。减压蒸除吡啶， 将残余物在二氯甲烷和2M氢氧化钠水溶液之间分配。水层用二氯甲烷 另外萃取两次。合并的有机层用硫酸镁干燥，过滤和减压浓缩。粗产 物进行HPLC[方法(i)]纯化，得到标题化合物，为三氟乙酸盐(47mg， 0.08mmol)。EsIMS：m/z 511.0[M+H]+。
实施例5
3-({5-[4-(氨甲酰基甲基)哌嗪-1-基]甲基}-[1，2，4]-噻二唑 -3-基)-7-乙基-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚，二盐酸盐
根据实施例1的方法，在步骤A中使用7-乙基吲哚代替7-氯吲哚， 制备标题化合物。EsIMS：m/z 483.5[M+H]+。
实施例6
甲磺酸3-(1-{四氢吡喃-4-基}甲基-7-乙基-1H-吲哚-3- 基)-[1，2，4]噻二唑-5-基甲酯(根据实施例1步骤G的方法制备，在步 骤A中使用7-乙基吲哚代替7-氯吲哚；50mg，0.11mmol)、碳酸钾 (15mg，0.11mmol)和适当的胺(0.17mmol)以及乙腈(1ml)的混合 物经历在150℃下的微波辐射达5分钟。所得混合物用甲醇稀释、过 滤并进行HPLC[方法(ii)]纯化，得到以下化合物：
6a：7-乙基-3-({5-[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]甲基}[1，2，4]- 噻二唑-3-基]-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚
1-(2-羟基乙基)哌嗪被用作胺。收率＝33.9mg(0.07mmol)。EsIMS： m/z 470.3[M+H]+。
6b：7-乙基-3-({5-[4-(N-异丙基氨甲酰基)甲基哌嗪-1-基]甲 基}-[1，2，4]-噻二唑-3-基)-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚
N-异丙基-1-哌嗪乙酰胺被用作胺。收率＝31.1mg(0.06mmol)。 EsIMS：m/z 525.3[M+H]+。
6c：7-乙基-3-({5-[3-酮基哌嗪-1-基]甲基}[1，2，4]-噻二唑-3- 基)-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚
哌嗪-2-酮被用作胺。收率＝35.9mg(0.08mmol)。EsIMS：m/z 440.0[M+H]+。
6d：7-乙基-3-({5-[4-(甲氧基羰基甲基)哌嗪-1-基]甲 基}-[1，2，4]-噻二唑-3-基)-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚
1-(甲氧基羰基甲基)哌嗪被用作胺。收率＝7.7mg(0.02mmol)。 EsIMS：m/z 498.4[M+H]+。
实施例7
甲磺酸3-(1-{四氢吡喃-4-基}甲基-7-甲氧基-1H-吲哚-3- 基)-[1，2，4]噻二唑-5-基甲酯(根据实施1步骤G的方法制备，在步骤 A中使用7-甲氧基吲哚代替7-氯吲哚)、碳酸钾(1.5当量)、适当的 胺(1.2当量)和1-甲基-2-吡咯烷酮的混合物经历在100℃下的微波 辐射达5分钟。反应如下所述进行处理。
7a：3-({5-[4-(氨甲酰基甲基)哌嗪-1-基]甲基}-[1，2，4]-噻二 唑-3-基)-7-甲氧基-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚，二盐酸盐
2-哌嗪-1-基乙酰胺被用作胺。在微波辐射之后，将混合物进行快 速柱色谱纯化，用含0％-2％甲醇的二氯甲烷洗脱。产物在甲醇中溶解 并加入氯化氢(过量；2M的乙醚溶液)。混合物经真空浓缩，得到标题 化合物。EsIMS：m/z 485.4[M+H]+。
7b：3-({5-[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]甲基}-[1，2，4]-噻二唑 -3-基)-7-甲氧基-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚，三氟乙酸盐
1-(2-羟基乙基)哌嗪被用作胺。在微波辐射之后，混合物用二氯 甲烷稀释，过滤并进行制备性LCMS纯化，得到标题化合物，为三氟乙 酸盐。EsIMS：m/z 472.1[M+H]+。
实施例8
1-环己基甲基-7-甲氧基-3-({5-[4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基] 甲基}-[1，2，4]-噻二唑-3-基)-1H-吲哚，三氟乙酸盐
甲磺酸3-(1-环己基甲基-7-甲氧基-1H-吲哚-3-基)-[1，2，4]噻 二唑-5-基甲酯(根据实施例1步骤G的方法制备，在步骤A中使用7- 甲氧基吲哚代替7-氯吲哚，在步骤B中使用溴甲基环己烷 (cyclohexylmethyl bromide)代替甲苯-4-磺酸四氢吡喃-4-基甲酯； 100mg，0.23mmol)、1-(2-甲氧基乙基)-哌嗪(174μl，1.15mmol) 和四氢呋喃(1ml)的混合物经历在150℃下的微波辐射达15分钟。所 得混合物用四氢呋喃(3ml)稀释。加入用聚合物承载的异氰酸酯 (Argonaut technologies，1.25mmol/g；1.3g)并将混合物振摇2 小时，然后过滤，用二氯甲烷洗涤。滤液经减压浓缩，然后进行HPLC[方 法(i)]纯化，得到标题化合物，为三氟乙酸盐(50mg，0.07mmol)。 EsIMS：m/z 484.4[M+H]+。
