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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201811174201.8 (22)申请日 2018.10.09 (71)申请人 江苏农牧科技职业学院 地址 225300 江苏省泰州市凤凰东路8号 (72)发明人 王冬梅方希修李成忠孙燕 (74)专利代理机构 北京汇知杰知识产权代理事 务所(普通合伙) 11587 代理人 杨巍蔡伦 (51)Int.Cl. C07H 17/04(2006.01) C07H 1/08(2006.01) (54)发明名称 一种芍药植株不同部位芍药苷含量的提取 方法 (57)摘要 本发明公开了一种芍。
2、药植株不同部位芍药 苷含量的提取方法， 包括取材、 淋洗、 分离、 干燥、 粉碎、 过筛、 酶解、 离心过滤、 切片、 煮沸、 过滤和 洗脱精炼。 淋洗与酶解过程均采用蒸馏水进行操 作， 不需使用系统组分以外的其它溶剂， 从而保 证不会引入新的杂质， 进而保证提取的精准度， 酶解过程加入稀盐酸溶液， 使得原料细胞壁破 裂， 原料中的有效成分更充分和更容易地被提取 出来， 未过筛的大颗粒进行二次粉碎， 使芍药植 株得花叶部分得到充分的粉碎， 过滤出的滤渣进 行二次煮沸， 以便于能够将根茎中含有的芍药苷 完全提取出来， 洗脱过程先用蒸馏水洗脱杂质， 再用70-80的乙醇洗脱， 最后收集乙醇洗脱液，。
3、 确保所提取的芍药苷的纯度。 权利要求书1页 说明书3页 附图1页 CN 109232687 A 2019.01.18 CN 109232687 A 1.一种芍药植株不同部位芍药苷含量的提取方法， 其特征在于： 其提取方法包括以下 步骤 步骤A： 取材， 选取不同生长年份的芍药植株； 步骤B： 淋洗， 将附着在芍药植株表面的泥土等杂质去除； 步骤C： 分离， 将芍药植株的各部分花、 叶、 茎以及根分离； 步骤D： 干燥， 将分离出的花叶等部分置于烘箱中于105杀青10min， 然后在70下烘 干至恒重； 步骤E： 粉碎， 使用400Y型粉碎机将干燥后的花叶进行粉碎； 步骤F： 过筛， 使用40。
4、目筛将粉碎后的原料进行筛选； 步骤G： 酶解， 将过筛的花叶粉末倒入激活的复合酶制剂缓冲液中， 在温度为40-60的 水浴上酶解3-15h； 步骤H： 离心过滤， 使用5810R型离心机进行离心， 分离出芍药苷液； 步骤I： 切片， 使用Leica EM UC6型超薄切片机将根茎部分切成薄片； 步骤J： 煮沸， 切成薄片的根茎倒入重量比为1:15的水中， 煎煮50min； 步骤K： 过滤， 煮沸过的液体通过滤网将滤液与滤渣分离； 步骤L： 洗脱精炼， 将过滤后的滤液浓缩， 上大孔吸附树脂柱进行洗脱， 洗脱液加温后加 活性炭脱色过滤， 滤液再浓缩至无醇可得芍药苷粗品， 粗品再加乙酸乙酯冷却结晶，。
5、 过滤， 将晶体干燥， 即得产品。 2.根据权利要求1所述的一种芍药植株不同部位芍药苷含量的提取方法， 其特征在于： 所述步骤B的淋洗与步骤G的酶解过程均采用蒸馏水进行操作。 3.根据权利要求1所述的一种芍药植株不同部位芍药苷含量的提取方法， 其特征在于： 所述步骤G酶解过程加入稀盐酸溶液， 调节Ph值至3-6， 然后进行酶解。 4.根据权利要求1所述的一种芍药植株不同部位芍药苷含量的提取方法， 其特征在于： 所述步骤F中未过筛的大颗粒返回步骤E进行二次粉碎。 5.根据权利要求1所述的一种芍药植株不同部位芍药苷含量的提取方法， 其特征在于： 所述步骤K中过滤出的滤渣进入步骤J进行二次煮沸。 6。
6、.根据权利要求1所述的一种芍药植株不同部位芍药苷含量的提取方法， 其特征在于： 所述步骤L的洗脱过程先用蒸馏水洗脱杂质， 再用70-80的乙醇洗脱， 最后收集乙醇洗脱 液。 权利要求书 1/1 页 2 CN 109232687 A 2 一种芍药植株不同部位芍药苷含量的提取方法 技术领域 0001 本发明涉及一种提取方法， 具体为一种芍药植株不同部位芍药苷含量的提取方 法， 属于有机化合物提取技术领域。 背景技术 0002 芍药是芍药科芍药属多年生草本植物， 在我国已有4000多年的栽培历史， 有着很 高的观赏价值和药用价值， 而芍药苷是白芍、 赤芍及牡丹皮等多种常用中药材的主要有效 成分， 具。
