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1、10申请公布号CN104311257A43申请公布日20150128CN104311257A21申请号201410516438522申请日20140930C05G3/0020060171申请人汤阴县食用菌研究所地址456150河南省安阳市汤阴县高速路口东300米72发明人王志军王森孔维威王月娥张春红孔维丽54发明名称一种木腐食用菌母种培养基配方及其配制方法57摘要本发明公开了一种木腐食用菌母种培养基配方及其配制方法,其配方由以下重量份的原料组成桃树枝条60100,小麦粒4060,豆腐4060,多维葡萄糖粉1525,琼脂1525,水1000;本发明又提供了培养基的配制方法,其步骤包括选料、配制、。
2、分装、封口、捆扎、灭菌、摆斜面,该培养基经多年使用,所转接培养的木腐食用菌菌种不论是纯化、复壮或继代培养,其菌丝生长浓密度、整齐度及生长速度均优于传统培养基PDA,特别是用于冰箱低温保藏的母种,在使用硅胶塞情况下,保藏12年后转接,其成活率仍可达到95以上,且无品种退化、变异等现象发生。51INTCL权利要求书1页说明书3页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书3页10申请公布号CN104311257ACN104311257A1/1页21一种木腐食用菌母种培养基配方,其特征在于由以下重量份的原料组成桃树枝条60100,小麦粒4060,豆腐4060,多维葡萄糖粉15。
3、25,琼脂1525,水1000;所述桃树枝条为初春桃树修剪时剪取并晒干的枝条,其直径小于1CM,长度为23CM;所述豆腐为市场销售的普通块状豆腐;所述水为凉开水或者纯净水。2根据权利要求1所述的一种木腐食用菌母种培养基配方,其特征在于该配方由以下重量份的原料组成桃树枝条80、小麦粒50、豆腐50、多维葡萄糖粉20、琼脂20、水1000。3根据权利要求1所述的一种木腐食用菌母种培养基配方,其特征在于所述桃树枝条的长度为25CM。4如权利要求1所述的一种木腐食用菌母种培养基的配制方法,其特征在于该配制方法包括以下步骤A、选料选取初春桃树修剪时的干桃树枝条,直径小于1CM,长度为23CM;选取籽粒饱。
4、满、干燥、无霉变的小麦粒;选用市场销售的普通块状豆腐,并切成小于1CM3的小块;市售多维葡萄糖粉,条状或者粉状琼脂;B、配制(1)煮料将桃树枝条、小麦粒用流水反复冲洗并沥干,再将沥干的桃树枝条、小麦粒、步骤A中的豆腐放入1000ML水中文火煮沸,并保持2530MIN,当小麦粒有开花趋势时关火;(2)初次过滤将煮过的料中的汁液用四层纱布过滤出来,静放510MIN后将上清液倒入锅内,底部沉淀废弃;(3)加热在初次过滤的汁液中加入琼脂,加热15MIN,直至琼脂完全溶化,停止加热;(4)再次过滤在加热后的汁液中加入多维葡萄糖粉并充分搅匀,用46层纱布滤去杂质即得配制液;C、分装将步骤B中得到的配制液分。
5、装入试管中,每个试管的装入量为试管长度的1/5;D、封口将步骤C分装后的试管用棉塞或者硅胶塞封口,封口松紧适中;E、捆扎将步骤D中封口后的试管每10支扎成一捆,每捆上部用牛皮纸或者报纸包裹;F、灭菌将步骤E中捆扎后的试管放入高压灭菌锅内,进行加热,当放气阀有大量蒸气逸出时,将其关闭,使锅内压力上升至004005MPA,再将放气阀缓慢打开,使锅内热蒸汽连同冷空气一同排出,当压力下降后至0后,关闭放气阀,继续加热至锅内压力达到015MPA,在此压力下保持2530MIN停火,待压力自然下降至0后,打开放气阀,阀内无蒸气逸出时,将锅盖打开一条小缝,使热蒸汽逸出,利用锅体的余热将棉塞或者硅胶塞烘干;G、。
6、摆斜面当步骤F灭菌后锅内温度降到5065时,取出试管并摆成斜面,斜面长度为试管总长度的1/2。5根据权利要求4所述的一种木腐食用菌母种培养基的配制方法,其特征在于所述配制步骤B中的煮料工序和加热工序中均需要不停轻轻搅拌,防止粘锅、溢锅或焦底。6根据权利要求4所述的一种木腐食用菌母种培养基的配制方法,其特征在于所述配制方法中采用的试管为18180MM或者20200MM规格的试管。7根据权利要求4所述的一种木腐食用菌母种培养基的配制方法,其特征在于所述步骤G中摆斜面时锅内温度为60。权利要求书CN104311257A1/3页3一种木腐食用菌母种培养基配方及其配制方法技术领域0001本发明专利涉及食。
