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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201710370336.0 (22)申请日 2017.05.23 (71)申请人 贵州绿健神农有机农业股份有限公 司 地址 558200 贵州省黔南布依族苗族自治 州独山县现代农业示范园区 (72)发明人 倪石寿 吴应军 (74)专利代理机构 北京联创佳为专利事务所 (普通合伙) 11362 代理人 张梅 (51)Int.Cl. A01H 4/00(2006.01) (54)发明名称 一种促进生长的铁皮石斛培养基及制备方 法 (57)摘要 本发明公开了一种铁皮石斛培养基及其制 。
2、备方法。 马铃薯90-110份、 蔗糖8-18份、 椰子粉 20-30份、 琼脂20-30份、 钼酸铵12-18份、 硫酸锌 1-5份、 硫酸亚铁5-10份、 香蕉25-35份。 本发明培 养基培养铁皮石斛时， 组培苗生长好， 组培苗质 量易保证， 且生长值和增殖率高,且培养基中不 含激素。 权利要求书1页 说明书4页 CN 108935092 A 2018.12.07 CN 108935092 A 1.一种促进生长的铁皮石斛培养基， 其特征在于： 按重量份计算， 由下述原料组成， 马铃薯 90-110份、 蔗糖 8-18份、 椰子粉 20-30份、 琼脂 20-30份、 钼酸铵 12-18份。
3、、 硫酸锌 1-5份、 硫酸亚铁 5-10份、 香蕉 25-35份。 2.如权利要求1所述的铁皮石斛培养基， 其特征在于： 按重量份计算， 由下述原料组成， 马铃薯 95-105份、 蔗糖 10-16份、 椰子粉 22-28份、 琼脂 22-28份、 钼酸铵 14-16份、 硫酸锌 2-4份、 硫酸亚铁 6-9份、 香蕉 26-32份。 3.如权利要求2所述的铁皮石斛培养基， 其特征在于： 按重量份计算， 由下述原料组成， 马铃薯 100份、 蔗糖 12份、 椰子粉 24份、 琼脂 26份、 钼酸铵 15份、 硫酸锌 3份、 硫酸亚铁 7份、 香蕉 30份。 4.一种如权利要求1-3中任一项所。
4、述的铁皮石斛培养基的制备方法， 其特征在于： 包括 下述步骤： （1） 取马铃薯蒸熟， 剁成土豆泥， 得A品； （2） 将蔗糖、 硫酸锌、 钼酸铵和硫酸亚铁在室温下加入2-3倍量水混匀， 得B品； （3） 将香蕉捣碎后加入A品中混匀， 得C品； （4） 将琼脂加水直至其完全溶解， 得D品； （5） 将椰子粉加2-5倍水溶解， 得E品 （6） 将B、 C、 D和E品装于组培瓶中混匀， 在高温蒸汽下灭菌20-30min， 冷却即得。 5.如权利要求4所述的用于培育铁皮石斛的培养基的制备方法， 其特征在于： 步骤 （6） 为： 将B、 C、 D和E品装于组培瓶中混匀， 之后在高温蒸汽下灭菌20-30。
5、min， 所述的蒸汽温度 120-130。 权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 108935092 A 2 一种促进生长的铁皮石斛培养基及制备方法 技术领域 0001 本发明涉及一种用于培育铁皮石斛的培养基及其制作方法， 特别是一种组培苗生 长好的铁皮石斛培养基及其制作方法。 背景技术 0002 铁皮石斛别称铁皮兰、 吊兰、 云南铁皮、 铁皮吊兰， 是兰科石斛属多年生草本植物， 铁皮石斛是石斛类药材的上品， 素有 “中华仙草-药中黄金” 之美称， 以茎入药， 含有多糖、 石 斛碱、 生物碱等有效成分， 具有滋阴清热、 生津益胃、 润喉明目等功效， 在抗肿瘤、 提高人体 免疫力、 治疗胃肠。
6、道疾病、 抗衰老、 抗氧化、 抗血小板聚集、 降低血糖、 治疗白内障等方面均 有良好疗效。 0003 铁皮石斛大多生长在炎热潮湿的热带、 亚热带的岩石缝隙中， 繁殖率很低， 自然野 生状态下繁殖率只有10-17； 果实为蒴果， 种子小而多， 种内胚发育不全或不成熟， 胚胎 少胚乳,自然结实率低于5， 在自然条件下须与兰菌共生才能萌发， 因此无法在大田或苗 床上播种， 很难生产足够的实生苗用于栽培。 铁皮石斛对生长环境要求苛刻， 成苗困难， 采 用传统的分株、 扦插等人工繁殖方法进行繁殖， 增殖速度非常低， 目前组织培养是铁皮石斛 增殖扩繁的主要方法。 关于铁皮石斛的组织培养已有相关报道， 但还。
