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1、(10)申请公布号 CN 102229922 A (43)申请公布日 2011.11.02 CN 102229922 A *CN102229922A* (21)申请号 201110150313.1 (22)申请日 2011.06.07 C12N 9/96(2006.01) C12N 9/40(2006.01) (71)申请人 山东思诺拜特生物科技有限公司 地址 256219 山东省滨州市邹平县好生镇白 云六路 申请人 师昆景 (72)发明人 师昆景 赵静 张召佐 张涛 (54) 发明名称 一种高稳定性液体 - 半乳糖苷酶的制备工 艺 (57) 摘要 本发明涉及一种高稳定性液体 - 半乳糖苷 酶。
2、的制备工艺， 包括以下步骤 ： 第一步， 将发酵放 罐后的液体粗酶产品高速离心， 其上清液经微滤 除菌、 超滤浓缩后得到高浓度液体 - 半乳糖苷 酶半成品， 放入搅拌罐 ； 第二步， 开动搅拌罐， 缓 慢加入磷酸或氢氧化钠， 调节液体 - 半乳糖苷 酶的pH值至4.6-5.0 ； 第三步， 按照质量百分比加 入 0.15-0.40的苯甲酸钠和 0.35-0.55山梨 酸钾 ； 第四步， 按照质量百分比缓慢加入 10的 稳定剂到搅拌罐中， 使之充分溶解至澄清透明， 静 置 24h 后灌装。本发明取得的有益效果是 ： (1) 具 有抑制细菌生长的功能， 防腐效果好 ； (2) 进一步 提高了苯甲酸。
3、钠和山梨酸钾的防腐功效 ； (3) 能 有效的提高液体 - 半乳糖苷酶在较高气温下的 活性存留率。 (51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书 1 页 说明书 3 页 CN 102229923 A1/1 页 2 1. 一种高稳定性液体 - 半乳糖苷酶的制备工艺， 其特征在于包括以下步骤 ： 1) 将发酵放罐后的液体粗酶产品高速离心， 其上清液经微滤除菌、 超滤浓缩后得到高 浓度液体 - 半乳糖苷酶半成品， 放入搅拌罐 ； 2) 开动搅拌罐， 缓慢加入磷酸或氢氧化钠， 调节液体 - 半乳糖苷酶的 pH 值至 4.6-5.0 ； 3) 按照质量百。
4、分比加入 0.15-0.40的苯甲酸钠和 0.35-0.55山梨酸钾 ； 4) 按照质量百分比缓慢加入 10的稳定剂到搅拌罐中， 使之充分溶解至澄清透明， 静 置 24h 后灌装。 2. 根据权利要求 1 所述的高稳定性液体 - 半乳糖苷酶的制备工艺， 其特征在于 ： 所 述稳定剂包括按照质量百分比配比的以下组份 ： 氯化钠 30-50 ； 山梨醇 40-60 ； 海藻糖 10-30。 权 利 要 求 书 CN 102229922 A CN 102229923 A1/3 页 3 一种高稳定性液体 - 半乳糖苷酶的制备工艺 技术领域 0001 本发明涉及液体酶制剂领域， 特别指高稳定性液体 - 。
5、半乳糖苷酶的制备工艺。 背景技术 0002 目前液体酶制剂尤其是液体 - 半乳糖苷酶在饲料行业、 食品行业已经得到了广 泛的应用， 但是， 现有的液体 - 半乳糖苷酶稳定性较差， 具体来说就是当气温较高尤其是 当气温在 30以上时， 其活性损失率较高， 同时现有的液体 - 半乳糖苷酶防腐效果差， 容 易受到细菌的污染， 因而不便于保存和运输。 发明内容 0003 本发明要解决的问题是 ： 提供一种高稳定性液体 - 半乳糖苷酶的制备工艺， 通 过该制备工艺制作出来的液体 - 半乳糖苷酶无混浊、 无沉淀、 无异味， 具有很高的稳定 性， 即在较高气温环境下， 其活性不会明显降低， 同时其抑菌效果和。
