天然产物氯化Γ正缬氨酸盐酸盐的不对称合成方法.pdf

摘要
申请专利号：	CN201310089263.X	申请日：	2013.03.20
公开号：	CN103145572A	公开日：	2013.06.12
当前法律状态：	实审	有效性：	审中
法律详情：	发明专利申请公开后的视为撤回IPC(主分类):C07C229/20申请公开日:20130612\|\|\|实质审查的生效IPC(主分类):C07C 229/20申请日:20130320\|\|\|公开
IPC分类号：	C07C229/20; C07C227/20; C07C227/18	主分类号：	C07C229/20
申请人：	康化（上海）新药研发有限公司
发明人：	陈兵; 朱峰
地址：	200231 上海市徐汇区银都路388号D座
优先权：
专利代理机构：	上海东亚专利商标代理有限公司 31208	代理人：	董梅
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内容摘要

本发明涉及天然产物氯化γ-正缬氨酸盐酸盐的不对称合成方法。一种天然产物氯化γ-正缬氨酸盐酸盐的不对称合成方法，从手性丁氧羰基保护的L-烯丙基甘氨酸出发，利用已知的卤内酯化反应具有较高的非对映选择性，建立了第二个手性中心。随后将丁内酯开环水解并保护羧基后，继而完成羟基化合物转化成构型反转的氯代化合物，从而构建了天然产物的主要骨架。随后，在氯化氢的醋酸溶液中，一次性脱掉所有保护基并防止内酯化，最终得到目标化合物氯化γ-正缬氨酸盐酸盐。

