2-( 吡啶 -2- 基氨基 )- 吡啶并 [2,3-d] 嘧啶 -7- 酮 发明领域 本发明涉及取代的 2- 氨基吡啶， 它们是有力的细胞周期蛋白依赖性激酶 4 抑制 剂。本发明化合物可用于治疗炎症和细胞增殖疾病， 例如癌症和再狭窄。
背景
细胞周期蛋白依赖性激酶和有关的丝氨酸 / 苏氨酸蛋白激酶是重要的细胞酶， 它 们在调节细胞分化和增殖中发挥重要功能。 细胞周期蛋白依赖性激酶催化单元受到调节性 亚单元的活化， 后者被称为细胞周期蛋白。至少有 16 种哺乳动物细胞周期蛋白已被鉴别 (Johns on D.G.andWalker C.L.， Annu.Rev.Pharmacol.Toxicol.1999 ； 39 ： 295-312)。细 胞周期蛋白 B/cdk1、 细胞周期蛋白 A/cdk2、 细胞周期蛋白 E/cdk2、 细胞周期蛋白 D/cdk4、 细 胞周期蛋白 D/Cdk6 和可能的其它杂二聚物 ( 包括 Cdk3 和 Cdk7) 是细胞周期进展的重要调 节剂。细胞周期蛋白 /Cdk 杂二聚物的另外功能包括转录、 DNA 修复、 分化和编程性细胞死 亡的调节 (Morgan D.O.， Annu.Rev.Cell.Dev.Biol.1997 ； 13261-13291)。
已经显示细胞周期蛋白依赖性激酶的活性增加或者活化暂时异常会导致人类 肿瘤的形成 (Sherr C.J.， Science 1996 ； 274 ： 1672-1677)。事实上， 人类肿瘤的形成普 遍与 Cdk 蛋白本身或其调节剂的改变有关 (Cordon-Cardo C.， Am.J.Pathol.1995 ； 147 ： 545-560 ； Karp J.E.and Broder S.， Nat.Med.1995 ； 1： 309-320 ； Hall M.et al.， Adv. Cancer Res.1996 ； 68 ： 67-108)。 天然存在的 Cdk 的蛋白质抑制剂例如 p16 和 p27 体外导致 肺癌细胞系的生长抑制 (Kamb A.， Curr.Top.Microbiol.Immunol.1998 ； 227 ： 139-148)。
小分子 Cdk 抑制剂也可以用于治疗心血管障碍， 例如再狭窄和动脉 粥样硬化和 其它由异常细胞增殖引起的血管障碍。继发于气囊血管成形术的血管平滑肌增殖和内膜 增生被细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂 p21 蛋白的过度表达所抑制 (Chang M.W.et al.， J.Clin.Invest.， 1995 ； 96 ： 2260 ； Yang Z-Y.et al.， Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)1996 ； 93 ： 9905)。而且， 嘌呤 cdk2 抑制剂 CVT-313(Ki ＝ 95nM) 导致大鼠新生内膜形成被抑制 80％以 上 (Brooks E.E.et al.， J.Biol.Chem.1997 ： 29207-29211)。
Cdk 抑制剂能够用于治疗由多种感染剂导致的疾病， 包括真菌、 原生动物寄生虫 ( 例如恶性疟原虫 ) 和 DNA 与 RNA 病毒。例如， 细胞周期蛋白依赖性激酶是继发于单纯性疱 疹病毒 (HSV) 感染的病毒复制所必需的 (Schang L.M.et al.， J.Virol.1998 ； 72 ： 5626)， 已 知 Cdk 同系物在酵母中扮演关键角色。
选择性 Cdk 抑制剂能够用于改善各种自身免疫障碍的后果。慢性炎性疾病类风湿 性关节炎是以滑膜组织增生为特征的 ； 滑膜组织增殖的抑制应当使炎症最小化和防止关节 破坏。Cdk 抑制剂 p16 蛋白在滑膜成纤维细胞的表达引起生长抑制 (Taniguchi K.et al.， Nat.Med.1999 ； 5： 760-767)。类似地， 在关节炎的大鼠模型中， 关节肿胀基本上被 p16 表达 性腺病毒处理所抑制。 Cdk 抑制剂可以有效对抗其它细胞增殖障碍， 包括牛皮癣 ( 以角质形 成细胞过度增殖为特征 )、 肾小球性肾炎和狼疮。
通过它们抑制正常未转化细胞的细胞周期进展的能力， 某些 Cdk 抑制剂可以用作 化学保护剂 (Chen et al.J.Natl.Cancer Institute， 2000 ； 92 ： 1999-2008)。在使用细胞
毒性剂之前用 Cdk 抑制剂预处理癌症患者， 能够减少普遍与化疗法有关的副作用。正常增 殖中的组织被选择性 Cdk 抑制剂的作用保护起来， 免受细胞毒性影响。
关于细胞周期蛋白依赖性激酶的小分子抑制剂的综述文章已经注意到鉴别抑 制特异性 Cdk 蛋白而不抑制其它酶的化合物的难度。因而， 尽管具有治疗多种疾病的潜 力， 不过目前还没有 Cdk 抑制剂获得批准用于商业目的 (Fischer， P.M.， Curr.Opin.Drug Discovery 2001， 4， 623-634 ； Fry， D.W.& Garrett， M.D.Curr.Opin.Oncologic，Endocrine & Metabolic Invest.2000， 2， 40-59 ； Webster， K.R.&Kimball， D.Emerging Drugs 2000， 5， 45-59 ； Sielecki， T.M.et al.J.Med.Chem.2000， 43， 1-18)。
发明概述
本发明提供式 I 化合物 ：
其中 ：
虚线代表任选的键 ；
X1、 X2 和 X3 各自独立地选自氢、 卤素、 C1-C6 烷基、 C1-C6 卤代烷基、 C1-C8 烷氧基、 C1-C8 5 5 6 5 5 5 5 6 5 6 5 6 5 6 烷氧基烷基、 CN、 NO2、 OR 、 NR R 、 CO2R 、 COR 、 S(O)nR 、 CONR R 、 NR COR 、 NR SO2R 、 SO2NR R 和 5 6 1 2 3 P(O)(OR )(OR ) ； 其条件是 X 、 X 和 X 至少有一个必须是氢 ；
n ＝ 0-2 ；
R1 各自独立地是氢、 卤素、 C1-C6 烷基、 C1-C6 卤代烷基、 C1-C6 羟基烷基或 C3-C7 环烷 基；
R2 和 R4 独立地选自氢、 卤素、 C1-C8 烷基、 C3-C7 环烷基、 C1-C8 烷氧基、 C1-C8 烷氧基 5 烷基、 C1-C8 卤代烷基、 C1-C8 羟基烷基、 C2-C8 链烯基、 C2-C8 炔基、 腈、 硝基、 OR 、 SR5、 NR5R6、 N(O)R5R6、 P(O)(OR5)(OR6)、 (CR5R6)mNR7R8、 COR5、 (CR4R5)mC(O)R7、 CO2R5、 CONR5R6、 C(O)NR5SO2R6、 NR5SO2R6、 C(O)NR5OR6、 S(O)nR5、 SO2NR5R6、 P(O)(OR5)(OR6)、 (CR5R6)mP(O)(OR7)(OR8)、 (CR5R6) (CR5R6)m- 杂 芳 基、 -T(CH2)mQR5、 -C(O)T(CH2)mQR5、 NR5C(O)T(CH2)mQR5 和 -CR5 ＝ m- 芳 基、 CR6C(O)R7 ； 或者 1
R 和 R2 可以构成一个碳环基团， 含有 3-7 个环成员， 优选 5-6 个 环成员， 其中至多 四个可以任选地被独立选自氧、 硫和氮的杂原子代替， 并且其中该碳环基团是未取代的或 者被一个、 两个或三个基团取代， 取代基独立地选自卤素、 羟基、 羟基烷基、 腈、 低级 C1-C8 烷 基、 低级 C1-C8 烷氧基、 烷氧基羰基、 烷基羰基、 烷基羰基氨基、 氨基烷基、 三氟甲基、 N- 羟基 5 6 5 乙酰胺、 三氟甲基烷基、 氨基及单或二烷基氨基、 (CH2)mC(O)NR R 和 O(CH2)mC(O)OR ， 条件是 碳环中有至少一个碳原子， 并且如果有两个或多个环氧原子， 那么该环氧原子不是彼此相 邻的 ；
T 是 O、 S、 NR7、 N(O)R7、 NR7R8W 或 CR7R8 ；
Q 是 O、 S、 NR7、 N(O)R7、 NR7R8W、 CO2、 O(CH2)m- 杂芳基、 O(CH2)mS(O)nR8、 (CH2)- 杂芳 基、 或一个碳环基团， 含有 3-7 个环成员， 其中至多四个环成员任选地是杂原子， 独立地选 自氧、 硫和氮， 条件是碳环中有至少一个碳原子， 并且如果有两个或多个环氧原子， 那么该 环氧原子不是彼此相邻的， 其中该碳环基团是未取代的或者被一个、 两个或三个基团取代， 取代基独立地选自卤素、 羟基、 羟基烷基、 低级烷基、 低级烷氧基、 烷氧基羰基、 烷基羰基、 烷 基羰基氨基、 氨基烷基、 三氟甲基、 N- 羟基乙酰胺、 三氟甲基烷基、 氨基和单或二烷基氨基 ；
W 是阴离子， 选自由氯化物、 溴化物、 三氟乙酸盐和三乙基铵组成的组 ；
m ＝ 0-6 ；
R4 和 X1、 X2 与 X3 之一可以构成一个芳族环， 含有至多三个独立选自氧、 硫和氮的 杂原子， 并且任选地被至多 4 个基团取代， 取代基独立地选自卤素、 羟基、 羟基烷基、 低级烷 基、 低级烷氧基、 烷氧基羰基、 烷基羰基、 烷基羰基氨基、 氨基烷基、 氨基烷基羰基、 三氟甲 基、 三氟甲基烷基、 三氟甲基烷基氨基烷基、 氨基、 单或二烷基氨基、 N- 羟基乙酰氨基、 芳基、 7 8 7 8 7 8 7 7 8 2 杂芳基、 羧基烷基、 腈、 NR SO2R 、 C(O)NR R 、 NR C(O)R 、 C(O)OR 、 C(O)NR SO2R 、 (CH )mS(O)nR7、 (CH2)m- 杂芳基、 O(CH2)m- 杂芳基、 (CH2)mC(O)NR7R8、 O(CH2)mC(O)OR7、 (CH2)mSO2NR7R8 和 C(O) R7 ； R3 是氢、 芳基、 C1-C8 烷基、 C1-C8 烷氧基、 C3-C7 环烷基或 C3-C7 杂环基 ； 5 6
R 和 R 独立地是氢、 C1-C8 烷基、 C2-C8 链烯基、 C2-C8 炔基、 芳基烷基、 环烷基、 杂环 烷基、 芳基、 杂芳基或杂芳基烷基 ； 或者 5 6
R 和 R 当附着于同一氮原子时， 可以与它们所附着的氮一起构成一个杂环的环， 含有 3-8 个环成员， 其中至多四个成员可以任选地被独立选自氧、 硫、 S(O)、 S(O)2 和氮的杂 原子代替， 条件是杂环中至少有一个碳原子， 并且如果有两个或多个环氧原子， 该环氧原子 不是彼此相邻的， 其中该杂环基团是未取代的或者被一个、 两个或三个基团取代， 取代基独 立地选自卤素、 羟基、 羟基烷基、 低级烷基、 低级烷氧基、 烷氧基羰基、 烷基羰基、 烷基羰基氨 基、 氨基烷基、 氨基烷基羰基、 三氟甲基、 三氟甲基烷基、 三氟甲基烷基氨基烷基、 氨基、 腈、 7 8 7 8 7 单或二烷基氨基、 N- 羟基乙酰氨基、 芳基、 杂芳基、 羧基烷基、 NR SO2R 、 C(O)NR R 、 NR C(O) 8 7 7 8 7 R、 C(O)OR 、 C(O)NR SO2R 、 (CH2)mS(O)nR 、 (CH2)m- 杂芳基、 O(CH2)m- 杂芳基、 (CH2)mC(O)NR7R8、 O(CH2)mC(O)OR7 和 (CH2)SO2NR7R8 ；
R7 和 R8 独立地是氢、 C1-C8 烷基、 C2-C8 链烯基、 C2-C8 炔基、 芳基烷基、 环烷基、 杂环 烷基、 芳基、 杂芳基或杂芳基烷基 ； 或者 7 8
R 和 R 当附着于同一氮原子时， 可以与它们所附着的氮一起构成一个杂环的环， 含有 3-8 个环成员， 其中至多四个成员任选地是独立选自氧、 硫、 S(O)、 S(O)2 和氮的杂原子， 条件是杂环中至少有一个碳原子， 并且如果有两个或多个环氧原子， 该环氧原子不是彼此 相邻的， 其中该杂环基团是未取代的或者被一个、 两个或三个基团取代， 取代基独立地选自 卤素、 羟基、 羟基烷基、 低级烷基、 低级烷氧基、 烷氧基羰基、 烷基羰基、 烷基羰基氨基、 氨基 烷基、 氨基烷基羰基、 三氟甲基、 三氟甲基烷基、 三氟甲基烷基氨基烷基、 氨基、 腈、 单或二烷 基氨基、 N- 羟基乙酰氨基、 芳基、 杂芳基、 羧基烷基 ；
及其药学上可接受的盐、 酯、 酰胺和前体药物。
本发明鉴别了 2-(2′ - 吡啶基 ) 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶酮化合物可用于治疗失控的
细胞增殖疾病， 包括但不限于诸如癌症、 再狭窄和类风湿性关节炎等增殖性疾病。另外， 这 些化合物可用于治疗炎症和炎性疾病。另外， 这些化合物具有作为抗感染剂的实用性。而 且， 这些化合物通过 它们抑制正常未转化细胞的细胞周期进展的能力， 具有作为化学保护 剂的实用性。很多本发明化合物在丝氨酸 / 苏氨酸激酶类细胞周期蛋白依赖性激酶 4 和细 胞周期蛋白依赖性激酶 6 的选择性上显示出出人意料的改善。化合物是容易合成的， 能够 借助多种方法对患者给药。
式 I 化合物可能含有手性中心， 因此可能存在不同的对映体和非对映体形式。本 发明涉及式 I 化合物的所有光学异构体和所有立体异构体， 包括这类化合物的外消旋混合 物和个别的对映体及非对映体， 及其混合物， 以及分别含有或者采用它们的如上所定义的 所有药物组合物和治疗方法。
由于本发明的式 I 化合物可能具有至少两个不对称中心， 它们能够存在各种立体 异构体形式或构型。 这里， 化合物能够存在单独的 (+) 和 (-) 光学活性形式及其混合物。 本 发明在其范围内包括所有这类形式。个别的异构体可以借助已知方法获得， 例如在最终产 物或其中间体的制备中进行光学拆分、 光学选择反应或色谱分离。
本发明化合物能够以未溶剂化形式以及溶剂化形式存在， 包括水合形式。一般而 言， 溶剂化形式包括水合形式等价于未溶剂化形式， 也打算涵盖在本发明的范围内。 本发明还包括同位素标记的化合物， 它们等同于式 I 所述的那些， 但一个或多个 原子被原子质量或质量数不同于自然界常见的原子质量或质量数的原子所代替。 可以引入 本发明化合物中的同位素的实例包括氢、 碳、 氮、 氧、 磷、 硫、 氟和氯的同位素， 分别例如 2H、 3 13 11 15 18 17 31 32 35 18 H、 C、 C、 14C、 N、 O、 O、 P、 P、 S、 F 和 36Cl。含有上述同位素和 / 或其它原子的其它 同位素的本发明化合物、 其前体药物和所述化合物或所述前体药物的药学上可接受的盐都 属于本发明的范围。某些同位素标记的本发明化合物、 例如引入放射性同位素 ( 例如 3H 和 14 C) 的那些可用于药物和 / 或底物组织分布测定。氚、 即 3H 和碳 -14、 即 14C 同位素是特别 优选的， 因为它们容易制备和检测。进而， 被更重的同位素取代， 例如氘、 即 2H， 由于代谢稳 定性更高可以提供治疗上的益处， 例如延长体内半衰期或减少剂量需求， 因而在有些情况 下可能是优选的。同位素标记的本 发明式 I 化合物及其前体药物一般可以这样制备， 在进 行下述流程和 / 或实施例与制备例所公开的工艺时， 用容易得到的同位素标记的试剂代替 非同位素标记的试剂。
式 I 化合物能够进一步生成药学上可接受的制剂， 包含式 I 化合物的盐、 溶剂和 N- 氧化物， 盐包括但不限于酸加成盐和 / 或碱盐。
本发明还提供药物制剂， 包含治疗有效量的式 I 化合物或其治疗学上可接受的盐 和其药学上可接受的载体、 稀释剂或赋形剂。所有这些形式都属于本发明。
“烷基” 在本发明中表示具有 1 至 10 个碳原子的直链或支链烃基团， 例如包括甲 基、 乙基、 正丙基、 异丙基、 正丁基、 仲丁基、 异丁基、 叔丁基、 正戊基、 异戊基、 正己基等。
“链烯基” 表示具有 2 至 8 个碳原子和至少一条双键的直链与支链烃基团， 包括但 不限于乙烯基、 3- 丁烯 -1- 基、 2- 乙烯基丁基、 3- 己烯 -1- 基等。术语 “链烯基” 包括环烯 基和杂链烯基， 其中 1 至 3 个选自 O、 S、 N 或取代的氮原子可以代替碳原子。
“炔基” 表示具有 2 至 8 个碳原子和至少一条叁键的直链与支链烃基团， 包括但不 限于乙炔基、 3- 丁炔 -1- 基、 丙炔基、 2- 丁炔 -1- 基、 3- 戊炔 -1- 基等。
“环烷基” 表示具有 3 至 8 个碳原子的单环或多环烃基， 例如环丙基、 环庚基、 环辛 基、 环癸基、 环丁基、 金刚烷基、 降蒎烷基、 十氢萘基、 降冰片基 (norbornyl)、 环己基和环戊 基。这类基团可以被诸如羟基、 酮基、 氨基、 烷基和二烷基氨基等基团取代。还包括这样的 环， 其中 1 至 3 个杂原子代替碳。 这类基团被称为 “杂环基” ， 它表示还携带至少一个选自 O、 S、 N 或取代的氮原子的环烷基。这类基团的实例包括但不限于环氧乙烷基、 吡咯烷基、 哌啶 基、 四氢吡喃和吗啉。
“烷氧基” 表示具有 1-10 个碳原子并且通过氧连接的直链或支链烷基。这类基团 的实例包括但不限于甲氧基、 乙氧基、 丙氧基、 异丙氧基、 正丁氧基、 仲丁氧基、 叔丁氧基、 戊 氧基、 2- 戊基氧基、 异戊氧基、 新戊氧基、 己氧基、 2- 己氧基、 3- 己氧基和 3- 甲基戊氧基。 另 外， 烷氧 基表示聚醚， 例如 -O-(CH2)2-O-CH3 等。
“酰基” 表示通过羰基键合的具有 1-10 个碳原子的烷基或芳基 (Ar)， 即 R-C(O)-。 例如， 酰基包括但不限于 C1-C6 烷酰基， 包括取代的烷酰基， 其中烷基部分可以被 NR4R5 或者 羧基或杂环基取代。典型的酰基包括乙酰基、 苯甲酰基等。
上述烷基、 链烯基、 烷氧基和炔基任选地优选地被 1 至 3 个基团取代， 取代基选自 4 5 NR R 、 苯基、 取代的苯基、 硫代 C1-C6 烷基、 C1-C6 烷氧基、 羟基、 羧基、 C1-C6 烷氧基羰基、 卤代、 腈、 环烷基、 和具有 1 或 2 个选自氮、 取代的氮、 氧和硫的杂原子的 5- 或 6- 元碳环环或杂环 环。 “取代的氮” 表示携带 C1-C6 烷基或 (CH2)pPh 的氮， 其中 p 是 1、 2 或 3。全卤代和多卤代 也包括在内。
取代的烷基的实例包括但不限于 2- 氨基乙基、 2- 羟基乙基、 五氯乙基、 三氟甲基、 2- 二乙氨基乙基、 2- 二甲氨基丙基、 乙氧羰基甲基、 3- 苯基丁基、 甲 (methanyl) 硫基甲基、 甲氧基甲基、 3- 羟基戊基、 2- 羧基丁基、 4- 氯丁基、 3- 环丙基丙基、 五氟乙基、 3- 吗啉代丙 基、 哌嗪基甲基和 2-(4- 甲基哌嗪基 ) 乙基。
取代的炔基的实例包括但不限于 2- 甲氧基乙炔基、 2- 乙硫基乙炔基、 4-(1- 哌嗪 基 )-3-( 丁炔基 )、 3- 苯基 -5- 己炔基、 3- 二乙氨基 -3- 丁炔基、 4- 氯 -3- 丁炔基、 4- 环丁 基 -4- 己炔基等。
典型的取代的烷氧基包括氨基甲氧基、 三氟甲氧基、 2- 二乙氨基乙氧基、 2- 乙氧 羰基乙氧基、 3- 羟基丙氧基、 6- 己酯基 (carboxhexyloxy) 等。
此外， 取代的烷基、 链烯基和炔基的实例包括但不限于二甲氨基甲基、 羧甲基、 4- 二甲氨基 -3- 丁烯 -1- 基、 5- 乙基甲基氨基 -3- 戊炔 -1- 基、 4- 吗啉代丁基、 4- 四氢吡 啶基丁基、 3- 咪唑烷 -1- 基丙基、 4- 四氢噻唑 -3- 基丁基、 苯甲基、 3- 氯苯甲基等。
术语 “阴离子” 表示带负电的抗衡离子， 例如氯化物、 溴化物、 三氟乙酸盐和三乙基 铵。
术语 “卤素” 在本发明中表示氟、 溴、 氯和碘。
“杂芳基” 表示一个或多个 5-、 6- 或 7- 元环的芳族环系， 含有至少一个、 至多四个 选自氮、 氧或硫的杂原子。这类杂芳基例如包括噻吩基、 呋喃基、 噻唑基、 三唑基、 咪唑基、 (异) 唑基、 二唑基、 四唑基、 吡啶基、 噻二唑基、 二唑基、 噻二唑基、 噻三唑 唑 基、 嘧啶基、 ( 异 ) 喹啉基、 1， 5- 二氮杂萘基、 苯邻二甲酰亚胺基、 苯并咪唑基和苯并基。优选的杂芳基是吡啶。
“芳基” 表示芳族碳环基团， 具有单一环 ( 例如苯基 )、 多个环 ( 例如联苯 ) 或多个稠合环， 其中至少一个是芳族的 ( 例如 1， 2， 3， 4- 四氢萘基、 萘基、 蒽基或菲基 )， 它们例如可 以被卤素、 低级烷基、 低级烷氧基、 低级烷硫基、 三氟甲基、 低级酰氧基、 芳基、 杂芳基和羟基 单 -、 二 - 或三 - 取代。优选的芳基是苯基。
术语 “癌症” 包括但不限于下列癌症 ： 乳腺、 卵巢、 子宫颈、 前列腺、 睾丸、 食道、 胃、 皮肤、 肺、 骨、 结肠、 胰腺、 甲状腺、 胆道、 颊腔与咽 ( 口 )、 唇、 舌、 口腔、 咽、 小肠、 结肠 - 直肠、 大肠、 直肠、 脑与中枢神经系统的癌症、 成胶质细胞瘤、 神经母细胞瘤、 角化棘皮瘤、 表皮样 癌、 大细胞癌、 腺癌、 腺瘤、 滤泡癌、 未分化的癌、 乳头状癌、 精原细胞瘤、 黑瘤、 肉瘤、 膀胱癌、 肝癌、 肾癌、 骨髓障碍、 淋巴障碍、 何杰金氏病、 毛发细胞癌和白血病。
本文所用的术语 “治疗” 涉及逆转、 减轻、 抑制该术语适用的障碍或病症的进展或 者预防之， 或者这类障碍或病症的一种或多种症状。本文所用的名词 “治疗” 涉及动词治疗 的动作， 后者是如刚才所定义的。
本文所用的术语 “药学上可接受的盐、 酯、 酰胺和前体药物” 表示本发明化合物的 那些羧酸盐、 氨基酸加成盐、 酯、 酰胺和前体药物， 它们在可靠的医学判断范围内适用于与 患者组织接触， 不会产生不恰当的毒性、 刺激作用、 变态反应等， 与合理的益处 / 风险比相 称， 就它们的预期应用而言是有效的， 以及 -- 可能的话 -- 本发明化合物的两性离子形式。 术语 “盐” 表示本发明化合物的相对无毒的无机与有机酸加成盐。这些盐可以在 化合物的最终分离和纯化期间被就地制备， 或者单独使经 过纯化的化合物游离碱形式与 适合的有机或无机酸反应， 再分离所生成的盐。只要本发明的式 I 化合物是碱性化合物， 它 们都能够与各种无机和有机酸生成多种不同的盐。 尽管这类盐就对动物给药而言必须是药 学上可接受的， 不过在实践中经常需要首先从反应混合物中分离碱化合物的药学上不可接 受的盐， 然后借助碱性试剂的处理简单地转化为游离碱化合物， 之后将游离碱转化为药学 上可接受的酸加成盐。碱性化合物的酸加成盐是这样制备的， 按照常规方式使游离碱形式 与足量所需的酸接触， 生成盐。按照常规方式使盐形式与碱接触， 再分离游离碱， 可以使游 离碱再生。游离碱形式在某些物理性质上多少不同于它们各自的盐形式， 例如在极性溶剂 中的溶解度， 但是出于本发明的目的， 盐还是等价于它们各自的游离碱。
药学上可接受的碱加成盐是与金属或胺生成的， 例如碱金属与碱土金属氢氧化物 或有机胺。用作阳离子的金属的实例有钠、 钾、 镁、 钙等。适合的胺的实例有 N， N’ - 二苄基 乙二胺、 氯普鲁卡因、 胆碱、 二乙醇胺、 乙二胺、 N- 甲基葡糖胺和普鲁卡因 ； 例如参见 Berge 等， 出处同上。
酸性化合物的碱加成盐可以这样制备， 按照常规方式使游离酸形式与足量所需的 碱接触， 生成盐。按照常规方式使盐形式与酸接触， 再分离游离酸， 可以使游离酸再生。游 离酸形式在某些物理性质上多少不同于它们各自的盐形式， 例如在极性溶剂中的溶解度， 但是出于本发明的目的， 盐还是等价于它们各自的游离酸。
盐可以是从无机酸制备的硫酸盐、 焦硫酸盐、 硫酸氢盐、 亚硫酸盐、 亚硫酸氢盐、 硝 酸盐、 磷酸盐、 磷酸一氢盐、 硫酸二氢盐、 偏磷酸盐、 焦磷酸盐、 氯化物、 溴化物、 碘化物， 酸例 如盐酸、 硝酸、 磷酸、 硫酸、 氢溴酸、 氢碘酸、 磷酸等。代表性盐包括氢溴酸盐、 盐酸盐、 硫酸 盐、 硫酸氢盐、 硝酸盐、 乙酸盐、 草酸盐、 戊酸盐、 油酸盐、 棕榈酸盐、 硬脂酸盐、 月桂酸盐、 硼 酸盐、 苯甲酸盐、 乳酸盐、 磷酸盐、 甲苯磺酸盐、 柠檬酸盐、 马来酸盐、 富马酸盐、 琥珀酸盐、 酒 石酸盐、 萘甲酸盐、 甲磺酸盐、 葡庚糖酸盐、 乳糖酸盐、 月桂基磺酸盐和羟乙磺酸盐等。盐也
可以是从有机酸制备的， 例如脂族一元与二元羧酸、 苯基取代的链烷酸、 羟基链烷酸、 链烷 二酸、 芳族酸、 脂族与芳族磺酸等。代表性盐包括乙酸盐、 丙酸盐、 辛酸盐、 异丁酸盐、 草酸 盐、 丙二酸盐、 琥珀酸盐、 辛二酸盐、 癸二酸盐、 富马酸盐、 马来酸盐、 扁桃酸盐、 苯甲酸盐、 氯 苯甲酸盐、 甲基苯甲酸盐、 二硝基苯甲酸盐、 萘甲酸盐、 苯磺酸盐、 甲苯磺酸盐、 苯乙酸盐、 柠 檬酸盐、 乳酸盐、 马来酸盐、 酒石酸盐、 甲磺酸盐等。 药学上可接受的盐可以包括基于碱金属 与碱土金属的阳离子， 例如钠、 锂、 钾、 钙、 镁等， 以及无毒的铵、 季铵和胺阳离子， 包括但不 限于铵、 四甲基铵、 四乙基铵、 甲胺、 二甲胺、 三甲胺、 三乙胺、 乙胺等。 还涵盖氨基酸的盐， 例 如精氨酸盐、 葡糖酸盐、 半乳糖醛酸盐等 ( 例如参见 Berge S.M.et al.， ″ Pharmaceutical Salts，″ J.Pharm..Sci.， 1977 ； 66 ： 1-19， 引入此作为参考 )。
本发明化合物的药学上可接受的无毒性酯的实例包括 C1-C6 烷基酯， 其中烷基是 直链或支链的。可接受的酯还包括 C5-C7 环烷基酯以及芳基烷基酯， 例如但不限于苄基 酯。C1-C4 烷基酯是优选的。本发明化合物的酯可以按照常规方法制备， 例如″ March′ s Advanced Organic Chemistry， 5 Edition″ .M.B.Smith & J.March， John Wiley & Sons， 2001。
本发明化合物的药学上可接受的无毒性酰胺的实例包括从氨、 伯 C1-C6 烷基胺和 仲 C1-C6 二烷基胺衍生的酰胺， 其中烷基是直链或支链的。在仲胺的情况下， 胺也可以是 含有一个氮原子的 5 或 6 元杂环的形式。从氨、 C1-C3 烷基伯胺和 C1-C2 二烷基仲胺衍生的 酰胺是优选的。本发明化合物的酰胺可以按照常规方法制备， 例如″ March′ s Advanced OrganicChemistry， 5 Edition″， M.B.Smith & J.March， John Wiley & Sons， 2001。
术语 “前体药物” 表示体内迅速转化得到上式母体化合物的化合物， 例如借助血 液中的水解作用。详尽的讨论参见 T.Higuchi and V.Stella，″ Pro-drugs as Novel Delivery Systems， ″ Vol.14 of the A.C.S.Symposium Series 和 Bioreversible Carriers in Drug Design， ed.Edward B.Roche， American Pharmaceutical Association andPergamon Press， 1987， 二者均引入此作为参考。
优选的本发明化合物是具有式 II 的那些 ：
其中 R1、 R2、 R3、 R4、 X1、 X2 和 X3 是如式 I 所定义的。 在一种优选的本发明实施方式中， X1、 X2 和 X3 之一是氢、 卤素或烷基。 在进一步优选的本发明实施方式中， X1、 X2 和 X3 之一是 OR5、 NR5R6 或 COR5。 在最优选的本发明实施方式中， X1 ＝ X2 ＝ X3 ＝ H。 在另一种优选的本发明实施方式中， R1 是氢、 卤素或烷基。 1 在更优选的本发明实施方式中， R 是烷基。 在优选的本发明实施方式中， R2 和 R4 是氢、 卤素、 C1-C8 烷基、 C1-C8 烷氧基、 腈、 OR5、NR5R6、 COR5、 (CR4R5)mC(O)R7、 CO2R5、 CONR5R6、 (CR5R6)m- 芳基或 (CR5R6)m- 杂芳基。
在更优选的本发明实施方式中， R2 是氢、 卤素、 C1-C8 烷基、 OR5、 NR5R6、 COR5、 (CR5R6) 5 6 m- 芳基或 (CR R )m- 杂芳基。
在进一步优选的本发明实施方式中， R4 是氢、 OR5 或 NR5R6。
在另一种优选的本发明实施方式中， R3 是 C1-C8 烷基。
在另外一种优选的本发明实施方式中， R5 和 R6 是氢、 C1-C8 烷基、 C2-C8 链烯基、 C2-C8 炔基、 芳基烷基、 环烷基、 杂环烷基、 芳基、 杂芳基或杂芳基烷基。
在进一步优选的本发明实施方式中， R5 和 R6 与它们所附着的氮一起构成一个含有 3-8 个成员的碳环， 至多四个成员是杂原子。
在更优选的本发明实施方式中， R5 和 R6 与它们所附着的氮一起构成 一个含有 5 或 6 个成员的碳环， 至多两个成员是杂原子。
在最优选的本发明实施方式中， R5 和 R6 与它们所附着的氮一起构成哌嗪环。
进一步优选的本发明实施方式是根据式 I 的化合物， 其中 R4 是二取代的胺。
尤其优选的本发明实施方式是根据式 I 的化合物， 其中 R1 是甲基， R3 是环戊基。
优选的本发明实施方式包括但不限于下面列举的化合物 ： 8- 环戊基 -2-( 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮盐酸盐，
8- 环戊基 -6- 乙基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮盐酸盐，
8- 环戊基 -7- 氧代 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -6- 甲酸乙基酯盐酸盐，
6- 氨基 -8- 环戊基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮盐酸盐，
6- 溴 -8- 环 戊 基 -2-[5-((R)-1- 甲 基 -1- 吡 咯 烷 -2- 基 )- 吡 啶 -2- 基 氨 基 ]-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮盐酸盐，
6- 溴 -8- 环己基 -2-( 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -2-[5-(3， 5- 二甲基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -2-[5-(3， 3- 二甲基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-[5-(4- 甲基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨 基 ]-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -2-[5-(3- 氨基 - 吡咯烷 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8- 环戊基 -5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-(5- 吗啉 -4- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
2-{5-[ 双 -(2- 甲氧基 - 乙基 )- 氨基 ]- 吡啶 -2- 基氨基 }-6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-(5- 吗啉 -4- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶 并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -2-{5-[ 双 -(2- 甲氧基 - 乙基 )- 氨基 ]- 吡啶 -2- 基氨基 }-8- 环戊 基 -5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
4-[6-(8- 环戊基 -6- 碘 -5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基 氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯，
8- 环戊基 -6- 碘 -5- 甲基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
4-{6-(8- 环戊基 -6-(2- 乙氧基 - 乙氧基 )-7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 }- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯，
8- 环戊基 -6-(2- 乙氧基 - 乙氧基 )-2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
2-{5-[ 双 -(2- 甲氧基 - 乙基 )- 氨基 ]- 吡啶 -2- 基氨基 }-6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -2-{5-[ 双 -(2- 甲氧基 - 乙基 )- 氨基 ]- 吡啶 -2- 基氨基 }-8- 环戊 基 -5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
4-[6-(8- 异丙基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡 啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯，
8- 异丙基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
4-[6-(8- 环戊基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡 啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯，
8- 环戊基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
4-[6-(8- 环己基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨 基 )- 吡 啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯，
8- 环己基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
4-[6-(8- 环丙基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡 啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯，
8- 环丙基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -2-( 吡啶 -2， 6- 基二氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-( 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-[5-(4- 甲基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
8- 环戊基 -6-(1- 乙氧基 - 乙烯基 )-5- 甲基 -2-[5-(4- 甲基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡 啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
(1-{6-[8- 环戊基 -6-(1- 乙氧基 - 乙烯基 )-5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶 并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 ]- 吡啶 -3- 基 }- 吡咯烷 -3- 基 )- 氨基甲酸叔丁基酯，
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -2-(4- 羟基 -3， 4， 5， 6- 四氢 -2H-[1， 3′ ] 联吡啶 -6′ - 基 氨基 )-5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
4-[6-(6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 氮杂环庚烷 -1- 甲酸叔丁基酯，
6- 溴 -8- 环戊基 -2-(5-[1， 4] 二氮杂环庚烷 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
4-{6-[8- 环戊基 -6-(1- 乙氧基 - 乙烯基 )-5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 ]- 吡啶 -3- 基 }-[1， 4] 二氮杂环庚烷 -1- 甲酸叔丁基酯，
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -2-(5-[1， 4] 二氮杂环庚烷 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-( 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮，
4-[6-(8- 环戊基 -5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨 基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯，
8- 环戊基 -5- 甲基 -2-(5- 哌嗪 -4- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
4-[6-(6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基 氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]-2， 2- 二甲基 - 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯，
6- 溴 -8- 环戊基 -2-[5-(3， 3- 二甲基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3d] 嘧啶 -7- 酮，
4-{6-[8- 环戊基 -6-(1- 乙氧基 - 乙烯基 )-5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 ]- 吡啶 -3- 基 }-2， 2- 二甲基 - 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯，
4-[6-(6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基 氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]-2， 6- 二甲基 - 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯，
6- 溴 -8- 环戊基 -2-[5-(3， 5- 二甲基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
4-{6-[8- 环戊基 -6-(1- 乙氧基 - 乙烯基 )-5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 ]- 吡啶 -3- 基 }-2， 6- 二甲基 - 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯，
8- 环戊基 -6-(1- 乙氧基 - 乙烯基 )-5- 甲基 -2-(5- 吗啉 -4- 基 - 吡啶 -2- 基氨 基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环 戊 基 -5- 甲 基 -2-(3， 4， 5， 6- 四 氢 -2H-[1， 3’ ] 联 吡 啶 -6’ - 基氨 基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
8- 环戊基 -6-(1- 乙氧基 - 乙烯基 )-5- 甲基 -2-(3， 4， 5， 6- 四氢 -2H-[1， 3’ ]联 吡啶 -6’ - 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-(3， 4， 5， 6- 四氢 -2H-[1， 3’ ] 联吡啶 -6’ - 基氨 基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
4-{6-[8- 环戊基 -6-(2- 乙氧基 - 乙基 )-7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 ]- 吡啶 -3- 基 }- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯，
8- 环戊基 -6-(2- 乙氧基 - 乙基 )-2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
4-{6-[8- 环戊基 -6-(2- 甲氧基 - 乙氧基甲基 )-7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 ]- 吡啶 -3- 基 }- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯，8- 环 戊 基 -6-(2- 甲 氧 基 - 乙 氧 基 甲 基 )-2-(5- 哌 嗪 -1- 基 - 吡 啶 -2- 基 氨 基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
4-[6-(8- 环戊基 -6- 乙氧基甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基 氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯，
8- 环戊基 -6- 乙氧基甲基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
4-[6-(8- 环戊基 -6- 甲氧基甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基 氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯，
8- 环戊基 -6- 甲氧基甲基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -2-[5-(2， 6- 二甲基 - 吗啉 -4- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
8- 环 戊 基 -6- 乙 氧 基 甲 基 -2-(3， 4， 5， 6- 四 氢 -2H-[1， 3’ ] 联 吡 啶 -6’ - 基氨 基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
8- 环戊基 -6- 乙氧基甲基 -2-(5- 吗啉 -4- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮， [8- 环戊基 -7- 氧代 -2-(3， 4， 5， 6- 四氢 -2H-[1， 3’ ] 联吡啶 -6’ - 基氨基 )-7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -6- 基甲基 ]- 氨基甲酸苄基酯，
8- 环戊基 -2-[5-(2， 6- 二甲基 - 吗啉 -4- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-6-(1- 乙氧 基 - 乙烯基 )-5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -2-[5-(2， 6- 二甲基 - 吗啉 -4- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
8- 环戊基 -5- 甲基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-6- 丙酰基 -8H- 吡啶 并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮。
其它本发明实施方式包括但不限于下面列举的化合物 ：
6- 溴 -8- 环戊基 -2- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
8- 环戊基 -6- 氟 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮盐酸盐，
8- 环戊基 -6- 甲基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮盐酸盐，
8- 环戊基 -6- 异丁氧基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮盐酸盐，
6- 苄基 -8- 环戊基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮盐酸盐，
