GPCR激动剂.pdf

式(I)的化合物，或其药学可接受的盐是GPCR激动剂，并用于治疗肥胖和糖尿病。

权利要求书
1、  式(I)的化合物或其药学可接受的盐：

其中Z为苯基或含有最多4个选自O、N和S的杂原子的5-或6-元杂芳基，它们中任何一个可任选地被一个或多个选自卤素、C1-4烷基、C1-4氟烷基、C1-4羟基烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C3-7环烷基、芳基、OR1、CN、NO2、-(CH2)j-S(O)mR1、-(CH2)j-C(O)NR1R11、NR1R11、NR2C(O)R1、NR2C(O)NR1R11、NR2SO2R1、SO2NR1R11、C(O)R2、C(O)OR2、-P(O)(CH3)2、-(CH2)j-(4-至7-元杂环基)或-(CH2)j-(5-至6-元杂芳基)的取代基取代；条件是Z不为任选取代的3-或4-吡啶基；
m为0、1或2；
j为0、1或2；
W和Y独立地为键、任选地被羟基或C1-3烷氧基取代的直链或支链C1-4亚烷基、或者直链或支链C2-4亚烯基；
X选自CH2、O、S、CH(OH)、CH(卤素)、CF2、C(O)、C(O)O、C(O)S、SC(O)、C(O)CH2S、C(O)CH2C(OH)、C(OH)CH2C(O)、C(O)CH2C(O)、OC(O)、NR5、CH(NR5R55)、C(O)NR2、NR2C(O)、S(O)和S(O)2；
Rx为氢或羟基；
G为CHR3、N-C(O)OR4、N-C(O)NR4R5、N-C1-4亚烷基-C(O)OR4、N-C(O)C(O)OR4、N-S(O)2R4、N-C(O)R4或N-P(O)(O-Ph)2；或者N-杂环基或N-杂芳基，两者中任何一个可任选地被一个或两个选自C1-4烷基、C1-4烷氧基或卤素的基团取代；
R1和R11独立地为氢、可任选地被卤素、羟基、C1-4烷氧基、芳氧基、芳基C1-4烷氧基、C1-4烷基S(O)m-、C3-7杂环基、-C(O)OR7或N(R2)2取代的C1-4烷基；或者可为C3-7环烷基、芳基、杂环基或杂芳基，其中这些环状基团可被一个或多个选自卤素、C1-4烷基、C1-4氟烷基、OR6、CN、SO2CH3、N(R2)2和NO2的取代基取代；或者R1和R11可共同形成任选地被羟基、C1-4烷基或C1-4羟基烷基取代且任选地包含选自O和NR2的另外的杂原子的5-或6-元杂环；或者R11为C1-4烷氧基；
R2独立地为氢或C1-4烷基；或者基团N(R2)2可形成任选地包含选自O和NR2的另外的杂原子的4-至7-元杂环；
R3为C3-6烷基；
R4为C1-8烷基、C2-8烯基或C2-8炔基，它们中任何一个可任选地被一个或多个选自卤素、NR5R55、OR5、C(O)OR5、OC(O)R5和CN的取代基取代且其所含的CH2基团可被O或S代替；或者为C3-7环烷基、芳基、杂环基、杂芳基、C1-4亚烷基C3-7环烷基、C1-4亚烷基芳基、C1-4亚烷基杂环基或C1-4亚烷基杂芳基，它们中任何一个可被一个或多个选自卤素、C1-4烷基、C1-4氟烷基、OR5、CN、NR5R55、SO2Me、NO2和C(O)OR5的取代基取代；
R5和R55独立地为H或C1-4烷基；或者R5和R55可共同形成5-或6-元杂环；或者基团NR5可代表NS(O)2-(2-NO2-C6H4)；
R6为氢、C1-2烷基或C1-2氟烷基；
R7为氢或C1-4烷基；
d为0、1、2或3；且
e为1、2、3、4或5，条件是d+e为2、3、4或5。

2、  根据权利要求1的化合物或其药学可接受的盐，其中Z为任选取代的苯基或6-元杂芳基。

3、  根据权利要求2的化合物或其药学可接受的盐，其中Z为苯基。

4、  根据权利要求1-3中任一项的化合物或其药学可接受的盐，其中Z被一个或多个卤素、C1-4烷基、C1-4氟烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、CN、S(O)mR1、NR2C(O)NR1R11、C(O)NR1R11、SO2NR1R11、COR2、COOR2或者5-或6-元杂芳基取代。

5、  根据权利要求1-4中任一项的化合物或其药学可接受的盐，其中G为N-C(O)OR4、N-C(O)NR4R5或N-杂芳基。

6、  根据权利要求5的化合物或其药学可接受的盐，其中G为N-C(O)OR4。

7、  根据权利要求1-6中任一项的化合物或其药学可接受的盐，其中R4代表任选地被一个或多个卤素原子或CN取代的C1-8烷基、C2-8烯基或者C2-8炔基，且其所含的CH2基团可被O或S代替；或者代表C3-7环烷基、芳基或C1-4亚烷基C3-7环烷基，它们中任何一个可被一个或多个选自卤素、C1-4烷基、C1-4氟烷基、OR5、CN、NR5R55、NO2或C(O)OC1-4烷基的取代基取代。

8、  根据权利要求7的化合物或其药学可接受的盐，其中R4代表任选地被一个或多个卤素原子或CN取代且其所含的CH2基团可被O或S代替的C2-5烷基，或任选地被C1-4烷基取代的C3-5环烷基。

9、  根据权利要求7或8的化合物或其药学可接受的盐，其中R4代表的基团是未取代的。

10、  根据权利要求1-9中任一项的化合物或其药学可接受的盐，其中d和e各自代表1。

11、  根据权利要求1-9中任一项的化合物或其药学可接受的盐，其中d和e各自代表2。

12、  根据前述权利要求中任一项的化合物或其药学可接受的盐，其中W和Y不都代表键。

13、  根据前述权利要求中任一项的化合物或其药学可接受的盐，其中-W-X-Y-代表4或5个原子链。

14、  根据前述权利要求中任一项的化合物或其药学可接受的盐，其中W为键。

15、  根据前述权利要求中任一项的化合物或其药学可接受的盐，其中X为CH2、CF2、O或NR5。

16、  根据前述权利要求中任一项的化合物或其药学可接受的盐，其中Y为任选地被羟基或C1-3烷氧基取代的直链或支链C3-4亚烷基。

17、  根据前述权利要求中任一项的化合物或其药学可接受的盐，其中Rx为氢。

18、  式(Ic)的根据权利要求1的化合物或其药学可接受的盐：

其中：
Ra和Rc独立地代表氢、氟、氯、甲基或CN；
Rb代表S(O)mR1、C(O)NR1R11、SO2NR1R11、NR2C(O)R1、NR2SO2R1、NR2C(O)NR1R11或5-元杂芳基；
X代表CH2、CF2、O、NH或C(O)；
Y代表直链或支链C3-4亚烷基；
R4代表C2-5烷基或可任选地被甲基取代的C3-6环烷基；
m代表1或2；
R1和R11独立地代表氢或可任选地被羟基或NH2取代的C1-4烷基，可选地，R1和R11可共同形成任选地被OH或CH2OH取代的杂环，例如5-或6-元杂环；且
R2独立地为氢或C1-4烷基；或者基团N(R2)2可形成任选地含有选自O和NR2的另外的杂原子的4-至7-元杂环。

19、  如实施例1至265中任何一个所定义的式(I)的化合物或其药学可接受的盐。

20、  药物组合物，其包含根据权利要求1至19中任一项的化合物或其药学可接受的盐，以及药学可接受的载体。

21、  治疗其中GPR119起作用的疾病或病症的方法，其包括向有此需要的个体给药有效量的根据权利要求1至19中任一项的化合物或其药学可接受的盐的步骤。

22、  调节过饱的方法，其包括向有此需要的个体给药有效量的根据权利要求1至19中任一项的化合物或其药学可接受的盐的步骤。

23、  治疗肥胖的方法，其包括向有此需要的个体给药有效量的根据权利要求1至19中任一项的化合物或其药学可接受的盐的步骤。

24、  治疗糖尿病的方法，其包括向有此需要的个体给药有效量的根据权利要求1至19中任一项的化合物或其药学可接受的盐的步骤。

25、  治疗代谢综合征(X综合征)、葡萄糖耐量降低、高脂血症、高甘油三酯血症、高胆固醇血症、低HDL水平或高血压的方法，其包括向有此需要的患者给药有效量的根据权利要求1至19中任一项的化合物或其药学可接受的盐的步骤。

26、  根据权利要求1至19中任一项的化合物或其药学可接受的盐，其用作药物。

27、  根据权利要求1至19中任一项的化合物或其药学可接受的盐，其用于制备治疗或预防如权利要求21至25中任一项所定义的疾病或病症的药物。

28、  根据权利要求1至19中任一项的化合物或其药学可接受的盐，其用于治疗或预防如权利要求21至25中任一项所定义的疾病或病症。

29、  式(XII)的化合物：

或其盐或保护的衍生物，其中基团Z、W、X、Y、Rx、d和e如权利要求1中所定义。

说明书GPCR激动剂
发明背景
本发明涉及G-蛋白偶联受体(GPCR)激动剂。具体而言，本发明涉及用于治疗肥胖例如作为过饱调节剂，以及用于治疗糖尿病的GPCR激动剂。
肥胖以脂肪组织质量相对于身体大小过量为特征。临床上，体脂质量通过身体质量指数(BMI；体重(kg)/身高(m)2)或腰围来评估。当BMI大于30时，个体被认为是肥胖的并且具有确定的源自超重的医学后果。体重增加尤其是腹部体脂导致的体重增加与患糖尿病、高血压、心脏病以及多种其他健康并发症例如关节炎、中风、胆囊疾病、肌肉和呼吸问题、背痛以及甚至某些癌症的风险增加有关，这在一段时期以来已成为公认的医学观点。
治疗肥胖的药理学方法主要涉及通过改变能量摄取和消耗之间的平衡来减少脂肪质量。大量研究已经明确确定了肥胖与能量动态平衡的调节所涉及的脑回路之间具有联系。直接和间接证据表明血清素途径、多巴胺能途径、肾上腺素能途径、胆碱能途径、内源性大麻素途径、类阿片途径和组胺能途径以及众多神经肽途径(如神经肽Y和黑皮质素(melanocortin))与能量摄取和消耗的中枢控制有关。下丘脑中枢还可以感知与维持体重以及肥胖度有关的外围激素如胰岛素和瘦素，以及源自脂肪组织的肽。
针对与胰岛素依赖性I型糖尿病以及非胰岛素依赖性II型糖尿病有关的病理生理学的药物存在许多潜在的副作用并且在大多数患者中并不能充分解决血脂异常以及高血糖症的问题。治疗方法利用饮食、锻炼、降血糖药物以及胰岛素，通常集中于个体患者的需要，但对新型抗糖尿病药物，尤其是能够较好地耐受且具有更少的副作用的新型抗糖尿病药物的需要一直存在。
类似地，以高血压及其相关的病理包括动脉硬化、脂血症、高血脂以及高胆固醇血症为特征的代谢综合征(综合征X)被认为与受激发时可导致血糖水平异常的胰岛素敏感性降低有关。心肌缺血以及微脉管疾病被确认为是与未被治疗或控制不佳的代谢综合征有关的病态。
人们对新型抗肥胖和抗糖尿病药物，尤其是对具有良好耐受性且具有很少副作用的新型抗肥胖和抗糖尿病药物的需要一直存在。
GPR119(过去称为GPR116)是在同时公开了人类和大鼠受体的WO00/50562中被鉴定为SNORF25的GPCR，US6,468,756也公开了小鼠受体(编号：AAN95194(人类)、AAN95195(大鼠)、AAN95196(小鼠))。
在人类中，GPR119在胰腺、小肠、结肠以及脂肪组织中表达。人类GPR119受体的表达谱表明它具有作为治疗肥胖和糖尿病的靶标应用的潜力。
国际专利申请WO2005/061489(在本申请的优先权日后公布)公开了作为GPR119受体激动剂的杂环衍生物。
本发明涉及用于治疗肥胖例如作为过饱的外周调节剂，以及用于治疗糖尿病的GPR119激动剂。
发明概述
式(I)的化合物：