权利要求书

权利要求书一种天然产物氯化γ‑正缬氨酸盐酸盐的不对称合成方法，从手性丁氧羰基保护的L‑烯丙基甘氨酸出发，利用已知的卤内酯化反应，合成路线为：
。
根据权利要求1所述的天然产物氯化γ‑正缬氨酸盐酸盐的不对称合成方法，其特征在于：包括下述步骤：
步骤1：叔丁氧羰基保护的L‑烯丙基甘氨酸和N‑溴代丁二酰亚胺反应，得到卤内酯化的产物1；
步骤2：将步骤1得到的卤内酯化的产物1经过三丁基锡氢和偶氮二异丁腈的自由基反应脱溴得到内酯化合物2；
步骤3：将步骤2得到的内酯化合物2经氢氧化锂水解后，和叔丁基溴反应，生成氨基酸的叔丁酯：(2S)‑叔丁氧羰基氨基‑(4R)‑羟基戊酸叔丁酯；
步骤4：将步骤3得到的(2S)‑叔丁氧羰基氨基‑(4R)‑羟基戊酸叔丁酯经过三苯基膦和四氯化碳处理后，生成(2S)‑叔丁氧羰基氨基‑(4S)‑氯戊酸叔丁酯；
步骤5：将步骤4得到的(2S)‑叔丁氧羰基氨基‑(4S)‑氯戊酸叔丁酯经过氯化氢的醋酸溶液处理后，脱掉氨基和羧基的保护基，得到最终产物氯化γ‑正缬氨酸盐酸盐。
根据权利要求2所述的天然产物氯化γ‑正缬氨酸盐酸盐的不对称合成方法，其特征在于，所述的步骤3中水解所用溶剂包括醇、酯、四氢呋喃、二甲基甲酰胺（DMF）、腈或水；所用的氢氧化锂由氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钾或碳酸钠代替。
根据权利要求2所述的天然产物氯化γ‑正缬氨酸盐酸盐的不对称合成方法，其特征在于，所述的步骤4中四氯化碳由氯仿、二氯甲烷、卤代芳烃、卤代烷烃或四氢呋喃代替；所用的试剂三苯基膦由2‑甲基三苯基膦、三正丁基膦或三环己基膦代替。
根据权利要求2所述的天然产物氯化γ‑正缬氨酸盐酸盐的不对称合成方法，其特征在于，所述的步骤5中使用溶剂为乙酸乙酯、乙醚、四氯化碳、氯仿、二氯甲烷、卤代芳烃、卤代烷烃、四氢呋喃；所用试剂为氯化氢的溶液，包括但不仅限于的醋酸溶液、二氧六环溶液、四氢呋喃溶液、乙酸乙酯溶液、氯仿溶液、二氯甲烷溶液、乙醚溶液、醇溶液、水溶液三苯基膦、2‑甲基三苯基膦、三正丁基膦、三环己基膦。
根据权利要求2所述的天然产物氯化γ‑正缬氨酸盐酸盐的不对称合成方法，其特征在于，所述的卤内酯化的产物1为(2S,4S)‑2‑叔丁氧羰基氨基‑4‑溴甲基丁内酯，合成方法是：向1 L三口烧瓶中加入(2S,4S)‑2‑叔丁氧羰基氨基‑4‑溴甲基丁内酯20.0 g/68 mmol、干燥甲苯(400 mL和偶氮二异丁腈11.2 g/68.3 mmol后，置换氮气；用针管加入正丁基锡氢19.9 g/68.3 mmol；加毕，升温到80°C，反应30分钟后，加入水 400 mL淬灭反应；萃取，取有机相，水相再用乙酸乙酯400 mL萃取三次，有机相合并后，依次用水400 mL和饱和食盐水400 mL洗涤有机相，有机相干燥，过滤，得产物(2S,4R)‑2‑叔丁氧羰基氨基‑4‑甲基丁内酯。
根据权利要求6所述的天然产物氯化γ‑正缬氨酸盐酸盐的不对称合成方法，其特征在于，将所述的(2S,4R)‑2‑叔丁氧羰基氨基‑4‑甲基丁内酯与四氢呋喃50 mL、水10 mL和氢氧化锂0.4 g/10 mmol，室温搅拌放置得到完全水解的(2S,4R)‑2‑叔丁氧羰基氨基‑4‑甲基丁内酯完全水解。
