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1、(10)申请公布号 CN 103750084 A (43)申请公布日 2014.04.30 CN 103750084 A (21)申请号 201310744331.1 (22)申请日 2013.12.30 A23L 1/015(2006.01) (71)申请人 中国农业科学院农产品加工研究所 地址 100193 北京市海淀区圆明园西路 2 号 (72)发明人 魏益民 郑海燕 魏帅 郭波莉 (74)专利代理机构 北京纪凯知识产权代理有限 公司 11245 代理人 关畅 (54) 发明名称 一种花生中降解黄曲霉毒素 B1的方法 (57) 摘要 本发明公开了一种降解黄曲霉毒素 B1的方 法。该方法，。
2、 包括如下步骤 ： 将黄曲霉毒素污染的 花生粕粉碎得到花生粕粉后， 进行挤压组织化， 完 成黄曲霉毒素 B1的降解。该方法操作简单， 降解 效果好， 适用于花生粕黄曲霉毒素的降解， 黄曲霉 毒素 B1的去除率达到 57% 以上， 具有很高的应用 价值和市场潜力。 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 5 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书5页 (10)申请公布号 CN 103750084 A CN 103750084 A 1/1 页 2 1. 一种降解黄曲霉毒素 B1的方法， 包括如下步骤 ： 将黄曲霉毒素污染的花生粕粉碎得 到。
3、花生粕粉后， 进行挤压组织化， 完成黄曲霉毒素 B1的降解。 2. 根据权利要求 1 所述的方法， 其特征在于 ： 所述粉碎步骤中， 粉碎为 50 目。 3. 根据权利要求 1-2 任一所述的方法， 其特征在于 ： 所述花生粕粉中， 水的质量百分含 量为 38-42%， 具体为 40%。 4. 根据权利要求 1-3 任一所述的方法， 其特征在于 ： 所述挤压组织化步骤中， 挤压机筒 的温度为 130-150， 具体为 146 ； 喂料速度为 16-20g/min， 具体为 18g/min ； 螺杆转速为 120-160r/min， 具体为 149r/min。 5.根据权利要求1-4任一所述的方。
4、法， 其特征在于 ： 所述方法还包括如下步骤 ： 在所述 挤压组织化步骤之后， 将挤压组织化所得产品烘干。 6.根据权利要求5所述的方法， 其特征在于 ： 所述烘干步骤中， 温度为45-60， 具体为 45 ； 时间为 6-10 小时， 具体为 8 小时。 7. 权利要求 1-6 任一所述方法得到的产品。 权 利 要 求 书 CN 103750084 A 2 1/5 页 3 一种花生中降解黄曲霉毒素 B1的方法 技术领域 0001 本发明涉及一种降解花生中黄曲霉毒素 B1的方法。 背景技术 0002 黄曲霉毒素 （aflatoxin， AF） 是由真菌寄生曲霉和黄曲霉菌等产生的次级代谢物， 其。
5、基本结构为二呋喃环和香豆素。目前已发现的 20 余种黄曲霉毒素中， 最常见的有 AFB1、 AFB2、 AFG1、 AFG2， 其中黄曲霉毒素 B1(AFB1) 毒性最强， 被国际癌症研究机构 （IARC） 划定为 IA 类致癌物。由于黄曲霉和寄生曲霉在自然界的分布很广， 而且很多食品基质本身的湿度为 菌落的繁殖和毒素的产生提供了有利条件， 农作物在田间受到黄曲霉的污染， 收割后贮藏 过程中如温度和湿度适宜， 黄曲霉孢子会大量繁殖产生更多的毒素， 在粮食和饲料的贮藏 过程中不可避免产生毒素。畜禽摄入污染的饲料引起动物体重下降或者引发疾病， 间接通 过食物链进入人体的黄曲霉毒素具有极强的致癌作用。
6、， 严重威胁人类健康。 0003 花生是我国主要的油料作物， 2012 年我国产花生约 1600 万吨， 约占世界花生产量 的 40%。花生在生长条件不良或储存不当情况下， 可能感染黄曲霉毒素， 染毒后严重威胁 人类及动物健康。挤压组织化主要是指植物蛋白的组织化。蛋白质含量较高的原料 （50% 以上） ， 在挤压机内， 由于受到剪切力和摩擦力的双重作用， 维持蛋白质三级、 四级结构的氢 键、 范德华力、 离子键和二硫键被破坏。随着蛋白质高级结构的破坏， 形成了相对成线性的 蛋白质分子链， 然后这些分子链在一定的温度和水分含量的条件下， 产生了分子间的重组， 形成了一种类似肉类组织结构的产品组织。