实施例9
3-({5-[4-(氨甲酰基甲基)哌嗪-1-基]甲基}-[1，2，4]-噻二唑 -3-基)-7-氯-1-(1，1-二氧代-六氢噻喃-4-基)甲基-1H-吲哚，二盐 酸盐
根据实施例1的方法，在步骤B中使用甲苯-4-磺酸1，1-二氧代- 六氢-1-噻喃-4-基甲酯代替甲苯-4-磺酸四氢吡喃-4-基甲酯，制备标 题化合物。EsIMS：m/z 537.3[M+H]+。
实施例10
3-({5-[3，5-二甲基哌嗪-1-基]甲基}-[1，2，4]-噻二唑-3- 基)-6-氟-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚，三氟乙酸盐
甲磺酸3-(1-{四氢吡喃-4-基}甲基-6-氟-1H-吲哚-3- 基)-[1，2，4]噻二唑-5-基甲酯(根据实施例1步骤G的方法制备，在步 骤A中使用6-氟吲哚代替7-氯吲哚；100mg，0.24mmol)、碳酸钾(66 mg，0.48mmol)、2，6-二甲基哌嗪(32mg，0.28mmol)和乙腈(3ml) 的混合物经历在150℃下的微波辐射达5分钟。所得混合物用甲醇稀 释、过滤并进行HPLC[方法(i)]纯化，得到标题化合物，为三氟乙酸 盐(31mg，0.06mmol)。EsIMS：m/z 444.5[M+H]+。
实施例11
3-({5-[4-(氨甲酰基甲基)哌嗪-1-基]甲基}-[1，2，4]-噁二唑-3- 基)-7-氯-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚，盐酸盐
步骤A：7-氯-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚-3-甲腈
经由压力平衡漏斗将三氯氧化磷(9.6ml，103mmol)滴加到冷却 (5-10℃)的7-氯-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚-3-甲酰胺(20.0g， 68.3mmol)在二甲基甲酰胺(200ml)中的溶液中。在三氯氧化磷加入 完毕后，将反应搅拌10分钟，然后回温到室温，并搅拌另外30分钟。 然后将反应混合物小心地倾入到用冰冷却的水(2000ml)中，所得沉淀 物被滤出并用水洗涤。然后将滤饼溶于二氯甲烷中，用水和盐水洗涤， 用硫酸钠干燥，并真空除去溶剂。所得固体从乙醚结晶，得到7-氯 -1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚-3-甲腈(12.9g，46.9mmol)，为 白色固体。
步骤B：7-氯-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚-3-甲脒
向7-氯-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚-3-甲腈(12.9g，46.9 mmol)在乙醇(280ml)和N，N-二异丙基乙胺(16.7ml，96.0mmol)中 的悬浮液中加入盐酸羟胺(6.8g，121.4mmol)。将反应混合物回热至 回流达6小时，然后冷却到室温，真空除去溶剂。将固体溶于二氯甲 烷中，用水和盐水洗涤，用硫酸钠干燥并真空除去溶剂。所得固体从 乙醚结晶，得到7-氯-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚-3-甲脒(13.1 g，42.5mmol)，为灰白色固体。
步骤C：7-氯-3-[(5-氯甲基)-([1，2，4]噁二唑-3-基)]-1-(四氢 吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚
将分子筛(5.3g)加入到搅拌的7-氯-1-(四氢吡喃-4-基)甲基 -1H-吲哚-3-甲脒(5.3g，17.2mmol)在四氢呋喃(150ml)中的溶液 中，将反应混合物搅拌60分钟。分份加入氢化钠(2.8g，116.6mmol)， 将反应混合物搅拌另外60分钟，然后回温到40℃达30分钟。然后将 反应冷却到-70℃(干冰/丙酮浴)，然后经由压力平衡漏斗滴加氯乙酰 氯(2.8ml，35.2mmol)。然后将反应回温到室温并搅拌另外4小时， 然后通过加入水(5ml)淬灭，过滤并真空除去溶剂。将固体溶于二氯 甲烷中，用水和盐水洗涤，用硫酸钠干燥并真空除去溶剂。所得残余 物进行快速柱色谱纯化，用含1％(v/v)乙醇的二氯甲烷到含3％(v/v) 乙醇的二氯甲烷洗脱。合并包含级分的产物，真空除去溶剂，所得固 体从乙醚重结晶，获得7-氯-3-[(5-氯甲基)-([1，2，4]噁二唑-3- 基)]-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚(4.1g，11.2mmol)，为白色 固体。