7、用菌母种培养领域,尤其是一种木腐食用菌母种培养基配方及其配制方法。背景技术0002目前,食用菌的营养早已被人们接受,已经成为家家餐桌上的日常菜肴,市场需求量越来越大,因此,种植面积也越来越大。食用菌按其栽培所需的原材料可分为草腐菌和木腐菌(WOODDECAYFUNGI),草腐菌所需栽培主要原料为作物秸秆,以及禾木科秸秆原料,木腐菌栽培的主要原料为阔叶树的木屑和棉籽壳。用作物秸秆为主要原料的栽培的品种和棉籽壳栽培的品种的培养料必须要经过堆制发酵。木腐食用菌是指生于枯木或活立木的死亡部分,分解吸收其养分,破坏其结构,导致木材腐朽的食用菌。由于木腐食用菌是从动植物尸体或无生命的有机物质中获取养料,所。
8、以木腐型食用菌较易培养,当前人工栽培食用菌中绝大多数,例如香菇、杏鲍菇、白灵菇、黑木耳、金耳、银耳、榆耳、槐耳、平菇、金针菇等都是木腐型食用菌。0003传统的木腐食用菌的母种分离和继代培养,多采用马铃薯200G、葡萄糖分析纯20G、琼脂20G、水1000ML的PDA培养基,亦有在此基础上加入MGSO4分析纯15G、KH2PO4分析纯3G的综合PDA培养基用于母种低温保存。实践证明,在生产中若长期使用该类培养基,部分食用菌品种易出现菌丝生长细弱、品种抗逆性降低或品种退化现象,给食用菌菌种生产、保存构成了严重的影响。发明内容0004针对现有技术中的问题,本发明的目的是要提供一种新的木腐食用菌母种培。
9、养基配方及其制备方法,且本发明的配方是由桃树枝条、小麦粒、豆腐、多维葡萄糖粉、琼脂配制而成,该配方制作的母种培养基经过多年应用证明,适宜平菇、香菇、金针菇、黑木耳、灵芝等多种木腐食药用菌的母种分离和继代培养,且无菌丝生长不良、品种抗逆性降低和退化现象发生。0005为了达到上述目的,本发明的技术方案是一种木腐食用菌母种培养基配方,其特征在于由以下重量份的原料组成桃树枝条60100,小麦粒4060,豆腐4060,多维葡萄糖粉1525,琼脂1525,水1000;所述桃树枝条为初春桃树修剪时剪取并晒干的枝条,其直径小于1CM,长度为23CM,优选为25CM晒干后的桃树枝条要妥善储存,严防变质;所述豆腐。
10、为市场销售的普通块状豆腐;所述水为凉开水或者纯净水。0006进一步地,该木腐食用菌母种培养基的配方由以下重量份的原料组成桃树枝条80、小麦粒50、豆腐50、多维葡萄糖粉20、琼脂20、水1000。0007另外,本发明又提供了一种木腐食用菌母种培养基的配制方法,其特征在于该配说明书CN104311257A2/3页4制方法包括以下步骤A、选料选取初春桃树修剪时的干桃树枝条,直径小于1CM,长度为23CM;选取籽粒饱满、干燥、无霉变的小麦粒;选用市场销售的普通块状豆腐,并切成小于1CM3的小块;市售多维葡萄糖粉,普通药店均有销售的口服产品;条状或者粉状琼脂;B、配制(1)煮料将桃树枝条、小麦粒用流水。
11、反复冲洗并沥干,再将沥干的桃树枝条、小麦粒、步骤A中的豆腐放入1300ML水中文火煮沸,煮沸过程中不停的轻轻搅拌,既要防止麦粒粘锅,又需防止搅碎豆腐,保持2530MIN,当小麦粒有开花趋势时关火;(2)初次过滤将煮过的料中的汁液用四层纱布过滤出来,静放510MIN后将上清液倒入锅内,底部沉淀废弃;(3)加热在初次过滤的汁液中加入琼脂,加热15MIN,加热期间应不停搅动,直至琼脂完全溶化,停止加热;(4)再次过滤在加热后的汁液中加入多维葡萄糖粉并充分搅匀,用46层纱布滤去杂质即得配制液;C、分装将步骤B中得到的配制液分装入试管中,每个试管的装入量为试管长度的1/5,此处选用的试管为18180MM。
12、或者20200MM规格的试管;D、封口将步骤C分装后的试管用棉塞或者硅胶塞封口,不论采用哪一种材料封口,封口松紧适中,既能保证正常通气,又能阻止杂菌入侵;E、捆扎将步骤D中封口后的试管每10支扎成一捆,每捆上部用牛皮纸或者报纸包裹,防止灭菌时冷凝水打湿棉塞;F、灭菌将步骤E中捆扎后的试管放入高压灭菌锅内,进行加热,当放气阀有大量蒸气逸出时,将其关闭,使锅内压力上升至004005MPA,再将放气阀缓慢打开,使锅内热蒸汽连同冷空气一同排出,当压力下降后至0后,关闭放气阀,继续加热至锅内压力达到015MPA,在此压力下保持2530MIN停火,待压力自然下降至0后,打开放气阀,阀内无蒸气逸出时,将锅盖。
