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稳定的溴烯尿苷局部用制剂
本发明涉及含有抑病毒剂溴烯尿苷和用于防止其光降解的稳定剂的局部用制剂。
技术背景
溴烯尿苷((E)-5-(2-溴乙烯基)-2’-脱氧尿苷)是抗病毒剂，其对水痘-带状疱疹病毒(VZV)和单纯疱疹病毒1型(HSV-1)非常有效。溴烯尿苷对抗VZV和HSV-1一向比其它已知的抑病毒剂如阿昔洛韦(ACV)和喷昔洛韦(PCV)更为有效。但是，溴烯尿苷的光不稳定性极大地限制了其在治疗中的应用。特别是UV光可导致溴烯尿苷异构化为Z-BVDU，并导致其它分解产物的形成，临床效力随之下降。因此非常需要溴烯尿苷的光稳定化作用，特别是对于可能经受长期光暴露的剂型如皮肤制剂。
不同的方法已被建议用于稳定药物，防止光降解。
US 6136332描述了用于治疗患病嘴唇的非水性皮肤病/药物组合物，当局部应用于人皮肤时其具有转移或迁移抗性。所述抗性是至少一种挥发油和至少一种苯代硅油联用的结果。该发明还包含具有一定程度的抗病毒活性的治疗剂。另外它还包含有机和无机防晒剂，但没有给出任何关于如何选择适宜防晒剂的提示。但是，该发明仍然没有解决抑病毒剂溴烯尿苷的有效光稳定化问题。
EP 0147811描述了加入发挥抗氧化作用的类黄酮衍生物如羟乙芦丁对吗多明的光稳定化作用。
US 5290774描述了使用在水性溶液中形成络合物的多元醇和硼酸对光敏药物的稳定化作用。
DE 3136282建议使用具有相似吸收图谱的物质保护光不稳定药物。据推测该保护作用取决于稳定剂和药物的吸收光谱之间的相似性，即两个吸收光谱之间的重叠越大，光稳定化作用越好。根据DE 3136282，按照ICH(国际协调会议)指导原则CPMP/ICH/279/95测定溴烯尿苷的降解。试验了包括药用赋形剂、着色剂或耐光药物在内的多种物质与溴烯尿苷的混合物。但是，大部分所试验的食品着色剂包括喹啉黄或香兰素均不能令人满意地稳定溴烯尿苷。
发明描述
现已发现某些吸收光谱与溴烯尿苷不同的物质可提供令人满意的溴烯尿苷光稳定化作用。
用偶氮类着色剂获得了最佳结果，如胭脂红A(E 124；丽春红4R；7-羟基-8-(4-磺酸基-1-萘基偶氮)-萘-1，3-二磺酸，三钠盐；CAS：2611-82-7)、金莲橙O(2，4-二羟基偶氮苯-4’-磺酸钠盐；CAS：547-57-9)或食品红9(E123；3-羟基-4-(4-磺酸基-1-萘基偶氮)-萘-2，7-二磺酸，三钠盐；CAS：915-67-3)。这组化合物的结构特征是存在与两个芳香体系如苯、萘、吡啶、吡咯、噻吩结合的偶氮基团，其中两个芳香体系可具有不超过4个选自以下的取代基：羟基、氨基、巯基、甲氧基、乙氧基、C₁-C₄-烷基、羧基、甲酰基、磺酸或膦酸以及相应的盐。
这些偶氮着色剂的光谱与溴烯尿苷的光谱显著不同。例如，胭脂红A显示在330和505nm有最大吸收，而溴烯尿苷的最大吸收在250nm和290nm。胭脂红A导致溴烯尿苷的耐光性增加至三倍以上。发现食品红9可保护溴烯尿苷避免分解，高于对照30％以上。用金莲橙O获得了最佳的回收率。当以5％的浓度使用时，在1％的制剂中几乎检测不到溴烯尿苷的降解。金莲橙O显示在约395nm有最大吸收。
另外，对若干紫外吸收剂作为溴烯尿苷的光稳定剂进行了试验。
观察到帕地马酯O、苯基苯并咪唑磺酸、Uvinul^T150、Uvinul^P25或水杨酸三甲环己酯无效。
令人惊讶的是：发现具有邻-羟基-二苯酮结构的UV-吸收剂如二羟苯酮、羟苯甲酮、2，2’，4，4’-四羟基-二苯酮、2，4-二羟基二苯酮、2，2’-二羟基-4，4’-二甲氧基二苯酮-5，5’-二磺酸钠和磺异苯酮可有效地使溴烯尿苷制剂对UV-照射稳定。虽然这些吸收剂不具有与溴烯尿苷相似的吸收图谱—例如2，2’，4，4’-四羟基二苯酮的最大吸收为约350nm—，但是与单独的溴烯尿苷相比，它们使照射后的溴烯尿苷回收率增加至三倍，即初始浓度的约75％。本发明的二苯酮衍生物包括这样的化合物，其中形成二苯酮部分的芳环带有不超过8个选自以下的取代基：羟基、氨基、巯基、甲氧基、乙氧基、C₁-C₄-烷基、羧基、甲酰基、磺酸和膦酸以及相应的盐。还包括在二苯酮的酮基邻位上带有至少一个羟基的相同化合物。
除了邻-羟基-二苯酮衍生物和偶氮着色剂以外，用类胡萝卜素，特别是β-胡萝卜素也获得了溴烯尿苷的光稳定化作用。后者在250至350nm的照射范围内几乎没有吸收，可产生显著的溴烯尿苷光稳定化作用。本发明的类胡萝卜素是指具有四萜结构的化合物，所述四萜结构具有不超过12个共轭双键，其选自α-、β-、γ-和δ-胡萝卜素、番茄红素、叶黄素、角黄素、隐黄质、rodoxanthin、玉米黄素、藏红花素、虾青素、岩藻黄质和堇菜黄质。
对这组抗氧剂/自由基猝灭剂物质的稳定化性能进行了试验。物质如半胱氨酸或α-脂酮酸未显示任何溴烯尿苷光稳定化作用。
不同的是，发现UV-吸收剂阿伏苯宗(avobenzene)、氰双苯丙烯酸辛酯、甲基-亚苄基-樟脑、甲氧基肉桂酸辛酯、二苯基-丙烷-1，3-二酮衍生物和氰基-二苯基丙烯酸衍生物可稳定溴烯尿苷，但是比二苯酮衍生物或偶氮着色剂的稳定化程度低。因此认为它们不是本发明的优选方案。
根据本发明，一组二苯基-丙烷-1，3-二酮衍生物包括这样的化合物，其中存在于二苯基-丙烷-1，3-二酮部分中的两个芳环带有至多6个彼此独立地选自以下的取代基：羟基、巯基、甲氧基、乙氧基、C₁-C₄-烷基、羧基、甲酰基、磺酸或膦酸，以及相应的盐，而氰基-二苯基丙烯酸衍生物包括这样的化合物，其中氰基-二苯基丙烯酸部分带有不超过6个选自以下的取代基：羟基、巯基、甲氧基、乙氧基、C₁-C₄-烷基、羧基、甲酰基、磺酸或膦酸，以及相应的盐。