根据权利要求7所述的天然产物氯化γ‑正缬氨酸盐酸盐的不对称合成方法，其特征在于，所述的水解的(2S,4R)‑2‑叔丁氧羰基氨基‑4‑甲基丁内酯和叔丁基溴反应，向100 mL三口烧瓶中加入(2S,4R)‑2‑叔丁氧羰基氨基‑4‑甲基丁内酯 (1.8 g, 8.36 mmol)，四氢呋喃（THF）50 mL，水10 mL和氢氧化锂(0.4 g, 10 mmol，室温搅拌放置至LC‑MS分析显示内酯水解完全，直接旋干，得到2.2 g发泡状固体，将该固体溶解在氮氮二甲基甲酰胺100 mL中，依次加入叔丁基溴28.2 g/0.28 mmol，碳酸钾13.7 g/ 0.1 mol和四丁基溴化铵2.7 g/ 8.3 mmol；氮气保护下，升温到50°C，反应过夜；次日，加入水500 mL,混合物用乙酸乙酯500 mL萃取；水相再用乙酸乙酯100 mL萃取三次，合并有机相，再用水100 mL洗三次有机相；有机相干燥，过滤，浓缩，硅胶柱层析分离得产物(2S)‑叔丁氧羰基氨基‑（4R） ‑羟基戊酸叔丁酯。
根据权利要求8所述的天然产物氯化γ‑正缬氨酸盐酸盐的不对称合成方法，其特征在于，所述的(2S)‑叔丁氧羰基氨基‑(4R)‑羟基戊酸叔丁酯经过三苯基膦和四氯化碳处理的反应条件为：向250 mL三口烧瓶中加入(2S)‑叔丁氧羰基氨基‑（4R）‑羟基戊酸叔丁酯 5.0 g, 17.3 mmol，用乙腈 100 mL溶解后，加入CCl4 100 mL和三苯基膦6.8 g, 26 mmol，室温搅拌过夜；次日，浓缩反应液，除去大部分溶剂后，硅胶柱层析，得到 (2S)‑叔丁氧羰基氨基‑(4S)‑氯戊酸叔丁酯。
根据权利要求9所述的天然产物氯化γ‑正缬氨酸盐酸盐的不对称合成方法，其特征在于，所述的步骤5中，向100 mL圆底烧瓶中加入所述的(2S)‑叔丁氧羰基氨基‑(4S)‑氯戊酸叔丁酯1.9 g, 6.2 mmol，三氯甲烷10 mL和氯化氢的醋酸溶液 10 mL，室温搅拌3小时后，过滤，得氯化γ‑正缬氨酸盐酸盐。

说明书

说明书天然产物氯化γ‑正缬氨酸盐酸盐的不对称合成方法
技术领域
本发明涉及天然产物氯化γ‑正缬氨酸（γ‑‑Chloronorvaline）盐酸盐的不对称合成方法。
背景技术
氨基酸是构成生物体蛋白质并同生命活动有关的物质，与生物的生命活动有着密切的关系。随着越来越多的具有生物功能的活性多肽的发现，高科技生命学科突破性的发展，对于氨基酸，特别是具有特殊结构的氨基酸的需求越来越大，现有的氨基酸品种已远远不能满足需求。因此，开发出越来越多的氨基酸已成为一个非常活跃的研究领域。
γ‑Chloronorvaline (AL‑719)和γ‑hydroxynorvalinelactone (AL‑719Y)是从灰孢链霉菌（Streptomyces griseosporeus）AL‑719的培养基中分离出来的氨基酸(The Journal of Antibiotics, 1980, 33, 1249‑1255)。其中，AL‑719在合成培养基中显示出抗菌活性，尤其是对绿脓杆菌（Pseudomonas aeruginosa），而且该活性和L‑亮氨酸显示出的活性刚好相反，AL‑719Y是AL‑719在生物体内转化后的产物。
Wieland 等通过光化学氯化L‑正缬氨酸的方式，合成得到AL‑719及其非对映异构体的混合物，然而并没有分离出AL‑719 (Liebigs Ann. Chem., 1973, 560‑565)。 Easton等也通过类似自由基反应得到AL‑719及其异构体的混合物，但依然没有分离出AL‑719 (Journal of the American Chemical Society, 2009, 131, 11323‑11325)。
发明内容
本发明目的在于：提供一种天然产物氯化γ‑正缬氨酸盐酸盐的不对称合成方法。
本发明目的通过下述技术方案实现：
一种天然产物氯化γ‑正缬氨酸盐酸盐（γ‑Chloronorvaline (AL‑719)的盐酸盐）的不对称合成方法，从手性丁氧羰基（Boc）保护的L‑烯丙基甘氨酸出发，利用已知的卤内酯化反应，合成路线为：