6、防腐性能强。 0004 为了解决上述技术问题， 本发明的高稳定性液体 - 半乳糖苷酶的制备工艺， 包 括以下步骤 ： 0005 第一步， 将发酵放罐后的液体粗酶产品高速离心， 其上清液经微滤除菌、 超滤浓缩 后得到高浓度液体 - 半乳糖苷酶半成品， 放入搅拌罐 ； 0006 第二步， 开动搅拌罐， 缓慢加入磷酸或氢氧化钠， 调节液体-半乳糖苷酶的pH值 至 4.6-5.0 ； 第三步， 按照质量百分比加入 0.15-0.40的苯甲酸钠和 0.35-0.55山梨酸 钾 ； 0007 第四步， 按照质量百分比缓慢加入 10的稳定剂到搅拌罐中， 使之充分溶解至澄 清透明， 静置 24h 后灌装。 0。
7、008 为了进一步提高液体 - 半乳糖苷酶的稳定性， 本发明的高稳定性液体 - 半乳 糖苷酶的制备工艺， 稳定剂包括按照质量百分比配比的以下组份 ： 0009 氯化钠 30-50 ； 0010 山梨醇 40-60 ； 0011 海藻糖 10-30。 0012 本发明取得的有益效果是 ： (1) 苯甲酸钠和山梨酸钾作为防腐剂加入到液体 - 半乳糖苷酶中， 具有抑制细菌生长的功能， 防腐效果好 ； (2) 放入磷酸或氢氧化钠， 调整 液体 - 半乳糖苷酶的 PH 值， 使 PH 值稳定在 4.6-5.0 之间， 能进一步提高苯甲酸钠和山梨 酸钾的防腐功效 ； (3) 氯化钠、 山梨醇和海藻糖作为稳。
8、定剂放入液体 - 半乳糖苷酶中后， 能有效的提高液体 - 半乳糖苷酶在较高气温下的活性存留率， 使得液体 - 半乳糖苷酶 在 40温度下保存六个月后， 依然能达到 85的活性。 具体实施方式 0013 制备高稳定性液体 - 半乳糖苷酶时， 采用如下步骤 ： 说 明 书 CN 102229922 A CN 102229923 A2/3 页 4 0014 第一步， 将发酵放罐后的液体粗酶产品高速离心， 其上清液经微滤除菌、 超滤浓缩 后得到高浓度液体 - 半乳糖苷酶半成品， 放入搅拌罐 ； 0015 第二步， 开动搅拌罐， 缓慢加入磷酸或氢氧化钠， 调节液体-半乳糖苷酶的pH值 至 4.8 ； 0。
9、016 第三步， 按照质量百分比加入 0.25的苯甲酸钠和 0.45山梨酸钾 ； 0017 第四步， 按照质量百分比缓慢加入 10的稳定剂到搅拌罐中， 使之充分溶解至澄 清透明， 静置 24h 后灌装。 0018 本发明的高稳定性液体 - 半乳糖苷酶的制备工艺， 稳定剂包括按照质量百分比 配比的以下组份 ： 0019 氯化钠 40 ； 0020 山梨醇 45 ； 0021 海藻糖 15。 0022 试验 1 0023 为了验证高稳定性液体 - 半乳糖苷酶的活性， 做如下试验 ： 0024 分别取500ml样品于4、 室温、 40中保存1-12个月， 表1为第1、 3、 6、 12月检测 到的活。
10、性存留率。 0025 表 1 高稳定性液体 - 半乳糖苷酶活性存留率 0026 0027 从表 1 可以看出， 由本发明制备出的产品无论是在冷藏条件下 (4 )、 室温条件 下、 还是高温条件下 (40 ) 其稳定性都良好， 即使在高温条件下保存 6 个月活性存留率依 然可以达到 85以上， 且产品外观品质不发生变化， 表明产品稳定性能较高， 适用于常温保 存及长途运输。 0028 试验 2 0029 为了验证高稳定性液体 - 半乳糖苷酶的抑菌能力， 做如下试验 ： 0030 分别取100ml样品于4、 室温、 40中保存0-12个月， 表2是第0、 1、 3、 6、 12月检 测到的杂菌含量， 其中杂菌含量以 CFU 平板计数。 0031 表 2 液体 - 半乳糖苷酶菌量 ( 个 /mL) 0032 0033 从表 2 可以看出， 本产品无论是在冷藏条件下 (4 )、 室温条件下、 还是高温条件 下 (40 ) 其添加的防腐剂， 主要是苯甲酸钠和山梨酸钾， 其抑菌效果良好 ( 食品级产品国 说 明 书 CN 102229922 A CN 102229923 A3/3 页 5 标要求 50000 个 /ml)， 不会使产品在保存过程中产生胀气、 霉变、 发酵和异味， 在冷藏条 件下 (4 ) 保存效果更好。 说 明 书 CN 102229922 A 。