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本发明的目的是提供新的成胶质细胞瘤治疗剂。本发明的具有AMPA受体拮抗作用的化合物作为成胶质细胞瘤，特别是恶性度高的原发性成胶质细胞瘤的治疗药物有用，从而实现了上述目的。

1.  成胶质细胞瘤治疗剂，其特征在于，以具有AMPA受体抑制活性的化合物为有效成分。

2.  如权利要求1所述的成胶质细胞瘤治疗剂，其特征还在于，具有AMPA受体抑制活性的化合物为[7-(1H-咪唑-1-基)-6-硝基-2，3-二氧代-3，4-二氢喹喔啉-1(2H)-基]乙酸或其盐或其水合物。

3.  如权利要求1所述的成胶质细胞瘤治疗剂，其特征还在于，具有AMPA受体抑制活性的化合物为2，3-二羟基-6-硝基-7-氨磺酰-苯并(F)-喹喔啉或其盐。

4.  如权利要求1所述的成胶质细胞瘤治疗剂，其特征还在于，具有AMPA受体抑制活性的化合物为2-[N-(4-氯苯基)-N-甲基氨基]-4H-吡啶并[3，2-e]-1，3-噻嗪-4-酮或其盐。

5.  成胶质细胞瘤治疗剂用医药组合物，其特征在于，以治疗有效量的具有AMPA受体抑制活性的化合物为有效成分，含有制药学允许的载体。

6.  如权利要求5所述的医药组合物，其特征还在于，具有AMPA受体抑制活性的化合物为[7-(1H-咪唑-1-基)-6-硝基-2，3-二氧代-3，4-二氢喹喔啉-1(2H)-基]乙酸或其盐或其水合物。

7.  如权利要求5所述的医药组合物，其特征还在于，具有AMPA受体抑制活性的化合物为2，3-二羟基-6-硝基-7-氨磺酰-苯并(F)-喹喔啉或其盐。

8.  如权利要求5所述的医药组合物，其特征还在于，具有AMPA受体抑制活性的化合物为2-[N-(4-氯苯基)-N-甲基氨基]-4H-吡啶并[3，2-e]-1，3-噻嗪-4-酮或其盐。

9.  具有AMPA受体抑制活性的化合物在含有治疗有效量的具有AMPA受体抑制活性的化合物的成胶质细胞瘤治疗用医药品的制备中的应用。

10.  如权利要求9所述的用途，其特征还在于，具有AMPA受体抑制活性的化合物为[7-(1H-咪唑-1-基)-6-硝基-2，3-二氧代-3，4-二氢喹喔啉-1(2H)-基]乙酸或其盐或其水合物。

11.  如权利要求9所述的用途，其特征还在于，具有AMPA受体抑制活性的化合物为2，3-二羟基-6-硝基-7-氨磺酰-苯并(F)-喹喔啉或其盐。

12.  如权利要求9所述的用途，其特征还在于，具有AMPA受体抑制活性的化合物为2-[N-(4-氯苯基)-N-甲基氨基]-4H-吡啶并[3，2-e]-1，3-噻嗪-4-酮或其盐。

13.  成胶质细胞瘤的治疗方法，其特征在于，给患者服用治疗有效量的具有AMPA受体抑制活性的化合物。

14.  如权利要求13所述的方法，其特征还在于，具有AMPA受体抑制活性的化合物为[7-(1H-咪唑-1-基)-6-硝基-2，3-二氧代-3，4-二氢喹喔啉-1(2H)-基]乙酸或其盐或其水合物。

15.  如权利要求13所述的方法，其特征还在于，具有AMPA受体抑制活性的化合物为2，3-二羟基-6-硝基-7-氨磺酰-苯并(F)-喹喔啉或其盐。

16.  如权利要求13所述的方法，其特征还在于，具有AMPA受体抑制活性的化合物为2-[N-(4-氯苯基)-N-甲基氨基]-4H-吡啶并[3，2-e]-1，3-噻嗪-4-酮或其盐。