8- 环戊基 -6- 羟甲基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮盐酸盐，
2-[5-(4- 叔丁氧羰基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8- 环戊基 -5- 甲基 -7- 氧
代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -6- 甲酸乙基酯，
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶 并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-( 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -2-( 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -2-[5-(3， 5- 二甲基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -2-[5-(3， 3- 二甲基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -2-[5-(4- 甲基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
2-[5-(3- 氨基 - 吡咯烷 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-6- 溴 -8- 环戊基 -8H- 吡啶 并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮， 6- 溴 -8- 环戊基 -2-[5-(3- 乙氨基 - 吡咯烷 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -2-(5- 吡咯烷 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
2-{5-[3-(1- 氨 基 -1- 甲 基 - 乙 基 )- 吡 咯 烷 -1- 基 ]- 吡 啶 -2- 基 氨 基 }-6- 溴 -8- 环戊基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
1-[6-(6- 溴 -8- 环 戊 基 -7- 氧 代 -7， 8- 二 氢 - 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -2- 基 氨 基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 吡咯烷 -2- 甲酸，
6- 溴 -8- 环戊基 -2-[5-(4- 二乙氨基 - 丁基氨基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶 并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -2-[5-(3- 乙氨基 - 吡咯烷 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-(5- 吡咯烷 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -2-{5-[3-(1- 氨基 -1- 甲基 - 乙基 )- 吡咯烷 -1- 基 ]- 吡啶 -2- 基氨 基 }-8- 环戊基 -5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
1-[6-(6- 乙酰基 -8- 环戊基 -5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 吡咯烷 -2- 甲酸，
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -2-[5-(4- 二乙氨基 - 丁基氨基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
8- 环戊基 -2-[5-(3， 5- 二甲基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-6- 乙基 -8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
8- 环戊基 -2-[5-(3， 3- 二甲基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-6- 乙基 -8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
8- 环戊基 -6- 乙基 -2-[5-(4- 甲基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶 并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
2-[5-(3- 氨基 - 吡咯烷 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8- 环戊基 -6- 乙基 -8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
8- 环戊基 -6- 乙基 -2-[5-(3- 乙氨基 - 吡咯烷 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
8- 环戊基 -6- 乙基 -2-(5- 吡咯烷 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
2-{5-[3-(1- 氨基 -1- 甲基 - 乙基 )- 吡咯烷 -1- 基 ]- 吡啶 -2- 基氨基 }-8- 环戊 基 -6- 乙基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
1-[6-(8- 环戊基 -6- 乙基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨 基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 吡咯烷 -2- 甲酸，
8- 环戊基 -2-[5-(4- 二乙氨基 - 丁基氨基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-6- 乙基 -8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 苄基 -8- 环戊基 -2-[5-(3， 5- 二甲基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 苄基 -8- 环戊基 -2-[5-(3， 3- 二甲基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 苄基 -8- 环戊基 -2-[5-(4- 甲基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶 并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
2-[5-(3- 氨基 - 吡咯烷 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-6- 苄基 -8- 环戊基 -8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 苄基 -8- 环戊基 -2-[5-(3- 乙氨基 - 吡咯烷 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 苄基 -8- 环戊基 -2-(5- 吡咯烷 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
2-{5-[3-(1- 氨基 -1- 甲基 - 乙基 )- 吡咯烷 -1- 基 ]- 吡啶 -2- 基氨基 }-6- 苄 基 -8- 环戊基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
1-[6-(6- 苄基 -8- 环戊基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨 基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 吡咯烷 -2- 甲酸，
6- 苄基 -8- 环戊基 -2-[5-(4- 二乙氨基 - 丁基氨基 )- 吡啶 -2- 基氨 基 ]-8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
8- 环 戊 基 -2-[5-(3， 5- 二 甲 基 - 哌 嗪 -1- 基 )- 吡 啶 -2- 基 氨 基 ]-6- 羟 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
8- 环 戊 基 -2-[5-(3， 3- 二 甲 基 - 哌 嗪 -1- 基 )- 吡 啶 -2- 基 氨 基 ]-6- 羟 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
8- 环戊基 -6- 羟甲基 -2-[5-(4- 甲基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
2-[5-(3- 氨基 - 吡咯烷 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8- 环戊基 -6- 羟甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
8- 环 戊 基 -2-[5-(3- 乙 氨 基 - 吡 咯 烷 -1- 基 )- 吡 啶 -2- 基 氨 基 ]-6- 羟 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
8- 环戊基 -6- 羟甲基 -2-(5- 吡咯烷 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
2-{5-[3-(1- 氨基 -1- 甲基 - 乙基 )- 吡咯烷 -1- 基 ]- 吡啶 -2- 基氨基 }-8- 环戊 基 -6- 羟甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
1-[6-(8- 环戊基 -6- 羟甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨 基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 吡咯烷 -2- 甲酸，
8- 环戊基 -2-[5-(4- 二乙氨基 - 丁基氨基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-6- 羟甲基 -8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 氨基 -8- 环戊基 -2-[5-(3， 5- 二甲基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 氨基 -8- 环戊基 -2-[5-(3， 3- 二甲基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 氨基 -8- 环戊基 -2-[5-(4- 甲基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶 并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 氨基 -2-[5-(3- 氨基 - 吡咯烷 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8- 环戊基 -8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 氨基 -8- 环戊基 -2-[5-(3- 乙氨基 - 吡咯烷 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 氨基 -8- 环戊基 -2-(5- 吡咯烷 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 氨基 -2-{5-[3-(1- 氨基 -1- 甲基 - 乙基 )- 吡咯烷 -1- 基 ]- 吡啶 -2- 基氨 基 }-8- 环戊基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
1-[6-(6- 氨基 -8- 环戊基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨 基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 吡咯烷 -2- 甲酸，
6- 氨基 -8- 环戊基 -2-[5-(4- 二乙氨基 - 丁基氨基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -2-(3， 4， 5， 6- 四氢 -2H-[1， 3’ ] 联吡啶 -6’ - 基氨基 )-8H- 吡啶 并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -2-(5- 吗啉 -4- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -2-(5- 二乙氨基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮，
2-{5-[ 双 -(2- 羟基 - 乙基 )- 氨基 ]- 吡啶 -2- 基氨基 }-6- 溴 -8- 环戊基 -8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
2-{5-[ 双 -(2- 甲氧基 - 乙基 )- 氨基 ]- 吡啶 -2- 基氨基 }-6- 溴 -8- 环戊基 -8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，2-[5-(2- 氨基 - 乙基氨基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-6- 溴 -8- 环戊基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -2-(5- 二甲氨基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮，
N-[6-(6- 溴 -8- 环 戊 基 -7- 氧 代 -7， 8- 二 氢 - 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -2- 基 氨 基 )- 吡啶 -3- 基 ]-N- 甲基 - 乙酰胺，
6- 溴 -8- 环戊基 -2-[5-(2- 甲氧基 - 乙氧基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -2-[5-(2- 甲氧基 - 乙氧基甲基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶 并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -2-[5-(2- 二乙氨基 - 乙氧基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -2-(5- 吡咯烷 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -2-(6- 甲基 -5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环 戊 基 -5- 甲 基 -2-(3， 4， 5， 6- 四 氢 -2H-[1， 3’ ] 联 吡 啶 -6’ - 基氨 基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -2-(5- 二乙氨基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
2-{5-[ 双 -(2- 羟基 - 乙基 )- 氨基 ]- 吡啶 -2- 基氨基 }-6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
2-[5-(2- 氨基 - 乙基氨基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲基 -8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -2-(5- 二甲氨基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
N-[6-(6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基 氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]-N- 甲基 - 乙酰胺，
6- 溴 -8- 环戊基 -2-[5-(2- 甲氧基 - 乙氧基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-5- 甲基 -8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环 戊 基 -2-[5-(2- 甲 氧 基 - 乙 氧 基 甲 基 )- 吡 啶 -2- 基 氨 基 ]-5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环 戊 基 -2-[5-(2- 二 乙 氨 基 - 乙 氧 基 )- 吡 啶 -2- 基 氨 基 ]-5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-(5- 吡咯烷 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-(6- 甲基 -5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-(3， 4， 5， 6- 四氢 -2H-[1， 3’ ] 联吡啶 -6’ - 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -2-(5- 二乙氨基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙 酰 基 -2-{5-[ 双 -(2- 羟 基 - 乙 基 )- 氨 基 ]- 吡 啶 -2- 基 氨 基 }-8- 环 戊 基 -5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙 酰 基 -2-[5-(2- 氨 基 - 乙 基 氨 基 )- 吡 啶 -2- 基 氨 基 ]-8- 环 戊 基 -5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -2-(5- 二甲氨基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
N-[6-(6- 乙酰基 -8- 环戊基 -5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]-N- 甲基 - 乙酰胺，
6- 乙 酰 基 -8- 环 戊 基 -2-[5-(2- 甲 氧 基 - 乙 氧 基 )- 吡 啶 -2- 基 氨 基 ]-5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -2-[5-(2- 甲氧基 - 乙氧基甲基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -2-[5-(2- 二乙氨基 - 乙氧基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-(5- 吡咯烷 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙 酰 基 -8- 环 戊 基 -5- 甲 基 -2-(6- 甲 基 -5- 哌 嗪 -1- 基 - 吡 啶 -2- 基 氨 基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -2-(3， 4， 5， 6- 四氢 -2H-[1， 3’ ] 联吡啶 -6’ - 基氨基 )-8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -2-(5- 吗啉 -4- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -2-(5- 二乙氨基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙 酰 基 -2-{5-[ 双 -(2- 羟 基 - 乙 基 )- 氨 基 ]- 吡 啶 -2- 基 氨 基 }-8- 环 戊 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -2-{5-[ 双 -(2- 甲氧基 - 乙基 )- 氨基 ]- 吡啶 -2- 基氨基 }-8- 环戊 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -2-[5-(2- 氨基 - 乙基氨基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8- 环戊基 -8H- 吡啶 并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -2-(5- 二甲氨基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
N-[6-(6- 乙酰基 -8- 环戊基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨 基 )- 吡啶 -3- 基 ]-N- 甲基 - 乙酰胺，
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -2-[5-(2- 甲氧基 - 乙氧基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶 并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，6- 乙酰基 -8- 环戊基 -2-[5-(2- 甲氧基 - 乙氧基甲基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -2-[5-(2- 二乙氨基 - 乙氧基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -2-(5- 吡咯烷 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -2-(6- 甲基 -5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶 并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -2-[5-(2- 甲氧基 - 乙氧基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -2-[5-(2- 甲氧基 - 乙基氨基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
2-(5- 氮杂环丁烷 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-6- 溴 -8- 环戊基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
2-(5- 氮杂环庚烷 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-6- 溴 -8- 环戊基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
N-[6-(6- 溴 -8- 环 戊 基 -7- 氧 代 -7， 8- 二 氢 - 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -2- 基 氨 基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 乙酰胺，
6- 溴 -8- 环 戊 基 -2-(5- 苯 氨 基 - 吡 啶 -2- 基 氨 基 )-8H- 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -2-[5-(4- 氟 - 苄基氨基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
N-[6-(6- 溴 -8- 环 戊 基 -7- 氧 代 -7， 8- 二 氢 - 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -2- 基 氨 基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 甲磺酰胺，
6- 溴 -8- 环戊基 -2-(5- 甲磺酰基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -2-(5- 苯基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 氨基 -8- 环戊基 -2-[5-(2- 甲氧基 - 乙氧基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 氨基 -8- 环戊基 -2-[5-(2- 甲氧基 - 乙基氨基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶 并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 氨基 -2-(5- 氮杂环丁烷 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8- 环戊基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 氨基 -2-(5- 氮杂环庚烷 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8- 环戊基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
N-[6-(6- 氨基 -8- 环戊基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨 基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 乙酰胺，
6- 氨基 -8- 环戊基 -2-(5- 苯氨基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮，6- 氨基 -8- 环戊基 -2-[5-(4- 氟 - 苄基氨基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
N-[6-(6- 氨基 -8- 环戊基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨 基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 甲磺酰胺，
6- 氨基 -8- 环戊基 -2-(5- 甲磺酰基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮，
6- 氨 基 -8- 环 戊 基 -2-(5- 苯 基 - 吡 啶 -2- 基 氨 基 )-8H- 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -2-[5-(2- 甲氧基 - 乙氧基 )- 吡啶 -2- 基氨 基 ]-5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -2-[5-(2- 甲氧基 - 乙基氨基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙 酰 基 -2-(5- 氮 杂 环 丁 烷 -1- 基 - 吡 啶 -2- 基 氨 基 )-8- 环 戊 基 -5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙 酰 基 -2-(5- 氮 杂 环 庚 烷 -1- 基 - 吡 啶 -2- 基 氨 基 )-8- 环 戊 基 -5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮， N-[6-(6- 乙酰基 -8- 环戊基 -5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 乙酰胺，
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-(5- 苯氨基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙 酰 基 -8- 环 戊 基 -2-[5-(4- 氟 - 苄 基 氨 基 )- 吡 啶 -2- 基 氨 基 ]-5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
N-[6-(6- 乙酰基 -8- 环戊基 -5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 甲磺酰胺，
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -2-(5- 甲磺酰基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-(5- 苯基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 苄基 -8- 环戊基 -2-[5-(2- 甲氧基 - 乙氧基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 苄基 -8- 环戊基 -2-[5-(2- 甲氧基 - 乙基氨基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶 并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
2-(5- 氮杂环丁烷 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-6- 苄基 -8- 环戊基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
2-(5- 氮杂环庚烷 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-6- 苄基 -8- 环戊基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
N-[6-(6- 苄基 -8- 环戊基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨 基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 乙酰胺，
6- 苄基 -8- 环戊基 -2-(5- 苯氨基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧
啶 -7- 酮，
6- 苄基 -8- 环戊基 -2-[5-(4- 氟 - 苄基氨基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
N-[6-(6- 苄基 -8- 环戊基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨 基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 甲磺酰胺，
6- 苄基 -8- 环戊基 -2-(5- 甲磺酰基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮，
6- 苄 基 -8- 环 戊 基 -2-(5- 苯 基 - 吡 啶 -2- 基 氨 基 )-8H- 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮，
8- 环戊基 -6- 羟甲基 -2-[5-(2- 甲氧基 - 乙氧基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶 并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
8- 环戊基 -6- 羟甲基 -2-[5-(2- 甲氧基 - 乙基氨基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
2-(5- 氮杂环丁烷 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8- 环戊基 -6- 羟甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
2-(5- 氮杂环庚烷 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8- 环戊基 -6- 羟甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
N-[6-(8- 环戊基 -6- 羟甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨 基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 乙酰胺，
8- 环戊基 -6- 羟甲基 -2-(5- 苯氨基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮，
8- 环戊基 -2-[5-(4- 氟 - 苄基氨基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-6- 羟甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
N-[6-(8- 环戊基 -6- 羟甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨 基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 甲磺酰胺，
8- 环戊基 -6- 羟甲基 -2-(5- 甲磺酰基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
8- 环戊基 -6- 羟甲基 -2-(5- 苯基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮，
8- 环戊基 -6- 乙基 -2-[5-(2- 甲氧基 - 乙氧基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
8- 环戊基 -6- 乙基 -2-[5-(2- 甲氧基 - 乙基氨基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶 并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
2-(5- 氮杂环丁烷 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8- 环戊基 -6- 乙基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
2-(5- 氮杂环庚烷 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8- 环戊基 -6- 乙基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
N-[6-(8- 环戊基 -6- 乙基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨 基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 乙酰胺，8- 环戊基 -6- 乙基 -2-(5- 苯氨基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮，
8- 环戊基 -6- 乙基 -2-[5-(4- 氟 - 苄基氨基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
N-[6-(8- 环戊基 -6- 乙基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨 基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 甲磺酰胺，
8- 环戊基 -6- 乙基 -2-(5- 甲磺酰基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮，
8- 环 戊 基 -6- 乙 基 -2-(5- 苯 基 - 吡 啶 -2- 基 氨 基 )-8H- 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -2-[5-( 哌嗪 -1- 羰基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -2-[5-(3， 5- 二甲基 - 哌嗪 -1- 羰基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
2-[5-(3- 氨基 - 吡咯烷 -1- 羰基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-6- 溴 -8- 环戊基 -8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -2-[5-( 吗啉 -4- 羰基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-[5-( 哌嗪 -1- 羰基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶 并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -2-[5-(3， 5- 二甲基 - 哌嗪 -1- 羰基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
2-[5-(3- 氨基 - 吡咯烷 -1- 羰基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-[5-( 吗啉 -4- 羰基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶 并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-[5-( 哌嗪 -1- 羰基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙 酰 基 -8- 环 戊 基 -2-[5-(3， 5- 二 甲 基 - 哌 嗪 -1- 羰 基 )- 吡 啶 -2- 基 氨 基 ]-5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -2-[5-(3- 氨基 - 吡咯烷 -1- 羰基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8- 环戊基 -5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-[5-( 吗啉 -4- 羰基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
8- 环戊基 -6- 乙基 -2-[5-( 哌嗪 -1- 羰基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
8- 环 戊 基 -2-[5-(3， 5- 二 甲 基 - 哌 嗪 -1- 羰 基 )- 吡 啶 -2- 基 氨 基 ]-6- 乙 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
2-[5-(3- 氨基 - 吡咯烷 -1- 羰基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8- 环戊基 -6- 乙基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
8- 环戊基 -6- 乙基 -2-[5-( 吗啉 -4- 羰基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -2-[5-( 哌嗪 -1- 磺酰基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -2-[5-( 吗啉 -4- 磺酰基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
2-[5-(3- 氨基 - 吡咯烷 -1- 磺酰基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-6- 溴 -8- 环戊 基 -8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环 戊 基 -2-[5-(3， 5- 二 甲 基 - 哌 嗪 -1- 磺 酰 基 )- 吡 啶 -2- 基 氨 基 ]-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-[5-( 哌嗪 -1- 磺酰基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-[5-( 吗啉 -4- 磺酰基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
2-[5-(3- 氨基 - 吡咯烷 -1- 磺酰基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 溴 -8- 环戊基 -2-[5-(3， 5- 二甲基 - 哌嗪 -1- 磺酰基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
8- 环戊基 -6- 乙基 -2-[5-( 哌嗪 -1- 磺酰基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
8- 环戊基 -6- 乙基 -2-[5-( 吗啉 -4- 磺酰基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
2-[5-(3- 氨 基 - 吡 咯 烷 -1- 磺 酰 基 )- 吡 啶 -2- 基 氨 基 ]-8- 环 戊 基 -6- 乙 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
8- 环 戊 基 -2-[5-(3， 5- 二 甲 基 - 哌 嗪 -1- 磺 酰 基 )- 吡 啶 -2- 基 氨 基 ]-6- 乙 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙 酰 基 -8- 环 戊 基 -5- 甲 基 -2-[5-( 哌 嗪 -1- 磺 酰 基 )- 吡 啶 -2- 基 氨 基 ]-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙 酰 基 -8- 环 戊 基 -5- 甲 基 -2-[5-( 吗 啉 -4- 磺 酰 基 )- 吡 啶 -2- 基 氨 基 ]-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙 酰 基 -2-[5-(3- 氨 基 - 吡 咯 烷 -1- 磺 酰 基 )- 吡 啶 -2- 基 氨 基 ]-8- 环 戊 基 -5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -2-[5-(3， 5- 二甲基 - 哌嗪 -1- 磺酰基 )- 吡啶 -2- 基氨 基 ]-5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮， 和
