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异黄酮衍生物 - 色烯 ( 满 ) 并噁嗪类化合物及其制备方法 和应用
    技术领域 本发明属于医药技术领域， 涉及异黄酮衍生物 - 色烯 ( 满 ) 并噁嗪类化合物及该 类化合物的制备、 抗癌活性的研究。
     背景技术 异黄酮类化合物广泛分布于大豆和其他多种植物中， 是许多药用植物的有效成 分， 具有明显的抗心律失常、 抗缺氧缺血、 解痉挛、 抗骨质疏松、 植物雌激素、 抑制癌细胞生 长、 抗氧化等作用。 结构研究证实， 异黄酮类为杂环多酚化合物， 与雌二醇具有相似结构。 在 大豆以及大豆异黄酮 ( 主要成分为染料木黄酮和大豆甙元 ) 的抗癌动物实验中， 发现生大 豆、 熟大豆以及有效成分均存在抑癌效果。同时， 大豆甙元为异黄酮类化合物的一种， 体外 研究表明其对乳腺癌、 前列腺癌和结肠癌有明显的抑制作用。 近年来， 国内外对黄酮类和异 黄酮类化合物的抗癌研究取得了很大的进展， 尤其近几年， 异黄酮的抗癌研究以取得突破 性的进展。
     目前， 已明确异黄酮抗癌主要作用机制包括 ： (1). 抑制酪氨酸蛋白激酶 (PTK) 活 性； (2). 抑制拓扑异构酶 II 活性 ； (3). 抑制新生血管形成 ； (4). 抗氧化作用 ； (5). 诱导细 胞程序性死亡和基因表达 ； (6). 性激素作用。
     已有的研究表明异黄酮化合物具有药理活性， 然而， 我们仍然需要新的、 活性更优 的化合物用于预防治疗相应疾病。
     发明内容
     本发明的目的是提供一种异黄酮衍生物 - 色烯 ( 满 ) 并噁嗪类化合物及其制备方 法和应用。
     本发明是在已有化合物结构的基础上做出一系列改动得到的色烯 ( 满 ) 并噁嗪类 化合物。该类化合物不仅可以避免酚羟基在空气中易氧化的特性， 而且在体内可以很快的 释放出羟基以发挥其作用。且该类化合物具有较强的抗肿瘤活性。
     本发明所述的异黄酮类衍生物， 其结构通式如下 (I)-(III)。
     其中，R1 表示氢、 取代或未取代的低级烷基、 环烷基、 烯基或炔基、 碳环或杂环芳基、 (碳 环或杂环芳基 )- 低级烷基、 低级烷基碳环或杂环芳基， 且 R1， R1’ 彼此独立， 可以相同也可以 不同 ；
     R2、 R3 和 R4 表示氢、 取代或未取代的低级烷基、 环烷基、 碳环或杂环芳基、 ( 碳环或 杂环芳基 )- 低级烷基、 羟基、 OR9、 OC(O)R9、 OS(O)R9、 巯基、 低级烷基硫基、 硝基、 腈基或卤 素；
     R2、 R3 和 R4 彼此独立， 可以相同也可以不同 ；
     R5 表示氢、 取代或未取代的低级烷基、 环烷基、 碳环或杂环芳基、 ( 碳环或杂环芳 基 )- 低级烷基、 羟基、 硝基、 腈基或卤素 ；
     R6 表示氢、 取代或未取代的低级烷基、 环烷基、 碳环或杂环芳基、 ( 碳环或杂环芳 基 )- 低级烷基、 硝基、 腈基或卤素 ；
     R7 表示氢、 取代或未取代的低级烷基、 环烷基、 碳环或杂环芳基、 ( 碳环或杂环芳 基 )- 低级烷基、 硝基、 腈基或卤素 ；
     R5、 R6、 和 R7 彼此独立， 可以相同也可以不同。
     通式 (II) 中的 R8 定义如下 ：
     表示氢、 取代或未取代的低级烷基、 环烷基、 碳环或杂环芳基、 ( 碳环或杂环芳 基 )- 低级烷基、 硝基、 腈基或卤素 ；
     通式 (III) 中的 R1’ 定义同 R1， 彼此独立， 可以相同也可以不同。
     X 为氧原子、 NR10、 或硫原子， 最好为氧原子 ；
     其中 R9、 R10 表示取代或未取代的低级烷基、 碳环或杂环芳基、 ( 碳环或杂环芳 基 )- 低级烷基 ；
     通式 (I)-(III) 结构中的符号 表示单键或双键。 低级烷基取代基可以被 1-3 个选自烷基、 卤素、 酰氧基、 羟基、 烷氧基、 硅氧基、 硝 基、 腈基的取代基任选取代。
     该发明提到的化合物还包括其所有药用可接受的盐， 比如阳离子盐， 阴离子盐， 两
     性离子盐。 “药用可接受的盐” 主要是指带有电荷的有机或无机基团， 并且可以与其它药用 试剂一起给药， 比如在盐中作为配对阳离子和配对阴离子。此处药用可接受的阳离子有钠 离子、 镁离子、 钾离子、 钙离子、 锌离子， 也可与氨形成铵盐， 以及与生理上可耐受的有机胺 如三乙胺或三 -(2- 羟乙基 ) 胺形成的盐， 但并不局限于此 ； 阴离子有氯离子、 醋酸根离子、 甲基苯磺酸离子、 柠檬酸盐、 碳酸盐和碳酸氢盐， 同样阴离子盐也不局限于此。
     药用可接受的盐包括如下形式 ： 醋酸盐、 抗坏血酸的盐、 天冬氨酸盐、 苯甲酸盐、 苯 磺酸盐、 柠檬酸盐、 肉桂酸盐、 乙基磺酸盐、 富马酸盐、 谷氨酸盐、 戊二酸盐、 葡萄酸盐、 盐酸 盐、 氢溴酸盐、 乳酸盐、 麻林酸盐、 苹果酸盐、 甲基磺酸盐、 萘酸盐、 羟基萘酸盐、 萘基磺酸盐、 萘基丙烯酸盐、 油酸盐、 草酸盐、 草酰乙酸盐、 磷酸盐、 丙酮酸盐、 对甲基苯磺酸盐、 酒石酸 盐、 三氟乙酸盐、 三苯基乙酸盐、 丙三酸盐、 水杨酸盐、 硫酸盐、 氨基磺酸盐、 对氨基苯磺酸盐 和琥珀酸盐。
     根据本发明更进一步的说明， 即当 X 为氧原子时， 所述的化合物为色烯 ( 满 ) 并噁 嗪类化合物， 其通式如 (I-I)、 (II-I) 和 (III-I) 所示，
     其中，
     R1 表示氢、 取代或未取代的低级烷基、 环烷基、 烯基或炔基、 碳环或杂环芳基、 (碳 环或杂环芳基 )- 低级烷基、 低级烷基碳环或杂环芳基， 且 R1， R1’ 彼此独立， 可以相同也可以
     不同 ； R2、 R3 和 R4 表示氢、 取代或未取代的低级烷基、 环烷基、 碳环或杂环芳基、 ( 碳环或 杂环芳基 )- 低级烷基、 羟基、 OR9、 OC(O)R9、 OS(O)R9、 巯基、 低级烷基硫基、 硝基、 腈基或卤 素；
     R2、 R3 和 R4 彼此独立， 可以相同也可以不同 ；
     R5 表示氢、 取代或未取代的低级烷基、 环烷基、 碳环或杂环芳基、 ( 碳环或杂环芳 基 )- 低级烷基、 羟基、 硝基、 腈基或卤素 ；
     R6 表示氢、 取代或未取代的低级烷基、 环烷基、 碳环或杂环芳基、 ( 碳环或杂环芳 基 )- 低级烷基、 硝基、 腈基或卤素 ；
     R7 表示氢、 取代或未取代的低级烷基、 环烷基、 碳环或杂环芳基、 ( 碳环或杂环芳 基 )- 低级烷基、 硝基、 腈基或卤素 ；
     R5、 R6、 和 R7 彼此独立， 可以相同也可以不同。
     通式 (II) 中的 R8 定义如下 ：
     表示氢、 取代或未取代的低级烷基、 环烷基、 碳环或杂环芳基、 ( 碳环或杂环芳 基 )- 低级烷基、 硝基、 腈基或卤素 ；
     通式 (III) 中的 R1’ 定义同 R1， 彼此独立， 可以相同也可以不同。
     其中 R9 表示取代或未取代的低级烷基、 碳环或杂环芳基、 ( 碳环或杂环芳基 )- 低 级烷基 ；
     通式 (I)-(III) 结构中的符号 表示单键或双键。
     低级烷基取代基可以被 1-3 个选自烷基、 卤素、 酰氧基、 羟基、 烷氧基、 硅氧基、 硝 基、 腈基的取代基任选取代。
     该类化合物还包括相应的有药理活性的盐。
     其中较优选择可定义如下，
     R1、 R1’表示氢、 取代或未取代的低级烷基、 碳环或杂环芳基、 ( 碳环或杂环芳 基 )- 低级烷基、 低级烷基碳环或杂环芳基 ； R2、 R3 和 R4 表示氢、 取代或未取代的低级烷基、 ( 碳环或杂环芳基 )- 低级烷基、 羟 基、 OR9、 OC(O)R9、 OS(O)R9、 硝基、 腈基或卤素 ；
     R5 表示氢、 取代或未取代的低级烷基、 羟基或卤素 ；
     R6 表示氢、 取代或未取代的低级烷基、 碳环芳基 ；