步骤D：3-({5-[4-(氨甲酰基甲基)哌嗪-1-基]甲基}-[1，2，4]-噁 二唑-3-基)-7-氯-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚，盐酸盐
向7-氯-3-[(5-氯甲基)-([1，2，4]-噁二唑-3-基)]-1-(四氢-吡 喃-4-基)甲基-1H-吲哚(50mg，0.14mmol)在1-甲基-2-吡咯烷酮(1 ml)中的溶液中加入2-哌嗪-1-基乙酰胺(40mg，0.28mmol)和碳酸钾 (28mg，0.20mmol)。将反应在室温下搅拌18小时。将反应用二氯甲 烷(1ml)稀释并通过2g StrataTM SCX giga管过滤。该管用甲醇洗 涤，然后用含2M氨的甲醇洗脱。蒸发甲醇-氨溶液，残余物进行快速 柱色谱纯化，用含0％至8％(v/v)乙醇的二氯甲烷洗脱。将经过纯化的 产物溶于二氯甲烷中并加入氯化氢(2M乙醚的溶液；0.2ml，0.4 mmol)。通过加入乙醇和乙醚使盐酸盐沉淀，并过滤，得到标题化合物 (10mg，0.02mmol)。EsIMS：m/z 475.1，473.1[M+H]+。
实施例12
6-溴-3-({5-[4-(氨甲酰基甲基)哌嗪-1-基]甲基}-[1，2，4]-噁二 唑-3-基)-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚，盐酸盐
根据实施例1的方法，在步骤A中使用6-溴吲哚代替7-氯吲哚制 备6-溴-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚-3-甲酰胺。根据实施例11 的方法，在步骤A中使用6-溴-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚-3- 甲酰胺代替7-氯-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚-3-甲酰胺制备标 题化合物。EsIMS：m/z 519.3[M+H]+。
实施例13
3-({5-[4-(氨甲酰基甲基)哌嗪-1-基]甲基}-[1，2，4]-噁二唑-3- 基)-7-乙基-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚
根据实施例1的方法，在步骤A中使用7-乙基吲哚代替7-氯吲哚， 制备7-乙基-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚-3-甲酰胺。根据实施 例11的方法，在步骤A使用7-乙基-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲 哚-3-甲酰胺代替7-氯-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚-3-甲酰胺， 制备标题化合物，并在快速色谱分离后作为游离碱形式被分离。EsIMS： m/z 467.3[M+H]+。
实施例14
7-氯-3-({5-[4-(乙氧基羰基甲基)哌嗪-1-基]甲基}-[1，2，4]-噁 二唑-3-基)-1-(1，1-二氧代-六氢噻喃-4-基)甲基-1H-吲哚
根据实施例1的方法，在步骤B使用甲苯-4-磺酸1，1-二氧代-六 氢-1-噻喃-4-基甲酯代替甲苯-4-磺酸四氢吡喃-4-基甲酯，制备7-氯 -1-(1，1-二氧代-六氢噻喃-4-基)甲基-1H-吲哚-3-甲酰胺。根据实施 例11的方法，在步骤A使用7-氯-1-(1，1-二氧代-六氢噻喃-4-基)甲 基-1H-吲哚-3-甲酰胺代替7-氯-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚 -3-甲酰胺，制备7-氯-3-[(5-氯甲基)-([1，2，4]-噁二唑-3- 基)]-1-(1，1-二氧代-六氢噻喃-4-基)甲基-1H-吲哚。
向7-氯-3-[(5-氯甲基)-([1，2，4]-噁二唑-3-基)]-1-(1，1-二氧 代-六氢噻喃-4-基)甲基-1H-吲哚(500mg，1.2mmol)在1-甲基-2- 吡咯烷酮(10ml)中的溶液中加入N，N-二异丙基乙胺(638μl，3.6 mmol)和1-(乙氧基羰基-甲基)哌嗪(417mg，2.4mmol)。反应在50 ℃搅拌18小时。然后将混合物在水(100ml)和乙醚(100ml)之间分配。 分层，水层用乙醚(2×100ml)萃取。合并的有机层用水(100ml)、盐 水(100ml)洗涤，干燥(Na2SO4)，并减压蒸发溶剂。残余物与二氯甲烷 /甲醇/乙醚混合物研磨，得到标题化合物，为白色固体(540mg，1.0 mmol)。EsIMS：m/z 550.8[M+H]+。
实施例15
7-氯-3-({5-[4-(甲基氨甲酰基甲基)哌嗪-1-基]甲 基}-[1，2，4]-噁二唑-3-基)-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚，盐 酸盐
