相关申请的交叉参考
本申请要求2003年3月5日提交的美国序列号为60/451,989的临时申请的优先 权。
发明背景
格列本脲和甲福明是分别属于磺脲类和盐酸双胍类的两种类型的口服治疗糖 尿病的药物。格列本脲也被称为优降糖，化学名称为1-[[对-[2-(5-氯-邻-甲氧苯 酰氨基)-乙基-]苯基]-磺酰基]-3-环己基脲(1-[[p-[2-(5-chloro-o-anisamido) ethyl]phenyl]sulfonyl]-3-cyclohexylurea)。格列本脲通过剧烈刺激胰腺分泌胰 岛素来降低血糖，依赖于胰岛中的功能性β细胞的作用。甲福明，通常以盐酸盐形 式存在，化学名称为N，N-二甲基亚氨基二碳亚氨基二酰胺盐酸盐(N，N- dimethylimidodicarbonimidicdiamide hydrochloride)。甲福明降低肝糖生成， 降低肠内葡萄糖的吸收，并且通过增加外周组织对葡萄糖的摄取和利用来提高胰岛 的敏感性。
由于作用方式的互相补充，格列本脲和甲福明通常同时应用于糖尿病人。这种 联合治疗对已经用格列本脲或甲福明分别独立治疗一段时间并且治疗已经无效的 病人特别有利。
人们期望将格列本脲和甲福明合并制成单剂量的形式比如片剂或明胶胶囊。但 是，虽然甲福明具有高水溶性，但是格列本脲是弱酸性的并且在水中只有少量溶解。 此外，当将甲福明和格列本脲联合制成单剂量形式的时候，由于在靠近格列本脲附 近存在甲福明，格列本脲的溶解度进一步降低。因此，需要获得一种能够提高格列 本脲溶解度的甲福明和格列本脲的组合剂量形式。优选地，这种组合剂量能够表现 出相当于通过单独给药同等剂量的甲福明和格列本脲后所获得可溶性和/或体内生 物利用度的体外可溶性和/或体内生物利用度。或者，人们需要获得一种能够表现 出相当于给予同样剂量的包含甲福明和格列本脲的商可商业获得的片剂的体外溶 解性和/或体内生物利用度的甲福明和格列本脲的组合剂量形式，所说的可商业获 得的片剂即获得美国食品和药品管理局(FDA)批准的GlucovanceTM片剂。
WO97/17975公开了盐酸甲福明和格列本脲需要以1/100重量比的组合形式给 药治疗II型糖尿病以获得最好的治疗效果。然而它并没有教导怎样去制备甲福明和 格列本脲的组合制品以确保达到合适的体外溶解度和体内生物利用度。
美国专利5,258,185描述了一种活性高、吸收快的格列本脲剂型，其基本组成 为1份的格列本脲溶液，2-30份的一种脂肪醇或者它们的混合物，3-70份的至少一 种糖醇，其中所述的糖醇被溶于10-100份的水中，和0.5-2摩尔的一种碱性反应物， 比如碱性氢氧化物、氨。格列本脲通过与碱反应物形成钠盐，转变为以分子形式分 散，增强了胃肠道对格列本脲的快速吸收。然而，钠盐的形成是药学上不可接受的， 因为，钠盐可能表现出与格列本脲本身不同的药动学参数。另外，WO01/51463 A1 申请所披露的组合由于能在血浆中快速导致起始高血浆药物浓度(″峰″)，而不能获 得所需要的生物利用度。
US 6,303,146B1和WO 01/51463都披露了格列本脲的微粒大小和粒径的分布对 其体外溶解度和体内生物利用度的影响。US 6,303,146B1还公开了为了获得较好的 格列本脲的体内生物利用度，格列本脲的粒径应该为至多10％的颗粒不大于2μm并且 至多10％的颗粒大于60μm。类似地，WO01/51463 A1也公开了为了获得同样的效果， 格列本脲应该是这样的，即有25％的颗粒粒径值在3-11μm之间，50％的颗粒粒径值在 6-23μm之间，并且有75％的颗粒粒径值在15-46μm之间，并且其粉末表面积值在 1.7-2.2平方米/克之间。目前的商业产品″Glucovance″(格列本脲和盐酸甲福明 的片剂，1.25mg/250mg，2.5mg/500mg，5mg/500mg)是按照US 6,303,146B1的方法 制备的。通过仔细选择粒径的大小，并将其限制到小于10μm，Glucovance已经被 证明具有和单独给药甲福明和格列本脲的生物利用度相当的格列本脲生物利用度。 另外，WO 01/51463A1也公开了具有所述粒径大小的格列本脲能避免在血浆中可导 致患者不期望出现的低血糖水平的快速导致起始高血浆药物浓度(″峰″)。