或其药学可接受的盐是GPR119激动剂，并用作肥胖和糖尿病的预防性治疗或治疗性治疗。
发明详述
本发明涉及式(I)的化合物或其药学可接受的盐：

其中Z为苯基或含有最多4个选自O、N和S的杂原子的5-或6-元杂芳基，它们中任何一个可任选地被一个或多个选自卤素、C1-4烷基、C1-4氟烷基、C1-4羟基烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C3-7环烷基、芳基、OR1、CN、NO2、-(CH2)j-S(O)mR1、-(CH2)j-C(O)NR1R11、NR1R11、NR2C(O)R1、NR2C(O)NR1R11、NR2SO2R1、SO2NR1R11、C(O)R2、C(O)OR2、-P(O)(CH3)2、-(CH2)j-(4-至7-元杂环基)或-(CH2)j-(5-至6-元杂芳基)的取代基取代；条件是Z不为任选取代的3-或4-吡啶基；
m为0、1或2；
j为0、1或2；
W和Y独立地为键、任选地被羟基或C1-3烷氧基取代的直链或支链C1-4亚烷基，或者直链或支链C2-4亚烷基；
X选自CH2、O、S、CH(OH)、CH(卤素)、CF2、C(O)、C(O)O、C(O)S、SC(O)、C(O)CH2S、C(O)CH2C(OH)、C(OH)CH2C(O)、C(O)CH2C(O)、OC(O)、NR5、CH(NR5R55)、C(O)NR2、NR2C(O)、S(O)和S(O)2；
Rx为氢或羟基；
G为CHR3、N-C(O)OR4、N-C(O)NR4R5、N-C1-4亚烷基-C(O)OR4、N-C(O)C(O)OR4、N-S(O)2R4、N-C(O)R4或N-P(O)(O-Ph)2；或者N-杂环基或N-杂芳基，两者中任何一个可任选地被一个或两个选自C1-4烷基、C1-4烷氧基或卤素的基团取代；
R1和R11独立地为氢、可任选地被卤素、羟基、C1-4烷氧基、芳氧基、芳基C1-4烷氧基、C1-4烷基S(O)m-、C3-7杂环基、-C(O)OR7或N(R2)2取代的C1-4烷基；或者可为C3-7环烷基、芳基、杂环基或杂芳基，其中这些环状基团可被一个或多个选自卤素、C1-4烷基、C1-4氟烷基、OR6、CN、SO2CH3、N(R2)2和NO2的取代基取代；或者R1和R11可共同形成任选地被羟基、C1-4烷基、C1-4羟基烷基取代且任选地包含选自O和NR2的另外的杂原子的5-或6-元杂环；或者R11为C1-4烷氧基；
R2独立地为氢或C1-4烷基；或者基团N(R2)2可形成任选地包含选自O和NR2的另外的杂原子的4-至7-元杂环；
R3为C3-6烷基；
R4为C1-8烷基、C2-8烯基或C2-8炔基，它们中任何一个可任选地被一个或多个选自卤素、NR5R55、OR5、C(O)OR5、OC(O)R5和CN的取代基取代，且其所含的CH2基团可被O或S代替；或者为C3-7环烷基、芳基、杂环基、杂芳基、C1-4亚烷基C3-7环烷基、C1-4亚烷基芳基、C1-4亚烷基杂环基或C1-4亚烷基杂芳基，它们中任何一个可被一个或多个选自卤素、C1-4烷基、C1-4氟烷基、OR5、CN、NR5R55、SO2Me、NO2和C(O)OR5的取代基取代；
R5和R55独立地为H或C1-4烷基；或者R5和R55可共同形成5-或6-元杂环；或者NR5可代表NS(O)2-(2-NO2-C6H4)；
R6为氢、C1-2烷基或C1-2氟烷基；
R7为氢或C1-4烷基；
d为0、1、2或3；且
e为1、2、3、4或5，条件是d+e为2、3、4或5。
式(I)的化合物的分子量优选小于800，较优选小于600，更优选小于500。
适当地，Z代表苯基或含有最多4个选自O、N和S的杂原子的5-或6-元杂芳基，它们中任何一个可任选地被一个或多个选自下列的取代基取代：卤素、C1-4烷基、C1-4氟烷基、C1-4羟基烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C3-7环烷基、芳基、OR1、CN、NO2、S(O)mR1、C(O)NR1R11、NR1R11、NR2C(O)R1、NR2SO2R1、SO2MR1R11、COR2、C(O)OR2、4-至7-元杂环基或5-至6-元杂芳基；条件是Z不为任选取代的3-或4-吡啶基。更适当地，Z代表苯基或含有最多4个选自O、N和S的杂原子的6-元杂芳基，它们中任何一个可被任选地取代。
在本发明的一个实施方案中，Z为苯基或含有最多4个选自O、N和S的杂原子的5-或6-元杂芳基，它们中任何一个可任选地被一个或多个选自下列的取代基取代：卤素、C1-4烷基、C1-4氟烷基、C1-4羟基烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C3-7环烷基、芳基、OR1、CN、NO2、S(O)mR1、C(O)NR1R11、NR1R11、NR2C(O)R1、NR2SO2R1、SO2NR1R11、C(O)R2、C(O)OR2、4-至7-元杂环基或5-至6-元杂芳基；条件是Z不为任选取代的3-或4-吡啶基。
Z优选为苯基或含有最多两个N杂原子的6-元杂芳基(两者之一可任选地被取代)，更优选为任选取代的苯基与特殊取代的苯基。Z杂芳基的实例包括噁唑基、异噁唑基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、呋喃基、哒嗪基或2-吡啶基。Z的优选的取代基为卤素、C1-4烷基、C1-4氟烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、CN、S(O)mR1、NR2C(O)NR1R11、C(O)NR1R11、SO2NR1R11、COR2、COOR2或5-或6-元杂芳基；特别是卤素如氟或氯、C1-4烷基、C1-4氟烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、CN、S(O)mR1、NR2C(O)NR1R11、C(O)NR1R11、SO2NR1R11或5-元杂芳基；尤其是氟、氯、甲基、S(O)mR1(例如其中m为1或2)、NR2C(O)NR1R11、C(O)NR1R11、SO2NR1R11或5-元杂芳基。
在一个实施方案中，Z的合适的取代基为卤素、C1-4烷基、C1-4氟烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、CN、S(O)mR1、C(O)NR1R11、SO2NR1R11、COR2、COOR2或5-或6-元杂芳基；特别是卤素(例如氟或氯)、C1-4烷基、C1-4氟烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、CN、S(O)mR1、C(O)NR1R11、SO2NR1R11；尤其是氟、氯、甲基、S(O)mR1(如其中m为1或2)、C(O)NR1R11或SO2NR1R11。
适当地，j为0或1。在本发明的一个实施方案中j代表0。在本发明的另一实施方案中j代表1。
适当地，W和Y独立地为键，任选地被羟基取代的直链或支链C1-4亚烷基，或者为直链或支链C2-4亚烷基。
在本发明的一个实施方案中，W和Y独立地为键，直链或支链C1-4亚烷基，或者为直链或支链C2-4亚烷基。
优选地，W和Y不都代表键。
优选地，W为键。
优选地，Y为任选地被羟基或C1-3烷氧基取代的直链或支链C3-4亚烷基，例如：未取代的直链或支链C3-4亚烷基。
在本发明的某些实施方案中，-W-X-Y-代表长度上2至6个原子的链。-W-X-Y-优选地代表4或5个原子的链。
当W为C2-3亚烷基时，双键的立体化学优选为(E)。
适当地，X选自CH2、O、S、CH(OH)、CH(卤素)、CF2、C(O)、C(O)O、C(O)S、SC(O)、C(O)CH2S、C(O)CH2C(OH)、C(O)CH2C(O)、OC(O)、NR5、CH(NR5R55)、C(O)NR2、S(O)和S(O)2。更适当地，X选自CH2、O、S、CH(OH)、CH(卤素)、C(O)、C(O)O、C(O)S、SC(O)、C(O)CH2S、C(O)CH2C(OH)、C(O)CH2C(O)、OC(O)、NR5、CH(NR5R55)、C(O)NR2、S(O)和S(O)2。
X优选为CH2、CF2、O或NR5(如NH)，尤其是CH2、O或NR5，特别是O。
Rx优选为氢。
G优选为N-C(O)OR4、N-C(O)NR4R5、N-C1-4亚烷基-C(O)OR4、N-C(O)C(O)OR4、N-杂环基、N-杂芳基、N-S(O)2R4、N-C(O)R4或N-P(O)(O-Ph)2；特别是N-C(O)OR4、N-C(O)NR4R5、N-C1-4亚烷基-C(O)OR4、N-杂芳基、N-S(O)2R4或N-C(O)R4；尤其是N-C(O)OR4、N-C(O)NR4R5、N-杂芳基、N-S(O)2R4或N-C(O)R4。更优选地，G为N-C(O)OR4、N-C(O)NR4R5或N-杂芳基。G最优选为N-C(O)OR4。当G为N-杂芳基时，杂芳基环优选为最多含有3个选自O、N和S的杂原子的5-或6-元杂芳基环，例如：吡啶-2-基、噁二唑基或嘧啶基，特别是嘧啶-2-基。可选地，G为CHR3。
适当地，R1和R11独立地为氢、C1-4烷基，其可任选地被卤素如氟、羟基、C1-4烷氧基-、芳氧基-、芳基C1-4烷氧基-、C1-4烷基S(O)m-、C3-7杂环基或N(R2)2取代；或者可为C3-7环烷基、芳基、杂环基或杂芳基，其中这些环状基团可被一个或多个选自卤素、C1-4烷基、C1-4氟烷基、OR6、CN、SO2CH3、N(R2)2和NO2的取代基取代；或者R1和R11可共同形成任选地包含选自O和NR2的另外的杂原子的5-或6-元杂环。
在本发明的一个实施方案中，R1和R11独立地为氢、C1-4烷基，其可任选地被卤素(如：氟)、羟基、C1-4烷氧基-、C1-4烷硫基-、C3-7杂环基或N(R2)2取代；或者可为C3-7环烷基、芳基、杂环基或杂芳基，其中这些环状基团可被一个或多个选自卤素、C1-4烷基、C1-4氟烷基、OR6、CN、SO2CH3、N(R2)2和NO2的取代基取代。
适当地，R2为氢、甲基或叔丁基。
典型的R3基团包括正戊基。
典型的R4基团包括甲基、乙基、丙基、异丙基、仲丁基、叔丁基、丁炔基、环丁基、戊基、2，2-二甲基丙基、环戊基、己基、环己基、三氟乙基、三氯乙基、苯基、甲氧基苯基、甲苯基、氟苯基、氯苯基、三氟甲基苯基、硝基苯基、萘基、氯苄基、甲硫基乙基(methylsulfanylethyl-)和四氢呋喃甲基。
优选地，R4代表任选地被一个或多个卤原子或氰基取代且其所含的CH2基团可被O或S代替的C1-8烷基、C2-8烯基或C2-8炔基；或C3-7环烷基、芳基或C1-4烷基C3-7环烷基，它们中任何一个可被一个或多个选自卤素、C1-4烷基、C1-4氟烷基、OR5、CN、NR5R55、NO2和C(O)OC1-4烷基的取代基取代。更优选地，R4代表任选地被一个或多个卤原子或CN取代且其所含的CH2基团可被O或S代替的C1-8烷基、C2-8烯基或C2-8炔基；或者C3-7环烷基或芳基，两者中任何一个可被一个或多个选自卤素、C1-4烷基、C1-4氟烷基、OR5、CN、NR5R55、NO2和C(O)OC1-4烷基的取代基取代。最优选的R4基团为任选地被一个或多个卤素或CN基团取代且其所含的CH2基团可被O或S代替的C2-5烷基(如C3-5烷基)，或者任选地被C1-4烷基取代的C3-5环烷基。在本发明的一个实施方案中R4代表的基团是未取代的。
在本发明的一个实施方案中d+e为2、3或4。适当地，d为1或2，e为1或2。在本发明的优选实施方案中d和e各自代表1。在本发明的更优选的实施方案中d和e各自代表2。
适当地，R5和R55独立地为氢或C1-4烷基基；或者R5和R55可共同形成5-或6-元杂环；尤其是，R5代表氢或甲基，特别是甲基。
适当地，R6为C1-4炔基或C1-4氟烷基。
可被提及的根据本发明的一组化合物为式(Ia)的化合物及其药学可接受的盐：

其中Z为苯基或含有最多4个选自O、N和S的杂原子的5-或6-元杂芳基，它们中任何一个可任选地被一个或多个选自下列的取代基取代：卤素、C1-4烷基、C1-4氟烷基、C1-4羟基烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C3-7环烷基、芳基、OR1、CN、NO2、S(O)mR1、NR2C(O)NR1R11、C(O)NR1R11、NR1R11、NR2C(O)R1、NR2SO2R1、SO2NR1R11、COR2、C(O)OR2、4-至7-元杂环基或5-至6-元杂芳基；条件是Z不为任选取代的3-或4-吡啶基。
m为0、1或2；
W和Y独立地为键、直链或支链C1-3亚烷基或直链或支链C2-3亚烯基；
X选自CH2、O、S、CH(OH)、CH(卤素)、C(O)、C(O)O、C(O)S、SC(O)、C(O)CH2S、C(O)CH2C(OH)、C(O)CH2C(O)、OC(O)、NR5、CH(NR5R55)、C(O)NR2、S(O)和S(O)2；
G为CHR3、N-C(O)OR4、N-C(O)NR4R5、N-C1-4亚烷基-C(O)OR4、N-C(O)C(O)OR4、N-S(O)2R4、N-C(O)R4或N-P(O)(O-Ph)2；或N-杂环基或N-杂芳基，它们中任何一个可任选地被一个或两个选自C1-4烷基、C1-4烷氧基或卤素的基团取代；
R1和R11独立地为氢、C1-4烷基，其可任选地被卤素如氟、羟基、C1-4烷氧基-、C1-4烷硫基-、C3-7杂环基或N(R2)2取代；或者可为C3-7环烷基、芳基、杂环基或杂芳基，其中这些环状基团可以被一个或多个选自卤素、C1-4烷基、C1-4氟烷基、OR6、CN、SO2CH3、N(p2)2和NO2的取代基取代；
R2独立地为氢或C1-4烷基；或者基团N(R2)2可形成任选地包含选自O和NR2的另外的杂原子的4-至7-元杂环；
R3为C3-6烷基；
R4为C1-8烷基、C2-8烯基或者C2-8炔基，它们中任何一个可任选地被一个或多个卤原子、NR5R55、OR5、C(O)OR5、OC(O)R5或氰基取代且其所含的CH2基团可被O或S代替；或者为C3-7环烷基、芳基、杂环基、杂芳基、C1-4亚烷基C3-7环烷基、C1-4烯基芳基、C1-4烯基杂环基或C1-4烯基杂芳基，它们中任何一个可任选地被一个或多个选自卤素、C1-4烷基、C1-4氟烷基、OR5、CN、NR5R55、SO2Me、NO2或C(O)OR5的取代基取代；
R5和R55独立地为氢或C1-4烷基；或者R5和R55可共同形成5-或6-元杂环；
R6为氢、C1-2烷基或C1-2氟烷基；
d为0、1、2或3；
e为1、2、3、4或5，且
条件是d+e为2、3、4或5。
一组重要的化合物为式(Ib)的那些：

其中：
Y代表直链或支链的C3-4亚烷基；
Z、X和R4如前对式(I)的化合物中所述。
一组特别重要的式(Ib)的化合物为式(Ic)的那些：

其中：
Ra和Rc独立地代表氢、氟、氯、甲基或CN；
Rb代表S(O)mR1、C(O)NR1R11、SO2NR1R11、NR2C(O)R1、NR2SO2R1、NR2C(O)NR1R11或5-元杂芳基；
X代表CH2、CF2、O、NH或C(O)；
Y代表直链或支链的C3-4亚烷基；
R4代表C2-5烷基或C3-6环烷基，其可任选地被甲基取代；
m代表1或2；
R1和R11独立地代表氢或C1-4烷基，其可任选地被羟基或NH2取代，可选地，R1和R11可共同形成任选地被OH或CH2OH取代的5-或6-元杂环；且
R2独立地为氢或C1-4烷基；或者基团N(R2)2可形成任选地含有选自O和NR10的另外的杂原子的4-至7-元杂环。
对于式(Ic)的化合物，适当地，Rb代表S(O)mR6、C(O)NR6R66或SO2NR6R66、NR10C(O)NR6R66或5-元杂芳基。可选地，对于式(Ic)的化合物，适当地，Rb代表NR10C(O)R6或NR10SO2R6。
尽管各个变量的优选基团已概括地对各个变量单独列在上文，但本发明优选的化合物包括其中式(I)至式(Ic)的若干或各个变量均选自各个变量中优选的、更优选的或特别列出的基团的化合物。因此，本发明旨在包括优选的、更优选的以及特别列出的基团的所有组合。
可被提及的本发明的特定化合物是包括在实施例中的化合物及其药学可接受的盐。
可任选地使用下列条件(单独地或以任何组合)以从本发明的范围内排除某些化合物：
i)当G为N-(CH2)3-C(O)OR4时，d代表2且e代表2，适当地，R4不代表乙基或三氯乙基。
ii)当d代表2且e代表2时，适当地，Z不为被-(CH2)j-吡啶-4-基取代的5-元杂芳基。
iii)适当地，Z不为被-(CH2)j-吡啶-4-基取代的5-元杂芳基。
iv)当d代表2，e代表2且-W-X-Y-代表-O-时，适当地，Z不代表嘧啶或任选取代的嘧啶。
v)当d代表2且e代表2时，G代表N-C(O)O-叔丁基且Z代表溴苯基，适当地，-W-X-Y-不代表-C(O)-或-C(NH2)-。
vi)当d代表2且e代表2时，G代表N-C(O)O-叔丁基或N-C(O)-CH2-(N-十氢喹啉)，适当地，-W-X-Y-不代表-CH＝CH-、-CH2-CH＝CH-或-C(O)-CH＝CH-。
vii)当-W-X-Y-代表-C(O)-，d代表2且e代表2时，适当地，Z不代表4-位被F、Cl或甲基单取代的苯基。
viii)当-W-X-Y-代表-CH2-C(O)-，d代表2且e代表2时，适当地，Z不代表4-位被F、Cl或甲基单取代的苯基。
除非另有说明，当用于本文时，“烷基”以及具有前缀“烷(alk)”的其他基团，比如例如烯基、炔基等，意指可为直链或支链或其组合的碳链。烷基的实例包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、仲丁基以及叔丁基、戊基、己基、庚基等。“烯基”、“炔基”以及其他类似术语包括具有至少一个不饱和碳碳键的碳链。
术语“氟烷基”包括被一个或多个氟原子取代的烷基，如：CH2F、CHF2和CF3。
术语“环烷基”意指不含杂原子的碳环，并包括单环和双环饱和及部分饱和的碳环。环烷基的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环庚基。部分饱和的环烷基的实例包括环己烯和2，3-二氢化茚。环烷基典型地总共含有3至10个环碳原子(例如：3至6个或8至10个)。
术语“卤素”包括氟、氯、溴和碘原子(特别是氟或氯)。
术语“芳基”包括苯基和萘基，特别是苯基。
除非另有说明，术语“杂环基”和“杂环”包括4-至10-元的单环和双环饱和环(如：4-至7-元单环饱和环)，并含有最多三个选自N、O和S的杂原子。杂环的实例包括氧杂环丁烷、四氢呋喃、四氢吡喃、氧杂环庚烷、氧杂环辛烷、硫杂环丁烷(thietane)、四氢噻吩、四氢噻喃、硫杂环庚烷(thiepane)、硫杂环辛烷(thiocane)、氮杂环丁烷、吡咯烷、哌啶、氮杂环庚烷(azepane)、氮杂环辛烷(azocane)、[1，3]二噁烷、噁唑烷、哌嗪等。杂环的其他实例包括含硫环的氧化形式。因此，四氢噻吩1-氧化物、四氢噻吩1，1-二氧化物、四氢噻喃1-氧化物和四氢噻喃1，1-二氧化物也被认为是杂环。
除非另有说明，术语“杂芳基”包括含有最多4个选自N、O和S的杂原子的单环和双环5-至10-元(如：单环5-或6-元)杂芳基环。这样的杂芳基环的实例为呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、三唑基、噁二唑基、噻二唑基、四唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基和三嗪基。双环杂芳基包括其中5-或6-元杂芳基环稠合到苯基或另一杂芳基的双环杂芳基。这样的双环杂芳环的实例为苯并呋喃、苯并噻吩、吲哚、苯并噁唑、苯并噻唑、吲唑、苯并咪唑、苯并三唑、喹啉、异喹啉、喹唑啉、喹喔啉和嘌呤。优选的杂芳基是含有最多4个选自N、O和S的杂原子的单环的5-或6-元杂芳基环。
本文描述的化合物可含有一个或多个不对称中心并可因此产生非对映异构体和光学异构体。本发明包括所有这样可能的非对映异构体以及它们的外消旋混合物、它们的基本纯的拆分的对映异构体、所有可能的几何异构体及其药学可接受的盐。上述式(I)并未在某些位置显示确定的立体化学。本发明包括式(I)的所有立体异构体及其药学可接受的盐。此外，还包括立体异构体的混合物以及分离的特定立体异构体。在用于制备这样的化合物的合成操作过程中，或者在利用本领域技术人员已知的外消旋化或差向异构化方法中，这样的方法的产物可为立体异构体的混合物。
当式(I)的化合物的互变异构体存在时，除非特别标明或另有说明，本发明包括任何可能的互变异构体及其药学可接受的盐、和其混合物。
当式(I)的化合物及其药学可接受的盐以溶剂合物或多晶型形式存在时，本发明包括任何可能的溶剂合物和多晶型形式。形成溶剂合物的溶剂类型没有特别限制，只要该溶剂是药理学可接受的。例如：可以使用水、乙醇、丙醇、丙酮等。
术语“药学可接受的盐”是指由药学可接受的无毒碱或酸制备的盐。当本发明的化合物为酸性时，其相应的盐可方便地由药学可接受的无毒碱，包括无机碱和有机碱来制备。由这样的无机碱得到的盐包括铝盐、铵盐、钙盐、铜(一价和二价)盐、铁盐、亚铁盐、锂盐、镁盐、钾盐、钠盐和锌盐等。特别优选的是铵盐、钙盐、镁盐、钾盐和钠盐。由药学可接受的有机无毒碱得到的盐包括伯胺、仲胺和叔胺，以及环胺和取代的胺如天然存在的和合成的取代的胺。可由之形成盐的其他药学可接受的有机无毒碱包括精氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱、N’，N’-二苄基乙二胺、二乙胺、2-二乙氨基乙醇、2-二甲氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、葡糖胺、氨基葡糖、组氨酸、哈胺(hydrabamine)、异丙胺、赖氨酸、甲基葡糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、多胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨丁三醇等。
当本发明的化合物为碱性时，其相应的盐可以方便地由药学可接受的无毒酸包括无机酸和有机酸来制备。这样的酸包括例如乙酸、苯磺酸、苯甲酸、樟脑磺酸、柠檬酸、乙磺酸、反丁烯二酸、葡萄糖酸、谷氨酸、氢溴酸、盐酸、羟乙磺酸、乳酸、马来酸、苹果酸、扁桃酸、甲磺酸、粘酸、硝酸、双羟萘酸、泛酸、磷酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸、对甲苯磺酸等。
由于式(I)的化合物旨在用于药学用途，它们优选以基本纯的形式提供，例如至少60％的纯度，更适当地为至少75％的纯度，尤其是至少98％的纯度(％为重量比重量)。
式(I)的化合物可如下文描述的进行制备，其中Z、d、e、W、X、Y和G如上文所定义。使用其中Rx为氢的化合物说明路线，其中Rx为羟基的化合物可使用类似方法制备。
如路线1所示，可通过将合适的酸(II)与醇、硫醇或胺(III)(其中E为O、S或NR2)缩合，采用对于这样的缩合反应的典型试剂，如EDCI来制备其中X为CO2、COS或CONR2的式(I)的化合物(Pottorf，R.S.；Szeto，P.Handbook of Reagents for Organic Synthesis：Activating Agents and ProtectingGroups；Pearson，A.J.，Roush，W.R.编辑；Wiley：Chichester，1999；pp186-188)。所述酸(II)和醇、硫醇和胺(III)或可商购或采用已知技术容易地制备。
路线1

