卡介菌制剂 技术领域：本发明涉及一种菌苗制剂，确切说，本发明涉及经口服给药的卡介菌制剂。
背景技术：卡介菌为牛型减毒结核菌，无致病性，有免疫原性，用卡介菌接种代替结核菌初次感染而获得对结核病的免疫力，是目前世界上应用最广泛的菌苗之一。
卡介菌是世界上第一个受到重视的免疫调节剂，Freund(1942年)发现它的佐剂作用。odd及Mathe等(1959、1969年)先后证明卡介菌具有增强非特异性免疫功能，增加对肿瘤的抵抗力。后经广泛研究用于肿瘤的免疫治疗。国内从七十年代起，卡介菌作为一种非特异性免疫增强剂，开始用于多种临床疾病的防治上，并收到了良好的效果。灭活卡介菌在通过20多年的实际应用中，其安全性和有效性都得到了证实，已被收入大多数的医药著作中。尤其灭活卡介菌含片是通过模拟自然感染途径，能够达到与上呼吸道感染后一样的提高口咽部分泌型lgA的作用。
分泌型lgA在机体局部免疫中，如保护呼吸道、消化道粘膜中起重要作用。SigA合成功能低下的幼儿易患呼吸道或消化道感染；老年性支气管炎也可能与呼吸道SigA合成功能低下有关。由于外分泌液中SigA不易被一般蛋白酶破坏，故为抗感染、抗过敏的一道重要的免疫“屏障”。SigA对吸入性抗原物质具有封闭作用，使这些抗原物质游离于分泌物中易于排除或使抗原物质限止于粘膜表面，不致进入机体，也避免了一些变态反应的发生。
分泌型lgA的局部免疫作用主要限于抗原刺激部位。因此局部抗原刺激比全身感染或注射抗原能更有效地刺激分泌型lgA的产生。目前利用卡介菌防治疾病的机理和临床报道很多，基础研究已经较为成熟，但由于现有技术采用的诸如下述培养基及其培养方法的限制，所以没能大范围推广应用。申请号为02155312.2的中国专利申请披露了卡介菌培养基、卡介菌培养方法和收获方法，为卡介菌广泛应用提供了广阔的前景。
卡介菌在国内外已经应用了70多年了。从七十年代开始应用卡介菌防治上呼吸道感染及多种疾病。防治疾病机理的研究也取得了很大进展。目前国内医药市场上已有卡介菌提取物～多糖、核酸注射剂型，每周注射2～3次，每次1ml，连续三个月为一疗程。而从七十年代开始的“口服”灭活卡介菌防治疾病研究，持续了20多年，并取得了公认的效果，已被收入大部分医药著作中。
呼吸系统疾病一直在国内各种疾病发病率的前两位。而上呼吸道感染，每年有1/3的人要有一次以上地发病，对人民身体健康带来严重危害。呼吸道疾病和局部粘膜免疫功能的高低有关，而分泌型lgA在局部免疫中起着极其重要作用。老人、儿童呼吸道疾病易感者，多和呼吸道及口咽部SigA合成功能低下有关。利用含服灭活卡介菌，刺激口咽部粘膜免疫系统，提高局部免疫能力，防止上呼吸道感染及哮喘的发病，是简便易行的方法。
发明内容：大批量生产卡介菌的培养基优选配方如下：
(1)成分：味精 7.0-9.0克
(2)K2HPO4·3H2O 0.6-0.9克
(3)Na3C6H5O7 1.7-2.2克
(4)MgSO4 0.4-0.7克
(5)铁(NH4)3(C6H5O7)2 0.04-0.08克
(6)丙三醇 50.0-70.0ml
(7)蒸馏水 940.0ml
(8)马铃薯 6.0-12.0克
(9)国产琼脂粉 15.0～5.0克
大批量生产卡介菌的培养基的最优选配方如下：