7、有显著地镇痛镇静抗惊厥作用， 能扩张冠状动脉,增加冠脉流量， 对抗急性心肌缺 血， 降低血压， 保护脑缺血， 抗血栓形成， 抗血小板聚集， 抗高血脂， 逆转低血压的作用， 安徽 亳州地区是白芍道地产区， 因其产量大， 质量好而闻名全国， 现白芍的采收以3-5年生为多， 部分企业是提取白芍中的芍药苷单体作为原料使用。 0003 现有的提取芍药苷的方法有醇水溶液回流提取法、 CO2超临界流体萃取法， 膜分离 法等， 虽然这些现有技术尝试了各种不同的提取和纯化方法， 有些方法工艺复杂， 有的需要 特殊的或复杂的设备， 但由于这些现有技术无法完全的破坏细胞壁的束缚， 最大限度地提 取出有效成分， 并对。
8、有效物质进行充分合理分离， 因而所得产品纯度不高， 也不易规模化生 产。 发明内容 0004 本发明的目的就在于为了解决上述问题而提供一种芍药植株不同部位芍药苷含 量的提取方法。 0005 本发明通过以下技术方案来实现上述目的： 一种芍药植株不同部位芍药苷含量的 提取方法， 其提取方法包括以下步骤 0006 步骤A： 取材， 选取不同生长年份的芍药植株； 0007 步骤B： 淋洗， 将附着在芍药植株表面的泥土等杂质去除； 0008 步骤C： 分离， 将芍药植株的各部分花、 叶、 茎以及根分离； 0009 步骤D： 干燥， 将分离出的花叶等部分置于烘箱中于105杀青10min， 然后在70 下烘。
9、干至恒重； 0010 步骤E： 粉碎， 使用400Y型粉碎机将干燥后的花叶进行粉碎； 0011 步骤F： 过筛， 使用40目筛将粉碎后的原料进行筛选； 0012 步骤G： 酶解， 将过筛的花叶粉末倒入激活的复合酶制剂缓冲液中， 在温度为40-60 的水浴上酶解3-15h； 0013 步骤H： 离心过滤， 使用5810R型离心机进行离心， 分离出芍药苷液； 0014 步骤I： 切片， 使用Leica EM UC6型超薄切片机将根茎部分切成薄片； 0015 步骤J： 煮沸， 切成薄片的根茎倒入重量比为1:15的水中， 煎煮50min； 0016 步骤K： 过滤， 煮沸过的液体通过滤网将滤液与滤渣分。
10、离； 0017 步骤L： 洗脱精炼， 将过滤后的滤液浓缩， 上大孔吸附树脂柱进行洗脱， 洗脱液加温 说明书 1/3 页 3 CN 109232687 A 3 后加活性炭脱色过滤， 滤液再浓缩至无醇可得芍药苷粗品， 粗品再加乙酸乙酯冷却结晶， 过 滤， 将晶体干燥， 即得产品。 0018 优选的， 为了保证提取的精准度， 所述步骤B的淋洗与步骤G的酶解过程均采用蒸 馏水进行操作。 0019 优选的， 为了使原料中的有效成分更充分和更容易地被提取出来， 所述步骤G酶解 过程加入稀盐酸溶液， 调节Ph值至3-6， 然后进行酶解。 0020 优选的， 为了使芍药植株得花叶部分得到充分的粉碎， 所述步骤。
11、F中未过筛的大颗 粒返回步骤E进行二次粉碎。 0021 优选的， 为了能够将根茎中含有的芍药苷完全提取出来， 所述步骤K中过滤出的滤 渣进入步骤J进行二次煮沸。 0022 优选的， 为了确保所提取的芍药苷的纯度， 所述步骤L的洗脱过程先用蒸馏水洗脱 杂质， 再用70-80的乙醇洗脱， 最后收集乙醇洗脱液。 0023 本发明的有益效果是： 该芍药植株不同部位芍药苷含量的提取方法设计合理， 步 骤B的淋洗与步骤G的酶解过程均采用蒸馏水进行操作， 不需使用系统组分以外的其它溶 剂， 从而保证不会引入新的杂质， 进而保证提取的精准度， 步骤G酶解过程加入稀盐酸溶液， 调节Ph值至3-6， 然后进行酶解。