如路线2所示，可通过将合适的硫醇或醇(IV)与合适的酸(V)(其中E为S或O)缩合，采用一般用于实现这样的反应的的试剂，例如EDCI来制备其中X为SCO或OCO的式(I)的化合物(Pottorf，R.S.；Szeto，P.Handbookof Reagents for Organic Synthesis：Activating Agents and Protecting Groups；Pearson，A.J.，Roush，W.R.编辑；Wiley：Chichester，1999；pp 186-188)。所述醇和硫醇(IV)，以及酸(V)或可商购或采用已知技术直接制备。
路线2

如路线3所示，可通过用合适的烷基卤或磺酸酯(VI)与合适的硫醇或醇(IV)(其中E为S或O，LG为氯、溴、碘、烷基磺酸酯或芳烃磺酸酯)烷基化来制备其中X为S或O的式(I)的化合物。一般采用碱如叔丁醇钾进行反应(Hall，S.E.等人，J.Med.Chem.1989，32，974-984)。醇和硫醇(IV)以及烷基卤或磺酸酯(VI)或可商购或采用已知技术容易地制得。其中X为SO或SO2的式(I)的化合物可容易地由通过用如mCPBA氧化其中X为S的式(I)的化合物得到(Fyfe，M.C.T.等人，国际专利公布WO04/72031)。
路线3

如路线4所示，其中W为C2-3亚烷基的式(I)的化合物可通过合适的磷鎓盐(VII)与合适的醛(VIII)之间的维蒂希反应制备，其中m为1或2，且n为0或1，条件是m+n＜3。作为选择，路线4中所述的方法，其中W为C2-3亚烷基的式(I)的化合物可通过合适的醛(IX)与合适的磷鎓盐(X)之间的维蒂希反应制备，如路线5所示，其中q为0或1且r为1或2，条件是q+r＜3。在合适的碱如NaOMe或LiHMDS存在下进行反应(March，J.Advanced Organic Chemistry，第四版；Wiley：New York，1992；pp956-963)。所述磷鎓盐(VII)和(X)以及醛(VIII)和(IX)或可商购或采用已知技术容易地制得。其中W为C2-3亚烷基的式(I)的化合物可由其中W为C2-3亚烯基的式(I)的化合物通过用例如钯炭作为催化剂的氢化反应合成。
路线4

路线5

如路线6所示，其中W为键，X为S或O，且基团Z未被取代或被CN取代的式(I)的化合物可通过合适的杂芳基卤(XI)缩合制备，其中用合适的醇或硫醇(III)，其中Hal代表卤素，E为S或O。该反应在合适的碱性体系存在下进行，如在三(3，6-二氧杂庚基)胺存在下的氢氧化钾和碳酸钾(Ballesteros，P.；Claramunt，R.M.；Elguero，J.Tetrahedron 1987，43，2557-2564)。所述杂芳基卤(XI)和醇/硫醇(III)或可商购或采用已知技术容易地制备。
路线6

其中G为NC(O)OR4、NC(O)NR4R5、NC(O)R4、或N-C(O)C(O)OR4的式(I)的化合物可通过路线7所示的路线制备，其中式(XII)的胺与式(XIII)的酰氯缩合，其中A为O、NR5、键或C(O)O。该反应在合适的碱例如三乙胺存在下进行(Picard，F.等人，J.Med.Chem.2002，45，3406-3417)。其中G为NCONR4R5且R5为氢的式(I)的化合物还可通过将胺(XII)与合适的异氰酸盐O＝C＝N-R4反应来制备(Boswell，R.F.，Jr.等人，J.Med.Chem.1974，17，1000-1008)。其中G为N-C1-4亚烷基-C(O)OR4的式(I)的化合物可通过将胺(XII)与合适的α-卤代酯进行烷基化来制备(Rooney，C.S.等人，J.Med.Chem.1983，26，700-714)。胺(XII)一般衍生自其N-叔丁氧羰基前体(通过路线1-6列出的路线之一制备)用酸如三氟乙酸脱保护(Fyfe，M.C.T.等人，国际专利公布WO04/72031)。
路线7

如路线8中所示，其中G为N-杂芳基的式(I)的化合物可通过将胺(XII)与式(XIV)的杂芳基氯缩合制备(Barillari，C.等人，Eur.J.Org.Chem.2001，4737-4741；Birch，A.M.等人，J.Med.Chem.1999，42，3342-3355)。
路线8

其中基团Z被CN取代的式(I)的化合物可由相应的未取代的Z基团通过Reissert反应制备(Fife，W.K.J.Org.Chem.1983，48，1375-1377)。类似的反应可被用于制备其中Z被卤素取代的化合物(Walters，M.A.；Shay，J.J.Tetrahedron Lett.1995，36，7575-7578)。所述其中Z被卤素取代的化合物可通过过渡金属催化的交联偶合反应被转化为相应的其中Z被C1-4烷基取代的化合物(Fürstner，A.等人，J.Am.Chem.Soc.2002，124，13856-13863)。
可通过类似于上述的方法或者通过本领域已知的方法制备其他式(I)的化合物。
式(I)的化合物的制备的进一步细节见实施例。
式(I)的化合物可以单独制备或者作为包含至少2种，例如5-1000种式(I)的化合物，更优选10-100种式(I)的化合物的化合物库来制备。可利用本领域技术人员已知的方法利用溶液或固相化学，通过组合的“分裂和混合”方法或者通过多重平行合成(multiple parallel synthesis)来制备化合物库。
在式(I)的化合物的合成期间，中间体化合物中的不稳定官能团如羟基、羧基和氨基可被保护。保护基可以在合成式(I)的化合物的任何阶段除去，或者可以存在于最终的式(I)的化合物上。关于可保护各种不稳定官能团的方法以及裂解所得到的被保护的衍生物的方法的全面论述在例如Protective Groups in Organic Chemistry，T.W.Greene及P.G.M.Wuts，(1991)，Wiley-Interscience，New York，第2版中给出。
如上述定义的任何新的中间体及其在合成式(I)的化合物中的用途也因此包括在本发明的范围内，例如式(XII)的化合物：

或其盐或被保护的衍生物，其中基团Z、W、X、Y、Rx、d和e为如上对于式(I)的化合物所定义。
如上文所示，式(I)的化合物用作GPR119激动剂，例如用于治疗和/或预防肥胖和糖尿病。对于这样的应用，式(I)的化合物会通常以药物组合物的形式给药。
本发明还提供了式(I)的化合物或其药学可接受的盐，其用作药物。
本发明还提供了包含式(I)的化合物与药学可接受的载体的药物组合物。
优选地，所述组合物由药学可接受的载体和无毒的治疗有效量的式(I)的化合物或其药学可接受的盐组成。
此外，本发明还提供了药物组合物，其通过调节GPR119治疗疾病例如通过调节过饱导致预防性地或治疗性地治疗肥胖，或用于治疗糖尿病，所述药物组合物包含药学可接受的载体和无毒的治疗有效量的式(I)的化合物或其药学可接受的盐。
所述药物组合物可以任选地包含其他治疗性成分或辅剂。所述组合物包括适于口服、直肠、局部以及肠胃外(包括皮下、肌内以及静脉内)给药的组合物，但在任何给定的情况下，最合适的途径将取决于特定的主体以及正被给药的活性成分所用于治疗的病症的性质和严重性。所述药物组合物可方便地采用单位剂量的形式并通过药学领域熟知的任一方法制备。
实际上，可以依照常规药物混合技术将式(I)的化合物或其药学可接受的盐作为活性成分与药物载体充分混合。根据给药(如口服或肠胃外(包括静脉内))所需的制剂形式不同，该载体可以采取多种不同的形式。
因此，所述药物组合物可以作为适于口服给药的离散单位呈现，例如各自包含预定量的活性成分的胶囊剂、扁囊剂或片剂。此外，所述组合物可作为散剂、颗粒剂、溶液剂、含水液体中的混悬剂、非水液体、水包油型乳剂或者油包水型液体乳剂呈现。除了上面列出的常见剂型以外，式(I)的化合物或其药学可接受的盐还可通过控释方式和/或递送装置给药。所述组合物可通过任何药学方法制备。通常，这样的方法包括将活性成分与作为一种或多种必需成分的载体相接触的步骤。通常，所述组合物通过将活性成分与液体载体或分散良好的固体载体或其两者均匀、充分地混合来制备。之后可以将该产品便利地制成期望呈现的形式。
式(I)的化合物或其药学可接受的盐还可与一种或多种其他治疗活性化合物一同被包含在药物组合物中。
所采用的药物载体可以是例如固体、液体或气体。固体载体的实例包括乳糖、石膏粉、蔗糖、滑石、明胶、琼脂、果胶、阿拉伯胶、硬脂酸镁以及硬脂酸。液体载体的实例为糖浆、花生油、橄榄油和水。气体载体的实例包括二氧化碳和氮气。
在制备用于口服剂型的组合物中，可以使用任何便利的药物介质。例如水、二醇、油、醇、调味剂、防腐剂、着色剂等可用于形成口服液体制剂例如混悬剂、酏剂以及溶液剂；而载体如淀粉、糖、微晶纤维素、稀释剂、粒化剂、润滑剂、粘合剂、崩解剂等可用于形成口服固体制剂例如散剂、胶囊剂和片剂。当使用固体药物载体时，由于它们便于给药，因此片剂和胶囊剂为优选的口服剂量单位。任选地，片剂可通过标准的含水或无水技术进行包衣。
包含本发明的组合物的片剂可以任选地与一种或多种助剂或辅剂通过压制或模塑来制备。压制片剂可以在适当的机器中通过压制任选地与粘合剂、润滑剂、惰性稀释剂、表面活性剂或分散剂混合的自由流动形式如粉末或颗粒形式的活性成分来制备。模塑片剂可以通过在适当的机器中，将经惰性液体稀释剂湿润的粉末状化合物的混合物进行模塑制得。各种片剂优选地包含约0.05mg至约5g的活性成分，且各种扁囊剂或胶囊剂优选包含约0.05mg至约5g的活性成分。
例如，旨在向人类口服给药的制剂可以包含约0.5mg至约5g的活性剂，所述活性剂与占组合物总量的约5％至约95％不等的适当且方便量的载体材料混合。单位剂量形式通常会包含约1mg至约2g的活性成分，典型地为25mg、50mg，、100mg、200mg、300mg、400mg、500mg、600mg、800mg或1000mg。
适于肠胃外给药的本发明的药物组合物可以制备为活性化合物在水中的溶液剂或混悬剂的形式。可包含适当的表面活性剂，例如：羟丙基纤维素。也可以在甘油、液体聚乙二醇及其在油中的混合物中制备分散体。此外，可以包含防腐剂以防止微生物的有害生长。
适于注射应用的本发明的药物组合物包括无菌水溶液或分散体。此外，所述组合物可以为用于临时制备这样的无菌可注射溶液或分散体的无菌粉末的形式。在所有情况下，最终的可注射形式必需是无菌的并且必需是有效的便于注射的流体。所述药物组合物在生产和储存条件下必须是稳定的；因此，优选地应该在抗微生物如细菌和真菌的污染作用下保存。所述载体可为含有例如水、乙醇、多元醇(如：甘油、丙二醇和液体聚乙二醇)、植物油及其适当的混合物的溶剂或者分散介质。
本发明的药物组合物可以为适于局部使用的形式，例如：气雾剂、乳膏剂、软膏剂、洗剂、撒粉等。此外，所述组合物可为适用于经皮装置的形式。这些制剂可使用式(I)的化合物或其药学可接受的盐通过常规加工方法制备。例如：乳膏剂或软膏剂通过混合亲水材料和水以及约5重量％至约10重量％的化合物以产生具有所需稠度的乳膏剂或软膏剂来制备。
本发明的药物组合物可以为其中载体为固体的适于直肠给药的形式。优选所述混合物形成单位剂量的栓剂。适当的载体包括可可脂以及通常用于本领域的其他材料。可方便地通过首先将该组合物与软化或融化的载体混合，之后冷却并在模子中成型来形成栓剂。
除了上述载体成分外，如果合适，上述药物制剂可包含一种或多种其他载体成分，例如：稀释剂、缓冲剂、调味剂、粘合剂、表面活性剂、增稠剂、润滑剂、防腐剂(包括抗氧化剂)等。此外，还可以包含其他辅剂以使该制剂与目标接受者的血液等渗。包含式(I)的化合物或其药学可接受的盐的组合物也可以制备成散剂或液体浓缩剂的形式。
通常，近似每天0.01mg/kg至约150mg/kg体重的剂量水平可用于治疗上述病症，或可选地每名患者每天约0.5mg至约7g。例如：通过以每天每公斤体重约0.01至50mg，或者可选地每名患者每天约0.5mg至约3.5g的化合物给药可以有效治疗肥胖。
然而，应理解，对于任何特定患者的具体剂量水平将取决于许多因素，包括：年龄、体重、一般健康、性别、饮食、给药时间、给药途径、排泄率、药物组合以及经历治疗的特定疾病的严重性。
式(I)的化合物可用于治疗其中GPR119起作用的疾病或病症。
因此，本发明还提供治疗其中GPR119起作用的疾病或病症的方法，其包括向有此需要的受试者给药有效量的式(I)的化合物或其药学可接受的盐的步骤。GPR119在其中起作用的疾病或病症包括肥胖和糖尿病。在本申请的上下文中，肥胖的治疗意在涵盖例如通过降低食欲和体重、维持体重的减轻及防止反弹来治疗诸如肥胖以及与食物摄取过多相关的其他饮食失调的疾病或病症以及糖尿病(包括1型和2型糖尿病、葡萄糖耐量降低、胰岛素抵抗以及糖尿病并发症例如神经病、肾病、视网膜病、白内障、心血管并发症以及脂血异常(dyslipidaemia))。以及治疗对摄取的脂肪的敏感性异常从而导致功能性消化不良的患者。本发明的化合物也可用于治疗代谢疾病，例如：代谢综合征(X综合征)、葡萄糖耐量降低、高脂血症、高甘油三酯血症、高胆固醇血症、低HDL水平和高血压。
本发明的化合物可提供与用于治疗上述病症的经由不同机理起作用的化合物相比的优点，因为它们可提供β细胞保护、增加的cAMP和胰岛素分泌以及缓慢的胃排空。
本发明还提供调节过饱的方法，其包括向有此需要的个体给药有效量的式(I)的化合物或其药学可接受的盐的步骤。
本发明还提供治疗肥胖的方法，其包括向有此需要的个体给药有效量的式(I)的化合物或其药学可接受的盐的步骤。
本发明还提供治疗糖尿病(包括1型和2型糖尿病，特别是2型糖尿病)的方法，其包括向有此需要的患者给药有效量的式(I)的化合物或其药学可接受的盐的步骤。
本发明还提供治疗代谢综合征(X综合征)、葡萄糖耐量降低、高脂血症、高甘油三酯血症、高胆固醇血症、低HDL水平或高血压的方法，其包括向有此需要的患者给药有效量的式(I)的化合物或其药学可接受的盐的步骤。
本发明还提供用于治疗上述定义的病症的式(I)的化合物或其药学可接受的盐。
本发明还提供式(I)的化合物或其药学可接受的盐在制备用于治疗上述定义的病症的药物中的应用。
在本发明的方法中，术语“治疗”包括治疗性和预防性治疗两者。
式(I)的化合物或其药学可接受的盐可以单独给药或者与一种或多种其他治疗活性化合物联合给药。所述其他治疗活性化合物可以用于治疗与式(I)的化合物所治疗的相同或不同的疾病或病症。所述治疗活性化合物可以同时给药、连续给药或者单独给药。
式(I)的化合物可与用于治疗肥胖和/或糖尿病的其他活性化合物一起给药，例如：胰岛素和胰岛素类似物、胃脂肪酶抑制剂、胰脂肪酶抑制剂、磺酰脲及类似物、双胍类、α2激动剂、格列酮类、PPAR-γ激动剂、混合的PPAR-α/γ激动剂、RXR激动剂、脂肪酸氧化抑制剂、α-葡糖苷酶抑制剂、二肽基肽酶IV抑制剂、GLP-1激动剂如GLP-1类似物和模拟物、β-激动剂、磷酸二酯酶抑制剂、降脂药、糖原磷酸化酶抑制剂、减肥药如胰脂肪酶抑制剂、MCH-1拮抗剂和CB-1拮抗剂(或反相激动剂)、淀粉状蛋白毒素(amylin)拮抗剂、脂氧合酶抑制剂、生长抑素(somostatin)类似物、葡糖激酶活化剂、胰高血糖素拮抗剂、胰岛素信号传导激动剂、PTP1B抑制剂、糖异生抑制剂、antilypolitic剂、GSK抑制剂、甘丙肽(galanin)受体激动剂、厌食药、CCK受体激动剂、瘦素、血清素能/多巴胺能减肥药、重摄取抑制剂如西布曲明、CRF拮抗剂、CRF结合蛋白、拟甲状腺素化合物、醛糖还原酶抑制剂、糖皮质激素受体拮抗剂、NHE-1抑制剂或山梨醇脱氢酶抑制剂。
包括式(I)的化合物或其药学可接受的盐以及至少一种其他减肥药的给药的联合治疗代表本发明的另一方面。
本发明还提供治疗哺乳动物如人类中的肥胖的方法，该方法包括向有此需要的哺乳动物给药有效量的式(I)的化合物或其药学可接受的盐以及另一种减肥药。
本发明还提供式(I)的化合物或其药学可接受的盐以及另一种减肥药用于治疗肥胖的用途。
本发明还提供式(I)的化合物或其药学可接受的盐在制备用于与另一种减肥药联合使用以治疗肥胖的药物中的用途。
式(I)的化合物或其药学可接受的盐以及其他减肥药可以共同给药(co-administration)、连续给药或者单独给药。
共同给药包括给药包含式(I)的化合物或其药学可接受的盐和其他减肥药的制剂，或者同时或单独给药各药物的不同制剂。当式(I)的化合物或其药学可接受的盐以及其他减肥药的药理学特性允许时，两种药物共同给药可能是优选的。
本发明还提供式(I)的化合物或其药学可接受的盐与另一种减肥药在制备用于治疗肥胖的药物中的用途。
本发明还提供包含式(I)的化合物或其药学可接受的盐与另一种减肥药以及药学可接受的载体的药物组合物。本发明还涵盖这样的组合物在上述方法中的应用。
GPR119激动剂与中枢作用的减肥药组合具有特别用途。
根据本发明的该方面用于组合治疗的其他减肥药优选为CB-1调节剂，如：CB-1拮抗剂或反向激动剂。CB-1调节剂的实例包括SR141716(利莫那班)和SLV-319((4S)-(-)-3-(4-氯苯基)-N-甲基-N-[(4-氯苯基)磺酰基]-4-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-1-甲酰胺)，以及在EP576357、EP656354、WO03/018060、WO03/020217、WO03/020314、WO03/026647、WO03/026648、WO03/027076、WO03/040105、WO03/051850、WO03/051851、WO03/053431、WO03/063781、WO03/075660、WO03/077847、WO03/078413、WO03/082190、WO03/082191、WO03/082833、WO03/084930、WO03/084943、WO03/086288、WO03/087037、WO03/088968、WO04/012671、WO04/013120、WO04/026301、WO04/029204、WO04/034968、WO04/035566、WO04/037823、WO04/052864、WO04/058145、WO04/058255、WO04/060870、WO04/060888、WO04/069837、WO04/069837、WO04/072076、WO04/072077、WO04/078261和WO04/108728以及其中所公开的文献中公开的那些化合物。
显示GPR119在其中起作用的其他疾病或病症包括WO00/50562和US6,468,756中描述的那些，例如：心血管疾病、高血压、呼吸疾病、妊娠异常、胃肠道病症、免疫病症、肌骨骼病症、抑郁、恐惧症、焦虑症、情绪障碍和阿尔茨海默病。
包括但不限于本说明中所引用的专利和专利申请的所有出版物都引入本文作为参考，正如分别具体地说明各单独的出版物都全文引入本文作为参考一样。
本发明现在将参考下列的实施例来描述，这些实施例是为说明性的目的而不该解释为对本发明范围的限制。
实施例
材料和方法
除非另有说明，在SiO2(40-63目)上进行柱色谱法。LCMS数据如下获得：Atlantis 3μC18柱(3.0×20.0mm，流速＝0.85L/min)，用含有0.1％HCO2H的H2O-CH3CN溶液洗脱6分钟，在220nm进行UV检测。梯度信息：0.0-0.3分钟保持在100％H2O；0.3-4.25分钟：梯度升至10％H2O-90％CH3CN；4.25-4.4分钟：梯度升至100％CH3CN；4.4-4.9分钟：保持在100％CH3CN；4.9-6.0分钟：回复至100％H2O。使用电喷雾离子源以正(ESI+)或负(ESI-)离子模式获得质谱。
缩写与简称：Ac：乙酰基；n-Bu：正丁基；t-Bu：叔丁基；dba：二亚苄基丙酮；DBU：1，8-二氮杂二环[5.4.0]十一-7-烯；DME：1，2-二甲氧基乙烷；DMF：二甲基甲酰胺；Et：乙基；HATU：O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N-四甲基脲六氟磷酸盐；HBTU：O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N-四甲基脲六氟磷酸盐；h：小时(s)；IH：异己烷；mCPBA：3-氯过氧苯甲酸；Me：甲基；Ph：苯基；RP-HPLC：反相高效液相色谱；rt：室温；RT：保留时间；THF：四氢呋喃；XantPhos：9，9-二甲基-4，5-双(二苯膦基)呫吨。
在别处已描述了下列化合物的合成：1-(2-溴乙基)-4-甲硫基苯：AveryM.A.等人，J.Med.Chem.，2003，46，4244-4258；2-氯-5-甲氧基嘧啶：Chesterfield J.H.等人，Pyrimidines.Part XI，J.Chem.Soc.，1960，4590-4596；2-氯-5-甲基嘧啶：US2002/0165241；4-(2-乙氧羰基-1-甲基乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：Kaneko，T.等人，美国专利6,518,423；(3-氟-4-甲硫基苯基)乙酸乙酯：Fyfe，M.C.T.等人，WO 04/072031；3-氟-4-甲硫基苯酚和3-氟-4-甲硫基苯胺：WO2002/083643；4-羟基-4-(3-羟基丙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：Cooper L.C.等人，Bioorg.Med.Chem.Lett.，2002，12，1759-1763；4-(3-羟基-2-甲基丙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：Caldwell，C.等人，WO00/059503；4-(3-羟基丙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：Siegel M.G.等人，Tetrahedron，1999，55，11619-11640；(4-甲氧羰基苄基)三苯基膦溴化物：Gross J.等人，Angew.Chem.(GE)，1995，107，523-526；(4-甲硫基苄基)磷酸二乙酯和(4-甲磺酰基苄基)磷酸二乙酯：Ulman A.等人，J.Am.Chem.Soc.，1990，112，7083-7090；4-(3-氧代丙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：Keenan，R.M.等人，J.Med.Chem.1999，42，545-559；3-哌啶-4-基丙基乙酸酯：Askew，B.等人，美国专利5,559,127。所有其他化合物可商购。
制备例1：4-[4-(4-甲磺酰基苯基)丁基]哌啶

