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1、10申请公布号CN104042548A43申请公布日20140917CN104042548A21申请号201410292620722申请日20140626A61K8/98200601A61K8/97200601A61K8/67200601A61K8/73200601A61K8/65200601A61K8/64200601A61K8/49200601A61Q19/0020060171申请人广东省保化检测中心有限公司地址510663广东省广州市科学城揽月路80号科技创新基地A区五楼502509单元、C区六楼602611单元72发明人郑伟东周锦珂陈燕玲廖家纯黄裕54发明名称一种蜗牛黏液提取物及其制备。
2、方法和在化妆品中的应用57摘要本发明公开了一种蜗牛黏液提取物，其中含有硫酸软骨素015，尿囊素015，胶原蛋白0110，小分子多肽的分子量分布在30005500道尔顿。本发明还公开了蜗牛黏液提取物的制备方法和在化妆品中的应用。本发明的优点是采用了高压匀浆提取和多级膜分离联用技术，蜗牛黏液有效成分高度富集，蜗牛黏液提取物含有硫酸软骨素015，尿囊素015，胶原蛋白0110，特别是小分子多肽的分子量分布在30005500道尔顿，非常适合于人体皮肤吸收，添加在化妆品中有利于修复受损肌肤，促进愈合，加速细胞再生。51INTCL权利要求书2页说明书10页附图4页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专。
3、利申请权利要求书2页说明书10页附图4页10申请公布号CN104042548ACN104042548A1/2页21一种蜗牛黏液提取物，其特征在于,其中含有硫酸软骨素015，尿囊素015，胶原蛋白0110，小分子多肽的分子量分布在30005500道尔顿。2根据权利要求1所述的一种蜗牛黏液提取物，其特征在于,所述蜗牛黏液提取物是通过以下步骤制得的取蜗牛黏液与去离子水混合均匀后，用高压匀浆器中提取；提取物料经离心机分离后，得到清澄提取液；提取液经微滤处理制得除菌液；除菌液用超滤分离；然后再用纳滤浓缩。3根据权利要求1所述的一种蜗牛黏液提取物的制备方法，其特征在于,其包括以下步骤1提取取蜗牛黏液，加入。
4、其质量530倍的水，在560温度和40100MPA压力下进行高压匀浆组织破碎提取13次；2离心将1步骤所得的高压匀浆物料用离心机分离，收集清液；3微滤清液用孔径为01M05M的陶瓷膜微滤；4超滤微滤透析液用截留分子量为6,00050,000道尔顿的超滤膜超滤；5纳滤超滤透析液用截留分子量802,000道尔顿的纳滤膜浓缩，收集浓缩液。4根据权利要求书3所述的一种蜗牛黏液提取物的制备方法，其特征在于,所述蜗牛黏液优选白玉蜗牛产生的粘液。5蜗牛黏液提取物在化妆品中的应用，添加量为0520。6一种抗衰老组合物，其特征在于,其包括以下重量份数组分7一种抗衰老面膜，其特征在于,其包括以下重量份数组分权利要。
5、求书CN104042548A2/2页3权利要求书CN104042548A1/10页4一种蜗牛黏液提取物及其制备方法和在化妆品中的应用技术领域0001本发明涉及一种蜗牛黏液提取物及其应用，特别涉及一种蜗牛黏液提取物及其制备方法和在化妆品中的应用。背景技术0002蜗牛属腹足纲陆生软体动物，具有很高的食用和药用价值。中国普遍养殖的品种有白玉蜗牛，其黏液中主要含有胶原蛋白、尿囊素、硫酸软骨素、维生素、天然抗菌肽等活性成分。其中尿囊素可以使皮肤再生；蛋白质和维生素可以增加皮肤的营养，使肌肤更加细腻和光滑。0003目前，对蜗牛产品的应用开发多数集中在食品和化妆品领域，对其研究主要是多糖、蜗牛酶、分泌物的提。
