一种粪产碱菌DY1菌株及其应用.pdf

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摘要
申请专利号:

CN201410334119.2

申请日:

2014.07.14

公开号:

CN104164387A

公开日:

2014.11.26

当前法律状态:

驳回

有效性:

无权

法律详情:

发明专利申请公布后的驳回IPC(主分类):C12N 1/20申请公布日:20141126|||实质审查的生效IPC(主分类):C12N 1/20申请日:20140714|||公开

IPC分类号:

C12N1/20; D01C1/04; C12R1/05(2006.01)N

主分类号:

C12N1/20

申请人:

东华大学

发明人:

丁若垚; 郁崇文; 张兴群

地址:

201620 上海市松江区松江新城人民北路2999号

优先权:

专利代理机构:

上海泰能知识产权代理事务所 31233

代理人:

黄志达

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内容摘要

本发明涉及一种粪产碱菌DY1菌株及其应用,其16Sr DNA序列如SEQ ID NO:1所示。菌株应用于沤麻制备红麻纤维或黄麻纤维。本发明培养条件粗放,耐热性好,生长繁殖快,可以有效去除红麻或黄麻纤维中的非纤维素胶质,且酶活稳定,菌、酶均无毒性,具有良好的应用前景。

权利要求书

1.  一种粪产碱菌DY1菌株,其特征在于:其16Sr DNA序列如SEQ ID NO:1所示。

2.
  一种如权利要求1所述的粪产碱菌DY1菌株的应用,其特征在于:所述菌株应用于沤麻制备红麻纤维或黄麻纤维。

3.
  根据权利要求2所述的一种粪产碱菌DY1菌株的应用,其特征在于:所述红麻纤维或黄麻纤维应用于制作麻袋、麻布、造纸、绳索、织地毯或窗帘。

说明书

一种粪产碱菌DY1菌株及其应用
技术领域
本发明属于沤麻领域,特别涉及一种粪产碱菌DY1菌株及其应用。 
背景技术
麻是纺织原料之一,其品种主要有亚麻、苎麻、大麻、红麻、黄麻、罗布麻、剑麻、蕉麻、荨麻和苘麻等。麻纤维是从各种麻植物取得的纤维的统称,具有吸湿、透气、散热和抗菌等其他天然纤维无法比拟的优点。我国作为世界上麻类资源最丰富的国家之一,每年生产的麻纤维及其制品除满足国内市场的需求,还作为大宗商品出口美国、西欧及东南亚国家,年均创汇近百亿美元。在国家节能减排政策和消费者回归自然、追求绿色的消费观念推动下,麻类纤维绿色加工技术已经成为纺织领域的研究热点。 
沤麻利用细菌和水分对植物的作用,溶解或腐蚀包围在韧皮纤维束外面的大部分蜂窝状结缔组织和胶质,从而促使纤维与麻茎分离的加工过程。在广泛应用的水沤法中,麻茎浸没在水中,水渗透到麻茎的中央部分,使内部细胞膨胀,胀破最外层,从而增加对水分和细菌的吸收。沤麻法是生产优质纤维的加工工艺,沤麻过程的菌种选择是沤麻的关键。 
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种粪产碱菌DY1菌株及其应用,该菌株培养条件粗放,耐热性好,生长繁殖快,可以有效去除红麻或黄麻纤维中的非纤维素胶质,且酶活稳定,菌、酶均无毒性,具有良好的应用前景。 
本发明的一种粪产碱菌DY1菌株,其16Sr DNA序列如SEQ ID NO:1所示。 
本发明的一种粪产碱菌DY1菌株的应用,所述菌株应用于沤麻制备红麻纤维或黄麻纤维。 
所述红麻纤维或黄麻纤维应用于制作麻袋、麻布、造纸、绳索、织地毯或窗帘。 