根据实施例14的方法，使用7-氯-3-[(5-氯甲基)-([1，2，4]噁二 唑-3-基)]-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚代替7-氯-3-[(5-氯甲 基)-([1，2，4]噁二唑-3-基)]-1-(1，1-二氧代-六氢噻喃-4-基)甲基 -1H-吲哚，制备7-氯-3-({5-[4-(乙氧基羰基)甲基哌嗪-1-基]甲 基}-[1，2，4]-噁二唑-3-基)-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚。
将7-氯-3-({5-[4-(乙氧基羰基)甲基哌嗪-1-基]甲 基}-[1，2，4]-噁二唑-3-基)-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚(660 mg，1.3mmol)悬浮在2M的氢氧化钠水溶液(30ml)中，将混合物加热 回流1小时。反应混合物用乙醚(30ml)洗涤，然后酸化。所得沉淀物 被滤出和干燥，然后与二氯甲烷、甲醇和乙醚的混合物研磨，得到 3-({5-[4-羧基甲基哌嗪-1-基]甲基}-[1，2，4]-噁二唑-3-基)-7-氯 -1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚，为灰白色固体(537mg，1.1 mmol)。向搅拌的3-({5-[4-羧基甲基哌嗪-1-基]甲基}-[1，2，4]-噁二 唑-3-基)-7-氯-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚(50mg，0.11mmol) 在二氯甲烷(1ml)中的溶液中加入N，N-二异丙基乙胺(130μl，0.74 mmol)、甲胺(2M的THF溶液；550μl，1.1mmol)和1-丙膦酸环酐(50％ 的乙酸乙酯溶液；705μl，1.1mmol)。反应搅拌4小时，然后用乙 酸乙酯(10ml)稀释，用5％的碳酸钠水溶液(3×15ml)、水(3×15ml) 和盐水(2×15ml)洗涤。有机层经干燥(MgSO4)，过滤和浓缩。所得胶 状物被溶于二氯甲烷和甲醇中，并加入氯化氢(2M的乙醚溶液；0.2ml， 0.4mmol)。通过添加乙醚使盐酸沉淀，并滤出，得到标题化合物(13.6 mg，0.03mmol)。EsIMS：m/z 487.5[M+H]+。
实施例16
根据实施例15的方法，使用可供选择的胺代替甲胺，制备以下的 化合物。
16a：7-氯-3-({5-[4-(甲氧基乙基氨甲酰基甲基)哌嗪-1-基]甲 基}-[1，2，4]-噁二唑-3-基)-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚，盐 酸盐
2-甲氧基乙胺被用作胺。EsIMS：m/z 531.2[M+H]+。
16b：7-氯-3-({5-[4-(羟基乙基氨甲酰基甲基)哌嗪-1-基]甲 基}-[1，2，4]-噁二唑-3-基)-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚，盐 酸盐
2-羟基乙胺被用作胺。EsIMS：m/z 517.2[M+H]+。
16c：7-氯-3-({5-[4-(环丙基甲基氨甲酰基甲基)哌嗪-1-基]甲 基}-[1，2，4]-噁二唑-3-基)-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚，盐 酸盐
环丙基甲胺被用作胺。EsIMS：m/z 527.3[M+H]+。
实施例17
7-氯-3-({5-[4-([1，2，4]噁二唑-3-基甲基)哌嗪-1-基]甲 基}[1，2，4]-噁二唑-3-基)-1-(1，1-二氧代-六氢噻喃-4-基)甲基-1H- 吲哚
向7-氯-3-[(5-氯甲基)-([1，2，4]噁二唑-3-基)]-1-(1，1-二氧 代-六氢噻喃-4-基)甲基-1H-吲哚(500mg，1.2mmol)在1-甲基-2- 吡咯烷酮(15ml)中的溶液中加入N，N-二异丙基乙胺(480μl，2.7 mmol)和哌嗪(470mg，5.4mmol)。反应在室温下搅拌18小时。然后 将混合物在水(100ml)和乙醚(100ml)之间分配。分层，水层用乙醚 (2×100ml)萃取。合并的有机层用水(100ml)、盐水(100ml)洗涤， 干燥(Na2SO4)，并减压蒸发溶剂，得到7-氯-3-({5-[哌嗪-1-基]甲 基}-[1，2，4]-噁二唑-3-基)-1-(1，1-二氧代-六氢噻喃-4-基)甲基 -1H-吲哚(400mg，0.96mmol)。向7-氯-3-({5-[哌嗪-1-基]甲 基}-[1，2，4]-噁二唑-3-基)-1-(1，1-二氧代-六氢噻喃-4-基)甲基 -1H-吲哚(50mg，0.11mmol)在二氯甲烷(2ml)和N，N-二异丙基乙胺 (38μl，0.22mmol)中的溶液中加入3-(氯甲基)-[1，2，4]噁二唑(19 mg，0.16mmol)。反应在室温下搅拌18小时。将反应通过2g StrataTMSCX giga管过滤，用二氯甲烷、甲醇洗涤，然后用含2M氨的甲醇洗 脱。减压蒸发甲醇-氨溶液，残余物进行快速柱色谱纯化，用含0％至 8％乙醇的二氯甲烷洗脱，得到标题化合物(49mg，0.09mmol)。EsIMS： m/z 546.3[M+H]+。