将三氟乙酸(3.0mL)加至在CH2Cl2(10mL)中的4-[4-(4-甲磺酰基苯基)丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯的搅拌溶液中(实例46，500mg，1.27mmol)。0.5小时后，除去溶剂，残余物在CH2Cl2(20mL)和饱和Na2CO3(10mL)水溶液间分配。水相用CH2Cl2(20mL)再萃取，用盐水(10mL)洗涤合并的有机物并干燥(MgSO4)。除去溶剂以得到标题化合物：RT＝2.29分钟，m/z(ES+)＝296.2[M+H]+。
制备例2：4-[3-(二乙氧基磷酰基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

将4-(2-氧代乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1g，4.4mmol)和二(二乙氧基氧膦基)甲烷(1.09mL，4.4mmol)溶于CH2Cl2(6.4mL)中并加入50％w/vNaOH水溶液(6.4mL)。搅拌10分钟后，将反应混合物用水(15mL)稀释并用EtOAc(4×30mL)萃取。干燥(MgSO4)合并的有机物并蒸发获得4-[(E)-3-(二乙氧基磷酰基)烯丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯：δH(CDC13)1.08(q，2H)1.32(t，6H)，1.45(s，9H)，1.55-1.67(m，3H)，2.17(t，2H)，2.67(t，2H)，4.03-4.19(m，6H)，5.66(dd，1H)，6.72(m，1H)。将该石蜡样品(1.64 g，4.54mmol)溶解在EtOH(15mL)中并加入钯炭(10％，164 mg，155μmol)。用H2交换空气，将混合物搅拌60小时。通过硅藻土垫过滤，用MeOH(4×5mL)洗涤，除去溶剂并通过柱色谱法(IH-EtOAc 1∶4)纯化残余物以得到标题膦酸酯：δH(CDCl3)1.08(dq，2H)，1.30-1.47(m，3H)，1.32(t，6H)，1.45(s，9H)，1.61-1.73(m，6H)，2.05(t，2H)，4.04-4.13(m，6H)。
制备例3：4-甲硫基-3-三氟甲基苯甲醛

用甲硫醇钠(365mg，5.21mmol)处理在无水DMF(7mL)中的4-氟-3-三氟甲基苯甲醛(1.0g，5.21mmol)溶液，并将得到的溶液室温搅拌18小时。蒸发DMF，用Et2O(80mL)吸收残余物并用水(30mL)和饱和Na2CO3(30mL)水溶液洗涤该乙醚溶液，接着干燥(MgSO4)。除去溶剂并通过柱色谱法(IH-EtOAc 20∶1)纯化残余物以得到标题化合物：δH(CDCl3)2.61(s，3H)，7.46(d，1H)，7.98(d，1H)，8.11(s，1H)，9.99(s，1H)。
使用制备例3描述的方法，由相应的芳基氟制备表1中列出的醛。
表1

制备例8：N-(4-甲硫基苯基)-2-硝基苯磺酰胺

将无水CH2Cl2(5mL)中的2-硝基苯磺酰氯(1.145g，5.17mmol)溶液以逐滴的方式加入无水CH2Cl2(15mL)中的4-(甲硫基)苯胺(0.685g，4.92mmol)和吡啶(540μL，6.64mmol)的搅拌溶液中。1.5小时后将该溶液蒸发至干，残余物在EtOAc(120mL)和饱和NH4Cl(50mL)水溶液间分配。分离有机相，用盐水(20mL)洗涤并干燥(MgSO4)。将溶剂减少到少量体积并通过硅胶短柱，用EtOAc洗脱。调节EtOAc的体积至15mL，加入IH(50mL)诱导标题化合物结晶：δH(CDCl3)2.47(s，3H)，7.15(d，2H)，7.17(d，2H)，7.22(s，1H)，7.62(t，1H)，7.73(t，1H)，7.84(d，1H)，7.89(d，1H)。
制备例9：4-(3-甲磺酰氧基丙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

将无水CH2Cl2(4.5 mL)中的4-(3-羟基丙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(244mg，1mmol)和干NEt3(280μL，2mmol)的搅拌溶液冷却至0℃并以逐滴的方式引入甲磺酰氯(93μL，1.2mmol)。反应升至室温并继续搅拌30分钟。用EtOAc(50mL)稀释混合物并用0.5 MHCl(10mL)水溶液、水(10mL)、饱和的碳酸氢钠(10mL)水溶液和盐水(10mL)洗涤，接着干燥(MgSO4)。蒸发溶剂以得到标题化合物：δH(CDCl3)1.10(dq，2H)，1.33-1.41(m，3H)，1.46(s，9H)，1.65(d，2H)，1.78(dt，2H)，2.68(t，2H)，3.01(s，3H)，4.09(m，2H)，4.22(t，2H)。
制备例10：4-(2-甲磺酰氧基乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

采用与制备例9中所述的相同方法，将4-(2-羟基乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯转化为相应的甲磺酸酯：δH(CDCl3)1.14(dq，2H)，1.46(s，9H)，1.62-1.73(m，5H)，2.70(t，2H)，3.02(s，3H)，4.10(m，2H)，4.29(t，2H)。
制备例11：4-(4-氧代丁基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

将在CH2Cl2(3mL)中的戴斯-马丁氧化剂(Dess-Martin periodinane)(165mg，391μmol)搅拌悬浮液在冰上冷却，加入在CH2Cl2(2mL)中的4-(4-羟基丁基)哌啶-1-羧酸叔丁酯溶液。在室温下继续搅拌1小时，蒸发溶剂，用乙醚(20mL)吸收残余物。有机相用盐水(3mL)洗涤、干燥(MgSO4)并蒸发。通过柱色谱法(IH-Et2O 2∶1)纯化残余物以得到标题醛：δH(CDCl3)1.09(dq，2H)，1.25-1.30(m，2H)，1.36-1.45(m，1H)，1.46(s，9H)，1.62-1.70(m，4H)，2.44(t，2H)，2.68(t，2H)，4.08(m，2H)，9.78(s，1H)。
制备例12：4-甲磺酰基苯硫酚

向在DMF(10mL)中的4-氟苯基甲基砜(1.74g，9.99mmol)的溶液中一次性加入固体氢硫化钠一水合物(0.88g，11.95mmol)。搅拌18小时后，加入水(20mL)和2MHCl(20mL)水溶液，用EtOAc(2×100mL)萃取得到的酸性溶液。有机相用水(2×50mL)和盐水(100mL)洗涤，接着干燥(MgSO4)并蒸发。向棕色残余物中加入乙醚(60mL)并用2M NaOH水溶液(50mL)萃取该混合物。分离水相并用浓HCl酸化至pH1，用EtOAc(2×50mL)萃取。干燥(MgSO4)后，蒸发有机相以得到标题化合物：δH(CDCl3)3.06(s，3H)，3.73(s，1H)，7.43(d，2H)，7.80(d，2H)。
制备例13：2-羟基-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯

将CH2Cl2(60mL)中的4-羟基-4-(3-羟基丙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.0g，3.86mmol)的搅拌溶液在冰浴上冷却，加入Dess-Martin五价碘(1.8g，4.24mmol)。1小时后，用乙醚(120mL)稀释反应混合物并用2M NaOH水溶液(70mL)洗涤。水相用乙醚(60mL)萃取，合并的有机物用水(50mL)和盐水(50mL)洗涤，接着干燥(MgSO4)。除去溶剂，残余物通过柱色谱法(IH-EtOAc 3∶2)纯化以得到标题化合物：δH(CDCl3)1.48(s，9H)，1.48-1.62(m，2H)，1.62-1.77(m，3H)，1.91-2.08(m，3H)，3.35(m，2H)，3.56(m，2H)，5.51(d，1H)。
制备例14：4-(3-乙氧羰基-2-氧代丙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

将THF(40mL)中的2-(1-叔丁氧羰基哌啶-4-基)乙酸(5g，20.58mmol)和羰基二咪唑(3.94g，24.28mmol)的溶液在室温搅拌5小时，接着加至预先制备的已在THF(50mL)中加热回流5小时的乙基丙二酸钾盐(4.66g，27.37mmol)和氯化镁(1.96g，20.58mmol)的混合物中。在室温下继续搅拌得到的反应混合物18小时，而后将其倒入冰水(250mL)中。加入足量浓HCl使水相pH为7。接着用EtOAc(2×300mL)萃取该溶液，合并的有机相用盐水(50mL)洗涤并干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，残余物通过柱色谱法(IH-EtOAc 4∶1)纯化，得到标题化合物：δH(CDCl3)1.12(dq，2H)，1.29(t，3H)，1.46(s，9H)，1.68(d，2H)，2.03(m，1H)2.48(d，2H)，2.73(t，2H)，3.42(s，2H)，4.07(m，2H)，4.20(q，2H)。
制备例15：2-氟-4-羟基苯甲酸甲酯

将三甲基甲硅烷基重氮甲烷(7mL在己烷中的2M溶液，14mmol)以逐滴的方式加至在甲苯(15mL)中的2-氟-4-羟基苯甲酸(2.0g，12.8mmol)的搅拌溶液中。5分钟后加入AcOH(75μL)和水(20mL)，分离水相并用EtOAc(50mL)萃取。用1M NaOH水溶液(3×30mL)萃取合并的有机物并用HCl水溶液酸化合并的含水萃取物至pH2。用EtOAc(100mL)萃取得到的悬浮液，干燥(MgSO4)，并蒸发以得到标题酯：δH(DMSO)3.78(s，3H)，6.63(dd，1H)，6.70(dd，1H)，7.75(t，1H)，10.79(s，1H)。
制备例16：4-(2-氧代乙氧基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

在0℃，向在无水THF(30mL)中的4-羧基甲氧基哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.50g，5.79mmol)的搅拌溶液中缓慢加入硼烷(11.58mL，于THF中的1.0M溶液，11.58mmol)。4小时后，通过缓慢加入饱和NaHCO3(30mL)水溶液终止反应并用EtOAc(2×50mL)萃取。用盐水(50mL)洗涤合并的有机物，干燥(MgSO4)，蒸发并通过柱色谱法(EtOAc)纯化以得到4-(2-羟基乙氧基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：δH(CDCl3)1.46(s，9H)，1.52(m，2H)，1.86(m，2H)，2.06(t，1H)，3.08(ddd，2H)，3.50(tt，1H)，3.58(t，2H)，3.71-3.80(m，4H)。用一次性加入的Dess-Martin五价碘(381mg，900μmol)处理在CH2Cl2(5mL)中的醇溶液(200mg，820μmol)。室温搅拌2小时后，将反应混合物在CH2Cl2(30mL)和饱和NaHCO3(15mL)水溶液间分配。将水相用CH2Cl2(2×30mL)进一步萃取，合并的有机物用盐水(10mL)洗涤并干燥(MgSO4)。除去溶剂，通过柱色谱法(IH-EtOAc 1∶1)纯化残余物以得到标题化合物：δH(CDCl3)1.44(s，9H)，1.56(m，2H)，1.85(m，2H)，3.09(ddd，2H)，3.53(tt，1H)，3.77(m，2H)，4.10(s，2H)，9.72(s，1H)。
制备例17：4-[4-(4-氨基苯基)丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

分部分地用NaH(116mg的60％的NaH，分散在油中，2.90mmol)处理在无水二甲氧基乙烷(15mL)中的二乙基(4-硝基苄基)磷酸盐(798mg，2.90mmol)的搅拌溶液。5分钟后，加入在二甲氧乙烷(4mL)中的4-(3-氧代丙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(500mg，2.07mmol)，继续搅拌1.5小时。通过加入饱和NH4Cl(10mL)水溶液终止反应并将混合物用EtOAc(2×80mL)萃取。用盐水(15mL)洗涤合并的有机相，干燥(MgSO4)，蒸发并将通过柱色谱(IH-EtOAc 4∶1)纯化残余物，得到4-[4-(4-硝基苯基)丁-3-烯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯：RT＝4.45分钟；m/z(ES+)＝361.2[M+H]+。将该石蜡样品(613mg，1.70mmol)溶解在EtOH(30mL)和EtOAc(30mL)的混合物中，加入在EtOH(1mL)中的钯炭浆液(10％，61mg，58μmol)。导入H2，该反应在室温搅拌18小时。在硅藻土垫上过滤后，除去溶剂以得到标题苯胺：RT＝3.19分钟；m/z(ES+)＝333.2[M+H]+。
制备例18：4-[3-(4-氨基苯基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

标题化合物由(4-硝基苄基)磷酸二乙酯和4-(2-氧代乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯采用制备例17中描述的方法制备：RT＝3.01分钟；m/z(ES+)＝319.2[M+H]+。
制备例19：4-[3-(4-乙硫基-3-氟苯氧基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

在20℃，将在无水PhMe(80mL)中的4-溴-3-氟苯酚(2.0g，10.5mmol)、二叔丁基偶氮二羧酸酯(3.6g，15.7mmol)、PPh3(4.1g，15.7mmol)和4-(3-羟基丙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(2.5g，10.5mmol)的混合物搅拌16小时。该反应用1M HCl终止，有机相用饱和Na2CO3水溶液和盐水洗涤，接着干燥(MgSO4)。过滤该溶液并浓缩以得到油状物，用IH和Et2O处理该油状物，沉淀出Ph3PO。通过过滤除去Ph3PO，浓缩溶液并通过柱色谱法(EtOAc-IH，1∶9)纯化残余物以提供4-[3-(4-溴-3-氟苯氧基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯：m/z(ES+)＝416.0[M+H]+。将该芳基溴(107mg，260μmol)，Pd2(dba)3(24mg，26μmol)和XantPhos(17mg，29μmol)在无水二甲苯(1.5mL)中的混合物在氩气下搅拌20分钟。加入NaSEt(26mg，310μmol)并将该反应物加热回流22小时。一冷却至室温，就将该反应物用EtOAc稀释并用水和盐水洗涤。干燥(MgSO4)该溶液、过滤并浓缩获得胶状物，该胶状物通过柱色谱法(CH2Cl2-IH[1∶1]，接着CH2Cl2，再CH2Cl2-EtOAc[9∶1])进行纯化以得到标题化合物：m/z(ES+)＝398.1[M+H]+。
使用类似于制备例19中描述的方法，通过Mitsunobu反应制备列于表2的芳基溴。
表2

