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1、10申请公布号CN104195215A43申请公布日20141210CN104195215A21申请号201410459280222申请日20140909C12Q1/06200601C12R1/0120060171申请人青岛润鑫伟业科贸有限公司地址266000山东省青岛市市南区香港中路18号A栋804室72发明人王雪梅孟宪斌74专利代理机构北京纽盟知识产权代理事务所特殊普通合伙11456代理人许玉顺54发明名称一种肠球菌琼脂培养基及其应用57摘要本发明为微生物领域，特别涉及一种肠球菌琼脂培养基，所述培养基的组分包括肉浸液肉汤、40G/L酵母浸粉、12G/L牛胆汁物、088G/L柠檬酸钠、045。
2、G/L柠檬酸铁铵、2G/L磷酸二氢钾017G/L叠氮化钠、09G/L七叶苷、150G/L琼脂，PH值为6973。所述的肉浸液肉汤为每升肉浸液肉汤中含有牛肉粉30G、氯化钠50G、胰酪蛋白胨120G、磷酸氢二钾20G。本发明培养基组方简单，制备操作方便，成本低，利于推广应用；菌生长迅速，变异率低；便于观察，分析。51INTCL权利要求书1页说明书3页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书3页10申请公布号CN104195215ACN104195215A1/1页21一种肠球菌琼脂培养基，其特征在于所述培养基的组分包括肉浸液肉汤、40G/L酵母浸粉、12G/L牛胆汁物、。
3、088G/L柠檬酸钠、045G/L柠檬酸铁铵、2G/L磷酸二氢钾017G/L叠氮化钠、09G/L七叶苷、150G/L琼脂，PH值为6973。2根据权利要求1所述的种肠球菌琼脂培养基，其特征在于所述的肉浸液肉汤为每升肉浸液肉汤中含有牛肉粉30G、氯化钠50G、胰酪蛋白胨120G、磷酸氢二钾20G。3一种根据权利要求1所述的种肠球菌琼脂培养基的应用，其特征在于用于食品和水中肠球菌的计数。权利要求书CN104195215A1/3页3一种肠球菌琼脂培养基及其应用技术领域0001本发明为微生物领域，特别涉及一种肠球菌琼脂培养基及其应用。背景技术0002微生物培养MICROCULTURE是生物培养的中的一。
4、种。所培养的微生物主要有病毒、细菌、放线菌、真菌等。微生物培养需要用到培养基，根据微生物的不同种类和生活习性来配制特定的培养基。微生物培养成功的关键在于无菌操作，如果培养器具和培养基不能彻底灭菌、培养的过程中有杂菌污染是很容易失败的。0003肠球菌ENTEROCOCCUS属肠球菌属，是人类和动物肠道正常菌群的一部分，通常在引起腹腔和盆腔感染所分离的混合菌丝中发现，既往认为肠球菌是对人类无害的共栖菌，但近年研究已证实了肠球菌的致病力。在需氧革兰阳性球菌中，它是仅次于葡萄球菌的重要院内感染致病菌，肠球菌亦可引起院外感染。肠球菌不仅可引起尿路感染、皮肤软组织感染，还可引起危及生命的腹腔感染、败血症、。
5、心内膜炎和脑膜炎等。0004溶血性链球菌，需氧或兼性厌氧菌，营养要求较高，普通培养基上生长不良，需补充血清、血液、腹水，大多数菌株需核黄素、维生素B6、烟酸等生长因子。最适生长温度为37，在2042能生长，最适PH为7476。在血清肉汤中易成长链，管底呈絮状或颗粒状沉淀生长。在血平板上形成灰白色、半透明、表面光滑、边缘整齐、直径05075MM的细小菌落，不同菌株溶血不一。0005粪肠球菌，根据最新分类原则，粪链球菌又叫粪肠球菌。应用C多糖抗原，根据兰氏LANCEELD血清学分类，可将链球菌分成许多群。粪链球菌属于D群。D群链球菌分肠球菌和非肠球菌两类。前者包括粪链球菌SFAECALIS、屎链球。