因此，本发明的目的是权利要求1地含有溴烯尿苷作为活性成分和至少一种以上提及的光稳定剂以及可药用赋形剂的局部用制剂。
优选具有苯基-偶氮-苯或邻-羟基-二苯酮结构的一组化合物以及类胡萝卜素。UV-吸收剂、特别是那些邻-羟基-二苯酮类的UV-吸收剂可制备无色皮肤制剂，一经应用于皮肤其可确保有效的药物光稳定化作用。将不同的邻-羟基-二苯酮衍生物、UV-吸收剂、类胡萝卜素和/或苯基-偶氮-苯衍生物联用可进一步提高光稳定作用的功效。事实上，已发现多组分制剂的亲水/亲油比率影响光稳定化作用的效力。例如，在O/W乳剂中，联用亲水性和亲油性光稳定剂磺异苯酮和羟苯甲酮可提供比单独的相同浓度的每种稳定剂更好的溴烯尿苷光稳定化作用。
根据本发明，可以使用的光稳定剂浓度为0.1％至10％、优选0.5％至5％w/w。
优选的局部用制剂为凝胶剂、乳剂、微乳、乳膏剂、软膏剂和唇膏的形式。制备本发明药物组合物的适宜方法为本领域任何技术人员所熟知，例如在Remington’s Pharmaceutical Science，第17版，Mack出版公司，Easton，PA(1985)中述及。对于一些制剂，可使用增加粘度的成分。已知的增稠剂有纤维素、淀粉和脂肪酸的衍生物以及硬脂酸铝、十六醇十八醇混合物(cetearyl alcohol)、二氧化硅、蜂蜡、白蜂蜡、卡波姆、聚乙烯醇。在任何情况下，本制剂中都不使用含苯基的硅油。
当制剂本身不具有足够的抗微生物活性或未经特殊制备或容器保存时，可以加入抗微生物防腐剂，特别是对于处于多剂量容器中的制剂。抗微生物防腐剂可选自季铵化合物例如十六烷三甲基氯化铵或苯扎氯铵、对-羟基苯甲酸衍生物如4-羟基苯甲酸甲酯或4-羟基苯甲酸丙酯、苯甲酸和山梨酸衍生物。其它抗微生物防腐剂有氯己定、氯甲酚(chloroxymethylbenzole)、咪唑烷基脲、2-溴-2-硝基-1，3-丙二醇、苯甲醇、苯氧基乙醇、醋酸苯汞。
本发明的稳定制剂可方便地用于局部治疗VZV和HSV-1感染。
稳定性试验
表1：在表面活性剂凝胶中不同物质对溴烯尿苷的稳定化作用(溴烯尿苷-/染料-/UV-吸收剂-浓度：1％w/w)；根据ISO 10977，SUNTESTCPS+，Atlas Co.，使用氙灯照射。

    染料/UV吸收剂    回收率％    (均值，n＝2至13)    不添加    26.1    喹啉黄^*    3.0    柠檬黄^*    10.6    β-胡萝卜素    35.0    食品红9^**    56.2    胭脂红A^**    77.6    金莲橙O^**    84.9    磺异苯酮^***    37.7    2，2’，4，4’-四羟基二苯酮^***    59.2    二羟苯酮^***    69.3
^*阴性实例(虽然与溴烯尿苷吸收相似，但没有光稳定化作用)
^**偶氮-着色剂
^***二苯酮衍生物
表2：在微乳中不同染料或UV-吸收剂对溴烯尿苷溶液的稳定化作用(溴烯尿苷-/染料-/UV-吸收剂-浓度：1％w/w)；根据ISO 10977，SUNTEST CPS+，Atlas Co.，使用氙灯、7200kJ/m²照射；由于样品形式特殊(密封于石英容器中)，所以在微乳中的回收率普遍高于那些用表面活性剂凝胶或O/W乳膏剂获得的回收率。    染料/UV吸收剂    回收率，以％计    (均值，n＝3)    不添加    73.0    食品红9^**    99.1    胭脂红A^**    100.1    磺异苯酮^***    88.1    羟苯甲酮^***    89.6    2，2’，4，4’-四羟基二苯酮^***    93.6    二羟苯酮^***    94.4
^**偶氮-着色剂
^***二苯酮衍生物
表3：在O/W-乳膏剂中不同UV-吸收剂对溴烯尿苷的光稳定化作用(溴烯尿苷-浓度：1％w/w；吸收剂-浓度：5％w/w)；根据ISO 10977，SUNTEST CPS+，Atlas Co.，使用氙灯、7200kJ/m²照射。    UV吸收剂    回收率，以％计    (均值，n＝3)    不添加    14.3    Uvinul^P25^*    0.3    帕地马酯O    17.2    磺异苯酮^***    37.2    羟苯甲酮^***    61.7    2，2’，4，4’-四羟基二苯酮^***    67.8    二羟苯酮^***    85.7
^*阴性实例(无光稳定化作用)
^***二苯酮衍生物
表4：在O/W-乳膏剂中不同UV-吸收剂对溴烯尿苷的光稳定化作用(溴烯尿苷-浓度：2％w/w；吸收剂-浓度：5％w/w)；根据ISO 10977，SUNTEST CPS+，Atlas Co.，使用氙灯、7200kJ/m²照射。    UV吸收剂    回收率，以％计    (均值，n＝3)    不添加    9.9    2.5％磺异苯酮^***/2.5％Uvinul^D50^***    48.1    2.5％磺异苯酮^***/2.5％羟苯甲酮^***    78.3    2.5％磺异苯酮^***/2.5％二羟苯酮^***    83
^***二苯酮衍生物
以下实施例更为详细地阐述了本发明。
实施例-药物组合物
通过在30℃的温度下将所有成分混合2小时制备以下微乳：
实施例1
溴烯尿苷                          1％