然而，US 6,303,146B1和WO 01/51463都使用了粉碎和微粉化以获得专利中所 要求的特定粒径分布。该制备方法一般包括使用空气喷雾粉碎，其需要昂贵的设备 (费用通常约为$1000,000-$2000,000)、特定的制备区域和充分的专业培训以减少 该方法中所使用的抗高血压化合物的接触量。此外，由于化合物颗粒的微粉化是通 过带有气旋分离器的空气喷雾来进行的，为了适当的分离粗颗粒，对材料的流动速 度和分离的准确控制是很有必要的。此外常由粉碎和微粉化而引起的宽粒度分布需 要进行重复的微粉化，其将不可避免导致材料的损失。同样的理由，为了获得终产 物的合理的重现性，需要进行严格的质量控制。总之，US6,303,146B1和WO 01/51463A1中公开的粉碎和微粉化过程是非常昂贵的和费时的，也总是伴随很明显 的大量原料的损失。
发明详述
本发明涉及一种制备含甲福明和格列本脲的固体口服剂型的方法。这种制备方 法是简单的、低成本的、完整的，并且容易用于工业大生产的。所述方法包括以下 步骤：
a)在有机溶液中均质格列本脲以得到浆液；
b)将步骤a)中得到的浆液喷雾到药用赋形剂上；
c)将上面步骤b)的产品和甲福明颗粒混合；和
d)制成甲福明和格列本脲的固体口服剂型。
或者，步骤a)中的均质产物可以直接喷雾到甲福明颗粒上，从而将上述b)和c) 合并为一个步骤。此外，喷雾可以和在30-45℃下的干燥同时进行。流化床制粒机， 如美国Glatt AirTechniques有限公司制造的Glatt，可用于喷雾步骤。
在本发明的一个实施方案中，上述步骤a)中的有机溶剂是醇，优选地，所述醇 是甲醇、乙醇或者其它含有1-6个碳原子的低级醇(低级醇类)，以及它们的稀释物 或混合物。精通此领域的技术人员容易获得的其它有机溶剂，比如丙酮，也可用于 本发明。在优选的实施方案中，用乙醇来均质格列本脲。
均质步骤可以采用高速匀浆器来进行，例如德国ART moderne Labortechnik制 造的MiccraD-8，它可以5000-500000rpm的速度进行均质。优选地，均质可以 10000-50000 rpm的速度进行，并进行至少一小时。通过对包括残渣的过滤和干燥 的重量分析测定得出，均质的产物是含大约8-15％重量百分比的可溶形式的格列本 脲和其余85-92％重量百分比的固体精细颗粒形式的格列本脲的浆液。为了测格列本 脲颗粒的大小，可以选用筛子来对颗粒进行筛选。在一个具体的实施中，可以采用 具有直径为45μm的孔大小的筛子。当浆液100％通过45μm的筛时，浆液中包含的颗 粒的直径都低于45μm。在一个优选的实施中，选用直径为35μm孔的筛子，当浆液 100％通过35-的孔时，格列本脲颗粒的直径都将低于35μm。
为了增加格列本脲的溶解性，可以在均质产物被喷雾到药物赋形剂或甲福明颗 粒之前加入润湿剂比如非离子表面活性剂。本发明可适用的润湿剂非限制性地包括 聚山梨醇酯-80(吐温-80)、聚氧乙烯40氢化蓖麻油(CremophoreRH 40)、辛酰 己酰基-聚乙二醇-8-甘油酯(Labrasol)、PEG-20硬脂醚(Brij-78)、PEG-20硬脂 酸甘油酯(CapmulRTM)、PEG-40月桂甘油酯(Croda)、PEG-60玉米甘油酯(Crovol M70)、PEG-20山梨糖醇单硬脂酸酯(Tween-60)、蔗糖单硬脂酸酯(Crodesta F- 160)、泊洛沙姆108(Pluronic RTM)。
本发明可应用的药学赋形剂非限定性地包括乳糖、微晶纤维素、淀粉、磷酸二 钙、磷酸三钙、碳酸钙、麦芽糖糊精、胶体二氧化硅和硬脂酸镁等。此外，粘合剂， 如聚乙烯吡咯烷酮(Kollidon-30)和羟丙基纤维素，也可以被加到步骤a)中的均质 液浆中，以增强制粒的粘合性。
本发明应用的格列本脲和有机溶液的重量比可以为1/10-1/40，优选1/20- 1/30。本发明应用的格列本脲和润湿剂的重量比可以为1/1-1/5，优选1/2-1/4。本 发明采用的格列本脲和药学赋形剂的重量比可以为1/10-1/80，优选1/25-1/65。
本发明制得的固体口服剂型可以是片剂、明胶胶囊，或者文献中记载的其它公 知的形式。片剂可以是单层或者双层片，并且固体口服剂型可以采用亲水聚合物比 如羟丙基甲基纤维素、羟丙基纤维素等包衣。
