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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201611268295.6 (22)申请日 2016.12.31 (71)申请人 新昌县迪斯曼科技有限公司 地址 312500 浙江省绍兴市新昌县澄潭镇 里丁村232-1号 (72)发明人 刘洋孙弋博 (74)专利代理机构 北京高航知识产权代理有限 公司 11530 代理人 赵永强 (51)Int.Cl. C12N 1/16(2006.01) (54)发明名称 一种酵母及利用该酵母生产富硒酵母的方 法 (57)摘要 一种酵母及利用该酵母生产富硒酵母的方 法, 其特征在于培养基由。
2、以下原料组成: 牛肉膏 蛋白胨、 甲氧基肉桂酸辛酯、 氯化锡、 含氨基的有 机氮源。 经过发酵培养、 反馈控制流加培养、 补加 氮源、 酵母泥制备、 干燥、 包装一系列步骤制成, 具有以下有益效果: 本发明发酵工艺通过反馈控 制, 因此本发明还具有操作易于实现、 控制精度 高、 发酵水平稳定的优点。 权利要求书1页 说明书4页 CN 106834147 A 2017.06.13 CN 106834147 A 1.一种酵母及利用该酵母生产富硒酵母的方法, 其特征在于培养基由以下原料组成: 牛肉膏蛋白胨、 甲氧基肉桂酸辛酯、 氯化锡、 含氨基的有机氮源。 2.根据权利要求1所述的一种酵母及利用该酵。
3、母生产富硒酵母的方法, 其特征在于培 养基由以下原料及其重量份数组成: 牛肉膏蛋白胨 400-600重量份 甲氧基肉桂酸辛酯 5-10重量份 氯化锡 2-8重量份 含氨基的有机氮源 40-80重量份。 3.根据权利要求1所述的一种酵母及利用该酵母生产富硒酵母的方法, 其特征在于酵 母生产富硒酵母的方法, 它包括以下步骤: 发酵培养: 将培养基投入到发酵罐中, 灭菌, 然后以保藏编号为CCTCCM2011021的酵 母为发酵种子接种至发酵罐中的培养基上进行培养; 反馈控制流加培养: 控制发酵温度28-32, PH4.9-5.5; 发酵初始, 在发酵罐中, 以 呼吸熵为依据反馈控制流加可发酵还原糖。
4、水溶液, 控制发酵呼吸熵在0.8-1.1之间; 发酵 15-23小时后, 以发酵罐中无机硒含量为依据反馈控制流加无机硒盐水溶液, 控制发酵罐中 的混合液体中无机硒盐含量在50-200mg/L; 无机硒盐流加结束后, 继续培养2-4小时; 酵母泥制备: 将经过上述步骤的发酵罐中的混合液体通过离心、 洗涤、 过滤, 制得酵 母泥。 4.根据权利要求3所述的一种酵母及利用该酵母生产富硒酵母的方法, 其特征在于在 流加无机硒盐水溶液过程中, 每隔5-10小时补加一次含氨基氮的有机氮源; 所述无机硒盐 水溶液为硒酸盐水溶液、 亚硒酸盐水溶液或硒酸盐与亚硒酸盐的混合物的水溶液; 所述含 氨基氮的有机氮源为。
5、蛋白胨、 酵母提取物、 植物蛋白、 氨基酸中的一种或多种。 5.根据权利要求3所述的一种酵母及利用该酵母生产富硒酵母的方法, 其特征在于包 括步骤成品制备: 将所述酵母泥调浆, 然后通过干燥的方式制得粉末; 所述干燥具体为, 采用160-200的温度进行喷雾干燥或在4-6Kpa的压力下进行蒸汽压力滚筒干燥, 干燥 后制得淡黄色粉末, 该淡黄色粉末水分含量小于6wt%。 6.根据权利要求1所述的一种酵母及利用该酵母生产富硒酵母的方法, 其特征在于培 养基中还含有Zn2+、 Cu2+、 Fe2+、 Mn2+。 7.根据权利要求4所述的一种酵母及利用该酵母生产富硒酵母的方法, 其特征在于无 机硒水溶。