     R7、 R8 表示氢、 取代或未取代的低级烷基或卤素 ；
     其中 R9 表示取代或未取代的低级烷基、 ( 碳环或杂环芳基 )- 低级烷基 ； 通式
     (I-I)-(III-I) 结构中的符号
     表示单键或双键低级烷基取代基可以被 1-3 个选自烷基、 卤素、 酰氧基、 羟基、 烷氧基、 硅氧基、 硝 基、 腈基的取代基任选取代。
     该类化合物还包括相应的有药理活性的盐。
     还可以较优定义如下，
     R1、 R1’ 为甲基、 乙基、 正丙基、 异丙基、 丁基、 苯甲基、 苯乙基、 苯基、 萘甲基、 萘基或 者由卤素、 羟基、 乙酰氧基、 甲氧基、 乙氧基、 硝基、 腈基取代的烷基苯基 ；
     R2、 R3 和 R4 表示氢、 羟基、 甲氧基 ；
     R2、 R3 和 R4 彼此独立， 可以相同也可以不同 ；
     R5 为氢、 甲基或卤素 ；
     R6 为氢、 甲基或乙基 ；
     R7 为氢、 甲基或卤素 ；
     R8 为氢、 甲基或卤素 ；
     卤素为氯和溴 ；
     通式 (I)-(III) 结构中的符号 表示单键或双键。
     该类化合物还包括相应的有药理活性的盐。
     还可优先定义为，R1 为甲基、 乙基、 正丙基、 苯甲基、 苯乙基、 苯基、 萘甲基或由甲基、 卤素、 羟基、 甲氧 基、 硝基、 腈基取代的甲基苯基 ；
     R2、 R3 和 R4 表示氢、 羟基、 甲氧基 ；
     R2、 R3 和 R4 彼此独立， 可以相同也可以不同 ；
     R5 为氢 ；
     R6 为氢 ；
     R7 为氢 ；
     R8 为氢。
     卤素为氯和溴。
     该类化合物还包括相应的有药理活性的盐。
     根据本发明， 通式 (I) 所代表的化合物含有手性中心， 该发明包含所有的对映异 构体和非对应异构体以及它们的拆分方法。
     发明中所提到的 “异黄酮” 或 “异黄酮类化合物” 包括异黄酮、 异黄烯、 异黄烷、 二 氢异黄酮、 异黄醇以及类似的化合物。
     发明中所提到的 “低级烷基” 是指 1 到 6 个碳原子的直链烷基或支链烷基， 例如甲 基、 乙基、 正丙基、 异丙基、 丁基、 异丁基、 叔丁基、 戊基、 异戊基、 己基等。其中最佳为 1 到 4 个碳原子的烷基， 比如甲基、 乙基、 正丙基、 异丙基、 正丁基、 异丁基、 叔丁基等。
     发明中提到的 “环烷基” 一般包含 3 到 7 个碳原子， 比如环丙基、 环丁基、 环戊基、 环己基、 环庚基。
     上文中提到的烷基、 烯基、 炔基、 环烷基可以被 1-3 个选自烷基、 卤素、 酰氧基、 羟 基、 烷氧基、 硅氧基、 硝基、 腈基的取代基任选取代。
     发明中提到的 “碳环芳基” 是指 C6-C10 芳基， 可以是苯基、 萘基， 也可以是被一个或 多个选自烷基、 卤素、 烷氧基、 羟基、 硅氧基、 硝基和腈基的取代基任选取代的苯基、 萘基。
     发明中提到的 “杂环芳基” 是指 5-10 元杂环芳基， 所述杂环芳基可以含有 1-3 个 选自 N、 O 或 S 的杂原子。
     发明中提到的 “卤素” 包括氟、 氯、 溴、 碘， 较为理想的为氯和溴。比如发明中提到 的 “卤代烷基” 就包括单卤代， 二卤代和全卤代烷基。
     该发明提到的化合物还包括其所有药用可接受的盐， 比如阳离子盐， 阴离子盐， 两 性离子盐。 “药用可接受的盐” 主要是指带有电荷的有机或无机基团， 并且可以与其它药用 试剂一起给药， 比如在盐中作为配对阳离子和配对阴离子。此处药用可接受的阳离子有钠 离子、 钾离子、 镁离子、 钙离子、 锌离子、 季铵盐， 但并不局限于此 ； 阴离子有氯离子、 醋酸根 离子、 甲基苯磺酸离子、 柠檬酸盐、 碳酸盐和碳酸氢盐， 同样阴离子盐也不局限于此。
     药用可接受的盐包括如下形式 ： 醋酸盐、 抗坏血酸的盐、 天冬氨酸盐、 苯甲酸盐、 苯 磺酸盐、 柠檬酸盐、 肉桂酸盐、 乙基磺酸盐、 富马酸盐、 谷氨酸盐、 戊二酸盐、 葡萄酸盐、 盐酸 盐、 氢溴酸盐、 乳酸盐、 麻林酸盐、 苹果酸盐、 甲基磺酸盐、 萘酸盐、 羟基萘酸盐、 萘基磺酸盐、 萘基丙烯酸盐、 油酸盐、 草酸盐、 草酰乙酸盐、 磷酸盐、 丙酮酸盐、 对甲基苯磺酸盐、 酒石酸 盐、 三氟乙酸盐、 三苯基乙酸盐、 丙三酸盐、 水杨酸盐、 硫酸盐、 氨基磺酸盐、 对氨基苯磺酸盐 和琥珀酸盐等无机酸或有机酸的盐。
     本发明提到的化合物可由异黄烷酮及其类似物为原料来制备， 其结构如通式(I-II)， (II-II) 所示 ：
     其中 R2、 R3、 R4、 R5、 R6、 R7、 R8、 X 与上文中所述定义相同 ； 另外反应中用到的还有甲 醛与伯胺 R1-NH2 或 R1’ -NH2， 其中 R1 与 R1’ 与上述定义相同， 彼此独立， 可以相同亦可以不 同。
     根据已有的文献 (WO98/08503 和 WO01/17986) 可合成通式 (I-II、 II-II、 ) 中所代 表的化合物。例如 4’ ， 7- 二羟基异黄烷酮及其类似物都可以通过 scheme I 所列出的通法 合成。
     利用苯环上不同取代的苯乙酸作为原料可制得各种异黄烷酮衍生物， 或者是得到 scheme I 所示化合物后再通过基团转化得到上述通式 (I-II)， (II-II) 所代表的其它化合 物。 同样的， 也可以利用不同取代的间苯二酚、 苯硫酚或苯胺做为起始原料来得到上述通式 (I-II)， (II-II) 所代表的 5 位、 6 位或 8 位取代的化合物。
     以异黄烷酮及其类似物为原料， 经过曼尼希反应、 还原反应、 脱水反应、 环合反应 可制得本发明的色烯并噁嗪类化合物及其类似物 ； 经过还原反应、 曼尼希反应、 环合反应可 制得本发明的色满并噁嗪类化合物及其类似物。根据环合反应发生的位置不同， 具体实施 方案如下 ：
     I： A 环上的成环反应
     I-1 色烯并噁嗪类化合物及其类似物
     第一步， 以通式 (I-II) 所代表的化合物为原料， 其中原料、 37％甲醛水溶液、 伯胺 配比为 1 ∶ 1.2 ∶ 1.6。先将甲醛、 伯胺按比例用少量 1， 4- 二氧六环溶解， 45℃搅拌 10 分 钟， 然后将原料的 1， 4- 二氧六环溶液倒入上述溶液中， 70℃搅拌 1h-3h， 冷却后析晶。
     第二步， 将析晶得到的固体用甲醇溶解， 分批加入 4 倍量的硼氢化钠室温下搅拌。 反应 24h 后， 加入饱和氯化铵溶液分解过量的硼氢化钠， 并加水搅拌， 然后用乙酸乙酯进行 萃取。将溶剂蒸干即得到固体产物。
     第三步， 将萃取得到的固体用乙醇室温溶解， 再加入 2 倍量的盐酸乙醇， 反应 1h 后 减压蒸掉部分乙醇， 然后再加入 2 倍量的无水乙醚使固体析出， 抽滤。
     第四步， 室温条件下以无水甲醇做溶剂， 加入适量的氢氧化钾与 1.2 倍量的多聚 甲醛搅拌下溶解， 然后加入上步得到的固体， 反应结束后抽滤即得到目标产物。 反应通式如 scheme II-1 所示。
     I-2 色满并噁嗪类化合物及其类似物
     第一步， 以通式 (I-II) 所代表的化合物为原料， 其中原料与甲酸铵的摩尔配比为 1 ∶ 6.5， 与 10％ Pd-C 的质量比是 1 ∶ 1.5。 将上述三种物质加入到适量冰醋酸中， 在 110℃ 下搅拌反应 6h， 冷却至室温， 氯仿稀释反应液， 抽滤， 分液收集氯仿层， 蒸去溶剂得棕黄色油 状物质。
     第二步， 将上述得到的棕黄色油状物质， 与 37％甲醛水溶液、 伯胺以 1 ∶ 1.2 ∶ 1.6 的配比进行曼尼希反应。
     第三步， 室温条件下以无水甲醇做溶剂， 加入适量的氢氧化钾与 1.2 倍量的多聚 甲醛搅拌下溶解， 然后加入上步得到的曼尼希产物， 反应结束后抽滤即得到目标产物。 反应 通式如 scheme II-2 所示。
     II ： C 环上的成环反应