具体包括下述步骤：
步骤1：叔丁氧羰基（Boc）保护的L‑烯丙基甘氨酸和N‑溴代丁二酰亚胺（NBS）反应，得到卤内酯化的产物1；
步骤1：保护的L‑烯丙基甘氨酸和N‑溴代丁二酰亚胺反应，得到卤内酯化的产物1(Journal of the American Chemical Society, 1986, 108, 6041‑6043; Tetrahedron, 1993, 49, 6195‑6222; Tetrahedron Letters, 1986, 27, 6079‑6082; Tetrahedron Letters, 1997, 38, 1643‑1646) ；
步骤2：将步骤1得到的卤内酯化的产物1经过三丁基锡氢和偶氮二异丁腈（AIBN）的自由基反应脱溴得到内酯化合物2；
步骤3：将步骤2得到的内酯化合物2经氢氧化锂水解后，和叔丁基溴反应（tert‑BuBr），生成氨基酸的叔丁酯：(2S)‑叔丁氧羰基氨基‑(4R)‑羟基戊酸叔丁酯；
步骤4：将步骤3得到的(2S)‑叔丁氧羰基氨基‑(4R)‑羟基戊酸叔丁酯经过三苯基膦和四氯化碳处理后，生成(2S)‑叔丁氧羰基氨基‑(4S)‑氯戊酸叔丁酯；
步骤5：将步骤4得到的(2S)‑叔丁氧羰基氨基‑(4S)‑氯戊酸叔丁酯经过氯化氢的醋酸溶液处理后，脱掉氨基和羧基的保护基，得到最终产物氯化γ‑正缬氨酸（γ‑‑Chloronorvaline）盐酸盐。
其中，所述的步骤3中水解所用溶剂包括醇、酯、四氢呋喃、二甲基甲酰胺（DMF）、腈或水；所用的氢氧化锂由氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钾或碳酸钠代替。
所述的步骤4中四氯化碳由氯仿、二氯甲烷、卤代芳烃、卤代烷烃或四氢呋喃代替；所用的试剂三苯基膦由2‑甲基三苯基膦、三正丁基膦或三环己基膦代替。
所述的步骤5中使用溶剂为乙酸乙酯、乙醚、四氯化碳、氯仿、二氯甲烷、卤代芳烃、卤代烷烃、四氢呋喃；所用试剂为氯化氢的溶液，包括但不仅限于的醋酸溶液、二氧六环溶液、四氢呋喃溶液、乙酸乙酯溶液、氯仿溶液、二氯甲烷溶液、乙醚溶液、醇溶液、水溶液三苯基膦、2‑甲基三苯基膦、三正丁基膦、三环己基膦。
本发明的有益效果：本发明从Boc‑L‑烯丙基甘氨酸出发，利用已知的卤内酯化反应具有较高的非对映选择性，建立了第二个手性中心；然后，将丁内酯开环水解并保护羧基后，继而完成羟基化合物转化成构型反转的氯代化合物，从而构建了天然产物的主要骨架；最后，在氯化氢的醋酸溶液中，一次性脱掉所有保护基并防止内酯化，最终得到目标化合物 γ‑Chloronorvaline (AL‑719)的盐酸盐。
具体实施方式
1：(2S,4R)‑2‑叔丁氧羰基氨基‑4‑甲基丁内酯的制备：
向1 L三口烧瓶中加入(2S,4S)‑2‑叔丁氧羰基氨基‑4‑溴甲基丁内酯 (20.0 g， 68 mmol)，干燥甲苯 (400 mL)和AIBN (11.2 g，68.3 mmol) 后，置换氮气；用针管加入正丁基锡氢 (19.9 g, 68.3 mmol)；加毕，升温到80°C，反应30分钟后，LC‑MS分析显示没有原料。
加入水 (400 mL)淬灭反应，萃取，取有机相，水相再用乙酸乙酯（EtOAc）400 mL×3萃取，有机相合并后，依次用水400 mL和饱和食盐水(400 mL洗涤有机相，有机相干燥，过滤。硅胶柱层析得产物(2S,4R)‑2‑叔丁氧羰基氨基‑4‑甲基丁内酯11.0 g，产率75%。
1H NMR (CDCl3): d 5.12 (m, 1H), 4.61~4.45 (m, 2H), 2.87 (m, 1H), 1.83~1.68 (m, 1H), 1.48~1.44 (m, 12H)。
2：(2S,4R)‑2‑叔丁氧羰基氨基‑4‑羟基戊酸叔丁酯的制备：
向100 mL三口烧瓶中加入(2S,4R)‑2‑叔丁氧羰基氨基‑4‑甲基丁内酯 (1.8 g, 8.36 mmol)，四氢呋喃（THF）50 mL，水10 mL和氢氧化锂(0.4 g, 10 mmol，室温搅拌过夜；
次日，LC‑MS分析显示内酯水解完全，直接旋干，得到2.2 g发泡状固体，将该固体溶解在氮氮二甲基甲酰胺(DMF) 100 mL中，依次加入叔丁基溴 (28.2 g, 0.28 mmol)，碳酸钾 (13.7 g, 0.1 mol)和四丁基溴化铵 (2.7 g, 8.3 mmol)；氮气保护下，升温到50°C，反应过夜。次日，加入水 (500 mL), 混合物用EtOAc 500 mL萃取；水相再用EtOAc 100 mL×3萃取，合并有机相，再用水 100 mL×3洗有机相；有机相干燥，过滤，浓缩，硅胶柱层析分离得产物(2S,4R)‑2‑叔丁氧羰基氨基‑4‑羟基戊酸叔丁酯0.9 g, 产率37%。
1H NMR (CDCl3): d 5.42~5.39 (m, 1H), 4.42~4.37 (m, 1 H), 3.85~3.80 (m, 2H) 1.90~1.81 (m, 1H), 1.48~1.30 (m, 19H), 1.23 (d, J = 6.3 Hz, 3H)。
本步骤中水解所用溶剂四氢呋喃也可为醇、酯、二甲基甲酰胺（DMF）、晴或水；所用的碳酸钾也可由氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂或碳酸钠代替。
3：(2S,4S)‑2‑叔丁氧羰基氨基‑4‑氯戊酸叔丁酯的制备：
向250 mL三口烧瓶中加入(2S,4R)‑2‑叔丁氧羰基氨基‑4‑羟基戊酸叔丁酯 5.0 g, 17.3 mmol，用乙腈 100 mL溶解后，加入CCl4 100 mL和三苯基膦6.8 g, 26 mmol，室温搅拌过夜；
次日，浓缩反应液，除去大部分溶剂后，硅胶柱层析，得到产物1.9 g，产率36%。
1H NMR (CDCl3): d 5.01 (s, 1H), 4.36 (s, 1H), 4.18~4.09 (m, 1H), 2.20~1.95 (m, 2H), 1.56 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.54~1.46 (m, 19H)。
本步骤中四氯化碳（CCl4）也可由氯仿、二氯甲烷、卤代芳烃、卤代烷烃或四氢呋喃代替；所用的试剂三苯基膦也可由2‑甲基三苯基膦、三正丁基膦或三环己基膦代替。
4：γ‑Chloronorvaline盐酸盐的制备：
向100 mL圆底烧瓶中加入(2S,4S)‑2‑叔丁氧羰基氨基‑4‑氯戊酸叔丁酯 1.9 g, 6.2 mmol，三氯甲烷（又称：氯仿）10 mL和氯化氢的醋酸溶液 10 mL，室温搅拌3小时后，过滤，得产物γ‑Chloronorvaline盐酸盐0.6 g, 产率51%。
1H NMR (DMSO‑d6): d 8.63 (br s, 3H), 4.45~4.39 (m, 1H), 3.93 (m, 1H), 2.27~2.17 (m, 2H), 1.52 (d, J = 6.3 Hz, 3H).
DEPT 135 (DMSO‑d6): d 54.8 (CH), 49.8 (CH), 40.2 (CH2), 25.0 (CH3)。
本步骤中使用的溶剂氯仿也可为乙酸乙酯、乙醚、四氯化碳、二氯甲烷、卤代芳烃、卤代烷烃、四氢呋喃；所用试剂为氯化氢的溶液，包括但不仅限于的醋酸溶液、二氧六环溶液、四氢呋喃溶液、乙酸乙酯溶液、氯仿溶液、二氯甲烷溶液、乙醚溶液、醇溶液、水溶液三苯基膦、2‑甲基三苯基膦、三正丁基膦、三环己基膦。

