《文蛤生物活性肽及其提取方法和应用.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《文蛤生物活性肽及其提取方法和应用.pdf（11页珍藏版）》请在专利查询网上搜索。
1、10申请公布号CN104311630A43申请公布日20150128CN104311630A21申请号201410497223322申请日20140925C07K7/08200601C12P21/06200601A61K38/10200601A61P37/02200601A23L1/30520060171申请人广西中医药大学地址530299广西壮族自治区南宁市青秀区五合大道13号72发明人杜正彩邓家刚郝二伟吴玉强74专利代理机构北京风雅颂专利代理有限公司11403代理人王安娜李翔54发明名称文蛤生物活性肽及其提取方法和应用57摘要本发明公开了一种文蛤生物活性肽及其提取方法和应用，所述文蛤生物活。
2、性肽N末端序列为TRGIDEIQNTGGGGTRR，等电点为879，分子量为18KDA。本发明提供的文蛤生物活性肽对免疫系统的巨噬细胞吞噬活性与脾淋巴细胞增殖能力同时具有促进作用，具有增强免疫的药理作用，可用于制备用于增强免疫的药物或保健食品，具有开发免疫增强新药的潜能。51INTCL权利要求书1页说明书9页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书9页10申请公布号CN104311630ACN104311630A1/1页21一种文蛤生物活性肽，其特征在于，所述文蛤生物活性肽N末端序列为TRGIDEIQNTGGGGTRR，等电点为879，分子量为18KDA。2一种根据。
3、权利要求1所述的文蛤生物活性肽的提取方法，其特征在于，包括以下步骤1取文蛤的肌肉组织和粘液，将其加入到质量浓度为052的乙酸溶液中，经破碎后得到匀浆液；其中，所述文蛤的肌肉组织和粘液与乙酸溶液的质量比为1052；2向所述匀浆液中加入木瓜蛋白酶、中性蛋白酶与胰蛋白酶，所述木瓜蛋白酶、中性蛋白酶与胰蛋白酶的质量比为15713，酶解温度为4045，加酶量为文蛤的肌肉组织和粘液湿重的011，调节匀浆液PH值至7580，酶解13H后升温灭酶；将灭酶后的匀浆液离心，取上清液，即为酶解液；3用有机膜对所述酶解液进行分离，收集分子量在150KDA之间的多肽酶解液，冷冻干燥后得到粗肽样品；4将所述粗肽样品用乙酸。
4、溶液溶解，离心，取上清液；然后用微孔滤膜过滤该上清液，然后将滤液抽进葡聚糖凝胶柱，洗脱，收集20MIN30MIN时间段的多肽组分溶液，接着冷冻干燥所述多肽组分溶液，得到文蛤粗多肽；5所述文蛤粗多肽通过高效液相色谱精制纯化，再经冷冻干燥，即得所述文蛤生物活性肽。3根据权利要求2所述的文蛤生物活性肽的提取方法，其特征在于，所述文蛤生物活性肽的纯度98。4根据权利要求2所述的文蛤生物活性肽的提取方法，其特征在于，所述木瓜蛋白酶、中性蛋白酶与胰蛋白酶的质量比为2471225。5根据权利要求2所述的文蛤生物活性肽的提取方法，其特征在于，所述加酶量为文蛤的肌肉组织和粘液湿重的0308。6根据权利要求1所述。
5、的文蛤生物活性肽在制备增强免疫药物或保健食品中的应用，其特征在于，所述药物或保健食品的制剂形式为液体制剂或固体制剂。7根据权利要求1所述的文蛤生物活性肽在制备增强免疫药物或保健食品中的应用，其特征在于，所述增强免疫药物或保健食品包含所述文蛤生物活性肽、药用级乳糖与半胱氨酸。8根据权利要求1所述的文蛤生物活性肽在制备增强免疫药物或保健食品中的应用，其特征在于，所述文蛤生物活性肽、药用级乳糖与半胱氨酸的质量比为5156121。权利要求书CN104311630A1/9页3文蛤生物活性肽及其提取方法和应用技术领域0001本发明涉及生化与生物医药领域，具体涉及一种文蛤生物活性肽及其提取方法和应用。背景技。