羟苯甲酮                          4％
肉豆蔻酸异丙酯                    29.5％
泊洛沙姆101                       11.8％
聚山梨酯85                        17.7％
二氧化硅                          10.7％
水                                适量加至100％
抗微生物防腐剂可以最后加入。
实施例2
溴烯尿苷                          1至2.5％
二羟苯酮                          0.5至2.5％
肉豆蔻酸异丙酯                    25至37％
泊洛沙姆101                       8至20％
聚山梨酯85                        15至25％
二氧化硅                          5至12％
4-羟基苯甲酸甲酯                  0.18％
4-羟基苯甲酸丙酯                  0.2％
水                                适量加至100％
实施例3
溴烯尿苷                          1至2.5％
2，2’，4，4’-四羟基二苯酮       0.5至5％
棕榈酸异丙酯                      25至37％
泊洛沙姆101                       8至20％
PEG-(50)-山梨醇-六油酸酯          15至25％
苯扎氯铵                          0.05至0.1％
乙二胺四乙酸                      0.1％
水                                适量加至100％
实施例4
溴烯尿苷                          1至2.5％
羟苯甲酮                          0.5至6％
肉豆蔻酸异丙酯                    25至37％
泊洛沙姆101                       8至20％
聚山梨酯85                        15至25％
水                                适量加至100％
实施例5
溴烯尿苷                          1至2.5％
磺异苯酮                          0.5至2.5％
肉豆蔻酸异丙酯                    25至37％
泊洛沙姆122                       8至20％
PEG-(40)-山梨醇-六油酸酯          15至25％
山梨酸                            0.1至0.2％
柠檬酸                            适量
水                                适量加至100％
实施例6
溴烯尿苷                          1至2.5％
胭脂红A                           0.5至2.5％
肉豆蔻酸异丙酯                    25至37％
泊洛沙姆101                       8至20％
PEG-(25)-甘油-三油酸酯            15至25％
以下凝胶制剂如下制备：将泊洛沙姆和水在10℃至20℃的温度下混合6至8小时，然后在充分混合下加入剩余的成分：
实施例7
溴烯尿苷                          1至2％
二羟苯酮                          0.5至2.5％
泊洛沙姆407                       1至10％
泊洛沙姆188                       10至40％
水                                适量加至100％
实施例8
溴烯尿苷                          1至2％
2，2’，4，4’-四羟基二苯酮       0.5至5％
泊洛沙姆407                       1至10％
泊洛沙姆188                       10至40％
4-羟基苯甲酸甲酯                  0.18％
4-羟基苯甲酸丙酯                  0.02％
水                                适量加至100％
实施例9
溴烯尿苷                          1至2％
磺异苯酮                          0.5至5％
氢氧化钠                          适量
泊洛沙姆407                       1至10％
泊洛沙姆188                       10至40％
氯己定                            0.05％
水                                适量加至100％
实施例10
溴烯尿苷                          1至2％