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1、(10)申请公布号 CN 103145572 A (43)申请公布日 2013.06.12 CN 103145572 A *CN103145572A* (21)申请号 201310089263.X (22)申请日 2013.03.20 C07C 229/20(2006.01) C07C 227/20(2006.01) C07C 227/18(2006.01) (71)申请人康化（上海）新药研发有限公司地址 200231 上海市徐汇区银都路 388 号 D 座 (72)发明人陈兵朱峰 (74)专利代理机构上海东亚专利商标代理有限公司 31208 代理人董梅 (54) 发明名称。

2、天然产物氯化 - 正缬氨酸盐酸盐的不对称合成方法 (57) 摘要本发明涉及天然产物氯化 - 正缬氨酸盐酸盐的不对称合成方法。一种天然产物氯化 - 正缬氨酸盐酸盐的不对称合成方法，从手性丁氧羰基保护的L- 烯丙基甘氨酸出发，利用已知的卤内酯化反应具有较高的非对映选择性，建立了第二个手性中心。随后将丁内酯开环水解并保护羧基后，继而完成羟基化合物转化成构型反转的氯代化合物，从而构建了天然产物的主要骨架。随后，在氯化氢的醋酸溶液中，一次性脱掉所有保护基并防止内酯化，最终得到目标化合物氯化 - 正缬氨酸盐酸盐。 (51)Int.Cl. 权利要求书 2 页说明书 4。

3、页附图 1 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请权利要求书2页说明书4页附图1页 (10)申请公布号 CN 103145572 A CN 103145572 A *CN103145572A* 1/2 页 2 1. 一种天然产物氯化 - 正缬氨酸盐酸盐的不对称合成方法，从手性丁氧羰基保护的 L- 烯丙基甘氨酸出发，利用已知的卤内酯化反应，合成路线为：。 2. 根据权利要求 1 所述的天然产物氯化 - 正缬氨酸盐酸盐的不对称合成方法，其特征在于：包括下述步骤：步骤 1 ：叔丁氧羰基保护的L- 烯丙基甘氨酸和 N- 溴代丁二酰亚胺反应，得。

4、到卤内酯化的产物 1 ；步骤 2 ：将步骤 1 得到的卤内酯化的产物 1 经过三丁基锡氢和偶氮二异丁腈的自由基反应脱溴得到内酯化合物 2 ；步骤 3 ：将步骤 2 得到的内酯化合物 2 经氢氧化锂水解后，和叔丁基溴反应，生成氨基酸的叔丁酯： (2S)- 叔丁氧羰基氨基 -(4R)- 羟基戊酸叔丁酯；步骤 4 ：将步骤 3 得到的 (2S)- 叔丁氧羰基氨基 -(4R)- 羟基戊酸叔丁酯经过三苯基膦和四氯化碳处理后，生成 (2S)- 叔丁氧羰基氨基 -(4S)- 氯戊酸叔丁酯；步骤 5 ：将步骤 4 得到的 (2S)- 叔丁氧羰基氨基 -(4S)- 氯戊酸叔丁。

5、酯经过氯化氢的醋酸溶液处理后，脱掉氨基和羧基的保护基，得到最终产物氯化 - 正缬氨酸盐酸盐。 3. 根据权利要求 2 所述的天然产物氯化 - 正缬氨酸盐酸盐的不对称合成方法，其特征在于，所述的步骤 3 中水解所用溶剂包括醇、酯、四氢呋喃、二甲基甲酰胺（DMF）、腈或水；所用的氢氧化锂由氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钾或碳酸钠代替。 4. 根据权利要求 2 所述的天然产物氯化 - 正缬氨酸盐酸盐的不对称合成方法，其特征在于，所述的步骤 4 中四氯化碳由氯仿、二氯甲烷、卤代芳烃、卤代烷烃或四氢呋喃代替；所用的试剂三苯基膦由 2- 甲基三苯基膦、三正丁基膦。

6、或三环己基膦代替。 5. 根据权利要求 2 所述的天然产物氯化 - 正缬氨酸盐酸盐的不对称合成方法，其特征在于，所述的步骤 5 中使用溶剂为乙酸乙酯、乙醚、四氯化碳、氯仿、二氯甲烷、卤代芳烃、卤代烷烃、四氢呋喃；所用试剂为氯化氢的溶液，包括但不仅限于的醋酸溶液、二氧六环溶液、四氢呋喃溶液、乙酸乙酯溶液、氯仿溶液、二氯甲烷溶液、乙醚溶液、醇溶液、水溶液三苯基膦、 2- 甲基三苯基膦、三正丁基膦、三环己基膦。权利要求书 CN 103145572 A 2 2/2 页 3 6. 根据权利要求 2 所述的天然产物氯化 - 正缬氨酸盐酸盐的不对称。

7、合成方法，其特征在于，所述的卤内酯化的产物 1 为 (2S,4S)-2- 叔丁氧羰基氨基 -4- 溴甲基丁内酯，合成方法是：向 1 L 三口烧瓶中加入 (2S,4S)-2- 叔丁氧羰基氨基 -4- 溴甲基丁内酯 20.0 g/68 mmol、干燥甲苯(400 mL和偶氮二异丁腈11.2 g/68.3 mmol后，置换氮气；用针管加入正丁基锡氢19.9 g/68.3 mmol ；加毕，升温到80C，反应30分钟后，加入水 400 mL淬灭反应；萃取，取有机相，水相再用乙酸乙酯400 mL萃取三次，有机相合并后，依次用水400 mL和饱和食盐水400 。