成胶质细胞瘤治疗剂
技术领域
本发明涉及具有AMPA受体拮抗作用的化合物作为成胶质细胞瘤治疗剂的新颖的医药用途。
背景技术
神经胶质瘤是从作为神经胶质干细胞的室管膜成胶质细胞开始向室管膜细胞、星形神经胶质、少突神经胶质等分化的过程中肿瘤化的细胞的总称(生化学辞典第三版，东京化学同人，东京，1998)。
成胶质细胞瘤(glioblastoms multiforme，以下也称为glioblastoma)是神经胶质瘤中在中枢神经系统蔓延最广、恶性度最高的恶性脑肿瘤的代表。
此外，其致死率也非常高，从发病到死亡只要9～12个月。即使在各种治疗方法有所进步的今日，从1986年至1990年的5年生存率(8.0％)与20年前的1969年至1975年的5年生存率(11.9％)相比，也几乎无变化(神经进步，43(3)，338-350，1990)，迫切希望确立有效的治疗方法。
成胶质细胞瘤的癌细胞在脑肿瘤中属于最高等级的未分化型，具有很高的游走性、增殖性和浸润性，预后极差。
成胶质细胞瘤因为从未分化星形细胞或前体细胞开始的恶变的基因机理的不同，被分为原发性成胶质细胞瘤(Primary glioblastoma de novo)及继发性成胶质细胞瘤(Secondary glioblastoma)。继发性成胶质细胞瘤在45岁以下的青壮年发病，星形细胞瘤平均在4～5年间经未分化星形细胞瘤发病。另一方面，原发性成胶质细胞瘤是多在平均55岁的高龄发病，通常从没有任何临床和病理学方面的异常状态开始在3个月内发病的突发型成胶质细胞瘤(也称为de novo glioblastoma)(Pathology and Genetics of the NervousSystems.29-39(IARC Press，Lyon，France，2000))。
成胶质细胞瘤沿有髓神经游走，在中枢神经中扩大到很大范围，所以在外科处置中不能够获得足够的效果(Neurol.Med.Chir.(东京)34，91-94，1994，Neurol.Med.Chir.(东京)33 425-428，1993，Neuropathology 17，186-188，1997)。此外，在日本适用于成胶质细胞瘤的药物制剂限于雷莫司汀、干扰素等，其有效性不够理想。
α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异噁唑丙酸(AMPA)型谷氨酸受体是离子型谷氨酸受体的一种，在中枢神经系统中负责几乎全部地兴奋性突触的快速神经传递(Trends Neurosci.16，359-365，1993，Annu.Rev.Neurosci.17，31-108，1994，Prog.Neurobiol.54，581-618，1998)。AMPA受体与神经细胞一样，在大多数的神经胶质细胞中表达(Trends Pharmacol.Sci.21，252-258，2000)。AMPA受体由4个亚单位GluR1-4组成。AMPA受体的Ca²⁺透过性依赖于亚单位的构成。即，具有GluR2亚单位的受体的Ca²⁺透过性较低，不具有GluR2的受体的Ca²⁺透过性较高。GluR2亚单位越多Ca²⁺透过性越低(Trends Neurosci.16，359-365，1993，Annu.Rev.Neurosci.17，31-108，1994，Prog.Neurobiol.54，581-618，1998)。此外，作为GluR2的独特性质，可例举通常作为精氨酸(R)的第2疏水部分(M2)的一个氨基酸残基被谷氨酸(Q)置换时，由置换的GluR2(Q)构成的同源体受体显现出高Ca²⁺透过性(Trends Neurosci.16，359-365，1993，Annu.Rev.Neurosci.17，31-108，1994)。即，即使GluR2亚单位较多，只要该亚单位为GluR(Q)型，则显现出高Ca²⁺透过性，如果为GluR2(R)型，则不显现Ca²⁺透过性。