制备例24：4-(2-溴乙基)-2-氟-1-甲硫基苯

在0℃，将在无水THF(13mL)中的(3-氟-4-甲硫基苯基)乙酸乙酯(2.00g，8.8mmol)溶液加至在无水THF(20mL)中的LiAlH4(0.35g，9.2mmol)的搅拌悬浮液中。将该反应升温至室温后，搅拌30分钟。加入更多LiAlH4(16mg，0.4mmol)并继续搅拌30分钟。将反应冷却至0℃，接着用饱和Na2SO4水溶液(25mL)冷却，并通过硅藻土过滤。残余物在真空下浓缩并将残余物在H2O和EtOAc间分配。再将水相用EtOAc萃取，干燥(MgSO4)合并的有机萃取物，过滤并浓缩。柱色谱法得到2-(3-氟-4-甲硫基苯基)乙醇：m/z(ES+)＝187.0[M+H]+。在无水乙醚(47mL)和MeCN(16mL)中的该醇(1.16g，6.24mmol)的搅拌溶液用PPh3(4.91g，18.7mmol)和咪唑(1.27g，18.7mmol)处理，接着用Br2(0.96mL，18.7mmol)处理。2小时后，真空除去溶剂，将残余物通过柱色谱法(EtOAc-IH，1∶99)纯化以得到标题化合物：RT＝3.92分钟。
制备例25：2-氟-4-羟基苯磺酰胺

将4-氨基-2-氟苯磺酰胺(150mg，0.79mmol)分部分地加至冰(2g)和H2SO4(100μL)的搅拌混合物中。向反应中滴加冰水(1mL)中的NaNO2(54mg，0.79mmol)溶液，维持反应温度在0至10℃间。0.5小时后，将反应混合物转移至含H2O(3mL)的滴液漏斗中，接着滴加在水(5mL)和H2SO4(0.5mL)中的CuSO4(500mg，3.15mmol)沸腾溶液。在135℃(浴)下加热反应0.5小时，接着冷却并用EtOAc(2×150mL)萃取。合并的有机层用2MNaOH(2×40mL)萃取。萃取物水溶液用12M HCl酸化至pH3，接着用EtOAc(2×150mL)萃取。干燥(MgSO4)有机萃取物，过滤并浓缩，通过柱色谱法(IH-EtOAc，9∶11)纯化残余物得到标题化合物：δH((CD3)2SO)6.68-6.75(m，2H)，7.39(s，2H)，7.60(t，1H)；m/z(ES-)＝190.1[M-H]-。
制备例26：4-(3-羟基丙基)哌啶-1-羧酸异丙酯

将i-PrOCOCl(1M于PhMe中，28.1mL，28.1mmol)经5分钟加至在无水CH2Cl2(100mL)中的3-哌啶-4-基-丙基乙酸酯(10.0g，54.0mmol)和NEt3(8.1g，80.2mmol)的溶液中。将反应搅拌3小时，接着该混合物用1M HCl(2×)、饱和Na2CO3水溶液和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。过滤该溶液并浓缩，接着用MeOH(50mL)吸收。加入2MNaOH并将反应搅拌4小时。减压除去MeOH并用EtOAc萃取残余物。将有机萃取物干燥(MgSO4)、过滤并浓缩以得到油，通过闪式色谱法(EtOAc-CH2Cl2，1∶1)纯化该油以得到标题化合物：δH(CDCl3)1.05-1.15(m，2H)，1.23(d，6H)，1.25-1.35(m，2H)，1.40-1.50(m，1H)，1.55-1.60(m，2H)，1.65-1.70(m，2H)，2.65-2.75(m，2H)，3.60-3.67(m，2H)，4.05-4.15(br m，2H)，4.90(sept，1H)。
制备例27：4-(3-甲磺酰氧基丙基)哌啶-1-羧酸异丙酯

使用与描述于制备例9中相同的方法，将4-(3-羟基丙基)哌啶-1-羧酸异丙酯(制备例26)转化成相应的甲磺酸酯：m/z(ES+)＝308.1[M+H]+。
制备例28：4-[3-(3-氟-4-甲硫基苯基氨基)丙基]哌啶-1-羧酸异丙酯

采用类似于实施例161概述的方法，将3-氟-4-甲硫基苯胺与4-(3-甲磺酰氧基丙基)哌啶-1-羧酸异丙酯(制备例27)反应，得到标题化合物：m/z(ES+)＝369.0[M+H]+。
制备例29：4-(3-羟基-1-甲基丙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

向0℃的无水THF(10mL)中的4-(2-乙氧羰基-1-甲基乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.0g，3.3mmol)的搅拌溶液中分部分地加入LiAlH4。将该混合物升温至室温并搅拌1小时。用H2O(2.5mL)、2MNaOH(0.25mL)和H2O(2.5mL)终止该反应，接着用EtOAc(2×)萃取。有机萃取物用盐水(3×)洗涤、干燥(MgSO4)、过滤并浓缩以得到标题化合物：δH(CDCl3)0.90(d，3H)，1.15-1.45(m，5H，1.49(s，9H)，1.50-1.80(m，3H)，2.20(s，1H)，2.60-2.70(brm，2H)，3.60-3.80(m，2H)，4.05-4.20(brm，2H)。
制备例30：4-(3-羟基丁基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

在-40℃，将MeMgCl(在THF中，3.0M，1.41mL，4.24mmol)加至在无水THF(10mL)中的4-(3-氧代丙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.93g，3.86mmol)的搅拌溶液中。1小时后再加入MeMgCl(在THF中，3.0M，1.41mL，4.24mmol)，并继续在-40℃再搅拌1小时。用饱和NH4Cl水溶液终止该反应，升温至室温并用CH2Cl2萃取。将有机萃取物干燥(MgSO4)、过滤、浓缩并通过闪式色谱(EtOAc-IH，2∶3)纯化残余物以得到标题化合物：δH(CDCl3)1.05-1.45(m，10H)，1.49(s，9H)，1.65-1.72(m，2H)，2.65-2.75(m，2H)，3.77-3.85(m，1H)，4.05-4.20(m，2H)。
制备例31：4-[3-(4-氨基-3-氟苯氧基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

利用类似于实施例156中概述的方法，3-氟-4-硝基苯酚与4-(3-羟基丙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯的Mitsunobu缩合反应获得4-[3-(3-氟-4-硝基苯氧基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯：δH(CDCl3)1.10-1.20(m，2H)，1.40-1.55(m，12H)，1.67-1.75(m，2H)，1.82-1.92(m，2H)，2.65-2.80(m，2H)，4.00-4.20(m，4H)，6.73-6.80(m，2H)，8.13(t，1H)。用钯炭(10％，0.25g)处理在EtOH(20mL)中的该化合物(1.85g)溶液，将反应在氢气氛下搅拌20小时，之后通过硅藻土过滤。真空浓缩滤液以得到标题化合物：m/z(ES+)＝353.2[M+H]+。
实施例1：4-[(E)-4-(4-甲氧羰基苯基)丁-3-烯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

将(4-甲氧羰基苄基)三苯基鏻溴化物(2.28g，4.64mmol)悬浮于二甲氧基乙烷(13mL)中并向该悬浮液中分部分地加入氢化钠(186mg的60％的NaH，分散在油中，4.64mmol)。搅拌20分钟后，引入在DME(6.5mL)中的4-(3-氧代丙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(800mg，3.31mmol)溶液，并将得到的反应室温搅拌20小时。加入饱和NH4Cl(30mL)水溶液并用EtOAc(2×30mL)萃取该混合物。干燥(MgSO4)合并的有机物，除去溶剂并通过柱色谱法(IH-EtOAc 95∶5，9∶1和4∶1)纯化残余物以得到标题化合物：RT＝4.51分钟；m/z(ES+)＝374.2[M+H]+。
实施例2：4-[4-(4-甲氧羰基苯基)丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

向在EtOH(15mL)中的4-[(E)-4-(4-甲氧羰基苯基)丁-3-烯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例1，280mg，750μmol)的溶液中加入在EtOAc(1mL)中的钯炭浆液(10％，28mg，27μmol)，在氢气氛下剧烈搅拌。60小时后，在硅藻土垫上过滤该混合物，用EtOAc(3×10mL)洗涤，蒸发合并的滤液以得到标题化合物：RT＝4.67分钟；m/z(ES+)＝376.2[M+H]+。
实施例3：4-[4-(4-羧基苯基)丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

用2M氢氧化钠水溶液(1.6mL，3.1mmol)处理在THF(5mL)中的4-[4-(4-甲氧羰基苯基)丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例2，376mg，1mmol)的溶液。加入足量的MeOH以确保搅拌的混合物的均质。18小时后将溶剂减至少量体积，用水(15mL)稀释并用EtOAc(5mL)洗涤该混合物。用2M HCl水溶液酸化该水相至pH4，用NaCl饱和并用EtOAc(50mL)萃取。将有机相干燥(MgSO4)并蒸发以得到标题酸：RT＝4.16分钟；m/z(ES+)＝360.4[M+H]+。
实施例4：4-[4-(4-乙基氨基甲酰基苯基)丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

向在二甲基乙酰胺(0.5mL)中的4-[4-(4-羧基苯基)丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例3，40mg，110μmol)的溶液中依次加入二异丙基乙胺(28.5μL，165μmol)、乙胺(110μL在THF中的2M溶液，220μmol)和HBTU(63mg，165μmol)。搅拌18小时后，除去溶剂，用EtOAc(2mL)吸收取残余物并用饱和Na2CO3水溶液(2×2mL)和盐水(2mL)洗涤。干燥(MgSO4)后，除去溶剂以得到标题化合物：RT＝4.01分钟；m/z(ES+)＝389.2[M+H]+。
使用实施例4所述的方法，通过合适的胺与4-[4-(4-羧基苯基)丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例3)的反应制备表3中列出的化合物。
表3



实施例18和19：4-{4-[4-(2-甲基亚磺酰基乙基氨基甲酰基)苯基]丁基}哌啶-1-羧酸叔丁酯和4-{4-[4-(2-甲磺酰基乙基氨基甲酰基)苯基]丁基}哌啶-1-羧酸叔丁酯

将{4-[4-(2-甲硫基乙基氨基甲酰基)苯基]丁基}哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例17，30mg，69μmol)溶解于CH2Cl2(1mL)中并加入mCPBA(23.3mg，纯度77％，104μmol)。彻夜搅拌后，将反应混合物用CH2Cl2(5mL)稀释，并加入饱和Na2CO3水溶液(2mL)。分离有机相，蒸发并将残余物通过柱色谱法(IH-EtOAc 6∶4，接着EtOAc，最后MeOH-EtOAc 1∶9)纯化以得到标题亚砜：RT＝3.65分钟；m/z(ES+)＝451.3[M+H]+和标题砜：RT＝3.79分钟；m/z(ES+)＝467.3[M+H]+。
采用1当量mCPBA在上述条件氧化仅获得亚砜；采用2当量mCPBA氧化获得相应的作为单一产物的砜。
实施例20：4-[4-(4-乙酰氨基苯基)丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

用乙酰氯(18μL，250μmol)处理在干燥THF(2mL)中的4-[4-(4-氨基苯基)丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(制备例17，40mg，135μmol)和NEt3(53μL，380μmol)的搅拌溶液。18小时后，用EtOAc(15mL)稀释该混合物，用水(4mL)、饱和NaHCO3水溶液(4mL)和盐水(4mL)洗涤并干燥(MgSO4)。除去溶剂，通过柱色谱法(IH-EtOAc 7∶3)纯化残余物以得到标题胺：RT＝3.97分钟；m/z(ES+)＝375.2[M+H]+。
使用类似于实施例20中概述的方法，通过合适的酸氯与4-[4-(4-氨基苯基)丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(制备例17)或4-[3-(4-氨基苯基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(制备例18)反应制备表4中所列的酰胺。
表4



实施例33：4-{4-[4-(2-羟基乙酰氨基)苯基]丁基}哌啶-1-羧酸叔丁酯

将在EtOH(1mL)中的钯炭浆液(10％，10mg，1μmol)加至在EtOH(4mL)中的4-{4-[4-(2-苄氧基乙酰氨基)苯基]丁基}哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例28，30mg，62μmol)溶液中，该混合物在氢气氛下搅拌18小时。通过硅藻土短柱过滤，除去溶剂以得到标题醇化合物：RT＝3.86分钟；m/z(ES+)＝391.3[M+H]+。
实施例34：4-{3-[4-(2-羟基乙酰氨基)苯基]丙基}哌啶-1-羧酸叔丁酯

采用实施例33中描述的方法氢解4-{3-[4-(2-苄氧基乙酰氨基)苯基]丙基}哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例29)，得到标题化合物：RT＝3.67分钟；m/z(ES+)＝377.3[M+H]+。
实施例35：4-{4-[4-(3-乙基脲基)苯基]丁基}哌啶-1-羧酸叔丁酯

将异氰酸乙酯(26μL，360μmol)加至CH2Cl2(2mL)中的4-[4-(4-氨基苯基)丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(制备例17，30mg，90μmol)的溶液中并将反应搅拌18小时。除去溶剂以得到标题化合物：RT＝4.04分钟；m/z(ES+)＝404.3[M+H]+。
实施例36：4-{4-[4-(3，3-二甲基脲基)苯基]丁基}哌啶-1-羧酸叔丁酯

将二甲基氨基甲酰氯(25μL，270μmol)加至干燥THF(2mL)中的4-[4-(4-氨基苯基)丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(制备例17，30mg，90μmol)和NEt3(70μL，500μmol)的溶液中。将得到的混合物在100℃加热(密封管，微波)20分钟，用CH2Cl2(12mL)稀释并用水(2mL)、饱和NaHCO3水溶液(2mL)和盐水(2mL)洗涤。在疏水性玻璃漏斗(hydrophobic frit)过滤后，除去溶剂，通过反相HPLC(CH3CN-H2O)纯化残余物，得到标题化合物：RT＝3.99分钟；m/z(ES+)＝404.4[M+H]+。
实施例37：4-(4-{4-[(吗啉-4-羰基)氨基]苯基}丁基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

采用实施例36中描述的相同的方法将4-[4-(4-氨基苯基)丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(制备例17)与4-吗啉羰基氯反应以得到标题尿素：RT＝4.01分钟；m/z(ES+)＝446.4[M+H]+。
实施例38：4-[4-(4-乙基磺酰基氨基苯基)丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

用乙基磺酰氯(47μL，500μmol)处理在干燥THF(2mL)中的4-[4-(4-氨基苯基)丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(制备例17，40mg，120μmol)和NEt3(100μL，720μmol)的溶液。搅拌48小时后，用CH2Cl2(12mL)稀释并用水(2mL)、饱和NaHCO3水溶液(2mL)和盐水(2mL)洗涤该混合物。在疏水性玻璃漏斗上过滤后，除去溶剂，通过柱色谱(IH-EtOAc 4∶1)纯化残余物以得到标题化合物：RT＝4.16分钟；m/z(ES+)＝425.2[M+H]+。
实施例39：4-[4-(4-甲磺酰基氨基苯基)丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

采用与实施例38中描述相同的方法，将4-[4-(4-氨基苯基)丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(制备例17)与甲磺酰氯反应以得到标题磺酰胺：RT＝4.11分钟；m/z(ES+)＝411.2[M+H]+。
实施例40：4-[(E)-4-(4-甲硫基苯基)丁-3-烯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

将氢化钠(102mg的60％的NaH，分散在油中，2.55mmol)悬浮在无水DME中，加入在无水DME(1.6mL)中的4-(3-氧代丙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(439mg，1.82mmol)的溶液，将得到的浆液搅拌5分钟，并引入在DME(1.5mL)中的(4-甲硫基苄基)磷酸二乙酯溶液。将反应混合物加热轻微回流2小时并在室温下放置过夜，而后将它倒入水(20mL)中并用EtOAc(2×50mL)萃取。将合并的有机相干燥(MgSO4)，减压除去溶剂，通过柱色谱(IH-EtOAc 9∶1)纯化残余物以得到标题化合物：RT＝4.89分钟；m/z(ES+)＝362.1[M+H]+。
表5中列出化合物采用类似于实施例40中描述的方法制备。
表5

实施例43和44：4-[(E)-4-(4-甲基亚磺酰基苯基)丁-3-烯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯和4-[(E)-4-(4-甲磺酰基苯基)丁-3-烯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

根据实施例18和19中描述的方法，使用1当量的mCPBA将4-[(E)-4-(4-甲硫基苯基)丁-3-烯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例40)氧化以得到标题亚砜：RT＝3.82分钟；m/z(ES+)＝378.2[M+H]+，使用两当量的mCPBA，以得到标题砜：RT＝3.92分钟；m/z(ES+)＝394.1[M+H]+.
实施例45和46：4-[4-(4-甲基亚磺酰基苯基)丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯和4-[4-(4-甲磺酰基苯基)丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

采用类似于实施例2中描述的方法，经Pd催化剂氢化4-[(E)-4-(4-甲基亚磺酰基苯基)丁-3-烯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例43)和4-[(E)-4-(4-甲磺酰基苯基)丁-3-烯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例44)的混合物，在柱色谱法(IH-EtOAc，7∶3)分离后，得到标题亚砜：RT＝3.82分钟，m/z(ES+)＝380.17[M+H]+和标题砜：RT＝4.16分钟；m/z(ES+)＝396.16[M+H]+。
采用实施例18和19中描述的方法，表6中所列的化合物由相应烯基硫化物通过氧化至相应的亚砜或砜，接着采用实施例2的方法经Pd催化剂氢化制备。
表6

实施例50：4-[3，4-二羟基-4-(4-甲磺酰基苯基)丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

