本发明涉及一种用于自身免疫溶血性贫血、肾炎、结缔组织以及脏器 移植排斥反应的新免疫抑制性化合物。
目前开发的免疫抑制剂，其药物选择性强，专一性地调节某一免疫细 胞的亚族。代表药物如环孢菌素A，能选择性抑T制辅助细胞的克隆(无 性繁殖系)的增殖，在器官移植方面取得了可喜的成绩，并已广泛用于临 床。然而，也发现一些副作用，如个别患者用药后有急性和慢性肾中毒、轻 度震颤、神经病变、齿龈肥厚和多毛等副作用。最近发现的FK-506属于 大环内酯类抗生素(C44H19NO5)，虽然实验研究结果满意，但因生产复杂， 限制了临床上广泛应用。
本发明目的在于克服现有免疫抑制的各种缺点，寻找更理想代药物化 合物。
本发明的化学结构如下：
上述结构中C12a和C6a的H原子为反式结构。
本发明的化合物化学结构新颖，有别于迄今所有的免疫抑制剂，分子 量小，结构简单，便于修饰。研究表明，本化合物的免抑制作用与环孢菌 素A相似或稍强，同时有抑制肿瘤细胞的作用，有可能成为更有特点的新 一代免疫抑制剂。
体内、体外药效学试验显示，本化合物具有好的免疫抑制作用，其细胞 免疫强度与当今临床上广泛使用的免疫抑制剂--环孢菌素A相当，其 体液免疫抑制作用明显优于环孢菌素A，同时其急性毒性很低，LD50(口 服)为1000mg/kg，比治疗剂量10mg/kg大100倍，所以有望开发成为一 个新的免疫抑制药物。
本化合物的理化性质如下：
(1)黄色针晶
(2)元素分析：C19H18O5
实验值：C69.58 H5.60
(3)分子量及分子式
图1为本发明的质谱图
本化合物质谱，在m/z326处有(M+)的分子离子峰；因此可确定其分 子式C19H18O5，分子量326。
(4)紫外吸收光谱
图2为本发明紫外吸收光谱图。
在232nm处有一特征性的吸收峰；在350nm处出现一个肩峰。
(5)红外吸收光谱
图3为本发明红外吸收光谱。
用KBr溶剂法测定，其主要吸收极大波数如下：3400，1690， 1640(cm-1)。
(6)核磁共振谱
图4为本发明核磁共振谱
使用400MH zin，在DMSO-d6中测定的1H的核磁共振谱如图4所 示。
(7)溶解性
溶于甲醇、乙醇、丙酮，不溶于水、石油醚。
(8)熔点
170℃(分解)
(9)旋光度 [ α ] 0 25 = + 150 · ( cl × 10 - 4 MeOH ) ]]>
(10)TLCRf值(silica ge 160M erck5715)
苯-甲醇＝9∶1 Rf＝0.43
氯仿-甲醇＝9∶1 Rf＝0.48
(11)单晶X光衍射：
图5为本发明分子结构图
将单晶(晶体大小：0.3×0.3×0.4mm)置于NICOLETR3M/EX射线 衍射仪上，用石墨晶体单色器λ＝1.5417810×10-10m。晶体数据属正文 晶系，空间群为P212121，晶胞参数为a＝9.275(4)， b＝10.994(5)，c＝15.683(7)×10-10m。晶胞内分子数Z＝4，体积 V＝1599.1×10-30m3。应用SHELXTL程序分析块矩阵最小二乘方法修 正结构参数，差值电子密度法确定氢原子的座标，最终的偏离因子 R＝0.0683，分子结构如附图5所示。
生物学性质：
本化合物对枯草菌6633和金葡萄15等有弱抗菌活性。
免疫抑制作用：
一、细胞免疫抑制作用
1、对T-淋巴细胞增殖的影响。
实验结果表明，不同剂量本发明的化合物(K-C)和环孢菌素A (CyA)一样对丝裂原ConA刺激T-淋巴细胞增殖有明显抑制作用， 它们的抑制率分别为20.7％、47.2％、71.7％和18.9％、52.8％、84.9％， 二药在相同剂量情况下，抑制T-细胞增殖的作用程度无统计学差异。
2、对小鼠DNFB所致迟发性超敏反应和大剂量环磷酰胺所致增强 型迟发性超敏反应的作用。
不同剂量(12.5，25，50mg/kg/d×g)本发明的化合物(K-C)可 明显抑制DNFB所致的迟发性超敏反应及环磷酰胺增强的DNFB迟发 性超敏反应，其作用强度与相同剂量的环孢菌素A(CyA)无统计学 差异。
3、对心脏和皮肤移植存活期的影响。
本化合物和环孢菌素A(CyA)一样对心脏和皮肤移植物的存活 期能显著延长，表明本化合物和环孢菌素A(CyA)对移植物排斥反 应有抑制作用。
4、本化合物对腹腔渗出细胞吞噬作用的影响。
环孢菌素A(CyA)和本发明的化合物(K-C)高剂量组与对照组 相比吞噬作用不存在统计学上的差异。提示环孢菌素A(CyA)和本 发明的化合物(K-C)对巨噬细胞吞噬作用可能无影响。
二、体液免疫抑制作用
1、本化合物对脾细胞分泌抗体的作用。
致敏对照与致敏溶剂组溶血素含量均较非致敏组含量高，提示致 敏动物抗体含量高，致敏溶剂组与致敏对照组相比较其溶血素含量 无统计学差异，提示溶剂对脾细胞抗体生成无明显影响。环孢菌素 A和本化合物高、中、低三个剂量组溶血素含量均比致敏对照组低 (P＜0.001)，提示两药对脾细胞抗体生存存在抑制作用。而且，本化 合物三个剂量对抗体的生成作用影响较环孢菌素A(CyA)弱。
2、本化合物对小鼠脾混合淋巴细胞反应的影响。
3、本化合物对小鼠活化B淋巴细胞所致脾细胞增殖的影响。
由上述2、3实验结果表明本发明的化合物(K-C)比环孢菌素A (CyA)具有更好的体液免疫抑制作用。