6、术0002免疫是机体对病原微生物侵袭的防卫功能及维持内环境稳定的功能。许多疾病的发生、发展与机体的免疫功能低下或免疫缺陷有着密切的关系。因此，免疫药物的开发成为医药工作者研究的重点。0003海洋天然生物活性物质是现代生物学研究的热点，而海洋生物活性肽是海洋活性物质研究的重要组成部分。海洋生物可提取多种生理功能的活性肽，因原料价廉，操作简单易行，安全性高而广受关注。0004然而，目前同时对免疫系统的巨噬细胞吞噬活性与脾淋巴细胞增殖能力具有增强作用的海洋生物多肽并不多见，而且增强效果并不显著。发明内容0005有鉴于此，本发明的目的在于提出一种文蛤生物活性肽及其提取方法和应用，以克服现有海洋生物多肽。
7、对免疫系统的巨噬细胞吞噬活性与脾淋巴细胞增殖能力的增强作用不显著的缺陷。0006基于上述目的，本发明提供一种文蛤生物活性肽，所述文蛤生物活性肽N末端序列为TRGIDEIQNTGGGGTRR，等电点为879，分子量为18KDA。0007本发明还提供上述文蛤生物活性肽的提取方法，包括以下步骤00081取文蛤的肌肉组织和粘液，将其加入到质量浓度为052的乙酸溶液中，经破碎后得到匀浆液；其中，所述文蛤的肌肉组织和粘液与乙酸溶液的质量比为1052；00092向所述匀浆液中加入木瓜蛋白酶、中性蛋白酶与胰蛋白酶，所述木瓜蛋白酶、中性蛋白酶与胰蛋白酶的质量比为15713，酶解温度为4045，加酶量为文蛤的肌肉。
8、组织和粘液湿重的011，调节匀浆液PH值至7580，酶解13H后升温灭酶；将灭酶后的匀浆液离心，取上清液，即为酶解液；00103用有机膜对所述酶解液进行分离，收集分子量在150KDA之间的多肽酶解液，冷冻干燥后得到粗肽样品；00114将所述粗肽样品用乙酸溶液溶解，离心，取上清液，用微孔滤膜过滤该上清液，然后将滤液抽进葡聚糖凝胶柱，洗脱，收集20MIN30MIN时间段的多肽组分溶液，接着冷冻干燥所述多肽组分溶液，得到文蛤粗多肽；00125所述文蛤粗多肽通过高效液相色谱精制纯化，再经冷冻干燥，即得所述文蛤生物活性肽。0013可选地，所述文蛤生物活性肽的纯度98。0014较佳地，所述木瓜蛋白酶、中性。
9、蛋白酶与胰蛋白酶的质量比为2471225。说明书CN104311630A2/9页40015较佳地，所述加酶量为文蛤的肌肉组织和粘液湿重的0308。0016本发明还提供所述文蛤生物活性肽在制备增强免疫药物或保健食品中的应用，所述药物或保健食品的制剂形式为液体制剂或固体制剂。0017较佳地，所述增强免疫药物或保健食品包含所述文蛤生物活性肽、药用级乳糖与半胱氨酸。0018优选地，所述文蛤生物活性肽、药用级乳糖与半胱氨酸的质量比为5156121。0019从上面所述可以看出，本发明通过上述提取方法从文蛤肉与粘液中分离得到一种文蛤生物活性肽，通过体外免疫实验发现该文蛤生物活性肽对小鼠单核巨噬细胞RAW26。
10、47吞噬中性红能力有明显增强作用，并明显促进了该巨噬细胞的NO释放量，同时对小鼠脾淋巴细胞增殖也具有明显促进作用。因此，本发明提供的文蛤生物活性肽对免疫系统的巨噬细胞吞噬活性与脾淋巴细胞增殖能力同时具有促进作用，具有增强免疫的药理作用，可用于制备用于增强免疫的药物或保健食品，具有开发免疫增强新药的潜能。具体实施方式0020为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，对本发明进一步详细说明。0021实施例1文蛤生物活性肽的提取方法00221预处理取鲜活文蛤，去壳，取肌肉组织和粘液共约250KG，加入到质量浓度为11的乙酸溶液中，肌肉组织和粘液与乙酸溶液的质量比为11，用高速。