胭脂红A                           0.5至5％
泊洛沙姆407                       1至10％
泊洛沙姆188                       10至40％
十六烷三甲基氯化铵                0.05至0.1％
水                                适量加至100％
实施例11
溴烯尿苷                          1至2％
β-胡萝卜素                       0.1至2.5％
泊洛沙姆407                       1至10％
泊洛沙姆188                       10至40％
4-羟基苯甲酸甲酯                  0.18％
4-羟基苯甲酸丙酯                  0.2％
水                                适量加至100％
以下卡波姆凝胶如下制备：将除1，2-丙二醇和水以外的所有成分混合，之后将混合物加至1，2-丙二醇中，最后加入水，将所述系统混合直至形成透明的凝胶。
实施例12
溴烯尿苷                          1至2.5％
磺异苯酮                          0.5至2.5％
卡波姆940                         1至2％
三(羟甲基)氨基甲烷                1至3％
1，2-丙二醇                       5至40％
柠檬酸                            适量
4-羟基苯甲酸甲酯                  0.18％
4-羟基苯甲酸丙酯                  0.2％
水                                适量加至100％
实施例13
溴烯尿苷                          1至2.5％
胭脂红A                           0.5至2.5％
卡波姆940                         1至2％
三(羟甲基)氨基甲烷                1至3％
1，2-丙二醇                       5至40％
苯扎氯铵                          0.1％
乙二胺四乙酸                      0.1％
水                                适量加至100％
实施例14
以下O/W乳膏剂如下制备：在80℃下乳化并均化，冷却至20℃至30℃，并在充分混合下加入活性成分。
溴烯尿苷                          1至2.5％
磺异苯酮                          0.5至2.5％
羟苯甲酮                          0.1至6％
1，2-丙二醇                       10至20％
氢氧化钾                          适量
石蜡油，subliquidum               15至30％
白凡士林(vasilinum album)         15至27％
聚氧乙烯-单硬脂酸酯               2至5％
十六醇十八醇混合物                2至5％
聚二甲基硅氧烷                    0.01至0.5％
咪唑烷基脲                        0.6％
4-羟基苯甲酸丙酯                  0.1至0.2％
水                                适量加至100％
实施例15
以下软膏剂如下制备：将油性成分熔化并混合，然后加入活性成分和UV-吸收剂，将软膏剂冷却至室温，必要时保持搅拌并均化。
溴烯尿苷                          1至2.5％
羟苯甲酮                          0.5至6％
石蜡油，perilquidum               2至10％
白凡士林                          适量加至100％
以下唇膏如下制备：将唇膏成分在约70℃至80℃下熔化并混合，然后加入活性成分和UV-吸收剂，随后将混合物铸塑在唇膏容器中。
实施例16
溴烯尿苷                          1至2.5％
二羟苯酮                          0.5至2.5％
胭脂红A                           0.1至1％
甘油单硬脂酸酯                    6至10％
氢化椰油-甘油酯                   28至29％
辛酸/癸酸甘油三酯                 38至39％
甘油三癸酸酯                      4至8％
白蜂蜡                            4至6％
氢化棕榈油                        1至3％
白凡士林                          适量加至100％
实施例17
溴烯尿苷                          1至2.5％
羟苯甲酮                          0.5至6％