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-([1， 6]- 二氮杂萘 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -2-[5-(1， 1- 二氧代 -116- 硫代吗啉 -4- 基 )- 吡啶 -2- 基 氨基 ]-5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，8- 环戊基 -6- 羟甲基 -5- 甲基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶 并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -2-(3- 氯 -5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8- 环戊基 -5- 甲基 -8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
4-[6- 乙酰基 -5- 甲基 -7- 氧代 -2-( 吡啶 -2- 基氨基 )-7H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -8- 基 ]- 环己烷甲酸，
4-[6- 乙酰基 -2-(5- 二甲氨基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-5- 甲基 -7- 氧代 -7H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -8- 基 ]- 环己烷甲酸，
6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-[5-( 哌嗪 -1- 磺酰基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6-(8- 环 戊 基 -6- 乙 基 -7- 氧 代 -7， 8- 二 氢 - 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -2- 基 氨 基 )-3- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 甲酸，
2-(6- 乙酰基 -5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8- 环戊基 -6- 乙基 -8H- 吡啶 并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
3-{2-[6-(8- 环戊基 -6- 乙基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基 氨基 )- 吡啶 -3- 基氧基 ]- 乙氧基 }- 丙酸，
[6-(8- 环 戊 基 -6- 乙 基 -7- 氧 代 -7， 8- 二 氢 - 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -2- 基 氨 基 )- 吡啶 -3- 基氧基 ]- 乙酸，
8- 环戊基 -2-(5-{2-[2-(5- 甲基 - 吡啶 -2- 基 )- 乙氧基 ]- 乙氧基 }- 吡啶 -2- 基 氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
2-[5-(3- 苯磺酰基 - 丙氧基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8- 环戊基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
8- 环戊基 -6- 乙基 -2-{5-[2-(2- 甲氧基 - 乙氧基 )- 乙氧基 ]- 吡啶 -2- 基氨 基 }-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
8- 环戊基 -2-(5-{[3-(3， 5- 二甲基 - 哌嗪 -1- 基 )- 丙基 ]- 甲基 - 氨基 }- 吡 啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
8- 环 戊 基 -2-{5-[(3- 咪 唑 -1- 基 - 丙 基 )- 甲 基 - 氨 基 ]- 吡 啶 -2- 基 氨 基 }-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -5- 甲基 -2-(5- 甲基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8- 哌啶 -4- 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮，
6- 乙酰基 -2-[5-(3， 4- 二羟基 - 吡咯烷 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8- 甲氧基甲 基 -5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮。
本发明提供治疗哺乳动物、 包括人类选自下组的障碍或病症的方法 ： 细胞增殖障 碍， 例如癌症、 与动脉粥样硬化有关的血管平滑肌增生、 手术后血管狭窄、 再狭窄和子宫内 膜异位 ； 感染， 包括病毒感染， 例如 DNA 病毒， 象疱疹， 和 RNA 病毒， 象 HIV， 以及真菌感染 ； 自 身免疫疾病， 例如牛皮癣、 炎症， 象类风湿性关节炎、 狼疮、 I 型糖尿病、 糖尿病性肾病、 多发 性硬化和肾小球性肾炎 ； 器官移植排斥， 包括宿主对移植物的疾病， 该方法包含给予所述哺 乳动物治疗这类障碍或疾病有效量的式 I 化合物或其药学上可接受的盐。
本发明进一步提供可用于治疗异常细胞增殖、 例如癌症的式 I 化合物。本发明进一步提供治疗异常细胞增殖、 例如选自下组的癌症的方法 ： 乳腺、 卵巢、 子宫颈、 前列腺、 睾 丸、 食道、 胃、 皮肤、 肺、 骨、 结肠、 胰腺、 甲状腺、 胆道、 颊腔与咽 ( 口 )、 唇、 舌、 口腔、 咽、 小肠、 结肠 - 直肠、 大肠、 直肠、 脑与中枢神经系统的癌症、 胶质母细胞瘤、 成神经细胞瘤、 角化棘 皮瘤、 表皮样癌、 大细胞癌、 腺癌、 腺瘤、 滤泡癌、 未分化的癌、 乳头状癌、 精原细胞瘤、 黑瘤、 肉瘤、 膀胱癌、 肝癌、 肾癌、 骨髓障碍、 淋巴障碍、 何杰金氏病、 毛发细胞癌和白血病， 该方法 包含给予需要这类治疗的受治疗者治疗有效量的式 I 化合物或其药学上可接受的盐。
进一步的本发明实施方式是治疗患有由血管平滑肌细胞增殖所致疾病的受治疗 者的方法。在本发明范围内的化合物有效地抑制血管平滑肌细胞的增殖和移行。该方法包 含给予需要治疗的受治疗者足以抑制血管平滑肌增生和 / 或移行量的式 I 化合物或其药学 上可接受的盐。
本发明进一步提供治疗患有痛风的受治疗者的方法， 包含对需要治疗的所述受治 疗者给以足以治疗该病症量的式 I 化合物或其药学上可接 受的盐。
本发明进一步提供治疗患有肾疾病、 例如多囊性肾疾病的受治疗者的方法， 包含 给予需要治疗的所述受治疗者足以治疗该病症量的式 I 化合物或其药学上可接受的盐。
由于它们对 cdk 和其它激酶的抑制活性， 本发明化合物也是有用的研究工具， 用 于体外和体内研究这些激酶的作用机理。 上述治疗方法优选地是这样进行的， 给予需要治疗的受治疗者治疗有效量的式 I 化合物 ( 如下所述 )。本发明化合物是取代的 2- 氨基吡啶， 它们是有力的细胞周期蛋白依 赖性激酶 4(cdk4) 抑制剂。这些化合物是容易合成的， 能够借助多种途径给药， 包括口服和 肠胃外， 具有很少或者没有毒性。本发明化合物是式 I 化合物类的成员。
本发明提供药物组合物， 包含治疗有效量的式 I 化合物或其药学上可接受的盐和 药学上可接受的载体、 稀释剂或赋形剂。
很多本发明化合物是细胞周期蛋白依赖性激酶 cdk4 的选择性抑制剂， 也就是说， 它们抑制 cdk4 的效力强于它们抑制酪氨酸激酶和其它丝氨酸 - 苏氨酸激酶， 包括其它细 胞周期蛋白依赖性激酶， 例如 cdk2。尽管它们具有 cdk4 抑制选择性， 本发明化合物也可以 抑制其它激酶， 不过抑制浓度高于它们抑制 cdk4 的浓度。然而， 本发明化合物也可以抑制 cdk6， 抑制浓度相似于抑制 cdk4 所必需的浓度， 因为 cdk6 在结构上与 cdk4 相似， 并且发挥 相似的功能。
优选的本发明实施方式是这样的式 I 化合物， 它们抑制 cdk4 的效力比它们抑制 cdk2 的效力至少强约 100 倍。
优选的本发明实施方式提供在低于抑制 cdk2 所必需的剂量下抑制 cdk4 的方法， 包含选择性抑制 cdk4 而非 cdk2 量的优选式 I 化合物的给药。
本发明的式 I 化合物具有有用的药学与药用性质。很多本发明的式 I 化合物表现 显著的选择性 cdk4 抑制活性， 因此在多种临床病症的治疗中具有重要价值， 其中 cdk4 激酶 异常地升高， 或者在正常量与活性水平上活化或存在， 但是 cdk 的抑制是治疗细胞增殖障 碍所需要的。这类 障碍包括但不限于下面段落所列举的那些。
本发明化合物可用于治疗癌症 ( 例如白血病和肺、 乳腺、 前列腺与皮肤的癌症， 例 如黑瘤 ) 和其它增殖性疾病， 包括但不限于牛皮癣、 HSV、 HIV、 再狭窄和动脉粥样硬化。为了 利用本发明化合物治疗癌症， 给予需要这类治疗的患者、 例如患有癌症或另一种增殖性疾
病者治疗有效量的药学上可接受的组合物， 其中包含至少一种本发明化合物。
本发明化合物是 cdk4 的选择性抑制剂， 也就是说， 它们抑制 cdk4 的效力强于它 们抑制酪氨酸激酶和其它丝氨酸 - 苏氨酸激酶， 包括其它细胞周期蛋白依赖性激酶， 例如 cdk2。尽管它们具有 cdk4 抑制选择性， 本发明化合物也可以抑制其它激酶， 不过抑制浓度 高于它们抑制 cdk4 的浓度。不过， 本发明化合物也可以抑制 cdk6， 抑制浓度相似于抑制 cdk4 所必需的浓度， 因为 cdk6 在结构上与 cdk4 相似， 并且发挥相似的功能。
发明的详细说明
本发明化合物的制备图例如流程 1 至 13 所示。
合成
本发明化合物可以按照一般流程 1 加以制备。 组分 A 和 B 的合成 (assembly) 一般 要求它们在适合溶剂中的化合， 溶剂例如 DMSO、 甲苯或吡啶， 再加热该混合物至 80-140℃。 4 根据取代基 R 的属性， 随后可能需要去保护步骤。
流程 1
由结构 A 代表的亚砜的合成已经如 PCT 申请 WO 98/33798 和 WO 01/70741 所述。 这类中间体是经由既定的和已公开的方案合成的 (Barvian et al.， J.Med.Chem.2000， 43， 4606-4616)， 始于商业上可得到的嘧啶， 即 4- 氯 -2- 甲硫基 - 嘧啶 -5- 甲酸乙酯。其中 X1 ＝ X2 ＝ X3 ＝氢的吡啶衍生物 B 可以从商业上可得到的 5- 溴 -2- 硝基吡啶制备， 在碱或钯的 促进下进行溴被亲核试剂的置换， 亲核试剂例如醇或者伯或仲胺， 继之以硝基的还原。 这种 方法的代表性实例如流程 2 所述。 可以用于该反应的碱的实例包括 K2CO3 或 Na2CO3。 可以在 一种相转移催化剂的存在下使用这些碱， 例如 Bu4NI。钯促进的反应通常这样进行， 使用催 化剂， 例如 Pd(OAc)2、 Pd2(dba)3 或 Pd(PPh3)4 等， 在非极性有机溶剂中， 例如苯、 甲苯、 四氢呋 喃或乙腈， 在 25-110℃的温度下。这些催化剂通常采用适合的配体， 例如 BINAP、 Xantphos 或有关的膦类 Pd 配体。硝基的还原通常使用阮内镍进行， 不过也可以使用其它还原剂， 包 括披钯碳或 Fe/HCl。
流程 2
当 X1、 X2 或 X3 至少有一个不是氢时， 吡啶衍生物 B 是借助本领域已知的方法 制 备 的。 代 表 性 工 艺 的 实 例 可 以 参 见 ComprehensiveHeterocyclic Chemistry， Eds. A.R.Katritzky， C.W.Rees， 1984， Pergamon， NY ； Volume 2， Chapter 2.08， Pyridines
and theirBenzoderivatives ： Synthesis， Gumos Jones。 还 可 以 参 照 Comprehensive Heterocyclic Chemistry II ， Eds.A.R.Katritzky ， C.W.Rees. ， E.Scriven ， 1996 ， Pergamon， NY ； Volume 25， Chapter5.05， Pyridines and their Benzoderivatives ： Synthesis， GurnosJones。代表性实例如流程 3 所述。
流程 3
获得本发明化合物的替代途径涉及吡啶并嘧啶核心片段向吡啶并嘧啶 C-2 胺 的转化， 如流程 4 所示， 以及采用这种胺作为亲核试剂置换吡啶片段中的离去基团， 例如 溴或碘。该反应使用钯催化剂进行， 以便提供收率相当于流程 1 所示途径的目标化合 物。 在 该 反 应 中 可 以 采 用 的 钯 催 化 剂 的 实 例 包 括 Pd(OAc)2、 Pd2(dba)3 或 Pd(PPh3)4 和 PdCl2(PPh3)2。这些催化剂通常采用适合的配体， 例如 BINAP、 Xantphos 或有关的膦基 Pd 配 体 (phosphine-based pdligand)。典型的溶剂包括二甲氧基乙烷、 四氢呋喃、 乙腈和甲苯。 反应通常在 25℃与 160℃之间的温度下进行。在有些情况下， 吡啶环上离去基团邻位吸电 子基团的存在会加速该反应 (Jonckers， T.H.M.et al.Tetrahedron 2001， 57， 7027-7034)。
流程 4
在本发明化合物的另一种替代途径中， 使吡啶片段转化为胍， 再与适当的配合体 (partner) 缩合， 经由缩合反应生成嘧啶环 ( 流程 5)。 该缩合反应通常要求在适合的非 极性有机溶剂中， 例如氯苯、 硝基苯或道氏热载体， 将浓度为 0.5M 至 2M 的反应组分加热至 100-200℃的温度。
流程 5
(PG) 是保护基团，
例如 Cbz 或 Boc。
另外， 本发明化合物的合成可以通过取代的嘧啶中间体进行， 例如流程 6-13 所示 那些。 因而， 在流程 6 中， 利用由 Piers 所介绍的化学， 将 4- 氨基， 5- 卤代 - 嘧啶硫化物直接 转化为吡啶并嘧啶酮 (e.g.Piers， E.McEachern， E.J.and Romero， M.A.J.Org.Chem.1997， 62， 6034-6040)。作为替代选择， 利用标准工艺， 通过 C2 位亚砜的置换安装侧链吡啶基 - 胺 ( 见上 )， 然后经由 Stille 偶联和环闭合反应构建吡啶并嘧啶酮。在流程 7 中采用了相似 的化学， 始于 2- 氯嘧啶。流程 6 和 7 中的 Stille 反应通常在钯的催化下进行， 例如使用 Pd2(dba)3 或 Pd(PPh3)4 和 PdCl2(PPh3)2。典型的溶剂包括二甲氧基乙烷、 四氢呋 Pd(OAc)2、 喃、 乙腈和甲苯， 在反应期间可以加热至 100-200℃的温度。环闭合会自发地发生， 或者在 适合的有机溶剂中轻微加热至 100℃以下的温度。流程 7 中 C2 侧链的安装通常利用 POPd、 Pd(OAc)2 或 Pd2(dba)3 的催化作用以及适合的配体进行， 配体例如 BINAP、 Xantphos 或有关 的膦基 Pd 配体。
流程 6
流程 7另一种构建吡啶酮环的方式是始于简单取代的 4- 氨基嘧啶 C5 位醛或酮， 进行 Wittig、 Horner-Wadsworth Emmons、 Knoevenagel 或有关的化学， 例如烯醇化阴离子化学， 以安装吡啶并嘧啶酮系统的 C4-C5 双键。在本领域技术人员熟知的条件下进行这些反应， 采用适合的碱， 例如 NaH、 NaOEt、 LDA、 BuLi、 HMDS 等。当双键的几何学是这样的， 即嘧啶和 酯以顺式关系处于新生成的双键上时， 环闭合通常会在反应条件下自发地发生。 否则， 可能 需要在适合的有机溶剂中轻微加热至 100℃以下的温度， 以促进环闭合。 当双键的几何学是 这样的， 即嘧啶和酯以反式关系处于双键上时， 双键的异构化能够驱动环闭合， 例如在 DBU 中加 热至 100 与 200℃之间的温度， 或者在本领域技术人员熟知的条件下用基团来源、 例 如碘和 UV 光处理。环生成和侧链安装的顺序可以与流程 11-13 所示相反。
流程 8
流程 9
流程 10
G1 和 G2 是吸电子官能团， 例如 CN、 CO2Et、 CO2Me。 流程 11
流程 12
流程 13G1 和 G2 是吸电子官能团， 例如 CN、 CO2Et、 CO2Me。
本发明化合物能够被配制成多种口服与肠胃外剂型给药， 包括透皮和直肠给药。 将为本领域技术人员所认可的是， 下列剂型可以包含式 I 化合物或对应的式 I 化合物的药 学上可接受的盐或溶剂化物。
本发明还包含药物制剂， 包含治疗有效量的式 I 化合物以及药学上可接受的载 体、 稀释剂或赋形剂。 就制备含有本发明化合物的药物组合物而言， 药学上可接受的载体可 以是固体或液体。固体形式制备物包括粉剂、 片剂、 丸剂、 胶囊剂、 扁囊剂、 栓剂和可分散的 颗粒剂。固体载体可以是一种或多种物质， 它们也可以充当稀释剂、 矫味剂、 粘合剂、 防腐
剂、 片剂崩解剂或包封材料。
在粉剂中， 载体是微细粉碎的固体， 例如滑石或淀粉， 它是与微细粉碎的活性组分 的混合物。 在片剂中， 将活性组分与具有必要粘合性质的载体按适合比例混合， 再压制成所 需的形状和大小。
本发明制剂优选地含有约 5％至约 70％或以上的活性化合物。适合的载体包括碳 酸镁、 硬脂酸镁、 滑石、 糖、 乳糖、 果胶、 糊精、 淀粉、 明胶、 黄蓍胶、 甲基纤维素、 羧甲基纤维素 钠、 低熔点蜡、 可可脂等。优选的口用剂型是胶囊剂， 它包括活性化合物与作为载体提供胶 囊的包封材料的制剂， 其中活性组分有或没有其它载体被一种载体围绕， 从而与之缔合。 类 似地， 包括扁囊剂和锭剂。可以使用片剂、 粉剂、 胶囊剂、 丸剂、 扁囊剂和锭剂作为适合于口 服给药的固体剂型。
就制备栓剂而言， 首先熔化低熔点蜡， 例如脂肪酸甘油酯混合物或可可脂， 再随着 搅拌将活性组分均匀分散其中。 然后将熔化了的均匀混合物倒入适宜大小的模具中， 冷却， 从而固化。
液体形式制备物包括溶液、 混悬液和乳液， 例如水或水 / 丙二醇溶液。就肠胃外注 射而言， 可以将液体制备物配制成在聚乙二醇水溶液、 等渗盐水、 5％含水葡萄糖等中的溶 液。适合于口用的水溶液可以这样制备， 将活性组分溶于水， 根据需要加入适合的着色剂、 矫味剂、 稳定剂和增稠剂。 适合于口用的水悬液可以这样制备， 将微细粉碎的活性组分分散 在水中， 再与粘性材料混合， 例如天然或合成树胶、 树脂、 甲基纤维素、 羧甲基纤维素钠或其 它熟知的悬浮剂。 还包括这样的固体形式制备物， 打算在使用前不久转化为液体形式制备物， 用于 口服给药。这类液体形式包括溶液、 混悬液和乳液。除了活性组分以外， 这些制备物还可以 含有着色剂、 矫味剂、 稳定剂、 缓冲剂、 人工与天然甜味剂、 分散剂、 增稠剂、 增溶剂等。可以 采用蜡、 聚合物、 微粒等制备缓释剂型。而且， 可以采用渗透泵在长时间内均匀投放活性化 合物。
本发明药物制备物优选地是单位剂型。在这类剂型中， 制备物被细分为含有适量 活性组分的单位剂量。 单位剂型可以是带包装的制备物， 该包装含有离散量的制备物， 例如 小包装的片剂、 胶囊剂和小瓶或安瓿 装的粉剂。而且， 单位剂型可以是胶囊剂、 片剂、 扁囊 剂或锭剂本身， 或者它可以是适当数量的任意这些的带包装形式。
式 I 化合物的治疗有效剂量将从大约 0.01mg/kg 至大约 100mg/kg 体重每天不等。 典型的成人剂量将是大约 0.1mg 至大约 3000mg 每天。根据特定的应用和活性组分的效力， 活性组分在单位剂量制备物中的量可以从大约 0.1mg 至大约 500mg 不等， 优选约 0.6mg 至 100mg。如果需要的话， 组合物还可以含有其它可相容的治疗剂。给予需要用式 I 化合物治 疗的受治疗者约 0.6 至约 500mg 每天的剂量， 在 24 小时内单次或多次给药。这类治疗可以 按连续间隔反复达必要的时间长度。
本发明提供治疗选自下组的障碍或病症的药物组合物 ： 细胞增殖障碍， 例如癌症、 与动脉粥样硬化有关的血管平滑肌增生、 手术后血管狭窄、 再狭窄和子宫内膜异位 ； 感染， 包括病毒感染， 例如 DNA 病毒， 象疱疹， 和 RNA 病毒， 象 HIV， 和真菌感染 ； 自体免疫疾病， 例 如牛皮癣、 炎症， 象类风湿性关节炎、 狼疮、 I 型糖尿病、 糖尿病性肾病、 多发性硬化和肾小球 性肾炎 ； 器官移植排斥， 包括宿主对移植物的疾病。
下列实施例打算阐述特定的发明实施方式， 决不打算限制说明书或权利要求书的范围。 本领域技术人员将认可的是， 原料可以不同， 可以采用额外步骤来生成由本发明 涵盖的化合物， 正如下列实施例所证明的。下列实施例仅供阐述目的， 既不打算、 也不应当 以任意方式被解释为限制发明。 本领域技术人员将认识到的是， 可以进行变化和修改， 而不 违背本发明的精神或范围。
实施例 1
8- 环戊基 -2-( 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将如 WO 98/33798( 引入此作为参考 ) 实施例 107 所述制备的 8- 环戊基 -2- 甲 亚 磺 酰 基 -8H- 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮 (200mg， 0.7mmol) 和 2- 氨 基 吡 啶 (130mg， 1.4mmol) 合并在 10ml 圆底烧瓶中。将烧瓶用氮吹扫 (10min)， 然 后在 160 ℃油浴中加 热 (30min)。冷却后， 将有机残余物用水研制， 得到橙色固体， 进一步经过反相 HPLC 纯化 [Vydac C18 TP254(30mmx100mm) ； A： ACN( 乙腈 )+0.1％ TFA( 三氟乙酸 ) ； B： H2O+0.1％ TFA ； 10％ -76％ B 历经 40min]。分离到 15mg 8- 环戊基 -2-( 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮， 为黄色固体。Mp ： ＞ 250℃， Anal.HPLC[Vydac C18 TP254(4.6x150mm) ； A： ACN+0.1％ TFA ； B： H2O+0.1％ TFA ； 10％ -76％ B 历经 20min] ： ＞ 98％ Rt ＝ 13.9min.
实施例 2
4-[6-(6- 溴 -8- 环 戊 基 -7- 氧 代 -7， 8- 二 氢 - 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -2- 基 氨 基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯
在干燥氩气氛下合并 6- 溴 -8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮 (0.78g， 2.19mmol， 如 WO 98/33798( 引入此作为参考 ) 实施例 107 所述制备 ) 和 4-(6- 氨基 - 吡啶 -3- 基 )- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (0.67g， 2.4mmol)， 没有溶剂。 将烧瓶排 空， 加热至 120℃达 1 小时。 混合物经过硅胶色谱纯化， 用氯仿洗脱， 得到黄色泡沫， 0.288g。 从乙腈中重结晶， 得到 4-[6-(6- 溴 -8- 环戊基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (0.266g， 21％ )。MS(APCI) ； M++1 ： 计算值， 570.17， 实测值， 570.0.
实施例 3
6- 溴 -8- 环戊基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮盐酸盐
将实施例 2 所制备的 4-[6-(6- 溴 -8- 环戊基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (0.26g， 0.46mmol) 溶于 1 ∶ 1 氯仿 / 甲醇 (15ml)， 向其中加入乙醚 (25ml)。将溶液用无水氯化氢气体吹扫， 用塞子塞住 18 小 时。 将所得白色固体过滤， 用乙醚洗涤， 在 60℃真空中干燥， 得到 6- 溴 -8- 环戊基 -2-(5- 哌 嗪 -1- 基 - 吡 啶 -2- 基 氨 基 )-8H- 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮 盐 酸 盐， 为淡黄色固体 + (0.254g)。MS(APCI) ； M +1 ： 计 算 值， 470.12， 实 测 值， 470.0.C21H24BrN2O-1.25H2O·2.2HCl 的元素分析 ： 计算值 ： C， 44.01 ； H， 5.05 ； N， 17.11， Cl( 离子 )， 13.61 ； H2O， 3.93. 实测值 ： C， 43.74 ； H， 5.07 ； N， 16.78 ； Cl( 离子 )， 13.73 ； H2O， 3.81.
实施例 4
4-[6-(8- 环戊基 -6- 乙基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨
基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯
4-[6-(8- 环戊基 -6- 乙基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨 基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯是这样制备的， 向甲苯 (10ml) 中加入 8- 环戊 基 -6- 乙基 -2- 甲亚磺酰基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (0.80g， 2.62mmol) 和 4-(6- 氨 基 - 吡啶 -3- 基 )- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (1.82g， 6.55mmol)， 继之以加热至 105℃达 10 小时。过滤所得悬浮液， 将固体用甲苯洗涤， 在真空中干燥， 得到 4-[6-(8- 环戊基 -6- 乙 基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸 叔丁基酯， 为固体 (0.204g)。MS(APCI) ； M++1 ； 计算值 520.3， 实测值 520.1
实施例 5
8- 环戊基 -6- 乙基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮盐酸盐
将实施例 4 所制备的 4-[6-(8- 环戊基 -6- 乙基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (0.204g， 0.39mmol) 溶 于 1 ∶ 1 氯仿 / 甲醇 (16ml)， 用无水氯化氢气体吹扫。搅拌 3.5 小时后， 加入乙醚 (8ml)， 得到固体沉淀。将固体过滤， 用乙醚洗涤， 在真空中干燥， 得到 0.180g 8- 环戊基 -6- 乙 基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮盐酸盐， 为黄色 + 固体。MS(APCI) ； M +1 ： 计算值， 420.52， 实测值， 420.2.
元 素 分 析： C34H29N7O·1.2H2O·2.1HCl ： Calc’ d： C， 53.36 ； H， 6.52 ； N， 18.93， Cl(ionic)， 14.38 ； H 2O ， 4.17.Found ： C， 53.25 ； H， 6.43 ； N， 18.80 ； Cl(ionic)， 14.36 ； H 2O ， 3.87
注： 其中 ionic 为离子， Calc’ d 为计算值， found 为实测值， 下同。
实施例 6
2-[5-(4- 叔丁氧羰基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8- 环戊基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -6- 甲酸乙基酯
向甲苯 (5ml) 中加入 8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -6- 甲酸乙基酯 (0.936g， 2.68mmol) 和 4-(6- 氨基 - 吡啶 -3- 基 )- 哌嗪 -1- 甲酸 叔丁基酯 (3.0g， 10.8mmol)， 加热至 100℃达 1 小时。 加入乙醚 (10ml)， 导致固体沉淀出来。 过滤收集该固体， 用乙醚洗涤， 在真空中干燥， 得到 2-[5-(4- 叔丁氧羰基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡 啶 -2- 基氨基 ]-8- 环戊基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -6- 甲酸乙基酯， 为 + 黄色固体 (0.42g， 28％ )。MS(APCI) ； M +1 ： 计算值 564.29， 实测值 564.3
实施例 7
8- 环戊基 -7- 氧代 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -6- 甲酸乙基酯盐酸盐
将 2-[5-(4- 叔丁氧羰基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8- 环戊基 -7- 氧 代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -6- 甲酸乙基酯 (0.40g， 0.709mmol， 如实施例 6 所述制 备 ) 溶于氯仿 (15ml) 与乙醇 (15ml) 的混合物， 将溶液用无水氯化氢气体吹扫。2 小时后， 加入乙酸乙酯， 沉淀出固体， 过滤， 用乙醚洗涤， 在真空中干燥， 得到 0.4g 8- 环戊基 -7- 氧 代 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -6- 甲酸乙基 酯盐酸盐， 为黄色固体。MS(APCI) ； Mol ： 计算值， 464.53， 实测值， 464.4.元素分析 ： C24H29N7O3·0.75H2O·2.0HCl ：
Calc’ d： C， 52.41 ； H， 5.96 ； N， 17.83 ， Cl(ionic) ， 12.89 ； H2O ， 2.46.Found ： C， 52.25 ； H， 5.86 ； N， 17.85 ； Cl(ionic)， 12.10 ； H2O， 1.52
实施例 8
(8- 环戊基 -2- 甲硫基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -6- 基 )- 氨基 甲酸叔丁基酯
向无水叔丁醇 (30ml) 中加入 8- 环戊基 -2- 甲硫基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -6- 甲酸 (2.48g， 8.02mmol)、 三乙胺 (0.974g，9.63mmol)， 历经 5 分钟加入二 苯基磷酰基叠氮化物 (2.65g， 9.63mmol)， 同时搅拌。 将该混合物在 75℃下加热 18 小时。 将 混合物过滤， 固体用乙酸乙酯洗涤。浓缩洗液， 得到富集所需产物的油。将该油用己烷 / 乙 醚研制， 洗液通过硅胶和 C 盐过滤。在真空中浓缩滤液， 得到 (8- 环戊基 -2- 甲硫基 -7- 氧 代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -6- 基 )- 氨基甲酸叔丁基酯， 为结晶性固体 (1.37g， + 45％ )。MS(APCI) ： M +1 ： 计算值， 377.16， 实测值 377.2.
实施例 9
(8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -6- 基 ) 氨基甲酸叔丁基酯
向 50 ∶ 50 二氯甲烷 / 甲醇 (12ml) 中加入 (8- 环戊基 -2- 甲硫基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -6- 基 )- 氨基甲酸叔丁基酯 (1.3g， 3.45mmol， 按照实施例 8 制备 )， 继之加入 2- 苯磺酰基 -3- 苯基 - 氧氮杂环丙烷 (1.08g， 4.14mmol)。将混合物在 25℃下搅拌 3.5 小时， 蒸发得到油， 经过硅胶处理， 用氯仿洗脱。蒸发含有产物的部分， 得到 (8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -6- 基 )- 氨基甲酸 + 叔丁基酯， 为固体 (1.2g， 89％ )。MS(APCI) ； M +1 ： 计算值， 393.15， 实测值 393.1.
实施例 10
4-[6-(6- 叔丁氧基羰基氨基 -8- 环戊基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯
将 (8- 环 戊 基 -2- 甲 亚 磺 酰 基 -7- 氧 代 -7， 8- 二 氢 - 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -6- 基 )- 氨基甲酸叔丁基酯 (1.2g， 3.06m l， 按照实施例 9 制备 ) 和 4-(6- 氨基 - 吡 啶 -3- 基 )- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (2.36g， 8.48mmol) 合并在甲苯 (4ml) 中， 加热至 105℃ 达 12 小时。 将所得糊状物用甲苯稀释， 过滤， 用甲苯洗涤， 在乙醚与 1N 柠檬酸之间分配。 将 混合物过滤， 固体用水和乙醚洗涤。 然后将固体溶于氯仿， 经无水硫酸镁干燥， 过滤， 滤液用 乙醚稀释， 得到固体沉淀。过滤收集该固体， 在真空中干燥， 得到 4-[6-(6- 叔丁氧基羰基氨 基 -8- 环戊基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌 嗪 -1- 甲 酸 叔 丁 基 酯， 为 固 体 (0.311g， 17 ％ )。MS(APCI)M++1 ； 计 算 值， 607.3， 实 测 值， 607.2.
实施例 11
6- 氨基 -8- 环戊基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮盐酸盐
向 1 ∶ 1 氯仿 / 甲醇 (20ml) 加入实施例 10 中制备的 4-[6-(6- 叔丁氧基羰基氨 基 -8- 环戊基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (0.31g， 0.511mmol)， 将混合物用无水氯化氢气体吹扫， 然后在室温 下搅拌 18 小时。过滤收集所得固体， 用乙醚洗涤， 在真空中干燥， 得到 6- 氨基 -8- 环戊 基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮盐酸盐， 为黄色 + 固体 (0.202g， 100％ )。MS(APCI) ； M +1 ： 计算值， 407.48， 实测值， 407.4.
元 素 分 析： C21H26N8O·1.25 H2O·2HCl ： Calc’ d： C， 50.46 ； H， 6.02 ； N， 22.14， Cl(ionic)， 15.98 ； H 2O ， 4.58.Found ： C， 50.25 ； H， 6.13 ； N， 22.32 ； Cl(ionic)， 14.13 ； H 2O ， 4.49
实施例 12
6- 溴 -8- 环 戊 基 -2-[5-((S)-1- 甲 基 -1- 吡 咯 烷 -2- 基 )- 吡 啶 -2- 基 氨 基 ]-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮盐酸盐
向 无 水 甲 苯 (4ml) 加 入 5-(1- 甲 基 - 吡 咯 烷 -2- 基 )- 吡 啶 -2- 基 胺 (1.19g， 6.7mmol， 如 WO 01/70730 所述制备 ) 和 6- 溴 -8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (1.0g， 2.81mmol)， 将混合物在 105℃下加热 1 小时。将混合物冷却， 过滤， 用甲苯和乙醚洗涤， 在真空中干燥， 得到固体 (0.256g)。将该固体溶于氯仿 (20ml)， 用无水 氯化氢气体处理， 得到胶状沉淀。 加入甲醇 (2ml)， 导致沉淀溶解， 将该溶液加入到迅速搅拌 着的乙醚中， 得到白色沉淀。过滤收集固体， 用乙醚洗涤， 在真空中干燥， 得到 6- 溴 -8- 环 戊基 -2-[5-((R)-1- 甲基 -1- 吡咯烷 -2- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 + 啶 -7- 酮盐酸盐 (0.30g， 23 ％ )， 为白色固体。MS(APCI) ； M +1 ： 计算值， 469.13， 实测值， 469.1.
元素分析： C22H25BrN6O·0.75H2O·1.75HCl ： Calc’ d： C， 48.33 ； H， 5.20 ； N， 15.37， Cl(ionic)， 11.34 ； H 2O ， 2.47.Found ： C， 48.23 ； H， 5.29 ； N， 15.21 ； Cl(ionic)， 11.55 ； H 2O ， 3.81
实施例 13
6- 溴 -8- 环己基 -2-( 吡啶 -2- 基 - 氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
借助 WO 98/33798 所述方法制备 6- 溴 -8- 环己基 -2- 甲亚磺酰基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (1.04g， 2.81mmol)， 与 2- 氨基吡啶 (2.5g， 26.6mmol) 混合。在没有加入 溶剂的存在下， 将混合物加热至 92℃达 4 小时， 得到固体沉淀。当温度在 24-60℃之间时， 将混合物过滤， 将所得固体用甲苯洗涤， 再用氯仿洗涤， 在真空中干燥， 得到 6- 溴 -8- 环己 基 -2-( 吡啶 -2- 基 - 氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮， 为黄色固体 (0.126g， 17％ )。 + MS(APCI) ； M +1 ： 计算值， 401.27， 实测值， 401.1.
元素分析 ：
C18H18BrN5O ： Calc’ d： C， 54.01 ； H， 4.53 ； N， 17.50 ； Br， 19.96.Found ： C， 53.87 ； H， 4.52 ； N， 15.21 ； Br， 20.09.
实施例 14
6- 溴 -8- 环戊基 -2- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 ； 含有 6- 甲基 - 烟酰 胺的化合物
将 6- 溴 -8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (1.09g， 3.06mmol) 和 6- 氨基 - 烟酰胺 (2.51g， 18mmol) 合并在甲苯 (8ml) 中， 加热至 100℃达 18 小 时。然后将混合物用二甲基亚砜 (8ml) 稀释， 加热至 120℃达 2 小时。然后将混合物倒入水(120ml) 中， 同时迅速搅拌。加入乙醚， 过滤收集所得固体。将该固体用 1 ∶ 1 温热的乙酸 乙酯 / 四氢呋喃洗涤， 在真空中干燥， 得到 6- 溴 -8- 环戊基 -2- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] + 嘧啶 -7- 酮， 为黄色固体 (0.233g， 18％ )。MS(APCI) ； M +1 ： 计算值， 429.06， 实测值， 429.1.
元素分析 ： C18H17BrN6O2 ：
实施例 15
6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 6- 溴 -8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (0.2g， 0.54mmol， 按 照 WO 01/70741 实 施 例 5 制 备 ) 和 4-(6- 氨 基 - 吡 啶 -3- 基 )- 哌 嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (0.6g， 2.16mmol) 合并在甲苯 (3ml) 中， 加热至 110℃过夜。加入琥 珀酸酐 (0.2g) 猝灭反应， 冷却， 得到固体。将该固体悬浮在 CH2Cl2 中， 过滤， 得到白色固体。 将滤液用饱和含水碳酸氢钠洗涤， 再用饱和含水氯化钠洗涤， 经无水硫酸镁干燥。 粗产物经 过硅胶色谱纯化， 用 75 ％乙酸乙酯∶ 25 ％己烷洗脱， 得到 4-[6-(6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲 基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸 叔丁基酯 (0.04g， 13％ )。MS(APCI)M++1 ： 计算值， 584.19， 实测值， 584.1. 将 4-[6-(6- 溴 -8- 环 戊 基 -5- 甲 基 -7- 氧 代 -7， 8- 二 氢 - 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -2- 基 氨 基 )- 吡 啶 -3- 基 ]- 哌 嗪 -1- 甲 酸 叔 丁 基 酯 (0.04g， 0.07mmol) 悬 浮 在 CH2Cl2(10ml) 中， 加入 MeOH， 目的是形成溶液 ( 至多约 6ml)。加入 2M HCl 的乙醚溶液 (10ml)， 同时搅拌。将反应混合物在室温下搅拌总计 3 天， 然后在减压下蒸发除去溶剂。 将剩余固体悬浮在乙醚中， 过滤， 得到 6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡 啶 -2- 基 氨 基 )-8H- 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮， 为 黄 色 固 体， 在 50 ℃ 真 空 中 干 燥。 + MS(APCI) ； M +1 ： 计算值， 486.15， 实测值， 486.1.
元 素 分 析： C23H26N7OBr·2.64H2O·2.0HCl ： Calc’ d： C， 43.68 ； H， 5.55 ； N， 16.21， Cl(ionic)， 11.72.Found ： C， 44.08 ； H， 5.32 ； N， 15.23， Cl(ionic)， 11.65.
实施例 16
8- 环戊基 -6- 氟 -2- 甲亚磺酰基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 8- 环戊基 -6- 氟 -2- 甲硫基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (10.5g， 37.9mmol) 和 2- 苯磺酰基 -3- 苯基 - 氧氮杂环丙烷 (11.8g， 45.4mmol) 合并在二氯甲烷 (120ml) 中， 在室温下搅拌 18 小时。将混合物蒸发得到油， 从乙酸乙酯 / 乙醚中结晶， 过滤， 在真空中干 燥， 得到 8- 环戊基 -6- 氟 -2- 甲亚磺酰基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮， 为白色固体 (8.88g， 79.6％ )。 1
H NMRδ(400MHz， CDCl3)8.94(s， 1H)， 7.25(d， 1H)， 6.06-5.99(m， 1H)， 2.98(s， 3H)， 2.28-2.21(m， 2H)， 2.18-2.12(m， 2H)， 2.02-1.94(m， 2H)， 1.74-1.67(m， 2H).