11、组织破碎机匀浆，得到匀浆液。00232酶解向步骤1中得到的匀浆液中加入木瓜蛋白酶、中性蛋白酶与胰蛋白酶，木瓜蛋白酶、中性蛋白酶与胰蛋白酶的质量比为372，酶解温度为4245，加酶量为文蛤肌肉组织和粘液湿重的05，调节匀浆液PH值至7579，酶解12H后升温至85，灭酶10MIN；将灭酶后的匀浆液离心，得上清液，即为所需酶解液，低温可以是20保存备用。需要说明的是，加酶量是指三种酶的加酶量之和。所述文蛤肌肉组织和粘液的湿重是指未加入到乙酸溶液中时的湿重。00243膜分离分别用50KDA、1KDA的有机膜对步骤2中得到的酶解液进行分离，收集分子量在150KDA之间的多肽酶解液，80冷冻干燥，即得粗。
12、肽样品。00254凝胶柱层析将步骤3中得到的粗肽样品用1MOL/L乙酸溶液溶解，然后以2000R/10MIN的转速离心，得上清液，然后用045M的聚醚砜微孔滤膜过滤该上清液，然后通过蠕动泵将过滤后的上清液即滤液抽进葡聚糖凝胶G25SEPHADEXG25柱子的上端，下端出口连接紫外检测仪检测波长280NM，洗脱，收集20MIN30MIN时间段的多肽组分溶液，再用真空冷冻干燥机80将该多肽组分溶液冻干，即得文蛤粗多肽，约15KG。0026SEPHADEXG25凝胶色谱条件如下所示0027说明书CN104311630A3/9页500285HPLC精制将步骤4中得到的文蛤粗多肽通过高效液相色谱制备型精。
13、制纯化，然后用真空冷冻干燥机80将该多肽组分溶液冻干为多肽冻干粉，即得本发明所述文蛤生物活性肽，约2750G，纯度985。0029HPLC色谱条件如下0030003100326多肽测定将步骤5中得到的文蛤生物活性肽采用PPSQ33A型全自动蛋白/多肽测序仪测序，N末端序列测定为TRGIDEIQNTGGGGTRR，等电点由等电聚焦电泳测定为PI879，采用SDSPAGE测定分子量为18KDA，该文蛤多肽命名为MERE18。0033作为本发明的一个实施例，称取新鲜的文蛤肉与粘液共约150KG，依次通过预处理，SEPHADEXG25凝胶柱层析，得粗文蛤粗多肽约1KG。再用制备型HPLC精制，得文蛤生。
14、物活性肽约1890G。0034具体地，所述文蛤生物活性肽的提取方法包括以下步骤00351预处理取鲜活文蛤，去壳，取肌肉组织和粘液，加入到质量浓度为08的乙酸溶液中，肌肉组织和粘液与乙酸溶液的质量比为1136，于高速组织破碎机匀浆，得到匀浆液。00362酶解向步骤1中得到的匀浆液中加入木瓜蛋白酶、中性蛋白酶与胰蛋白酶，木瓜蛋白酶、中性蛋白酶与胰蛋白酶的质量比为357141，酶解温度为4043，加酶量为文蛤肌肉组织和粘液湿重的042，调节匀浆液PH值至7880，酶解152H后升温至80，灭酶12MIN；将灭酶后的匀浆液离心，得上清液，即为所需酶解液，低温可以是18保存备用。需要说明的是，加酶量是指。
15、三种酶的加酶量之和。所述文蛤肌肉组织和粘液的湿重是指未加入到乙酸溶液中时的湿重。00373膜分离分别用50KDA、1KDA的有机膜对步骤2中得到的酶解液进行分离，收集分子量在150KDA之间的多肽酶解液，70冷冻干燥，即得粗肽样品。说明书CN104311630A4/9页600384凝胶柱层析将步骤3中得到的粗肽样品用1MOL/L乙酸溶液溶解，然后以2000R/10MIN的转速离心，得上清液，然后用043M的聚醚砜微孔滤膜过滤该上清液，然后通过蠕动泵将过滤后的上清液即滤液抽进葡聚糖凝胶G25SEPHADEXG25柱子的上端，下端出口连接紫外检测仪检测波长280NM，洗脱，收集25MIN30MIN。
16、时间段的多肽组分溶液，再用真空冷冻干燥机82将该多肽组分溶液冻干，即得文蛤粗多肽。0039SEPHADEXG25凝胶色谱条件如下所示004000415HPLC精制将步骤4中得到的文蛤粗多肽通过高效液相色谱制备型精制纯化，然后用真空冷冻干燥机80将该多肽组分溶液冻干为多肽冻干粉，即得本发明所述文蛤生物活性肽，纯度983。0042HPLC色谱条件如下00430044作为本发明的一个实施例，称取新鲜的文蛤肉与粘液共约180KG，依次通过预处理，SEPHADEXG25凝胶柱层析，得粗文蛤粗多肽约12KG。再用制备型HPLC精制，得文蛤生物活性肽约2020G。0045具体地，所述文蛤生物活性肽的提取方法。