将水(0.5mL)、丙酮(3mL)和N-甲基吗啉-N-氧化物(31mg，265μmol)的搅拌混合物冷却至0℃，加入OsO4(16μL，在叔丁醇中的2.5％w/v溶液，13μmol)。滴加在丙酮(1.25mL)中的4-[4-(4-甲磺酰基苯基)丁-3-烯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例44，100mg，250μmol)溶液并在室温彻夜搅拌得到的溶液。加入水(5mL)和固体硫代硫酸钠(106mg)，剧烈搅拌0.5小时后，将混合物蒸发至干。在水(20mL)和EtOAc(50mL)间分配残余物，分离水相，并再用EtOAc萃取(3×20mL)。合并的有机物用盐水洗涤(20mL)、干燥(MgSO4)、蒸发，通过柱色谱法(IH-EtOAc 1∶1 to 0∶1)纯化残余物，得到标题二醇：RT＝3.11分钟，m/z(ES+)＝428.2[M+H]+。
实施例51：2-{4-[4-(4-甲磺酰基苯基)丁基]哌啶-1-基}-4-三氟甲基嘧啶

将4-[4-(4-甲磺酰基苯基)丁基]哌啶(制备例1，50mg，169μmol)溶解于无水1，4-二噁烷(0.6 mL)中并加入2-氯-4-三氟甲基嘧啶(37mg，203μmol)和DBU(51.5mg，338μmol)。搅拌18小时后，除去溶剂，将残余物再溶在CH2Cl2(10mL)中。该溶液用水(10mL)洗涤，通过疏水性玻璃漏斗干燥并蒸发。通过柱色谱法(IH-EtOAc 1∶1)纯化残余物以得到标题化合物RT＝4.45分钟，m/z(ES+)＝441.5[M+H]+。
通过类似于实施例51中概述的方法制备表7中的化合物。
表7

实施例60：4-[4-(4-甲磺酰基苯基)丁基]-3，4，5，6-四氢-2H-[1，2′]联吡啶

在80℃，将4-[4-(4-甲磺酰基苯基)丁基]哌啶(制备例1，50mg，169μmol)，2-氟吡啶(65μL，760μmol)和DBU(50μL，340μmol)的混合物搅拌18小时。将反应混合物用CH2Cl2(10mL)稀释并用水洗涤(2mL)。将有机相通过疏水性玻璃漏斗，除去溶剂以得到标题化合物：RT＝2.69分钟，m/z(ES+)＝441.5[M+H]+。
实施例61：4-[4-(4-甲磺酰基苯基)丁基]哌啶-1-羧酸乙酯

将氯甲酸乙酯(24.2μL，253μmol)加至无水CH2Cl2(1ml)中的4-[4-(4-甲磺酰基苯基)丁基]吡啶(制备例1，50mg，169μmol)和NEt3(118μL，845μmol)的溶液中。室温搅拌1.5小时后，将反应混合物用CH2Cl2(5mL)稀释并用水(2mL)洗涤。将该有机相通过疏水性玻璃漏斗干燥并蒸发以得到标题化合物：RT＝3.77分钟；m/z(ES+)＝368.1[M+H]+。
采用实施例61中描述的方法，通过4-[4-(4-甲磺酰基苯基)丁基]哌啶与合适的氯甲酸酯反应制备来表8中所列的化合物。
表8

实施例70：4-[4-(4-甲磺酰基苯基)丁基]哌啶-1-羧酸环丁酯

用无水THF(1mL)中的三光气溶液(60mg，202μmol)处理无水THF(4mL)中的环丁醇(48.7mg，676μmol)的搅拌溶液。1小时后加入干燥NEt3(188μL，1.35mmol)并将浑浊的混合物继续搅拌20分钟，而后快速加至无水THF(2mL)中的4-[4-(4-甲磺酰基苯基)丁基]哌啶(制备例1，50mg，169μmol)溶液中。搅拌1小时后，用水(2mL)终止反应并用CH2Cl2(15mL)稀释。将有机相通过疏水性玻璃漏斗干燥并蒸发以获得残余物，其通过反相HPLC(CH3CN-H2O)纯化，得到标题化合物：RT＝4.02分钟；m/z(ES+)＝394.1[M+H]+。
采用实施例70中描述的方法，通过将合适的醇与三光气反应，接着与4-[4-(4-甲磺酰基苯基)丁基]哌啶反应制备来表9中所列的化合物。
表9

实施例74：4-羟基-4-[4-(4-甲磺酰基苯基)丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

将正丁基锂(在己烷中，0.938mL的1.6M溶液，1.5mmol)以逐滴的方式加至无水THF(3mL)中的(4-甲磺酰基苄基)磷酸二乙酯(460mg，1.5mmol)的溶液中。室温搅拌5分钟后，加入在干燥THF(2mL)中的2-羟基-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯的溶液(制备例13，176mg，683μmol)，升温至65℃，并保持2小时。冷却后，加入饱和NH4Cl溶液(5mL)，并将该混合物用EtOAc(3×30mL)萃取。将有机相用盐水(20mL)洗涤、干燥(MgSO4)并蒸发，通过柱色谱法(IH-EtOAc 9∶1逐步至6∶1)纯化残余物，得到4-羟基-4-[(E)-4-(4-甲磺酰基苯基)丁-3-烯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯：RT＝3.36分钟；m/z(ES+)＝410.3[M+H]+。将该石蜡样品(211mg，516μmol)溶解在EtOH(5mL)中，加入于EtOH(1mL)中的钯炭浆液(10％，50mg，46μmol)，并交换为H2氛。将该混合物搅拌18小时，接着通过硅藻土垫过滤，用EtOAc(5×5mL)洗涤。蒸发合并的滤液，将残余物通过柱色谱法(IH-EtOAc，1∶1)纯化以得到标题砜：RT＝3.36分钟，m/z(ES+)＝412.3[M+H]+。
实施例75：4-[4-(3-氯-4-甲硫基苯基)丁-3-烯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

将无水THF(5mL)中的4-[3-(二乙氧基磷酰基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(制备例2，584mg，1.61mmol)的搅拌溶液冷却到-78℃，滴加正丁基锂(在己烷中，1mL的1.6M溶液，1.6mmol)。15分钟后通过套管加入在干燥THF(2mL)中的3-氯-4-甲硫基苯甲醛(制备例4，300mg，1.61mmol)溶液，在-78℃继续搅拌2小时。用饱和NH4Cl水溶液(15mL)终止反应，将混合物升至室温并用EtOAc(3×30mL)萃取。干燥(MgSO4)合并的有机相，蒸发并将残余物通过柱色谱法(IH-EtOAc 1∶9)纯化，以得到4-[4-(3-氯-4-甲硫基苯基)-3-(二乙氧基磷酰基)-4-羟基丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯：RT＝4.02分钟，m/z(ES+)＝550.1[M+H]+。将该材料的样品(666mg，1.21mmol)溶解在MeOH(5.5mL)中，加入4 MNaOH水溶液(5.5mL)。将得到的剧烈搅拌的混合物加热至60℃，加入足量THF(1.5mL)使溶液澄清均匀。18小时后冷却该混合物，并用1MHCl水溶液酸化至pH5，用CH2Cl2(3×25mL)萃取。干燥(MgSO4)合并的有机相，蒸发，并将残余物用干燥CHCl3(5.5mL)吸收。加入二异丙基碳二亚胺(380μL，2.42mmol)并将该溶液搅拌5小时，而后蒸发，将残余物通过柱色谱法(IH-EtOAc 4∶1)纯化，得到标题化合物：RT＝4.79分钟，m/z(ES+)＝396.2[M+H]+。
采用实施例75中描述的步骤次序，由4-[3-(二乙氧基磷酰基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(制备例2)与合适的醛反应来制备表10中列出的化合物。
表10

实施例80和81：4-[4-(3-氯-4-甲基亚磺酰基苯基)丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯和4-[4-(3-氯-4-甲磺酰基苯基)丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

采用实施例18和19中所述的方法将4-[4-(3-氯-4-甲硫基苯基)丁-3-烯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例75)通过mCPBA氧化，得到4-[4-(3-氯-4-甲基亚磺酰基苯基)丁-3-烯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯：RT＝4.14分钟，m/z(ES+)＝412.2[M+H]+和4-[4-(3-氯-4-甲磺酰基苯基)丁-3-烯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯：RT＝4.14分钟，m/z(ES+)＝428.2[M+H]+的混合物。该亚砜和砜的混合物通过实施例2中描述的方法经Pd催化剂氢化，通过柱色谱法分离后得到标题亚砜：RT＝4.29分钟，m/z(ES+)＝414.2[M+H]+和标题砜：RT＝4.26分钟，m/z(ES+)＝430.2[M+H]+。
采用实施例80和81中描述的系列步骤由相应的硫化物制备表11中所列的亚砜和砜。
表11


实施例90：4-[4-羟基-4-(4-甲硫基苯基)丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

将溴化4-甲硫基镁(在THF中，0.3mL的1.29 M溶液，390μmol)加至无水THF(3mL)中的4-(4-氧代丁基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(制备例11，70mg，274μmol)的搅拌溶液中。0.5小时后，通过加入1M HCl水溶液(0.5mL)终止反应，用乙醚稀释(15mL)，用盐水洗涤(2mL)并干燥(MgSO4)。除去溶剂后，残余物通过柱色谱法(IH-EtOAc 2∶1)纯化以得到标题醇：RT＝4.02分钟；m/z(ES+)＝380.2[M+H]+。
实施例91和92：4-[4-羟基-4-(4-甲基亚磺酰基苯基)丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯和4-[4-羟基-4-(4-甲磺酰基苯基)丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

采用类似于实施例18和19中描述的方法，通过mCPBA氧化将4-[4-羟基-4-(4-甲硫基苯基)丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例90)样品，得到标题亚砜：RT＝3.32分钟；m/z(ES+)＝396.1[M+H]+和标题砜：RT＝3.52分钟；m/z(ES+)＝412.1[M+H]+。
实施例93：4-[4-(4-甲基亚磺酰基苯基)-4-氧代丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

用固体Dess-Martin五价碘(36.5mg，86μmol)处理在CH2Cl2(1.5mL)中的4-[4-羟基-4-(4-甲基亚磺酰基苯基)丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例91，17mg，43μmol)溶液。搅拌1.5小时后，将该混合物用EtOAc(11mL)稀释，用饱和Na2CO3水溶液(1.5mL)和盐水(1.5mL)洗涤，接着干燥(MgSO4)。除去溶剂，并将残余物通过柱色谱法(EtOAc)纯化以得到标题化合物：RT＝3.64分钟；m/z(ES+)＝394.2[M+H]+。
实施例94：4-[4-(4-甲磺酰基苯基)-4-氧代丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

采用类似于实施例93的方法，将4-[4-羟基-4-(4-甲磺酰基苯基)丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例92)氧化得到标题化合物：RT＝3.79分钟；m/z(ES+)＝410.1[M+H]+。
实施例95：4-[4-(4-氟甲基亚磺酰基苯基)-4-羟基丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

氩气下，将纯的三氟化(二乙基氨基)硫(DAST)(23μL，178μmol)加至干燥CH2Cl2(0.5mL)中的4-[4-(4-甲基亚磺酰基苯基)-4-氧代丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例93，35mg，89μmol)溶液中，将该混合物室温搅拌6小时。再加入DAST(23μL，178μmol)并将混合物在35℃下再加热18小时。加入CH2Cl2(2mL)和水(0.5mL)，该混合物用EtOAc(20mL)稀释。用水(2mL)、盐水(2mL)洗涤和干燥(MgSO4)后，除去溶剂，将残余物通过柱色谱法(IH-EtOAc 4∶1)纯化以获得4-[4-(4-氟甲硫基苯基)-4-氧代丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯：RT＝4.20分钟；m/z(ES+)＝396.2[M+H]+。将该硫化物样品(28mg，70.8μmol)溶解在CH2Cl2(2mL)中，加入在CH2Cl2(1mL)中的mCPBA(15.8mg，纯度77％，71μmol)。搅拌过夜后，蒸发溶剂并将残余物溶解在EtOAc(20mL)中，用饱和Na2CO3水溶液(2×3mL)、水(3mL)和盐水(3mL)洗涤。干燥(MgSO4)后蒸发溶剂并将残余物通过柱色谱(Et2O，接着EtOAc)纯化，得到标题化合物：RT＝3.69分钟；m/z(ES+)＝412.2[M+H]+。
实施例96：4-[4，4-二氟-4-(4-甲磺酰基苯基)丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

将4-[4-(4-甲磺酰基苯基)-4-氧代丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例94，27mg，66μmol)样品称至充满氮气的小烧瓶中，加入纯净的三氟化(二乙基氨基)硫(DAST)(200μL，1.5mmol)。将得到的溶液室温搅拌60小时，接着通过小心加入饱和Na2CO3水溶液(2mL)终止反应。萃取入EtOAc(15mL)后，将有机相用盐水(2mL)洗涤，干燥(MgSO4)并蒸发。残余物通过制备薄层色谱(IH-EtOAc 2∶1)纯化，得到标题化合物：RT＝4.01分钟；m/z(ES+)＝432.3[M+H]+。
实施例97：4-[4-(4-甲硫基苯基)丁酰基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

将钠金属(127mg，5.52mmol)溶解在干燥EtOH(15mL)中并将得到的溶液在搅拌下冷却到0℃。加入4-(2-乙氧羰基乙酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.65g，5.52mmol)，该混合物升温至室温并保持10分钟，加入在EtOH(2mL)中的1-(2-溴乙基)-4-甲硫基苯(1.5g，5.52mmol)悬浮液。将该反应加热回流85小时，冷却并在真空下除去乙醇。将残余物溶解在EtOAc(100mL)中，用水(25mL)和盐水(25mL)洗涤。干燥(MgSO4)后除去溶剂，通过柱色谱法(IH-EtOAc 9∶1，接着7∶1)纯化残余物，获得4-[2-乙氧羰基-4-(4-甲硫基苯基)丁酰基]哌啶-1-羧酸叔丁酯：RT＝4.20分钟；m/z(ES+)＝450.2[M+H]+。将该酯(897mg，2.0mmol)样品溶解在MeOH(16mL)中，加入在水(6.5mL)中的KOH(224mg，4mmol)溶液。加热回流2小时，除去MeOH，用EtOAc(50mL)萃取水相并干燥(MgSO4)。除去溶剂，得到标题硫醚：RT＝4.14分钟；m/z(ES+)＝378.3[M+H]+。
实施例98：4-[4-(4-甲硫基苯基)-2-氧代丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

采用实施例97中描述的方法，将1-溴甲基-4-甲基硫代苯与4-(3-乙氧羰基-2-氧代丙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(制备例14)反应以获得4-[3-乙氧羰基-4-(4-甲硫基苯基)-2-氧代丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯：RT＝4.20分钟；m/z(ES+)＝450.2[M+H]+。将该物质水解并脱羧，得到标题化合物：RT＝4.14分钟；m/z(ES+)＝378.2[M+H]+。
实施例99：4-[4-(3-氟-4-甲硫基苯基)丁酰基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

采用实施例97中描述的方法，将4-(2-溴代乙基)-2-氟-1-甲硫基苯(制备例24)与4-(2-乙氧羰基乙酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯反应，将该产物水解并脱羧，得到标题化合物：RT＝4.24分钟；m/z(ES+)＝396.1[M+H]+。
实施例100：4-[1-羟基-4-(4-甲硫基苯基)丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

用硼氢化钠(56mg，1.47mmol)处理在EtOH(7mL)中的4-[4-(4-甲硫基苯基)丁酰基]哌啶-1-羧酸叔丁酯溶液(实施例97，370mg，981μmol)。搅拌2小时后，除去溶剂，将残余物用EtOAc(40mL)吸收，用水(5mL)和盐水(5mL)洗涤，接着干燥(MgSO4)，并蒸发以得到标题醇：RT＝3.97分钟；m/z(ES+)＝380.3[M+H]+。
实施例101：4-[2-羟基-4-(4-甲硫基苯基)丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

以类似于实施例100中描述的方式用硼氢化钠还原4-[4-(4-甲硫基苯基)-2-氧代丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例98)，得到标题醇：RT＝3.99分钟；m/z(ES+)＝380.2[M+H]+。
实施例102：4-[4-(3-氟-4-甲硫基苯基)-1-羟基丁基]哌啶-l-羧酸叔丁酯

以类似于实施例100中描述的方式用硼氢化钠还原4-[4-(3-氟-4-甲硫基苯基)丁酰基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例99)以得到标题醇：RT＝4.19分钟；m/z(ES+)＝398.1[M+H]+。
实施例103：4-[4-(3-氟-4-甲硫基苯基)-1-甲氧基丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

在无水THF(3mL)中的NaH(40.6mg的60％的NaH分散在矿物油中，1.0mmol)、4-[4-(3-氟-4-甲硫基苯基)-1-羟基丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例102，130mg，327μmol)和MeI(0.15mL，2.4mmol)的搅拌混合物在微波辐射下加热至90℃并保持2小时，接着在微波辐射下加热至100℃并保持1.5小时。将反应物通过柱色谱法纯化以得到标题化合物：RT＝4.51分钟；m/z(ES+)＝412.1[M+H]+。
采用实施例18和19中所述的方法用mCPBA氧化相应的硫化物制备
表12中所列的亚砜和砜。
表12


根据实施例93中概述的方法，通过由Dess-Martin五价碘氧化相应的醇制备表13中所列的化合物。
表13


实施例118：4-[3-(4-氰基苯基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

将在无水THF(5mL)中的氯化(4-氰基苄基)三苯基鏻溶液(201mg，480μmol)冷却到0℃，滴加二(三甲基甲硅烷)氨基锂(在THF中，530μL的1.0M溶液，530μmol)。搅拌45分钟后，一次性加入固体4-(2-氧代乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(100mg，440μmol)，并将温度升至室温。18小时后，用EtOAc(30mL)稀释该反应物，用水(5mL)、盐水(5mL)洗涤并干燥(MgSO4)。减压蒸发溶剂，将残余物通过柱色谱法纯化获得(E)-和(Z)-4-[3-(4-氰基苯基)烯丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯。该混合物采用实施例2中所列方法在Pd催化剂氢化以得到标题化合物：RT＝4.89分钟；δH(CD3OD)1.00(dq，2H)，1.25(m，2H)，1.44(s，9H)，1.39-1.48(m，1H)，1.57-1.66(m，4H)，2.53(t，2H)，2.69(t，2H)，4.01(d，2H)，7.02(d，2H)，7.05(d，2H)。
实施例119：4-[4-(4-氰基苯基)丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