     其中， 以通式 (II-II)( 其中 R8 不为氢 ) 所代表的化合物为原料进行反应时， 方案 同 I。此处介绍以通式 (II-II)( 其中 R8 为氢 ) 所代表的化合物为原料， 方案如下 ：
     II-1 色烯并噁嗪类化合物及其类似物
     第一步， 以通式 (II-II)( 其中 R8 为氢 ) 所代表的化合物为原料， 与氯甲基甲醚、 碳酸钾配比为 1 ∶ 1.5 ∶ 2。先将原料和碳酸钾溶于一定量丙酮中于室温下搅拌 15min， 然 后加入氯甲基甲醚， 继续搅拌 20min 后停止反应。除去滤饼， 加水搅拌， 用乙酸乙酯萃取， 得 淡黄色油状物。
     第二步， 将上步得到的油状物用甲醇溶解， 分批加入 3 倍量的硼氢化钾室温下搅 拌。反应 40min 后， 加入饱和氯化铵溶液分解过量的硼氢化钠， 并加水搅拌， 然后用乙酸乙 酯进行萃取。将溶剂蒸干即得到黄色油状物。
     第三步， 该步进行曼尼希反应， 其中上步油状物质、 37％甲醛水溶液、 伯胺配比为 1 ∶ 1.2 ∶ 1.6。先将甲醛、 伯胺按比例用少量 1， 4- 二氧六环溶解， 45℃搅拌 10 分钟， 然后 将上述油状物质的 1， 4- 二氧六环溶液倒入上述溶液中， 70℃搅拌 12h-15h。反应停后冷却 析晶。
     第四步， 将得到的固体用乙醇室温溶解 ( 不一定全溶 )， 再加入 2 倍量的盐酸乙醇， 反应 4h 后减压蒸掉部分乙醇， 然后再加入 2 倍量的无水乙醚使固体析出， 抽滤。
     第五步， 室温条件下以无水甲醇做溶剂， 加入适量的氢氧化钾与 1.2 倍量的多聚 甲醛搅拌下溶解， 然后加入上步得到的固体， 反应结束后抽滤即得到目标产物。 反应通式如 scheme III-1 所示。
     II-2 色满并噁嗪类化合物及其类似物
     第一步， 以通式 (I-II)( 其中 R8 为氢 ) 所代表的化合物为原料， 其中原料与甲酸 铵的摩尔配比为 1 ∶ 6.5， 与 10％ Pd-C 的质量比是 1 ∶ 1.5。将上述三种物质加入到适量 冰醋酸中， 在 110℃下搅拌反应 6h， 冷却至室温， 氯仿稀释反应液， 抽滤， 分液收集氯仿层， 蒸去溶剂得棕黄色油状物质。
     第二步， 以上述得到的棕黄色油状物质为原料， 与氯甲基甲醚、 碳酸钾配比为 1 ∶ 1.5 ∶ 2。先将原料和碳酸钾溶于一定量丙酮中于室温下搅拌 15min， 然后加入氯甲基 甲醚， 继续搅拌 20min 后停止反应。除去滤饼， 加水搅拌， 用乙酸乙酯萃取， 得黄色油状物。
     第 三 步， 将 第 二 步 得 到 的 黄 色 油 状 物 质 为 原 料， 与 37 ％ 甲 醛 水 溶 液、 伯胺以 1 ∶ 1.2 ∶ 1.6 的配比进行曼尼希反应。
     第四步， 将上述得到的曼尼希产物用 2 倍量的乙醇溶解， 室温下搅拌， 再加入适量 的盐酸乙醇继续搅拌 6h。反应毕， 蒸掉部分乙醇， 然后再加入 2 倍量的无水乙醚使固体析 出， 抽滤。
     第五步， 室温条件下以无水甲醇做溶剂， 加入适量的氢氧化钾与 1.2 倍量的多聚 甲醛搅拌下溶解， 然后加入上步得到的固体， 反应结束后抽滤即得到目标产物。 反应通式如 scheme III-2 所示。
     III ： A 环和 C 环都参与的成环反应
     III-1 色烯并噁嗪类化合物及其类似物
     该反应的实施方案同 I 相似， 主要是在第一步中反应物料的配比及反应时间发生 了改变。以通式 (II-II)( 其中 R8 为氢 ) 所代表的化合物为原料进行反应， 它与 37％甲醛 水溶液、 伯胺配比为 1 ∶ 2.5 ∶ 3.5， 先将甲醛、 伯胺按比例用少量 1， 4- 二氧六环溶解， 45℃ 搅拌 10 分钟， 然后将 (II-II) 的 1， 4- 二氧六环溶液倒入上述溶液中， 70℃搅拌 24h-30h ； 后三步反应与 I 相同。反应通式如 scheme IV-1 所示。
     III-2 色满并噁嗪类化合物及其类似物
     第一步， 以通式 (II-II)( 其中 R8 为氢 ) 所代表的化合物为原料进行反应， 其中原 料与甲酸铵的摩尔配比为 1 ∶ 6.5， 与 10％ Pd-C 的质量比是 1 ∶ 1.5。将上述三种物质加 入到适量冰醋酸中， 在 110℃下搅拌反应 6h， 冷却至室温， 氯仿稀释反应液， 抽滤， 分液收集 氯仿层， 蒸去溶剂得棕红色油状物质。
     第二步， 将第二步得到的棕红色油状物质为原料， 与 37 ％甲醛水溶液、 伯胺以 1 ∶ 2.5 ∶ 3.5 的配比进行曼尼希反应。 。
     第三步， 室温条件下以无水甲醇做溶剂， 加入适量的氢氧化钾与 1.2 倍量的多聚 甲醛搅拌下溶解， 然后加入上步得到的曼尼希产物， 反应结束后抽滤即得到目标产物。 反应 通式如 scheme IV-2 所示。
     上述路线的曼尼希反应仅限于脂肪伯胺， 由于芳香胺的反应活性较差， 本发明采 用胺交换的方法得到芳香胺曼尼希碱， 以通式 (I) 所代表的化合物为例进行说明， 具体操 作如下 ：
     第一步， 以通式 (I-II) 所代表的化合物为原料， 其中原料、 37％甲醛水溶液、 脂肪 胺 ( 一般选用仲胺， 二甲胺 ) 配比为 1 ∶ 1.2 ∶ 1.6。先将甲醛、 脂肪胺按比例用少量 1， 4- 二氧六环溶解， 45 ℃搅拌 10 分钟， 然后将原料的 1， 4- 二氧六环溶液倒入上述溶液中， 70℃搅拌 1h-3h。反应停后冷却析晶。
     第二步， 将上步得到的黄色固体用丙酮溶解， 在冰浴条件下加入溴甲烷的丙酮溶 液， 搅拌直到有固体析出。
     第三步， 按原料与芳香胺 1 ∶ 1.5 的配比取一定量的芳香胺溶于乙醇中， 将季铵盐 固体加入到上述乙醇溶液中， 再滴加 2-3 滴冰醋酸于 35℃下反应 2h-3h。反应结束后冷却 析晶即得到芳香胺曼尼希碱， 反应通式如 scheme V 所示。
     附图说明 ：
     图 1 为 MCF-7 细胞筛药模型 ( 紫杉醇 )
     图 2 为 MCF-7 细胞筛药 (YHT-1 ～ YHT-4)
     图 3 为 MCF-7 细胞筛药 (YHT-5 ～ YHT-8)
     图 4 为 MCF-7 细胞筛药 (YHT-9 ～ YHT-12)
     图 5 为 MCF-7 细胞筛药 (YHT-13 ～ YHT-16) 具体实施方式 ：
     下面我们列举出一些色烯 ( 满 ) 并噁嗪类化合物的具体合成方案。
     实施例 13-(4’ - 甲氧基苯基 )-9- 丙基 -9， 10- 二氢 -2H， 8H- 色烯并 [8， 7-e][1， 3]- 噁嗪 -3- 烯 (1)
     取 2.4mL 丙胺 (0.030mol) 和 1.8mL 37 ％甲醛水溶液 (0.022mol) 溶于 3mL 1， 4- 二氧六环中， 45 ℃搅拌 10min。4’ - 甲氧基 -7- 羟基异黄酮 (5g， 0.019mol) 溶于 50mL 1， 4- 二氧六环中， 滴加至上述反应液中， 升温至 70 ℃， 搅拌反应 3h， 冷却至室温， 减压除 去部分溶剂， 冷却至 5 ℃析晶， 抽滤得到黄色固体 2.9g， 乙醇重结晶得淡黄色固体 2.18g。 取 1g 上述固体用 75mL 甲醇溶解， 室温搅拌下分批加入硼氢化钠 (0.40g， 0.011mol)， 反应 24h 后， 加入饱和氯化铵溶液分解过量硼氢化钠， 并加水搅拌， 用乙酸乙酯进行萃取， 蒸干溶 剂得到 0.8g 土黄色固体。将得到的固体加入 16mL 乙醇室温下溶解， 再加入 12mL 盐酸乙 醇 (0.5mol/L)， 搅拌， 加入 2 倍量无水乙醚使固体析出， 放置后抽滤， 得到 0.52g 类白色固 0.002mol) 在室温搅拌下 体。以无水甲醇做溶剂， 加入适量氢氧化钾与多聚甲醛 (0.06g， 溶解， 然后加入上述固体， 反应毕抽滤即得到目标产物， 为白色固体 (0.41g， 收率 75.9％ )。 1 H NMR(300MHz， d6-DMSO)δ ： 0.94(t， 3H， CH3)， 1.60(m， 2H， CH2)， 2.71(t， 2H， -N-CH2-CH2)， 3.83(s， 3H， -OCH 3)， 3.95(s， 2H， Ar-CH 2-N)， 4.84(s， 2H， CH 2-O)， 5.12(s， 2H， O-CH 2-N)， 6.65(s， 1H， H4)， 6.37(d， 1H， J ＝ 8.28Hz， H6)， 6.85(d， 1H， J ＝ 8.29Hz， H5)， 6.91(d， 2H， J ＝ 8.73Hz， H3’ ， H5’ )， 7.34(d， 2H， J ＝ 8.75Hz， H2’ ， H6’ )。