6、取方面，但未见有化妆品级蜗牛黏液提取物的研究报道。0004热带病与寄生虫学2005年第3卷第3期公开发表的“江西巴蜗牛活性成分提取方法的比较研究”报道了天螺多糖提取方法。中国生化药物杂志1993年第2期公开发表的“蜗牛酶的研究及应用”报道了从蜗牛消化腺提取蜗牛酶的方法。申请号为CN201210292779X的中国发明专利申请公开了一种蜗牛粘液的提取方法，采用瞬间电击蜗牛足部，收集蜗牛足腺分泌的粘液，然后通过冷冻干燥得到蜗牛分泌物。0005目前对蜗牛研究报道多数集中在多糖、蜗牛酶、蜗牛粘液等方面的提取，未见含有胶原蛋白、尿囊素、硫酸软骨素、小分子多肽等成分的化妆品级蜗牛黏液提取物的制备工艺方面的。
7、研究报道，也未见有蜗牛黏液提取物在化妆品应用中的功效作用和安全性方面进行评价的研究。鉴于蜗牛黏液提取物可在化妆品中的应用越来越广泛，有必要就供化妆品用的蜗牛黏液提取物的活性成分、安全性进行研究，以确保蜗牛提取物在化妆品中应用的功效和安全。发明内容0006本发明的目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种应用在化妆品中有利于修复受损肌肤，促进愈合，加速细胞再生的蜗牛黏液提取物。0007本发明另一目的是提供一种蜗牛黏液提取物的制备方法。0008本发明第三目的是提供一种蜗牛黏液提取物在化妆品中的应用。0009为了实现上述目的，本发明通过下述技术方案实现一种蜗牛黏液提取物，其中含有硫酸软骨素015，尿。
8、囊素015，胶原蛋白0110，小分子多肽的分子量分布在30005500道尔顿，非常适合于人体皮肤吸收，添加在化妆品中有利于修复受损肌肤，促进愈合，加速细胞再生。0010所述蜗牛黏液提取物是从白玉蜗牛黏液中提取制得的，主要含有胶原蛋白、尿囊素、硫酸软骨素、小分子多肽活性成分。0011所述蜗牛黏液提取物是通过以下步骤制得的取蜗牛黏液与去离子水混合均匀后，用高压匀浆器中提取；提取物料经离心机分离后，得到清澄提取液；提取液经微滤处说明书CN104042548A2/10页5理，除去细菌、微生物等杂质制得除菌液；除菌液用超滤分离，除去大分子的蛋白、多糖等人体皮肤难于吸收的物质；然后再用纳滤浓缩，得到供化妆。
9、品使用的蜗牛黏液提取物。0012一种蜗牛黏液提取物的制备方法，其包括以下步骤00131提取取蜗牛黏液，加入其质量530倍的水，在560温度和40100MPA压力下进行高压匀浆组织破碎提取13次。00142离心将1步骤所得的高压匀浆物料用离心机分离，收集清液。00153微滤清液用孔径为01M05M的陶瓷膜微滤，除去细菌、微生物等杂质；00164超滤微滤透析液用截留分子量为6,00050,000道尔顿的超滤膜超滤，除去大分子的蛋白、多糖等人体皮肤难于吸收的物质；00175纳滤超滤透析液用截留分子量802,000道尔顿的纳滤膜浓缩，收集浓缩液，得到蜗牛黏液提取物，通过纳滤浓缩得到供化妆品使用的蜗牛黏。
10、液提取物。0018所述蜗牛黏液优选白玉蜗牛产生的粘液。0019一种蜗牛黏液提取物在化妆品中的应用，其添加量为0520。0020一种抗衰老组合物，其包括以下重量份数组分00210022一种抗衰老面膜，其包括以下重量份数组分0023说明书CN104042548A3/10页60024蜗牛黏液提取物含有的尿囊素可修复受损肌肤，促进愈合，加速细胞再生；胶原蛋白具有保持水分，增强皮肤弹性的功效；硫酸软骨素有利于去除老旧角质，减少皮肤皱纹及疤痕；小子多肽具有刺激肌肤再生、淡化色斑、增进肌肤质地和光泽度的作用。0025与现有技术相比，本发明的优点是采用了高压匀浆提取和多级膜分离联用技术，蜗牛黏液有效成分高度富。