6、液的浓度为300-500g/L; 所述培养基中的可发酵还原糖以水溶液的形式存在, 并 且该可发酵还原糖水溶液的浓度为400-700g/L。 8.根据权利要求3所述的一种酵母及利用该酵母生产富硒酵母的方法, 其特征在于在 整个步骤阶段, 控制发酵温度为28.0-32.0。 9.根据权利要求3所述的一种酵母及利用该酵母生产富硒酵母的方法, 其特征在于经 过步骤的发酵罐中的混合液体, 每升含酵母60g-100g; 经过步骤的发酵罐中的混合液 体中, 无机硒转化率为95-99%, 硒代蛋氨酸占有机硒总量的65-70wt%。 权利要求书 1/1 页 2 CN 106834147 A 2 一种酵母及利用该。
7、酵母生产富硒酵母的方法 技术领域 0001 本发明涉及一种酵母及利用该酵母生产富硒酵母的方法, 属于肥料制备领域。 背景技术 0002 硒是人体必需的微量元素, 适量摄入硒能够提高体内硒水平, 使体内谷胱甘肽过 氧化酶(GSH-PX)活性增加。 硒缺乏可影响人体抗氧化功能与免疫功能, 并引起克山病。 硒酵 母富含B族维生素。 0003 硒在GSH-PX的活性中心, 是GSH-PX的辅助因子, 能催化过氧化氢和有机氢过氧化 物的还原。 用硒酵母治疗冠心病可使血浆过氧化脂质(LPO)均值下降, GSH-PX比值升高, 硒 可通过直接或间接的抗氧化作用, 减少或阻止脂质过氧化反应, 降低体内LPO浓。
8、度, 升高前 列环素PGI2的含量, 使PGI1/TXA1(血栓素A2)比值升高, 防止血栓形成。 Se-GSH-PX活性增高 能大量清除在血管壁损伤处凝聚的胆固醇, 调节血脂代谢, 从而防止动脉粥样硬化的发生 与发展。 0004 硒的抗氧化作用还能调整细胞代谢逆转恶性细胞的功能, 微粒体环氧化酶或羟化 酶能活化绝大多数致癌物, 生成活性环氧化物和羟化产物而致癌。 含硒酶GSH-PX能破坏体 内的一些环氧化物造成环氧化活化途径的堵塞, 改变致癌物的代谢方向, 从而减少甚至消 除致癌危险。 0005 硒在抗衰老作用方面, 目前认为其主要作用机制是硒化物参与Se-GSH-PX而发挥 抗氧化的作用和。
9、硒本身就是自由基清除剂。 硒可清除体内代谢所产生的自由基粒子, 该自 由基粒子在癌变过程中起重要作用, 同时保护细胞膜及内容物免受损伤。 0006 硒可抑制程序外DNA的修复, 能抑制肿瘤细胞的DNA合成, 硒通过先择性地抑制肝 癌细胞的环-磷腺苷-磷酸-酯酶(C-AMP-PDZ)的活性, 提高肝癌细胞内C-AMP水平, 从而造成 了控制癌细胞分裂及增殖的内环境而发挥抑癌作用。 0007 研究表明适当剂量的硒制剂对正常的心脏功能具有明显的保护作用, 缺硒情况 下, 由于GSH-PX的活力降低, 体内代谢生成的脂质过氧化物积累过多, 从而破坏了细胞膜的 完整性。 对缺硒人群补硒, 由于增强了GS。
10、H-PX的活力, 而防止了有害的脂质过氧化物的蓄 积。 0008 所谓富硒酵母是利用酵母在生长过程中对硒的自主吸收和转化, 使硒与酵母体内 的蛋白质和多糖结合, 从而消除了无机硒对生物体的毒副作用, 使硒能够更高效, 更安全地 被机体吸收利用。 另外酵母中有丰富的蛋白质, 维生素等营养成分, 利于机体的生长。 目前 国内外对富硒酵母的研究和生产中普遍存在着硒转化率低、 产率低等问题。 发明内容 0009 本发明的目的是为解决上述问题而提供一种硒酵母。 0010 本发明的上述目的是通过以下方案实现的。 0011 一种酵母及利用该酵母生产富硒酵母的方法, 其培养基由以下原料组成: 牛肉膏 说明书 。