     所实施例 23-(4’ - 甲氧基苯基 )-9- 异丙基 -9， 10- 二氢 -2H， 8H- 色烯并 [8， 7-e] [1， 3]- 噁嗪 -3- 烯 (2)
     取 2.4mL 异丙胺 (0.030mol) 和 1.8mL 37％甲醛水溶液 (0.022mol) 溶于 3mL 1， 4- 二氧六环中， 45℃搅拌 10min。4’ - 甲氧基 -7- 羟基异黄酮 (5g， 0.019mol) 溶于 50mL 1， 4- 二氧六环中， 滴加至上述反应液中， 70℃搅拌反应 3h， 冷却至室温， 减压除去部分溶剂， 冷却至 5℃析晶， 抽滤得到黄色固体 2.3g。取 1.5g 黄色固体用 105mL 甲醇溶解， 室温搅拌 下分批加入硼氢化钠 (0.60g， 0.016mol)， 反应 24h 后， 加入饱和氯化铵溶液分解过量的硼 氢化钠， 并加水搅拌， 乙酸乙酯进行萃取， 蒸干溶剂得到 1.2g 土黄色固体。将得到的固体加 入 24mL 乙醇室温下溶解， 再加入 12mL 盐酸乙醇 (0.5mol/L)， 搅拌， 加入 2 倍量无水乙醚搅 拌使固体析出， 放置后抽滤， 得到 0.83g 类白色固体。以无水甲醇做溶剂， 加入适量氢氧化 钾与多聚甲醛 (0.08g， 0.003mol) 在室温搅拌下溶解， 然后加入上述固体， 反应毕抽滤即得
     到目标产物， 为类白色固体 (0.71g， 收率 82.5 ％ )。1HNMR(300MHz， CDCl3)δ ： 1.15(d， 6H， C(CH3)2)， 3.11(m， 1H， NCH(CH3)2)， 3.83(s， 3H， -OCH3)， 4.01(s， 2H， Ar-CH2-N)， 4.93(s， 2H， CH2-O)， 5.13(s， 2H， O-CH2-N)， 6.65(s， 1H， H4)， 6.35(d， 1H， J ＝ 8.25Hz， H6)， 6.84(d， 1H， J ＝ 8.27Hz， H5)， 6.91(d， 2H， J ＝ 8.81Hz， H3’ ， H5’ )， 7.35(d， 2H， J ＝ 8.79Hz， H2’ ， H6’ )。
     实 施 例 33-(4’ - 羟 基 苯 基 )-9- 丙 基 -9， 10- 二 氢 -2H， 8H- 色 烯 并 [8， 7-e][1， 3]- 噁嗪 -3- 烯 (3)
     取 2.4mL 丙胺 (0.030mol) 和 1.8mL 37％甲醛水溶液 (0.022mol) 溶于 3mL 1， 4- 二 氧六环中， 45℃搅拌 10min。然后取 4’ ， 7- 二羟基异黄酮 (5g， 0.020mol) 溶于 50mL 1， 4- 二 氧六环中， 滴加到上述反应液中， 70℃搅拌反应 1.5h， 冷却至室温， 减压除去部分溶剂， 冷却 至 5℃析晶， 抽滤得到黄色固体 3.21g， 乙醇重结晶得淡黄色固体 2.79g。 取 1.5g 上述淡黄色 固体用 100mL 甲醇溶解， 室温搅拌下分批加入硼氢化钠 (0.70g， 0.018mol)， 反应 24h 后， 加 入饱和氯化铵溶液分解过量的硼氢化钠， 并加水搅拌， 乙酸乙酯萃取， 蒸干溶剂得到 0.76g 淡红色固体。将得到的固体加入 16mL 乙醇室温下溶解， 再加入 10mL 盐酸乙醇 (0.5mol/ L)， 搅拌， 加入 2 倍量无水乙醚搅拌使固体析出， 放置后抽滤， 得到 0.49g 类白色固体。以 无水甲醇做溶剂， 加入适量氢氧化钾与多聚甲醛 (0.06g， 0.002mol) 在室温搅拌下溶解， 然 后加入上述固体， 反应毕抽滤即得到目标产物， 为淡黄色固体 (0.29g， 收率 57.0 ％ )。1H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 0.94(t， 3H， CH3)， 1.63(m， 2H， CH2)， 2.72(t， 2H， -N-CH2-CH2)， 3.96(s， 2H， Ar-CH2-N)， 4.84(s， 2H， CH2-O)， 5.11(s， 2H， O-CH2-N)， 6.63(s， 1H， H4)， 6.38(d， 1H， J＝ 8.29Hz， H6)， 6.85(d， 1H， J ＝ 7.91Hz， H5)， 6.83(d， 2H， J ＝ 8.68Hz， H3’ ， H5’ )， 7.28(d， 2H， J ＝ 8.67Hz， H2’ ， H6’ )。
     实 施 例 43-(4’ - 甲 基 苯 基 )-9- 甲 基 -9， 10- 二 氢 -2H， 8H- 色 烯 并 [8， 7-e][1， 3]- 噁嗪 -3- 烯 (4)
     取 3.4mL 25％甲胺 (0.019mol) 和 1.2mL 37％甲醛水溶液 (0.015mol) 溶于 1.5mL 1， 4- 二氧六环中， 45℃搅拌 10min。4’ - 甲基 -7- 羟基异黄酮 (3g， 0.012mol) 溶于 30mL 1，
     4- 二氧六环中滴加至上述反应液中， 70℃搅拌反应 2h， 冷却至室温， 减压除去部分溶剂， 冷 却至 5℃析晶， 抽滤得到黄色固体 2.8g， 乙醇重结晶得淡黄色固体 2.5g。取 1.5g 上述淡黄 色固体用 80mL 甲醇溶解， 室温搅拌下分批加入硼氢化钠 (0.77g， 0.020mol)， 反应 24h 后， 加 入饱和氯化铵溶液分解过量的硼氢化钠， 并加水搅拌， 乙酸乙酯萃取， 蒸干得到 0.97g 淡红 色固体。 将得到的固体加入 20mL 乙醇室温下溶解， 再加入 13mL 盐酸乙醇 (0.5mol/L)， 反应 完后， 加入 2 倍量无水乙醚搅拌使固体析出， 放置后抽滤， 得到 0.53g 红色固体。 以无水甲醇 做溶剂， 加入适量氢氧化钾与多聚甲醛 (0.05g， 0.002mol) 在室温搅拌下溶解， 然后加入上 1 述固体， 反应毕抽滤即得到目标产物， 为类白色固体 (0.39g， 收率 70.7％ )。 HNMR(300MHz， CDCl3)δ ： 1.97(s， 3H， ArCH3)， 2.69(s， 3H， -N-CH3)， 3.98(s， 2H， Ar-CH2-N)， 4.79(s， 2H， CH2-O)， 5.11(s， 2H， O-CH2-N)， 6.65(s， 1H， H4)， 6.38(d， 1H， J ＝ 8.18Hz， H6)， 6.86(d， 1H， J ＝ 8.23Hz， H5)， 6.73(d， 2H， J ＝ 8.74Hz， H2’ ， H6’ )， 7.29(d， 2H， J ＝ 8.69Hz， H3’ ， H5’ )。
     实施例 53-(4’ - 甲氧基苯基 )-9- 甲基 -9， 10- 二氢 -2H， 8H- 色烯并 [8， 7-e][1， 3]- 噁嗪 -3- 烯 (5)