采用类似于实施例118中描述的方法，(4-氰基苄基)三苯基氯化磷与4-(3-氧代丙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯反应得到标题化合物：RT＝4.97分钟；δH(CDCl3)1.07(dq，2H)，1.23-1.30(m，2H)，1.31-1.40(m，3H)，1.47(s，9H)，1.56-1.66(m，4H)，2.58(t，2H)，2.65(t，2H)，4.06(br s，2H)，7.07(d，2H)，7.10(d，2H)。
实施例120：4-{3-[(4-甲硫基苯基)-(2-硝基苯磺酰基)氨基]丙基}哌啶-1-羧酸叔丁酯

在氩气下，将N-(4-甲硫基苯基)-2-硝基苯磺酰胺(制备例8，0.6g，1.85mmol)、4-(3-羟基丙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(672mg，2.76mmol)，三苯基膦(724mg，2.76mmol)和氮杂二羧酸二叔丁酯(636mg，2.76mmol)的混合物溶解在无水甲苯(10mL)中。室温搅拌48小时后，除去溶剂，将残余物通过柱色谱法(IH-EtOAc，2∶1接着1∶1)纯化，得到标题磺胺：RT＝4.51分钟；m/z(ES+)＝550.2[M+H]+。
采用类似于实施例120中描述的方法制备表14中所列的化合物。
表14

实施例123：4-[3-(4-甲硫基苯基氨基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

将固体碳酸铯(261mg，800μmol)加至CH3CN(1.0mL)中的4-{3-[(4-甲硫基苯基)-(2-硝基苯磺酰基)氨基]丙基}哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例120，219mg，400μmol)和硫代苯酚(88mg，800μmol)的搅拌溶液中。1小时后，将该混合物用乙醚(50mL)稀释，用水(2×5mL)和盐水(5mL)洗涤，接着干燥(MgSO4)。除去溶剂，将残余物通过柱色谱法(IH-EtOAc 2∶1)纯化以得到标题化合物：RT＝4.01分钟；m/z(ES+)＝365.2[M+H]+。
实施例124：4-[2-(4-甲硫基苯基氨基)乙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

以实施例123中描述的相同方式，将4-{2-[(4-甲硫基苯基)-(2-硝基苯磺酰基)氨基]乙基}哌啶-1-羧酸叔丁酯用碳酸铯和硫代苯酚处理以得到标题化合物：RT＝3.74分钟；m/z(ES+)＝351.2[M+H]+。
实施例125：4-[3-(3-氟-4-甲硫基苯基氨基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

将粉末的的4分子筛(100 mg)悬浮在无水CH2Cl2(3.5mL)中的4-(3-氧代丙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(50mg，210μmol)的溶液中，加入3-氟-4-甲硫基苯胺(33mg，210μmol)。搅拌20分钟后，加入三乙酰氧硼氢化钠(58mg，270μmol)并继续搅拌24小时。将反应混合物在饱和的NaHCO3水溶液(15mL)和Et2O(25mL)间分配，分离有机相，用盐水洗涤(5mL)，干燥(MgSO4)并蒸发。将残余物通过柱色谱(IH-EtOAc 3∶1)法纯化以得到标题化合物：RT＝4.36分钟；m/z(ES+)＝383.3[M+H]+。
采用实施例18和19中描述的方法，通过用mCPBA氧化相应的硫化物来合成表15中所列的亚砜和砜。
表15


实施例134：4-{3-[甲基(4-甲硫基苯基)氨基]丙基}哌啶-1-羧酸叔丁酯

将THF(2.5mL)中的4-[3-(4-甲硫基苯基氨基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例123，90mg，247μmol)溶液经4分钟滴加至在THF(1.25mL)中的10％H2SO4水溶液(0.5mL)和甲醛(在水中，241μL的37％溶液，2.96mmol)的搅拌的冰冷溶液中。经4-5分钟以每次10mg的量分次加入固体硼氢化钠(65.5mg，1.73mmol)并将反应升温至室温。搅拌15分钟后，将该混合物倾至0.2MNaOH水溶液(20mL)中，并用EtOAc(2×25mL)萃取。合并的有机相用盐水(10mL)洗涤，干燥(MgSO4)并蒸发。残余物通过硅胶短柱过滤(IH-EtOAc 4∶1)，得到标题化合物：RT＝3.90分钟；m/z(ES+)＝379.2[M+H]+。
采用实施例134中描述的方法合成表16中的化合物。
表16


实施例140和141：4-[4-(4-甲基亚磺酰基苯基氨基)丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯和4-[4-(4-甲磺酰基苯基氨基)丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

采用实施例18和19中描述的方法，将4-{4-[(4-甲硫基苯基)-(2-硝基苯磺酰基)氨基]丁基}哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例122)氧化成4-{4-[(4-甲基亚磺酰基苯基)-(2-硝基苯磺酰基)氨基]丁基}-哌啶-1-羧酸叔丁酯：RT＝3.97分钟；m/z(ES+)＝580.2[M+H]+和4-{4-[(4-甲磺酰基苯基)-(2-硝基苯磺酰基)氨基]丁基}哌啶-1-羧酸叔丁酯：RT＝4.07分钟；m/z(ES+)＝596.1[M+H]+。
在每种情况下，得到的亚砜或砜以实施例123中所述的方式用在CH3CN中的碳酸铯和硫代苯酚处理，得到标题亚砜：RT＝3.77分钟；m/z(ES+)＝395.2[M+H]+，或者标题砜RT＝3.87分钟；m/z(ES+)＝411.2[M+H]+。
实施例142：4-[3-(4-甲硫基苯氧基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

将无水THF(4mL)中的氢化钠(231mg的60％的NaH，分散在油中，5.8mmol)悬浮液冷却到0℃，以逐滴的方式加入在THF(2mL)中的4-(甲基硫代)苯酚(771mg，5.5mmol)溶液。搅拌0.5小时后，经套管引入在无水THF(3mL)中的4-(3-甲磺酰氧基丙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯溶液(制备例9，322mg，1mmol)，得到的无色溶液在65℃加热16小时。冷却后，将该混合物用乙醚(100mL)稀释并依次用2MNaOH水溶液(10mL)、水(10mL)、2MNaOH水溶液(10mL)和盐水(10mL)洗涤。除去溶剂，将残余物通过柱色谱法(IH-EtOAc 4∶1)纯化以得到标题化合物：RT＝4.57分钟；m/z(ES+)＝366.2[M+H]+。
采用类似于实施例142中描述的方法，由合适的4-(甲硫基)苯酚和相应的甲磺酸酯合成表17中所列的化合物。
表17

采用实施例18和19中的方法，通过将相应的硫化物氧化成亚砜或砜来制备表18中的化合物。
表18

实施例154：4-[3-(5-甲磺酰基吡啶-2-基氧基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

将在THF中的4-(3-羟基丙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.29g，5.3mmol)的搅拌溶液冷却到0℃，分次地加入氢化钠(233mg的60％的NaH，分散在油中，5.83mmol)。15分钟后，加入固体2-溴-5-甲基磺酰基吡啶，将得到的混合物加热回流20小时。除去溶剂，并将残余物质溶解在EtOAc(150mL)中，用饱和NaHCO3水溶液(20mL)、盐水(20mL)洗涤并干燥(MgSO4)。除去溶剂并纯化残余物以得到标题芳基醚：RT＝3.87分钟；m/z(ES+)＝399.1[M+H]+。
实施例155：4-[3-(5-氰基吡啶-2-基氧基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

采用实施例154中描述的方法将2-氯-5-氰基吡啶与4-(3-羟基丙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯反应以得到标题化合物：RT＝3.86分钟；m/z(ES+)＝346.3[M+H]+。
实施例156：4-[3-(4-羧基-3-氟苯氧基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

将2-氟-4-羟基苯甲酸甲酯(制备例15，800mg，4.7mmol)、4-(3-羟基丙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.04g，4.27mmol)和三苯基膦(1.23g，4.7mmol)的混合物溶解在无水THF(40mL)中并冷却到0℃。引入纯的二异丙基氮杂二羧酸酯(924μL，4.7mmol)，将得到的溶液升温至室温并搅拌6小时。再加入三苯基膦(615mg，2.35mmol)和二异丙基氮杂羧酸酯(462μL，2.35mmol)并继续搅拌18小时。将反应混合物用EtOAc(200mL)稀释，用饱和Na2CO3水溶液(40mL)洗涤并干燥(MgSO4)。除去溶剂，将得到的油用Et2O-IH研磨以沉淀出三苯基膦氧化物，该化合物通过过滤除去。蒸发滤液并将残余物通过柱色谱法(IH-EtOAc 4∶1)纯化以获得4-[3-(3-氟-4-甲氧羰基苯氧基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯：RT＝4.45分钟；m/z(ES+)＝396.3[M+H]+。将该甲酯样品(1.04g，2.63mmol)溶解在MeOH(20mL)中，加入在水(5mL)中的LiOH.H2O(1.1g，26.3mmol)。搅拌20小时后，蒸发甲醇并加入水(30mL)，用2MHCl水溶液酸化至pH4。得到的悬浮液用EtOAc(3×70mL)萃取，将合并的萃取物干燥(MgSO4)并蒸发得到标题酸：RT＝3.94分钟；m/z(ES+)＝382.3[M+H]+。
实施例157：4-[3-(4-羧基苯氧基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

将无水THF(50mL)中的4-羟基苯甲酸甲酯(1.82g，12mmol)的溶液用氢化钠(480mg的60％的NaH分散在油中，12mmol)处理并搅拌30分钟。加入溶解在干燥THF(20mL)中的4-(2-甲磺酰氧基丙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(制备例9，700mg，2.18mmol)，将反应加热回流3天。冷却后，加入Et2O(150mL)，并将该混合物用2MNaOH水溶液(3×30mL)和盐水(30mL)洗涤，接着干燥(MgSO4)。除去溶剂后，将残余粗产物再溶于MeOH(10mL)中并加入在水(2.5mL)中的LiOH.H2O(894mg，21.8mmol)。室温搅拌该混合物18小时，在真空下除去甲醇，将剩余水溶液用2MHCl水溶液酸化至pH3。将得到的混合物用Et2O(2×40mL)萃取；合并的有机相接着用2MNaOH水溶液(3×20mL)萃取，这些合并的水相用浓HCl酸化至pH3。沉淀的固体用Et2O(3×30mL)萃取，干燥(MgSO4)合并的有机相并蒸发溶剂以得到标题酸：RT＝3.76分钟；m/z(ES-)＝362.5[M-H]-。
实施例158：6-[3-(1-叔丁氧羰基哌啶-4-基丙氧基]烟酸

将4-[3-(5-氰基吡啶-2-基氧基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例155，2.90g，8.40mmol)、2MNaOH水溶液(25mL，50mmol)和EtOH(50mL)的混合物加热回流48小时。蒸发EtOH，剩余水相用浓盐酸调节至pH5。将沉淀的固体萃取至EtOAc(200mL)中，干燥(MgSO4)并蒸发。将得到的固体溶解在50％的饱和Na2CO3水溶液(30mL)中，用EtOAc(20mL)洗涤，用浓HCl酸化至pH5。用EtOAc(2×70mL)萃取后，干燥(MgSO4)合并的有机相并蒸发得到标题酸：RT＝3.57分钟；m/z(ES+)＝365.2[M+H]+。
实施例159：4-[3-(4-羧基-3-氟苯氧基)丙基]哌啶-1-羧酸异丙酯

采用类似于实施例156中概述的方法制备该羧酸：RT＝3.64分钟；m/z(ES+)＝368.1[M+H]+。
实施例160：4-[3-(4-羧基-3，5-二氟苯氧基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

如实施例156中概述的，采用Mitsunobu反应，使4-溴-3，5-二氟苯酚和4-(3-羟基丙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯反应，获得4-[3-(4-溴-3，5-二氟苯氧基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯：RT＝4.61分钟。将在无水THF(10mL)中的该芳基溴(2.28g，5.2mmol)的溶液加至-78℃下在无水THF(10mL)中的n-BuLi(在己烷中，4.2mL的2.5M溶液，10.5mmol)的搅拌溶液。40分钟后，向反应混合物中鼓入CO2(g)，使温度升至室温。用水终止该反应，减压除去THF并加入EtOAc。用水萃取该混合物。将合并的水萃取物用1M HCl酸化至pH2，并接着用EtOAc萃取。用盐水洗涤有机层并干燥(MgSO4)。过滤、蒸发溶剂以及闪式色谱法(EtOAc-己烷-AcOH，100∶100∶1)纯化，得到标题化合物：RT＝3.84分钟；m/z(ES+)＝400.1[M+H]+。
实施例161：4-[3-(4-羧基-3-氟苯基氨基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

将NaH(364mg的60％的NaH分散在矿物油中，9.1mmol)加至无水THF(10mL)中的4-氨基-2-氟苯甲酸甲酯(1.03g，6.1mmol)的搅拌溶液中。30分钟后，加入4-(2-甲磺酰氧基丙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(制备例9，1.95g，6.1mmol)，反应加热回流5天后用H2O(20mL)终止反应并用EtOAc(100mL)萃取。有机层用饱和的Na2CO3水溶液和盐水洗涤并干燥(MgSO4)。过滤、溶剂蒸发并用闪式色谱法(EtOAc-IH，3∶7)纯化，获得4-[3-(3-氟-4-甲氧羰基苯基氨基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯：m/z(ES+)＝395.2[M+H]+。将在MeOH-H2O(12.5mL，4∶1)中的该酯(300mg，0.76mmol)与LiOH·H2O(319mg，7.6mmol)的混合物加热回流20小时。真空除去MeOH，接着用0.5M HCl将残余物酸化至pH5，再用EtOAc萃取。有机萃取物用盐水洗涤后干燥、过滤并浓缩以得到标题化合物：RT＝3.72分钟；m/z (ES-)＝379.5[M-H]-。
实施例162：4-[3-(4-乙基氨基甲酰基-3-氟苯氧基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

将在无水THF(5mL)中的4-[3-(4-羧基-3-氟苯氧基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例156，100mg，260μmol)和二异丙基乙胺(113μL，650μmol)的溶液先用HATU(119mg，300μmol)处理，搅拌1小时后，接着用乙胺(在THF中，130μL的2M溶液，260μmol)处理。继续搅拌18小时后该混合物用CH2Cl2(30mL)稀释。用饱和的Na2CO3水溶液(5mL)洗涤，干燥(MgSO4)有机相，蒸发后通过柱色谱法(IH-EtOAc 7∶3)纯化残余物，得到标题化合物：RT＝4.07分钟；m/z(ES+)＝409.2[m+H]+。
采用类似于实施例162中描述的方法，通过将或者4-[3-(4-羧基-3-氟苯氧基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例156)、4-[3-(4-羧基苯氧基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例157)、6-[3-(1-叔丁氧羰基哌啶-4-基丙氧基]烟酸(实施例158)、4-[3-(4-羧基-3-氟苯氧基)丙基]哌啶-1-羧酸异丙酯(实施例159)、4-[3-(4-羧基-3，5-二氟苯氧基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例160)，或者4-[3-(4-羧基-3-氟苯基氨基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例161)与合适的胺反应来制备表19中所列的酰胺。
表19







实施例210：4-[2-(4-甲硫基苄基氧)乙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

将粉末的KOH(449mg，8mmol)悬浮在无水甲苯(20mL)中，并一次性加入(4-甲基硫代)苄基氯(345mg，2mmol)。搅拌10分钟后，加入4-(2-羟基乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(688mg，3mmol)，接着加入三[2-(2-甲氧基乙氧基)乙基]胺(64μL，200μmol)，将由此获得的混合物加热，温和回流18小时。冷却该混合物，用甲苯稀释并用水(30mL)洗涤。将水相用甲苯(2×20mL)萃取并用盐水(30mL)洗涤合并的有机相、干燥(MgSO4)并蒸发得到标题化合物：RT＝4.47分钟；m/z(ES+)＝366.2[m+H]+。
实施例211：4-[2-(4-甲硫基苯基)乙氧基甲基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

将2-(4-甲硫基苯基)乙醇(100mg，595μmol)溶解在干燥DMF(4mL)中，冷却到0℃，加入氢化钠(36mg的60％的NaH分散在油中，900μmol)。将混合物升温至室温，搅拌1小时后加入四正丁基碘化铵(22mg，60μmol)和4-甲磺酰氧基甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯(210mg，717μmol)。继续搅拌18小时，通过加入水(1mL)终止反应。用EtOAc(30mL)稀释后，用水(5mL)和盐水(5mL)洗涤有机相，接着干燥(MgSO4)。除去溶剂后通过柱色谱法(IH-EtOAc 6∶1)纯化残余的油，得到标题醚：RT＝4.16分钟；m/z(ES+)＝366.2[M+H]+。
实施例212和213：4-[2-(4-甲基亚磺酰基苄基氧)乙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯和4-[2-(4-甲磺酰基苄基氧)乙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

采用实施例18和19中描述的方法，通过mCPBA将4-[2-(4-甲硫基苄基氧)乙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例210)氧化得到标题亚砜：RT＝3.49分钟；m/z(ES+)＝382.2[M+H]+，以及标题砜：RT＝3.65分钟；m/z(ES+)＝398.2[M+H]+。
实施例214和215：4-[2-(4-甲基亚磺酰基苯基)乙氧基甲基]哌啶-1-羧酸叔丁酯和4-[2-(4-甲磺酰基苯基)乙氧基甲基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

采用实施例18和19中描述的方法氧化4-[2-(4-甲硫基苯基)乙氧基甲基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例211)。纯化得到标题亚砜：RT＝3.40分钟；m/z(ES+)＝382.2[M+H]+和标题砜：RT＝3.59分钟；m/z(ES+)＝398.3[M+H]+。
实施例216：4-[(E)-3-(4-甲磺酰基苯基)烯丙氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

将氢化钠(34 mg的60％的NaH分散在油中，860μmol)一次性加至干燥DME(7mL)中的(4-甲磺酰基苄基)磷酸二乙酯(263mg，860μmol)的搅拌溶液中。30分钟后，加入在干燥DME(2mL)中的4-(2-氧代乙氧基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(制备例16，149mg，610μmol)溶液，并继续搅拌3小时。加入水(5mL)并将该混合物用EtOAc(3×20mL)萃取。合并的有机物用盐水(5mL)洗涤，干燥(MgSO4)并蒸发以获得粗产物，该粗产物通过闪式色谱法(IH-EtOAc 7∶3 then 3∶2)纯化，得到标题石蜡：RT＝3.44分钟；m/z(ES+)＝396.3[M+H]+。
实施例217：4-[3-(4-甲磺酰基苯基)丙氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