7、化蛋白。 花生粕是花生仁经压榨提炼油料后的 产品， 富含植物蛋白， 口感较好， 广泛用做禽畜水产饲料和深加工产品。 当前， 花生粕中AFB1 污染严重， 一是受花生原料污染严重的影响， 累积到花生粕产品中 ； 二是花生粕本身营养丰 富， 特别利于微生物的繁殖， 尤其是黄曲霉菌而导致产生AFB1。 中国是世界上最大的花生生 产、 消费和贸易出口国。花生油产量近几年维持在 250 万吨左右， 按 40% 的出油率计算， 每 年花生粕的产量在 350 万吨以上。因此， 控制花生粕中黄曲霉毒素的污染对于保障花生粕 饲料的食用安全， 对于花生粕的深加工利用， 对于整个食品安全链条具有重要意义。 发明内容。
8、 0004 本发明的目的是提供一种花生中降解黄曲霉毒素 B1的方法。 0005 本发明提供的降解花生中黄曲霉毒素 B1的方法， 包括如下步骤 ： 将黄曲霉毒素污 染的花生粕粉碎得到花生粕粉后， 进行挤压组织化， 完成黄曲霉毒素 B1的降解。 0006 上述方法的粉碎步骤中， 粉碎的目数为 50 目。 0007 所述花生粕粉中， 水分的质量百分含量为 38-42%， 具体为 40%、 40-42% 或 38-40%。 0008 所述挤压组织化步骤中， 挤压机筒的温度为 130-150， 具体为 140、 146、 130-146、 140-146 或 146-150 ； 0009 喂料速度为 1。
9、6-20g/min， 具体为 18、 16-18 或 18-20g/min ； 0010 螺杆转速为 120-160r/min， 具体为 140、 149、 140-149、 149-160 或 120-149r/min。 说 明 书 CN 103750084 A 3 2/5 页 4 0011 所述方法还包括如下步骤 ： 在所述挤压组织化步骤之后， 将挤压组织化所得产品 烘干。 0012 所述烘干步骤中， 温度为 45-60， 具体为 45 ； 0013 时间为 6-10 小时， 具体为 8 小时。 0014 另外， 按照上述方法所得的产品， 也属于本发明的保护范围。 0015 本发明提供的降。
10、解花生中黄曲霉毒素的方法， 是对污染黄曲霉毒素的花生粕采用 挤压组织化处理。 在挤压过程中， 物料在挤压机螺杆内部的高温、 高压、 高剪切力作用下， 花 生粕中的淀粉在极短的时间内糊化， 蛋白质变性， 黄曲霉毒素在受到多重因素作用下裂解。 该方法操作简单， 降解效果好， 适用于花生粕黄曲霉毒素的降解， 黄曲霉毒素的去除率达到 57% 以上， 具有很高的应用价值和市场潜力。 具体实施方式 0016 下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明， 均为常规方法。 0017 下述实施例中所用的材料、 试剂等， 如无特殊说明， 均可从商业途径得到。 0018 下 述 实 施 例 挤 压 组 织 化 步 骤。
11、 所 用 设 备 均 为 德 国 布 拉 本 德 食 品 仪 器 公 司 的 型 号 为 DSE-25 的 同 向 啮 合 双 螺 杆 挤 压 膨 化 （Twin-Screw Extruder Lab Station,Brabender,Germany）实验室工作站 ： 螺杆外径 （D）为 25mm ； 长径比为 20 ： 1 ； 挤 压机各区段长度 ： 喂料区 4D， 区 6D， 区 6D， 区 4D， 区 2D， 区 2D。方形挤出模头 ： 2mm20mm。工作站由进料系统、 进水系统、 加热区、 传感器监控系统等组成， 挤压机五个区 分别配有加热和冷却监控系统， 可单独控温， 并有工作站。
12、系统自动控制及记录数据。 0019 下述实施例中， 花生粕的水分含量采用直接加热干燥法 GB5009.3-2010 的方法， 0020 具体测定方法如下 ： 0021 取洁净铝盒放置于 105烘箱中， 铝制盒盖斜放于盒边， 烘干半小时后， 将盒盖盖 好并取出， 放于干燥器内冷却半小时后称重， 重复上述实验2-3次直至恒重。 称取2.00g(保 留后四位小数 ) 花生粕粉， 置于已为恒重的铝盒内， 加上盒盖后称取总体重量后放入烘箱 中， 将盒盖放于斜放在一旁， 105烘干 4h 后， 盖好盒盖， 放于干燥器半小时候称重， 重复上 述操作， 使得两次质量差在 2mg 范围内， 视为恒重。水分含量计。
13、算公式为 ： 0022 水分 (%)=(ml-m2)/Wx100% 0023 式中， m1带盖铝盒与干燥前样品重量， g ； 0024 m2带盖铝盒与干燥后样品重量， g ； 0025 W样品的重量， g ； 0026 黄曲霉毒素 B1含量的测定 （酶联免疫法） 方法如下 ： 选用北京华安麦科生物技术有 限公司生产的 AFB1试剂盒测定。 0027 试剂盒原理采用间接 ELISA 方法， 在酶标板微孔条上预包被黄曲霉毒素 B1抗原， 样品中黄曲霉毒素 B1和此抗原竞争抗黄曲霉毒素 B1抗体 （抗试剂） ， 同时， 抗黄曲霉毒素 B1 抗体与酶标二抗 （酶标物） 相结合， 经底物显色， 样品吸光。