13、打开一条小缝,使热蒸汽逸出,利用锅体的余热将棉塞或者硅胶塞烘干;G、摆斜面当步骤F灭菌后锅内温度降到5065时,优选为60时,取出试管并摆成斜面,斜面长度为试管总长度的1/2,斜面长短要均匀一致。0008与现有技术相比,本发明提供的一种木腐食用菌母种培养基配方及其配制方法与众不同,该配方由桃树枝条、小麦粒、豆腐、多维葡萄糖粉、琼脂配制而成,该培养基经多年使用,所转接培养的木腐食用菌菌种不论是纯化、复壮或继代培养,其菌丝生长浓密度、整齐度及生长速度均优于传统培养基PDA,特别是用于冰箱低温保藏的母种,在使用硅胶塞情况下,保藏12年后转接,其成活率仍可达到95以上,且无品种退化、变异等现象发生。具。
14、体实施方式0009下面结合具体的实施例对本发明进行进一步说明。0010本发明的一种木腐食用菌母种培养基配方,由以下重量份的原料组成桃树枝条80,小麦粒50,豆腐50,多维葡萄糖粉20,琼脂20,水1000;采用的桃树枝条为初春桃树修剪时剪取并晒干的枝条,其直径小于1CM,长度为23CM,优选为25CM晒干后的桃树枝条要妥善储存,严防变质;采用的豆腐为市场销售的普通块状豆腐;采用的水为凉开水或者纯净水。0011另外,本发明又提供了一种木腐食用菌母种培养基的配制方法,该配制方法包括以下步骤A、选料在桃树修剪使选择直径小于1CM的枝条,用剪枝等工具将枝条剪成23CM说明书CN104311257A3/。
15、3页5长的段,晒干后妥善储存,严防变质;小麦粒应子粒饱满、干燥、无霉变;豆腐选用市场销售的普通块状产品;多维葡萄糖粉为口服产品,普通药店均有销售;琼脂条状、粉状均可。0012B、配制先将桃树枝条、小麦粒放入盆内,用流水反复冲洗干净,放入框内沥去多余的水分,豆腐切成1CM3的小块。将铝或不锈钢锅洗净,加入凉开水或纯净水1300ML其中300ML会在煮沸过程中蒸发,将枝条、小麦粒、豆腐,文火煮沸2530MIN,煮沸过程中要轻轻搅动,既要防止麦粒粘锅,又需防止搅碎豆腐。当小麦粒有开花趋势时停火,将汁液用4层纱布过滤到另一容器内,待汁液静止510MIN后将上清液倒入锅内,底部沉淀废弃,加入琼脂,继续加。
16、热至琼脂完全溶化,加热期间应勤搅动,严防溢锅或焦底,15MIN左右,琼脂即可完全溶化。停止加热后,将多维葡萄糖粉加入锅内充分搅匀,用46层纱布滤去杂质,若滤液不足1000ML可用开水补足。0013C、分装因加入琼脂的汁液低于43极易凝固,所以应趁热及时分装,若环境温度过低,需做好保温工作。分装所用试管的规格多为18180MM或20200MM,每管装入量为810ML,也就是试管长度的1/5,分装应做到装量均匀一致,严防培养液污染管口及管壁。0014D、封口分装好的试管应及时用棉塞或硅胶塞封口。不论采用哪一种材料封口,都应做到松紧适中,既能保证正常通气,又能阻止杂菌入侵。0015E、扎捆封口后的试。
17、管每10支扎成一捆,上部用牛皮纸或报纸包裹,防止灭菌时冷凝水打湿棉塞。0016F、灭菌母种培养基灭菌多采用手提式高压蒸气灭菌锅,先将锅盖打开,取出内桶,加入自来水,水量应略低于底部支架,放入内桶,将是个直立放入桶内,桶内每次可放18180MM的试管120支左右。灭菌时将锅盖盖严,上紧螺丝,即可打开放气阀,开始加热,当放气阀有大量蒸气逸出时,将其关闭,使锅内压力上升至004005MPA,再将放气阀缓慢打开,使锅内热蒸汽连同冷空气一同排出,当压力下降后至0后,关闭放气阀,继续加热至锅内压力达到015MPA,在此压力下保持2530MIN即可停火,待压力自然下降至0后,打开放气阀,阀内无蒸气逸出时,将锅盖打开一条小缝,使热蒸汽逸出,利用锅体的余热将棉塞烘干。0017G、摆斜面当锅内温度降至60左右时,将锅盖完全打开,将试管逐捆取出及时摆成斜面,斜面长度为试管总长的1/2,斜面长短要均匀一致。0018可以理解的是,以上关于本发明的具体描述,仅用于说明本发明而并非受限于本发明实施例所描述的技术方案,本领域的普通技术人员应当理解,仍然可以对本发明进行修改或等同替换,以达到相同的技术效果;只要满足使用需要,都在本发明的保护范围之内。说明书CN104311257A。