11、集，蜗牛黏液提取物含有硫酸软骨素015，尿囊素015，胶原蛋白0110，特别是小分子多肽的分子量分布在30005500道尔顿，非常适合于人体皮肤吸收，添加在化妆品中有利于修复受损肌肤，促进愈合，加速细胞再生。附图说明0026图1是发明技术工艺流程图表示了本发明的主要技术过程，其中高压匀浆提取结合多级膜分离浓缩是本发明的技术关键；0027图2是产品分子量分布图表示供化妆品用的蜗牛黏液提取物中多肽的分子量分布情况，主要分布在30005500道尔顿；0028图3是产品细胞增值实验结果图表示添加了供化妆品用的蜗牛黏液提取物细胞增殖实验结果；0029图4是产品空白组细胞增值实验结果图表示空白组的细胞修复。
12、实验结果。具体实施方式0030下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。0031实施例10032一种蜗牛黏液提取物，其中含有硫酸软骨素02质量百分比含量，尿囊素02，胶原蛋白02，小分子多肽的分子量分布在3100道尔顿。说明书CN104042548A4/10页70033实施例20034一种蜗牛黏液提取物，其中含有硫酸软骨素49，尿囊素49，胶原蛋白99，小分子多肽的分子量分布在5400道尔顿。0035实施例30036一种蜗牛黏液提取物，其中含有硫酸软骨素13，尿囊素13，胶原蛋白16，小分子多肽的分子量分布在35005000道尔顿。0037实施例40038一种。
13、蜗牛黏液提取物，其中含有硫酸软骨素25，尿囊素25，胶原蛋白5，小分子多肽的分子量分布在4500道尔顿，非常适合于人体皮肤吸收，添加在化妆品中有利于修复受损肌肤，促进愈合，加速细胞再生。0039实施例50040上述蜗牛黏液提取物的制备方法，如图1所示，其包括以下步骤00411提取取蜗牛黏液，加入其质量6倍的水，在8温度和50MPA压力下用高压匀浆器进行高压匀浆组织破碎提取13次。00422离心将1步骤所得的高压匀浆物料用离心机分离，收集清液；离心机转速可以为5001300转/分钟；00433微滤清液用孔径为02MM的陶瓷膜微滤，除去细菌、微生物等杂质；00444超滤微滤透析液用截留分子量为6,。
14、500道尔顿的超滤膜超滤，除去大分子的蛋白、多糖等人体皮肤难于吸收的物质；00455纳滤超滤透析液用截留分子量100道尔顿的纳滤膜浓缩，收集浓缩液，得到蜗牛黏液提取物，通过纳滤浓缩得到供化妆品使用的蜗牛黏液提取物。0046实施例60047上述蜗牛黏液提取物的制备方法，其包括以下步骤00481提取取蜗牛黏液，加入其质量29倍的水，在59温度和99MPA压力下用高压匀浆器进行高压匀浆组织破碎提取13次。00492离心将1步骤所得的高压匀浆物料用离心机分离，收集清液。00503微滤清液用孔径为049M的陶瓷膜微滤，除去细菌、微生物等杂质；00514超滤微滤透析液用截留分子量为49,000道尔顿的超滤。