8、mL洗涤有机相，有机相干燥，过滤，得产物(2S,4R)-2-叔丁氧羰基氨基-4-甲基丁内酯。 7. 根据权利要求 6 所述的天然产物氯化 - 正缬氨酸盐酸盐的不对称合成方法，其特征在于，将所述的 (2S,4R)-2- 叔丁氧羰基氨基 -4- 甲基丁内酯与四氢呋喃 50 mL、水 10 mL 和氢氧化锂 0.4 g/10 mmol，室温搅拌放置得到完全水解的 (2S,4R)-2- 叔丁氧羰基氨基 -4- 甲基丁内酯完全水解。 8. 根据权利要求 7 所述的天然产物氯化 - 正缬氨酸盐酸盐的不对称合成方法，其特征在于，所述的水解的(2S,4R)-2-叔丁氧羰基氨基-4-甲。

9、基丁内酯和叔丁基溴反应，向100 mL 三口烧瓶中加入 (2S,4R)-2- 叔丁氧羰基氨基 -4- 甲基丁内酯 (1.8 g, 8.36 mmol)，四氢呋喃（THF） 50 mL，水 10 mL 和氢氧化锂 (0.4 g, 10 mmol，室温搅拌放置至 LC-MS 分析显示内酯水解完全，直接旋干，得到2.2 g发泡状固体，将该固体溶解在氮氮二甲基甲酰胺100 mL中，依次加入叔丁基溴28.2 g/0.28 mmol，碳酸钾13.7 g/ 0.1 mol和四丁基溴化铵2.7 g/ 8.3 mmol ；氮气保护下，升温到50C，反应过夜；次日，加入水500。

10、 mL,混合物用乙酸乙酯500 mL萃取；水相再用乙酸乙酯100 mL萃取三次，合并有机相，再用水100 mL洗三次有机相；有机相干燥，过滤，浓缩，硅胶柱层析分离得产物 (2S)- 叔丁氧羰基氨基 -（4R） - 羟基戊酸叔丁酯。 9. 根据权利要求 8 所述的天然产物氯化 - 正缬氨酸盐酸盐的不对称合成方法，其特征在于，所述的(2S)-叔丁氧羰基氨基-(4R)-羟基戊酸叔丁酯经过三苯基膦和四氯化碳处理的反应条件为：向 250 mL 三口烧瓶中加入 (2S)- 叔丁氧羰基氨基 -（4R）- 羟基戊酸叔丁酯 5.0 g, 17.3 mmol，用乙腈 100。

11、 mL 溶解后，加入 CCl4 100 mL 和三苯基膦 6.8 g, 26 mmol，室温搅拌过夜；次日，浓缩反应液，除去大部分溶剂后，硅胶柱层析，得到 (2S)- 叔丁氧羰基氨基 -(4S)- 氯戊酸叔丁酯。 10. 根据权利要求 9 所述的天然产物氯化 - 正缬氨酸盐酸盐的不对称合成方法，其特征在于，所述的步骤 5 中，向 100 mL 圆底烧瓶中加入所述的 (2S)- 叔丁氧羰基氨基-(4S)-氯戊酸叔丁酯1.9 g, 6.2 mmol，三氯甲烷10 mL和氯化氢的醋酸溶液 10 mL，室温搅拌 3 小时后，过滤，得氯化 - 正缬氨酸盐酸盐。权利。

12、要求书 CN 103145572 A 3 1/4 页 4 天然产物氯化 - 正缬氨酸盐酸盐的不对称合成方法技术领域 0001 本发明涉及天然产物氯化 - 正缬氨酸（-Chloronorvaline）盐酸盐的不对称合成方法。背景技术 0002 氨基酸是构成生物体蛋白质并同生命活动有关的物质，与生物的生命活动有着密切的关系。随着越来越多的具有生物功能的活性多肽的发现，高科技生命学科突破性的发展，对于氨基酸，特别是具有特殊结构的氨基酸的需求越来越大，现有的氨基酸品种已远远不能满足需求。因此，开发出越来越多的氨基酸已成为一个非常活跃的研究领域。 0003 -Chlor。

13、onorvaline (AL-719) 和 -hydroxynorvalinelactone (AL-719Y) 是从灰孢链霉菌（Streptomyces griseosporeus） AL-719 的培养基中分离出来的氨基酸 (The Journal of Antibiotics, 1980, 33, 1249-1255)。其中， AL-719 在合成培养基中显示出抗菌活性，尤其是对绿脓杆菌（Pseudomonas aeruginosa），而且该活性和 L- 亮氨酸显示出的活性刚好相反， AL-719Y 是 AL-719 在生物体内转化后的产物。 0004 Wieland 等。