胭脂红A                           0.1至1％
甘油单硬脂酸酯                    12至20％
氢化椰油-甘油酯                   28至29％
辛酸/癸酸甘油三酯                 28至39％
双甘油与辛酸/癸酸/异硬脂酸/
羟基硬脂酸和己二酸的混合酯        13至34％
白蜂蜡                            适量加至100％
所使用的非专有名说明：
物质                              说明
1，2-丙二醇                       丙二醇(USP 24)
卡波姆940                         卡波姆940(USPNF 19)
卡波姆934P                        卡波姆934P(USPNF 19)
白蜂蜡                            白蜡(USPNF 19)
十六醇十八醇混合物                十六醇十八醇混合物(USPNF 19)
胭脂红A                           E124；丽春红4R；7-羟基-8-(4-
                                  磺酸基-1-萘基偶氮)-萘-1，3-二磺酸，三
                                  钠盐；CAS：2611-82-7
二羟苯酮                          二羟苯酮(USP 24)
苯基苯并咪唑磺酸                  苯基苯并咪唑磺酸(USP 24)
帕地马酯O                         帕地马酯O(USP 24)
水杨酸三甲环己酯                  水杨酸三甲环己酯(USP 24)
食品红9                           E123；3-羟基-4-(4-磺酸基-1-萘基偶
                                  氮)-萘-2，7-二磺酸，三钠盐；
                                  CAS：915-67-3
肉豆蔻酸异丙酯                    肉豆蔻酸异丙酯(USPNF 19)
泊洛沙姆188                       泊洛沙姆188(USPNF 19)
泊洛沙姆407                       泊洛沙姆407(USPNF 19)
石蜡油，perilquidum               矿脂(欧洲药典)
石蜡油，subliquidum               矿物油(USP 24)
聚二甲基硅氧烷                    聚二甲基硅氧烷(USPNF 19)
氢氧化钾                          氢氧化钾(USP 24；试剂)
喹啉黄                            I类：2-(1，3-二氧代-2-二氢化茚基)-喹
                                  啉-二磺酸，二钠盐
                                  II类：2-(1，3-二氧代-2-二氢化茚基)-甲
                                  基喹啉-二磺酸，二钠盐；
                                  CAS：8004-92-0；E104
氢氧化钠                          氢氧化钠(USPNF 19)
柠檬黄                            5-羟基-1-(4-磺酸基苯基)-4-(4-磺酸基
                                  苯基偶氮)-吡唑-3-碳酸，三钠盐；
                                  CAS：1934-21-0；E102
三(羟甲基)氨基甲烷                氨丁三醇(USP 24；试剂)
金莲橙O                           2，4-二羟基偶氮苯-4’-磺酸钠盐；CAS：
                                  547-57-9
聚山梨酯85                        聚氧乙烯20失水山梨醇三油酸酯
                                  CAS：9005-70-3
羟苯甲酮                          羟苯甲酮(USP 24)
甲氧基肉桂酸辛酯                  甲氧基肉桂酸辛酯(USP 24)
磺异苯酮                          磺异苯酮(USP 24)
2，2’，4，4’-四羟基二苯酮       CAS：131-55-5
4-双(聚乙氧基)对氨基-苯甲         CAS：113010-52-9
酸-聚乙氧基乙酯
2，4，6-三苯胺基-对-(羰基-2’-乙  CAS：88122-99-0
基己基-1’-氧基)-1，3，5-三嗪
香兰素                            香兰素(USPNF 19)
白凡士林                          凡士林(USP 24)