一种缬沙坦的水解杂质化合物及其制备方法、检测方法和用途.pdf

本发明公开了一种缬沙坦水解杂质化合物，同时公开了该化合物的制备方法、检测方法及其在缬沙坦有关物质检查时作为杂质对照品的用途。通过对该化合物的制备以及结构确证，为缬沙坦有关物质的分析提供对照品，从而提高缬沙坦的质量标准，为缬沙坦的安全用药提供重要的指导意义。

1.  一种缬沙坦的水解杂质化合物，其化学结构式如式(Ⅰ)所示：


2.  权利要求1所述缬沙坦的水解杂质化合物的制备方法，其特征在于该方法包括以下步骤：
(1)将缬沙坦溶于乙腈中，加入盐酸后，加热回流反应使其水解，然后加入NaOH水溶液调pH至中性，分相，所得水相中加入NaCl成饱和溶液，过滤，用正丁醇萃取所得饱和水溶液，取有机相，蒸干得白色固体；
(2)将白色固体用水在室温下打浆，抽滤得纯品。

3.  根据权利要求2所述缬沙坦的水解杂质化合物的制备方法，其特征在于该方法包括以下步骤：
(1)将缬沙坦溶于乙腈中，加入4～9mol/L的盐酸后，加热回流反应3～5小时，搅拌降至室温，然后加入40～60％NaOH水溶液调pH至中性，分相，所得水相中加入NaCl成为饱和溶液，过滤，用正丁醇萃取所得饱和水溶液，取有机相，蒸干得白色固体；
(2)将白色固体在真空干燥箱中烘干，然后用8～12倍重量的水室温打浆1～3小时，抽滤得纯品。

4.  根据权利要求3所述缬沙坦的水解杂质化合物的制备方法，其特征在于该方法包括以下步骤：
(1)将缬沙坦溶于乙腈中，加入6mol/L的盐酸后，加热回流反应4小时，搅拌降至室温，然后加入50％NaOH水溶液调pH至中性，分相，所得水相中加入NaCl成为饱和溶液，过滤，用正丁醇萃取过滤所得饱和水溶液，取有机相，蒸干得白色固体；
(2)将白色固体在真空干燥箱中烘干，然后用10倍重量的水室温打浆2小时， 抽滤得纯品。

5.  权利要求1所述缬沙坦的水解杂质化合物的HPLC检测方法，其特征在于：该方法以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积比为450～550：550～450：1～2的乙腈-水-冰醋酸为流动相；检测波长为227～233nm；流速：1.0ml/min；进样量：10μl；柱温：25～35℃。

6.  权利要求5所述缬沙坦的水解杂质化合物的HPLC检测方法，其特征在于，该方法以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积比为500：500：1的乙腈-水-冰醋酸为流动相；检测波长为230nm；流速：1.0ml/min；进样量：10μl；柱温：30℃。

7.  权利要求1所述缬沙坦的水解杂质化合物在缬沙坦有关物质检查时作为杂质对照品的用途。

一种缬沙坦的水解杂质化合物及其制备方法、检测方法和用途
技术领域
本发明属医药技术领域，涉及一种缬沙坦的水解杂质化合物及其制备方法、检测方法和用途。
背景技术
缬沙坦(valsartan)，化学名：N-(1-氧戊基)-N-[4-[2-(1H-四唑-5-基)苯基]苄基]-L-缬氨酸，化学式见式Ⅱ，是血管紧张素受体拮抗剂，具有全新的降压机制，降压平稳、疗效强、作用时间长、患者耐受性好，可用于各种类型高血压，并对心脑肾有较好的保护作用，心肌梗塞、心力衰竭、蛋白尿、糖尿病等高血压病人可做为常规药物使用，也可与利尿剂(如氢氯噻嗪)联合使用。

关于缬沙坦的文献相当丰富，主要集中在合成路线和晶型上，在缬沙坦的杂质控制方面，中国专利CN102670485B公开了缬沙坦的固体组合物的制备方法，以及其中的水解杂质H的限度，但该专利中并没有公开该杂质的制备方法以及结构确证的资料，也没有公开该水解杂质作为杂质对照品在缬沙坦有关物质检查中的应用。
缬沙坦胶囊为化药注册分类6类，研究时需与原研制剂进行对比研究，在同步稳定考察过程中，市售品的杂质谱与自研样品不尽相同，但同样存在该水解杂质，通过对水解杂质化合物的制备以及结构确证，可以为缬沙坦有关物质的分析提供对照品，从而提高缬沙坦的质量标准，为缬沙坦的安全用药提供重要的指 导意义。
发明内容
本发明的目的在于提供一种缬沙坦的水解杂质化合物及其制备方法、检测方法和用途，通过化学合成法获取该化合物，并对其进行结构确证以确认该化合物的结构，从而将其作为缬沙坦有关物质检查时的杂质对照品，直接有效的监控缬沙坦中杂质的变化情况。
为了实现本发明的目的，发明人通过大量试验研究，最终获得了如下方案：
一种缬沙坦的水解杂质化合物，其化学结构式如式(Ⅰ)所示：