     取 3.2mL 25％甲胺 (0.018mol) 和 1.1mL 37％甲醛水溶液 (0.013mol) 溶于 1.0mL 1， 4- 二氧六环中， 45℃搅拌 10min。4’ - 甲氧基 -7- 羟基异黄酮 (3g， 0.011mol) 溶于 30mL 1， 4- 二氧六环中， 滴加至上述反应液中， 70 ℃搅拌反应 3h， 冷却至室温， 减压除去部分溶 剂， 冷却至 5℃析晶， 抽滤得到淡黄色固体 2.5g， 乙醇重结晶得淡黄色固体 2.12g。取 1.0g 上述固体用 50mL 甲醇溶解， 室温搅拌下分批加入硼氢化钠 (0.49g， 0.013mol)， 反应 24h 后， 加入饱和氯化铵溶液分解过量硼氢化钠， 并加水搅拌， 乙酸乙酯萃取， 蒸干溶剂得到 0.82g 淡黄色固体。 将得到的固体加入 16mL 乙醇室温下溶解， 再加入 12mL 盐酸乙醇 (0.5mol/L)， 搅拌， 加入 2 倍量无水乙醚搅拌使固体析出， 放置后抽滤， 得到 0.58g 褐色固体。 以无水甲醇 做溶剂， 加入适量氢氧化钾与多聚甲醛 (0.07g， 0.002mol) 在室温搅拌下溶解， 然后加入上 1 述固体， 反应毕抽滤即得到目标产物， 为灰白色固体 (0.36g， 收率 59.7％ )。 HNMR(300MHz， CDCl3)δ ： 2.62(s， 3H， -N-CH3)， 3.83(s， 3H， -OCH3)， 3.93(s， 2H， Ar-CH2-N)， 4.77(s， 2H， CH2-O)， 5.12(s， 2H， O-CH2-N)， 6.65(s， 1H， H4)， 6.39(d， 1H， J ＝ 8.29Hz， H6)， 6.87(d， 1H， J ＝ 8.35Hz， H5)， 6.93(d， 2H， J ＝ 8.86Hz， H3’ ， H5’ )， 7.35(d， 2H， J ＝ 8.81Hz， H2’ ， H6’ )。
     实施例 63-(4’ - 甲氧基苯基 )-9- 对甲基苯基 -9， 10- 二氢 -2H， 8H- 色烯并 [8， 7-e][1， 3]- 噁嗪 -3- 烯 (6)
     取 2.1mL 二甲胺 (0.030mol) 和 1.8mL 37％甲醛水溶液 (0.022mol) 溶于 3mL 1， 4- 二氧六环中， 45 ℃搅拌 10min。4’ - 甲氧基 -7- 羟基异黄酮 (5g， 0.019mol) 溶于 50mL 1， 4- 二氧六环中， 滴加至上述反应液中， 70℃搅拌反应 3h， 减压除去部分溶剂， 冷却至 5℃ 析晶， 抽滤得到黄色固体 2.3g。将得到的上述固体用丙酮溶解， 冰浴条件下加入 4.4g 溴 甲烷丙酮溶液 (30 ％ )， 搅拌至固体析出， 抽滤得 1.8g 白色固体。取对甲基苯胺 (0.68g， 0.006mol) 溶于 10mL 乙醇中， 滴加 2 滴冰醋酸， 加入上述得到的 1.8g 固体， 35℃条件下反 应 2h， 冷却析晶得到 1.6g 黄色固体。取 1.5g 上述黄色固体加入 200mL 甲醇溶解， 室温下 搅拌分批加入硼氢化钠 (0.59g， 0.015mol)， 反应 24h 后， 加入饱和氯化铵溶液分解过量 硼氢化钠， 并加水搅拌， 抽滤得到 0.9g 淡黄色固体。得到的固体加入 18mL 乙醇室温下溶 解， 再加入 9.5mL 盐酸乙醇 (0.5mol/L)， 搅拌， 加入 2 倍量无水乙醚使固体析出， 放置后抽 滤， 得到 0.71g 类白色固体。以无水甲醇做溶剂， 加入适量氢氧化钾与多聚甲醛 (0.07g， 0.002mol) 在室温搅拌下溶解， 然后加入上述固体。反应毕抽滤即得到目标产物， 为类白色 1 固体 (0.61g， 收率 83.2％ )。 H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 2.03(s， 3H， ArCH3)， 7.17(d， 2H， J ＝ 7.97， N-ArH3’ ， H5’ )， 6.71(d， 2H， J ＝ 8.02， N-ArH2’ ， H6’ )， 3.83(s， 3H， -OCH3)， 4.72(s， 2H， Ar-CH2-N)， 4.78(s， 2H， CH2-O)， 6.11(s， 2H， O-CH2-N)， 6.67(s， 1H， H4)， 6.37(d， 1H， J＝ 8.21Hz， H6)， 6.87(d， 1H， J ＝ 8.25Hz， H5)， 6.97(d， 2H， J ＝ 8.77Hz， H3’ ， H5’ )， 7.37(d， 2H， J ＝ 8.80Hz， H2’ ， H6’ )。
     实 施 例 73-(3- 丙 基 -3， 4- 二 氢 -2H- 苯 并 [e][1， 3] 噁 嗪 基 )-5- 甲 基 -7- 羟 基 -2H-3- 色烯 (7)
     取 5- 甲 基 -4’ ， 7- 二 羟 基 异 黄 酮 (5g， 0.019mol)， 碳 酸 钾 (5.11g， 0.037mol) 溶于 150mL 丙酮中于室温下搅拌 15min， 加入氯甲基甲醚 (2.34g， 0.028mol)， 继续搅拌 20min， 抽滤， 将滤液倒入 4 倍量于丙酮的水中， 乙酸乙酯萃取， 干燥后蒸干溶剂得淡黄色 油状物 4.94g。该油状物用甲醇溶解， 室温下搅拌分批加入硼氢化钾 (3.07g， 0.057mol)， 反应 40min 后加入饱和氯化铵溶液分解过量硼氢化钾， 并加水搅拌， 乙酸乙酯萃取， 将溶 剂蒸干即得到淡黄色油状物 3.82g。将 1.4mL 丙胺 (0.018mol) 和 1.1mL 37 ％甲醛水溶 液 (0.013mol) 溶于 1.5mL 1， 4- 二氧六环中， 45℃搅拌 10min。然后取上述油状物 (3.5g， 0.011mol) 溶于 35mL1， 4- 二氧六环中， 滴加至上述反应液中， 70℃搅拌反应 17h， 减压除去
     部分溶剂， 冷却至 5℃析晶， 抽滤得到黄色固体 3.16g， 乙醇重结晶后得淡黄色固体 2.6g。 取 得到的固体 1.5g 加入 30mL 乙醇室温下溶解， 再加入 19mL 盐酸乙醇 (0.5mol/L)， 搅拌， 加 入 2 倍量无水乙醚使固体析出， 放置后抽滤， 得到 0.83g 类白色固体。以无水甲醇做溶剂， 加入适量氢氧化钾与多聚甲醛 (0.10g， 0.003mol) 在室温搅拌下溶解， 然后加入上述固体， 1 反应毕抽滤即得到目标产物， 为淡黄色固体 (0.66g， 收率 76.4％ )。 H NMR(300MHz， CDCl3) δ： 0.95(t， 3H， CH3)， 1.59(m， 2H， CH2)， 2.69(t， 2H， -N-CH2-CH2)， 2.19(s， 3H， ArCH3)， 3.91(s， 2H， Ar-CH2-N)， 4.73(s， 2H， CH2-O)， 5.11(s， 2H， O-CH2-N)， 6.71(s， 1H， H4)， 6.49(d， 1H， J＝ 2.72Hz， H6)， 6.39(d， 1H， J ＝ 2.67Hz， H8)， 6.83(dd， 1H， J ＝ 8.38Hz， 2.44Hz， H5’ )， 7.28(d， 1H， J ＝ 8.37Hz， H6’ )， 7.12(d， 1H， J ＝ 2.47Hz， H2’ )。
     实施例 89- 丙基 -3-(3- 丙基 -3， 4- 二氢 -2H- 苯并 [e][1， 3] 噁嗪基 )-9， 10- 二 氢 -2H， 8H- 色烯并 [8， 7-e][1， 3]- 噁嗪 -3- 烯 (8)
     取 4.8mL 丙胺 (0.060mol) 和 3.6mL 37 ％甲醛水溶液 (0.044mol) 溶于 5mL 1， 4- 二氧六环中， 45℃搅拌 10min。4’ ， 7- 二羟基异黄酮 (5g， 0.020mol) 溶于 50mL 1， 4- 二氧 六环中， 滴加至上述反应液中， 70℃搅拌反应 27h， 减压除去部分溶剂， 冷却至 5℃析晶， 抽 滤得到黄色固体 2.71g， 乙醇重结晶得淡黄色固体 2.32g。取 2g 上述固体加入 160mL 甲醇 溶解， 室温搅拌下分批加入硼氢化钠 (0.76g， 0.020mol)， 反应 26h 后加入饱和氯化铵溶液 分解过量硼氢化钠， 并加水搅拌， 乙酸乙酯萃取， 干燥后蒸干溶剂得到 1.07g 淡红色固体。 将得到的固体加入 21mL 乙醇室温下溶解， 再加入 12mL 盐酸乙醇 (0.5mol/L)， 搅拌， 加入 3 倍量无水乙醚使固体析出， 放置后抽滤， 得到 0.79g 类白色固体。以无水甲醇做溶剂， 加入 适量氢氧化钾与多聚甲醛 (0.15g， 0.005mol) 在室温搅拌下溶解， 然后加入上述固体， 反应 1 毕抽滤即得到目标产物， 为淡黄色固体 (0.57g， 收率 67.9％ )。 H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 0.94(t， 6H， CH3)， 1.59(m， 4H， CH2)， 2.70(t， 4H， -N-CH2-CH2)， 3.88(s， 4H， Ar-CH2-N)， 4.87(s， 2H， CH2-O)， 5.12(s， 4H， O-CH2-N)， 6.67(s， 1H， H4)， 6.41(d， 1H， J ＝ 8.17Hz， H6)， 6.88(d， 1H， J ＝ 8.15Hz， H5)， 6.77(dd， 1H， J ＝ 8.22Hz， 2.51Hz， H5’ )， 7.26(d， 1H， J ＝ 8.27Hz， H6’ )， 7.11(d， 1H， J ＝ 2.49Hz， H2’ )。