本发明所制备的固体口服剂型中大约有8-15％重量的具有不可测粒径值的溶解 或分散形式的格列本脲，其余的格列本脲为直径小于45μm，优选小于35μm的分散 体形式。这种结构的固体口服剂型能够实现格列本脲在一段时间内的分级释放，即 在起始释放后的实现逐渐稳步增长的释放。尽管不受任何特定的理论的约束，但是 它呈现出起始的快速释放和稳定释放，快速释放是由占8-15％重量的具有不可测粒 径的以溶液形式存在的格列本脲造成的，稳定释放是由剩余85-92％的以颗粒形式存 在的格列本脲造成的。因此，本发明所制备的固体口服剂型能够在不产生过高的血 浆药物浓度即″峰″的情况下实现足够且延续的药物溶解度和生物利用度。
本发明所制备的固体口服剂型也可以达到与″Glucovance″片剂相当的格列本 脲的生物利用度和/或溶解度，其中所说的片剂即被美国专利US6,303,146B1公开并 被美国食品和药品管理局(FDA)在2000年7月31日通过的″Glucovance(下文称为 ″Glucovance片剂)，该组合片中25％的筛下物值不超过6μm，50％％的筛下物值不超 过7-10μm，和75％的筛下物值不超过21μm。
术语″相当″意思是指基本上相同。特别的，当与短语″体内生物利用度″用在一 起时，意思是指，当给患者或试验动物给药时，本发明所制备的固体口服剂型产生 的格列本脲的生物利用度在给予同样剂量强度的Glucovance的最大血浆浓度 (Cmax)和血浆浓度-时间曲线下面积(AUC)的Glucovance的80-125％之内。当使用 短语″体外溶解度″时，术语″相当″意思是指本发明所制备的固体口服剂型产生的格 列本脲释放百分比为当将同等剂量强度的Glucovance放到相同浓度溶液中时格 列本脲释放百分比的80-125％。
尽管盐酸甲福明是本领域在制药工业上所最常用的甲福明盐，其它形式的甲福 明盐也可以代替盐酸甲福明用于本发明。术语″甲福明″，当应用于本申请时，是指 盐酸甲福明或精通此领域的技术人员容易想到的其它甲福明盐。
采用下述的步骤可以制备甲福明颗粒。将四百克(400gm)聚乙烯吡咯烷酮 (Kollidon-30)和400gm的纯净水进行混合并将其加热到80-90℃。将一百克(100 gm)玉米淀粉分散于150克纯净水中，并且将浆液加到上述热的聚乙烯吡咯烷酮溶液 中，混合得到均匀的糊状物。将五千克(5000gm)盐酸甲福明和200克乙醇酸淀粉钠 在制粒机中混合。把聚乙烯吡咯烷酮-淀粉糊状物加入制粒机中，比如快速混合制 粒机(Aeromatic-Fielder，PMA)，并将该湿物质制粒。制得的颗粒在流化床干燥器 中干燥，用16目筛整粒。或在流化床制粒机(GlattFBE Processor)中将聚乙烯吡 咯烷酮-淀粉糊状物喷雾到甲福明和乙醇酸淀粉钠的混合物上，得到甲福明颗粒。
在本发明的一个实施方案中，将50克已经通过0.5mm筛粉碎和研磨的格列本脲 分散到1180克乙醇溶液中，在25000rpm下均质2小时，接着过35μm目的筛。然后把 150克聚乙烯吡咯烷酮(Kollidon-30)和150克聚山梨醇酯80溶于这种格列本脲浆 液。将得到的浆液在流化床制粒机(GlattFBE Processor)中喷雾到1900克乳糖、 300克淀粉1500和100克乙醇酸淀粉钠的混合物上，喷雾速度为在0.5-1.0个大气 压下30-45gm/ml，进料空气温度为35-45℃。最后过16目筛对所得颗粒大小进行调 整。或者，将格列本脲浆液在单锅制备器中(Zanchetta)喷雾到乳糖，淀粉1500 和乙醇酸淀粉钠的混合物上。
根据本发明的另一个实施方案，将50克已经通过0.5mm筛粉碎和研磨的格列本 脲分散到1180克乙醇中，在25000rpm下均质2小时，接着过35μm目的筛。然后把400gm 聚乙烯吡咯烷酮(Kollidon-30)和150克聚山梨醇酯80溶于格列本脲浆液。然后将得 到的浆液在流化床制粒机(GlattFBE Processor)中喷雾到5000克盐酸甲福明、 1900克乳糖、300克淀粉1500和100克乙醇酸淀粉钠的混合物上，喷雾速度为在 0.5-1.0个大气压下30-45 gm/ml，进料空气温度为35-45℃。最后过16目筛对所得 颗粒大小进行调整。或者将格列本脲浆液在单锅制备器中(Zanchetta)喷雾到甲福 明、乳糖、淀粉1500和乙醇酸淀粉钠的混合物上。