采用实施例2中描述的方法，在EtOH中的4-[(E)-3-(4-甲磺酰基苯基)烯丙氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例216)经Pd催化剂氢化，得到标题化合物：RT＝3.54分钟；m/z(ES+)＝398.3[M+H]+。
实施例218：4-[2-(2，3-二氟苄氧基)乙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

用tBuOK(47mg，42μmol)处理在无水THF(2mL)中的(2，3-二氟苯基)甲醇(50mg，350μmol)的搅拌溶液，接着加入4-(2-甲磺酰氧基乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(制备例10)。将得到的混合物加热回流12小时，冷却后倒入饱和NH4Cl水溶液中，并用EtOAc(20mL)萃取。合并的有机相用盐水(5mL)洗涤，干燥(MgSO4)并蒸发。将残余物通过柱色谱法(IH-EtOAc，4∶1)纯化，得到标题化合物：RT＝4.39分钟；m/z(ES+)＝356.1[M+H]+。
实施例219：4-[2-(3，4-二氟苄氧基)乙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

采用实施例218中描述的方法，将(3，4-二氟苯基)甲醇转化成标题化合物：RT＝4.30分钟；m/z(ES+)＝356.1[M+H]+。
实施例220：4-[3-(4-甲磺酰基苯基硫烷基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

在氩气下于干燥烧瓶中，将氢化钠(121mg的60％的NaH分散在油中，3.02mmol)悬浮在干燥THF(4mL)中并在冰浴上冷却。加入在干燥THF(3mL)中的4-甲磺酰基苯硫酚(582mg，2.83mmol)，将该混合物搅拌0.5小时。缓慢加入在干燥THF(3mL)中的4-(3-甲磺酰氧基丙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(制备例9，359mg，1.12mmol)溶液，将得到的浆状物在65℃加热18小时。冷却后，将混合物用乙醚(60mL)稀释，用2M NaOH水溶液(2×10mL)、水(60mL)和盐水(50mL)洗涤，接着干燥(MgSO4)。除去溶剂，将残余物通过柱色谱(IH-EtOAc 3∶1)纯化，得到标题化合物：RT＝3.99分钟；m/z(ES+)＝414.2[M+H]+。
实施例221和222：4-[3-(4-甲磺酰基苯亚磺酰基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯和4-[3-(4-甲磺酰基苯磺酰基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

根据实施例18和19中描述的方法，使用mCPBA将4-[3-(4-甲磺酰基苯硫基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例220)氧化，得到标题亚砜：RT＝3.36分钟；m/z(ES+)＝430.3[M+H]+和标题砜：RT＝3.59分钟；m/z(ES+)＝446.3[M+H]+。
实施例223：4-[3-(3-氟-4-甲硫基苯基氨基甲酰基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

在20℃，将无水DMF(10mL)中的4-(3-羧基丙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(200mg，737μmol)、EDCI(141mg，737μmol)、HOBt(99mg，737μmol)和DIPEA(0.38mL，2.2mmol)溶液搅拌10分钟后，用3-氟-4-甲硫基苯胺(105mg，670μmol)处理。112小时后，将反应物真空浓缩并将残余物溶于EtOAc中。将有机层用饱和Na2CO3水溶液洗涤、干燥(MgSO4)。过滤、蒸发溶剂，并通过闪式色谱法(IH-EtOAc，3∶2)纯化，得到标题化合物：RT＝3.97分钟；m/z(ES+)＝411.1[M+H]+。
实施例224和225：4-[3-(3-氟-4-甲基亚磺酰基苯基氨基甲酰基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯和4-[3-(3-氟-4-甲磺酰基苯基氨基甲酰基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

根据实施例18和19中描述的方法，使用mCPBA将4-[3-(3-氟-4-甲硫基苯基氨基甲酰基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例223)的样品氧化成标题亚砜：RT＝3.34分钟；m/z(ES+)＝427.1[M+H]+和标题砜：RT＝3.61分钟；m/z(ES+)＝443.1[M+H]+。
实施例226：4-[2-(3-氟-4-甲磺酰基苯基氨基甲酰基)乙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

采用类似于实施例223、224和225中描述的方法，由3-氟-4-甲硫基苯胺和4-(2-羧基乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯制备标题化合物：RT＝3.45分钟；m/z(ES+)＝446.1[M+NH4]+。
表20中所列的亚砜和砜通过两步制备：1)采用类似于实施例156中的方案，用合适的苯酚与合适的醇进行Mitsunobu反应；2)进行如实施例18和19中概述的氧化。
表20

实施例232：4-[3-(3-氟-4-甲磺酰基苯氧基)-2-甲基丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

由3-氟-4-甲硫基苯酚和4-(3-羟基-2-甲基丙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯经由实施例156、18和19示例的两步Mitsunobu氧化制备：δH(CDCl3)1.04(m，2H)，1.15-1.27(m，2H)，1.35-1.50(m，10H，1.56(s，3H)，1.65-1.75(brm，2H)，2.02-2.12(m，1H)，2.65-2.75(br，2H)，3.19(s，3H)，3.78-3.86(m，2H)，4.05-4.16(m，2H)，6.71-6.81(m，2H)，7.86(t，1H)。
表21中所列的亚砜和砜通过两步制备：1)如制备例19中概述的，形成钯催化的硫醚；2)如实施例18和19中概述的进行氧化。
表21



表22中所列的化合物通过两步制备：1)通过类似于制备例1中概述的方案将4-[3-(3-氟-4-甲基亚磺酰基苯氧基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例148)或4-[3-(3-氟-4-甲磺酰基苯氧基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例151)脱保护；2)经由实施例61和70中所述的方法进行氨基甲酸酯合成。
表22


实施例256：4-[3-(2-氟-4-甲磺酰基苯氧基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

在无水DMF(3mL)中的NaH(31.2mg的60％的NaH分散在矿物油中，1.3mmol)、2-氟-4-甲磺酰基苯酚(244mg，1.28mmol)和4-(3-甲磺酰氧基丙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(制备例9，380mg，1.21mmol)的搅拌混合物在70℃下搅拌6小时。减压除去DMF，将残余物用Et2O(100mL)吸收。该溶液用2MNaOH(10mL)和盐水(10mL)洗涤并干燥(MgSO4)。过滤、蒸发溶剂、柱色谱法(IH-EtOAc，1∶1)纯化，在Et2O-CH2Cl2-IH中重结晶得到标题化合物：RT＝3.77分钟；m/z(ES+)＝416.0[M+H]+。
实施例257：4-[3-(3-氟-4-磺胺基苯氧基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

采用类似于制备例19中概述的方法，由2-氟-4-羟基苯磺酰胺(制备例25)与4-(3-羟基丙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯进行Mitsunobu缩合制备：δH(CDCl3)1.10-1.22(m，2H)，1.40-1.50(m，12H)，1.65-1.75(m，2H)，1.80-1.90(m，2H)，2.65-2.80(m，2H)，4.01(t，2H)，4.05-4.20(br，2H)，4.96(s，2H)，6.70-6.80(m，2H)，7.83(t，1H)；RT＝3.70分钟；m/z(ES-)＝415.4[M-H]-。
实施例258：4-[3-(4-甲磺酰基苯氧基)丁基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

采用类似于制备例19中概述的方法，由4-甲基磺酰基苯酚与4-(3-羟基丁基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(制备例30)进行Mitsunobu缩合制备：RT＝3.92分钟；m/z(ES-)＝412.1[M+H]+。
采用类似于实施例20，35，36和38中的方法，由4-[3-(4-氨基-3-氟苯氧基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(制备例31)制备表23中的化合物。
表23


实施例265：4-{3-[4-(二甲基膦酰基)-3-氟苯氧基]丙基}哌啶-1-羧酸叔丁酯

在-78℃，将n-BuLi(在己烷中，0.84mL的1.6M溶液，1.34mmol)滴加入无水THF(10mL)中的4-[3-(4-溴-3-氟苯氧基)丙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(参见制备例19，560mg，1.34mmol)的搅拌溶液中。45分钟后，加入在无水THF(1mL)中的Me2P(O)Cl溶液(100mg，0.89mmol)。将反应经1小时升温至-30℃，接着加入H2O(1mL)。将该混合物在EtOAc(100mL)和盐水(100mL)间分配。干燥(Na2SO4)有机萃取物、过滤、浓缩并通过柱色谱法(MeOH-EtOAc，1∶9)纯化，得到标题化合物：RT＝3.65分钟；m/z(ES+)＝414.1[M+H]+。
本发明的化合物的生物活性可以在以下测定系统中进行测试：
酵母报告基因测定法
基于酵母细胞的报告基因测定法之前已记载于文献(例如，参见Miret J.J.等人，2002，J.Biol.Chem.，277：6881-6887；Campbell R.M.等人，1999，Bioorg.Med.Chem.Lett.，9：2413-2418；King K.等人，1990，Science，250：121-123；WO99/14344；WO00/12704；以及US6,100,042)中。简而言之，已对酵母细胞工程化以使内源性酵母G-α(GPA1)缺失并用由多种技术构建的G-蛋白嵌合体代替之。此外，使内源性酵母GPCR，Ste3缺失从而允许选择的哺乳动物GPCR异源表达。在酵母中，在真核细胞中保守的信息素信号转导途径的元件(例如，促分裂原激活的蛋白激酶途径)驱动Fusl的表达。通过将β-半乳糖苷酶(LacZ)置于Fusl启动子(Fuslp)的控制下，已建立了其中受体激活导致酶读出(enzymatic read-out)的系统。
通过适应性改变的Agatep等所述的醋酸锂方法(Agatep，R.等人，1998，Transformation of Saccharomyces cerevisiae by the lithiumacetate/single-stranded carrier DNA/polyethylene glycol(LiAc/ss-DNA/PEG)protocol.Technical Tips Online，Trends Journals，Elsevier)转化酵母细胞。简而言之，酵母细胞在酵母胰蛋白胨板(YT)上生长过夜。将载体单链DNA(10μg)、两种Fuslp-LacZ报告基因质粒(一种具有URA选择标记而另一种具有TRP选择标记)各2μg、2μg酵母表达载体(2μg复制源)中的GPR119(人类或小鼠受体)以及醋酸锂/聚乙二醇/TE缓冲液移液至微量离心管中。含有受体/无受体对照的酵母表达质粒具有LEU标记。将酵母细胞接种到该混合物中并在30℃下将反应进行60分钟。之后将酵母细胞在42℃下热激15分钟。之后细胞经洗涤并铺在选择平板上。该选择平板是不含LEU、URA和TRP的合成的确定成分的酵母培养基(SD-LUT)。在30℃下温育2-3天后，将选择平板上生长的菌落在LacZ测定法中进行测试。
为了进行β-半乳糖苷酶的荧光酶测定法，将携带人或小鼠GPR119受体的酵母细胞在液体SD-LUT培养基中生长过夜达到未饱和浓度(即细胞仍在分裂并且还没有达到稳定期)。用新鲜的培养基将它们稀释至最佳测定浓度并将90μl的酵母细胞加入到96孔黑色聚苯乙烯板(Costar)上。将溶于DMSO并在10％DMSO溶液中稀释至10X浓度的化合物加入至板中，并将板置于30℃下4h。4h之后，将β-半乳糖苷酶的底物加入至各个孔中。在这些实验中，使用了释放荧光黄的酶的底物荧光黄二(β-D-吡喃半乳糖苷)(FDG)，从而可进行荧光读出(fluorimetric read-out)。每孔加入20μl500μM FDG/2.5％Triton X100(该洗涤剂是为了使细胞可渗透而必需的)。在将细胞与底物温育60分钟后，每孔加入20μl的1M碳酸钠以终止反应并增强荧光信号。之后将板置于荧光计中于485/535nm处读数。
本发明的化合物给出的荧光信号比背景信号(即在不含化合物的1％DMSO存在下获得的信号)增加了至少约1.5倍。给出至少5倍增加的本发明的化合物可能是优选的。
cAMP测定法
建立了表达重组人类GPR119的稳定的细胞系并将该细胞系用于研究本发明的化合物对环AMP(cAMP)的细胞内水平的影响。该细胞单层经磷酸盐缓冲盐水洗涤并在37℃下用补充有1％DMSO的刺激缓冲液中的各种不同浓度的化合物刺激30分钟。之后将细胞溶解并利用Perkin ElmerAlphaScreenTM(放大发光邻近测定(Amplified Luminescent ProximityHomogeneous Assay))cAMP试剂盒测定cAMP含量。缓冲液和测定条件记载于生产商的方案中。
本发明的化合物产生细胞内cAMP水平的浓度依赖性增加并且EC50通常＜10μM。在cAMP测定法中显示低于1μM的EC50的化合物可能是优选的。
体内饲养研究
本发明的化合物对体重以及食物和水摄取的影响在维持在反向(reverse-phase)光照下的自由进食的雄性Sprague-Dawley大鼠上进行测试。通过适当的给药途径(例如，腹膜内或口服)给药测试化合物和参比化合物并在接下来的24h内进行测定。将大鼠单独饲养在温度为21±4℃，湿度为55±2％的具有金属栅格地板的聚丙烯笼中。将具有笼垫的聚丙烯托盘置于各笼之下以检测任何食物溢出。将动物维持在反相明暗周期下(从09.30-17.30h熄灯8h)，期间用红色光照射房间。在两周的适应期期间，动物可以自由获取普通粉末状鼠料和自来水。鼠料置于具有铝盖的玻璃饲养罐中。在每个盖子上有3-4cm的小孔从而可以通过它获取食物。在黑暗期开始时对动物、饲养罐以及水瓶称重(精确到最接近的0.1g)。向动物给药本发明的化合物后的1、2、4、6和24h陆续测量饲养罐和水瓶并测量与用载体治疗的对照组相比各治疗组间在基线的任何显著性差异。
本发明所选择的化合物在≤100mg/kg的剂量下在一个或多个时间点表现出统计学上显著性的降低食欲作用。
本发明的化合物在胰β细胞(HIT-T15)的体外模型中的抗糖尿病作用
细胞培养物
从ATCC获得HIT-T15细胞(传代60)并在添加10％胎牛血清和30nM亚硒酸钠的RPMI1640培养基中培养。根据文献，全部试验均用低于传代70的细胞完成，所述文献描述了传代数超过81的该细胞系的改变的性质(Zhang HJ，Walseth TF，Robertson RP.Insulin secretion and cAMPmetabolism in HIT cells.Reciprocal and serial passage-dependent relationships.Diabetes.1989 Jan；38(1)：44-8)。
cAMP测定法
在96孔板中以100000细胞/0.1ml/孔在标准培养基中铺板HIT-T15细胞并培养24h，接着弃去该培养基。将细胞与100μl刺激缓冲液(Hanks缓冲盐溶液，5mM HEPES，0.5mM IBMX，0.1％BSA，pH 7.4)在室温下温育15分钟。将其弃去，并用在存在0.5％DMSO的刺激缓冲液中的0.001、0.003、0.01、0.03、0.1、0.3、1、3、10、30μM范围的化合物稀释液替代。将细胞在室温下温育30分钟。接着，每孔加入75ul溶胞缓冲液(5mM HEPES，0.3％Tween-20，0.1％BSA，pH 7.4)并将该板以900rpm振摇20分钟。通过在3000rpm下离心5分钟来除去颗粒物，接着将样品平行两份转移进384孔板，并根据Perkin Elmer AlphaScreen cAMP测定试剂盒指示进行加工。简而言之，设置25μl含有8μl样品、5μl受体珠混合料和12μl检测混合料的反应物，以使最终反应成分的浓度与试剂盒指示中说明的相同。将反应物在室温下温育150分钟，接着使用Packard Fusion装置对该板读数。将cAMP的测量值与已知cAMP量(0.01、0.03、0.1、0.3、1、3、10、30、100、300、1000nM)的标准曲线比较以将读数转换为绝对cAMP量。使用XLfit 3软件分析数据。
发现代表性的本发明的化合物以低于10μM的EC50增加cAMP。在cAMP测定法中显示低于1μM的EC50的化合物可能是优选的。
胰岛素分泌测定法
在12孔板中以106细胞/1ml/孔在标准培养基中铺板HIT-T15细胞并培养3天，接着弃去该培养基。用含有119mM NaCl、4.74mM KCl、2.54mM CaCl2、1.19mM MgSO4、1.19mM KH2PO4、5mM NaHCO3、pH7.4的10mM HEPES以及1％牛血清蛋白的补充的Krebs-Ringer缓冲液(KRB)将细胞洗两次。在37℃下用1ml KRB培养细胞30分钟，然后将其弃去。接着用KRB第二次培养30分钟，将其收集并用于测量各孔的基础胰岛素分泌水平。接着向平行两份的孔中加入在补充有5.6mM葡萄糖的1mlKRB中的化合物稀释液(0、0.1、0.3、1、3、10uM)。在37℃下温育30分钟后，移出样品以测定胰岛素水平。使用Mercodia大鼠胰岛素ELISA试剂盒，按照生产商的指示，用已知胰岛素浓度的标准曲线完成胰岛素的测量。通过从不存在葡萄糖的预温育物减去基础分泌水平来校正各孔的胰岛素水平。使用XLfit3软件分析数据。
发现代表性的本发明的化合物以低于10μM的EC50增加胰岛素分泌。在胰岛素分泌测定法中显示低于1μM的EC50的化合物可能是优选的。
口服葡萄糖耐量测试
在雄性C57Bl/6或雄性ob/ob小鼠中评价本发明的化合物对口服葡萄糖(Glc)耐量的影响。在Glc给药前5h收回食物并在整个研究中保持收回。在研究期间，小鼠可自由饮水。在动物尾部做出切口，接着取血(20μL)以测量基础Glc水平，45分钟后给药Glc负荷。然后，称重小鼠并口服给药测试化合物或载体(20％的羟丙基-β-环糊精水溶液或25％的Gelucire 44/14水溶液)，30分钟后再次取血样(20μL)并用Glc负荷(2-5gkg-1口服)治疗。接着在Glc给药后25、50、80、120和180分钟采血样(20μL)。为测量Glc水平，从尾部的切口端采20μL血样至一次性微吸管(Dade DiagnosticsInc.，Puerto Rico)中，并将该样品加入480μL溶血试剂中。接着向在96孔测定板中的180μL Trinders葡萄糖试剂(Sigma酶(Trinder)比色法)中加入平行两份20μL稀释溶血等分试样。混合后，将样品在室温下放置30分钟，然后凭Glc标准品(Sigma葡萄糖/尿素氮结合的标准品组)读数。代表性的本发明的化合物在≤100mg kg-1的剂量下在统计学上降低了Glc偏移。