实施例 17
4-[6-(8- 环戊基 -6- 氟 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 ) 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯
向 甲 苯 (8ml) 加 入 8- 环 戊 基 -6- 氟 -2- 甲 亚 磺 酰 基 -8H- 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮 (2.0g， 6.77mmol， 按照实施例 16 制备 ) 和 4-(6- 氨基 - 吡啶 -3- 基 )- 哌嗪 -1- 甲 酸叔丁基酯 (6.0g， 21mmol)， 加热至 98℃达 18 小时。将混合物过滤， 用甲苯洗涤， 将固体悬
浮在乙醚中。将混合物过滤， 将固体溶于氯仿， 用 1N 柠檬酸、 盐水洗涤， 经无水硫酸镁干燥。 将粗产物用乙醚研制， 在真空中干燥， 得到 4-[6-(8- 环戊基 -6- 氟 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯， 为固体 (0.88g， + 25％ )。MS(APCI)M +1 ： 计算值， 510.3， 实测值 510.2.
实施例 18
8- 环戊基 -6- 氟 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮盐酸盐
将实施例 17 中制备的 4-[6-(8- 环戊基 -6- 氟 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (0.195g， 0.38mmol) 溶于 1 ∶ 1 氯仿 / 甲醇 (8ml)， 用无水氯化氢气体吹扫， 在室温下搅拌 2.5 小时。 向该混合物加入 乙醚 (15ml)， 得到沉淀， 过滤， 用乙醚洗涤， 在真空中干燥， 得到 8- 环戊基 -6- 氟 -2-(5- 哌 嗪 -1- 基 - 吡 啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮盐酸盐， 为黄色固体 (0.177g， + 88％ )。MS(APCI) ； M +1 ： 计算值， 410.46， 实测值， 410.3.
元 素 分 析： C21H24N7O·1.0H2O·2.0HCl ： Calc’ d： C， 50.73 ； H， 5.75 ； N， 19.46， Cl(ionic)， 13.77 ； H 2O ， 1.41.Found ： C， 50.41 ； H， 5.64 ； N， 19.59 ； Cl(ionic)， 14.16 ； H 2O ， 3.60.
实施例 19
4-[6-(8- 环戊基 -6- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨 基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯
将 8- 环戊基 -6- 甲基 -2- 甲亚磺酰基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (1.0g， 3.43mmol) 加入到 4-(6- 氨基 - 吡啶 -3- 基 )- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (1.91g， 6.86mmol) 的甲苯 (5ml) 溶液中。将混合物加热至 100 ℃历经 18 小时， 然后用乙醚处理， 生成沉淀。 过滤收集该沉淀， 然后在真空中干燥， 得到 4-[6-(8- 环戊基 -6- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二 氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯， 为黄色固 + 体 (0.411g)。MS(APCI)M +1 ： 计算值， 506.28， 实测值 506.2.
实施例 20
8- 环戊基 -6- 甲基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮盐酸盐
将实施例 19 中制备的 4-[6-(8- 环戊基 -6- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (0.411g， 0.813mmol) 溶于甲 醇 / 氯仿的 1 ∶ 1 混合物， 用无水氯化氢气体吹扫， 在室温下搅拌 2 小时， 加入乙醚， 沉淀出 固体。将悬液过滤， 在真空中干燥残余物， 得到 8- 环戊基 -6- 甲基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡 啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮盐酸盐， 为黄色固体 (0.393g)。(APCI) ； + M +1 ： 计算值， 406.50， 实测值， 406.2.
元素分析 ：
C22H27N7O·2.85H2O·2.2HCl ： Calc’ d： C， 49.20 ； H， 6.55 ； N， 18.26， Cl(ionic)， 14.52 ； H2O， 9.56
Found ： C， 49.43 ； H， 6.32 ； N， 17.87 ； Cl(ionic)， 14.38 ； H2O， 7.35
实施例 214-[6-(8- 环戊基 -6- 异丁氧基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基 氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯
将含 60 ％氢化钠的油 (0.182g， 4.4mmol) 用己烷洗涤， 加入到 2- 甲基 -1- 丙醇 (10ml) 中。该混合物泡腾， 形成溶液。向该溶液加入 4-[6-(8- 环戊基 -6- 氟 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (0.225g， 0.44mmol， 如实施例 17 所述制备 )， 将混合物在 95℃下加热 72 小时。蒸发溶剂， 将残余物 溶于乙醚， 然后过滤。蒸发滤液， 得到 4-[6-(8- 环戊基 -6- 异丁氧基 -7- 氧代 -7， 8- 二 氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯， 为结晶性 + 固体 (0.092g， 37％ )。MS(APCI)M +1 ： 计算值， 564.3， 实测值 564.3.
实施例 22
8- 环戊基 -6- 异丁氧基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮盐酸盐
将 4-[6-(8- 环 戊 基 -6- 异 丁 氧 基 -7- 氧 代 -7， 8- 二 氢 - 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (0.067g， 0.119mmol) 溶于氯仿 (5ml)， 冷却至 0℃。将该溶液用无水氯化氢气体吹扫， 用塞子塞住 3 小时。向混合物加入 乙醚， 得到沉淀， 过滤， 在真空中干燥， 得到 8- 环戊基 -6- 异丁氧基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡 啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮盐酸盐， 为固体 (0.056g)。 MS(APCI) ； M++1 ： 计算值， 464.5， 实测值， 464.3.
元 素 分 析： C25H33N7O2·1.0H2O·2.0HCl ： Calc’ d： C， 54.15 ； H， 6.72 ； N， 17.68， Cl(ionic)， 12.78 ； H 2O ， 3.25.Found ： C， 54.18 ； H， 6.98 ； N， 17.51 ； Cl(ionic)， 12.15 ； H 2O ， 2.60.
实施例 23
4-[6-(6- 苄基 -8- 环戊基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨 基 ) 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯
将 6- 苄基 -8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (0.64g， 1.74mmol) 与 4-(6- 氨基 - 吡啶 -3- 基 )- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (0.87g， 2.96mmol) 的甲 苯 (10ml) 溶液加热至 95℃达 28 小时。 使反应混合物冷却， 然后经过硅胶色谱处理， 用含 20 至 50％乙酸乙酯的己烷梯度洗脱。蒸发含有产物的部分， 将残余物用乙腈研制， 得到固体。 过滤收集该固体， 在真空中干燥， 得到 4-[6-(6- 苄基 -8- 环戊基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶 并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (0.201g， 19.8％ )。 + MS(APCI)M +1 ： 计算值， 582.31， 实测值， 582.3.
实施例 24
6- 苄基 -8- 环戊基 -2-(5- 哌嗪 -1- 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮盐酸盐
将实施例 23 中制备的 4-[6-(6- 苄基 -8- 环戊基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (0.21g， 0.36mmol) 溶于 1 ∶ 1 氯仿∶甲醇 (15ml)， 用无水氯化氢气体吹扫， 用塞子塞住 3 小时。将混合物倒入乙醚 (50ml) 中， 得到沉淀， 过滤， 在真空中干燥， 得到 6- 苄基 -8- 环戊基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡 啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮盐酸盐 (0.162g)。元素分析 ：
C28H31N72·1.5H2O·1.5HCl ： Calc’ d： C， 57.26 ； H， 6.09 ； N， 16.69， Cl(ionic)， 9.05 ； H2O， 4.60.Found ： C， 57.95 ； H， 6.23 ； N， 16.80 ； Cl(ionic)， 9.87 ； H2O， 4.59.
实施例 25
6- 溴甲基 -8- 环戊基 -2- 甲硫基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 8- 环 戊 基 -6- 甲 基 -2- 甲 硫 基 -8H- 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮 (3.5g， 12.7mmol) 与 N- 溴琥珀酰亚胺 (2.6g， 14.6mmol) 的四氯化碳 (100ml) 溶液用紫外光照射， 使温度达到 45 ℃历经 3 小时。将混合物过滤， 用稀亚硫酸钠溶液洗涤， 再用盐水洗涤， 经 无水硫酸镁干燥。粗产物经过硅胶色谱处理， 用 1 ∶ 1 乙酸乙酯∶己烷洗脱， 得到 6- 溴甲 基 -8- 环戊基 -2- 甲硫基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮， 为结晶性固体 (1.46g， 32％收 率 )，mp 103-105℃。
实施例 26
乙酸 8- 环戊基 -2- 甲硫基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -6- 基甲 基酯
向冰乙酸 (10ml) 加入实施例 25 中制备的 6- 溴甲基 -8- 环戊基 -2- 甲硫基 -8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (1.33g， 3.75mmol) 和乙酸银 (1.03g， 6.2mmol)， 加热至 110℃达 5 小时。然后在减压下蒸发溶剂， 将所得残余物悬浮在乙酸乙酯中， 过滤。使所得固体从乙 酸乙酯中重结晶， 得到乙酸 8- 环戊基 -2- 甲硫基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 + 啶 -6- 基甲基酯， 为固体 (0.89g， 71％ )。MS(APCI)M +1 ； 计算值 334.11， 实测值 334.2.
实施例 27
乙酸 8- 环戊基 -2- 甲磺酰基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -6- 基 甲基酯
将实施例 26 中制备的乙酸 8- 环戊基 -2- 甲硫基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -6- 基甲基酯 (0.85g， 2.55mmol) 和 2- 苯磺酰基 -3- 苯基 - 氧氮杂环丙烷 (0.8g， 3.06mmol) 混合在二氯甲烷 (20ml) 中， 在室温下搅拌 5 小时。 向该混合物加入乙醚， 得到固 体沉淀， 过滤， 在真空中干燥， 得到乙酸 8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡 + 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -6- 基甲基酯， 为固体 (0.81g， 91％ )。MS(APCI)M +1 ； 计算值 350.41， 实 测值 350.2.
实施例 28
4-[6-(6- 乙 酰 氧 基 甲 基 -8- 环 戊 基 -7- 氧 代 -7， 8- 二 氢 - 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯
向甲苯 (8ml) 加入将实施例 27 中制备的乙酸 8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -7- 氧 代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -6- 基甲基酯 (0.80g， 2.29mmol) 和 4-(6- 氨基 - 吡 啶 -3- 基 )- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (1.17g， 4.20mmol)， 加热至 96℃达 6 小时。 使反应混合 物冷却， 然后过滤， 残余物用甲苯洗涤。将所得固体在真空中干燥， 然后从氯仿 / 乙醚中重 结 晶， 得到 4-[6-(6- 乙酰氧基甲基 -8- 环戊基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯， 为固体 (0.213g， 16.5％ )。 MS(APCI) + M +1 ； 计算值， 564.2， 实测值， 564.3.
实施例 298- 环戊基 -6- 羟甲基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮盐酸盐
将实施例 28 中制备的 4-[6-(6- 乙酰氧基甲基 -8- 环戊基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (0.21g， 0.36mmol) 溶于 1 ∶ 1 氯仿∶甲醇 (8ml)， 将该溶液用无水氯化氢气体吹扫， 然后在室温下搅拌 3 小时。 将该混合物加入到乙醚 (50ml) 中， 得到固体， 过滤收集， 用乙醚洗涤， 然后在真空中干燥， 得到 8- 环戊基 -6- 羟甲基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 + 啶 -7- 酮盐酸盐， 为固体 (0.17g， 93％ )。MS(APCI) ； M +1 ： 计算值， 422.5， 实测值， 422.2.
元 素 分 析： C22H27N7O2·1.0H2O·2.0HCl ： Calc’ d： C， 51.56 ； H， 6.10 ； N， 19.13， Cl(ionic)， 13.84 ； H 2O ， 3.51.Found ： C， 51.13 ； H， 5.95 ； N， 19.05 ； Cl(ionic)， 13.70 ； H 2O ， 0.67.
实施例 30
2-[5-(4- 叔丁氧羰基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8- 环戊基 -5- 甲基 -7- 氧 代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -6- 甲酸乙基酯
将 6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2- 甲硫基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (442mg， 1.25mmol， 按照 WO 01/70741 实施例 9 制备 )、 Pd(OAc)2(312mg， 1.4mmol)、 双 ( 二苯基膦基 ) 丙烷 (400mg， 0.97mmol) 与 N， N- 二异丙基乙胺 (1.1g， 8.87mmol) 在 EtOH(20ml) 中的混合 物在约 600PSI CO 下搅拌， 加热至 100℃达 16 小时。将所得溶液过滤， 在减压下浓缩滤液， 得到橙色的油， 经过色谱纯化 (20％乙酸乙酯 / 己烷 )， 得到 8- 环戊基 -5- 甲基 -2- 甲硫 基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -6- 甲酸乙基酯， 为油 (138mg， 36％收率 )。 + M +1 ： 计算值 .348.4， 实测值， 348.2.
将 8- 环戊基 -5- 甲基 -2- 甲硫基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -6- 甲 酸乙基酯 (138mg， 0.40mmol) 溶于 CH2Cl2(6ml)， 加入 2- 苯磺酰基 -3- 苯基氧氮杂环丙烷 (155mg， 0.6mmol)。将反应混合物在室温下搅拌 18 小时， 然后可在减压下除去溶剂， 剩余残 余物经过制备型 TLC 纯化 (50％乙酸乙酯 / 己烷 )。 将更高极性的含有产物的部分用 CH2Cl2 萃取， 蒸发溶剂， 得到 8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 + [2， 3-d] 嘧啶 -6- 甲酸乙基酯， 为白色固体 (110mg， 75.7％ )。M +1 ： 计算值 .364.4， 实测值 364.2.
将 8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -6- 甲酸乙基酯 (110mg， 0.30mmol) 与 4-(6- 氨基 - 吡啶 -3- 基 )- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (310mg， 1.1mmol) 的甲苯溶液在 100℃下加热 10 小时， 然后冷却至室温。 向反应混合物加入 乙醚， 产物沉淀出来。 过滤收集该沉淀， 干燥， 得到 2-[5-(4- 叔丁氧羰基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡 啶 -2- 基氨基 ]-8- 环戊基 -5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -6- 甲酸 + 乙基酯 (50mg， 29％ )。M +1 ： 计算值 .578.3， 实测值 578.4.
实施例 31
8- 环戊基 -5- 甲基 -7- 氧代 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-7， 8- 二氢 - 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -6- 甲酸乙基酯盐酸盐
在室温下， 将无水 HCl 气体通入 2-[5-(4- 叔丁氧羰基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基 氨基 ]-8- 环戊基 -5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -6- 甲酸乙基酯(50mg， 0.086mmol， 如实施例 30 所述制备 ) 的 CH2Cl2/EtOH 溶液， 将反应搅拌 24 小时。 向反应 混合物加入乙醚， 有固体沉淀出来， 分离， 干燥， 得到 8- 环戊基 -5- 甲基 -7- 氧代 -2-(5- 哌 嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -6- 甲酸乙基酯盐酸盐， 为 + 黄色固体 (12mg， 29％ )。mp 216-218℃ .M +1 ； 计算值 .478.6， 实测值 478.1.HPLC， 保留时 间： 5.77min.
实施例 32
4-[6-(6- 乙酰基 -8- 环戊基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨 基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯
将 三 丁 基 (1- 乙 氧 基 乙 烯 基 ) 锡 (0.39ml， 1.15mmol) 加 入 到 实 施 例 2 中 制 备 的 4-[6-(6- 溴 -8- 环戊基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡 啶 -3- 基 ]- 哌 嗪 -1- 甲 酸 叔 丁 基 酯 (440mg， 0.77mmol) 与 四 ( 三 苯 膦 ) 钯 (0)(88mg， 0.077mmol) 在甲苯 (5ml) 中的混合物中。将反应混合物在 110℃下加热 1 小时， 然后冷却 至室温。过滤收集所生成的固体， 用甲苯洗涤， 然后干燥， 得到 4-[6-(6- 乙酰基 -8- 环戊 基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸 + 叔丁基酯。M +1 ： 计算值 .534.6， 实测值 534.2. 实施例 33
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮盐酸盐
在室温下， 将无水 HCl 气体通入 4-[6-(6- 乙酰基 -8- 环戊基 -7- 氧代 -7， 8- 二 氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (398mg， 0.74mmol， 如实施例 32 所述制备 ) 的 MeOH/CH2Cl2(10ml/10ml) 溶液中达约 5min。将反应 混合物搅拌过夜， 然后在减压下除去溶剂。将剩余固体用热乙酸乙酯研制， 干燥， 得到 6- 乙 酰基 -8- 环戊基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 盐酸盐 (329mg， 76％ )。mp ＞ 300℃ .
元素分析计算值 ：
C 23H 27N 7O 2.4.25HCl ： C， 46.94 ； H， 5.35 ； N， 16.66.Found ： C， 46.77 ； H， 5.33 ； N， + 16.30.M +1 ： Calc’ d： 434.2， Found 434.2.
实施例 34
4-[6-(6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基 氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯
将 6- 溴 -8- 环 戊 基 -2- 甲 亚 磺 酰 基 -5- 甲 基 -8H- 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮 (10.00g， 0.027mol， 如 WO 01/707041 实施例 6 所述制备， 引入此作为参考 ) 与 10.37g(0.0373mol)4-(6- 氨基 - 吡啶 -3- 基 )- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯的甲苯 (100ml) 悬浮 液在氮下、 在油浴中加热 7 小时。 薄 层色谱 (SiO2， 10％ MeOH/DCM) 表明两种原料都有剩余。 将悬液在回流下加热另外 18 小时。将所得悬液冷却至室温， 过滤， 得到 4-[6-(6- 溴 -8- 环 戊基 -5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌 嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (5.93g， 38％ )。mp ＞ 250℃ .MS(APCI) ； M++1 ： 计算值， 584.2， 实测值，
584.2
实施例 354-{6-[8- 环戊基 -6-(1- 乙氧基 - 乙烯基 )-5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 ]- 吡啶 -3- 基 }- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯
将 4-[6-(6- 溴 -8- 环 戊 基 -5- 甲 基 -7- 氧 代 -7， 8- 二 氢 - 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (5.93g， 0.010mol， 如实施例 34 所述制备 )、 四 ( 三苯膦 ) 钯 (0)(1.40g， 0.00121mol) 与三丁基 (1- 乙氧基乙烯基 ) 锡 (5.32ml， 0.0157mol) 的甲苯 (30ml) 悬浮液在回流下加热 3.5 小时。将混合物冷却， 过滤， 得到固体。固体经过硅胶色谱纯化， 使用 5-66％乙酸乙酯 / 己烷历经 15 分钟的梯度洗脱， 得到 4-{6-[8- 环戊基 -6-(1- 乙氧基 - 乙烯基 )-5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 ]- 吡啶 -3- 基 }- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯， 为黄色泡沫 (4.50g， 78％ )。 + MS(APCI)M +1 ； 计算值 576.2， 实测值， 576.3.
实施例 36
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶 并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮盐酸盐
将氯化氢气体通入冰浴冷却的 4-{6-[8- 环戊基 -6-(1- 乙氧基 - 乙烯基 )-5- 甲 基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 ]- 吡啶 -3- 基 }- 哌嗪 -1- 甲酸 叔丁基酯 (4.50g， 0.00783mol， 如实施例 35 所述制备 ) 的 DCM(100ml) 溶液中。用塞子塞 住所得悬液， 在室温下搅拌过夜， 然后用乙醚 (200ml) 稀释。过滤收集固体， 用乙醚洗涤， 干 燥， 得到 6- 乙酰基 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶 并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮的盐酸盐， 为黄色固体 (4.01g， 92％ )。mp 200℃ .HPLC， C18 反相， 10-95％梯度的 0.1％ TFA/CH3CN 的 0.1％ TFA/H2O 溶液， 在 22 分钟内 ： 99.0％， 11.04 分钟 . +
MS(APCI) ； M +1 ： 计算值 448.2， 实测值 448.3 ；
元 素 分 析 计 算 值： C24H29N7O2·2.4H2O·1.85HCl ： C， 51.64 ； H， 6.44 ； N， 17.56， Cl(total)， 11.75.Found ： C， 51.31 ； H， 6.41 ； N， 17.20 ； Cl(total)， 12.11.
实施例 37
6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-( 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 6- 溴 -8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (370mg， 1mmol， 如 WO 01/707041 实施例 6 所述制备， 引入此作为参考 ) 与 2- 氨基吡啶 (140mg， 1.5mmol) 在甲苯 (5ml) 中的混合物在 110 ℃下加热 18 小时， 然后冷却至室温。 过滤收集所生成的固体， 用甲苯洗涤， 再用丙酮洗涤， 在真空中干燥， 得到 6- 溴 -8- 环戊 基 -5- 甲基 -2-( 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮， 为米色固体 (22mg， 30％ )。mp 267-268℃ .
元 素 分 析 计 算 值： C18H18BrN5O.0.33H2O ： C， 53.22 ； H， 4.63 ； N， 17.24.Found ： C， 52.88 ； H， 4.38 ； N， 17.04.
实施例 38
6- 溴 -8- 环戊基 -2-( 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
按照实施例 37 所述工艺， 使 6- 溴 -8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮与 2- 氨基吡啶反应， 得到 6- 溴 -8- 环戊基 -2-( 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮， 37％收率。mp ： 273-275℃ .
元 素 分 析 计 算 值： C17H16BrN5O.0.1H2O ： C， 52.62 ； H， 4.21 ； N， 18.05.Found ： C，52.23 ； H， 4.10 ； N， 17.91.M++1 ： Calc’ d： 386.05， Found 385.9.
实施例 39
8- 环戊基 -2- 甲硫基 -7- 氧代 -78- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -6- 甲酸 乙基酯
在 -20℃氮下， 向 4- 环戊氨基 -2- 甲硫基 - 嘧啶 -5- 甲酸乙基酯 (92g， 8mmol) 的 THF(80ml) 溶液加入吡啶 (2.6ml， 32mmol)， 继之以 TiCl4(1.75ml， 16mmol) 的 CH2Cl2(20ml) 溶液。除去冷却浴， 将反应混合物在室温下搅拌 1 小时。将反应用水 (10ml) 猝灭， 然后 用乙醚稀释， 用饱和氯化铵水溶液洗涤三次， 再用盐水洗涤一次。有机层经无水硫酸镁干 燥。除去干燥剂， 蒸发溶剂， 得到黄色的油， 无需进一步纯化即可使用。将该油溶于无水 DMF(150ml)， 用 1， 8- 二氮杂二环 [5.4.0] 十一碳 -7- 烯 (119μl， 0.8mmol) 处理。将所得 溶液加热至 80℃达 1 小时， 然后冷却至室温， 用乙酸乙酯稀释。将该混合物用水洗涤， 再用 饱和氯化铵水溶液洗涤 (3 次 )， 再用盐水洗涤。将有机层经无水硫酸镁干燥， 然后过滤， 在真空中除去溶剂， 得到褐色的油， 结晶， 在室温下放置后得到黄色固体。过滤收集该固 体， 用乙酸乙酯冲洗， 然后在真空中干燥。浓缩滤液， 经过硅胶色谱处理， 用含 20-50％乙酸 乙酯的己烷洗脱， 得到额外的产物， 除去溶剂后为固体。合并两份固体， 得到所需产物， 即 8- 环戊基 -2- 甲硫基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -6- 甲酸乙基酯 (1.2g)， 1 两步收率为 42 ％。 H NMRδ(400MHz， CDCl3)8.64(s， 1H)， 8.23(s， 1H)， 5.90-5.99(m， 1H)， 4.37(q， J ＝ 1.8Hz， 2H)， 2.60(s， 3H)， 2.27-2.35(m， 2H)， 2.02-2.10(m， 2H)， 1.81-1.89(m， 2H)， 1.63-1.70(m， 2H)， 1.37(t， J ＝ 7Hz， 3H).
实施例 40
8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -6- 甲酸乙 基酯
将 8- 环戊基 -2- 甲硫基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -6- 甲酸乙 基酯 (1.2g， 3.6mmol) 溶于 CH2Cl2(20ml)， 在室温下用 2- 苯磺酰基 -3- 苯基 - 氧氮杂环丙 烷 (1.13g， 4.32mmol) 处理， 搅拌 1 天。在减压下浓缩后， 粗反应混合物经过硅胶色谱处理， 用乙酸乙酯洗脱， 得到 8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 + 啶 -6- 甲酸乙基酯， 为白色固体 (0.85g， 68 ％ )。MS(APCI) ； M +1 ： 计算值， 350.1， 实测值 350.0.
实施例 41
4-(6- 硝基 - 吡啶 -3- 基 )- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯
将 5- 溴 -2- 硝基吡啶 (203g， 1.365mol)、 碘化四正丁基铵 (25.2g， 0.068mol)、 哌 嗪 (152.8g， 1.774mol) 和碳酸钾 (207.44g， 1.50mol) 混合在 DMSO(2.6L) 中。使反应混合 物温热至 80℃， 放热至 100℃。使混合物冷却回 80℃， 在该温度下维持过夜。冷却至室温 后， 将反应混合物倒入水 (7L) 中， 过滤收集所得固体。将该固体用二氯甲烷研制两次 ( 每 次 1L)。 含水母液用氯仿萃取 (4x2L)， 合并有机层， 用水 (2L) 洗涤， 再用盐水 (2L) 洗涤。 将 母液用氯仿再萃取 (3x2L)， 继之以盐水洗涤 (1.5L)。合并有机萃取液， 浓缩， 得到橙色固体 (490.46g)， 无需进一步纯化即可使用。将该固体溶于 THF(2L)， 加入水 (500ml) 和碳酸氢 钠 (119.22g， 1.419mol)， 继之以历经 2.5 小时分批加入二碳酸二叔丁酯 (262g， 1.2mol)， 以 便温度不升至 26℃以上。3 小时后， 在减压下除去挥发性物质， 将残余物用水 (1L) 稀释， 用 二氯甲烷萃取 (3x1L)。合并有机层， 用水 (1L) 洗涤。该水然后用更多的二氯甲烷 (300ml)反萃取。合并有机萃取液， 用硫酸镁干燥， 过滤， 浓缩， 得到褐色固体。使该物质在 2.0L 乙 酸乙酯中温热至 60℃。在 60℃下， 过滤除去固体， 得到产物 4-(6- 硝基 - 吡啶 -3- 基 )- 哌 嗪 -1- 甲酸叔丁基酯， 为橙色固体 (190.93g， 62％ )。
实施例 42
4-(6- 氨基 - 吡啶 -3- 基 )- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯
将 4-(6- 硝基 - 吡啶 -3- 基 )- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (83g， 0.269mol) 加阮内 镍 (15g， 50 ％水浆液 ) 的甲醇 (1.3L) 溶液置于 Parr 摇动器中， 在 50psi 氢下氢化 5 小 时。将反应混合物通过 C 盐垫过滤， 浓缩得到褐色固体。将该物质用乙醚 (120ml) 研制 4 小时。加入庚烷， 将混合物冷却至 0℃达 45 分钟。过滤收集固体， 干燥， 得到产物 4-(6- 氨 基 - 吡啶 -3- 基 )- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯， 为黄褐色固体 (62.46g， 83％ )。 mp 130-132℃ . + MS(ESI) ； M +1 ： 计算值， 279.2， 实测值 279.
元素分析计算值 ： C14H22N4O3 ： C， 60.41 ； H， 7.97 ； N， 20.13.Found ； C， 60.45 ； H， 7.60 ； N， 19.87.
实施例 43
6- 溴 -8- 环己基 -2- 甲亚磺酰基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 8- 环己基 -2- 甲硫基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (4g， 14.5mmol) 溶于 二甲基甲酰胺 (100ml)， 向该溶液加入 N- 溴琥珀酰亚胺 (3.9g， 21.8mmol) 和过氧化苯甲酰 (0.53g， 2.2mmol)。将反应混合物在室温下搅拌 3 天， 然后用乙酸乙酯稀释， 用水洗涤， 再用 饱和碳酸氢钠水溶液洗涤两次。将有机层经硫酸镁干燥， 过滤， 蒸发， 得到 6- 溴 -8- 环己 基 -2- 甲硫基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮， 为奶油色固体 (8g)。将这种粗的中间体 重新溶于 CH2Cl2， 用 2- 苯磺酰基 -3- 苯基 - 氧氮杂环丙烷 (3.78g， 14.5mmol) 处理。将所 得溶液在室温下搅拌过夜， 然后在减压下浓缩， 经过硅胶色谱处理， 用乙酸乙酯洗脱， 得到 6- 溴 -8- 环己基 -2- 甲亚磺酰基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮， 为无色固体 (3.72g， 67 1 ％ )。 HNMR ： (400MHz， CDCl3)8.90(s， 1H)， 8.13(s， 1H)， 5.41(br s， 1H)， 2.96(s， 3H)， 2.58-1.70(m， 2H)， 1.87(br d， J ＝ 13Hz， 2H)， 1.31-1.47(m， 2H)， 1.28(t， J ＝ 3Hz， 2H).
实施例 44
6- 溴 -8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 8- 环戊基 -2- 甲硫基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (5g， 19mmol) 悬浮在 二甲基甲酰胺 (80ml) 中， 用 N- 溴琥珀酰亚胺 (5.1g， 28.7mmol) 和过氧化苯甲酰 (0.7g， 2.87mmol) 处理。 在室温下搅拌 5 小时后， 将反应混合物用乙酸乙酯稀释， 用水、 饱和碳酸氢 钠水溶液和盐水洗涤， 有机层然后经硫酸镁干燥。 过滤和除去溶剂后， 粗产物经过硅胶色谱 处理， 用 20％乙酸乙酯∶ 80％己烷洗脱， 得到 6- 溴 -8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -8H- 吡啶 并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮， 为绒毛状白色固体 (4.2g， 65％ )。 1
H NMR ： (400MHz， CDCl3)8.56(s， 1H)， 7.98(s， 1H)， 5.97-6.05(m， 1H)， 2.59(s， 3H)， 2.22-2.29(m， 2H)， 2.06-2.07(m， 2H)， 1.86-1.88(m， 2H)， 1.64-1.68(m， 2H).
实施例 45
8- 环戊基 -6- 碘 -5- 甲基 -2- 甲硫基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将硫化物 8- 环戊基 -5- 甲基 -2- 甲硫基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (7.03g，25.51mmol) 和碘 (7.12g， 28.06mmol) 合并在无水二氯甲烷 (120ml) 中。将混合物避光， 在 室温下搅拌 27 分钟。一次性加入双 ( 三氟乙酰氧基 ) 碘苯 (13.16g， 30.61mmol)， 将反应混 合物加热至 37℃达 2 小时， 然后冷却至室温达 2 小时。加入 50％ (w/v) 硫代硫酸钠水溶液 (114ml)， 将两相搅拌 30 分钟， 然后分离。 水相用二氯甲烷 (50ml) 萃取， 合并有机相， 用 50％ (w/v) 硫代硫酸钠水溶液 (50ml) 和水 (4x130ml) 洗涤。 将有机相干燥， 过滤， 在真空中浓缩， 得到粗产物， 经过色谱纯化 (15％庚烷 / 二氯甲烷 )， 得到 8- 环戊基 -6- 碘 -5- 甲基 -2- 甲 硫基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (5.94g， 58 ％ )， 为白色固体。MS(ESI) ； M++1 ： 计算 1 值， 401， 实测值 401. H NMRδ(300MHz， CDCl3)8.91(s， 1H)， 6.12-6.00(m， 1H)， 2.70(s， 3H)， 2.62(s， 3H)， 2.30-2.24(m， 2H)， 2.15-2.08(m， 2H)， 1.93-1.81(m， 2H)， 1.75-1.57(m， 2H)
实施例 46
8- 环戊基 -6- 碘 -2- 甲亚磺酰基 -5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 8- 环戊基 -6- 碘 -5- 甲基 -2- 甲硫基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (1.51g， 3.76mmol) 和 2- 苯 磺 酰 基 -3- 苯 基 氧 氮 杂 环 丙 烷 (0.98g， 3.76mmol) 合 并 在 二 氯 甲 烷 (14ml) 中， 在室温下搅拌， 直至没有原料剩余。在真空中除去溶剂， 残余物经过色谱纯化 ( 梯度 ： 含 50％乙酸乙酯的庚烷至 100％乙酸乙酯 )， 得到 8- 环戊基 -6- 碘 -2- 甲亚磺酰 基 -5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (1.16g， 74％ )， 为白色固体。MS(ESI) ； M++1 ： 计算值， 418， 实测值 418. 1
H NMRδ(300MHz， CDCl3)9.13(s， 1H)， 6.14-6.02(m， 1H)， 2.98(s， 3H)， 2.80(s， 3H)， 2.27-2.06(m， 4H)， 2.00-1.87(m， 2H)， 1.72-1.63(m， 2H).