本发明还涉及通过给有此需要的患者施用有效量的本发明制备的格列本脲和 甲福明联合的固体口服剂型来治疗糖尿病。
下面的实施例将进一步对本发明进行说明。
实施例1
制备含500mg甲福明和5mg格列本脲，但未经均质和不含润湿剂的片剂： 部分1-格列本脲颗粒
将50克格列本脲先通过0.5mm筛进行粉碎和研磨，然后将获得的格列本脲微粒 与1900克乳糖、300克淀粉1500和100克乙醇酸淀粉钠混合，并用溶于1180克乙醇 的150gm聚乙烯吡咯烷酮(Kollidon-30)溶液制粒。在45℃下干燥后将由此而获得的 颗粒通过16目筛来对其大小进行调整。
部分2-甲福明颗粒
四百(400)克的聚乙烯吡咯烷酮(Kollidon-30)和400gm的纯净水混合，加热到 80-90℃。将一百(100)克玉米淀粉分散于150克纯净水中，并将浆液加到上述热的 聚乙烯吡咯烷酮溶液中，混合得到均匀的糊状物。接着将五千(5000)克盐酸甲福明 和200克乙醇酸淀粉钠在制粒机中混合。然后把聚乙烯吡咯烷酮-淀粉糊状物加入制 粒机，并将该湿物质制粒。制得的颗粒在流化床干燥器中干燥，用16目筛整粒。 部分3-片剂的制备
将甲福明颗粒(部分2)与格列本脲颗粒(部分1)、70克胶体二氧化硅和30克硬脂 酸镁混合。然后用合适的压片机对混合物压片。再用0.85％的羟丙基纤维素 (MethocelE15)在片剂包衣装置中对所得的片剂进行包衣。
实施例2
制备含500mg甲福明和5mg格列本脲且经过均质但不含润湿剂的片剂： 部分1-格列本脲颗粒
50克格列本脲先通过0.5mm筛进行粉碎和研磨，获得的格列本脲颗粒分散到 1180gm的乙醇溶液中，在25000rpm下均质2小时，得到浆液。接着过35μm目的筛， 然后把150克聚乙烯吡咯烷酮(Kollidon-30)加到浆液中，把所得的分散体在流化床 制粒机(Glatt)中喷雾到1900克乳糖、300克淀粉1500和100克乙醇酸淀粉钠的混 合物上，喷雾速度为在0.5-1.0个大气压下30-45gm/ml，进料空气温度为35-45℃。 用16目筛对所得的颗粒的大小进行调整。
部分2-甲福明颗粒
将四百(400)克聚乙烯吡咯烷酮(Kollidon-30)和400gm纯净水混合，加热到 80-90℃。将一百(100)克玉米淀粉分散于150克纯净水中，并且将浆液加到上述热 的聚乙烯吡咯烷酮溶液中，混合得到均匀的糊状物。接着将五千(5000)克盐酸甲福 明和200克乙醇酸淀粉钠在制粒机中混合。然后把聚乙烯吡咯烷酮-淀粉糊状物加入 制粒机中，比如快速混合制粒机(Aeromatic-Fielder，PMA)，并将该湿物质制粒。 制得的颗粒在流化床干燥器中干燥，过16目筛进行整粒。
部分3-片剂的制备
将格列本脲颗粒(部分1)和甲福明颗粒(部分2)、70克胶体二氧化硅和30克硬脂 酸镁混合。然后用合适的压片机对混合物压片。再用0.85％的羟丙基纤维素 (MethocelE15)在片剂包衣装置中对所得的片剂进行包衣。
实施例3
制备含500mg甲福明、5mg经过均质的格列本脲和润湿剂(聚山梨醇酯-80)的片 剂：
部分1-格列本脲颗粒
五十(50)克格列本脲先通过0.5mm筛进行粉碎和研磨，获得的格列本脲颗粒分 散到1180克乙醇溶液中，在25000rpm下均质2小时，得到浆液。接着过35μm目的筛， 然后把150克聚乙烯吡咯烷酮(Kollidon-30)和150克聚山梨醇酯-80加到格列本脲 浆液中，将所得的分散体在流化床制粒机(Glatt)中喷雾到1900克乳糖、300克淀 粉1500和100克乙醇酸淀粉钠的混合物上，喷雾速度为在0.5-1.0个大气压下30- 45gm/ml，进料空气温度为35-45℃。用16目筛对所得的颗粒的大小进行调整。 部分2-甲福明颗粒
四百(400)克聚乙烯吡咯烷酮(Kollidon-30)和400gm的纯净水混合，加热到 80-90℃。将一百(100)克玉米淀粉分散于150克纯净水中，并且将浆液加到上述热 的聚乙烯吡咯烷酮溶液中，混合得到均匀的糊状物。接着将五千(5000)克盐酸甲福 明和200克乙醇酸淀粉钠在制粒机中混合。然后把聚乙烯吡咯烷酮-淀粉糊状物加入 制粒机中，并将该湿物质制粒。制得的颗粒在流化床干燥器中干燥，用16目筛整粒。