15、膜超滤，除去大分子的蛋白、多糖等人体皮肤难于吸收的物质；00525纳滤超滤透析液用截留分子量1900道尔顿的纳滤膜浓缩，收集浓缩液，得到蜗牛黏液提取物，通过纳滤浓缩得到供化妆品使用的蜗牛黏液提取物。0053实施例70054上述蜗牛黏液提取物的制备方法，其包括以下步骤00551提取取蜗牛黏液，加入其质量20倍的水，在45温度和75MPA压力下用高压匀浆器进行高压匀浆组织破碎提取2次。00562离心将1步骤所得的高压匀浆物料用离心机分离，收集清液。00573微滤清液用孔径为03M的陶瓷膜微滤，除去细菌、微生物等杂质；00584超滤微滤透析液用截留分子量为35,000道尔顿的超滤膜超滤，除去大分子的。
16、蛋白、多糖等人体皮肤难于吸收的物质；说明书CN104042548A5/10页800595纳滤超滤透析液用截留分子量1800道尔顿的纳滤膜浓缩，收集浓缩液，得到蜗牛黏液提取物，通过纳滤浓缩得到供化妆品使用的蜗牛黏液提取物。0060本发明采用的提取和分离技术，整个生产过程可在低温条件下进行，保证了胶原蛋白、小分子多肽等活性成分不被破坏。同时由于采用了多级膜分离技术，除去了蜗牛黏液大分子物质和细菌微生物，高度富集胶原蛋白和小分子多肽，保证蜗牛黏液提取物在化妆品应用的安全性和在皮肤修复方面的功效作用。0061其中，所述蜗牛黏液优选白玉蜗牛产生的粘液。所述超滤膜优选中空纤维膜，所述中空纤维膜内径在066。
17、MM之间的超滤膜称为毛细管式超滤膜，毛细管式超滤膜因内径较大，不易被大颗粒物质堵塞。所述纳滤膜可以是聚酰胺材质制成的。0062实施例80063取10KG蜗牛黏液，置于提取釜中，加入300L的水，加热至60，搅拌混合均匀后，用高压匀浆器中提取3次。所得到的提取物料用离心机离心分离，除去沉淀物质。离心液用孔径为05M陶瓷膜微滤处理，微滤透析液用截留分子量50,000道尔顿的超滤膜超滤，超滤透析液用截留分子量2,000道尔顿纳滤膜浓缩，收集浓缩液，得到蜗牛黏液提取物产品118G，收率118。0064实施例90065取45KG蜗牛黏液，置于提取釜中，加入225L的水，冷却至5，搅拌混合均匀后，用高压匀。
18、浆器中提取1次。所得到的提取物料用离心机离心分离，除去沉淀物质。离心液用孔径为01M陶瓷膜微滤处理，微滤透析液用截留分子量6,000道尔顿的超滤膜超滤，超滤透析液用截留分子量80道尔顿纳滤膜浓缩，收集浓缩液，得到蜗牛黏液提取物产品841G，收率187。0066实施例100067取22KG蜗牛黏液，置于提取釜中，加入330L的水，加热至40，搅拌混合均匀后，用高压匀浆器中提取2次。所得到的提取物料用离心机离心分离，除去沉淀物质。离心液用孔径为03M陶瓷膜微滤处理，微滤透析液用截留分子量10,000道尔顿的超滤膜超滤，超滤透析液用截留分子量500道尔顿纳滤膜浓缩，收集浓缩液，得到蜗牛黏液提取物产品。
19、702G，收率319。0068实施例110069取35KG蜗牛黏液，置于提取釜中，加入280L的水，于室温25条件下搅拌混合均匀后，用高压匀浆器中提取3次。所得到的提取物料用离心机离心分离，除去沉淀物质。离心液用孔径为02M陶瓷膜微滤处理，微滤透析液用截留分子量6,000道尔顿的超滤膜超滤，超滤透析液用截留分子量1,000道尔顿纳滤膜浓缩，收集浓缩液，得到蜗牛黏液提取物产品21KG，收率600。0070实施例120071取30KG蜗牛黏液，置于提取釜中，加入300L的水，于室温25条件下搅拌混合均匀后，用高压匀浆器中提取2次。所得到的提取物料用离心机离心分离，除去沉淀物质。离心液用孔径为03M。