6、菌SFAECIUM和坚忍链球菌SDURANS,后者有牛链球菌SBOVIS和马肠链球菌SEQUINUS。0006其营养要求低，在普通营养琼脂上也可生长。能在10或45PH96或含65NACL肉汤培养基中生长，并能耐6530分钟。它可利用精氨酸为能源，发酵山梨醇，不发酵阿拉伯糖。在简单的培养基上生长不需叶酸。DNADNA杂交结果显示，肠球菌与链球菌属同源程度低，故有学者建议另立肠球菌属，与人类有关者为粪肠球菌EFAECALIS和屎肠球菌EFAECIUM。0007培养基MEDIUM是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐包括微量元素以及维生素和水。
7、等。有的培养基还含有抗菌素和色素，用于单种微生物培养和鉴定。培养基由于配制的原料不同，使用要求不同，而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后，易被细菌污染或分解变质，因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基如组织培养基，较长时间的贮存，必须放在36的冰箱内。由于液体培养基不易长期保管，现在均改制成粉末。0008培养基根据化学分类为天然培养基、组合培养基和半组合培养基；根据物理分类为液体培养基、固定培养基和脱水培养基；根据微生物分类为选择性培养基、鉴别培养基。说明书CN104195215A2/3页4发明内容0009本发明克服现有技术中的不足，提供一种肠球菌琼脂。
8、培养基及其应用。0010本发明运用生物化学，微生物学及无机、有机、分析化学和荧光技术的原理，对不同的碳源、氮源、无机盐类、维生素、生长促进剂等诸类营养组分的组合进行筛选，对培养基的PH值、离子强度、氧化还原电势、表面张力、气体环境等物化因子进行了比较，研究出了本发明的培养基。0011本发明所采用的技术方案为0012一种肠球菌琼脂培养基，所述培养基的组分包括肉浸液肉汤、40G/L酵母浸粉、12G/L牛胆汁物、088G/L柠檬酸钠、045G/L柠檬酸铁铵、2G/L磷酸二氢钾017G/L叠氮化钠、09G/L七叶苷、150G/L琼脂，PH值为6973。0013在以上方案的基础上，所述的肉浸液肉汤为每升。
9、肉浸液肉汤中含有牛肉粉30G、氯化钠50G、胰酪蛋白胨120G、磷酸氢二钾20G。0014本发明还公开了一种肠球菌琼脂培养基的应用，用于食品和水中肠球菌的计数。0015胰酪蛋白胨和牛肉浸粉、酵母粉提供氮源、维生素和生长因子；氯化钠维持均衡的渗透压；细菌水解七叶苷与柠檬酸铁铵中铁离子反应形成黑色的6,7二羟基香豆素；柠檬酸钠、牛胆粉和叠氮化钠为选择性抑菌剂，抑制非链球菌的细菌；琼脂是培养基的凝固剂。0016称取本品563G，加热溶解于1000ML蒸馏水中，121高压灭菌15分钟，冷至451，倾入含1ML样品液平皿中约15ML培养基，混匀，凝固。352倒置培养基培养242H。0017注从保温开始至。
10、做成平板时间不要超过4H。0018本发明的有益效果00191、培养基组方简单，制备操作方便，成本低，利于推广应用；00202、菌生长迅速，变异率低；00213、便于观察，分析。具体实施方式0022实施例10023一种肠球菌琼脂培养基，所述培养基的组分包括肉浸液肉汤、40G/L酵母浸粉、12G/L牛胆汁物、088G/L柠檬酸钠、045G/L柠檬酸铁铵、2G/L磷酸二氢钾017G/L叠氮化钠、09G/L七叶苷、150G/L琼脂，PH值为6973。0024所述的肉浸液肉汤为每升肉浸液肉汤中含有牛肉粉30G、氯化钠50G、胰酪蛋白胨120G、磷酸氢二钾20G。0025称取本品563G，加热溶解于1000ML蒸馏水中，121高压灭菌15分钟，冷至451，倾入含1ML样品液平皿中约15ML培养基，混匀，凝固。352倒置培养基培养242H。0026注从保温开始至做成平板时间不要超过4H。0027在3605培养24小时0028说明书CN104195215A3/3页5菌名生长状况培养特征粪链球菌良好棕黑邑，具有棕邑晕轮金黄邑葡萄球菌被抑制大肠埃希氏菌被抑制0029上述具体实施方式中的实施例是说明性的而不是限定性的，可按照所限定范围列举出若干个实施例，因此在不脱离本发明总体构思下所做的任何变化和修改，都应属本发明所限定的保护范围之内。说明书CN104195215A。