部分3-片剂的制备
将格列本脲颗粒(部分1)和甲福明颗粒(部分2)、70克胶体二氧化硅和30克硬脂 酸镁混合。然后用合适的压片机对混合物压片。再用0.85％的羟丙基纤维素 (MethocelE15)在片剂包衣装置中对所得的片剂进行包衣。
实施例4
制备含500mg甲福明、5mg经过均质的格列本脲和润湿剂(聚氧乙烯40氢化蓖麻 油(CremopjorRH 40)的片剂：
部分1-格列本脲颗粒
五十(50)克格列本脲先通过0.5mm筛进行粉碎和研磨，获得的格列本脲颗粒分 散到1180克乙醇溶液中，在25000rpm下均质2小时，得到浆液。接着过35μm目的筛， 然后把150克聚乙烯吡咯烷酮(Kollidon-30)和150克聚氧乙烯40氢化蓖麻油 (CremopjorRH 40)加到格列本脲浆液中，将所得的分散体在流化床制粒机 (Glatt)中喷雾到1900克乳糖、300克淀粉1500和100克乙醇酸淀粉钠的混合物 上，喷雾速度为在0.5-1.0个大气压下30-45gm/ml，进料空气温度为35-45℃。用 16目筛对所得的颗粒的大小进行调整。
部分2-甲福明颗粒
四百(400)克聚乙烯吡咯烷酮(Kollidon-30)和400gm纯净水混合，加热到80- 90℃。将一百(100)克玉米淀粉分散于150克纯净水中，并且将浆液加到上述热的聚 乙烯吡咯烷酮溶液中，混合得到均匀的糊状物。接着将五千(5000)克盐酸甲福明和 200克乙醇酸淀粉钠在制粒机中混合。然后把聚乙烯吡咯烷酮-淀粉糊状物加入制粒 机中，并将该湿物质制粒。制得的颗粒在流化床干燥器中干燥，用16目筛整粒。
部分3-片剂的制备
将格列本脲颗粒(部分1)和甲福明颗粒(部分2)、70克胶体二氧化硅和30克硬脂 酸镁混合。然后用合适的压片机对混合物压片。再用0.85％的羟丙基纤维素 (MethocelE15)在片剂包衣装置中对所得的片剂进行包衣。
实施例5
制备含500mg甲福明、5mg经过均质的格列本脲和润湿剂(聚山梨醇酯-80)的片 剂：
部分1-格列本脲颗粒
五十(50)克格列本脲先通过0.5mm筛进行粉碎和研磨，获得的格列本脲颗粒分 散到1180克乙醇溶液中，在25000rpm下均质2小时，得到浆液。接着过35μm目的筛， 然后把400克聚乙烯吡咯烷酮(Kollidon-30)和150克聚山梨醇酯-80加到格列本脲 浆液中，将所得的分散体在流化床制粒机(Glatt)中喷雾到5000克盐酸甲福明、 1900克乳糖、300克淀粉1500和100克乙醇酸淀粉钠的混合物上，喷雾速度为在 0.5-1.0个大气压下30-45gm/ml，进料空气温度为35-45℃。用16目筛对所得的颗 粒的大小进行调整。
部分2-片剂的制备
将颗粒(部分1)、70克胶体二氧化硅和30克硬脂酸镁混合。然后用合适的压片 机对混合物压片。再用0.85％的羟丙基纤维素(MethocelE15)在片剂包衣装置中对 所得的片剂进行包衣。
实施例6
制备含500mg甲福明、2.5mg经过均质的格列本脲和润湿剂(聚山梨醇酯-80)的 片剂：
部分1-格列本脲颗粒
将二十五(25)克格列本脲先通过0.5mm筛进行粉碎和研磨，获得的格列本脲颗 粒分散到590克乙醇溶液中，在25000rpm下均质2小时，得到浆液。接着过35μm目的 筛，然后把75克聚乙烯吡咯烷酮(Kollidon-30)和75克聚山梨醇酯-80加到格列本脲 浆液中，将所得的分散体在流化床制粒机(Glatt)中喷雾到950克乳糖，150克淀 粉1500和50克乙醇酸淀粉钠的混合物上，喷雾速度为在0.5-1.0个大气压下30-45 gm/ml，进料空气温度为35-45℃。用16目筛对所得的颗粒的大小进行调整。
部分2-甲福明颗粒
四百(400)克聚乙烯吡咯烷酮(Kollidon-30)和400gm的纯净水混合，加热到 80-90℃。将一百(100)克玉米淀粉分散于150克纯净水中，并且将浆液加到上述热 的聚乙烯吡咯烷酮溶液中，混合得到均匀的糊状物。接着将五千(5000)克盐酸甲福 明和200克乙醇酸淀粉钠在制粒机中混合。然后把聚乙烯吡咯烷酮-淀粉糊状物加入 制粒机中，并将该湿物质制粒。制得的颗粒在流化床干燥器中干燥，用16目筛整粒。