实施例 47
6- 溴 -8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
按 照 8- 环 戊 基 -6- 碘 -2- 甲 亚 磺 酰 基 -5- 甲 基 -8H- 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮所述工艺， 从 6- 溴 -8- 环戊基 -2- 甲硫基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮制 备。 MS(APCI)Calc’ d forC13H14BrN3O2S ： 357， 355.0.Found ： 1 358(M+1)， 356. H NMRδ(400MHz， DMSO-d6)9.14(s， 1H)， 8.63(s， 1H)， 5.91-5.86(m， 1H)， 2.89(s， 3H)， 2.15(br s， 2H)， 2.04(brs， 2H)， 1.87-1.79(m， 2H)， 1.61-1.58(m， 2H).
实施例 48
6- 溴 -8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
按照 8- 环戊基 -6- 碘 -2- 甲亚磺酰基 -5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 所述工艺， 从 6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2- 甲硫基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮制 备。 MS(APCI)Calc’ d for C14H16BrN3O2S ： 371.01， 369.01.Found ： 1 372.9(M+1)， 371.9. H NMRδ(400MHz， CDCl3)9.01(s， 1H)， 6.06-5.97(m， 1H)， 2.93(s， 3H)， 2.67(s， 3H)， 2.21-2.11(m， 2H)， 2.10-2.04(m， 2H)， 1.94-1.87(m， 2H)， 1.67-1.62(m， 2H).
实施例 49
4-[6-(8- 环戊基 -6- 碘 -5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基 氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯
在密封的试管中， 将 8- 环戊基 -6- 碘 -2- 甲亚磺酰基 -5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮 (100mg， 0.240mmol) 与 2- 氨 基 -4- 叔 丁 氧 羰 基 - 哌 嗪 基 吡 啶 (96mg，0.34mmol) 的无水甲苯 (3ml) 溶液加热至 110-120 ℃达 42 小时。将混合物冷却至室温， 用二氯甲烷 (20ml) 稀释。将该混合物用水 (10ml) 和盐水 (10ml) 洗涤， 然后经无水硫酸 钠干燥， 滗析， 在减压下浓缩， 得到固体， 用甲苯研制， 得到 4-[6-(8- 环戊基 -6- 碘 -5- 甲 基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌 嗪 -1- 甲 酸 叔 丁 基 酯 (63mg， 41 ％ )， 为 黄 色 - 橙 色 固 体。MS(ESI) ； M++1 ： 计 算 值， 632， 实测值 1 632. HNMRδ(300MHz， CDCl3)8.88(s， 1H)， 8.73(bs， 1H)， 8.19(d， J ＝ 9.1Hz， 1H)， 8.08(d， J ＝ 2.8Hz， 1H)， 7.33(dd， J ＝ 3， 9.1Hz， 1H)， 5.99(pent.J ＝ 8.7Hz， 1H)， 3.64-3.60(m， 4H)， 3.15-3.11(m， 4H)， 2.69(s， 3H)， 2.35-2.28(m， 2H)， 2.13-2.09(m， 2H)， 1.89-1.86(m， 2H)， 1.71-1.63(m， 2H)， 1.50(s， 9H).
实施例 50
8- 环戊基 -6- 碘 -5- 甲基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 4-[6-(8- 环 戊 基 -6- 碘 -5- 甲 基 -7- 氧 代 -7， 8- 二 氢 - 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (60mg， 0.096mmol) 与无水二氯 甲烷 (4ml) 在氮下用三氟乙酸 (0.4ml， 5mmol) 历经 10 分钟逐滴处理。搅拌 2.6 小时后， 在减压下浓缩反应混合物。将所得残余物溶于二氯甲烷 (2x2ml)， 在减压下浓缩。然后将 残余物用无水乙醚研制 (2x2ml)， 得到 63mg 橙色固体。使该固体在二氯甲烷与饱和含水 碳酸氢钠之间分配。过滤除去不溶性物质。水层用二氯甲烷萃取 (2x10ml)， 合并有机溶 液， 经硫酸钠干燥， 滗析， 在减压下浓缩， 得到黄色残余物， 经过色谱纯化 ( 含 5％甲醇的二 氯甲烷 +1 ％ NH4OH)， 得到 8- 环戊基 -6- 碘 -5- 甲基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨 基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮， 为黄色固体 (15mg， 28 ％ )。Mp ＞ 240 ℃ .MS(ESI) ； 1 M+1 ： 计算值， 532， 实测值 532. H NMRδ(300MHz， CDCl3)8.79(s， 1H)， 8.16d， J ＝ 9.1Hz， 1H)， 8.02(d， J ＝ 2.8Hz， 1H)， 7.84(s， 1H)， 8.02(d， J ＝ 2.8Hz， 1H)， 7.84(s， 1H)， 7.35-7.31(m， 1H)， 5.99(pent.J ＝ 8.7Hz， 1H)， 3.20-3.13(m， 4H)， 3.08-3.05(m， 4H)， 2.69(s， 3H)， 2.34-2.25(m， 2H)， 2.11-2.02(m， 2H)， 1.89-1.86(m， 2H)， 1.71-1.63(m， 2H).
实施例 51
8- 环戊基 -6- 乙基 -2-(4- 羟基 -3， 4， 5， 6- 四氢 -2H-[1， 3′ ] 联吡啶 -6′ - 基 氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 8- 环戊基 -6- 乙基 -2- 甲磺酰基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (0.115g， 0.47mmol) 和 6′ - 氨基 -3， 4， 5， 6- 四氢 -2H-[1， 3′ ] 联吡啶 -4- 醇 (0.117g， 0.61mmol) 合 并在无水二甲苯中， 在 140℃氮下加热过夜。然后使粗反应混合物冷却， 用 CH2Cl2 稀释。过 滤收集沉淀， 在真空中干燥， 得到 8- 环戊基 -6- 乙基 -2-(4- 羟基 -3， 4， 5， 6- 四氢 -2H-[1， 3 ′ ] 联吡啶 -6 ′ - 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (15mg， 7 ％ )。MS(APCI) ； + M +1 ： 计算值， 435.2， 实测值 435.2.
实施例 52
4-{6-[8- 环戊基 -6-(2- 乙氧基 - 乙氧基 )-7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 ]- 吡啶 -3- 基 }- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯
在氮气氛下， 将 8- 环戊基 -6-(2- 乙氧基 - 乙氧基 )-2- 甲亚磺酰基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (1.2ml 0.46M 甲苯溶液， 0.552mmol) 和 4-(6- 氨基 - 吡啶 -3- 基 )- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (0.307g， 1.1mmol) 合并在甲苯中， 加热至 110 ℃。4 小时后， 用二甲 苯 (1ml) 代替甲苯， 继续在回流下加热过夜。冷却至室温后， 将粗反应混合物溶于 CH2Cl2， 用饱和氯化铵水溶液洗涤， 再用盐水洗涤。将有机层干燥 (MgSO4)， 过滤， 蒸发至干。经过 硅胶色谱处理， 用含 5％ CH3OH 的 CH2Cl2 洗脱， 继之以第二色谱步骤， 用乙酸乙酯洗脱， 得到 4-{6-[8- 环戊基 -6-(2- 乙氧基 - 乙氧基 )-7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基 氨基 ]- 吡啶 -3- 基 }- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (70mg， 22％ )， 为黄色固体。MS(APCI) ； M++1 ： 计算值， 580.32， 实测值 580.2. 1
H NMR ： (400MHz DMSO)8.50(s， 1H)， 8.26(d， J ＝ 9Hz， 1H)， 7.94(d， J ＝ 3Hz， 1H)， 7.39(dd， J ＝ 3， 9Hz， 1H)， 6.78(s， 1H)， 5.89-5.98(m， 1H)， 4.15(t， J ＝ 5Hz， 2H)， 3.86(t， J ＝ 5Hz， 2H)， 3.56-3.62(m， 6H)， 3.09(br t， J ＝ 5Hz， 4H)， 2.29-2.33(m， 2H)， 2.07-2.10(m， 2H)， 1.84-1.92(m， 2H)， 1.63-1.69(m， 2H)， 1.47(s， 9H)， 1.22(t， J ＝ 7Hz， 3H).
实施例 53
8- 环戊基 -6-(2- 乙氧基 - 乙氧基 )-2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 4-{6-[8- 环戊基 -6-(2- 乙氧基 - 乙氧基 )-7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -2- 基 氨 基 ]- 吡 啶 -3- 基 }- 哌 嗪 -1- 甲 酸 叔 丁 基 酯 (70mg， 0.12mmol) 溶 于 CH2Cl2(2.5ml)， 加入 2M HCl 的乙醚溶液 (2.5ml)。将该混合物在室温下搅拌 2 小时， 生成 黄色沉淀。在减压下除去溶剂， 将所得固体悬浮在乙醚中， 过滤收集， 然后在 50℃真空中 干燥过夜， 得到 8- 环戊基 -6-(2- 乙氧基 - 乙氧基 )-2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨 基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮盐酸盐 (30mg， 52％ )。 MS(APCI) ； M++1 ： 计算值， 480.3， 实测值 480.4.
元素分析计算值 ： C25H33N7O32HCl 3.44H2O ： C， 48.87 ； H， 6.87 ； N， 15.96.Found ； C， 48.48 ； H， 6.66 ； N， 15.66.
实施例 54
2-{5-[ 双 -(2- 甲氧基 - 乙基 )- 氨基 ]- 吡啶 -2- 基氨基 }-6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 6- 溴 -8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 5 5 (0.4g， 1.08mmol) 和 N ， N - 双 -(2- 甲氧基 - 乙基 )- 吡啶 -2， 5- 二胺 (0.5g， 2.2mmol) 合 并在甲苯 (3.5ml) 中， 加热至 110℃。5 小时后， 使反应混合物冷却， 粗产物直接经过硅胶 色谱处理， 用含 25 ％至 100％乙酸乙酯的己烷梯度洗脱， 得到 2-{5-[ 双 -(2- 甲氧基 - 乙 基 )- 氨基 ]- 吡啶 -2- 基氨基 }-6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 + (0.49g， 85％ )， 为橙色的胶。mp 94-95℃ .MS(APCI) ； M +1 ： 计算值， 530.2， 实测值 530.1.
元素分析计算值 ：
C24H32N6O3Br10.13 H2O ： C， 54.00 ； H， 5.90 ； N， 15.74.Found ； C， 53.61 ； H， 5.68 ； N， 15.60.
实施例 55
6- 乙酰基 -2-{5-[ 双 -(2- 甲氧基 - 乙基 )- 氨基 ]- 吡啶 -2- 基氨基 }-8- 环戊 基 -5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮将 2-{5-[ 双 -(2- 甲 氧 基 - 乙 基 )- 氨 基 ]- 吡 啶 -2- 基 氨 基 }-6- 溴 -8- 环 戊 基 -5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (0.4g， 0.75mmol)、 三丁基 -(1- 乙氧基 - 乙烯 基 )- 锡烷 (0.42g， 1.175mmol) 和四 ( 三苯膦 ) 钯 (0.1g， 0.09mmol) 合并在经过 N2 吹扫的 甲苯 (4ml) 中， 加热至 110℃。2 小时后， 使反应混合物冷却， 加入承载固体 40％ KF 的氧化 铝 (0.2g)。将该混合物用甲苯 (15ml) 稀释， 旋转混合 2 分钟。过滤和除去溶剂后， 粗产物 经过硅胶色谱处理， 用含 50-65％乙酸乙酯的己烷洗脱， 得到橙色的胶 (0.298g)。将该胶溶 于 CH2Cl2， 用 10％ KF 的 H2O 溶液洗涤， 再用盐水洗涤， 干燥 (MgSO4)。除去干燥剂和蒸发溶 剂后， 将剩余物质溶于乙酸乙酯 (10ml)， 用 1M HCl( 含水 ) 处理。 将所得混合物在室温下剧 烈搅拌 1 小时。加入足量 CH2Cl2， 以溶解已生成的沉淀， 有机溶液用饱和碳酸氢钠水溶液洗 涤。水层用 CH2Cl2 反萃取两次， 合并有机层， 干燥 (MgSO4)。除去干燥剂， 蒸发溶剂， 得到泡 沫状固体， 溶于乙酸乙酯 (20ml)， 过滤， 然后用等体积己烷稀释， 贮存在 4℃下。生成黄色晶 体， 过滤收集， 在真空中干燥， 得到 6- 乙酰基 -2-{5-[ 双 -(2- 甲氧基 - 乙基 )- 氨基 ]- 吡 啶 -2- 基氨基 }-8- 环戊基 -5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (120mg， 32％ )。Mp + 138-138℃ .MS(APCI) ； M +1 ： 计算值， 494.3， 实测值 495.3.
元素分析计算值 ： C26H34N6O4 ： C， 63.14 ； H， 6.93 ； N， 16.99.Found ； C， 63.04 ； H， 6.77 ； N， 16.86.
实施例 56
4-[6-(8- 异 丙 基 -7- 氧 代 -7， 8- 二 氢 - 吡 啶 并 [2， 3] 嘧 啶 -2- 基 氨 基 )- 吡 啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯
将 2- 氯 -8- 异丙基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (338mg， 1.5mmol) 与 4-(6- 氨 基 - 吡啶 -3- 基 )- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (460mg， 2.0mmol) 在甲苯 (6ml) 中的混合物在 110℃下加热约 20 小时， 然后冷却至室温。过滤收集固体， 用甲苯洗涤， 干燥。将样品溶于 CH2Cl2， 经过两块制备型 TLC 平板纯化 ( 用 10％ MeOH/CH2Cl2 洗脱 )。 提取 Rf ＝ 0.23 的带， 得 到 4-[6-(8- 异丙基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌 嗪 -1- 甲酸叔丁基酯， 为黄色固体 (180mg， 26 ％ )。1HNMR (400MHz， DMSO)9.29(s， 1H)， 8.80(br， 1H)， 8.17 ～ 8.9(m， 2H)， 7.70(d， J ＝ 2.5Hz， 1H)， 7.2(d， J ＝ 9.8Hz， 1H)， 6.88(d， J ＝ 9.6Hz， 1H)， 5.6 ～ 5.5(m， 1H)， 4.06(m， 1H)， 3.4 ～ 3.9(m， 4H)， 3.14(d， J ＝ 5.2Hz， 2H)， 2.98(m， 4H)， 1.52(s， 3H)， 1.1.50(s， 3H)， 1.38(s， 9H)
实施例 57
8- 异丙基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
在室温下， 将 HCl 气体通入 4-[6-(8- 异丙基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (180mg， 0.39mmol) 的 CH2Cl2(5ml) 溶液中。5 小时后过滤收集所生成的浅黄色固体。固体是吸湿性的， 因此将其溶于 MeOH， 向该溶液加入几滴水。然后在减压下除去溶剂， 生成玻璃状固体。将该固体用丙酮洗涤， 进 一步干燥， 得到 8- 异丙基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮盐酸盐 (101mg， 66％ )。mp 237-240℃ . 1
H NMR (400MHz， DMSO-d6)9.38(br s， 1H)， 9.28(s， 1H)， 8.88(br s， 1H)， 8.14(d， J ＝ 9.5Hz， 1H)， 8.07(d， J ＝ 9.0Hz， 1H)， 7.73(s， 1H)， 7.23(d， J ＝ 9.5Hz， 1H)， 6.85(d， J＝ 9.5Hz， 1H)， 5.57-5.01(m， 1H)， 3.23(br s， 4H)， 3.17(br s， 4H)， 1.49(s， 3H)， 1.47(s， 3H).实施例 58
4-[6-(8- 环戊基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡 啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯
将 8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -8H- 吡啶并 [2， 3-] 嘧啶 -7- 酮 (416mg， 1.5mmol) 与 4-(6- 氨基 - 吡啶 -3- 基 )- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (460mg， 2.0mmol) 在甲苯 (6ml) 中的 混合物在 110℃下加热约 20 小时， 然后冷却至室温。过滤收集所生成的固体， 用甲苯洗涤， 干燥， 得到所需产物 4-[6-(8- 环戊基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨 基 )- 吡 啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (143mg)， 19.4％收率。 1
H NMR (400MHz， DMSO)9.97(s， 1H)， 8.72(s， 1H)， 8.03(d， J ＝ 3.0Hz， 1H)， 7.85(m， 1H)， 7.74(d， J ＝ 9.2Hz， 1H)， 7.25(m， 1H)， 6.31(d， J ＝ 9.3Hz， 1H)， 5.80(m， 1H)， 3.4(m， 4H)， 3.28(m， 4H)， 2.47(m， 2H)， 1.9(m， 2H)， 1.87(br， 2H)， 1.6 ～ 1.8(br， 2H)， 1.5 ～ 1.6(m， 2H)， 1.39(s， 9H).
实施例 59
8- 环戊基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
在室温下， 将 4-[6-(8- 环戊基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨 基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (143mg， 0.29mmol) 的 CH2Cl2/MeOH(6ml/1.5ml) 溶液用 HCl 气体处理约 3 分钟。将溶液在室温下搅拌约 6 小时， 然后过滤收集固体。将 该固体用 CH2Cl2 洗涤， 在真空中干燥， 得到 8- 环戊基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨 基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮盐酸盐 (98mg， 66％ )。mp 213-215℃ .
元素分析计算值 ：
C21H25N7O 2.0HCl 2.5H2O ： C， 49.51 ； H， 5.90 ； N， 15.74 ； Cl， 13.92.Found ： C， 49.64 ； H， 6.12 ； N， 19.23， Cl， 14.20.
实施例 60
4-[6-(8- 环己基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡 啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯
将 8- 环己基 -2- 甲亚磺酰基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (430mg， 1.47mmol) 与 4-(6- 氨基 - 吡啶 -3- 基 )- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (556mg， 2.43mmol) 在甲苯 (5ml) 中的混合物在 100 ℃下加热 18 小时。冷却至室温， 收集所生成的固体， 用甲苯洗涤， 然后 干燥， 得到 4-[6-(8- 环己基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡 啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (105mg， 14％ )。 1
HNMR (400MHz， DMSO)10.02(s， 1H)， 8.70(s， 1H)， 8.04(d， J ＝ 3.0Hz， 1H)， 7.72(d， J ＝ 9.2Hz， 1H)， 7.44(dd， J ＝ 9.2， 3.1Hz， 1H)， 6.28(m， 1H)， 3.60(m， 4H)， 3.08(m， 4H)， 1.6 ～ 1.8(m， 10H)， 1.39(s， 9H).
实施例 61
8- 环己基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
在室温下， 将 HCl 气体通入 4-[6-(8- 环己基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (105mg， 0.21mmol) 的 CH2Cl2(3ml) 溶液， 直至有固体生成。将混合物在室温下搅拌 6 小时， 过滤收集所生成的固体。固体是吸 湿性的。从 MeOH 中重结晶， 加入几滴水， 得到 8- 环己基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮盐酸盐 (40mg， 35％ )。mp ： 228-230℃ .
元素分析计算值 ： C22H27N7O2.0HCl3.5H2O ： C， 48.80 ； H， 6.70 ； N， 18.11 ； Cl， 13.09. Found ： C， 48.88 ； H， 6.39 ； N， 17.95 ； Cl， 12.88.
实施例 62
8- 环丙基 -2- 甲亚磺酰基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 8- 环 丙 基 -2- 甲 硫 基 -8H- 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮 (0.5g， 2.1mmol) 与 2- 苯 磺 酰 基 -3- 苯 基 - 氧 氮 杂 环 丙 烷 (0.84g， 3.2mmol) 的 CH2Cl2(5ml) 溶 液 在 室 温 下 搅 拌 20 小 时。 过 滤 收 集 所 生 成 的 白 色 固 体， 用 己 烷 洗 涤， 然 后 干 燥， 得 到 8- 环 丙 基 -2- 甲 亚 磺 酰 基 -8H- 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮 (0.388g， 74 ％ )。 1 HNMR ： (400MHz， DMSO)9.15(s， 1H)， 8.0(d， J ＝ 9.5Hz， 1H)， 6.74(d， J ＝ 9.5Hz， 1H)， 2.92(s， 1H)， 1.18 ～ 1.14(m， 2H)， 0.83 ～ 0.79(m， 2H).
实施例 63
4-[6-(8- 环丙基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡 啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯
将 8- 环丙基 -2- 甲亚磺酰基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (388mg， 1.56mmol) 与 4-(6- 氨基 - 吡啶 -3- 基 )- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (462mg， 2.0mmol) 在甲苯 (5ml) 中的混合物在 100℃下加热 18 小时。冷却至室温， 过滤收集固体， 用甲苯洗涤， 干燥， 得到 4-[6-(8- 环丙基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌 嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (96mg， 13％ )。 1
H NMR (400MHz， DMSO)9.97(s， 1H)， 8.67(s， 1H)， .39(d， J ＝ 9.3Hz， 1H)， 8.0(d， J ＝ 2.95Hz， 1H)， 7.71(d， J ＝ 9.3Hz， 1H)， 6.28(d， J ＝ 9.3Hz， 1H)， 3.42(br， 4H)， 3.05(br， 4HO， 2.80(m， 1H)， 1.37(s， 9H)， 1.20(d， J ＝ 6.1Hz， 2H)， 0.76(br， 2H).
实施例 64
8- 环丙基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 HCl 气 体 通 入 4-[6-(8- 环 丙 基 -7- 氧 代 -7， 8- 二 氢 - 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (96mg， 0.21mmol) 的 CH2Cl2(5ml) 溶 液达几分钟， 直至有固体生成。将混合物在室温下搅拌 18 小时， 过滤收集所生成的固体， 用 CH2Cl2 洗涤， 然后在真空中干燥， 得到所需产物 8- 环丙基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基 氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮， 为它的盐酸盐 (83mg， 85％ )。mp ＞ 300℃ .
元素分析计算值 ： C19H21N7O.2.1HCl.1.5H2O ： C， 48.87 ； H， 5.63 ； N， 20.99.Found ： C， 49.23 ； H， 5.53 ； N， 20.68.
实施例 65
6- 溴 -8- 环戊基 -2-( 吡啶 -2， 6- 二氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 6- 溴 -8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (370mg， 1.0mmol) 与 2， 6- 二氨基吡啶 (164mg， 1.5mmol) 在甲苯 (5ml) 中的混合物在 120℃下加热过 夜。 过滤收集冷却后生成的固体， 用甲苯洗涤， 然后在热甲醇中用声波处理， 干燥， 得到所需 产物 6- 溴 -8- 环戊基 -2-( 吡啶 -2， 6- 二氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (105mg， 26％ )。mp ＞ 300℃ .
元素分析计算值 ：C17H17N6OBr ： C， 50.89 ； H， 4.27 ； N， 20.94.Found ： C， 51.00 ； H， 4.20 ； N， 21.04.
实施例 66
6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-( 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧定 -7- 酮
将 6- 溴 -8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (370mg， 1.0mmol) 与 2， 6- 二氨基吡啶 (163mg， 1.5mmol) 在甲苯 (5ml) 中的混合物在 120℃ 下加热过夜。过滤收集冷却后生成的固体， 用甲苯洗涤， 在热 MeOH 中用声波处理。过滤后， 进一步干燥固体， 得到所需产物 2-(6- 氨基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (39mg， 9.3％ )。mp ： ＞ 274.6-276℃ .
元素分析 ：
Calc’ d for C18H19BrN6O.0.2H2O ： C， 51.61 ； H， 4.67 ； N， 20.06.Found ： C， 51.42 ； H， 4.44 ； N， 19.87.
实施例 67
8- 环戊基 -6- 乙基 -2- 甲磺酰基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
在氮气氛下， 向冷却 (0℃， 冰浴 ) 的 8- 环戊基 -6- 乙基 -2- 甲硫基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (5.0g， 17.28mmol) 的二氯甲烷 (25ml) 溶液加入间 - 氯过苯甲酸 (MCPBA) (7.4g， 30.0mmol)。除去冷却浴， 将反应混合物在 RT 下搅拌 3 小时。将反应混合物倒入 aq.NaHCO3( 饱和溶液， 100ml) 中， 用二氯甲烷萃取三次 ( 总计 300ml)。合并有机层， 经硫酸 镁干燥。除去干燥剂， 蒸发溶剂， 得到深橙色油， 经过硅胶色谱处理， 用乙酸乙酯 / 二氯甲烷 梯度洗脱， 得到 8- 环戊基 -6- 乙基 -2- 甲磺酰基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮， 为白色 粉末。从二氯甲烷 / 己烷中重结晶， 得到白色针晶 (3.56g， 11.1mmol)。mp 174-176℃ ( 未 校正 ) ； 1
H NMR (400MHz， CDCl3)8.87(s， 1H)， 7.50(s， 1H)， 5.98-5.89(m， 1H)， 3.36(s， 3H)， 2.68(q， J ＝ 7.3Hz， 2H)， 2.30-2.22(m， 2H)， 2.16-2.11(m， 1H)， 1.97-1.89(m， 1H)， 1.72-1.68(m， 1H)， 1.26(t， J ＝ 7.3Hz， 3H) ； MS(APCI+)322(M+1， 100).
实施例 68
8- 环戊基 -6-(2- 乙氧基 - 乙氧基 )-2- 甲硫基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
在氮气氛下， 向氢化钠 (45mg， 1.1mmol， 60 ％油分散体 ) 的 THF(10ml) 悬液加入 2- 乙氧基乙醇 (113mg， 1.25mmol)。将反应混合物在 RT 下搅拌 30 分钟。向该混合物加入 8- 环戊基 -6- 氟 -2- 甲硫基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮。然后将反应混合物加热至 回流， 搅拌过夜。将冷却后的溶液用水 (25ml) 猝灭， 用乙酸乙酯 (50ml) 萃取。有机层随后 用 aq.NH4Cl 洗涤两次 ( 各 20ml)， 再用盐水 (20ml) 洗涤。有机层经硫酸镁干燥。除去干 燥剂， 蒸发溶剂， 得到黄色的油， 经过硅胶色谱处理， 用乙酸乙酯 / 己烷梯度洗脱， 得到 8- 环 戊基 -6-(2- 乙氧基 - 乙氧基 )-2- 甲硫基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮， 为澄清的油 (289mg， 0.83mmol)。 1
H NMR (400MHz， CDCl3)8.52(s， 1H)， 6.77(s， 1H)， 6.04-5.95(m， 1H)， 4.16(t， J ＝ 4.0Hz， 2H)， 3.86(t， J ＝ 4.0Hz， 2H)， 3.58(q， J ＝ 8.0Hz， 2H)， 2.59(s， 3H)， 2.34-2.25(m， 2H)， 2.13-2.03(m， 2H)， 1.91-1.82(m， 2H)， 1.71-1.60(m， 2H)， 1.20(t， J ＝ 8.0Hz， 3H) ； MS(APCI+)350(M+1).
实施例 698- 环 戊 基 -6-(2- 乙 氧 基 - 乙 氧 基 )-2- 甲 亚 磺 酰 基 -8H- 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮
向 8- 环戊基 -6-(2- 乙氧基 - 乙氧基 )-2- 甲硫基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (289mg， 0.83mmol) 的氯仿 (5ml) 溶液加入 2- 苯磺酰基 -3- 苯基 - 氧氮杂环丙烷 (281mg， 1.07mmol)。将反应混合物在 RT 氮下搅拌过夜。除去溶剂， 粗产物经过硅胶色谱处理， 用 5％甲醇 - 乙酸乙酯 / 己烷梯度洗脱， 得到 8- 环戊基 -6-(2- 乙氧基 - 乙氧基 )-2- 甲亚磺 酰基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮， 为澄清的油 (210mg， 0.56mmol)。 1
H NMR (400MHz， CDCl3)8.84(s， 1H)， 6.89(s， 1H)， 6.06-5.98(m， 1H)， 4.23(t， J ＝ 4.0Hz， 2H)， 3.89(t， J ＝ 4.0Hz， 2H)， 3.60(q， J ＝ 6.9Hz， 2H)， 2.95(s， 3H)， 2.28-2.19(m， 2H)， 2.15-2.10(m， 2H)， 1.97-1.88(m， 2H)， 1.71-1.64(m， 2H)， 1.21(t， J ＝ 6.9Hz， 3H) ； MS(APCI+)350(M+1).
实施例 70
6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-[5-(4- 甲基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
在氮下， 将 6- 溴 -8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮 (1.0g， 2.7mmol) 和 5-(4- 甲基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基胺 (1.48g， 7.7mmol) 合并在甲苯 (3.0ml) 中。将反应混合物加热至回流， 搅拌 4 小时。将反应混合物冷却至 RT， 过滤。将固体用另外的甲苯洗涤 ( 总计 25ml)， 在真空中干燥， 得到黄色粉末 (338mg， 0.78mmol)。mp 278-280℃ ( 分解 ) ； 1
MS(APCI+)498， 500(100) ； H NMR (400MHz， CDCl3)10.71-10.64(m， 2H)， 9.01(s， 1H)， 8.10-8.09(m， 1H)， 7.89(d， J ＝ 0.10Hz， 1H)， 7.52-7.30(m， 1H)， 5.97-5.89(m， 1H)， 3.87-3.84(m， 2H)， 3.53-3.50(m， 2H)， 3.22-3.09(m， 4H)， 2.83-2.82(m， 3H)， 2.60(s， 3H)， 2.21-2.15(m， 2H)， 1.94(br， 2H)， 1.81-1.78(m， 2H)， 1.62-1.60(M， 2H) ； 元素分析计算值 ： C23H28BrN7O13.00H2O 1.65HCl 0.60 C2H5OH ： C， 43.70 ； H， 5.74 ； N， 14.74.Found ； C， 43.76 ； H， 5.79 ； N， 14.39.
实施例 71
8- 环戊基 -6-(1- 乙氧基 - 乙烯基 )-5- 甲基 -2-[5-(4- 甲基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡 啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
向 6 英 钱 (dram) 小 瓶 装 入 6- 溴 -8- 环 戊 基 -5- 甲 基 -2-[5-(4- 甲 基 - 哌 嗪 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (266mg， 0.53mmol) 和四 ( 三苯膦 ) 钯 (0)(61mg， 0.053mmol)， 用氩代替空气。 加入甲苯 (5ml)， 继之以三丁基 -(1- 乙 氧基 - 乙烯基 )- 锡烷 (289mg， 0.80mmol)。将小瓶加热至 110℃， 搅拌 12 小时。将反应混 合物用氯仿 (25ml) 稀释， 吸附在硅胶上。经过硅胶色谱纯化 ( 氯仿 /2- 丙醇 +1％ TEA 梯 度 )， 得到 8- 环戊基 -6-(1- 乙氧基 - 乙烯基 )-5- 甲基 -2-[5-(4- 甲基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡 啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (237mg， 0.48mmol)。MS(APCI+)490(M+1， 100).
实施例 72
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-[5-(4- 甲基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨 基 ]-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮向 8- 环戊基 -6-(1- 乙氧基 - 乙烯基 )-5- 甲基 -2-[5-(4- 甲基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡 啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (237mg， 0.48mmol) 的氯仿 (5ml) 溶液加 入氯化氢 (2M 乙醚溶液， 2.0ml， 4.0mmol)。将反应混合物在 RT 下搅拌 12 小时。蒸发溶剂， 将残余物溶于乙醇。蒸发乙醇， 得到 6- 乙酰基 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-[5-(4- 甲基 - 哌 嗪 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (239mg， 0.52mmol)。 1
MS(APCI+)462(M+1， 100) ； H NMR (400MHz， DMSOd6)10.83(m， 2H)， 9.00(s， 1H)， 8.1(m， 1H)， 7.88-7.82(m， 2H)， 5.89-5.80(m， 1H)， 3.88-3.85(m， 2H)， 3.54-3.51(m， 2H)， 3.23-3.11(m， 4H)， 2.83-2.82(m， 3H)， 2.43(s， 3H)， 2.34(s， 3H)2.23-2.11(m， 2H)， 1.93(br， 2H)， 1.81-1.77(m， 2H)， 1.60-1.59(m， 2H) ； 元素分析计算值 ： C25H31N7O2， 2.70HCl， 1.05 C2H5OH ： C， 53.50 ； H， 6.63 ； N， 16.12.Found ： C， 53.45 ； H， 6.47 ； N， 15.85.