20、陶瓷膜微滤处理，微滤透析液用截留分子量8,000道尔顿的超滤膜超滤，超滤透析液用截留分子量800道尔顿纳滤膜浓缩，收集浓缩液，得到蜗牛黏液提取物产品16KG，收率533。说明书CN104042548A6/10页90072上述实施例所得的蜗牛黏液提取物的硫酸软骨素、尿囊素、胶原蛋白含量，以及小子肽的分子量分布结果汇总见下表007300740075按照化妆品管理及安全性和功效性评价的规定，进行了蜗牛黏液提取物的皮肤刺激试验、眼部刺激实验和细菌微生物方面的检测，各项指标结果均符合化妆品的要求。0076本发明蜗牛黏液提取物能有效提高皮肤细胞自我分化和复制能力，原蛋白具有保持水分，增强皮肤弹性的功效；硫。
21、酸软骨素有利于去除老旧角质，减少皮肤皱纹及疤痕；小子多肽具有刺激肌肤再生、淡化色斑、增进肌肤质地和光泽度的作用。具体检测参见图24所示，。0077一种蜗牛黏液提取物在膏霜、水剂、乳液等化妆品中的应用，其优选的添加量为110。最优选的，蜗牛黏液提取物的添加量为5。0078实施例130079一种抗衰老组合物，其包括以下重量份数组分0080说明书CN104042548A7/10页100081实施例140082一种抗衰老组合物，其包括以下重量份数组分00830084实施例150085一种抗衰老组合物，其包括以下重量份数组分0086说明书CN104042548A108/10页110087上述一种抗衰老组。
22、合物的制备方法如下00881先将乙二胺四乙酸二钠加入水相中搅拌，同时加热升温至8090摄氏度后保温半小时；00892在1步骤水相中依次加入聚甘油、氢化淀粉水解物、卡拉胶和透明质酸钠、搅拌至完全溶解后开始降温；00903待温度降到4555摄氏度后加入芦荟提取物、海藻糖、维生素E和萄聚糖，搅拌均匀；00914将温度降至3545摄氏度后加入蜗牛黏液提取物和，搅拌均匀；00925最后加入用氢氧化钠调节好PH值为78，搅拌均匀。0093实施例160094一种抗衰老面膜，其包括以下重量份数组分0095说明书CN104042548A119/10页120096实施例170097一种抗衰老面膜，其包括以下重量份。
23、数组分009800990100实施例180101一种抗衰老面膜，其包括以下重量份数组分0102说明书CN104042548A1210/10页130103上述一种抗衰老面膜的制备方法如下01041在水中加入乙二胺四乙酸二钠EDTA2NA搅拌，同时加热升温至8090摄氏度后保温半小时；01052依次加入聚甘油、氢化淀粉水解物、卡拉胶和透明质酸钠，以2050RPM的转速搅拌至完全溶解后开始降温；01063待温度降到4555摄氏度后加入防腐剂、芦荟提取物、海藻糖、维生素E和萄聚糖，充分搅拌均匀；01074在温度降至3545摄氏度后加入蜗牛黏液提取物，以2050RPM的转速搅拌均匀；01085最后加入用。
24、氢氧化钠调节好PH值为78，1020RPM的转速搅拌搅拌均匀。0109上述实施例制成的化妆品对皮肤没有不良效果，可以有效的改善皮肤状态，使其恢复活性和弹性，具有两个保湿滋润效果，能有效提高皮肤细胞自我分化和复制能力，原蛋白具有保持水分，增强皮肤弹性的功效；硫酸软骨素有利于去除老旧角质，减少皮肤皱纹及疤痕；小子多肽具有刺激肌肤再生、淡化色斑、增进肌肤质地和光泽度的作用。具体检测参见图24所示，其检测效果与上述提取物检测效果一致。0110上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。说明书CN104042548A131/4页14图1说明书附图CN104042548A142/4页15图2说明书附图CN104042548A153/4页16图3说明书附图CN104042548A164/4页17图4说明书附图CN104042548A17。