部分3-片剂的制备
将格列本脲颗粒(部分1)和甲福明颗粒(部分2)、70克胶体二氧化硅和30克硬脂 酸镁混合。然后用合适的压片机对混合物压片。再用0.85％的羟丙基纤维素 (MethocelE15)在片剂包衣装置中对所得的片剂进行包衣。
实施例7
制备含500mg甲福明、1.25mg经过均质的格列本脲和润湿剂(聚山梨醇酯-80)的 片剂：
部分1-格列本脲颗粒
将十二点五(12.5)克格列本脲先通过0.5mm筛进行粉碎和研磨，将获得的格列 本脲颗粒分散到295克乙醇溶液中，在25000rpm下均质2小时，得到浆液。接着过35μm 目的筛，然后把37.5克聚乙烯吡咯烷酮(Kollidon-30)和37.5克聚山梨醇酯-80加到 格列本脲浆液中，将所得的分散体在流化床制粒机(Glatt)中喷雾到475克乳糖， 75克淀粉1500和25克乙醇酸淀粉钠的混合物上，喷雾速度为在0.5-1.0个大气压 下30-45gm/ml，进料空气温度为35-45℃。用16目筛对所得的颗粒的大小进行调整。
部分2-甲福明颗粒
将两百(200)克聚乙烯吡咯烷酮(Kollidon-30)和200gm的纯净水混合，加热到 80-90℃。将五十(50)克玉米淀粉分散于75克纯净水中，并且将浆液加到上述热的 聚乙烯吡咯烷酮溶液中，混合得到均匀的糊状物。两千五百(2500)克盐酸甲福明和 100克乙醇酸淀粉钠在制粒机中混合。然后把聚乙烯吡咯烷酮-淀粉糊状物加入制粒 机中，并将该湿物质制粒。制得的颗粒在流化床干燥器中干燥，用16目筛整粒。 部分3-片剂的制备
将格列本脲颗粒(部分1)和甲福明颗粒(部分2)，35克胶体二氧化硅和15gm的硬 脂酸镁混合。然后用合适的压片机对混合物压片。再用0.85％的羟丙基纤维素 (MethocelE15)在片剂包衣装置中对所得的片剂进行包衣。
实施例8
制备含250mg甲福明、1.25mg经过均质的格列本脲和润湿剂(聚山梨醇酯-80)的 胶囊：
部分1-格列本脲颗粒
将十二点五(12.5)克格列本脲先通过0.5mm筛进行粉碎和研磨，获得的格列本 脲颗粒分散到295克乙醇溶液中，在25000rpm下均质2小时，得到浆液。接着过35μm 目的筛，然后把37.5克聚乙烯吡咯烷酮(Kollidon-30)和37.5克聚山梨醇酯-80加到 格列本脲浆液中，将所得的分散体在流化床制粒机(Glatt)中喷雾到475克乳糖， 75克淀粉1500和25克乙醇酸淀粉钠的混合物上，喷雾速度为在0.5-1.0个大气压 下30-45gm/ml，进料空气温度为35-45℃。用16目筛对所得的颗粒的大小进行调整。
部分2-甲福明颗粒
将二百(200)克聚乙烯吡咯烷酮(Kollidon-30)和200gm的纯净水混合，加热到 80-90℃。将五十(50)克玉米淀粉分散于75克纯净水中，并且将浆液加到上述热的 聚乙烯吡咯烷酮溶液中，混合得到均匀的糊状物。将两干五百(2500)克盐酸甲福明 和100克乙醇酸淀粉钠在制粒机中混合。然后把聚乙烯吡咯烷酮-淀粉糊状物加入制 粒机中，并将该湿物质制粒。制得的颗粒在流化床干燥器中干燥，用16目筛整粒。 部分3-片剂的制备
将格列本脲颗粒(部分1)和甲福明颗粒(部分2)、35克胶体二氧化硅和15gm的硬 脂酸镁混合。然后将颗粒混合物填充入00号的硬明胶胶囊中。
实施例9-体外溶解性研究
上述实施例制备的片剂和美国Bristol-Myers Squibb公司生产的Glucovance 片剂在900ml的PH为7.5的磷酸缓冲液(USP)中，使用USP溶解装置II以100rpm的速度 测定体外溶解性。