     实施例 99- 丙基 -3-(3- 甲基 -3， 4- 二氢 -2H- 苯并 [e][1， 3] 噁嗪基 )-9， 10- 二 氢 -2H， 8H- 色烯并 [8， 7-e][1， 3]- 噁嗪 -3- 烯 (9)
     取 2.4mL 丙胺 (0.030mol) 和 1.8mL 37 ％甲醛水溶液 (0.022mol) 溶于 3mL 1， 4- 二氧六环中， 45℃搅拌 10min。4’ ， 7- 二羟基异黄酮 (5g， 0.020mol) 溶于 50mL 1， 4- 二 氧六环中， 滴加至上述反应液中， 70℃搅拌反应 2.5h， 减压除去部分溶剂， 冷却至 5℃析晶， 抽滤得到黄色固体 4.03g。取该固体 3g， 加入 2.6mL 甲胺 (0.015mol) 和 0.9mL 37％甲醛 水溶液 (0.011mol)， 反应 17h， 得到固体 2.21g。取 1.5g 上述固体加入 150mL 甲醇溶解， 室 温搅拌下分批加入硼氢化钠 (0.62g， 0.016mol)。反应 26h 后， 加入饱和氯化铵溶液分解过 量硼氢化钠， 并加水搅拌， 乙酸乙酯萃取， 蒸干溶剂得到 0.97g 淡红色固体。将得到的固体 加入 20mL 乙醇室温下溶解， 再加入 11mL 盐酸乙醇 (0.5mol/L)， 搅拌， 加入 3 倍量无水乙 醚使固体析出， 放置后抽滤， 得到 0.77g 类白色固体。以无水甲醇做溶剂， 加入适量氢氧化 钾与多聚甲醛 (0.12g， 0.004mol) 在室温搅拌下溶解， 然后加入上述固体， 反应毕抽滤即得 1 到目标产物， 为淡黄色固体 (0.44g， 收率 55.7 ％ )。 HNMR(300MHz， CDCl3)δ ： 0.93(t， 3H， CH3)， 1.59(m， 2H， CH2)， 2.71(t， 2H， -N-CH2-CH2)， 2.58(s， 3H， CH3)， 3.88(s， 2H， Ar-CH2-9-N)，3.86(s ， 2H ， Ar-CH 2-3’ -N) ， 4.87(s ， 2H ， CH 2-O) ， 5.12(s ， 2H ， 7-O-CH 2-N) ， 5.11(s ， 2H ， 4’ -O-CH2-N)， 6.68(s， 1H， H4)， 6.41(d， 1H， J ＝ 8.15Hz， H6)， 6.88(d， 1H， J ＝ 8.15Hz， H5)， 6.77(dd， 1H， J ＝ 8.24Hz， 2.34Hz， H5’ )， 7.28(d， 1H， J ＝ 8.27Hz， H6’ )， 7.13(d， 1H， J＝ 2.44Hz， H2’ )。
     实施例 103-(3’ ， 4’ - 二甲氧基苯基 )-9- 异丙基 -9， 10- 二氢 -2H， 8H- 色烯并 [8， 7-e][1， 3]- 噁嗪 -3- 烯 (10)
     取 2.2mL 异丙胺 (0.027mol) 和 1.7mL 37％甲醛水溶液 (0.020mol) 溶于 2mL 1， 4- 二氧六环中， 45 ℃搅拌 10min。3’ ， 4’ - 二甲氧基 -7- 羟基异黄酮 (5g， 0.017mol) 溶于 50mL 1， 4- 二氧六环中， 滴加至上述反应液中， 70℃搅拌反应 3h， 减压除去部分溶剂， 冷却 至 5℃析晶， 抽滤得到黄色固体 3.8g。 取 2.0g 上述固体用 160mL 甲醇溶解， 分批加入硼氢化 钠 (0.82g， 0.022mol) 室温下搅拌， 反应 24h 后加入饱和氯化铵溶液分解过量硼氢化钠， 并 加水搅拌， 乙酸乙酯萃取， 蒸干溶剂得到 1.5g 土黄色固体。将得到的固体加入 30mL 乙醇室 温下溶解， 再加入 16mL 盐酸乙醇 (0.5mol/L)， 搅拌， 加入 2 倍量无水乙醚搅拌使固体析出， 放置后抽滤， 得到 1.21g 类白色固体。以无水甲醇做溶剂， 加入适量氢氧化钾与多聚甲醛
     (0.12g， 0.004mol) 在室温搅拌下溶解， 然后加入上述固体， 反应毕抽滤即得到目标产物， 为 1 类白色固体 (0.89g， 收率 71.1％ )。H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 1.17(d， 6H， C(CH3)2)， 3.04(m， 1H， NCH(CH3)2)， 3.83(s， 6H， -OCH3)， 3.95(s， 2H， Ar-CH2-N)， 4.79(s， 2H， CH2-O)， 5.11(s， 2H， O-CH2-N)， 6.68(s， 1H， H4)， 6.35(d， 1H， J ＝ 8.25Hz， H6)， 6.87(d， 1H， J ＝ 8.27Hz， H5)， 6.99(dd， 1H， J ＝ 8.12Hz， 2.11Hz， H5’ )， 6.95(d， 1H， J ＝ 8.09Hz， H6’ )， 6.94(d， 1H， J＝ 2.08Hz， H2’ )。
     实施例 113-(3’ - 甲氧基苯基 )-9- 对溴苯基 -9， 10- 二氢 -2H， 8H- 色烯并 [8， 7-e] [1， 3]- 噁嗪 -3- 烯 (11)
     取 2.1mL 二甲胺 (0.030mol) 和 1.8mL 37％甲醛水溶液 (0.022mol) 溶于 3mL 1， 4- 二氧六环中， 45℃搅拌 10min。3’ - 甲氧基 -7- 羟基异黄酮 (5g， 0.019mol) 溶于 50mL 1， 4- 二氧六环中， 滴加至上述反应液中， 70℃搅拌反应 3h， 减压除去部分溶剂， 冷却至 5℃析 晶， 抽滤得到黄色固体 3.3g。将得到的上述固体用丙酮溶解， 冰浴条件下加入 6.4g 溴甲烷 丙酮溶液 (30％ )， 搅拌至固体析出， 抽滤得 2.78g 白色固体。 取对溴苯胺 (1.70g， 0.01mol) 溶于 20mL 乙醇中， 滴加 3 滴冰醋酸， 加入上述得到的 2.5g 固体， 35℃搅拌 4h， 冷却析晶得 到 2.2g 黄色固体。取 1.5g 上述黄色固体用 200mL 甲醇溶解， 室温搅拌下分批加入硼氢化 钠 (0.61g， 0.016mol)， 反应 27h 后加入饱和氯化铵溶液分解过量硼氢化钠， 加水搅拌， 抽滤 得到 1.12g 淡黄色固体。将得到的固体加入 22mL 乙醇室温下溶解， 再加入 13mL 盐酸乙醇 (0.5mol/L)， 搅拌， 加入 3 倍量无水乙醚搅拌使固体析出， 放置后抽滤， 得到 0.88g 类白色固 体。以无水甲醇做溶剂， 加入适量氢氧化钾与多聚甲醛 (0.09g， 0.003mol) 在室温搅拌下溶 解， 然后加入上述固体， 反应毕抽滤即得到目标产物， 为类白色固体 (0.43g， 收率 47.8％ )。 1 HNMR(300MHz， CDCl3)δ ： 7.33(d， 2H， J ＝ 7.99， N-ArH3’ ， H5’ )， 6.66(d， 2H， J ＝ 8.02， N-ArH2’ ， H6’ )， 3.82(s， 3H， -OCH3)， 4.72(s， 2H， Ar-CH2-N)， 4.75(s， 2H， CH2-O)， 6.05(s， 2H， O-CH2-N)， 6.71(s， 1H， H4)， 6.40(d， 1H， J ＝ 8.19Hz， H6)， 6.82(d， 1H， J ＝ 8.22Hz， H5)， 7.67(t， 1H， H5’ )， 7.07(s， 1H， H2’ )， 6.55(d， 1H， H6’ )， 6.87(d， 1H， H4’ )。