11、1/4 页 3 CN 106834147 A 3 蛋白胨、 甲氧基肉桂酸辛酯、 氯化锡、 含氨基的有机氮源。 0012 上述培养基由以下原料及其重量份数组成: 牛肉膏蛋白胨400-600重量份 甲氧基肉桂酸辛酯5-10重量份 氯化锡2-8重量份 含氨基的有机氮源40-80重量份 本发明的另一个目的是提供一种利用上述酵母生产富硒酵母的方法, 它包括以下步 骤: 发酵培养: 将培养基投入到发酵罐中, 灭菌, 然后以保藏编号为CCTCCM2011021的酵 母为发酵种子接种至发酵罐中的培养基上进行培养; 反馈控制流加培养: 控制发酵温度28-32, PH4.9-5.5; 发酵初始, 在发酵罐中, 以。
12、 呼吸熵为依据反馈控制流加可发酵还原糖水溶液, 控制发酵呼吸熵在0.8-1.1之间; 发酵 15-23小时后, 以发酵罐中无机硒含量为依据反馈控制流加无机硒盐水溶液, 控制发酵罐中 的混合液体中无机硒盐含量在50-200mg/L; 无机硒盐流加结束后, 继续培养2-4小时; 酵母泥制备: 将经过上述步骤的发酵罐中的混合液体通过离心、 洗涤、 过滤, 制得酵 母泥。 0013 作为上述技术方案的优选, 在流加无机硒盐水溶液过程中, 每隔5-10小时补加一 次含氨基氮的有机氮源; 所述无机硒盐水溶液为硒酸盐水溶液、 亚硒酸盐水溶液或硒酸盐 与亚硒酸盐的混合物的水溶液; 所述含氨基氮的有机氮源为蛋白。
13、胨、 酵母提取物、 植物蛋 白、 氨基酸中的一种或多种。 0014 作为上述技术方案的优选, 它还包括步骤成品制备: 将所述酵母泥调浆, 然后通 过干燥的方式制得粉末; 所述干燥具体为, 采用160-200的温度进行喷雾干燥或在4- 6Kpa的压力下进行蒸汽压力滚筒干燥, 干燥后制得淡黄色粉末, 该淡黄色粉末水分含量小 于6wt%。 0015 作为上述技术方案的优选, 它还包括步骤成品制备: 将所述酵母泥通过挤压造 粒制成颗粒, 再采用温度分级段流化干燥, 制得淡黄色颗粒, 该颗粒的水分含量小于6wt%。 0016 作为上述技术方案的优选, 所述培养基中还含有Zn2+、 Cu2+、 Fe2+、。
14、 Mn2+。 0017 作为上述技术方案的优选, 所述无机硒水溶液的浓度为300-500g/L; 所述培养基 中的可发酵还原糖以水溶液的形式存在, 并且该可发酵还原糖水溶液的浓度为400-700g/ L。 0018 作为上述技术方案的优选, 在整个步骤阶段, 控制发酵温度为28.0-32.0。 0019 作为上述技术方案的优选, 经过步骤的发酵罐中的混合液体, 每升含酵母60g- 100g; 经过步骤的发酵罐中的混合液体中, 无机硒转化率为95-99%, 硒代蛋氨酸占有机硒 总量的65-70wt%。 0020 与传统方法相比, 本发明具有以下有益效果: 本发明发酵工艺通过反馈控制, 因此 本发。
15、明还具有操作易于实现、 控制精度高、 发酵水平稳定的优点。 具体实施方式 0021 本具体实施例仅仅是对本发明的解释, 其并不是对本发明的限制, 本领域技术人 说明书 2/4 页 4 CN 106834147 A 4 员在阅读完本说明书后可以根据需要对本实施例做出没有创造性贡献的修改, 但只要在本 发明的权利要求范围内都受到专利法的保护。 0022 实施例1 一种酵母及利用该酵母生产富硒酵母的方法, 其培养基由以下原料组成: 牛肉膏蛋白 胨、 甲氧基肉桂酸辛酯、 氯化锡、 含氨基的有机氮源。 甲氧基肉桂酸辛酯和氯化锡加入培养 基后, 能提高微量元素的积累。 0023 上述培养基由以下原料及其重。