本发明所采用的粪产碱菌DY1菌株的保藏号为CGMCC No.9119,保藏日为2014年5月4日,保藏单位CGMCC中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号 中国科学院微生物研究所,建议分类命名为:粪产碱菌(Alcaligenes faecalis)。 
根据16Sr DNA测序Blast及聚类分析结果,该菌与粪产碱菌相似性为99%,结合镜检分析,命名此菌株为粪产碱菌(Alcaligenes faecalis)DY1菌株。16S rDNA测序中,所采用的正向引物27F,反向引物1492R,均为国际通用引物,由上海生工生物工程技术服务有限公司合成。 
有益效果
本发明培养条件粗放,耐热性好,生长繁殖快,可以有效去除红麻或黄麻纤维中的非纤维素胶质,且酶活稳定,菌、酶均无毒性,具有良好的应用前景。 
附图说明
图1为本发明所用菌株显微镜染色照片(油镜); 
图2a-j为本发明采用引物27F产生的细菌DNA图谱; 
图3a-j为本发明采用引物1492R产生的细菌DNA图谱。 
具体实施方式
下面结合具体实施例,进一步阐述本发明。应理解,这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解,在阅读了本发明讲授的内容之后,本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改,这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。 
实施例1 
沤麻时间据红麻或黄麻收获时间定,一般为9月中下旬至10月中下旬。 
沤麻方法: 
(1)将保存的粪产碱菌DY1菌株于牛肉膏蛋白胨培养基(每1000ml培养基包括牛肉膏3g、蛋白胨10g、氯化钠5g和水1000ml)中培养,添加冻存缓冲液(每100ml冻存缓冲液包括甘油50ml和水50ml),培养条件为37℃,pH自然,培养时间12小时; 
(2)在红麻或黄麻麸皮培养基(每1000ml培养基包括红麻或黄麻皮200g,麸皮50g,麦芽汁50ml和水950ml)1000ml中接入菌一环,摇瓶培养,培养条件为37℃,pH自然,培养时间24小时; 
(3)将培养基接种入红麻或黄麻麸皮发酵培养基(每1000ml培养基包括红麻或黄麻皮100g,麸皮100g,麦芽汁200ml和水800ml),摇瓶培养得到发酵菌液,培养条件为37℃,pH自然,培养时间24小时; 
(4)沤麻池的准备:用4HB-800型红麻或黄麻剥皮机将鲜皮从红麻或黄麻全杆中分离出来(韧皮部因机械挤压、打板击打已造成许多伤口,利于脱胶菌入侵,但不破坏纤维);尾部端齐(以洗麻时能甩得动为度,20根左右为一把),稍部拢齐、直,顺折成三至四层(沤麻池深度相仿,浸水时正好淹没麻把)或对折,每把麻中部靠尾处用鲜皮扎把,把与把之间用扎把的鲜皮连接,按顺序排列、排紧;一般每个沤麻池均分批投放,便于分批洗麻;投放好麻把后然后将麻把全部压入水中,基本上不露出水面为宜。最后用厚型塑料薄膜(透明)将全部麻把盖住,再压紧塑料薄膜,以防麻皮离水。麻趟间距15-20厘米。麻层厚度一般在2-2.5厘米为宜。 
(5)将制备的发酵菌液使用喷淋法入沤麻池做沤麻处理,沤麻后制得可供纺织制品用红麻或黄麻纤维,沤麻条件为自然温度,pH自然;喷淋法的工艺具体为每48小时向沤麻区域喷洒菌液8ml。 
完成沤制时间:视气温定,一般9月中下旬至10月中下旬,沤制时间逐渐延长,若气温变化不大,则沤制时间基本相同。在红麻或黄麻正常收获季节约为10-20天。 

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一种粪产碱菌DY1菌株及其应用.pdf_第3页
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资源描述