14、通过光化学氯化L- 正缬氨酸的方式，合成得到 AL-719 及其非对映异构体的混合物，然而并没有分离出 AL-719 (Liebigs Ann. Chem., 1973, 560-565)。 Easton 等也通过类似自由基反应得到 AL-719 及其异构体的混合物，但依然没有分离出 AL-719 (Journal of the American Chemical Society, 2009, 131, 11323-11325)。发明内容 0005 本发明目的在于：提供一种天然产物氯化 - 正缬氨酸盐酸盐的不对称合成方法。 0006 本发明目的通过下述技术方案实现：一种天然。

15、产物氯化 - 正缬氨酸盐酸盐（-Chloronorvaline (AL-719) 的盐酸盐）的不对称合成方法，从手性丁氧羰基（Boc）保护的L- 烯丙基甘氨酸出发，利用已知的卤内酯化反应，合成路线为：说明书 CN 103145572 A 4 2/4 页 5 具体包括下述步骤：步骤 1 ：叔丁氧羰基（Boc）保护的L- 烯丙基甘氨酸和 N- 溴代丁二酰亚胺（NBS）反应，得到卤内酯化的产物 1 ；步骤 1 ：保护的L- 烯丙基甘氨酸和 N- 溴代丁二酰亚胺反应，得到卤内酯化的产物 1(Journal of the American Chemical。

16、 Society, 1986, 108, 6041-6043; Tetrahedron, 1993, 49, 6195-6222; Tetrahedron Letters, 1986, 27, 6079-6082; Tetrahedron Letters, 1997, 38, 1643-1646) ；步骤 2 ：将步骤 1 得到的卤内酯化的产物 1 经过三丁基锡氢和偶氮二异丁腈（AIBN）的自由基反应脱溴得到内酯化合物 2 ；步骤 3 ：将步骤 2 得到的内酯化合物 2 经氢氧化锂水解后，和叔丁基溴反应（tert-BuBr），生成氨基酸的叔丁酯： (2S)- 叔丁氧羰基。

17、氨基 -(4R)- 羟基戊酸叔丁酯；步骤 4 ：将步骤 3 得到的 (2S)- 叔丁氧羰基氨基 -(4R)- 羟基戊酸叔丁酯经过三苯基膦和四氯化碳处理后，生成 (2S)- 叔丁氧羰基氨基 -(4S)- 氯戊酸叔丁酯；步骤 5 ：将步骤 4 得到的 (2S)- 叔丁氧羰基氨基 -(4S)- 氯戊酸叔丁酯经过氯化氢的醋酸溶液处理后，脱掉氨基和羧基的保护基，得到最终产物氯化 - 正缬氨酸（-Chloronorvaline）盐酸盐。 0007 其中，所述的步骤 3 中水解所用溶剂包括醇、酯、四氢呋喃、二甲基甲酰胺（DMF）、腈或水；所用的氢氧化锂由氢氧化钠、。

18、氢氧化钾、碳酸钾或碳酸钠代替。 0008 所述的步骤 4 中四氯化碳由氯仿、二氯甲烷、卤代芳烃、卤代烷烃或四氢呋喃代替；所用的试剂三苯基膦由 2- 甲基三苯基膦、三正丁基膦或三环己基膦代替。 0009 所述的步骤 5 中使用溶剂为乙酸乙酯、乙醚、四氯化碳、氯仿、二氯甲烷、卤代芳烃、卤代烷烃、四氢呋喃；所用试剂为氯化氢的溶液，包括但不仅限于的醋酸溶液、二氧六环溶液、四氢呋喃溶液、乙酸乙酯溶液、氯仿溶液、二氯甲烷溶液、乙醚溶液、醇溶液、水溶液三苯基膦、 2- 甲基三苯基膦、三正丁基膦、三环己基膦。 0010 本发明的有益效果：本发。

19、明从 Boc-L- 烯丙基甘氨酸出发，利用已知的卤内酯化反说明书 CN 103145572 A 5 3/4 页 6 应具有较高的非对映选择性，建立了第二个手性中心；然后，将丁内酯开环水解并保护羧基后，继而完成羟基化合物转化成构型反转的氯代化合物，从而构建了天然产物的主要骨架；最后，在氯化氢的醋酸溶液中，一次性脱掉所有保护基并防止内酯化，最终得到目标化合物 -Chloronorvaline (AL-719) 的盐酸盐。具体实施方式 0011 1 ： (2S,4R)-2- 叔丁氧羰基氨基 -4- 甲基丁内酯的制备：向 1 L 三口烧瓶中加入 (2S,4S)-2。

20、- 叔丁氧羰基氨基 -4- 溴甲基丁内酯 (20.0 g， 68 mmol)，干燥甲苯 (400 mL)和AIBN (11.2 g， 68.3 mmol) 后，置换氮气；用针管加入正丁基锡氢 (19.9 g, 68.3 mmol) ；加毕，升温到 80 C，反应 30 分钟后， LC-MS 分析显示没有原料。 0012 加入水 (400 mL) 淬灭反应，萃取，取有机相，水相再用乙酸乙酯（EtOAc） 400 mL3 萃取，有机相合并后，依次用水 400 mL 和饱和食盐水 (400 mL 洗涤有机相，有机相干燥，过滤。硅胶柱层析得产物 (2S,4R)-2-。