实施例 73
(1-{6-[8- 环戊基 -6-(1- 乙氧基 - 乙烯基 )-5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶 并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 ]- 吡啶 -3- 基 }- 吡咯烷 -3- 基 )- 氨基甲酸叔丁基酯
向 6 英钱小瓶装入 {1-[6-(6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶 并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 吡咯烷 -3- 基 }- 氨基甲酸叔丁基酯 (379mg， 0.65mmol) 和四 ( 三苯膦 ) 钯 (0)(75mg， 0.065mmol)， 用氩代替空气。加入甲苯 (5ml)， 继之 以三丁基 -(1- 乙氧基 - 乙烯基 )- 锡烷 (352mg， 0.97mmol)。将小瓶加热至 110℃， 搅拌 12 小时。 将反应混合物用氯仿 (25ml) 稀释， 吸附在硅胶上。 经过硅胶色谱 纯化 ( 氯仿 /2- 丙 醇 +1％ TEA 梯度 )， 得到 (1-{6-[8- 环戊基 -6-(1- 乙氧基 - 乙烯基 )-5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 ]- 吡啶 -3- 基 }- 吡咯烷 -3- 基 )- 氨基甲酸叔 丁基酯， 为黄色固体 (394mg， 0.68mmol)。MS ： (APCI+)576(M+1， 100)， 548.
实施例 74
6- 乙酰基 -2-[5-(3- 氨基 - 吡咯烷 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-8- 环戊基 -5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
向 (1-{6-[8- 环戊基 -6-(1- 乙氧基 - 乙烯基 )-5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶 并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 ]- 吡啶 -3- 基 }- 吡咯烷 -3- 基 )- 氨基甲酸叔丁基酯 (394mg， 0.68mmol) 的氯仿 (5ml) 溶液加入氯化氢 (2M 乙醚溶液， 2.0ml， 4.0mmol)。将反应混合物 在 RT 下搅拌 12 小时。蒸发溶剂， 将残余物溶于乙醇。蒸发乙醇， 得到 6- 乙酰基 -8- 环戊 基 -5- 甲 基 -2-[5-(4- 甲 基 - 哌 嗪 -1- 基 )- 吡 啶 -2- 基 氨 基 ]-8H- 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮 (239mg， 0.52mmol)。 1
MS(APCI+)487， 391， 279(100) ； H NMR (400MHz， DMSOd6)8.98(s， 1H)， 8.34(br， 2H) ， 7.78-7.73(m ， 2H) ， 7.51(br ， 1H) ， 5.89-5.80(m ， 1H) ， 3.98(br ， 2H) ， 3.62-3.51(m ， 4H)， 2.40-3.23(m， 2H)， 2.44(s， 3H)， 3.34(s， 3H)， 2.25-2.20(m， 2H)， 2.16-2.13(m， 1H)， 1.93(br， 2H)， 1.80-1.78(m， 2H)， 1.61-1.58(m， 2H) ； C24H29N7O2， 2.10HCl， 2.85 H2O， 0.45 C2H5OH ： C， 50.16 ； H， 6.68 ； N， 16.45 ； Cl-， 12.49.Found ： C， 50.37 ； H， 6.90 ； N， 16.45 ； Cl-， 12.61.
实施例 75
6- 溴 -8- 环戊基 -2-(4- 羟基 -3， 4， 5， 6- 四氢 -2H-[1， 3 ′ ] 联吡啶 -6 ′ - 基氨基 )-5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
在氮气氛下， 将 6- 溴 -8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (2.50g， 6.76mmol) 和 6′ - 氨基 -3， 4， 5， 6- 四氢 -2H-[1， 3′ ] 联吡啶 -4- 醇 (1.96g， 10.13mmol) 合并在甲苯 (10.0ml) 中。将反应混合物加热至回流， 搅拌 4 小时。将 反应混合物冷却至 RT， 过滤。将固体用另外的甲苯洗涤 ( 总计 75ml)， 在真空中干燥， 得到 黄色粉末 (566mg， 1.13mmol)。 1
MS(APCI+)499， 501(M+2， 100) ； H NMR (400MHz， DMSO-d6)10.06(s， 1H)， 8.96(s， 1H)， 8.04(s， 1H)， 7.83(d， J ＝ 9.3Hz， 1H)， 7.46(d， J ＝ 7.3Hz， 1H)， 5.93-5.89(m， 1H)， 4.71(s ， 1H) ， 3.65-3.60(m ， 1H) ， 3.53-3.51(m ， 2H) ， 2.88-2.83(m ， 2H) ， 2.57(s ， 3H) ， 2.18(br， 2H)， 1.90-1.81(m， 5H)， 1.59-1.48(m， 3H) ；元 素 分 析 计 算 值 ： C23H27Br1N6O2， 0.45H2O ： C， 54.43 ； H， 5.54 ； N， 16.56.Found ： C， 54.04 ； H， 5.23 ； N， 16.33.
实施例 76
8- 环戊基 -6-(1- 乙氧基 - 乙烯基 )-2-(4- 羟基 -3， 4， 5， 6- 四氢 -2H-[1， 3′ ] 联 吡啶 -6′ - 基氨基 )-5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
向 6 英钱小瓶装入 6- 溴 -8- 环戊基 -2-(4- 羟基 -3， 4， 5， 6- 四氢 -2H-[1， 3′ ] 联吡啶 -6′ - 基氨基 )-5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (316mg， 0.63mmol) 和四 ( 三苯膦 ) 钯 (0)(72mg， 0.063mmol)， 用氩代替大气。 加入甲苯 (5ml)， 继之以三丁基 -(1- 乙 氧基 - 乙烯基 )- 锡烷 (343mg， 0.95mmol)。将小瓶加热至 110℃， 搅拌 12 小时。将反应混 合物用氯仿 (25ml) 稀释， 吸附在硅胶上。经过硅胶色谱纯化 ( 氯仿 /2- 丙醇 +1％ TEA 梯 度 )， 得到 6- 溴 -8- 环戊基 -2-(4- 羟基 -3， 4， 5， 6- 四氢 -2H-[1， 3′ ] 联吡啶 -6′ - 基氨 基 )-5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (255mg， 0.52mmol)。 MS(APCI+)463， 491(M+1， 100).
实施例 77
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -2-(4- 羟基 -3， 4， 5， 6- 四氢 -2H-[1， 3′ ] 联吡啶 -6′ - 基 氨基 )-5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
向 8- 环戊基 -6-(1- 乙氧基 - 乙烯基 )-2-(4- 羟基 -3， 4， 5， 6- 四氢 -2H-[1， 3′ ] 联吡啶 -6 ′ - 基氨基 )-5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (255mg， 0.52mmol) 的 氯仿 (2ml) 溶液加入氯化氢 (2M 乙醚溶液， 5.0ml， 10.0mmol)。将反应混合物在 RT 下搅拌 12 小时。蒸发溶剂， 将残余物溶于乙醇。蒸发乙醇， 得到 6- 乙酰基 -8- 环戊基 -2-(4- 羟 基 -3， 4， 5， 6- 四氢 -2H-[1， 3′ ] 联吡啶 -6′ - 基氨基 )-5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮 (213mg， 0.46mmol)。 1
MS(APCI+)463(M+1， 100) ； HNMR (400MHz， DMSO-d6)10.90(br， 1H)， 9.07(s， 1H)， 8.19(s， 1H)， 7.91(br， 2H)， 5.91-5.89(m， 1H)， 3.77(br， 1H)， 3.62(br， 2H)， 3.07(br， 2H)， 2.58(s， 3H)， 2.40(s， 3H)， 2.30(br， 2H)， 1.98-1.86(m， 5H)， 1.65(br， 4H) ； 元素分析计算值 ： C25H30N6O3， 1.76 C3H8O1， 0.36CHCl3 ： C， 60.20 ； H， 7.33 ； N， 13.75.Found ： C， 60.48 ； H， 6.97 ； N， 13.35.
实施例 78
4-[6-(6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基 氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 氮杂环庚烷 -1- 甲酸叔丁基酯将 4-(6- 氨基 - 吡啶 -3- 基 )- 氮杂环庚烷 -1- 甲酸叔丁基酯 (614mg， 2.10mmol) 的 甲 苯 (10ml) 溶 液在 Dean-Stark 设 备中回流 3 小 时。除 去热源， 当 回流平 息 时加 入 6- 溴 -8- 环 戊 基 -2- 甲 亚 磺 酰 基 -5- 甲 基 -8H- 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮 (700mg， 1.89mmol)。 将 该 混 合 物 在 N2 下 回 流 12 小 时。 加 入 琥 珀 酸 酐 (500mg)， 继续回流 3 小 时。将反应混合物冷却， 溶于乙酸乙酯 (100ml)， 有机层用水洗涤 ( 总计 100ml)。有机 层经硫酸镁干燥， 蒸发溶剂。粗产物经过硅胶色谱处理， 用氯仿 /2- 丙醇梯度洗脱， 得到 4-[6-(6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡 啶 -3- 基 ]- 氮杂环庚烷 -1- 甲酸叔丁基酯， 为黄色粉末 (414mg， 0.82mmol)。 MS(APCI+)500， 600(M+1， 100).
实施例 79
6- 溴 -8- 环戊基 -2-(5-[1， 4] 二氮杂环庚烷 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将氯化氢气体通入 4-[6-(6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 氮杂环庚烷 -1- 甲酸叔丁基酯 (80mg， 0.13mmol) 的氯仿 (5ml) 溶液中达 30 分钟。蒸发溶剂， 将残余物用乙醇 (5ml) 研制。收集 6- 溴 -8- 环 戊基 -2-(5-[1， 4] 二氮杂环庚烷 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮盐酸盐， 为黄色粉末 (44mg， 0.089mmol)。 1
MS(APCI+)499， 501(M+2， 100) ； H NMR δ(400MHz， DMSO-d6)8.84(s， 2H)， 8.13(s， 1H)， 7.66-7.64(m， 1H)， 7.42-7.39(m， 1H)， 5.86-5.82(m， 1H)， 4.36(s， 1H)， 3.81(s， 2H)， 3.60(s， 2H)， 3.16(s， 2H)， 2.09(s， 4H)， 1.99(s， 2H)， 1.79(br， 2H)， 1.60(s， 2H)， 1.05(s， 2H) ； 元素分析计算值 ： C23H28Br1N7O1， 0.15HCl， 2.55 C2H5OH， 0.45 CHCl3 ： C， 50.79 ； H， 6.55 ； N， 14.52.Found ： C， 50.83 ； H， 5.69 ； N， 14.21.
实施例 80
4-{6-[8- 环戊基 -6-(1- 乙氧基 - 乙烯基 )-5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 ]- 吡啶 -3- 基 }-[1， 4] 二氮杂环庚烷 -1- 甲酸叔丁基酯
向 6 英钱小瓶装入 4-[6-(6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 氮杂环庚烷 -1- 甲酸叔丁基酯 (123mg， 0.25mmol) 和四 ( 三苯膦 ) 钯 (0)(29mg， 0.025mmol)， 用氩代替大气。加入甲苯 (5ml)， 继 之以三丁基 -(1- 乙氧基 - 乙烯基 )- 锡烷 (137mg， 0.37mmol)。将小瓶加热至 110℃， 搅拌 12 小时。将反应混合物用氯仿 (25ml) 稀释， 吸附在硅胶上。经过硅胶色谱纯化 ( 氯仿 / 乙 酸乙酯梯度 )， 得到 4-{6-[8- 环戊基 -6-(1- 乙氧基 - 乙烯基 )-5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二 氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 ]- 吡啶 -3- 基 }-[1， 4] 二氮杂环庚烷 -1- 甲酸叔丁 基酯， 为黄色固体 (116mg， 0.20mmol)。MS ： (APCI+)125(100)， 490， 590(M+1， 100)， 624.
实施例 81
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -2-(5-[1， 4] 二氮杂环庚烷 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
向 4-{6-[8- 环戊基 -6-(1- 乙氧基 - 乙烯基 )-5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶 并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 ]- 吡啶 -3- 基 }-[1， 4] 二氮杂环庚烷 -1- 甲酸叔丁基酯 (116mg， 0.20mmol) 的氯仿 (5ml) 溶液加入氯化氢 (2M 乙醚溶液， 5.0ml， 10.0mmol)。将反应混合物在 RT 下搅拌 12 小时。蒸发溶剂， 将残余物溶于乙醇。蒸发乙醇， 得到 6- 乙酰基 -8- 环戊 基 -2-(5-[1， 4] 二氮杂环庚烷 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮盐酸盐 (47mg， 0.10mmol)。
1 MS(APCI+)432， 462(M+1， 100) ； H NMR(400MHz， DMSO-d6)9.19(br， 2H)， 8.99(s，1H)， 7.91(s， 1H)， 7.78-7.75(m， 2H)， 5.88-5.80(m， 1H)， 3.80-3.77(m， 3H)， 3.25(br， 3H)， 3.16(br， 2H)， 2.44(s， 3H)， 2.34(s， 3H)， 2.49-2.18(m， 2H)， 2.12-2.10(m， 2H)， 1.93(br， 2H)， 1.81-1.78(m， 2H)， 1.61-1.58(m， 2H) ： 元 素 分 析 计 算 值： C25H31N7O2， 2.80HCl， 0.45 C3H8O2 ： C， 53.35 ； H， 6.25 ； N， 16.25.Found ： C， 52.96 ； H， 6.62 ； N， 15.95.
实施例 82
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-( 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮
将 6- 乙 酰 基 -2- 氨 基 -8- 环 戊 基 -5- 甲 基 -8H- 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮 (195mg， 0.681mmol) 和叔丁醇钠 (92mg， 0.953mmol) 悬浮在经过 N2 吹扫的甲苯 (5ml) 中。 向 该 悬 液 加 入 2- 溴 吡 啶 (78μl)、 三 ( 二 亚 苄 基 丙 酮 ) 二 钯 (0)(25mg， 0.027mmol) 和 BINAP(34mg， 0.054mmol)。将反应小瓶用氩吹扫， 将反应在 70 ℃下加热过夜。将反应混 合物用乙醚和甲醇稀释， 通过 C 盐垫过滤， 在减压下浓缩。粗产物经过硅胶色谱处理， 用 含 40 ％至 100 ％乙酸乙酯的己烷梯度洗脱， 得到 6- 乙酰基 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-( 吡 啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮， 为固体 (40mg， 16％ )。1H NMRδ(400MHz， CDCl 3)8.84(s ， 1H) ， 8.35-8.32(m ， 2H) ， 8.21(bs ， 1H) ， 7.75-7.71(m ， 1H) ， 7.03-7.01(m ， 1H)， 5.89-5.85(m， 1H)， 2.54(s， 3H)， 2.37(s， 3H)， 2.03-2.08(m， 2H)， 1.92-1.87(m， 2H)， 1.73-1.67(m， 2H).
MS(APC I)M+H 计算值 ： 363.2， 实测值 ： 364.1 ； 经 HPLC 纯化后的纯度为 92％。
实施例 83
4-[6-(8- 环戊基 -5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨 基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯
将 8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (0.40g， 1.37mmol) 和 4-(6- 氨基 - 吡啶 -3- 基 )- 哌嗪 -1- 羧酸丁基酯 (0.497g， 1.78mmol) 在甲 苯 (4ml) 中加热至回流达 16 小时。将反应混合物冷却至室温， 过滤收集所生成的沉淀， 在 漏斗上用甲苯洗涤 (3x 10ml)， 得到 4-[6-(8- 环戊基 -5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶 并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯， 为深褐色 - 灰色固 1 体 (0.100g， 16.2 ％ )。 H NMRδ(400MHz， DMSO-d6)9.92(s， 1H)， 8.78(s， 1H)， 8.02(d， J＝ 2.9Hz， 1H)， 7.87(d， J ＝ 9.3Hz， 1H)， 7.50(dd， J ＝ 2.9， 9.0Hz， 1H)， 6.18(s， 1H)， 5.77(m， 1H)， 3.44(m， 4H)， 3.07(m， 4H)， 2.39(s， 3H)， 2.20(m， 2H)， 1.85(m， 2H)， 1.71(m， 2H)， 1.55(m， 2H)， 1.39(s， 9H).
实施例 84
8- 环戊基 -5- 甲基 -2-(5- 哌嗪 -4- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 4-[6-(8- 环戊基 -5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨 基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (0.093g， 0.184mmol) 溶于二氯甲烷 (3ml)， 向其中加入 2N HCl 的乙醚溶液 (2ml)， 将所得混合物搅拌 2 天。 加入另外的 2N HCl， 继续搅拌 16 小时。 除去溶剂， 得到 8- 环戊基 -5- 甲基 -2-(5- 哌嗪 -4- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮 盐 酸 盐， 为 黄 色 固 体 (0.080g， 90.9 ％ )。1H NMRδ(400MHz， DMSO-d6)9.92(s， 2H)， 8.85(s， 1H)， 8.02(d， J ＝ 2.9Hz， 1H)， 7.91(d， J ＝ 9.3Hz， 1H)， 7.78(d， J ＝ 9.3Hz， 1H)， 6.33(s， 1H)， 5.79(m， 1H)， 3.40(m， 4H)， 3.22(m， 4H)， 2.39(s， 3H)， 2.20(m， 2H)， 1.91(m， 2H)， 1.74(m， 2H)， 1.56(m， 2H).
实施例 85
2， 2- 二甲基 -4-(6- 硝基 - 吡啶 -3- 基 )- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯
将 5- 溴 -2- 硝基吡啶 (10.67g， 52.6mmol)、 碘化四正丁基铵 (0.97g， 02.63mmol)、 2， 2- 二甲基 - 哌嗪 (6.60g， 57.8mmol) 和碳酸钾 (8.00g， 57.8mmol) 混合在 DMSO(50ml) 中。 将反应混合物温热至 95℃达 5 小时。将反应混合物倒入冰屑 ( 大约 200ml) 中， 然后用二 氯甲烷萃取 (6x75ml)。合并有机相， 经 MgSO4 干燥， 过滤除去无机盐， 浓缩剩余溶剂， 得到 橙色固体。将该固体溶于二氯甲烷 (100ml)， 向其中加入三乙胺 (10.65g， 14.7ml， 105mmol) 和二碳酸二叔丁酯 (13.8g， 63.12mmol)。 16 小时后， 加入更多的二碳酸二叔丁酯 (3.8g， 17.41mmol)， 使混合物回流 3 小时。然后将反应混合物冷却至室温， 用二氯甲烷 (100ml) 稀释， 用水洗涤 (1x100ml)。然后将有机层经 MgSO4 干燥， 过滤， 蒸发溶剂， 得到 2， 2- 二甲 基 -4-(6- 硝基 - 吡啶 -3- 基 )- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯， 为橙色固体 (14.91g， 84.2％ )。 1
H NMRδ(400MHz， CDCl3)8.17(d， J ＝ 9.3Hz， 1H)， 7.97(d， J ＝ 2.9Hz， 1H)， 7.01(dd， J ＝ 2.9， 9.0Hz， 1H)， 3.91(m， 2H)， 3.54(m， 4H)， 1.48(s， 9H)， 1.43(s， 6H).
实施例 86
4-(6- 氨基 - 吡啶 -3- 基 )-2， 2- 二甲基 - 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯
将 2， 2- 二甲基 -4-(6- 硝基 - 吡啶 -3- 基 )- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (14.63g， 43.5mmol) 溶于 THF(400ml)， 向其中加入阮内镍 (6.8g)。将反应混合物在氢气氛 (50psi) 下摇动 4 小时。过滤除去催化剂， 蒸发溶剂， 得到 4-(6- 氨基 - 吡啶 -3- 基 )-2， 2- 二甲 1 基 - 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯， 为紫色固体 (11.26g， 84.5％ )。 H NMRδ(400MHz， CDCl3)7.63(d， J ＝ 2.4Hz， 1H)， 7.06(dd， J ＝ 2.9， 8.8Hz， 1H)， 6.51(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 3.68(m， 2H)， 3.16(m， 2H)， 2.98(s， 2H)， 1.48(s， 9H)， 1.43(s， 6H).
实施例 87
4-[6-(6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基 氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]-2， 2- 二甲基 - 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯
将 6- 溴 -8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (1.0g， 2.70mmol) 和 4-(6- 氨 基 - 吡 啶 -3- 基 )-2， 2- 二 甲 基 - 哌 嗪 -1- 甲 酸 叔 丁 基 酯 (1.14g， 3.73mmol) 在甲苯 (10ml) 中加热至回流达 16 小时。将反应混合物冷却至室温， 过 滤收集所生成的沉淀， 在漏斗上用甲苯洗涤 (3x10ml)， 得到 4-[6-(6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲 基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]-2， 2- 二甲基 - 哌 嗪 -1- 甲酸叔丁基酯， 为深褐色 - 灰色固体 (0.525g， 31.8％ )。 1
H NMRδ(400MHz， DMSO-d6)9.96(s， 1H)， 8.91(s， 1H)， 7.89(d， J ＝ 2.7Hz， 1H)， 7.74(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 7.26(dd， J ＝ 3.2， 9.3Hz， 1H)， 6.18(s， 1H)， 5.86(m， 1H)， 3.67(m， 2H)， 3.37(m， 4H)， 2.54(s， 3H)， 2.15(m， 2H)， 1.84(m， 2H)， 1.71(m， 2H)， 1.53(m， 2H)， 1.39(s，9H)， 1.33(s， 6H).
实施例 88
6- 溴 -8- 环戊基 -2-[5-(3， 3- 二甲基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 4-[6-(6- 溴 -8- 环 戊 基 -5- 甲 基 -7- 氧 代 -7， 8- 二 氢 - 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]-2， 2- 二甲基 - 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (0.051g， 0.083mmol) 溶于二氯甲烷 (3ml)， 向其中加入 2N HCl(2ml)， 将所得混合物在室温下搅拌 2 小时。将 该混合物浓缩， 放置 10 天， 然后溶于 2N HCl(2ml)， 在室温下搅拌 5 小时。除去溶剂， 得到 6- 溴 -8- 环戊基 -2-[5-(3， 3- 二甲基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-5- 甲基 -8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮盐酸盐， 为黄色固体 (0.035g， 71.4％ )。 1
H NMRδ(400MHz， DMSO-d6)9.32(s， 2H)， 8.98(s， 1H)， 8.04(d， J ＝ 2.7Hz， 1H)， 7.83(d， J ＝ 9.3Hz， 1H)， 7.26(m， 1H)， 5.89(m， 1H)， 3.34(m， 2H)， 3.23(m， 4H)， 2.58(s， 3H)， 2.14(m， 2H)， 1.91(m， 2H)， 1.77(m， 2H)， 1.57(m， 2H)， 1.38(s， 6H).
实施例 89
4-{6-[8- 环戊基 -6-(1- 乙氧基 - 乙烯基 )-5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 ]- 吡啶 -3- 基 }-2， 2- 二甲基 - 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯
将 4-[6-(6- 溴 -8- 环 戊 基 -5- 甲 基 -7- 氧 代 -7， 8- 二 氢 - 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]-2， 2- 二甲基 - 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (0.412g， 0.673mmol)、 四 ( 三苯膦 ) 钯 (0.093g， 0.081mmol) 和三丁基 -(1- 乙氧基 - 乙烯基 )- 锡烷 (0.379g， 1.05mmol) 溶于甲苯 (3ml)， 缓慢加热至回流达 1 小时。 蒸发溶剂， 将固体重新溶于二氯甲烷 (8ml)， 经过硅胶色谱纯化， 得到 4-{6-[8- 环戊基 -6-(1- 乙氧基 - 乙烯基 )-5- 甲基 -7- 氧 代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 ]- 吡啶 -3- 基 }-2， 2- 二甲基 - 哌嗪 -1- 甲 酸叔丁基酯， 为黄色固体 (0.405g， 99.0％ )。 1
HNMR δ (400MHz ， CDCl 3)8.73(s ， 1H) ， 8.15(d ， J ＝ 9.0Hz ， 1H) ， 8.00(s ， 1H) ， 7.85(d， J ＝ 2.9Hz， 1H)， 7.18(m， 1H)， 5.90(m， 1H)， 4.52(d， J ＝ 2.4Hz， 1H)， 4.18(d， J＝ 2.4Hz， 1H)， 3.93(q， J ＝ 7.1Hz， 2H)， 3.80(m， 2H)， 3.38(m， 2H)， 3.26(s， 2H)， 2.41(s， 3H)， 2.35(m， 2H)， 2.06(m， 2H)， 1.85(m， 2H)， 1.64(m， 2H)， 1.49(s， 9H)， 1.45(s， 6H)， 1.36(t， J ＝ 7.1Hz， 3H).
实施例 90
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -2-[5-(3， 3- 二甲基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 4-{6-[8- 环戊基 -6-(1- 乙氧基 - 乙烯基 )-5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶 并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 ]- 吡啶 -3- 基 }-2， 2- 二甲基 - 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (0.400g， 0.663mmol) 溶于乙酸乙酯 (10ml) 和 6N HCl(10ml)， 在室温下搅拌 2 小时。蒸发溶剂， 得到 黄色固体， 在 50℃真空烘箱中干燥 5 小时。将固体用 EtOH(20ml) 研制， 过滤， 得到 6- 乙酰 基 -8- 环戊基 -2-[5-(3， 3- 二甲基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-5- 甲基 -8H- 吡啶 并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮盐酸盐， 为黄色固体 (0.120g， 38.1％ )。 1
H NMRδ(400MHz， DMSO-d6)9.15(s， 2H)， 8.93(s， 1H)， 8.04(d， J ＝ 3.2Hz， 1H)， 7.82(d， J ＝ 9.1Hz， 1H)， 7.64(m， 1H)， 5.78(m， 1H)， 3.31(m， 2H)， 3.24(m， 2H)， 3.18(s， 2H)，2.38(s， 3H)， 2.28(s， 3H)， 2.18(m， 2H)， 1.85(m， 2H)， 1.73(m， 2H)， 1.54(m， 2H)， 1.35(s， 6H).
MS(APCI)M+H ； 计算值 476.3， 实测值 476.1
元素分析计算值 ： C26H33N7O24.38HCl ： C， 49.16 ； H， 5.93 ； N， 15.43.Found ； C， 49.55 ； H， 6.80 ； N， 14.76.
实施例 91
4-(6- 氨基 - 吡啶 -3- 基 )-2， 6- 二甲基 - 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯
将 5- 溴 -2- 硝基吡啶 (10.81g， 53.3mmol)、 碘化四正丁基铵 (0.98g， 2.66mmol)、 2， 6- 二甲基 - 哌嗪 (6.69g， 58.6mmol) 和碳酸钾 (8.10g， 58.6mmol) 混合在 DMSO(50ml) 中。 将混合物温热至 80℃达 4 小时， 此 时借助 TLC 分析， 反应是完全的。将反应混合物用二氯 甲烷稀释， 用水洗涤 (3x75ml)。合并有机相， 经 MgSO4 干燥， 过滤除去无机盐， 浓缩剩余溶 剂， 得到橙色固体。将该固体溶于二氯甲烷 (150ml)， 向其中加入三乙胺 (10.8g， 14.8ml， 108mmol) 和二碳酸二叔丁酯 (13.95g， 63.9mmol)。 将反应混合物加热至回流达 3 小时， 然后 冷却至室温， 用二氯甲烷 (100ml) 稀释， 用水洗涤 (1x100ml)。然后将有机层经 MgSO4 干燥， 过滤， 蒸发溶剂， 得到橙色固体。将橙色固体溶于 THF(500ml)， 向其中加入阮内镍 (9.23g)。 将反应混合物在氢气氛 (50psi) 下摇动 4 小时。过滤除去催化剂， 蒸发溶剂， 得到粗的紫色 固体。该固体经过色谱纯化， 用乙酸乙酯洗脱， 得到 4-(6- 氨基 - 吡啶 -3- 基 )-2， 6- 二甲 基 - 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯， 为紫色固体 (4.36g， 26.7％ )。 1
H NMRδ(400MHz， CDCl3)7.72(d， J ＝ 2.4Hz， 1H)， 7.18(dd， J ＝ 2.9， 8.8Hz， 1H)， 6.51(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 4.35(s， 2H)， 4.21(m， 2H)， 3.08(dd， J ＝ 4.4， 11.7Hz 2H)， 1.48(s， 9H)， 1.35(d， J ＝ 6.8Hz， 6H).
实施例 92
4-[6-(6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基 氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]-2， 6- 二甲基 - 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯
将 6- 溴 -8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (1.0g， 2.70mmol) 和 4-(6- 氨 基 - 吡 啶 -3- 基 )-2， 6- 二 甲 基 - 哌 嗪 -1- 甲 酸 叔 丁 基 酯 (1.14g， 3.73mmol) 在甲苯 (10ml) 中加热至回流达 16 小时。将反应混合物冷却至室温， 过 滤收集所生成的沉淀， 在漏斗上用甲苯洗涤 (3x10ml)， 得到 4-[6-(6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲 基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]-2， 6- 二甲基 - 哌 嗪 -1- 甲酸叔丁基酯， 为深褐色 - 灰色固体 (0.620g， 37.6％ )。 1
H NMRδ(400MHz， CDCl3)8.79(s， 1H)， 8.23(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 7.99(d， J ＝ 2.7Hz， 1H)， 7.36(dd， J ＝ 2.7， 8.8Hz， 1H)， 5.99(m， 1H)， 4.28(m， 2H)， 3.30(m， 2H)， 2.93(dd， J ＝ 4.4， 11.7Hz 2H)， 2.61(s， 3H)， 2.30(m， 2H)， 2.11(m， 2H)， 1.89(m， 2H)， 1.68(m， 2H)， 1.49(s， 9H)， 1.38(d， J ＝ 6.8Hz， 6H).
实施例 93
6- 溴 -8- 环戊基 -2-[5-(3， 5- 二甲基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 4-[6-(6- 溴 -8- 环 戊 基 -5- 甲 基 -7- 氧 代 -7， 8- 二 氢 - 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]-2， 6- 二甲基 - 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (0.051g， 0.083mmol) 溶于二氯甲烷 (3ml)， 向其中加入 2N HCl(2ml)， 将混合物在室温下搅拌 2 小时。 将该混合物浓缩， 放置 10 天， 然后溶于 2N HCl(2ml)， 在室温下搅拌 5 小时。 除去溶剂， 得到 6- 溴 -8- 环 戊基 -2-[5-(3， 5- 二甲基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮盐酸盐， 为黄色固体 (0.039g， 71.4％ )。 1
H NMRδ(400MHz， DMSO-d6)9.51(m， 1H)， 9.02(m， 1H)， 8.98(s， 1H)， 8.07(s， 1H)， 7.83(s， 2H)， 5.90(m， 1H)， 3.85(d， J ＝ 11.2Hz， 2H)， 3.35(m， 2H)， 2.76(dd， J ＝ 12.0， 12.0Hz 2H)， 2.58(s， 3H)， 2.14(m， 2H)， 1.92(m， 2H)， 1.77(m， 2H)， 1.58(m， 2H)， 1.28(d， J ＝ 6.4Hz， 6H).
实施例 94
4-{6-[8- 环戊基 -6-(1- 乙氧基 - 乙烯基 )-5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 ]- 吡啶 -3- 基 }-2， 6- 二甲基 - 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯
将 4-[6-(6- 溴 -8- 环 戊 基 -5- 甲 基 -7- 氧 代 -7， 8- 二 氢 - 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -2- 基氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]-2， 6- 二甲基 - 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (0.450g， 0.735mmol)、 四 ( 三苯膦 ) 钯 (0.102g， 0.088mmol) 和三丁基 -(1- 乙氧基 - 乙烯基 )- 锡烷 (0.414g， 1.15mmol) 溶于甲苯 (4ml)， 缓慢加热至回流达 2 小时。 蒸发溶剂， 将固体重新溶于二氯甲烷 (8ml)。该溶液经过硅胶色谱纯化， 得到 4-{6-[8- 环戊基 -6-(1- 乙氧基 - 乙烯基 )-5- 甲 基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 ]- 吡啶 -3- 基 }-2， 6- 二甲基 - 哌 嗪 -1- 甲酸叔丁基酯， 为黄色固体 (0.275g， 61.9％ )。 1
H NMRδ(400MHz， CDCl3)8.73(s， 1H)， 8.20(d， J ＝ 9.0Hz， 1H)， 8.06(s， 1H)， 8.00(d， J ＝ 2.7Hz， 1H)， 7.32(dd， J ＝ 2.7， 9.0Hz， 1H)， 5.89(m， 1H)， 4.51(d， J ＝ 2.4Hz， 1H)， 4.26(m， 2H)， 4.17(d， J ＝ 2.4Hz， 1H)， 3.93(q， J ＝ 6.8Hz， 2H)， 3.28(d， J ＝ 11.7， 2H)， 2.90(dd， J ＝ 4.2， 11.7Hz， 1H)， 2.41(s， 3H)， 2.35(m， 2H)， 2.06(m， 2H)， 1.85(m， 2H)， 1.65(m， 2H)， 1.48(s， 9H)， 1.45(s， 6H)， 1.36(m， 9H).