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1、10申请公布号CN104164387A43申请公布日20141126CN104164387A21申请号201410334119222申请日20140714CGMCCNO911920140504C12N1/20200601D01C1/04200601C12R1/0520060171申请人东华大学地址201620上海市松江区松江新城人民北路2999号72发明人丁若垚郁崇文张兴群74专利代理机构上海泰能知识产权代理事务所31233代理人黄志达54发明名称一种粪产碱菌DY1菌株及其应用57摘要本发明涉及一种粪产碱菌DY1菌株及其应用,其16SRDNA序列如SEQIDNO1所示。菌株应用于沤麻制备红麻纤。

2、维或黄麻纤维。本发明培养条件粗放,耐热性好,生长繁殖快,可以有效去除红麻或黄麻纤维中的非纤维素胶质,且酶活稳定,菌、酶均无毒性,具有良好的应用前景。83生物保藏信息51INTCL权利要求书1页说明书2页序列表1页附图11页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书2页序列表1页附图11页10申请公布号CN104164387ACN104164387A1/1页21一种粪产碱菌DY1菌株,其特征在于其16SRDNA序列如SEQIDNO1所示。2一种如权利要求1所述的粪产碱菌DY1菌株的应用,其特征在于所述菌株应用于沤麻制备红麻纤维或黄麻纤维。3根据权利要求2所述的一种粪产碱。

3、菌DY1菌株的应用,其特征在于所述红麻纤维或黄麻纤维应用于制作麻袋、麻布、造纸、绳索、织地毯或窗帘。权利要求书CN104164387A1/2页3一种粪产碱菌DY1菌株及其应用技术领域0001本发明属于沤麻领域,特别涉及一种粪产碱菌DY1菌株及其应用。背景技术0002麻是纺织原料之一,其品种主要有亚麻、苎麻、大麻、红麻、黄麻、罗布麻、剑麻、蕉麻、荨麻和苘麻等。麻纤维是从各种麻植物取得的纤维的统称,具有吸湿、透气、散热和抗菌等其他天然纤维无法比拟的优点。我国作为世界上麻类资源最丰富的国家之一,每年生产的麻纤维及其制品除满足国内市场的需求,还作为大宗商品出口美国、西欧及东南亚国家,年均创汇近百亿美元。

4、。在国家节能减排政策和消费者回归自然、追求绿色的消费观念推动下,麻类纤维绿色加工技术已经成为纺织领域的研究热点。0003沤麻利用细菌和水分对植物的作用,溶解或腐蚀包围在韧皮纤维束外面的大部分蜂窝状结缔组织和胶质,从而促使纤维与麻茎分离的加工过程。在广泛应用的水沤法中,麻茎浸没在水中,水渗透到麻茎的中央部分,使内部细胞膨胀,胀破最外层,从而增加对水分和细菌的吸收。沤麻法是生产优质纤维的加工工艺,沤麻过程的菌种选择是沤麻的关键。发明内容0004本发明所要解决的技术问题是提供一种粪产碱菌DY1菌株及其应用,该菌株培养条件粗放,耐热性好,生长繁殖快,可以有效去除红麻或黄麻纤维中的非纤维素胶质,且酶活稳。

5、定,菌、酶均无毒性,具有良好的应用前景。0005本发明的一种粪产碱菌DY1菌株,其16SRDNA序列如SEQIDNO1所示。0006本发明的一种粪产碱菌DY1菌株的应用,所述菌株应用于沤麻制备红麻纤维或黄麻纤维。0007所述红麻纤维或黄麻纤维应用于制作麻袋、麻布、造纸、绳索、织地毯或窗帘。0008本发明所采用的粪产碱菌DY1菌株的保藏号为CGMCCNO9119,保藏日为2014年5月4日,保藏单位CGMCC中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所,建议分类命名为粪产碱菌ALCALIGENESFAECALIS。0009根据16SR。