实施例18
3-[5-[4-(叔丁氧基羰基)-顺式-2，6-二甲基哌嗪-1-基甲 基]-[1，2，4]-噁二唑-3-基]-7-氯-1-[(四氢吡喃-4-基)甲基]-1H-吲 哚
7-氯-3-[(5-氯甲基)-([1，2，4]-噁二唑-3-基)]-1-(四氢吡喃-4- 基)甲基-1H-吲哚(73mg，0.20mmol)、4-Boc-顺式-2，6-二甲基哌嗪 (64mg，0.30mmol)、N，N-二异丙基乙胺(78mg，0.60mmol)和碘化 钠(30mg，0.20mmol)在二甲基甲酰胺(2.0ml)中的混合物经历在160 ℃下的微波辐射达5分钟，然后通过5g StrataTM SCX giga管过滤， 用二氯甲烷、甲醇洗脱，然后用含2M氨的甲醇洗脱。产物进行快速 柱色谱纯化，用含50％(v/v)乙酸乙酯的庚烷洗脱，然后用乙酸乙酯洗 脱，得到标题化合物(40.2mg，0.074mmol)。EsIMS：m/z 566.5， 544.7[M+H]+，488.3，444.5。
实施例19
7-氯-3-[5-(顺式-2，6-二甲基哌嗪-1-基甲基)-[1，2，4]-噁二唑 -3-基]-1-[(四氢吡喃-4-基)甲基]-1H-吲哚，三氟乙酸盐
3-[5-[4-(叔丁氧基羰基)-顺式-2，6-二甲基哌嗪-1-基甲 基]-[1，2，4]-噁二唑-3-基]-7-氯-1-[(四氢吡喃-4-基)甲基]-1H-吲 哚(38mg，0.070mmol)和5N盐酸(0.2ml)在1，4-二氧杂环己烷(2.0 ml)中的混合物在室温下搅拌1小时，然后在90℃搅拌0.5小时。将 混合物通过5g StrataTM SCX giga管过滤，用二氯甲烷、甲醇洗脱， 然后用含2M氨的甲醇洗脱，并进行HPLC[方法(i)]纯化，得到标题化 合物，为三氟乙酸盐(14.4mg，0.026mmol)。EsIMS：m/z 444.6[M+H]+， 418.8，386.9。
实施例20
3-[5-[4-(氨甲酰基甲基)-顺式-2，6-二甲基哌嗪-1-基甲 基]-[1，2，4]-噁二唑-3-基]-7-氯-1-[(四氢吡喃-4-基)甲基]-1H-吲 哚，三氟乙酸盐
7-氯-3-[5-(顺式-2，6-二甲基哌嗪-1-基甲基)-[1，2，4]-噁二唑 -3-基]-1-[(四氢吡喃-4-基)甲基]-1H-吲哚(10mg，0.023mmol)、 2-溴乙酰胺(4.7mg，0.034mmol)、N，N-二异丙基乙胺(4.4mg，0.034 mmol)和碘化钠(1.0mg，0.007mmol)在乙腈(2.0ml)中的混合物经 历在100℃下的微波辐射达5分钟。将混合物通过5g StrataTMSCX giga管过滤，用二氯甲烷、甲醇洗脱，然后用含2M氨的甲醇洗脱， 并进行HPLC[方法(i)]纯化，得到标题化合物，为三氟乙酸盐(12.2mg， 0.020mmol)。EsIMS：m/z 501.4[M+H]+，432.8，387.1。
实施例21
另外使用实施例18至20的方法制备以下的化合物。
21a：(R)-3-{5-[4-(氨甲酰基甲基)-2-甲基哌嗪-1-基甲 基]-[1，2，4]-噁二唑-3-基}-7-氯-1-[(四氢吡喃-4-基)甲基]-1H-吲 哚，三氟乙酸盐
(R)-4-Boc-2-甲基哌嗪被用来代替4-Boc-顺式-2，6-二甲基哌 嗪。
EsIMS：m/z 509.3，487.5[M+H]+，473.5。
21b：(S)-3-{5-[4-(氨甲酰基甲基)-2-甲基哌嗪-1-基甲 基]-[1，2，4]-噁二唑-3-基}-7-氯-1-[(四氢吡喃-4-基)甲基]-1H-吲 哚，三氟乙酸盐
(S)-4-Boc-2-甲基哌嗪被用来代替4-Boc-顺式-2，6-二甲基哌 嗪。
EsIMS：m/z 509.3，487.5[M+H]+，170.1。
21c：3-{5-[4-(氨甲酰基甲基)-2-羟基甲基哌嗪-1-基甲 基]-[1，2，4]-噁二唑-3-基}-7-氯-1-[(四氢吡喃-4-基)甲基]-1H-吲 哚，三氟乙酸盐
4-Boc-2-羟基甲基哌嗪被用来代替4-Boc-顺式-2，6-二甲基哌 嗪。
EsIMS：m/z 525.5，503.0[M+H]+，485.9。
21d：3-{5-[4-(氨甲酰基甲基)-高哌嗪-1-基甲基]-[1，2，4]-噁 二唑-3-基}-7-氯-1-[(四氢吡喃-4-基)甲基]-1H-吲哚，三氟乙酸盐
1-Boc-高哌嗪被用来代替4-Boc-顺式-2，6-二甲基哌嗪。
EsIMS：m/z 509.3，487.5[M+H]+，387.4，170.1。
21e：(1S，4S)-3-[5-[5-(氨甲酰基甲基)-2，5-二氮杂双环并 [2.2.1]庚烷-2-基甲基]-[1，2，4]-噁二唑-3-基]-7-氯-1-[(四氢吡喃 -4-基)甲基]-1H-吲哚，三氟乙酸盐
(1S，4S)-2-Boc-2，5-二氮杂双环并[2.2.1]庚烷被用来代替 4-Boc-顺式-2，6-二甲基哌嗪。
EsIMS：m/z 507.3，485.8[M+H]+，168.6。
实施例22
(R)-7-氯-3-[5-(3-甲基哌嗪-1-基甲基)-[1，2，4]-噁二唑-3- 基]-1-[(四氢吡喃-4-基)甲基]-1H-吲哚，三氟乙酸盐