该化合物通过DEPT谱、COSY谱、HMBC、¹H-NMR谱、¹³C-NMR谱等进行了结构确证，解析所得化合物结构如下：

各方法解析所得数据见下表1：



通过结构确证证明该化合物与目标化合物的化学结构相符。
本发明的另一个目的在于提供该缬沙坦的水解杂质化合物的制备方法，包括以下步骤：
(1)将缬沙坦溶于乙腈中，加入盐酸后，加热回流反应使其水解，然后加入NaOH水溶液调pH至中性，分相，所得水相中加入NaCl成饱和溶液，过滤，用正丁醇萃取所得饱和水溶液，取有机相，蒸干得白色固体；
(2)将白色固体用水在室温下打浆，抽滤得纯品。
进一步地，优选的制备方法包括以下步骤：
(1)将缬沙坦溶于乙腈中，加入4～9mol/L的盐酸后，加热回流反应3～5小时，搅拌降至室温，然后加入40～60％NaOH水溶液调pH至中性，分相，所得水相中加入NaCl成为饱和溶液，过滤，用正丁醇萃取所得饱和水溶液，取有机相，蒸干得白色固体；
(2)将白色固体在真空干燥箱中烘干，然后用8～12倍重量的水室温打浆1～3小时，抽滤得纯品。
更进一步地，优选的制备方法包括以下步骤：
(1)将缬沙坦溶于乙腈中，加入6mol/L的盐酸后，加热回流反应4小时，搅拌降至室温，然后加入50％NaOH水溶液调pH至中性，分相，所得水相中加入NaCl成为饱和溶液，过滤，用正丁醇萃取过滤所得饱和水溶液，取有机相，蒸干得白色固体；
(2)将白色固体在真空干燥箱中烘干，然后用10倍重量的水室温打浆2小时，抽滤得纯品。
本发明还提供了该杂质化合物在缬沙坦有关物质检查时作为杂质对照品的用途。
缬沙坦有关物质检查时的色谱条件为：
以十八烷基键合硅胶为填充剂；以乙腈-水-冰醋酸(体积比为：450～550:550～450:1～2)为流动相；检测波长为227～233nm；流速：1.0ml/min；进样量：10μl；柱温：25～35℃。
进一步的，优选的HPLC条件为：
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水-冰醋酸(体积比为：500:500:1)为流动相；检测波长为230nm；流速：1.0ml/min；进样量：10μl；柱温：30℃。
实验步骤：取缬沙坦细粉适量，精密称定，加流动相溶解并稀释制成每1ml中约含缬沙坦0.5mg的溶液，摇匀，滤过，取滤液作为供试品溶液；精密量取供试品溶液适量，用流动相定量稀释制成每1ml中约含1μg的溶液，作为对照溶液。另精密称取水解杂质对照品适量，用流动相定量稀释成每1ml中约含1μg的溶液，作为对照品溶液。照高效液相色谱法(中国药典2010年版二部附录ⅤD)试验，用十八烷基键合硅胶为填充剂，以乙腈-水-冰醋酸(500:500:1)为流动相；检测波长为230nm。理论板数按缬沙坦峰计算不低于4000，缬沙坦与相邻杂质峰的分离度应符合要求。量取对照溶液10μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分峰高为记录仪满量程的15％。再精密量取供试品溶液、对照溶液及对照品溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的4倍。供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，水解杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积(0.2％)，其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积(0.2％)，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的3.5倍(0.7％)。
与现有技术相比，本发明涉及的缬沙坦水解杂质化合物及其制备方法、检测方法和用途的有益效果在于：公开了缬沙坦在生产、储运过程中产生的一种重要的水解杂质化合物，此杂质化合物的含量多少直接影响缬沙坦的药物品质。本发明通过化学合成法获取该化合物，并对其进行结构确证以确认该化合物的结构，并公开了HPLC检测方法将其作为缬沙坦有关物质检查时的杂质对照品，从而直接有效的监控缬沙坦中的杂质的变化情况。本发明的实施有助于缬沙坦质量标准的提高，从而更好的控制缬沙坦的产品质量，对人民群众安全用药具有重要的意义。
附图说明
图1 缬沙坦水解杂质化合物的¹H-NMR谱图。
图2 缬沙坦水解杂质化合物的¹³C-NMR谱图。
图3 缬沙坦水解杂质化合物的HMBC谱图。
图4 缬沙坦水解杂质化合物的DEPT谱图。
图5 缬沙坦水解杂质化合物的COSY谱图。
具体实施方式
以下是本发明的具体实施例，对本发明的技术方案做进一步的描述，但是本发明的保护范围并不限于这些实施例。凡是不背离本发明构思的改变或等同替代均包括在本发明的保护范围之内。