关于神经胶质瘤细胞和谷氨酸，有报道GluR2基因的表达在C6-神经胶质瘤较低(J.Nuerosci.Res.46，164-178，1996)，66％的成胶质细胞瘤培养细胞与谷氨酸受体激动剂反应而去极化(Eur.J.Neurosci.10，2153-2162，1998)。
以下所述为离子型谷氨酸受体家族的拮抗剂对神经胶质瘤等的抑制作用的报道。
1)专利文献1揭示了涉及为治疗癌症而抑制AMPA受体复合体和谷氨酸的互相作用的方法的发明，作为脑肿瘤的具体例子，可例举被分类为胎儿性肿瘤的成神经管细胞瘤、作为神经胶质瘤的一种的人脑星形细胞瘤，AMPA受体拮抗剂GYK152446显现出对脑星形细胞瘤的体外效果。
但是，上述文献中对AMPA受体拮抗剂用于恶性度高、对放射线治疗和化疗具有抗性的成胶质细胞瘤的治疗既无揭示也无暗示。
2)上述发明者的非专利文献1中记载了来自外周的癌细胞对NMDA和AMPA受体的拮抗剂的敏感性高，但来自神经和神经胶质细胞的癌细胞敏感性低的现象。此外，记载了这些拮抗剂作为外周癌的治疗剂有用。因此，从使用了恶性度低于成胶质细胞瘤的癌细胞的体外效果不能够预测该拮抗剂对本发明的成胶质细胞瘤的效果。
3)非专利文献2中报道了作为NMDA受体拮抗剂的MK-801及美金刚对大鼠的C6及RG2神经胶质瘤移植模型显现出增殖抑制效果。
但是，使用了动物模型的以往的神经胶质瘤的研究受到过无法再现实际的肿瘤的播散的批判(非专利文献3)。
4)此外，作为上述非专利文献1的批判文献的非专利文献4中，作为神经胶质细胞瘤的复合治疗方法之一，暗示抑制AMPA受体和NMDA受体的可能性。但是，作者对非专利文献1中采用的使用了C6及RG2神经胶质瘤的动物模型是否反映人的癌症仍存在疑问。
如上所述，这些现有技术中对AMPA受体拮抗剂可成为神经胶质瘤中恶性最强的人成胶质细胞瘤的治疗剂没有具体记载，由C6及RG2神经胶质瘤的效果不能够预测对人的成胶质细胞瘤的治疗效果。
因此，本发明在这些现有技术中没有记载，不能够很容易地由这些技术导出。
[专利文献1]
PCT国际公开小册子WO 00/24395
[非专利文献1]
Proceedings of the National Academy of Sciences of United Statesof America 98(11)，6372-6377，2001
[非专利文献2]
Nature Medicine 7(9)，1010-1015，2001
[非专利文献3]
Nature Medicine 6(4)，369-370，2000
[非专利文献4]
Nature Medicine 7(9)，994-995，2001
发明的揭示
本发明的目的是提供具有新的作用机理的成胶质细胞瘤治疗剂。
本发明者为了实现上述目的而进行认真研究后发现，GluR1及/或GluR4亚单位在成胶质细胞瘤细胞、特别是人的原发性成胶质细胞瘤细胞中广泛表达，作为Ca²⁺透过性AMPA受体起作用。即，确认通过腺病毒载体的中介作用导入GluR2(R)基因，使机体内的Ca²⁺透过性AMPA受体转变为Ca²⁺不透过性AMPA受体，能够抑制游走性，诱发成胶质细胞瘤细胞的凋亡。即，GluR2(R)亚单位的存在对Ca²⁺透过性的抑制诱发了成胶质细胞瘤的细胞死亡。相反地发现Ca²⁺透过性AMPA受体的过量表达不仅导致癌细胞的形态变化和增殖亢进，还促进了游走性。