7-氯-3-[(5-氯甲基)-([1，2，4]-噁二唑-3-基)]-1-(四氢吡喃-4- 基)甲基-1H-吲哚(73mg，0.20mmol)、(R)-2-甲基哌嗪(30mg，0.30 mmol)、N，N-二异丙基乙胺(78mg，0.60mmol)和碘化钠(30mg，0.20 mmol)在乙腈(1.0ml)和二甲基甲酰胺(1.0ml)中的混合物经历在160 ℃下的微波辐射达5分钟。将混合物通过5g StrataTM SCX giga管 过滤，用二氯甲烷、甲醇洗脱，然后用含2M氨的甲醇洗脱，并进行 HPLC[方法(i)]纯化，得到标题化合物，为三氟乙酸盐(73mg，0.13 mmol)。EsIMS：m/z 430.1[M+H]+，113.2。
实施例23
(S)-7-氯-3-[5-(3-羟基甲基哌嗪-1-基甲基)-[1，2，4]-噁二唑 -3-基]-1-[(四氢吡喃-4-基)甲基]-1H-吲哚三氟乙酸盐
根据实施例22的方法，使用(S)-2-羟基甲基哌嗪代替(R)-2-甲基 哌嗪，制备标题化合物。EsIMS：m/z 446.3[M+H]+，428.6。
实施例24
(S)-7-氯-3-[5-[3-羟基甲基-4-(甲基氨甲酰基甲基)哌嗪-1-基 甲基]-[1，2，4]-噁二唑-3-基]-1-[(四氢吡喃-4-基)甲基]-1H-吲哚
(S)-7-氯-3-[5-(3-羟基甲基哌嗪-1-基甲基)-[1，2，4]-噁二唑 -3-基]-1-[(四氢吡喃-4-基)甲基]-1H-吲哚(22mg，0.049mmol)、 N-甲基-2-氯乙酰胺(11mg，0.098mmol)、N，N-二异丙基乙胺(19mg， 0.15mmol)和碘化钠(7mg，0.049mmol)在二甲基甲酰胺(2.0ml)中 的混合物经历在160℃下的微波辐射达5分钟。将混合物通过5g StrataTM SCX giga管过滤，用二氯甲烷、甲醇洗脱，然后用含2M氨 的甲醇洗脱，并进行快速柱色谱纯化，用乙酸乙酯到含33％(v/v)甲醇 的乙酸乙酯洗脱，得到标题化合物(23.9mg，0.046mmol)。EsIMS：m/z 539.8，517.5[M+H]+，503.1，200.6。
实施例25
另外使用实施例22至24的方法制备以下的化合物。
25a：(R)-7-氯-3-[5-[3-羟基甲基-4-(甲基氨甲酰基甲基)哌嗪 -1-基甲基]-[1，2，4]-噁二唑-3-基]-1-[(四氢吡喃-4-基)甲基]-1H- 吲哚
EsIMS：m/z 539.7，517.7[M+H]+，503.4，200.1。
25b：(S)-7-氯-3-[5-[4-(二甲基氨甲酰基甲基)-3-羟基甲基哌 嗪-1-基甲基]-[1，2，4]-噁二唑-3-基]-1-[(四氢吡喃-4-基)甲 基]-1H-吲哚
EsIMS：m/z 553.7，531.2[M+H]+，214.3。
25c：(R)-7-氯-3-[5-[4-(二甲基氨甲酰基甲基)-3-羟基甲基哌 嗪-1-基甲基]-[1，2，4]-噁二唑-3-基]-1-[(四氢吡喃-4-基)甲 基]-1H-吲哚
EsIMS：m/z 553.3，531.2[M+H]+，214.4。
25d：3-[5-[4-(氨甲酰基甲基)-3-甲氧基羰基哌嗪-1-基甲 基]-[1，2，4]-噁二唑-3-基]-7-氯-1-(四氢吡喃-4-基)甲基]-1H-吲哚
EsIMS：m/z 553.5，531.2[M+H]+，488.5，214.4。
实施例26
7-氯-3-[5-(反式-2，5-二甲基哌嗪-1-基甲基)-[1，2，4]-噁二唑 -3-基]-1-[(四氢吡喃-4-基)甲基]-1H-吲哚，三氟乙酸盐
7-氯-3-[(5-氯甲基)-([1，2，4]-噁二唑-3-基)]-1-(四氢吡喃-4- 基)甲基-1H-吲哚(73mg，0.20mmol)、反式-2，5-二甲基哌嗪(69mg， 0.60mmol)、N，N-二异丙基乙胺(78mg，0.60mmol)和碘化钠(30mg， 0.20mmol)在二甲基甲酰胺(2.0ml)中的混合物经历在160℃下的微 波辐射达5分钟，将混合物通过5g StrataTM SCX giga管过滤，用 二氯甲烷、甲醇洗脱，然后用含2M氨的甲醇洗脱，并进行HPLC[方法 (i)]纯化，得到标题化合物，为三氟乙酸盐(6.7mg，0.012mmol)。 EsIMS：m/z 444.5[M+H]+，126.4。
实施例27
3-[5-[4-(氨甲酰基甲基)-反式-2，5-二甲基哌嗪-1-基甲 基]-[1，2，4]-噁二唑-3-基]-7-氯-1-[(四氢吡喃-4-基)甲基]-1H-吲 哚，三氟乙酸盐
7-氯-3-[5-(反式-2，5-二甲基哌嗪-1-基甲基)-[1，2，4]-噁二唑 -3-基]-1-[(四氢吡喃-4-基)甲基]-1H-吲哚(10mg，0.023mmol)、 2-溴乙酰胺(4.7mg，0.034mmol)、N，N-二异丙基乙胺(4.4mg，0.034 mmol)和碘化钠(1.0mg，0.007mmol)在二甲基甲酰胺(2.0ml)中的 混合物经历在160℃下的微波辐射达5分钟。将混合物通过5g StrataTMSCX giga管过滤，用二氯甲烷、甲醇洗脱，然后用含2M氨的甲醇洗 脱，并进行HPLC[方法(i)]纯化，得到标题化合物，为三氟乙酸盐(11.3 mg，0.018mmol)。EsIMS：m/z 523.5，501.4[M+H]+，184.3。