6、DNA测序BLAST及聚类分析结果,该菌与粪产碱菌相似性为99,结合镜检分析,命名此菌株为粪产碱菌ALCALIGENESFAECALISDY1菌株。16SRDNA测序中,所采用的正向引物27F,反向引物1492R,均为国际通用引物,由上海生工生物工程技术服务有限公司合成。0010有益效果0011本发明培养条件粗放,耐热性好,生长繁殖快,可以有效去除红麻或黄麻纤维中的非纤维素胶质,且酶活稳定,菌、酶均无毒性,具有良好的应用前景。附图说明说明书CN104164387A2/2页40012图1为本发明所用菌株显微镜染色照片油镜;0013图2AJ为本发明采用引物27F产生的细菌DNA图谱;0014图3A。

7、J为本发明采用引物1492R产生的细菌DNA图谱。具体实施方式0015下面结合具体实施例,进一步阐述本发明。应理解,这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解,在阅读了本发明讲授的内容之后,本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改,这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。0016实施例10017沤麻时间据红麻或黄麻收获时间定,一般为9月中下旬至10月中下旬。0018沤麻方法00191将保存的粪产碱菌DY1菌株于牛肉膏蛋白胨培养基每1000ML培养基包括牛肉膏3G、蛋白胨10G、氯化钠5G和水1000ML中培养,添加冻存缓冲液每100ML冻存缓冲液包括甘油50。

8、ML和水50ML,培养条件为37,PH自然,培养时间12小时;00202在红麻或黄麻麸皮培养基每1000ML培养基包括红麻或黄麻皮200G,麸皮50G,麦芽汁50ML和水950ML1000ML中接入菌一环,摇瓶培养,培养条件为37,PH自然,培养时间24小时;00213将培养基接种入红麻或黄麻麸皮发酵培养基每1000ML培养基包括红麻或黄麻皮100G,麸皮100G,麦芽汁200ML和水800ML,摇瓶培养得到发酵菌液,培养条件为37,PH自然,培养时间24小时;00224沤麻池的准备用4HB800型红麻或黄麻剥皮机将鲜皮从红麻或黄麻全杆中分离出来韧皮部因机械挤压、打板击打已造成许多伤口,利于脱。

9、胶菌入侵,但不破坏纤维;尾部端齐以洗麻时能甩得动为度,20根左右为一把,稍部拢齐、直,顺折成三至四层沤麻池深度相仿,浸水时正好淹没麻把或对折,每把麻中部靠尾处用鲜皮扎把,把与把之间用扎把的鲜皮连接,按顺序排列、排紧;一般每个沤麻池均分批投放,便于分批洗麻;投放好麻把后然后将麻把全部压入水中,基本上不露出水面为宜。最后用厚型塑料薄膜透明将全部麻把盖住,再压紧塑料薄膜,以防麻皮离水。麻趟间距1520厘米。麻层厚度一般在225厘米为宜。00235将制备的发酵菌液使用喷淋法入沤麻池做沤麻处理,沤麻后制得可供纺织制品用红麻或黄麻纤维,沤麻条件为自然温度,PH自然;喷淋法的工艺具体为每48小时向沤麻区域喷。

10、洒菌液8ML。0024完成沤制时间视气温定,一般9月中下旬至10月中下旬,沤制时间逐渐延长,若气温变化不大,则沤制时间基本相同。在红麻或黄麻正常收获季节约为1020天。说明书CN104164387A1/1页50001序列表CN104164387A1/11页6图1图2A说明书附图CN104164387A2/11页7图2B图2C说明书附图CN104164387A3/11页8图2D图2E说明书附图CN104164387A4/11页9图2F图2G说明书附图CN104164387A5/11页10图2H图2I说明书附图CN104164387A106/11页11图2J图3A说明书附图CN104164387A117/11页12图3B图3C说明书附图CN104164387A128/11页13图3D图3E说明书附图CN104164387A139/11页14图3F图3G说明书附图CN104164387A1410/11页15图3H图3I说明书附图CN104164387A1511/11页16图3J说明书附图CN104164387A16。

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