实施例 95
6- 乙 酰 基 -8- 环 戊 基 -2-(3， 5- 二 甲 基 - 哌 嗪 -1- 吡 啶 -2- 基 氨 基 ]-5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 4-{6-[8- 环戊基 -6-(1- 乙氧基 - 乙烯基 )-5- 甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶 并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 ]- 吡啶 -3- 基 }-2， 2- 二甲基 - 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (0.250g， 0.414mmol) 溶于二氯甲烷 (3ml)， 向其中加入 2N HCl(3ml)， 将混合物在室温下搅拌 16 小 时。 蒸发溶剂， 将固体在 50℃真空烘箱中干燥 24 小时， 得到 6- 乙酰基 -8- 环戊基 -2-[5-(3， 5- 二甲基 - 哌嗪 -1- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮盐 酸盐， 为黄色固体 (0.120g， 38.1％ )。 1
H NMRδ(400MHz， DMSO-d6)9.51(m， 2H)， 9.0(m， 1H)， 8.97(s， 1H)， 8.08(d， J ＝ 2.7Hz， 1H)， 7.84(d， J ＝ 9.3Hz， 1H)， 7.78(m， 1H)， 5.80(m， 1H)， 3.35(d， J ＝ 11.5Hz， 2H)， 3.35(m， 2H)， 2.75(dd， J ＝ 12.2， 2H)， 2.40(s， 3H)， 2.30(s， 3H)， 2.19(m， 2H)， 1.88(m， 2H)， + 1.76(m， 2H)， 1.57(m， 2H)， 1.29(d， J ＝ 6.6Hz， 6H).MS(APCI) ； M +1 ： Calc’ d， 476.3， Found 476.1. 元素分析计算值 ： C26H33N7O22.70HCl， 0.10H2O ： C， 54.23， H， 6.28， N， 17.03.Found ： C， 54.60 ； H， 6.68 ； N， 16.57.
实施例 96
4-(6- 硝基 - 吡啶 -3- 基 )- 吗啉将 5- 溴 -2- 硝基吡啶 (5.41g， 25.3mmol)、 碘化四正丁基铵 (0.467g， 1.27mmol)、 吗 啉 (2.43g， 27.9mmol) 和 碳 酸 钾 (3.85g， 27.9mmol) 混 合 在 DMSO(50ml) 中。 将 混 合 物温热至 80 ℃达 15 小时。将反应混合物用乙酸乙酯稀释， 过滤除去固体。将有机滤液 用水洗涤， 然后蒸发溶剂。然后将残余物用二氯甲烷 / 己烷混合物研制， 得到 4-(6- 硝 1 基 - 吡啶 -3- 基 )- 吗啉， 为褐色针晶 (2.90g， 54.8％ )。 HNMRδ(400MHz， CDCl3)8.16(m， 1H)， 7.97(d， J ＝ 2.9Hz， 1H)， 7.15(dd， J ＝ 3.2， 9.3Hz， 1H)， 3.45(m， 4H)， 1.72(m， 4H).
实施例 97
5- 吗啉 -4- 基 - 吡啶 -2- 基胺
将 4-(6- 硝基 - 吡啶 -3- 基 )- 吗啉 (2.86g， 13.7mmol) 溶于 THF(100ml)， 向其中加 入阮内镍 (1.03g)。将反应混合物在氢气氛 (50psi) 下摇动 4 小时。过滤除去催化剂， 蒸发 1 溶剂， 得到 5- 吗啉 -4- 基 - 吡啶 -2- 基胺， 为紫色固体 (1.91g， 78.0％ )。H NMRδ(400MHz， CDCl3)7.76(d， J ＝ 2.0Hz， 1H)， 7.16(dd， J ＝ 2.7， 8.8Hz， 1H)， 6.50(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 4.24(s， 2H)， 3.84(m， 4H)， 3.16(m， 4H)， 3.01(m， 4H).
实施例 98
6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-(5- 吗啉 -4- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 6- 溴 -8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (1.0g， 2.70mmol) 和 5- 吗啉 -4- 基 - 吡啶 -2- 基胺 (0.668g， 3.73mmol) 在甲苯 (10ml) 中加 热至回流达 16 小时。将反应混合物冷却至室温， 过滤收集所生成的沉淀， 在漏斗上用甲苯 洗涤 (3x10ml)。将所得固体在乙酸乙酯 (15ml) 中重新回流， 冷却， 过滤， 得到 6- 溴 -8- 环 戊基 -5- 甲基 -2-(5- 吗啉 -4- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮， 1 为深褐色 - 灰色固体 (0.350g， 26.7％ )。 H NMRδ(400MHz， CDCl3)8.78(s， 1H)， 8.17(d， J ＝ 9.0Hz， 1H)， 8.02(d， J ＝ 2.7Hz， 1H)， 7.97(s， 1H)， 7.32(dd， J ＝ 2.9， 9.0Hz， 1H)， 5.99(m， 1H)， 3.89(m， 4H)， 3.16(m， 4H)， 2.61(s， 3H)， 2.30(m， 2H)， 2.10(m， 2H)， 1.88(m， 2H)， 1.68(m， 2H).
实施例 99
8- 环戊基 -6-(1- 乙氧基 - 乙烯基 )-5- 甲基 -2-(5- 吗啉 -4- 基 - 吡啶 -2- 基氨 基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-(5- 吗啉 -4- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶 并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (0.290g， 0.597mmol)、 四 ( 三苯膦 ) 钯 (0.083g， 0.072mmol) 和三 丁基 -(1- 乙氧基 - 乙烯基 )- 锡烷 (0.336g， 0.932mmol) 溶于甲苯 (4ml)， 缓慢加热至回流 达 3 小时。反应混合物经过硅胶色谱纯化， 得到 8- 环戊基 -6-(1- 乙氧基 - 乙烯基 )-5- 甲 基 -2-(5- 吗啉 -4- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮， 为黄色固体 1 (0.110g， 38.6 ％ )。 H NMRδ(400MHz ， DMSO-d6)8.95(s， 1H)， 8.83(s， 1H)， 8.02(d， J＝ 2.9Hz， 1H)， 7.86(d， J ＝ 9.0Hz， 1H)， 7.44(dd， J ＝ 3.2， 9.3Hz， 1H)， 5.79(m， 1H)， 4.42(d， J ＝ 2.0Hz， 1H)， 4.01(d， J ＝ 2.0Hz， 1H)， 3.79(q， J ＝ 6.8Hz， 2H)， 3.72(m， 4H)， 3.09(m， 4H)， 2.34(s， 3H)， 2.17(m， 2H)， 1.85(m， 2H)， 1.71(m， 2H)， 1.55(m， 2H)， 1.21(m， 3H).
实施例 1006- 乙酰基 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-(5- 吗啉 -4- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶 并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 8- 环戊基 -6-(1- 乙氧基 - 乙烯基 )-5- 甲基 -2-(5- 吗啉 -4- 基 - 吡啶 -2- 基 氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (0.490g， 1.03mmol) 溶于二氯甲烷 (5ml)。加入 2N HCl 的乙醚溶液 (3ml)， 将所得混合物在室温下搅拌 4 小时。然后， 加入另外的 2N HCl 的乙 醚溶液 (2ml)， 将混合物搅拌另外 12 小时。反应混合物用二氯甲烷和含水 NaHCO3 稀释。分 离各层， 将有机层经 MgSO4 干燥， 过滤， 蒸发溶剂， 得到黄色固体。 使固体从己烷、 乙酸乙酯与 二氯甲烷的混合物中重结晶， 得到 6- 乙酰基 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-(5- 吗啉 -4- 基 - 吡 啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮， 为黄色固体 (0.280g， 60.7％ )。 MS(APCI) ； + 1 M +1 ： 计算值， 449.2， 实测值 449.2. H NMRδ(400MHz， DMSO-d6)8.79(s， 1H)， 8.17(d， J＝ 9.0Hz， 1H)， 8.02(d， J ＝ 2.7Hz， 1H)， 7.31(dd， J ＝ 2.9， 9.0Hz， 1H)， 5.86(m， 1H)， 3.88(m， 4H)， 3.15(m， 4H)， 2.54(s， 3H)， 2.36(s， 3H)， 2.32(m， 2H)， 2.05(m， 2H)， 1.87(m， 2H)， 1.68(m， 2H).
实施例 101
6′ - 硝基 -3， 4， 5， 6- 四氢 -2H-[1， 3′ ] 联吡啶
将 5- 溴 -2- 硝基吡啶 (5.6g， 27.6mmol)、 碘化四正丁基铵 (0.510g， 1.38mmol)、 哌啶 (2.58g， 30.3mmol) 和碳酸钾 (3.85g， 30.3mmol) 混合在 DMSO(50ml) 中。将反应混合 物温热至 80℃达 4 小时。将反应混合物用乙酸乙酯稀释， 过滤。减少体积， 以除去乙酸乙 酯， 剩余溶液用水 (50ml) 稀释。 立即生成沉淀， 过滤收集， 在漏斗上用水洗涤， 得到 6′ - 硝 基 -3， 4， 5， 6- 四氢 -2H-[1， 3′ ] 联吡啶， 为橙色 - 褐色固体 (4.90g， 85.7％ )。 1
H NMRδ(400MHz， CDCl3)7.76(s， 1H)， 7.15(d， J ＝ 7.3Hz， 1H)， 6.49(d， J ＝ 8.5Hz， 1H)， 3.84(m， 5H)， 3.00(m， 4H)， 2.60(s， 1H).
实施例 102
3， 4， 5， 6- 四氢 -2H-[1， 3′ ] 联吡啶 -6′ - 基胺
将 6 ′ - 硝 基 -3， 4， 5， 6- 四 氢 -2H-[1， 3 ′ ] 联 吡 啶 (4.69g， 22.6mmol) 溶 于 THF(100ml)， 向其中加入阮内镍 (1.08g)。将反应在氢气氛 (50psi) 下摇动 4 小时。过滤 除去催化剂， 蒸发溶剂， 得到 3， 4， 5， 6- 四氢 -2H-[1， 3′ ] 联吡啶 -6′ - 基胺， 为紫色固体 (4.86g， 85.7％ )。 1
HNMRδ(400MHz， CDCl3)7.76(d， J ＝ 2.4Hz， 1H)， 7.19(dd， J ＝ 2.9， 8.8Hz， 1H)， 6.47(dd， J ＝ 0.7， 8.8Hz， 1H)， 4.18(s， 2H)， 2.97(m， 4H)， 1.71(m， 4H)， 1.53(m， 2H).
实施例 103
6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-(3， 4， 5， 6- 四氢 -2H-[1， 3 ′ ] 联吡啶 -6 ′ - 基氨 基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 6- 溴 -8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (1.0g， 2.70mmol) 和 3， 4， 5， 6- 四氢 -2H-[1， 3′ ] 联吡啶 -6′ - 基胺 (0.668g， 3.73mmol) 在甲苯 (10ml) 中加热至回流达 16 小时。将反应混合物冷却至室温， 过滤收集所生成的 沉淀， 在漏斗上用甲苯洗涤 (3x10ml)， 得到 6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-(3， 4， 5， 6- 四 氢 -2H-[1， 3 ′ ] 联 吡 啶 -6 ′ - 基 氨 基 )-8H- 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮， 为褐色固体 1 (0.358g， 27.3％ )。 HNMRδ(400MHz， CDCl3)8.79(s， 1H)， 8.27(s， 1H)， 8.17(d， J ＝ 9.0Hz，1H)， 8.01(s， 1H)， 7.38(d， J ＝ 6.8Hz， 1H)， 5.98(m， 1H)， 3.1(m， 4H)， 2.60(s， 3H)， 2.30(m， 2H)， 2.11(m， 2H)， 1.88(m， 2H)， 1.57-1.75(m， 8H).
实施例 104
8- 环戊基 -6-(1- 乙氧基 - 乙烯基 )-5- 甲基 -2-(3， 4， 5， 6- 四氢 -2H-[1， 3′ ] 联 吡啶 -6′ - 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 6- 溴 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-(5- 吗啉 -4- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶 并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (0.310g， 0.641mmol)、 四 ( 三苯膦 ) 钯 (0.089g， 0.077mmol) 和三 丁基 -(1- 乙氧基 - 乙烯基 )- 锡烷 (0.361g， 1.0mmol) 溶于甲苯 (3ml)， 缓慢加热至回流达 2 小时。使反应混合物冷却， 然后经过硅胶色谱纯化， 得到 8- 环戊基 -6-(1- 乙氧基 - 乙烯 基 )-5- 甲基 -2-(3， 4， 5， 6- 四氢 -2H-[1， 3′ ] 联吡啶 -6′ - 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮， 为黄色固体 (0.180mg， 59.2％ )。 1
H NMRδvvv(400MHz， CDCl3)8.73(s， 1H)， 8.16(d， J ＝ 9.0Hz， 1H)， 8.05(s， 1H)， 8.01(d， J ＝ 2.9Hz， 1H)， 7.36(dd， J ＝ 2.9， 9.3Hz， 1H)， 5.90(m， 1H)， 4.52(d， J ＝ 2.4Hz， 1H)， 4.18(d， J ＝ 2.2Hz， 1H)， 3.93(q， J ＝ 7.1Hz， 2H)， 3.14(m， 4H)， 2.41(s， 3H)， 2.36(m， 2H)， 2.06(m， 2H)， 1.84(m， 2H)， 1.56-1.77(m， 8H)， 1.21(t， J ＝ 7.1Hz， 3H).
实施例 105
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -5- 甲基 -2-(3， 4， 5， 6- 四氢 -2H-[1， 3′ ] 联吡啶 -6′ - 基 氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 8- 环戊基 -6-(1- 乙氧基 - 乙烯基 )-5- 甲基 -2-(3， 4， 5， 6- 四氢 -2H-[1， 3′ ] 联吡啶 -6′ - 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (0.180g， 0.379mmol) 溶于乙酸乙 酯 (10ml)， 加入 6N HCl(10ml)， 然后将混合物在室温下搅拌 2 小时。 混合物用二氯甲烷和含 水 NaHCO3 稀释。 分离各层， 将有机层经 MgSO4 干燥， 过滤， 蒸发溶剂， 得到 6- 乙酰基 -8- 环戊 基 -5- 甲基 -2-(3， 4， 5， 6- 四氢 -2H-[1， 3′ ] 联吡啶 -6′ - 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 1 嘧啶 -7- 酮， 为黄色固体 (0.120g， 71.0％ )。 H NMRδ(400MHz， CDCl3)8.78(s， 1H)， 8.20(d， J ＝ 8.5Hz， 1H)， 7.95(s， 1H)， 7.39(m， 1H)， 5.85(m， 1H)， 3.15(m， 4H)， 2.53(s， 3H)， 2.36(s， + 3H)， 2.33(m， 2H)， 2.05(m， 2H)， 1.87(m， 2H)， 1.77-1.56(m， 8H).MS(APCI) ； M +1 ： Calc’ d， 447.2， Found 447.2. 元素分析计算值 ：
C25H30N6O20.35H2O ： C， 66.31 ； H， 6.83 ； N， 18.56.Found ： C， 66.68 ； H， 6.76 ； N， 18.07.
实施例 106
8- 环戊基 -6-(2- 乙氧基 - 乙基 )-2- 甲硫基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
向冷却 (-78℃ ) 的 4- 乙氧基 - 丁酸乙酯 (9.85g， 61.47mmol) 的 THF(25ml) 溶液 加入双 ( 三甲基甲硅烷基 ) 氨基化锂 (77.0ml， 76.85mmol， 1MTHF 溶液 )。将反应混合物搅 拌 10 分钟， 生成阴离子。然后加入 4- 环戊氨基 -2- 甲硫基 - 嘧啶 -5- 甲醛， 使反应温热 至 RT， 搅拌过夜。反应混合物用 10％含水 HCl(100ml) 猝灭。水层用乙酸乙酯萃取 ( 总计 150ml)， 合并有机层， 浓缩， 得到黄色的油。经过硅胶色谱纯化 ( 氯仿 / 乙酸乙酯梯度 )， 得 到 8- 环戊基 -6-(2- 乙氧基 - 乙基 )-2- 甲硫基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (3.22g， 1 9.65mmol)。 MS(APCI+)334(M+1， 100) ； H NMR (400MHz， DMSO-d6)8.54(s， 1H)， 7.47-7.46(m， 1H)， 5.99-5.90(m， 1H)， 3.69(t， J ＝ 6.25Hz， 2H)， 3.49(q， J ＝ 7.03Hz， 2H)， 2.84(t， J ＝ 6.25Hz， 2H)， 2.59(s， 3H)， 2.34-2.29(m， 2H)， 2.08-2.02(m， 2H)， 1.88-1.83(m，2H)， 1.69-1.65(m， 3H)， 1.17(t， J ＝ 7.04Hz， 3H).
实施例 107
4-{6-[8- 环戊基 -6-(2- 乙氧基 - 乙基 )-7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -2- 基氨基 ]- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯
将 8- 环 戊 基 -6-(2- 乙 氧 基 - 乙 基 )-2- 甲 亚 磺 酰 基 -8H- 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮 (1.0g， 2.86mmol) 和 4-(6- 氨基 - 吡啶 -3- 基 )- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (1.10g， 3.95mmol) 在甲苯 (10ml) 中加热至回流达 16 小时。 将混合物冷却至室温， 经过硅胶色谱纯 化， 得到 4-{6-[8- 环戊基 -6-(2- 乙氧基 - 乙基 )-7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -2- 基氨基 ]- 吡啶 -3- 基 }- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯， 为橙色固体 (0.328g， 20.4％ )。 1
H NMRδ(400MHz， CDCl3)8.54(s， 1H)， 8.26(d， J ＝ 9.0Hz， 1H)， 7.98(d， J ＝ 2.9Hz， 1H)， 7.45(s， 1H)， 7.38(dd， J ＝ 2.9， 9.3Hz， 1H)， 5.90(m， 1H)， 3.70(t， J ＝ 6.3， 1H)， 3.61(m， 4H)， 3.51(q， J ＝ 7.1， 1H)， 3.11(m， 4H)， 2.84(t， J ＝ 5.9， 1H)， 2.33(m， 2H)， 2.08(m， 2H)， 1.87(m， 2H)， 1.69(m， 2H)， 1.48(s， 9H)， 1.19(t， J ＝ 7.1， 1H).
实施例 108
8- 环戊基 -6-(2- 乙氧基 - 乙基 )-2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 4-{6-[8- 环戊基 -6-(2- 乙氧基 - 乙基 )-7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 ]- 吡啶 -3- 基 }- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (0.325g， 0.577mmol) 溶于二氯甲 烷 (4ml)。 加入 2N HCl 的乙醚溶液 (4ml)， 将混合物在室温下搅拌 18 小时。 蒸发溶剂， 得到 8- 环戊基 -6-(2- 乙氧基 - 乙基 )-2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮盐酸盐， 为黄色固体 (0.292g， 97.7％ )。MS(APCI)M+H 计算值 ： 449.2. 实 测值 ： 449.2.
元素分析理论值 ： C25H33N7O22.6HCl， 0.35 H2O ： C， 52.26 ； H， 6.56 ； N， 16.88.Found ： C， 52.01 ； H， 6.96 ； N， 16.88.
实施例 109
8- 环戊基 -6-(2- 甲氧基 - 乙基 )-2- 甲硫基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 6- 溴甲基 -8- 环戊基 -2- 甲硫基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (1.33g， 3.75mmol) 溶于 2- 甲氧基乙醇 (10ml)， 向其中加入碳酸钾 (0.778g， 5.63mmol)， 将混合物 在室温下搅拌 2 小时。然后将反应混合物过滤， 用乙酸乙酯洗涤盐。合并有机相， 蒸发， 得 到 8- 环戊基 -6-(2- 甲氧基 - 乙氧基甲基 )-2- 甲硫基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮， 1 为蜡状固体 (1.00g， 76.3％ )。 H NMRδ(400MHz， CDCl3) 8.60(s， 1H)， 7.71(t， J ＝ 1.6Hz， 1H)， 5.95(m， 1H)， 4.52(d， J ＝ 1.6Hz， 1H)， 3.76(m， 2H)， 3.63(m， 2H)， 3.41(s， 3H)， 2.60(s， 3H)， 2.32(m， 2H)， 2.06(m， 2H)， 1.87(m， 2H)， 1.68(m， 2H).
实施例 110
8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -6-(2- 甲氧基 - 乙氧基甲基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮
将 8- 环戊基 -6-(2- 甲氧基 - 乙氧基甲基 )-2- 甲硫基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮 (1.46g， 4.18mmol) 和 2- 苯磺酰基 -3- 苯基 - 氧氮杂环丙烷 (1.31g， 5.01mmol) 溶 于二氯甲烷 (10ml)， 在环境温度下搅拌 12 小时。反应混合物然后经过硅胶色谱纯化， 得到8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -6-(2- 甲氧基 - 乙氧基甲基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮， 为白色蜡状固体 (0.60g， 39.3％ )。 1
H NMRδ(400MHz， CDCl3)8.94(s， 1H)， 7.88(t， J ＝ 1.7Hz， 1H)， 5.95(m， 1H)， 4.52(d， J ＝ 1.7Hz， 1H)， 3.80(m， 2H)， 3.65(m， 2H)， 3.43(s， 3H)， 2.98(s， 3H)， 2.25(m， 2H)， 2.13(m， 2H)， 1.94(m， 2H)， 1.70(m， 2H).
实施例 111
4-{6-[8- 环戊基 -6-(2- 甲氧基 - 乙氧基甲基 )-7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 ]- 吡啶 -3- 基 }- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯
将 8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -6-(2- 甲氧基 - 乙氧基甲基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮 (1.0g， 2.86mmol) 和 4-(6- 氨基 - 吡啶 -3- 基 )- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (1.10g， 3.95mmol) 在甲苯 (10ml) 中加热至回流达 16 小时。 将反应混合物冷却至室温， 经过硅胶色 谱纯化， 得到 4-{6-[8- 环戊基 -6-(2- 甲氧基 - 乙氧基甲基 )-7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 ]- 吡啶 -3- 基 }- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯， 为黄色固体 (0.140g， 14.7％ )。 1
H NMRδ(400MHz， CDCl 3)8.60(s， 1H)， 8.34(m， 1H)， 7.95(s， 1H)， 7.69(t， J ＝ 1.4Hz， 1H)， 7.42(m， 1H)， 5.91(m， 1H)， 4.53(d， J ＝ 1.2Hz， 1H)， 3.78(m， 1H)， 3.63(m， 6H)， 3.43(s， 3H)， 3.11(m， 4H)， 2.35(m， 2H)， 2.08(m， 2H)， 1.88(m， 2H)， 1.69(m， 2H)， 1.48(s， 9H).
实施例 112
8- 环 戊 基 -6-(2- 甲 氧 基 - 乙 氧 基 甲 基 )-2-(5- 哌 嗪 -1- 基 - 吡 啶 -2- 基 氨 基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 4-{6-[8- 环戊基 -6-(2- 甲氧基 - 乙氧基甲基 )-7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 ]- 吡啶 -3- 基 }- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (0.140g， 0.242mmol) 溶 于二氯甲烷 (2ml)。加入 2N HCl 的乙醚溶液 (2ml)， 将反应混合物在室温下搅拌 18 小时。 蒸发溶剂， 得到 8- 环戊基 -6-(2- 甲氧基 - 乙氧基甲基 )-2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基 氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮盐酸盐， 为黄色固体 (0.116g， 85.9％ )。MS(APCI) ； + M +1 ： 计算值， 480.3， 实测值 480.2.
元素分析理论值 ： C25H33N7O22.16HCl ： C， 53.78 ； H， 6.35 ； N， 17.56.Found ； C， 54.03 ； H， 6.64 ； N， 17.17.
实施例 113
8- 环戊基 -6- 乙氧基甲基 -2- 甲硫基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 3- 乙氧基 - 丙酸乙酯 (12.31g， 84.2mmol) 溶于四氢呋喃 (40ml)， 向其中缓慢加 入 LiHMDS(89ml， 88.9mmol， 1.0M THF 溶液 )。然后加入净的 4- 环戊氨基 -2- 甲硫基 - 嘧 啶 -5- 甲醛 (10.0g， 42.2mmol)， 将反应混合物在环境温度下搅拌 17 小时， 然后加热至回流 达 7 小时。将反应混合物用乙酸乙酯和水稀释， 分离各层， 有机层经 MgSO4 干燥， 蒸发溶剂， 得到粗油。 将粗产物溶于乙酸乙酯， 用己烷稀释， 得到沉淀， 过滤收集， 得到 8- 环戊基 -6- 乙 氧基甲基 -2- 甲硫基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮， 为灰白色固体 (4.70g， 34.9％ )。 1
H NMRδ(400MHz， CDCl3)8.47(s， 1H)， 7.52(t， J ＝ 1.5Hz， 1H)， 5.82(m， 1H)， 4.32(d， J ＝ 1.7Hz， 1H)， 3.53(q， J ＝ 7.1Hz， 2H)， 2.47(s， 3H)， 2.17(m， 2H)， 1.93(m， 2H)， 1.73(m， 2H)， 1.54(m， 2H)， 1.15(t， J ＝ 7.1Hz， 3H).实施例 114
8- 环戊基 -6- 乙氧基甲基 -2- 甲亚磺酰基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 8- 环戊基 -6- 乙氧基甲基 -2- 甲硫基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (4.60g， 14.40mmol) 和 2- 苯磺酰基 -3- 苯基 - 氧氮杂环丙烷 (4.89g， 18.72mmol) 溶于二氯甲烷 (30ml)， 在环境温度下搅拌 12 小时。粗产物然后经过硅胶色谱纯化， 得到 8- 环戊基 -6- 乙 氧 基 甲 基 -2- 甲 亚 磺 酰 基 -8H- 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮， 为 白 色 蜡 状 固 体 (2.67g， 55.3％ )。 1
H NMRδ(400MHz， CDCl3)8.94(s， 1H)， 7.81(t， J ＝ 1.7Hz， 1H)， 5.98(m， 1H)， 4.50(d， J ＝ 1.7Hz， 1H)， 3.68(q， J ＝ 7.1Hz， 2H)， 2.96(s， 3H)， 2.22(m， 2H)， 2.12(m， 2H)， 1.94(m， 2H)， 1.69(m， 2H)， 1.31(t， J ＝ 7.1Hz， 3H).
实施例 115
4-[6-(8- 环戊基 -6- 乙氧基甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基 氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯
将 8- 环戊基 -6- 乙氧基甲基 -2- 甲亚磺酰基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (1.0g， 2.86mmol) 和 4-(6- 氨基 - 吡啶 -3- 基 )- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (1.10g， 3.95mmol) 在甲苯 (10ml) 中加热至回流达 16 小时。将反应混合物冷却至室温， 经过硅胶色谱纯化， 得 到 4-[6-(8- 环戊基 -6- 乙氧基甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨 基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯， 为黄色固体 (0.140g， 14.7％ )。 1
H NMRδ(400MHz， CDCl3)8.59(s， 1H)， 8.26(d， J ＝ 9.3Hz， 1H)， 7.97(d， J ＝ 2.7Hz， 1H)， 7.6(t， J ＝ 1.5Hz， 1H)， 7.38(dd， J ＝ 2.7， 9.0Hz， 1H)， 5.89(m， 1H)， 4.55(d， J ＝ 1.2Hz， 1H)， 3.66(q， J ＝ 7.1Hz， 2H)， 3.60(m， 4H)， 3.11(m， 4H)， 2.34(m， 2H)， 2.07(m， 2H)， 1.88(m， 2H)， 1.69(m， 2H)， 1.48(s， 9H)， 1.30(t， J ＝ 6.8Hz， 3H).
实施例 116
8- 环戊基 -6- 乙氧基甲基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 4-{6-[8- 环戊基 -6-(2- 甲氧基 - 乙氧基甲基 )-7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 ]- 吡啶 -3- 基 }- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (0.140g， 0.242mmol) 溶 于二氯甲烷 (2ml)。加入 2N HCl 的乙醚溶液 (2ml)， 将反应混合物在室温下搅拌 18 小时。 蒸发溶剂， 得到 8- 环戊基 -6-(2- 甲氧基 - 乙氧基甲基 )-2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基 氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮， 为黄色固体 (0.116g， 85.9％ )。MS(APCI)M+1 计算 值： 450.3. 实测值 ： 450.1. 1
H NMRδ(400MHz， DMSO-d6)9.12(s， 2H)， 8.34(s， 1H)， 8.01(d， J ＝ 2.7Hz， 1H)， 7.86(s， 1H)， 7.83(s， 1H)， 7.76(d， J ＝ 9.5Hz， 1H)， 5.84(m， 1H)， 4.32(d， J ＝ 1.2Hz， 1H)， 3.57(q， J ＝ 6.8Hz， 2H)， 3.38(m， 4H)， 3.23(m， 4H)， 2.26(m， 2H)， 1.89(m， 2H)， 1.75(m， 2H)， 1.58(m， 2H)， 1.19(t， J ＝ 6.8Hz， 3H).
实施例 117
8- 环戊基 -6- 甲氧基甲基 -2- 甲硫基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 3- 甲氧基 - 丙酸甲酯 (9.95g， 84.2mmol) 溶于四氢呋喃 (40ml)， 向其中缓慢加 入 LiHMDS(89ml， 88.9mmol， 1.0M THF 溶液 )。然后加入净的 4- 环戊氨基 -2- 甲硫基 - 嘧啶 -5- 甲醛 (10.0g， 42.2mmol)， 将反应混合物加热至回流达 7 天。将反应混合物用乙酸乙 酯和水稀释， 分离各层， 有机层经 MgSO4 干燥， 蒸发溶剂， 得到粗油。 将粗产物溶于乙酸乙酯， 用己烷稀释， 得到沉淀， 过滤收集， 得到 8- 环戊基 -6- 甲氧基甲基 -2- 甲硫基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮， 为灰白色固体 (3.11g， 24.1 ％ )。1H NMRδ(400MHz， CDCl3)8.46(s， 1H)， 7.49(t， J ＝ 1.7Hz， 1H)， 5.81(m， 1H)， 4.28(d， J ＝ 1.7Hz， 1H)， 3.37(s， 3H)， 2.47(s， 3H)， 2.18(m， 2H)， 1.93(m， 2H)， 1.73(m， 2H)， 1.55(m， 2H).
实施例 118
8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -6- 甲氧基甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 8- 环戊基 -6- 甲氧基甲基 -2- 甲硫基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (4.44g， 14.54mmol) 和 2- 苯磺酰基 -3- 苯基 - 氧氮杂环丙烷 (4.94g， 18.90mmol) 溶于二氯甲烷 (100ml)， 在环境温度下搅拌 12 小时。减少溶剂体积至大约 50ml， 然后经过硅胶色谱纯化， 得到 8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -6- 甲氧基甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮， 为灰白 1 色固体 (2.51g， 53.7％ )。 H NMRδ(400MHz， CDCl3)8.93(s， 1H)， 7.78(t， J ＝ 1.7Hz， 1H)， 5.99(m， 1H)， 4.46(d， J ＝ 1.7Hz， 1H)， 3.53(s， 3H)， 2.96(s， 3H)， 2.23(m， 2H)， 2.12(m， 2H)， 1.93(m， 2H)， 1.69(m， 2H).
实施例 119
4-[6-(8- 环戊基 -6- 甲氧基甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基 氨基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯
将 8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -6- 甲氧基甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (2.5g， 7.78mmol) 和 4-(6- 氨基 - 吡啶 -3- 基 )- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (2.99g， 10.73mmol) 在甲苯 (25ml) 中加热至回流达 16 小时。将反应混合物冷却至室温， 经过硅胶色谱纯化， 得 到 4-[6-(8- 环戊基 -6- 甲氧基甲基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨 基 )- 吡啶 -3- 基 ]- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯， 为黄色固体 (1.24g， 30.5％ )。 1
H NMRδ(400MHz， CDCl3)8.59(s， 1H)， 8.26(d， J ＝ 9.3Hz， 1H)， 7.97(d， J ＝ 2.7Hz， 1H)， 7.6(t， J ＝ 1.5Hz， 1H)， 7.38(dd， J ＝ 2.7， 9.0Hz， 1H)， 5.89(m， 1H)， 4.55(d， J ＝ 1.2Hz， 1H)， 3.66(q， J ＝ 7.1Hz， 2H)， 3.60(m， 4H)， 3.11(m， 4H)， 2.34(m， 2H)， 2.07(m， 2H)， 1.88(m， 2H)， 1.69(m， 2H)， 1.48(s， 9H)， 1.30(t， J ＝ 6.8Hz， 3H).