17、包括以下步骤00461预处理取鲜活文蛤，去壳，取肌肉组织和粘液，加入到质量浓度为173的乙酸溶液中，肌肉组织和粘液与乙酸溶液的质量比为1084，于高速组织破碎机匀浆，得到匀浆液。00472酶解向步骤1中得到的匀浆液中加入木瓜蛋白酶、中性蛋白酶与胰蛋白酶，木瓜蛋白酶、中性蛋白酶与胰蛋白酶的质量比为33718，酶解温度为4345，加酶量为文蛤肌肉组织和粘液湿重的065，调节匀浆液PH值至75277，酶解132H后升温至90，灭酶8MIN；将灭酶后的匀浆液离心，得上清液，即为所需酶解液，低温可以是16保存备用。需要说明的是，加酶量是指三种酶的加酶量之和。所述文蛤肌肉组织说明书CN104311630A。
18、5/9页7和粘液的湿重是指未加入到乙酸溶液中时的湿重。00483膜分离分别用50KDA、1KDA的有机膜对步骤2中得到的酶解液进行分离，收集分子量在150KDA之间的多肽酶解液，85冷冻干燥，即得粗肽样品。00494凝胶柱层析将步骤3中得到的粗肽样品用1MOL/L乙酸溶液溶解，然后以2500R/10MIN的转速离心，得上清液，然后用044M的聚醚砜微孔滤膜过滤该上清液，然后通过蠕动泵将过滤后的上清液即滤液抽进葡聚糖凝胶G25SEPHADEXG25柱子的上端，下端出口连接紫外检测仪检测波长280NM，洗脱，收集20MIN28MIN时间段的多肽组分溶液，再用真空冷冻干燥机85将该多肽组分溶液冻干，。
19、即得文蛤粗多肽。0050SEPHADEXG25凝胶色谱条件如下所示005100525HPLC精制将步骤4中得到的文蛤粗多肽通过高效液相色谱制备型精制纯化，然后用真空冷冻干燥机80将该多肽组分溶液冻干为多肽冻干粉，即得本发明所述文蛤生物活性肽，纯度981。0053HPLC色谱条件如下00540055作为本发明的一个实施例，称取新鲜的文蛤肉与粘液共约600KG，依次通过预处理，SEPHADEXG25凝胶柱层析，得粗文蛤粗多肽约395KG。再用制备型HPLC精制，得文蛤生物活性肽约7506G。0056具体地，所述文蛤生物活性肽的提取方法包括以下步骤00571预处理取鲜活文蛤，去壳，取肌肉组织和粘液，。
20、加入到质量浓度为105的乙酸溶液中，肌肉组织和粘液与乙酸溶液的质量比为1096，于高速组织破碎机匀浆，得到匀浆液。00582酶解向步骤1中得到的匀浆液中加入木瓜蛋白酶、中性蛋白酶与胰蛋白酶，木瓜蛋白酶、中性蛋白酶与胰蛋白酶的质量比为387115，酶解温度为4244，说明书CN104311630A6/9页8加酶量为文蛤肌肉组织和粘液湿重的035，调节匀浆液PH值至7680，酶解1225H后升温至81，灭酶13MIN；将灭酶后的匀浆液离心，得上清液，即为所需酶解液，低温可以是22保存备用。需要说明的是，加酶量是指三种酶的加酶量之和。所述文蛤肌肉组织和粘液的湿重是指未加入到乙酸溶液中时的湿重。005。
21、93膜分离分别用50KDA、1KDA的有机膜对步骤2中得到的酶解液进行分离，收集分子量在150KDA之间的多肽酶解液，86冷冻干燥，即得粗肽样品。00604凝胶柱层析将步骤3中得到的粗肽样品用1MOL/L乙酸溶液溶解，然后以2050R/10MIN的转速离心，得上清液，然后用045M的聚醚砜微孔滤膜过滤该上清液，然后通过蠕动泵将过滤后的上清液即滤液抽进葡聚糖凝胶G25SEPHADEXG25柱子的上端，下端出口连接紫外检测仪检测波长280NM，洗脱，收集22MIN30MIN时间段的多肽组分溶液，再用真空冷冻干燥机78将该多肽组分溶液冻干，即得文蛤粗多肽。0061SEPHADEXG25凝胶色谱条件如。