21、叔丁氧羰基氨基 -4- 甲基丁内酯 11.0 g，产率 75%。 0013 1H NMR (CDCl 3): d 5.12 (m, 1H), 4.614.45 (m, 2H), 2.87 (m, 1H), 1.831.68 (m, 1H), 1.481.44 (m, 12H)。 0014 2 ： (2S,4R)-2- 叔丁氧羰基氨基 -4- 羟基戊酸叔丁酯的制备：向100 mL三口烧瓶中加入(2S,4R)-2-叔丁氧羰基氨基-4-甲基丁内酯 (1.8 g, 8.36 mmol)，四氢呋喃（THF） 50 mL，水 10 mL 和氢氧化锂 (0.4 g, 10 mmol，室温搅拌。

22、过夜；次日， LC-MS 分析显示内酯水解完全，直接旋干，得到 2.2 g 发泡状固体，将该固体溶解在氮氮二甲基甲酰胺 (DMF) 100 mL 中，依次加入叔丁基溴 (28.2 g, 0.28 mmol)，碳酸钾 (13.7 g, 0.1 mol)和四丁基溴化铵 (2.7 g, 8.3 mmol) ；氮气保护下，升温到50C，反应过夜。次日，加入水 (500 mL), 混合物用 EtOAc 500 mL 萃取；水相再用 EtOAc 100 mL3 萃取，合并有机相，再用水 100 mL3 洗有机相；有机相干燥，过滤，浓缩，硅胶柱层析分离得产物 (。

23、2S,4R)-2- 叔丁氧羰基氨基 -4- 羟基戊酸叔丁酯 0.9 g, 产率 37%。 0015 1H NMR (CDCl 3): d 5.425.39 (m, 1H), 4.424.37 (m, 1 H), 3.853.80 (m, 2H) 1.901.81 (m, 1H), 1.481.30 (m, 19H), 1.23 (d, J = 6.3 Hz, 3H)。 0016 本步骤中水解所用溶剂四氢呋喃也可为醇、酯、二甲基甲酰胺（DMF）、晴或水；所用的碳酸钾也可由氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂或碳酸钠代替。 0017 3 ： (2S,4S)-2- 叔丁氧羰基氨基 -4-。

24、氯戊酸叔丁酯的制备：向 250 mL 三口烧瓶中加入 (2S,4R)-2- 叔丁氧羰基氨基 -4- 羟基戊酸叔丁酯 5.0 g, 17.3 mmol，用乙腈 100 mL 溶解后，加入 CCl4 100 mL 和三苯基膦 6.8 g, 26 mmol，室温搅拌过夜；次日，浓缩反应液，除去大部分溶剂后，硅胶柱层析，得到产物 1.9 g，产率 36%。 0018 1H NMR (CDCl 3): d 5.01 (s, 1H), 4.36 (s, 1H), 4.184.09 (m, 1H), 2.201.95 (m, 2H), 1.56 (d, J = 6.6 Hz, 3。

25、H), 1.541.46 (m, 19H)。 0019 本步骤中四氯化碳（CCl4）也可由氯仿、二氯甲烷、卤代芳烃、卤代烷烃或四氢呋喃代替；所用的试剂三苯基膦也可由 2- 甲基三苯基膦、三正丁基膦或三环己基膦代替。说明书 CN 103145572 A 6 4/4 页 7 0020 4 ： -Chloronorvaline 盐酸盐的制备：向100 mL圆底烧瓶中加入(2S,4S)-2-叔丁氧羰基氨基-4-氯戊酸叔丁酯 1.9 g, 6.2 mmol，三氯甲烷（又称：氯仿） 10 mL 和氯化氢的醋酸溶液 10 mL，室温搅拌 3 小时后，过滤，得产物 -。

26、Chloronorvaline 盐酸盐 0.6 g, 产率 51%。 0021 1H NMR (DMSO-d 6): d 8.63 (br s, 3H), 4.454.39 (m, 1H), 3.93 (m, 1H), 2.272.17 (m, 2H), 1.52 (d, J = 6.3 Hz, 3H). DEPT 135 (DMSO-d6): d 54.8 (CH), 49.8 (CH), 40.2 (CH2), 25.0 (CH3)。 0022 本步骤中使用的溶剂氯仿也可为乙酸乙酯、乙醚、四氯化碳、二氯甲烷、卤代芳烃、卤代烷烃、四氢呋喃；所用试剂为氯化氢的溶液，包括但不仅限于的醋酸溶液、二氧六环溶液、四氢呋喃溶液、乙酸乙酯溶液、氯仿溶液、二氯甲烷溶液、乙醚溶液、醇溶液、水溶液三苯基膦、 2- 甲基三苯基膦、三正丁基膦、三环己基膦。说明书 CN 103145572 A 7 1/1 页 8 图 1 说明书附图 CN 103145572 A 8 。

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