实施例 120
8- 环戊基 -6- 甲氧基甲基 -2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 4-{6-[8- 环戊基 -6-(2- 甲氧基 - 乙氧基甲基 )-7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -2- 基氨基 ]- 吡啶 -3- 基 }- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (0.110g， 0.205mmol) 溶 于二氯甲烷 (2ml)。加入 2N HCl 的乙醚溶液 (2ml)， 将反应混合物在室温下搅拌 18 小时。 蒸发溶剂， 得到 8- 环戊基 -6-(2- 甲氧基 - 乙氧基甲基 )-2-(5- 哌嗪 -1- 基 - 吡啶 -2- 基 氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮盐酸盐， 为黄色固体 (0.096g， 92.1％ )。MS(APCI) 1 M+1 计 算 值 ： 450.3. 实 测 值 ： 450.1. H NMRδ(400MHz， DMSO-d6)9.12(s， 2H)， 8.34(s， 1H)， 8.01(d， J ＝ 2.7Hz， 1H)， 7.86(s， 1H)， 7.83(s， 1H)， 7.76(d， J ＝ 9.5 Hz， 1H)， 5.84(m， 1H)， 4.32(d， J ＝ 1.2Hz， 1H)， 3.57(q， J ＝ 6.8Hz， 2H)， 3.38(m， 4H)， 3.23(m， 4H)， 2.26(m， 2H)， 1.89(m， 2H)， 1.75(m， 2H)， 1.58(m， 2H)， 1.19(t， J ＝ 6.8Hz， 3H).实施例 121
2， 6- 二甲基 -4-(6- 硝基 - 吡啶 -3- 基 )- 吗啉
将 5- 溴 -2- 硝基吡啶 (4.84g， 23.84mmol)、 碘化四正丁基铵 (0.440g， 1.19mmol)、 2， 6- 二甲基 - 吗啉 (3.02g， 26.22mmol) 和碳酸钾 (3.62g， 26.22mmol) 混合在 DMSO(45ml) 中。将反应混合物温热至 80℃达 6 小时。将反应混合物用乙酸乙酯稀释， 过滤。减少滤液 的体积， 以除去乙酸乙酯， 剩余溶液用水 (50ml) 稀释。立即生成沉淀， 过滤收集， 然后在漏 斗上用水洗涤， 得到 2， 6- 二甲基 -4-(6- 硝基 - 吡啶 -3- 基 )- 吗啉， 为橙色固体 (4.39g， 1 78.0 ％ )。 H NMRδ(400MHz， CDCl3)8.16(d， J ＝ 9.0Hz， 1H)， 8.11(d， J ＝ 2.9Hz， 1H)， 7.19(dd， J ＝ 2.9， 9.3Hz， 1H)， 3.77(m， 2H)， 3.65(dd， J ＝ 2.2， 12.9Hz， 2H)， 2.66(dd， J＝ 10.7， 12.5Hz， 2H)， 1.29(d， J ＝ 6.4Hz， 6H).
实施例 122
5-(2， 6- 二甲基 - 吗啉 -4- 基 )- 吡啶 -2- 基胺
将 2， 6- 二 甲 基 -4-(6- 硝 基 - 吡 啶 -3- 基 )- 吗 啉 (4.00g， 16.86mmol) 溶 于 THF(100ml)， 向其中加入阮内镍 (3.10g)。将反应混合物在氢气氛 (50psi) 下摇动 4 小时。 过滤催化剂， 蒸发溶剂， 得到 5-(2， 6- 二甲基 - 吗啉 -4- 基 )- 吡啶 -2- 基胺， 为紫色固体 (3.05g， 87.4％ )。 1
H NMRδ(400MHz， CDCl3)7.74(d， J ＝ 2.4Hz， 1H)， 7.16(dd， J ＝ 2.9， 8.8Hz， 1H)， 6.49(dd， J ＝ 0.7， 8.8Hz， 1H)， 3.79(m， 2H)， 2.34(dd， J ＝ 10.5， 10.5， 2H)， 1.22(d， J ＝ 6.3Hz， 6H).
实施例 123
6- 溴 -8- 环戊基 -2-[5-(2， 6- 二甲基 - 吗啉 -4- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 6- 溴 -8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (1.0g， 2.70mmol) 和 5-(2， 6- 二甲基 - 吗啉 -4- 基 )- 吡啶 -2- 基胺 (0.668g， 3.73mmol) 在甲 苯 (10ml) 中加热至回流达 16 小时。将反应混合物冷却至室温， 过滤收集所生成的沉淀， 在 漏斗上用甲苯洗涤 (3x10ml)， 得到 6- 溴 -8- 环戊基 -2-[5-(2， 6- 二甲基 - 吗啉 -4- 基 )- 吡 啶 -2- 基氨基 ]-5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮， 为褐色固体 (0.358g， 27.3％ )。 MS(APCI)M+1 计算值 ： 513.2. 实测值 ： 513.1.
元素分析计算值： C24H29BrN6O2 ： C， 56.14 ； H， 5.69 ； N， 16.37.Found ； C， 55.90 ； H， 5.62 ； N， 16.10.
实施例 124
8- 环戊基 -6- 乙氧基甲基 -2-(3， 4， 5， 6- 四氢 -2H-[1， 3 ′ ] 联吡啶 -6 ′ - 基氨 基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 8- 环戊基 -6- 乙氧基甲基 -2- 甲亚磺酰基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (0.60g， 1.79mmol) 和 3， 4， 5， 6- 四氢 -2H-[1， 3′ ] 联吡啶 -6′ - 基胺 (0.438g， 2.47mmol) 在甲苯 (6ml) 中加热至回流达 16 小时。将反应混合物冷却至室温， 滤出所生成的沉淀， 用 甲苯洗涤 (2x4ml)， 得到 8- 环戊基 -6- 乙氧基甲基 -2-(3， 4， 5， 6- 四氢 -2H-[1， 3′ ] 联吡 啶 -6′ - 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (0.122g， 15.2％ )。MS(APCI)M+1 计算 值： 449.3. 实测值 ： 449.3.元素分析计算值 ： C25H32N6O2 ： C， 66.94 ； H， 7.19 ； N， 18.74.Found ： C， 66.72 ； H， 7.13 ； N， 18.57.
实施例 125
8- 环戊基 -6- 乙氧基甲基 -2-(5- 吗啉 -4- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 8- 环戊基 -6- 乙氧基甲基 -2- 甲亚磺酰基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (0.60g， 1.79mmol) 和 5- 吗啉 -4- 基 - 吡啶 -2- 基胺 (0.442g， 2.47mmol) 在甲苯 (6ml) 中加 热至回流达 16 小时。将反应混合物冷却至室温， 滤出所生成的沉淀， 用甲苯洗涤 (2x4ml)， 得到 8- 环戊基 -6- 乙氧基甲基 -2-(5- 吗啉 -4- 基 - 吡啶 -2- 基氨基 )-8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (0.142g， 17.6％ )。MS(APCI) ； M++1 ： 计算值， 451.3， 实测值 451.3.
元素分析计算值 ： C25H32N6O2 ： C， 63.98 ； H， 6.71 ； N， 18.65.Found ； C， 64.03 ； H， 6.66 ； N， 18.49.
实施例 126
(8- 环戊基 -2- 甲硫基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -6- 基甲基 )- 氨 基甲酸苄基酯
将 3- 苄氧基羰基氨基 - 丙酸乙酯 (6.68g， 26.58mmol) 溶于四氢呋喃 (40ml)， 向其 中缓慢加入 LiHMDS(28ml， 28mmol， 1.0M THF 溶液 )。然后加入净的 4- 环戊氨基 -2- 甲硫 基 - 嘧啶 -5- 甲醛 (3.15g， 13.29mmol)， 将反应混合物加热至回流达 7 小时。将反应混合物 用乙酸乙酯和水稀释， 分离各层， 有机层经 MgSO4 干燥， 蒸发溶剂， 得到粗油。粗油经过硅胶 色谱纯化， 得到 (8- 环戊基 -2- 甲硫基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -6- 基 甲基 )- 氨基甲酸苄基酯， 为淡黄色蜡状固体 (1.67g， 29.6％ )。 1
H NMRδ(400MHz， CDCl3)8.57(s， 1H)， 7.56(s， 1H)， 7.26-7.36(m， 5H)， 5.93(m， 1H)， 5.56(t， J ＝ 6.1Hz， 1H)， 5.08(s， 2H)， 4.25(d， J ＝ 6.2Hz， 2H)， 2.60(s， 3H)， 2.30(m， 2H)， 2.05(m， 2H)， 1.86(m， 2H)， 1.69(m， 2H).
实施例 127
(8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -6- 基甲 基 )- 氨基甲酸苄基酯
将 (8- 环戊基 -2- 甲硫基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -6- 基甲 基 )- 氨基甲酸苄基酯 (1.67g， 3.93mmol) 和 2- 苯磺酰基 -3- 苯基 - 氧氮杂环丙烷 (1.34g， 5.11mmol) 溶于二氯甲烷 (20ml)， 在环境温度下搅拌 12 小时。反应混合物然后经过硅胶色 谱纯化， 得到 (8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -7- 氧代 -7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -6- 基 甲基 )- 氨基甲酸苄基酯， 为白色固体 (0.98g， 56.6％ )。 1
H NMRδ(400MHz， CDCl3)8.89(s， 1H)， 7.68(s， 1H)， 7.32(m， 5H)， 5.96(m， 1H)， 5.52(t， J ＝ 6.4Hz， 1H)， 5.09(s， 2H)， 4.32(d， J ＝ 6.3Hz， 2H)， 2.95(s， 3H)， 2.22(m， 2H)， 2.12(m， 2H)， 1.95(m， 2H)， 1.69(m， 2H).
实施例 128
[8- 环戊基 -7- 氧代 -2-(3， 4， 5， 6- 四氢 -2H-[1， 3′ ] 联吡啶 -6′ - 基氨基 )-7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -6- 基甲基 ]- 氨基甲酸苄基酯
将 8- 环戊基 -6- 乙氧基甲基 -2- 甲亚磺酰基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮(0.90g， 2.04mmol) 和 3， 4， 5， 6- 四氢 -2H-[1， 3′ ] 联吡啶 -6′ - 基胺 (0.497g， 2.82mmol) 在甲苯 (10ml) 中加热至回流达 16 小时。将反应混合物冷却至室温， 滤出所生成的沉 淀， 用甲苯洗涤 (2x4ml)， 得到 [8- 环戊基 -7- 氧代 -2-(3， 4， 5， 6- 四氢 -2H-[1， 3′ ] 联 吡啶 -6 ′ - 基氨基 )-7， 8- 二氢 - 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -6- 基甲基 ]- 氨基甲酸苄基酯 1 (0.320g， 28.3％ )。 H NMRδ(400MHz， CDCl3)8.55(s， 1H) ， 8.12(d ，J ＝ 9.0Hz ， 1H) ， 8.03(d ，J ＝ 2.9Hz ， 1H) ， 7.95(s ， 1H) ， 7.54(s ， 1H) ， 7.27-7.35(m， 5H)， 5.88(m， 1H)， 5.62(t， J ＝ 6.1Hz， 1H)， 5.09(s， 2H)， 4.25(d， J ＝ 6.4Hz， 2H)， 2.34(m， 2H)， 2.04(m， 2H)， 1.88(m， 2H)， 1.71(m， 5H)， 1.60(m， 3H).
实施例 129
8- 环戊基 -2-[5-(2， 6- 二甲基 - 吗啉 -4- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-6-(1- 乙氧 基 - 乙烯基 )-5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 6- 溴 -8- 环戊基 -2-[5-(2， 6- 二甲基 - 吗啉 -4- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-5- 甲 基 -8H- 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮 (0.062g， 0.121mmol)、 四 ( 三 苯 膦 ) 钯 (0.017g， 0.015mmol) 和三丁基 -(1- 乙氧基 - 乙烯基 )- 锡烷 (0.068mg， 0.188mmol) 溶于甲苯 (2ml)， 缓慢加热至回流达 12 小时。加入另外的四 ( 三苯膦 ) 钯 (0.010g)， 将反应加热至回流达 16 小时。将反应混合物冷却， 经过硅胶色谱纯化， 得到 8- 环戊基 -2-[5-(2， 6- 二甲基 - 吗 啉 -4- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-6-(1- 乙氧基 - 乙烯基 )-5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 1 啶 -7- 酮， 为黄色固体 (0.055g， 90.2％ )。 H NMRδ(400MHz， CDCl3)8.72(s， 1H)， 8.17(d， J ＝ 9.0Hz， 1H)， 7.99(d， J ＝ 2.9Hz， 1H)， 7.83(s， 1H)， 7.29(dd， J ＝ 2.9， 9.0Hz， 1H)， 5.89(m， 1H)， 4.51(d， J ＝ 2.5Hz， 1H)， 4.17(d， J ＝ 2.4Hz， 1H)， 3.93(q， J ＝ 7.1Hz， 2H)， 3.83(m， 2H)， 3.37(d， J ＝ 10.3Hz， 2H)， 2.44(dd， J ＝ 10.5， 10.5， 2H)， 2.41(s， 3H)， 2.34(m， 2H)， 2.06(m， 2H)， 1.84(m， 2H)， 1.65(m， 2H)， 1.36(t， J ＝ 7.1Hz， 3H)， 1.26(d， J ＝ 6.4Hz， 6H).
实施例 130
6- 乙酰基 -8- 环戊基 -2-[5-(2， 6- 二甲基 - 吗啉 -4- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-5- 甲 基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 8- 环戊基 -2-[5-(2， 6- 二甲基 - 吗啉 -4- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-6-(1- 乙 氧 基 - 乙 烯 基 )-5- 甲 基 -8H- 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮 (0.055g， 0.109mmol) 溶 于 乙酸乙酯 (3ml) 和 1N 含水 HCl(2ml)， 在室温下搅拌 48 小时。反应混合物用二氯甲烷 和含水 NaHCO3 稀释。分离各层， 将有机层经 MgSO4 干燥， 过滤， 蒸发溶剂， 得到 6- 乙酰 基 -8- 环戊基 -2-[5-(2， 6- 二甲基 - 吗啉 -4- 基 )- 吡啶 -2- 基氨基 ]-5- 甲基 -8H- 吡啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮 (0.020g， 38.4 ％ )。MS(APCI)M+1 计 算 值 ： 477.3. 实 测 值 ： 477.2 1 . HNMRδ(400MHz， CDCl3)8.79(s， 1H)， 8.1(d， J＝ 9.0Hz， 1H)， 8.00(d， J ＝ 2.7Hz， 1H)， 7.90(s， 1H)， 7.30(dd， J ＝ 3.1， 9.3Hz， 1H)， 5.87(m， 1H)， 3.83(m， 2H)， 3.37(d， J ＝ 10.0Hz， 2H)， 2.54(s， 3H)， 2.46(dd， J ＝ 11.7， 11.7， 2H)， 2.37(s， 3H)， 2.32(m， 2H)， 2.05(m， 2H)， 1.87(m， 2H)， 1.68(m， 2H)， 1.27(d， J ＝ 6.4Hz， 6H).
实施例 131
8- 环戊基 -6- 甲基 -2- 甲硫基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 2-( 二乙氧基 - 磷酰基 )- 丙酸乙酯 (15.24g， 64mmol) 溶于四氢呋喃 (100ml)， 在 -70 ℃下向其中缓慢加入正丁基锂 (47.7ml， 119mmol， 2.5M 己烷溶液 )。将 4- 环戊氨基 -2- 甲硫基 - 嘧啶 -5- 甲醛 (15g， 63mmol) 溶于四氢呋喃 (70ml)， 然后加入到反应混合 物中， 使反应温热至 -40℃。3 小时后， 使反应温热至室温， 倒入冷的 1N 柠檬酸中， 用乙醚 萃取。将有机层用盐水洗涤， 经 MgSO4 干燥， 过滤， 浓缩， 得到黄色的油， 经过 硅胶色谱纯 化。将所得油溶于 1， 8- 二氮杂二环 [5.4.0] 十一碳 -7- 烯 (75ml)， 加热至 150 ℃达 4 小 时。将反应混合物冷却至室温， 用乙酸乙酯 (350ml) 稀释， 用 5％ HCl 和盐水洗涤， 经 MgSO4 干燥， 然后过滤， 在真空中浓缩。剩余残余物用乙醚稀释， 滤出所沉淀的固体， 得到 8- 环戊 基 -6- 甲基 -2- 甲硫基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮， 为白色固体 (6.33g， 31.3％ )。 1 H NMRδ(400MHz， CDCl3)8.52(s， 1H)， 7.39(d， J ＝ 1.2Hz， 1H)， 5.96， (m， 1H)， 2.59(s， 3H)， 2.30(m， 2H)， 2.19(d， J ＝ 1.2Hz， 3H)， 2.07(m， 2H)， 1.86(m， 2H)， 1.67(m， 2H).
实施例 132
8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -6- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 8- 环 戊 基 -6- 甲 基 -2- 甲 硫 基 -8H- 吡 啶 并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮 (2.56g， 9.30mmol) 溶于二氯甲烷 (17ml) 和甲基 (17ml)， 向其中加入 2- 苯磺酰基 -3- 苯基 - 氧氮 杂环丙烷， 将反应混合物搅拌 16 小时。除去溶剂， 加入乙醚。过滤收集所沉淀的固体， 得到 8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -6- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮， 为白色固体 (2.30g， 84.8％ )。 1
H NMRδ(400MHz， CDCl3)8.85(s， 1H)， 7.54(s， 1H)， 5.99， (m， 1H)， 2.95(s， 3H)， 2.27(d， J ＝ 1.2Hz， 3H)， 2.24(m， 2H)， 2.13(m， 2H)， 1.94(m， 2H)， 1.70(m， 2H).
实施例 133
6- 溴 -8- 环戊基 -2-(4- 甲氧基 - 苄基氨基 )-5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮
将 6- 溴 -8- 环戊基 -2- 甲亚磺酰基 -5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (1.00g， 2.70mmol) 与 4- 甲氧基苄基胺 (0.39ml， 4.0mmol) 的甲苯 (15ml) 悬液在回流下加 热 2 小时。将溶液冷却， 过滤收集所得固体， 得到 6- 溴 -8- 环戊基 -2-(4- 甲氧基 - 苄基氨 基 )-5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (1.04g， 86.4％ )。
1H NMR(400MHz， CDCl3)1.6(m， 2H)， 1.8(m， 2H)， 2.0(m， 2H)， 2.2(m， 2H)， 2.53(s，3H)， 3.79(s， 3H)， 4.59(m， 2H)， 5.96(m， 1H)， 6.1(m， 1H)， 6.86 (d， J ＝ 8.3Hz， 2H)， 7.27(d， J Calc for M+H， 443.1 ； Found， 443.1 ＝ 8.1Hz， 2H)， 8.5(br s， 1H).MS(APCI)(C21H23Br1N4O2) ：
实施例 134 8- 环戊基 -6-(1- 乙氧基 - 乙烯基 -2-(4- 甲氧基 - 苄基氨基 ))-5- 甲基 -8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 6- 溴 -8- 环戊基 -2-(4- 甲氧基 - 苄基氨基 )-5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧 啶 -7- 酮 (0.44g， 1.0mmol)、 三丁基 (1- 乙氧基乙烯基 ) 锡 (0.53ml， 1.6mmol) 和四 ( 三苯 膦 ) 钯 (0)(0.14g， 0.12mmol) 的甲苯 (5ml) 悬浮液在回流下加热 2 小时。将悬浮液冷却至 室温， 过滤。 浓缩滤液， 将残余物用己烷研制， 得到固体。 经过硅胶色谱处理 ( 含 5 至 50％乙 酸乙酯的己烷， 历经 15 分钟 )， 得到 8- 环戊基 -6-(1- 乙氧基 - 乙烯基 -2-(4- 甲氧基 - 苄 1 H 基氨基 ))-5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (0.35g， 81％ )。 NMR (400MHz， CDCl3)1.34(t， J ＝ 7.1Hz， 3H)， 1.6(m， 2H)， 1.7(m， 2H)， 2.0(m， 2H)， 2.3(m， 2H)， 2.34(s， 3H)， 3.78(s， 3H)， 3.90(q， J ＝ 7.0Hz， 2H)， 4.13(d， J ＝ 2.2Hz， 1H)， 4.48(d， J
＝ 2.2Hz， 1H)， 4.59(d， J ＝ 5.4Hz， 2H)， 5.87(m， 1H)， 6.0(m， 1H)， 6.86(d， J ＝ 8.6Hz， 2H)， 7.27(d， J ＝ 8.6Hz， 2H)， 8.5(br s， 1H).MS(APCI)(C25H30N4O3)Calc for M+H， 435.2 ； Found， 435.3.
实施例 135
6- 乙酰基 -2- 氨基 -8- 环戊基 -5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮
将 8- 环戊基 -6-(1- 乙氧基 - 乙烯基 -2-(4- 甲氧基 - 苄基氨基 )-5- 甲基 -8H- 吡 啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (2.90g， 6.67mmol) 的三氟乙酸 (50ml) 溶液在回流下加热 8 小时。 冷却后， 在真空中浓缩溶液， 用水稀释。将所得悬液用 1N NaOH 调至碱性， 过滤收集固体。 将固体溶于 CH2Cl2， 经过硅胶色谱处理， 用乙酸乙酯洗脱， 得到 6- 乙酰基 -2- 氨基 -8- 环戊 基 -5- 甲基 -8H- 吡啶并 [2， 3-d] 嘧啶 -7- 酮 (1.51g， 79.1％ )。 1
mp 182-186 ℃ . H NMRδ(400MHz， CDCl3)1.6(m， 2H)， 1.8(m， 2H)， 2.0(m， 2H)， 2.3(m ， 2H) ， 2.32(s ， 3H) ， 2.52(s ， 3H) ， 5.34(s ， 2H) ， 5.84(m ， 1H) ， 8.63(s ， 1H).MS(APCI) (C15H18N4O2)Calc for M+H， 287.1 ； Found， 287.1.
实施例 136
生物学测定法
为了测定本发明化合物对 Cdk4 和有关激酶的抑制效力和选择性， 在常用于测量 细胞周期蛋白依赖性激酶和其它蛋白激酶抑制作用的标准测定法中评价化合物 ( 例如参 见 D.W.Fry et al.， J.Biol.Chem.2001， 276， 16617-16623)。这些测定法是如下所述进行 的。
Cdk2/ 细胞周期蛋白 A 抑制作用的测定
关于 IC50 测定和动力学评价的 Cdk2 酶测定法是如下进行的。使用 96 孔过滤平 板 (Millipore MADVN6550)。最终测定体积为 0.1ml， 含有缓冲液 A(20mM TRIS( 三 [ 羟 甲 基 ] 氨 基 甲 烷 )(pH7.4)， 50mM NaCl， 1mM 二 硫 苏 糖 醇， 10mM MgCl2)、 12mM ATP( 含 有 32 0.25μCi[ P]ATP)、 20ngCdk2/ 细胞周期蛋白 A、 1μg 视网膜母细胞瘤蛋白和供试化合物的 适当比例缓冲液 A 稀释液 ( 采用没有加入供试化合物的单独缓冲液 A 作为没有抑制作用 的对照。使用含有过量 EDTA 的缓冲液 A 测定在没有酶活性存在下的背景 32P 水平 )。向小 孔加入除 ATP 以外的所有组分， 将平板置于平板混合机上达 2 分钟。加入 [32P]ATP 引发反 应， 将平板在 25℃下孵育 15 分钟。加入 0.1ml 20％ TCA 终止反应。使平板在 4℃下保持至 少 1 小时， 以便底物沉淀出来。然后将小孔用 0.2ml 10％ TCA 洗涤 5 次， 利用 β 平板计数 32 器 (Wallac Inc.， Gaithersburg， MD) 测定 P 的引入。利用中位效应法测定供试化合物的 IC50(Chou， T-C and Talalay， P.Applications of the median effect principle for the assessmentof low-dose risk of carcinogens and for the quantitation ofsynergism and antagonism of chemotherapeutic agents.In ： NewAvenues in Developmental Cancer Chemotherapy(Eds.Harrap， K.T.and Connors， T.A.)， pp.37-64.Academic Press， New York， 1987)。
Cdk4/ 细胞周期蛋白 D 抑制作用的测定
关于 IC50 测定和动力学评价的 Cdk4 酶测定法是如下进行的。使用 96 孔过滤 平 板 (Millipore MADVN6550)。 总 体 积 为 0.1ml， 含 有 缓 冲 液 A(20mM TRIS( 三 [ 羟 甲 基 ] 氨 基 甲 烷 )(pH7.4)， 50mM NaCl， 1mM 二 硫 苏 糖 醇， 10mM MgCl2)、 25μM ATP( 含 有0.25μCi[32P]ATP)、 20ngCdk4、 1μg 视网膜母细胞瘤蛋白和供试化合物的适当比例缓冲液 A 稀释液。采用没有加入供试化合物的单独缓冲液 A 作为没有抑制作用的对照。使用含有 过量 EDTA 的缓冲液 A 测定在没有酶活性存在下的背景 32P 水平。向小孔加入除 ATP 以外 的所有组分， 将平板置于平板混合机上达 2 分钟。加入 [32P]ATP 引发反应， 将平板在 25℃ 下孵育 15 分钟。加入 0.1ml 20％三氯乙酸 (TCA) 终止反应。使平板在 4℃下保持至少 1 小时， 以便底物沉淀出来。然后将小孔用 0.2ml 10 ％ TCA 洗涤 5 次， 利用 β 平板计数器 32 (Wallac Inc.， Gaithersburg， MD) 测定 P 的结合。利用中位效应法测定供试化合物的 IC50(Chou， T-C and Talalay， P.Applications of the median effect principle for the assessmentof low-dose risk of carcinogens and for the quantitation ofsynergism and antagonism of chemotherapeutic agents.In ： NewAvenues in Developmental Cancer Chemotherapy(Eds.Harrap， K.T.and Connors， T.A.)， pp.37-64.Academic Press， New York， 1987)。
FGFr 抑制作用的测定
就 FGF 受体 (FGFr) 酪氨酸激酶测定法而言， 使用 96 孔平板 (100μl/ 孵育 / 孔 )， 32 优化条件， 以测量从 [γ P]ATP 到谷氨酸盐 - 酪氨酸共聚物底物的 32P 引入。简而言之， 向 每孔加入 82.5μl 孵育缓冲液 B(25mM Hepes(pH 7.0)， 150mM NaCl， 0.1％ Triton X-100， 0.2mM PMSF， 0.2mM Na 3VO4， 10mM MnCl2) 和 750μg/ml 聚 (4 ∶ 1) 谷氨酸盐 - 酪氨酸， 继 之以 2.5μl 供试化合物的缓冲液 B 稀释液和 5μl 7.5μg/μl FGFr 溶液， 引发反应。在 32 25℃下孵育 10 分钟后， 向每孔加入 10ml[γ P]ATP(0.4μCi 加 50μMATP)， 将样本在 25℃ 下孵育另外 10 分钟。加入 100μl 含有 20mM 焦磷酸钠的 30％三氯乙酸 (TCA) 终止反应， 产 物沉淀在玻璃纤维垫 (Wallac) 上。将滤器用含有 100mM 焦磷酸钠的 15％ TCA 洗涤 3 次， 在 Wallac 1250Betaplate 读数器中计数滤器上所保留的放射性。非特异性活性被定义为 在样本与单独缓冲液 ( 没有酶 ) 孵育之后滤器上所保留的放射性。特异性酶活性 ( 酶加缓 冲液 ) 被定义为总活性减去非特异性活性。基于抑 制曲线确定供试化合物抑制 50％特异 性活性的浓度 (IC50)。
若干本发明化合物与 WO 98/33798 所公开的化合物对比测定结果列在表 1 中。为 了对比， 可能的话还提供了每种实施例化合物 C2 苯基氨基类似物的数据。这些类似物不同 于实施例化合物在于吡啶基环氮原子被 CH 代替， 用上标区分于本发明化合物 ( 例如， 实施 例化合物 1 的苯基氨基类似物表示为 1’ )。这些 C2- 苯基氨基吡啶并嘧啶酮以前描述在专 利申请 WO 98/33798 和 WO 01/70741 中。
表1
实施例 1’ 1 3’ 3 5’ 5 7’Cdk4IC50(μM) 0.21 0.145 0.002 0.016 0.001 0.019 0.004Cdk2IC50(μM) 0.021 5.01 0.043 6.052 0.142 NA 5.95075FGFr IC50(μM) 2.98 ＞5 0.08 1.032 0.086 0.99 0.042101906104 A CN 101906106说0.595 0.005 0.012 0.175 ＞5 0.260 0.005 0.160 0.015 0.051 0.002 0.027 0.009 1.70 0.004 0.005 NA 0.013 0.006 0.049 0.006 0.123 0.006 0.011 NA ＞5 0.088 0.95 0.145 0.005 0.135 0.018 0.036 1.1 0.024 0.014 ＞5 0.006 0.015 0.006 0.013 0.92 0.430 0.763 0.135 0.005明书NA 0.088 2.12 NA NA NA 1.74 ＞5 NA NA 0.153 1.605 NA ＞5 NA ＞5 NA 4.38 3.943 ＞5 0.535 ＞5 1.83 ＞5 NA ＞5 NA ＞5 ＞5 0.711 NA 0.94 ＞5 ＞5 ＞5 ＞5 ＞5 0.081 1.52 4.35 1.38 4.47 ＞5 0.515 ＞572/74 页7 11’ 11 12 13 14 15’ 15 18’ 18 20’ 20 22’ 22 24’ 24
29’ 29 31’ 31b 33’ 33 36’ 36 37’ 37 38’ 38 50 51’ 51 53’ 53 54 55 57’ 57 59’ 59 61’ 61 64 65 66 70 72＞5 0.095 NA NA NA NA 0.439 ＞5 0.139 ＞5 0.059 4.05 3.149 ＞5 ＞5 ＞5 NA ＞5 5 ＞5 0.556 ＞5 0.233 ＞5 NA ＞5 0.080 ＞5 ＞5 0.179 ＞5 ＞5 ＞5 ＞5 ＞5 0.084 ＞5 0.024 2.5 0.119 0.835 ＞5 3.30 ＞5 ＞5 ＞576101906104 A CN 101906106说0.014 0.074 0.019 0.012 0.440 0.007 0.580 0.020 0.021 0.015 0.063 0.005 0.037 1.95 0.004 ＞5 0.005 0.007 0.124 0.031 0.018 0.013 0.545 0.018 0.030明＞5 ＞5书＞5 ＞5 ＞5 ＞5 ＞5 1.078 ＞5 ＞5 ＞5 ＞5 ＞5 1.815 ＞5 ＞5 ＞5 NA ＞5 0.136 ＞5 ＞5 ＞5 2.470 ＞5 ＞5 ＞573/74 页74 75 77 81 82 84’ 84 88’ 88 90 93’ 93 95’ 95 98 100 103 105 108’ 108 112 116 120 124 125 130
＞5 ＞5 ＞5 ＞5 ＞5 1.33 ＞5 1.86 ＞5 0.545 ＞5 ＞5 ＞5 ＞5 ＞5 0.205 ＞5 ＞5 ＞5 3.800 ＞5 ＞5 ＞5制剂实施例
如上所述， 本发明化合物通常将与常用赋形剂、 稀释剂和载体配制成组合物， 适宜 对哺乳动物给药。下列实施例阐述典型的组合物， 它们作为本发明进一步的实施方式而提 供。
实施例 137
片剂制剂
将本发明化合物与乳糖和玉米淀粉 ( 混合用 ) 混合， 掺合均匀， 得到粉末。将玉米 淀粉 ( 成糊用 ) 悬浮在 6ml 水中， 在搅拌的同时加热形成糊。将糊加入到混合后的粉末中， 将混合物造粒。使湿颗粒通过 No.8 硬筛， 在 50℃下干燥。将混合物用 1％硬脂酸镁润滑， 压制成片。将片剂对患者给药， 频率 (rate) 为每天 1 至 4 次， 用于预防和治疗癌症。
实施例 138
肠胃外溶液
向 700ml 丙二醇与 200ml 注射用水的溶液加入 20.0g 本发明化合物 36b。搅拌该 混合物， 用盐酸调节 pH 至 5.5。用注射用水调节体积至 1000ml。将溶液灭菌， 灌装在 5.0ml 安瓿中， 每支含有 2.0ml(40mg 化合物 )， 在氮气氛下密封。 将溶液注射给予患有癌症并且需 要治疗的患者。
现在已经利用如此完整、 清楚、 简明和精确的术语描述了本发明和制备及使用它 的方式和方法， 使所属领域技术人员能够制备和使用之。 可以理解的是， 上面描述了本发明 优选的实施方式， 可以对其进行修改， 而不背离如权利要求书所述的本发明精神或范围。 为 了确切地指出和明确地要求保护被视为发明的主题， 下列权利要求为本说明书作总结。78