14、值与其含有的黄曲霉毒素 B1成负 相关， 与标准曲线比较再乘以稀释倍数， 即可得出样品中黄曲霉毒素 B1的含量。 0028 实施例 1 0029 将黄曲霉毒素 B1含量为 (229.33.7)g/kg 的花生粕样品， 用粉碎机粉碎成 50 说 明 书 CN 103750084 A 4 3/5 页 5 目的花生粕粉后， 测定花生粕粉中的水分含量， 以及喂料速度与喂料器转速、 喂水速度和横 流泵刻度之间的关系， 根据表1和表2中所列由花生粕粉的预设喂料量与产品水分含量， 计 算需补加水分的克数， 并设定喂料器转速和恒流泵刻度。 0030 挤压机启动一小时预热以达到稳定状态后， 喂料于挤压机中， 按。
15、照表1和表2所列 条件进行挤压组织化， 也即 ： 机筒温度为 140， 花生粕粉中的水分质量百分含量为 40%， 喂 料速度为 16g/min， 螺杆转速为 160r/min， 完成该含花生粕样品黄曲霉毒素 B1的降解。 0031 在上述挤压组织化步骤之后， 还可将所得花生粕样品置于烘箱中于 45烘干 8 小 时， 粉碎， 放入自封袋中。测定该花生粕样品中黄曲霉毒素 B1的含量。可知， 黄曲霉毒素 B1 的降解率为 55.2%。 0032 实施例 2-27 0033 按照实施例 1 的步骤， 仅将机筒温度、 花生粕水分含量、 喂料速度和螺杆转速按照 表 1 和表 2 所列数据进行替换。 003。
16、4 所得黄曲霉毒素 B1的降解率亦列于表 2 中。 0035 表 1、 试验因素水平表 0036 0037 0038 表 2、 黄曲霉毒素 AFB1降解率 0039 说 明 书 CN 103750084 A 5 4/5 页 6 0040 采用Design-Expert7.0统计分析软件对表2数据进行回归拟合分析， 获得对响应 值 - 花生粕中黄曲霉毒素 AFB1降解率 （Y） 的影响因子 - 机筒温度 （X1） 、 物料水分 （X2） 、 喂 料速度 （X3） 和螺杆转速 （X4） 的二次多项式回归模型， 得到黄曲霉毒素 AFB1降解率 （Y） 的回 归方程为 ： 0041 Y=56.27+0。
17、.87X1+2.73X2-0.15X3+0.92X4+0.25X1X2-0.82X1X3+0.12X1X4+0.75X2X3+0. 60X2X4-0.28X3X4-0.99X12-5.46X22-1.54X32-1.39X42 0042 由回归模型得到黄曲霉毒素 AFB1降解率最大预测值为 57.1%。优化组合为 X1=145.74， X2=40.55， X3=17.65， X4=148.66， 即机筒温度为 145.74、 物料水分 40.55%、 喂料 速度 17.65g/min 和螺杆转速 148.66r/min。 说 明 书 CN 103750084 A 6 5/5 页 7 0043 。
18、依据回归模型得到的最佳工艺条件， 兼顾实际操作， 优化的工艺参数为 ： 机筒温度 为 146、 物料水分 40%、 喂料速度 18g/min 和螺杆转速 149r/min。 0044 实施例 28 0045 按照实施例1的步骤， 将黄曲霉毒素B1含量为(229.33.7)g/kg的花生粕样品 在工艺参数为 ： 机筒温度为 146、 物料水分 40%、 喂料速度 18g/min 和螺杆转速 149r/min 条件下挤压， 完成黄曲霉毒素 B1的降解， 降解率为 57.7%。 0046 对照例 ： 0047 将黄曲霉毒素 B1含量为 (229.33.7)g/kg 的花生样品， 用粉碎机粉碎成 50。
19、 目 的花生粉后， 测定花生粕的水分含量， 以及喂料速度与喂料器转速、 喂水速度和横流泵刻度 之间的关系， 根据花生粕粉的预设喂料量与产品水分含量计算需补加水分的克数， 并设定 喂料器转速和恒流泵刻度， 待挤压组织化机启动一小时预热以达到稳定状态后， 喂料于挤 压机中， 进行挤压组织化， 机筒温度为 180， 物料水分 24%， 喂料速度为 30g/min， 螺杆转速 为 160r/min， 该条件下产品质地硬， 造成挤压机出口堵死， 挤压组织化试验不能进行。在机 筒温度为 150， 物料水分 35%、 喂料速度为 20g/min， 螺杆转速为 160r/min， 完成该含黄曲 霉毒素 B1的花生样品的降解， 降解率为 43.2%。 说 明 书 CN 103750084 A 7 。