7、存在组培苗质量难以 保证等问题， 极大地制约了铁皮石斛生产规模的扩大。 发明内容 0004 本发明的目的， 是提供一种铁皮石斛培养基及其制作方法， 用本发明培养基培养 铁皮石斛时， 组培苗生长好， 组培苗质量易保证， 且生长值和增殖率高, 且培养基中不含激 素。 0005 本发明是这样实现的。 0006 一种促进生长的铁皮石斛培养基， 按重量份计算， 由下述原料组成， 0007 0008 前述的铁皮石斛培养基， 按重量份计算， 由下述原料组成， 0009 0010 前述的铁皮石斛培养基， 按重量份计算， 由下述原料组成， 说 明 书 1/4 页 3 CN 108935092 A 3 0011 。
8、0012 前述的铁皮石斛培养基的制备方法， 包括下述步骤： 0013 (1)取马铃薯蒸熟， 剁成土豆泥， 得A品； 0014 (2)将蔗糖、 硫酸锌、 钼酸铵和硫酸亚铁在室温下加入2-3倍量水混匀， 得B品； 0015 (3)将香蕉捣碎后加入A品中混匀， 得C品； 0016 (4)将琼脂加水直至其完全溶解， 得D品； 0017 (5)将椰子粉加2-5倍水溶解， 得E品 0018 (6)将B、 C、 D和E品装于组培瓶中混匀， 在高温蒸汽下灭菌20-30min， 冷却即得。 0019 前述的铁皮石斛培养基的制备方法中， 所述的步骤(6)为： 将B、 C、 D 和E品装于组 培瓶中混匀， 之后在高。
9、温蒸汽下灭菌20-30min， 所述的蒸汽温度 120-130。 0020 申请人对本发明进行了大量的实验研究， 部分实验如下： 0021 实验例1生长和增殖考察. 0022 1材料与方法 0023 1.1材料 0024 1.1.1铁皮石斛T 4品种(原种采自于云南广南县)组培苗。 0025 1.1.2本发明培养基： 按实施例1进行制作； 0026 1.1.3对比培养基： 培养基原料中不含椰子粉、 钼酸铵、 硫酸锌和硫酸亚铁， 其余制 作方法同实施例1。 0027 2方法 0028 2.1培养试验 0029 取轻度黄花扭曲的组培苗， 去掉根兜后， 每个培养基接种8瓶， 每瓶接种12 株， 30。
10、 天后观察， 统计组培苗的生长情况。 0030 2.2培养条件 0031 各试验组在白天温度(21士2)、 夜间温度(162)、 光照1800-2000L x、 光照时 间12h/d及通风良好的组培培养室中培养。 0032 2.3统计方法 0033 生长值(cm)统计时平均株高-继代时平均株高； 0034 增殖率()(统计时苗总数一继代时苗总数)/初始苗总数100。 0035 3结果 0036 3.1对铁皮石斛组培苗生长的影响 0037 经50d培养后的生长情况见表1。 0038 表1对组培苗生长的影响 0039 培养基 生长值/cm 增殖率/ 对比培养基 1.20 186.2 说 明 书 2。
11、/4 页 4 CN 108935092 A 4 本发明培养基 1.55 226.3 0040 由表可知， 本发明培养基组生长值和增值率均高于对比培养基组。 0041 实施例2.壮苗生根及移栽成活率考察 0042 1材料与方法 0043 1.1材料 0044 1.1.1铁皮石斛T 4品种(原种采自于云南广南县)组培苗。 0045 1.1.2本发明培养基： 按实施例1进行制作； 0046 1.1.3对比培养基： 培养基原料中不含椿皮、 琥珀、 黄芩、 杜仲和肉苁蓉， 其余制作 方法同实施例1。 0047 2方法 0048 2.1以上述培养基设2个处理， 及本发明培养基组和对比培养基组， 每处理接种。