22、下所示006200635HPLC精制将步骤4中得到的文蛤粗多肽通过高效液相色谱制备型精制纯化，然后用真空冷冻干燥机90将该多肽组分溶液冻干为多肽冻干粉，即得本发明所述文蛤生物活性肽，纯度983。0064HPLC色谱条件如下00650066实施例20067文蛤生物活性肽增强免疫作用实验研究00681、本发明提供的文蛤生物活性肽对小鼠巨噬细胞吞噬中性红能力的影响0069小鼠单核巨噬细胞RAW2647吞噬中性红实验制备细胞浓度为1106个/ML的巨噬细胞悬液，加入96孔板，100L/孔，加文蛤生物活性肽干预，给药终浓度为100G/ML，50G/ML，25G/ML。每个浓度设3个复孔，1G/ML的脂多。
23、糖简称LPS，对巨噬细胞的增说明书CN104311630A7/9页9值具有促进作用为阳性对照。同样体积的完全培养液为调零孔。培养48H后，每孔加入01中性红生理盐水液100L，继续培养30MIN，倾去上清，温PBS洗3遍，每孔加入细胞溶解液为体积胞分数50的乙酸和体积分数50的无水乙醇200L，室温下静置过夜，待细胞溶解后，用酶标仪检测540NM处的吸光度OD值OD值与细胞的吞噬功能成正比。0070表1对小鼠巨噬细胞吞噬中性红能力的影响0071分组浓度G/MLOD值空白对照/02660005阳性LPS103330006文蛤生物活性肽10003090001文蛤生物活性肽5002970004文蛤生。
24、物活性肽25028800090072P005P0010073吞噬作用是巨噬细胞的一种主要功能，在机体非特异免疫中起重要作用。巨噬细胞可吞噬体内的各种病原微生物、肿瘤细胞以及机体内的死细胞等，形成的吞噬体与溶酶体结合并在多种酶的作用下消化杀灭各种抗原性异物。该实验结果显示参见表1，各组与空白对照组比较，阳性对照LPS1G/ML与文蛤生物活性肽组100G/ML，50G/ML，25G/ML的OD值明显升高P001或P005，这表明文蛤生物活性肽对小鼠巨噬细胞吞噬中性红能力有明显增强作用。00742、本发明提供的文蛤生物活性肽对小鼠巨噬细胞释放NO的影响0075小鼠单核巨噬细胞RAW2647释放NO能。
25、力的检测0076取处于对数生长期的小鼠单核巨噬细胞RAW2647，胰酶消化收集细胞，用含10胎牛血清的培养液将其制备成巨噬细胞悬液，调整细胞浓度为1106个/ML，于96孔板接种100L/孔，置37，5CO2培养24H。加入文蛤生物活性肽100L/孔干预，给药终浓度为100G/ML，50G/ML，25G/ML，并以100LLPS2G/ML作阳性对照，培养液作空白对照，每组3个复孔。于37、5CO2条件下培养24H后，取上清液100L，按NO试剂盒批号20120418，南京建成生物工程研究所的说明书测定NO的量。0077表2对小鼠巨噬细胞释放NO的影响0078分组浓度G/MLNO含量MOL/L空。
26、白对照/280014阳性LPS21149084说明书CN104311630A8/9页10文蛤生物活性肽100803098文蛤生物活性肽50643070文蛤生物活性肽254510810079P005P0010080NO是巨噬细胞分泌的一种有重要生物学意义的气体信号分子，是活化巨噬细胞，吞噬病原微生物的主要效应分子。由上表2可看出，各实验组与空白对照组比较，阳性对照LPS2G/ML与文蛤生物活性肽组100G/ML，50G/ML，25G/MLNO含量明显升高P001或P005，这表明文蛤生物活性肽对小鼠巨噬细胞释放NO有明显增强作用。00813、本发明提供的文蛤生物活性肽对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响0。