12、， 使得原料细胞壁破裂， 原料中的有效成分更充分和更容易 地被提取出来， 步骤F中未过筛的大颗粒返回步骤E进行二次粉碎， 使芍药植株得花叶部分 得到充分的粉碎， 避免原料浪费， 步骤K中过滤出的滤渣进入步骤J进行二次煮沸， 经过多次 煮沸， 以便于能够将根茎中含有的芍药苷完全提取出来， 步骤L的洗脱过程先用蒸馏水洗脱 杂质， 再用70-80的乙醇洗脱， 最后收集乙醇洗脱液， 使洗脱的更为彻底， 确保所提取的芍 药苷的纯度。 附图说明 0024 图1为本发明结构示意图。 具体实施方式 0025 下面将结合本发明实施例中的附图， 对本发明实施例中的技术方案进行清楚、 完 整地描述， 显然， 所描述。
13、的实施例仅仅是本发明一部分实施例， 而不是全部的实施例。 基于 本发明中的实施例， 本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他 实施例， 都属于本发明保护的范围。 0026 请参阅图1， 一种芍药植株不同部位芍药苷含量的提取方法， 其提取方法包括以下 步骤 0027 步骤A： 取材， 选取不同生长年份的芍药植株； 0028 步骤B： 淋洗， 将附着在芍药植株表面的泥土等杂质去除； 0029 步骤C： 分离， 将芍药植株的各部分花、 叶、 茎以及根分离； 0030 步骤D： 干燥， 将分离出的花叶等部分置于烘箱中于105杀青10min， 然后在70 下烘干至恒重； 0031 步。
14、骤E： 粉碎， 使用400Y型粉碎机将干燥后的花叶进行粉碎； 0032 步骤F： 过筛， 使用40目筛将粉碎后的原料进行筛选； 说明书 2/3 页 4 CN 109232687 A 4 0033 步骤G： 酶解， 将过筛的花叶粉末倒入激活的复合酶制剂缓冲液中， 在温度为40-60 的水浴上酶解3-15h； 0034 步骤H： 离心过滤， 使用5810R型离心机进行离心， 分离出芍药苷液； 0035 步骤I： 切片， 使用Leica EM UC6型超薄切片机将根茎部分切成薄片； 0036 步骤J： 煮沸， 切成薄片的根茎倒入重量比为1:15的水中， 煎煮50min； 0037 步骤K： 过滤， 。
15、煮沸过的液体通过滤网将滤液与滤渣分离； 0038 步骤L： 洗脱精炼， 将过滤后的滤液浓缩， 上大孔吸附树脂柱进行洗脱， 洗脱液加温 后加活性炭脱色过滤， 滤液再浓缩至无醇可得芍药苷粗品， 粗品再加乙酸乙酯冷却结晶， 过 滤， 将晶体干燥， 即得产品。 0039 所述步骤B的淋洗与步骤G的酶解过程均采用蒸馏水进行操作， 不需使用系统组分 以外的其它溶剂， 从而保证不会引入新的杂质， 进而保证提取的精准度， 所述步骤G酶解过 程加入稀盐酸溶液， 调节Ph值至3-6， 然后进行酶解， 使得原料细胞壁破裂， 原料中的有效成 分更充分和更容易地被提取出来， 所述步骤F中未过筛的大颗粒返回步骤E进行二次。
16、粉碎， 使芍药植株得花叶部分得到充分的粉碎， 避免原料浪费， 所述步骤K中过滤出的滤渣进入步 骤J进行二次煮沸， 经过多次煮沸， 以便于能够将根茎中含有的芍药苷完全提取出来， 所述 步骤L的洗脱过程先用蒸馏水洗脱杂质， 再用70-80的乙醇洗脱， 最后收集乙醇洗脱液， 使 洗脱的更为彻底， 确保所提取的芍药苷的纯度。 0040 对于本领域技术人员而言， 显然本发明不限于上述示范性实施例的细节， 而且在 不背离本发明的精神或基本特征的情况下， 能够以其他的具体形式实现本发明。 因此， 无论 从哪一点来看， 均应将实施例看作是示范性的， 而且是非限制性的， 本发明的范围由所附权 利要求而不是上述说明限定， 因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有 变化囊括在本发明内。 不应将权利要求中的任何附图标记视为限制所涉及的权利要求。 0041 此外， 应当理解， 虽然本说明书按照实施方式加以描述， 但并非每个实施方式仅包 含一个独立的技术方案， 说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见， 本领域技术人员应当 将说明书作为一个整体， 各实施例中的技术方案也可以经适当组合， 形成本领域技术人员 可以理解的其他实施方式。 说明书 3/3 页 5 CN 109232687 A 5 图1 说明书附图 1/1 页 6 CN 109232687 A 6 。