实施例1缬沙坦水解杂质化合物的制备
(1)取缬沙坦30g，溶于200ml乙腈中，加入6mol/L的盐酸200ml，加热回流反应4小时后，搅拌降至室温，然后加入50％NaOH水溶液调pH至中性，分相，所得水相中加入NaCl成为饱和溶液，过滤，用正丁醇萃取所得饱和水溶液，取有机相，蒸干得白色固体；
(2)将白色固体在真空干燥箱中烘干，然后用10倍重量的水室温打浆2小时，抽滤得纯品。通过DEPT谱、COSY谱、HMBC、¹H-NMR谱、¹³C-NMR谱等进行了结构确证，解析所得数据见表1。
实施例2缬沙坦水解杂质化合物的制备
(1)取缬沙坦30g，溶于200ml乙腈中，加入4mol/L的盐酸300ml，加热回流反应5小时后，搅拌降至室温，然后加入60％NaOH水溶液调pH至中性，分相，所得水相中加入NaCl成为饱和溶液，过滤，用正丁醇萃取所得饱和水溶液，取有机相，蒸干得白色固体；
(2)将白色固体在真空干燥箱中烘干，然后用8倍重量的水室温打浆3小时，抽滤得纯品。通过DEPT谱、COSY谱、HMBC、¹H-NMR谱、¹³C-NMR谱等进行了结构确证，解析所得数据见表1。
实施例3缬沙坦水解杂质化合物的制备
(1)取缬沙坦30g，溶于200ml乙腈中，加入9mol/L的盐酸140ml，加热回流反应3小时后，搅拌降至室温，然后加入40％NaOH水溶液调pH至中性，分相，所得水相中加入NaCl成我饱和溶液，过滤，用正丁醇萃取所得饱和水溶液，取有机相，蒸干得白色固体；
(2)将白色固体在真空干燥箱中烘干，然后用12倍重量的水室温打浆1 小时，抽滤得纯品。通过DEPT谱、COSY谱、HMBC、¹H-NMR谱、¹³C-NMR谱等进行了结构确证，解析所得数据见表1。
实施例4缬沙坦水解杂质化合物在缬沙坦有关物质检查时作为杂质对照品的应用
色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水-冰醋酸(体积比为：500:500:1)为流动相；检测波长为230nm；流速：1.0ml/min；进样量：10μl；柱温：30℃。
实验步骤：取缬沙坦细粉适量，精密称定，加流动相溶解并稀释制成每1ml中约含缬沙坦0.5mg的溶液，摇匀，滤过，取滤液作为供试品溶液；精密量取供试品溶液适量，用流动相定量稀释制成每1ml中约含1μg的溶液，作为对照溶液。另精密称取水解杂质对照品适量，用流动相定量稀释成每1ml中约含1μg的溶液，作为对照品溶液。照高效液相色谱法(中国药典2010年版二部附录ⅤD)试验，用十八烷基键合硅胶为填充剂，以乙腈-水-冰醋酸(500:500:1)为流动相；检测波长为230nm。理论板数按缬沙坦峰计算不低于4000，缬沙坦与相邻杂质峰的分离度应符合要求。量取对照溶液10μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分峰高为记录仪满量程的15％。再精密量取供试品溶液、对照溶液及对照品溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的4倍。供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，水解杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积(0.2％)，其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积(0.2％)，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的3.5倍(0.7％)。
水解杂质化合物作为有关物质检查时的对照品测定缬沙坦的有关物质含量检查结果如下：

实施例5缬沙坦水解杂质化合物在缬沙坦有关物质检查时作为杂质对照品的应用
色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水-冰醋酸(体积比为：450:550:1)为流动相；检测波长为227nm；流速：1.0ml/min；进样量：10μl；柱温：25℃。
实验步骤：同实施例4。
水解杂质化合物作为有关物质检查时的对照品测定缬沙坦的有关物质含量检查结果如下：

实施例6缬沙坦水解杂质化合物在缬沙坦有关物质检查时作为杂质对照品的应用
色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水-冰醋酸(体积比为：550:450:2)为流动相；检测波长为233nm；流速：1.0ml/min；进样量：10μl；柱温：35℃。
实验步骤：同实施例4。
水解杂质化合物作为有关物质检查时的对照品测定缬沙坦的有关物质含量检查结果如下：