27、082脾淋巴细胞增殖实验0083无菌取脾，制备小鼠脾淋巴细胞悬液，调整细胞浓度为810106个/ML，于96孔板接种100L/孔，再分别加入培养液空白对照、阳性对照刀豆球蛋白ACONA，10G/ML及文蛤生物活性肽100G/ML，50G/ML，25G/ML各100L/孔，置33，5CO2培养48H。培养结束前4H，用MTT法测定，酶标仪在530NM的吸光度OD值。OD值与细胞增殖指数成正比。0084表3对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响0085分组浓度G/MLOD值空白对照/03630009阳性CONA1004320015文蛤生物活性肽10004360010文蛤生物活性肽5004240004文蛤生物活。
28、性肽25039300100086P005P0010087脾脏是T淋巴细胞定居和接受抗原刺激产生免疫应答的重要场所，以CONA为代表的有丝分裂原非特异性地诱导T细胞活化，导致细胞因子合成，细胞因子受体表达及最终活化增殖，增强机体免疫能力。0088由表3可看出，各实验组与空白对照组比较，阳性对照CONA组2G/ML与文蛤生物活性肽组100G/ML，50G/ML，25G/MLOD明显升高P001或P005，这表明文蛤生物活性肽对小鼠脾淋巴细胞增殖有明显促进作用。0089实施例30090文蛤生物活性肽加入适宜药物辅料，制成相应的药物或保健食品，如胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂、丸剂、口服液或注射剂，既得本。
29、发明物制成的药物或保健食品。说明书CN104311630A109/9页110091作为本发明的一个实施例，可以在加入乳糖与半胱氨酸，文蛤生物活性肽、乳糖与半胱氨酸的质量比约为多少1091。具体地，取本发明文蛤生物活性肽5000G纯度985与药用级乳糖4500G及500G半胱氨酸混合均匀，装入0胶囊，再将胶囊装入药用白色塑料瓶，封口，即得成品。0092作为本发明的一个实施例，可以在加入药用级乳糖与半胱氨酸，文蛤生物活性肽、乳糖与半胱氨酸的质量比约为8121。具体地，取本发明文蛤生物活性肽8000G纯度983与药用级乳糖12000G及1000G半胱氨酸混合均匀，装入0胶囊，再将胶囊装入药用白色塑料。
30、瓶，封口，即得成品。0093作为本发明的一个实施例，可以在加入药用级乳糖与半胱氨酸，文蛤生物活性肽、乳糖与半胱氨酸的质量比约为多少1381。具体地，取本发明文蛤生物活性肽1040G纯度982与药用级乳糖640G及80G半胱氨酸混合均匀，装入0胶囊，再将胶囊装入药用白色塑料瓶，封口，即得成品。0094作为本发明的一个实施例，可以在加入药用级乳糖与半胱氨酸，文蛤生物活性肽、乳糖与半胱氨酸的质量比约为多少1091。具体地，取本发明文蛤生物活性肽2000G纯度985与药用级乳糖1800G及200G半胱氨酸混合均匀，装入0胶囊，再将胶囊装入药用白色塑料瓶，封口，即得成品。0095综上所述，本发明通过上述。
31、提取方法从文蛤肉与粘液中分离得到一种文蛤生物活性肽，通过体外免疫实验发现该文蛤生物活性肽对小鼠单核巨噬细胞RAW2647吞噬中性红能力有明显增强作用，并明显促进了该巨噬细胞的NO释放量，同时对小鼠脾淋巴细胞增殖也具有明显促进作用。因此，本发明提供的文蛤生物活性肽对免疫系统的巨噬细胞吞噬活性与脾淋巴细胞增殖能力同时具有促进作用，具有增强免疫的药理作用，可用于制备用于增强免疫的药物或保健食品，具有开发免疫增强新药的潜能。0096所属领域的普通技术人员应当理解以上所述仅为本发明的具体实施例而已，并不用于限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。说明书CN104311630A11。