12、25 瓶， 置于培养温度为(252)、 光照度为1500lx、 光照时间15h/d条件下培养。 培养6周后， 统计组培苗的生根数、 根长、 株高等。 0049 2.2选取在壮苗生根培养基中生长状况良好、 株高4-5cm、 根长4cm、 具有5条长根的 组培苗移栽。 首先将组培苗移至室外通风处炼苗1周左右， 炼苗温度为22-25， 将组培瓶盖 逐日拧松， 移栽前1d揭盖， 使组培苗逐渐适应自然环境。 将培养基与小苗一起取出， 用水洗 净。 设2个处理， 及本发明培养基组和对比培养基组， 移栽后1周、 6周分别统计组培苗的成活 率。 0050 3结果 0051 3.1组培苗的生根数、 根长、 株高。
13、结果见表2。 0052 表26周后组培苗的生长情况 0053 培养基 株高/cm 生根率/ 根长/cm 根数/条 生长情况 对比培养基 3.2 93 2.2 2.5 + 本发明培养基 4.0 100 3.4 4.5 + 0054 注：“+” 表示组培苗生长状况较好， 交瘦弱， 新根少但根长， 叶片细长， 呈浅绿 色；“+” 表示组培苗生长状况优良， 交粗壮， 根较粗且长， 根较多， 有部分气生根长出， 叶 片厚大， 呈深绿色。 0055 由表可知， 接种6周后， 对照组处理下组培苗平均根长为2.2cm， 平均根数为2.5条， 平均株高为3.2cm。 本发明组处理下培苗平均根长为3.4m， 平均。
14、根数为 4.5条， 平均株高为 4.0cm， 丛生芽较少且生根率较高， 组培苗叶片增大， 呈长椭圆形， 叶片变厚， 呈深绿色， 部分 组培苗还长出较长的气生根。 由此可见， 两种培养基中， 组培苗在本发明培养基中生长状态 最佳， 生根率可达100， 根长、 根数、 叶片形态更适于移栽。 0056 与现有技术相比， 用本发明培养基培养铁皮石斛时， 组培苗生长好， 组培苗质量易 保证， 且生长值和增殖率高,且培养基中不含激素。 具体实施方式 0057 实施例1 0058 配方： 马铃薯100kg、 蔗糖12kg、 椰子粉24kg、 琼脂26kg、 钼酸铵15kg、 硫酸锌3kg、 硫 说 明 书 。
15、3/4 页 5 CN 108935092 A 5 酸亚铁7kg、 香蕉30kg。 0059 制作工艺： 0060 (1)取马铃薯蒸熟， 剁成土豆泥， 得A品； 0061 (2)将蔗糖、 硫酸锌、 钼酸铵和硫酸亚铁在室温下加入2-3倍量水混匀， 得B品； 0062 (3)将香蕉捣碎后加入A品中混匀， 得C品； 0063 (4)将琼脂加水直至其完全溶解， 得D品； 0064 (5)将椰子粉加2-5倍水溶解， 得E品 0065 (6)将B、 C、 D和E品装于组培瓶中混匀， 之后在高温蒸汽下灭菌20-30min， 所述的蒸 汽温度120-130。 0066 实施例2 0067 配方： 马铃薯90kg。
16、、 蔗糖8kg、 椰子粉20kg、 琼脂20kg、 钼酸铵12kg、 硫酸锌1kg、 硫酸 亚铁5kg、 香蕉25kg。 0068 制作工艺： 0069 (1)取马铃薯蒸熟， 剁成土豆泥， 得A品； 0070 (2)将蔗糖、 硫酸锌、 钼酸铵和硫酸亚铁在室温下加入2-3倍量水混匀， 得B品； 0071 (3)将香蕉捣碎后加入A品中混匀， 得C品； 0072 (4)将琼脂加水直至其完全溶解， 得D品； 0073 (5)将椰子粉加2-5倍水溶解， 得E品 0074 (6)将B、 C、 D和E品装于组培瓶中混匀， 在高温蒸汽下灭菌20-30min， 冷却即得。 0075 实施例3 0076 配方： 。
17、马铃薯110kg、 蔗糖18kg、 椰子粉30kg、 琼脂30kg、 钼酸铵18kg、 硫酸锌5kg、 硫 酸亚铁10kg、 香蕉35kg。 0077 制作工艺： 0078 (1)取马铃薯蒸熟， 剁成土豆泥， 得A品； 0079 (2)将蔗糖、 硫酸锌、 钼酸铵和硫酸亚铁在室温下加入2-3倍量水混匀， 得B品； 0080 (3)将香蕉捣碎后加入A品中混匀， 得C品； 0081 (4)将琼脂加水直至其完全溶解， 得D品； 0082 (5)将椰子粉加2-5倍水溶解， 得E品 0083 (6)将B、 C、 D和E品装于组培瓶中混匀， 在高温蒸汽下灭菌20-30min， 冷却即得。 说 明 书 4/4 页 6 CN 108935092 A 6 。