     实施例 123-(4’ - 羟基苯基 )-9- 对氯苯基 -9， 10- 二氢 -2H， 8H- 色烯并 [8， 7-e] [1， 3]- 噁嗪 -3- 烯 (12)
     取 2.1mL 二甲胺 (0.030mol) 和 1.8mL 37％甲醛水溶液 (0.022mol) 溶于 3mL 1， 4- 二氧六环中， 45℃搅拌 10min。4’ ， 7- 二羟基异黄酮 (5g， 0.020mol) 溶于 50mL 1， 4- 二氧 六环中， 滴加至上述反应液中， 70℃搅拌反应 1.5h， 减压除去部分溶剂， 冷却至 5℃析晶， 抽 滤得到黄色固体 3.7g。将得到的上述固体用丙酮溶解， 冰浴条件下加入 6.0g 溴甲烷丙酮 溶液 (30％ )， 搅拌至固体析出， 抽滤得 3.44g 白色固体。取对氯苯胺 (1.62g， 0.013mol) 溶 于 25mL 乙醇中， 滴加 4 滴冰醋酸， 加入上述得到的 3.44g 固体， 35℃条件下反应 3h， 冷却析 晶得到 2.1g 黄色固体。取 1.5g 上述黄色固体用 200mL 甲醇溶解， 室温搅拌下分批加入硼 氢化钠 (0.58g， 0.015mol)， 反应 26h 后加入饱和氯化铵溶液分解过量的硼氢化钠， 并加水 搅拌， 抽滤得到 1.02g 淡黄色固体。将得到的固体加入 20mL 乙醇室温下溶解， 再加入 11mL
     盐酸乙醇 (0.5mol/L)， 搅拌， 加入 2 倍量无水乙醚搅拌使固体析出， 放置后抽滤， 得到 0.80g 类白色固体。以无水甲醇做溶剂， 加入适量氢氧化钾与多聚甲醛 (0.08g， 0.003mol) 在室温 搅拌下溶解， 然后加入上述固体。反应完后抽滤即得到目标产物， 为类白色固体 (0.43g， 收 1 率 52.0％ )。 H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 7.29(d， 2H， J ＝ 8.22， N-ArH3’ ， H5’ )， 6.74(d， 2H， J ＝ 8.19， N-ArH2’ ， H6’ )， 4.70(s， 2H， Ar-CH2-N)， 4.75(s， 2H， CH2-O)， 6.12(s， 2H， O-CH2-N)， 6.69(s， 1H， H4)， 6.35(d， 1H， J ＝ 8.32Hz， H6)， 6.88(d， 1H， J ＝ 8.29Hz， H5)， 6.79(d， 2H， J ＝ 8.59Hz， H3’ ， H5’ )， 7.35(d， 2H， J ＝ 8.62Hz， H2’ ， H6’ )。
     实施例 133-(4’ - 甲氧基苯基 )-9- 丙基 -9， 10- 二氢 -2H， 8H- 硫色烯并 [8， 7-e] [1， 3]- 噁嗪 -3- 烯 (13)
     取 2.3mL 丙胺 (0.029mol) 和 1.7mL 37 ％甲醛水溶液 (0.021mol) 溶于 3mL 1， 4- 二氧六环中， 45℃搅拌 10min。7- 羟基 -3-(4’ - 甲氧苯基 )- 二氢苯并噻喃 -4- 酮 (5g， 0.018mol) 溶于 50mL 1， 4- 二氧六环中， 滴加至上述反应液中， 升温至 70℃， 搅拌反应 3h， 冷却至室温， 减压除去部分溶剂， 冷却至 5℃析晶， 抽滤得到黄色固体 2.43g， 乙醇重结晶得 淡黄色固体 1.88g。取 1.5g 上述固体用 112.5mL 甲醇溶解， 室温搅拌下分批加入硼氢化 钠 (0.64g， 0.017mol)， 反应 24h 后， 加入饱和氯化铵溶液分解过量硼氢化钠， 并加水搅拌，
     用乙酸乙酯进行萃取， 蒸干溶剂得到 1.12g 土黄色固体。将得到的固体加入 22.4mL 乙醇 室温下溶解， 再加入 12.8mL 盐酸乙醇 (0.5mol/L)， 搅拌， 加入 2 倍量无水乙醚使固体析出， 放置后抽滤， 得到 0.82g 淡黄色固体。以无水甲醇做溶剂， 加入适量氢氧化钾与多聚甲醛 (0.09g， 0.003mol) 在室温搅拌下溶解， 然后加入上述固体， 反应毕抽滤即得到目标产物， 为 1 白色固体 (0.57g， 收率 67.1 ％ )。 H NMR(300MHz， d6-DMSO)δ ： 0.93(t， 3H， CH3)， 1.63(m， 2H， CH2)， 2.69(t， 2H， -N-CH2-CH2)， 3.82(s， 3H， -OCH3)， 3.89(s， 2H， Ar-CH2-N)， 3.62(s， 2H， CH2-S)， 5.09(s， 2H， O-CH2-N)， 6.60(s， 1H， H4)， 6.52(d， 1H， J ＝ 8.17Hz， H6)， 6.75(d， 1H， J ＝ 8.19Hz， H5)， 6.91(d， 2H， J ＝ 8.66Hz， H3’ ， H5’ )， 7.35(d， 2H， J ＝ 8.77Hz， H2’ ， H6’ )。
     实施例 143-(3’ ， 4’ - 二甲氧基苯基 )-9- 异丙基 -9， 10- 二氢 -2H， 8H- 色满并 [8， 7-e][1， 3]- 噁嗪 (14)
     将 3’ ， 4’ - 二甲氧基 -7- 羟基异黄酮 (5g， 0.017mol)、 甲酸铵 (6.8g， 0.108mol)、 7.5g10％ Pd-C 溶于 25mL 冰醋酸中， 110℃下搅拌反应 6h， 冷却至室温。取 50mL 氯仿稀释反 应液， 抽滤， 并用 50mL 氯仿洗涤。分液收集氯仿层， 蒸去溶剂得棕黄色油状物质 3.02g。取 1.4mL 异丙胺 (0.017mol) 和 1.0mL 37％甲醛水溶液 (0.013mol) 溶于 1mL 1， 4- 二氧六环 中， 45℃搅拌 10min。将上述得到的 3.02g 棕黄色油状物质溶于 30mL 1， 4- 二氧六环中， 滴 加至上述反应液中， 70℃搅拌反应 7h， 减压除去部分溶剂， 冷却至 5℃析晶， 抽滤得到淡黄 色固体 2.89g。以无水甲醇做溶剂， 加入适量氢氧化钾与多聚甲醛 (0.29g， 0.009mol) 在室 温搅拌下溶解， 然后加入上述固体， 反应毕抽滤即得到目标产物， 为类白色固体 (1.33g， 收 1 率 44.5％ )。HNMR(300MHz， CDCl3)δ ： 1.13(d， 6H， C(CH3)2)， 2.99(m， 1H， NCH(CH3)2)， 3.83(s， 6H， -OCH3)， 3.95(s， 2H， Ar-CH2-N)， 4.34， 4.08(m， 2H， CH2-O)， 5.09(s， 2H， O-CH2-N)， 2.88， 2.67(m， 2H， H4)， 3.24(m， 1H， Ar-CH)， 6.33(d， 1H， J ＝ 8.14Hz， H6)， 6.67(d， 1H， J ＝ 8.15Hz， H5)， 6.81(dd， 1H， J ＝ 8.01Hz， 2.23Hz， H5’ )， 6.95(d， 1H， J ＝ 7.99Hz， H6’ )， 7.11(d， 1H， J ＝ 2.20Hz， H2’ )。实 施 例 153-(3- 乙 基 -3， 4- 二 氢 -2H- 苯 并 [e][1， 3] 噁 嗪 基 )-5- 甲 基 -7- 羟 基 -2H- 色满 (15)
     将 5- 甲 基 -4’ ， 7- 羟 基 异 黄 酮 (5g， 0.019mol)、甲 酸 铵 (7.6g， 0.120mol)、 7.5g10％ Pd-C 溶于 25mL 冰醋酸中， 110℃下搅拌反应 8h， 冷却至室温。取 50mL 氯仿稀释 反应液， 抽滤， 并用 50mL 氯仿洗涤。分液收集氯仿层， 蒸去溶剂得棕红色油状物质 2.12g。