此外，本发明者构筑了能够很好地反映人的成胶质细胞瘤的病理学特性的动物模型，用以确认本发明的效果。本发明者所构筑的移植了人成胶质细胞瘤细胞株CGNH-89的动物模型是强烈地浸润脑实质内和软脑膜下、引起脑膜播散、反映人的成胶质细胞瘤的病理学特征的模型。
因此，由于成胶质细胞瘤细胞的AMPA受体由GluR1及/或GluR4亚单位构成，不表达GluR2，所以基于该AMPA受体的高Ca²⁺透过性与成胶质细胞瘤细胞的高增殖性和游走性有关的认识，实际上确认了具有AMPA受体抑制活性的化合物对反映人成胶质细胞瘤的动物模型的增殖抑制效果，从而完成了本发明。
即，本发明涉及以具有AMPA受体抑制活性的化合物为有效成分的成胶质细胞瘤的治疗剂。
较好的是具有AMPA受体抑制活性的化合物为[7-(1H-咪唑-1-基)-6-硝基-2，3-二氧代-3，4-二氢喹喔啉-1(2H)-基]乙酸或其盐或其水合物的成胶质细胞瘤治疗剂。
还涉及具有AMPA受体抑制活性的化合物为2，3-二羟基-6-硝基-7-氨磺酰-苯并(F)-喹喔啉或其盐的成胶质细胞瘤治疗剂。
还涉及具有AMPA受体抑制活性的化合物为2-[N-(4-氯苯基)-N-甲基氨基]-4H-吡啶并[3，2-e]-1，3-噻嗪-4-酮或其盐的成胶质细胞瘤治疗剂。
另外，本发明还涉及以治疗有效量的具有AMPA受体抑制活性的化合物为有效成分、含有制药学允许的载体的成胶质细胞瘤治疗剂用医药组合物；较好的是具有AMPA受体抑制活性的化合物为[7-(1H-咪唑-1-基)-6-硝基-2，3-二氧代-3，4-二氢喹喔啉-1(2H)-基]乙酸或其盐或其水合物的上述医药组合物；具有AMPA受体抑制活性的化合物为2，3-二羟基-6-硝基-7-氨磺酰-苯并(F)-喹喔啉或其盐的上述医药组合物；具有AMPA受体抑制活性的化合物为2-[N-(4-氯苯基)-N-甲基氨基]-4H-吡啶并[3，2-e]-1，3-噻嗪-4-酮或其盐的上述医药组合物。
还涉及以具有AMPA受体抑制活性的化合物为有效成分的成胶质细胞瘤治疗剂在含有治疗有效量的具有AMPA受体抑制活性的化合物的成胶质细胞瘤治疗用医药品的制备中的应用。
较好的是上述用途中，具有AMPA受体抑制活性的化合物为[7-(1H-咪唑-1-基)-6-硝基-2，3-二氧代-3，4-二氢喹喔啉-1(2H)-基]乙酸或其盐或其水合物；上述用途中，具有AMPA受体抑制活性的化合物为2，3-二羟基-6-硝基-7-氨磺酰-苯并(F)-喹喔啉或其盐；上述用途中，具有AMPA受体抑制活性的化合物为2-[N-(4-氯苯基)-N-甲基氨基]-4H-吡啶并[3，2-e]-1，3-噻嗪-4-酮或其盐或其水合物。
本发明还涉及给患者服用治疗有效量的具有AMPA受体抑制活性的化合物的成胶质细胞瘤的治疗方法。
较好的是上述方法中，具有AMPA受体抑制活性的化合物为[7-(1H-咪唑-1-基)-6-硝基-2，3-二氧代-3，4-二氢喹喔啉-1(2H)-基]乙酸或其盐或其水合物；上述方法中，具有AMPA受体抑制活性的化合物为2，3-二羟基-6-硝基-7-氨磺酰-苯并(F)-喹喔啉或其盐；上述方法中，具有AMPA受体抑制活性的化合物为2-[N-(4-氯苯基)-N-甲基氨基]-4H-吡啶并[3，2-e]-1，3-噻嗪-4-酮或其盐。
附图的简单说明
图1为从肿瘤移植的第2天起的14天内反复腹腔内给予对照品(PBS)及化合物A 100mg/kg时比较肿瘤体积的图。
实施发明的最佳方式