16、量份数组成: 牛肉膏蛋白胨 450重量份 甲氧基肉桂酸辛酯 6重量份 氯化锡 5重量份 含氨基的有机氮源 60重量份。 0024 实施例2 一种酵母及利用该酵母生产富硒酵母的方法, 其培养基由以下原料组成: 牛肉膏蛋白 胨、 甲氧基肉桂酸辛酯、 氯化锡、 含氨基的有机氮源。 0025 上述培养基由以下原料及其重量份数组成: 牛肉膏蛋白胨 560重量份 甲氧基肉桂酸辛酯 7重量份 氯化锡 7重量份 含氨基的有机氮源 68重量份。 0026 实施例3 一种酵母及利用该酵母生产富硒酵母的方法, 其培养基由以下原料组成: 牛肉膏蛋白 胨、 甲氧基肉桂酸辛酯、 氯化锡、 含氨基的有机氮源。 0027 上。
17、述培养基由以下原料及其重量份数组成: 牛肉膏蛋白胨 500重量份 甲氧基肉桂酸辛酯 9重量份 氯化锡 3重量份 含氨基的有机氮源 79重量份 上述酵母生产富硒酵母的方法, 它包括以下步骤: 发酵培养: 将培养基投入到发酵罐中, 灭菌, 然后以保藏编号为CCTCCM2011021的酵 母为发酵种子接种至发酵罐中的培养基上进行培养; 反馈控制流加培养: 控制发酵温度28-32, PH4.9-5.5; 发酵初始, 在发酵罐中, 以 呼吸熵为依据反馈控制流加可发酵还原糖水溶液, 控制发酵呼吸熵在0.8-1.1之间; 发酵21 小时后, 以发酵罐中无机硒含量为依据反馈控制流加无机硒盐水溶液, 控制发酵罐。
18、中的混 合液体中无机硒盐含量在150mg/L; 无机硒盐流加结束后, 继续培养3小时; 酵母泥制备: 将经过上述步骤的发酵罐中的混合液体通过离心、 洗涤、 过滤, 制得酵 母泥; 补加氮源: 在流加硒酸盐或亚硒酸盐水溶液过程中, 每隔8小时补加一次有机氮源 (蛋白胨、 酵母提取物、 植物蛋白、 单一或复合氨基酸) , 补加量1g/L; 干燥: 将酵母泥调浆, 采用180喷雾干燥, 干燥后制得淡黄色粉末状产品, 该产品水 说明书 3/4 页 5 CN 106834147 A 5 分小于6wt%; 包装: 得到的富硒酵母产品采用铝箔袋、 塑料袋和纸桶等多种包装, 包装成不同规格 的各类富硒酵母产品。
19、。 0028 实施例4 一种酵母及利用该酵母生产富硒酵母的方法, 其培养基由以下原料组成: 牛肉膏蛋白 胨、 甲氧基肉桂酸辛酯、 氯化锡、 含氨基的有机氮源。 0029 上述培养基由以下原料及其重量份数组成: 牛肉膏蛋白胨 580重量份 甲氧基肉桂酸辛酯 6重量份 氯化锡 5重量份 含氨基的有机氮源 65重量份 上述酵母生产富硒酵母的方法, 它包括以下步骤: 发酵培养: 将培养基投入到发酵罐中, 灭菌, 然后以保藏编号为CCTCCM2011021的酵 母为发酵种子接种至发酵罐中的培养基上进行培养; 反馈控制流加培养: 控制发酵温度29.0-29.5, PH4.5-5.5; 发酵初始, 在发酵罐。
20、 中, 以呼吸熵为依据反馈控制流加可发酵还原糖水溶液, 控制发酵呼吸熵在0.9-1.1之间; 发酵20小时后, 以发酵罐中无机硒含量为依据反馈控制流加无机硒盐水溶液, 控制发酵罐 中的混合液体中无机硒盐含量在78mg/L; 无机硒盐流加结束后, 继续培养2.5小时; 酵母泥制备: 将经过上述步骤的发酵罐中的混合液体通过离心、 洗涤、 过滤, 制得酵 母泥; 补加氮源: 在流加硒酸盐或亚硒酸盐水溶液过程中, 每隔8小时补加一次有机氮源 (蛋白胨、 酵母提取物、 植物蛋白、 单一或复合氨基酸) , 补加量1g/L; 干燥: 将酵母泥调浆, 采用180喷雾干燥, 干燥后制得淡黄色粉末状产品, 该产品水 分小于6wt%; 包装: 得到的富硒酵母产品采用铝箔袋、 塑料袋和纸桶等多种包装, 包装成不同规格 的各类富硒酵母产品。 说明书 4/4 页 6 CN 106834147 A 6 。