表1：实施例1-8所制备的片剂和Glucovance片剂的体外溶解性的比较 片剂 (甲福明/格列 本脲，w/w) 制备方法 格列本脲释放后的％ 1)均质 2)润湿剂 30分钟 45分钟 60分钟 实施例1 (500/5) 1)没有 2)没有 ＜50 ＜50 ＜50 实施例2 (500/5) 1)有 2)没有 61.9- 63.78 72.3- 74.9 75.4- 81.8 实施例3 (500/5) 1)有 2)有(聚山梨醇酯-80) 76.7- 83.25 87.1- 91.36 86.3- 96.2 实施例4 (500/5) 1)有 2)有(聚氧乙烯40氢化蓖麻油) 87.59- 94.23 95.86- 101.29 98.52- 100.1 实施例5 (500/5) 1)有 2)有(直接喷雾到甲福明颗粒上) 77.5- 84.3 86.5- 92.6 86.6- 94.5 实施例6 (500/2.5) 1)有 2)有 83.2- 90.8 90.35- 97.2 92.4- 100.7 实施例7 (250/1.25) 1)有 2)有 83.1- 92.4 92.1- 97.05 92.7- 100.3 实施例8 (250/1.25) 1)有 2)有(明胶胶囊) 81.52- 87.4 85.4- 91.06 89.9- 94.65 Glucovance片 (500/5) 1)没有 2)没有 74.1- 84.41 79.82- 85.2 84.6- 88.8 Glucovance片 (500/2.5) 1)没有 2)没有 76.4- 82.4 81.7- 84.9 83.8- 86.2 Glucovance (250/1.25) 1)没有 2)没有 79.3- 80.7 83.6- 85.09 86.25- 87.9
实施例1显示的是通过不采用均质格列本脲和添加润湿剂的传统的方法制备的 片剂；实施例2-8是采用本发明公开的方法制备的甲福明/格列本脲组合片。实施例 2中没有润湿剂，实施例4显示的是一种其中将格列本脲浆液直接喷雾到甲福明颗粒 上的方法。
体外溶解性试验数据很清楚的表明：与传统的制备方法(实施例1)生产的片剂 相比，通过在有机溶剂中均质格列本脲制备的固体口服剂型(实施例2-8)表现出很 高的体外生物溶解性。当润湿剂比如表明活性剂聚山梨醇酯-80或者聚氧乙烯40氢 化蓖麻油被加到格列本脲浆液中时，如实施例3-8，格列本脲的溶解性得到了进一 步的提高。
此外，用本发明方法制备的固体口服剂型(实施例2-8)产生了格列本脲在60分 钟内的分级释放：起始产生一种格列本脲较早起效必需的格列本脲的快速的体外释 放，接着格列本脲的释放稳步增长。看开似乎开始格列本脲释放的迅速发生是由 8-15％以溶液形式存在的格列本脲所产生的，和平稳释放是由剩余的85-92％的以分 散形式存在的格列本脲所产生的。结论是：本发明所制备的固体口服剂型能够在不 产生过高的最大的药物血浆浓度比如″峰″的情况下实现足够的和延续的药物溶解 度和生物利用度。
此外，用本发明的方法制备的固体口服剂型(实施例2-8)实现了与Glucovance 片剂相当的体外溶解度。另一种表述方法为，本发明所制备的固体口服剂型产生格 列本脲释放百分比为将与同样剂量强度的Glucovance放到溶液中时格列本脲释 放百分比的80-125％。
实施例9-体内生物利用度研究
用人体志愿者测定体内生物利用度，包括：
1.采用随机交叉的方式给予禁食的人体志愿者口服上述实施例2中的组合物和 当前商品GlucovanceTM(500/5)，测定格列本脲的生物利用度并比较。
纪录格列本脲的平均药动学参数比如最大血浆浓度(Cmax)，达到最大血浆浓度 的时间(Tmax)，药物血浆浓度与时间曲线下面积(AUC0-t和AUC0-∞)，观察值如下：
表2：实施例2的片剂和Glucovance片剂的体内生物利用度比较 参数 Glucovance(500/5) 实施例2的片剂 Cmax(ng/ml) 187.71±72.2 158±80.48 AUC0-t(ng/ml*小时) 1108.56±642.65 731.1±441.75 AUC0-∞(ng/ml*小时) 1197±642.65 838.29±441.75
表3：相对Glucovance而言实施例2的格列本脲的
对数转化数据的90％置信区间(C.I.) 参数 90％C.I. 美国FDA可接受的90％C.I.的标准** Cmax(ng/ml) 89.73-103.42 80-125 AUC(0-t)(ng/ml*hr) 88.94-99.76 80-125 AUC(0-∞)(ng/ml*hr) 90.78-99.98 80-125
(90％C.I.符合美国FDA的有关对文件生物等价性对数转化数据的可接受的的标 准)