以下对本发明进行更详细地说明。
成胶质细胞瘤表示原发性成胶质细胞瘤及继发性成胶质细胞瘤，较好的是原发性成胶质细胞瘤。
成胶质细胞瘤治疗剂表示具有成胶质细胞瘤的增殖抑制效果、生存期的延长或生存率的提高效果的制剂。
增殖抑制效果是指给患有成胶质细胞瘤的动物，较好为患有成胶质细胞瘤的人使用本发明所用的化合物时，其成胶质细胞瘤的体积与未使用该化合物的情况相比，有所减小或未增加的效果。
生存期的延长是指给患有成胶质细胞瘤的动物，较好为患有成胶质细胞瘤的人使用本发明所用的化合物时，生存期比适用于该病症的各种治疗处理方法或未进行治疗的平均生存期有所延长的效果。较好的是有上述生存期显著延长的效果。
生存率提高是指给患有成胶质细胞瘤的动物，较好为患有成胶质细胞瘤的人使用本发明所用的化合物时，1个月至12个月，1年至5年或5年以上的生存率比适用于该病症的各种治疗处理方法或未进行治疗的生存率有所提高的效果。较好的是前述生存率有显著提高的效果。
本发明可使用的化合物是抑制谷氨酸受体的AMPA受体的化合物。
具有AMPA受体的抑制活性的化合物包括具有在AMPA受体的配体结合部位竞争性地或非竞争性地结合、抑制AMPA受体和谷氨酸的结合的作用的化合物，或者具有不直接与AMPA受体的结合部位结合、但与AMPA受体的变构调节部位结合、阻断谷氨酸的神经传递作用的化合物。
较好的是2，3-二羟基-6-硝基-7-氨磺酰-苯并(F)-喹喔啉(NBQX)，以及作为在WO 96/10023被公开的AMPA受体拮抗剂的[7-(1H-咪唑-1-基)-6-硝基-2，3-二氧代-3，4-二氢喹喔啉-1(2H)-基]乙酸(ゾナンパネル)或其盐，或2-[N-(4-氯苯基)-N-甲基氨基]-4H-吡啶并[3，2-e]-1，3-噻嗪-4-酮(以下称为化合物B)或其盐。
[7-(1H-咪唑-1-基)-6-硝基-2，3-二氧代-3，4-二氢喹喔啉-1(2H)-基]乙酸与酸或碱形成盐。较好的是制药学允许的盐。
作为与酸形成的盐，可例举与盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、硝酸、磷酸等无机酸，甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、乳酸、苹果酸、柠檬酸、酒石酸、碳酸、苦味酸、甲磺酸、乙磺酸、谷氨酸等有机酸形成的酸加成盐。作为与碱形成的盐，可例举与钠、钾、镁、钙、铝等无机碱，甲胺、乙胺、乙醇胺等有机碱或赖氨酸、精氨酸、鸟氨酸等碱性氨基酸形成的盐和铵盐。此外，可形成水合物、与乙醇等形成溶剂合物或多晶形。
较好的是[7-(1H-咪唑-1-基)-6-硝基-2，3-二氧代-3，4-二氢喹喔啉-1(2H)-基]乙酸·一水合物(化合物A)。
2-[N-(4-氯苯基)-N-甲基氨基]-4H-吡啶并[3，2-e]-1，3-噻嗪-4-酮(化合物B)可与酸形成盐。作为与酸形成的盐，可例举与盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、硝酸、磷酸等无机酸，甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、乳酸、苹果酸、柠檬酸、酒石酸、碳酸、苦味酸、甲磺酸、乙磺酸等有机酸，天冬氨酸和谷氨酸等酸性氨基酸形成的酸加成盐。较好的是游离体。
此外，化合物B或其盐也可作为水合物、乙醇合物等各种溶剂合物或多晶形物质被分离，化合物B包括上述各种水合物、溶剂合物和多晶形物质。
上述化合物之外，作为本发明所包含的AMPA受体拮抗剂，例如还包含下表所示的化合物。