(1)成分：味精 7.5-8.5克
(2)K2HPO4·3H2O 0.7-0.9克
(3)Na3C6H5O7 1.9-2.1克
(4)MgSO4 0.4-0.6克
(5)铁(NH4)3(C6H5O7)2 0.04-0.06克
(6)丙三醇 55.0-65.0ml
(7)蒸馏水 940.0ml
(8)马铃薯 18.0-23.0克
(9)国产琼脂粉 7.0～10.0克
《土豆浆亦可用洗净土豆，直接榨汁，按每1000ml培养基加土豆汁20～40ml代替》
本发明提供的方法中，配制方法为，将上述1～7成分混匀加热溶解后，加入蒸熟土豆(或土豆汁)及琼脂粉用打浆机打成糊状，用自动灌装设备分装于大试管内，每管30.0ml，加盖后送入高压灭菌器中15磅30分钟灭菌后倒成斜面凝固后备用。
本发明提供的方法中，接种方法为，在无菌条件下，先将卡介菌制成均匀混悬液，再用吸管适量吸取，均匀涂布于上述斜面上，送入37℃培养室内培养15天，每天观察一次，发现被杂菌污染者，即时取出消毒后洗净以备再用。
本发明提供的方法中，收获卡介菌的方法为，将生长丰满无污染培养管中的卡介菌，用无菌生理盐水洗下，放入无菌离心管内，2000转/分离心10分钟，倒净上清液后，将压积菌灭活后放入无菌容器，置于-18℃低温冷库中保存。
本发明提供一种口服给药的、由下述成份组成的培养基培养的卡介菌或灭活卡介菌制剂：(1)味精、(2)K2HPO4·3H2O、(3)Na3C6H5O7、(4)MgSO4、(5)Fe(NH4)3(C6H5O7)2、(6)丙三醇、(7)蒸馏水、(8)马铃薯、(9)琼脂粉，所述制剂每剂含所述卡介菌或灭活卡介菌25mg～150mg。
本发明提供的卡介菌制剂为如口服给药剂型，例如片剂、胶囊剂和喷雾剂。术语“片剂”剂型，是将卡介菌或包括灭活卡介菌和诸如乳糖、甘露醇、糊精、蛋白糖、桔味香精、硬脂酸镁制片辅料均匀混合后压制而成的片剂剂型，其中每片卡介菌或灭活卡介菌25mg～150mg。按百分重量计，卡介菌或灭活卡介菌占20％，辅料占80％；术语“胶囊”剂型，是将卡介菌或灭卡介菌和辅料混合均匀后装入胶囊和液体辅料混合均匀后压制成软胶囊的剂型，其中每粒胶囊含卡介菌或灭活卡介菌25mg～150mg。按百分重量计，卡介菌或灭活卡介菌占20％，辅料占80％；喷雾剂型：是将卡介菌或灭活卡介菌用物理方法如用超声波、机械研磨等将卡介菌或灭活卡介菌打碎，制成向口腔咽喉部喷雾的剂型，每支含打碎卡介菌或灭活卡介菌50mg～100mg。
具体实施方式：本发明片剂配方如下：
按百分重量计，将20％卡介菌或灭活卡介菌和80％辅料均匀混合后压制而成，辅料由乳糖、甘露醇、糊精、蛋白糖、桔味香精、硬脂酸镁组成，每片含卡介菌或灭活卡介菌100mg。
按百分重量计，将20％卡介菌或灭活卡介菌和80％辅料均匀混合后压成软胶囊。
用物理方法例如用超声波、机械研磨将卡介菌或灭活卡介菌打碎，制成向口腔咽喉部喷雾的剂型，其中每支含卡介菌80mg。
本发明披露的卡介菌制剂无刺激、无痛苦，使用方便，为患者乐于接受的给药途径提供了有力保证。
本领域的普通技术人员阅读了该说明书记载的内容后可以进行种种修改和变更，但是这种修改和变更都在申请待批的权利要求书的保护范围之内。