**＝工业指标：食物对生物利用度的影响和进食生物等效性的研究。美国FDA， CDER，2002年12月的标准
2.采用随机交叉的方式给予禁食的人体志愿者口服上述实施例3中的组合物和 当前商品Glucovance(500/5)，测定格列本脲的生物利用度并比较。
纪录格列本脲的平均药动学参数比如最大血浆浓度(Cmax)，达到最大血浆浓度 的时间(Tmax)，药物血浆浓度与时间曲线下面积(AUC0-t和AUC0-∞)，观察值如下：
表4：实施例3的片剂和Glucovance片剂的体内生物利用度比较： 参数 Glucovance(500/5) 实施例3的片剂 Cmax(ng/ml) 164.226±26.114 147.94±38.333 AUC0-t(ng/ml*小时) 653.359±242.494 595.6371±302.663 AUC0-∞(ng/ml*小时) 682.124±242.494 629.439±302.663
表5：相对Glucovance而言实施例3的格列本脲的
对数转化数据的90％置信区间(C.I.) 参数 90％C.I. 美国FDA可接受的90％C.I.的标准** Cmax(ng/ml) 85.80-104.72 80-125 AUC(0-t)(ng/ml*hr) 92.74-96.54 80-125 AUC(0-∞)(ng/ml*hr) 93.12-96.87 80-125
(90％C.I.符合美国FDA的有关对文件生物等价性对数转化数据的可接受的的标 准)
**＝工业指标：食物对生物利用度的影响和进食生物等效性的研究。美国FDA， CDER，2002年12月的标准
3.上述实施例3的组合物口服给予人体志愿者。分别或同时给人体志愿者口服 由Bristol-Myers Suibb公司生产的含有500mg盐酸甲福明的商业片剂Glucophage 和由美国Aventis公司生产含有5mg格列本脲的商业片Diabeta。
采用一个针对健康的、成年的、男性的试验者在禁食的状况下的随机的、单剂 量的、两种处理、两个阶段、开放标志、包含一个冲刷阶段的交叉试验方案来评价 实施例3的组合物与单独或同时服用盐酸甲福明剂型(Glucophage片剂-500mg)和 格列本脲剂型(Diabeta-5mg片剂)相对生物利用度。
纪录格列本脲的平均药动学参数比如最大血浆浓度(Cmax)，达到最大血浆浓度 的时间(Tmax)，药物血浆浓度与时间曲线下面积(AUC0-t和AUC0-∞)，观察值如下：
表6：实施例3和单独或同时给予甲福明和格列本脲的体内生物利用度比较： 参数 Diabeta 5mg+Glucophage 500mg 实施例3的片剂 Cmax(ng/ml) 116.997±15.780 128.154±22.316 AUC0-t(ng/ml*小时) 527.516±228.114 469.194±111.905 AUC0-∞(ng/ml*小时) 581.948±228.115 520.883±111.9
表7：对于Diabeta5mg和Glucophage500mg联合用药而言，
实施例3中格列本脲的对数转化数据的90％置信区间(C.I.) 参数 90％C.I. 美国FDA可接受的90％C.I.的标准** Cmax(ng/ml) 100.62-106.59 80-125 AUC(0-t)(ng/ml*hr) 93.50-101.55 80-125 AUC(0-∞)(ng/ml*hr) 93.97-101.15 80-125
(90％C.I.符合美国FDA的有关对文件生物等价性对数转化数据的可接受的的标 准)
**＝工业指标：食物对生物利用度的影响和进食生物等效性的研究。美国FDA， CDER，2002年12月的标准
数据表明：
1.实施例2和3的组合物与格列本脲的体内生物利用度呈现出显著的不同。
2.实施例3的组合物表现出与Glucovance相当的格列本脲的生物利用度。
3.实施例3的组合物表现出与分别或同时给予甲福明和格列本脲的生物利用 度相当的格列本脲的生物利用度。
总之，按照本发明的方法制备的甲福明和格列本脲的固体口服剂型能够实现与 给予相同剂量强度的Glucovance片剂相当的格列本脲的生物利用度和/或溶解 性。按照本发明的方法制备的甲福明和格列本脲的固体口服剂型还能够产生与分别 或同时给予同等强度的甲福明和格列本脲相当的格列本脲的生物利用度。