     将得到的黄色油状物质和 (2.3g， 0.017mol) 碳酸钾溶于 64mL 丙酮中于室温下搅拌 15min， 然后加入氯甲基甲醚 (0.99g， 0.012mol)， 继续搅拌 20min 后停止反应。除去滤饼， 加水搅 拌， 用乙酸乙酯萃取， 得黄色油状物 1.47g。取 0.45mL 乙胺 (0.007mol) 和 0.43mL 37％甲 醛水溶液 (0.005mol) 溶于 1mL 1， 4- 二氧六环中， 45 ℃搅拌 10min。将上述得到的 1.47g 黄色油状物质溶于 15mL 1， 4- 二氧六环中， 滴加至上述反应液中， 70℃搅拌反应 11h， 减压 除去部分溶剂， 冷却至 5℃析晶， 抽滤得到淡红色固体 1.03g。将得到的固体加入 20mL 乙 醇室温下溶解， 再加入 5.5mL 盐酸乙醇 (0.5mol/L)， 搅拌， 加入 2 倍量无水乙醚使固体析 出， 放置后抽滤， 得到 0.77g 类白色固体。以无水甲醇做溶剂， 加入适量氢氧化钾与多聚 甲醛 (0.09g， 0.003mol) 在室温搅拌下溶解， 然后加入上述固体， 反应毕抽滤即得到目标 1 产物， 为淡黄色固体 (0.44g， 收率 55.2 ％ )。 H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 0.95(t， 3H， CH3)， 2.70(q， 2H， -N-CH2)， 2.18(s， 3H， ArCH3)， 3.88(s， 2H， Ar-CH2-N)， 4.28， 4.07(m， 2H， CH2-O)， 5.11(s， 2H， O-CH2-N)， 2.85， 2.72(s， 1H， H4)， 3.38(m， 1H， Ar-CH)， 6.37(d， 1H， J ＝ 2.66Hz， H6)， 6.21(d， 1H， J ＝ 2.67Hz， H8)， 6.83(dd， 1H， J ＝ 8.34Hz， 2.46Hz， H5’ )， 7.18(d， 1H， J＝ 8.37Hz， H6’ )， 7.07(d， 1H， J ＝ 2.47Hz， H2’ )。
     实施例 163-(4’ - 甲氧基苯基 )-9- 甲基 -9， 10- 二氢 -2H， 8H- 色烯并 [8， 7-e][1， 3]- 噁嗪 -3- 烯盐酸盐 (16)
     取化合物 (5)0.6g 灰白色固体溶于 2.4mL 丙酮中， 冰浴条件下通入氯化氢气体， 待 1 固体析出后， 抽滤即得到类白色目标物质 (0.44g， 收率 65.7％ )。H NMR(300MHz， CDCl3)δ ： 2.63(s， 3H， -N-CH3)， 3.83(s， 3H， -OCH3)， 3.91(s， 2H， Ar-CH2-N)， 4.71(s， 2H， CH2-O)， 5.11(s， 2H， O-CH2-N)， 6.67(s， 1H， H4)， 6.39(d， 1H， J ＝ 8.29Hz， H6)， 6.88(d， 1H， J ＝ 8.35Hz， H5)， 6.96(d， 2H， J ＝ 8.86Hz， H3’ ， H5’ )， 7.29(d， 2H， J ＝ 8.81Hz， H2’ ， H6’ )。
     在以上的合成方法中， 有些结构可以被一些合适的取代基选择性取代或保护， 比 如羟基可以被烃化 (MeI/ 碱 )， 酰化 (Ac2O/Py) 或硅烷化 (C1SiR3/ 碱 )。同样的， 根据已有 的文献可以很容易的进行脱保护。
     实施例 17
     本研究选择人乳腺癌细胞 MCF-7 作为对象， MCF-7 是来自人乳腺癌胸腔流出物的 组织培养细胞系。人们现已将依赖雌激素的乳腺癌细胞构建成了独立的 MCF-7 细胞系， 可 用于体外研究肿瘤类分泌治疗的机制并做为理想的抗乳腺癌药物筛选细胞系。 观察该类化 合物抑瘤率的影响， 进而从细胞水平验证色烯 ( 满 ) 并噁嗪类衍生物能否提高对乳腺癌细 胞的杀瘤作用。
     具体实施方案如下 ：
     一、 细胞的培养
     MCF-7 培养于 MEM 5％小牛血清培养液中， 所有细胞培养条件为 (37±0.5)℃湿润
     气流， 5％ CO2， 95％空气。所有细胞为 2 天更换一次培养液。
     二、 细胞增殖抑制实验 (MTT 法 ) ：
     本 发 明 中 采 用 紫 杉 醇 作 为 阳 性 对 照 药， 取 10μl 0.854mg/mL 的 紫 杉 醇 母 液 -3 -3 (10 mol/L)， 按照 10 倍等级用 DMSO 稀释成 10 ～ 10-8mol/L 7 个浓度的母液。每份母液取 4μl， 加 196μl 的 PBS(0.05％吐温 -20PH 7.4 的磷酸盐缓冲液 ) 稀释， 即为要加入的各个 浓度紫杉醇。色烯 ( 满 ) 并噁嗪类化合物 (YHT-1 ～ YHT-16)， 先用 DMSO 配成 5×10-4mol/L 的母液， DMSO 5 倍梯度稀释成 5 个母液。取 4μl 母液， 加入到预冷的 196μl 的 PBS， 即为 待加药物。
     按 文 献 (Stephan B， Martin RB.Assessment of antineoplastic agents by MTT assay ： partial underestimation of antiproliferative properties[J].Cancer Chemother Pharmacol， 1992， 30 ： 385-393.) 的 方 法 操 作， MCF-7 细 胞 接 种 量 为 198μl 含 2000 个细胞。恒温培养 48h 后分别加入 10ul 各个浓度的药物和阳性对照药紫杉醇 (taxol)， 紫杉醇终浓度为 10-6 ～ 10-10mol/L， 对照组添加 0.2％ DMSO。培养 96h， 其间每隔 24h 更换一次含待试化合物的培养液。 然后添加 50μl MTT 液 (2mg MTT/ml PBS) 至每个微 孔中， 37℃下培养 4h。 倾净微孔中所有液体， 每个微孔中加入 100μl DMSO， 轻轻振摇 5min。 以第一列为空白参比， 将其余各列分别在 550nm 和 690nm 下测量其吸光度值 A1 和 A2， 并计 算 (A1-A2) 实验组与 (A1-A2) 对照组之比值 X。X 即为实验组相对于对照组的细胞生长速度 的百分率， 该值越小， 表明待试物对癌细胞抑制能力越强。实验重复 3 次。
     三、 统计方法
     数据采用 Multi Cycle-Plus Verson3.0(Phoenix Flow Systems， San Diego， CA) 软件进行处理， 并采用 One Way ANOVA 软件包进行统计分析。
     四、 结果与讨论
     色烯 ( 满 ) 并噁嗪类化合物 (YHT-1 ～ YHT-16) 对乳腺癌细胞的抗增殖作用 ( 表 1)。在活性测试中， 实验人员选用作紫杉醇为阳性对照药， 其 IC50 为 10-7M ～ 10-8M。
     Table 1 Anti-proliferation effect of targeted compounds on mammary cells(x±s)
     各个化合物的 IC50 值 ( 细胞达到 50％抑制时待试化合物的浓度， 表 2) Table 2 IC50 values of targeted compounds(nmol/L)在 MFC-7 细胞活性测试中， YHT-1 ～ YHT-16 均有抑制肿瘤细胞的趋势。其中 YHT-3、 YHT-4、 YHT-12 和 YHT-14 的 IC50 值均大于 40×10-8M， 与紫杉醇比较其抗癌活性较差 ； YHT-1、 YHT-2、 YHT-5、 YHT-10、 YHT-13 和 YHT-16 的 IC50 值均在 20×10-8M 左右， 较上述三种 化合物显示出较好的抗 MCF-7 细胞活性 ； YHT-6、 YHT-7、 YHT-8、 YHT-9、 YHT-11 和 YHT-15 的 IC50 值均在 10×10-8M 左右， 展现出良好的抗 MCF-7 细胞活性。