实施例28
3-[5-[4-(氨甲酰基甲基)-顺式-3，5-二甲基哌嗪-1-基甲 基]-[1，2，4]-噁二唑-3-基]-7-氯-1-[(四氢吡喃-4-基)甲基]-1H-吲 哚三氟乙酸盐
7-氯-3-[(5-氯甲基)-([1，2，4]-噁二唑-3-基)]-1-(四氢吡喃-4- 基)甲基-1H-吲哚(73mg，0.20mmo l)、顺式-2，6-二甲基哌嗪(69mg， 0.60mmol)、N，N-二异丙基乙胺(78mg，0.60mmol)和碘化钠(30mg， 0.20mmol)在二甲基甲酰胺(2.0ml)中的混合物经历在160℃下的微 波辐射达5分钟，将混合物通过5g StrataTMSCX giga管过滤，用 二氯甲烷、甲醇洗脱，然后用含2M氨的甲醇洗脱，得到粗的7-氯 -3-[5-[顺式-3，5-二甲基哌嗪-1-基甲基]-[1，2，4]-噁二唑-3- 基]-1-[(四氢吡喃-4-基)甲基]-1H-吲哚，将10mg(0.023mmol)的粗 产物与2-溴乙酰胺(4.7mg，0.034mmol)、N，N-二异丙基乙胺(4.4mg， 0.034mmol)和碘化钠(1.0mg，0.007mmol)在乙腈(2.0ml)中混合。 混合物经历在160℃下的微波辐射达5分钟，将混合物通过5g StrataTMSCX giga管过滤，用二氯甲烷、甲醇洗脱，然后用含2M氨的甲醇洗 脱，并进行HPLC[方法(i)]纯化，得到3-[5-[4-(氨甲酰基甲基)-顺式 -3，5-二甲基哌嗪-1-基甲基]-[1，2，4]-噁二唑-3-基]-7-氯-1-[(四氢 吡喃-4-基)甲基]-1H-吲哚的三氟乙酸盐和起始材料(7-氯-3-[5-[顺 式-3，5-二甲基哌嗪-1-基甲基]-[1，2，4]-噁二唑-3-基]-1-[(四氢吡 喃-4-基)甲基]-1H-吲哚)的三氟乙酸盐的混合物。为了除去作为相应 的乙酰胺衍生物的起始材料，将混合物(5.5mg)与乙酰氯(4.0mg， 0.05mmol)在N，N-二异丙基乙胺(6.5mg，0.05mmol)存在的条件下 在二氯甲烷(1.0ml)中在室温下反应0.5小时，将反应混合物用甲醇 (0.2ml)淬灭，然后通过5g StrataTM SCX giga管过滤，用二氯甲 烷、甲醇洗脱，然后用含2M氨的甲醇洗脱，并进行HPLC[方法(i)]纯 化，得到标题化合物，为三氟乙酸盐(5.1mg，0.008mmol)。EsIMS：m/z 523.8，501.5[M+H]+，184.1。
实施例29
(R)-3-[5-[4-(氨甲酰基甲基)-3-甲基哌嗪-1-基甲 基]-[1，2，4]-噁二唑-3-基]-7-氯-1-[(四氢吡喃-4-基)甲基]-1H-吲 哚，三氟乙酸盐
(R)-1-Boc-3-甲基哌嗪(100mg，0.50mmol)、2-溴乙酰胺(103mg， 0.75mmol)、N，N-二异丙基乙胺(129mg，1.00mmol)和碘化钠(7.5mg， 0.050mmol)在乙腈(2.0ml)中的混合物经历在100℃下的微波辐射达 5分钟，将混合物通过5g StrataTM SCX giga管过滤，用二氯甲烷、 甲醇洗脱，然后用含2M氨的甲醇洗脱，并进行快速柱色谱纯化，用乙 酸乙酯到含17％(v/v)甲醇的乙酸乙酯洗脱，得到(R)-2-(4-Boc-2-甲 基哌嗪-1-基)乙酰胺(114mg，0.44mmol)。
(R)-2-(4-Boc-2-甲基哌嗪-1-基)乙酰胺(114mg，0.44mmol)和 5N盐酸(0.2ml)在1，4-二氧杂环己烷(2.0ml)中的混合物在90℃搅 拌20分钟。将混合物真空浓缩，定量得到(R)-2-(2-甲基哌嗪-1-基) 乙酰胺盐酸盐。
7-氯-3-[(5-氯甲基)-([1，2，4]-噁二唑-3-基)]-1-(四氢吡喃-4- 基)-甲基-1H-吲哚(73mg，0.20mmol)、(R)-2-(2-甲基哌嗪-1-基) 乙酰胺盐酸盐(101mg，0.44mmol)、N，N-二异丙基乙胺(129mg，1.00 mmol)和碘化钠(30mg，0.20mmol)在二甲基甲酰胺(2.0ml)中的混 合物经历在160℃下的微波辐射达5分钟，将混合物通过5g StrataTMSCX giga管过滤，用二氯甲烷、甲醇洗脱，和用含2M氨的甲醇洗脱， 并进行HPLC[方法(i)]纯化，得到标题化合物，为三氟乙酸盐(89.1mg， 0.148mmol)。Es IMS：m/z 509.5，487.5[M+H]+，170.4。
实施例30
(S)-3-[5-[4-(氨甲酰基甲基)-3-甲基哌嗪-1-基甲 基]-[1，2，4]-噁二唑-3-基]-7-氯-1-[(四氢吡喃-4-基)甲基]-1H-吲 哚三氟乙酸盐
根据实施例29的方法，使用(S)-1-Boc-3-甲基哌嗪代替 (R)-1-Boc-3-甲基哌嗪，制备标题化合物。EsIMS：m/z 509.6， 487.5[M+H]+，170.3。
实施例31
3-({4-[4-(氨甲酰基甲基)哌嗪-1-基]甲基}[1，3]-噻唑-2- 基)-7-氯-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚
7-氯-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚-3-甲酰胺(1.8g，6.0 mmol)、Lawesson′s试剂(4.85g，12.0mmol)、甲苯(150ml)和四氢 呋喃(50ml)的混合物在室温下搅拌3天。将反应混合物真空浓缩，所 得残余物进行柱色谱纯化，用含20-50％(v/v)乙酸乙酯的正庚烷洗脱， 得到7-氯-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚-3-硫代羧酸酰胺 (carbothioic acid amide)(1.4g，4.5mmol)。
7-氯-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚-3-硫代羧酸酰胺(920mg， 3.0mmol)、1，3-二氯丙酮(571mg，4.50mmol)在甲苯(30ml)中的 混合物在40℃搅拌18小时。将反应混合物真空浓缩，所得结晶用含 10％二氯甲烷(v/v)的正庚烷洗涤，得到7-氯-3-[4-(氯甲基)-[1，3]- 噻唑-2-基]-1-(四氢吡喃-4-基)甲基-1H-吲哚(590mg，1.5mmol)。
7-氯-3-[4-(氯甲基)-[1，3]-噻唑-2-基]-1-(四氢吡喃-4-基)甲 基-1H-吲哚(40mg，0.11mmol)、2-哌嗪-1-基乙酰胺(32mg，0.15 mmol)、N，N-二异丙基乙胺(27mg，0.21mmol)、碘化钠(16mg，0.11 mmol)和二甲基甲酰胺(2ml)的混合物经历在160℃下的微波辐射达5 分钟。将反应混合物通过5g StrataTM SCX giga管过滤。该管用甲 醇洗涤，然后用含2M氨的甲醇洗脱。真空浓缩甲醇-氨溶液，所得残 余物进行柱色谱纯化，用含0-3％(v/v)(含2M氨的甲醇)的二氯甲烷 洗脱，得到标题化合物(30.6mg，0.06mmol)。EsIMS：m/z 490.4， 488.5[M+H]+。
实施例32
在CHO细胞中表达的人CB1受体的效力和效价的体外测定。
将表达人CB1受体的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞和荧光素酶报告基 因悬浮在酚红/无血清的DMEM/F-12 nut mix混合物中，该混合物包含 毒霉素林/链霉素(50U/50μg/ml)和两性霉素B(1μg/ml)并以3×104个细胞/孔的密度接种在96孔板中(100μl的最终容积)。在试验前， 将细胞温育过夜(在37℃，5％CO2/95％空气中，约18小时)。
将供试化合物(10mM的二甲基亚砜溶液)在F12 Nut Mix中稀释 以获得浓度为0.11mM至0.11nM的储备溶液。将储备溶液(10μl) 直接加入到相关孔中。将板在37℃下温育5小时，从而进行激动剂诱 导的荧光素酶的表达。在减弱的光线下，向各孔中加入LucLite底物 (Packard；根据厂商说明书进行重构；100μl)。将板用Top Seal盖 上，然后在室温下温育5小时，然后在Packard TopCount上计数(单 光子计数，0.01分钟计数时间，5分钟计数延迟)。
通过对每秒钟计数(CPS)-化合物浓度(M)的绘图进行最小平方求 和方法拟合出“最佳拟合”曲线，以获得EC50值。表1表示本发明的 一些代表性化合物的pEC50值。
表1
实施例33
神经性疼痛的大鼠(Chung)模型
在这一模型中，通过对左侧L5脊神经进行紧密结扎而诱导机械痛 觉超敏。该试验已被成功地用于证实在临床上治疗神经性疼痛所用的 抗惊厥药(加巴喷丁)、抗抑郁药(度洛西汀)和阿片样物质镇痛药(吗啡) 的抗痛觉超敏的效果。
雄性Wistar大鼠(手术时体重150-175克)用于这一研究。将大鼠 置于有机玻璃笼中的升高(～40厘米)的网孔地板上，使用上下(up and down)方法，使用被施用于爪的跖面上的具有增加的力(2.6-167mN) 的von Frey细丝测量对机械刺激的大鼠缩足反射阈值(Chaplan SR等 人，J Neurosci.Methods 53：55-63，1994；Dixon J Ann.Rev. Pharmacol.Toxicol.20：441-462，1980)。在进行基线测量后，将 每只动物麻醉并将L5脊神经紧密结扎。使动物从术中恢复至少七天的 时间段。在给药当天再次测量缩足反射阈值(0分钟)。在此次读数 之后立刻对大鼠经口给予媒介物或供试化合物。然后在给予化合物后 第60、120、180和240分钟进行读数。
数据用平均数±s.e.m表示。在最大剂量组中测量了对于每只动 物的达最大效果的时间，并将这些值平均化从而计算平均的达最大效 果的时间。为了分析的目的，将达最大效果的时间tmax定义为是最靠 近该平均值的时间点。使用Kruskal-Wallis单因素方差分析、非参数 统计检验比较了组间的tmax数据。然后使用非参数Dunn′s检验将每个 处理组与媒介物组进行比较。还使用了从底部到顶部分别具有0和15g 常数(截断值)的非线性回归(S形剂量应答；可变斜率)(XLFit软件) 计算了在tmax时的ED50值(在该剂量下痛觉超敏被逆转约50％)。