5,8二取代1,6二氮杂萘7羰酰胺类化合物及其制备方法、组合物和用途.pdf

本发明公开5，8-二取代-1，6-二氮杂萘-7-羰酰胺类化合物及其制备方法和用途，以及包含此化合物的药物组合物。更具体地，本发明公开了结构式I表示的5，8-二取代-1，6-二氮杂萘-7-羰酰胺类化合物及其制备方法和用途。经过对多种肿瘤细胞系(人乳腺癌细胞MDA-MB-435，p53缺失的低分化结肠腺癌细胞Hct116p53-/-，p53富集的低分化结肠腺癌细胞Hct116p53+/+，人乳腺癌细胞Mcf-7，NIH189，人乳腺癌细胞SkBr-3，前列腺癌细胞LnCap，LnHer，人结肠癌细

1、  结构通式I所示的5，8-二取代-1，6-二氮杂萘-7-羰酰胺类化合物：

其中，
A为：(1)苯环；(2)C₈-C₁₀骈合成的双碳环，其中一个是苯环，另一个为饱和的或者不饱和的环；(3)8～10个原子骈合成的环，并含有0-3个选自N、O和S中的杂原子，其中一个是芳环或者芳杂环，另一个为饱和的或者不饱和的碳环或杂环；(4)含有1～3个选自N、O和S中的杂原子的五元或六元芳杂环；或(5)含有0～3个选自N、O和S中的杂原子的三元至七元脂肪环；
L是：(1)直接键；(2)C₁-C₆烷基；(3)C₂-C₆烯基；(4)(C₀-C₆烷基)-(C₃-C₆环烷基)-(C₀-C₆烷基)；或(5)(C₀-C₆烷基)-M-(C₀-C₆烷基)，其中M为N(R_a)、OC(＝O)或C(＝O)O；其中，(3)中的烯基和(2)、(4)、(5)中的烷基可以被1-3个各自独立的取代基取代，所述取代基选自下列原子或基团之中：C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷氧基C₁-C₆烷基、C₃-C₈环烷基、卤素、氨基、巯基、羟基、-CF₃、-CN、-NO₂、-NR_aR_b、-NR_aCOR_b、-NR_aCOOR_b、-NR_aSO₂R_b、-COOR_b、-COR_b、-CONR_aR_b、-SO₂R_b、-SO₂NR_aR_b、-OR_a和-OCOR_b；
R₁、R₂、R₃、R₄和R₆各自独立地为氢、卤素、羟基、巯基、-CF₃、-CN、-NO₂或者未取代或各自独立地被1-3个取代基取代的下列基团：C₁-C₈烷基、C₁-C₈烷氧基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、C₃-C₈环烷基、C₃-C₈环烷氧基、硅氧基、氨基、苯基、苄基、萘基、C₅-C₁₀芳香性杂环基或C₃-C₇饱和杂环基；所述取代基选自下列原子或基团之中：C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷氧基C₁-C₆烷基、杂环基、杂环基羰基、C₁-C₆烷基杂环基、C₆-C₁₀芳基、C₃-C₈环烷基、卤素、巯基、羟基、-CF₃、-CN、-NO₂、-NRaRb、-NRaCORb、-NRaCOORb、-NRaSO₂Rb、-COORb、-CORb、-CONRaRb、-SO₂Rb、-SO₂NRaRb、-ORa和-OCORb，且NRaRb可共同组成环胺；所述杂环包括1-3个选自N、O和S中的杂原子；
R₅为氢、羟基或者未取代或被1-3个各自独立的取代基取代的下列基团：C₁-C₈烷基、C₁-C₈烷氧基C₁-C₈烷基、C₁-C₈烷氧基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、C₃-C₈环烷基、苯基、苄基、萘基、C₅-C₁₀芳香性杂环基或C₃-C₈饱和杂环基；所述杂环包括1-3个选自N、O和S中的杂原子；所述取代基选自下列原子或基团：C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷氧基C₁-C₆烷基、卤素、氨基、硝基、巯基、羟基、-CN和-CF₃；
B为：(1)R_d或R_e；(2)含有0～3个选自N、O和S中的杂原子的三元至七元脂肪环，杂环上有1-3个各自独立地从R_d或R_e中选取取代基取代；(3)含有1-3个选自N、O和S中的杂原子的五元或六元杂芳环，杂环上有1-3个各自独立的从R_d或R_e中选取取代基的取代基；或(4)8～10个碳原子骈合成的环，并含有0-3个选自N、O和S中的杂原子，其中一个是芳环，另一个为饱和的或者不饱和的碳环或杂环；杂环上有1-3个各自独立的从R_d或R_e中选取取代基的取代基；
R_a为氢、C₁-C₆烷基、C₃-C₈环烷基或C₆-C₁₀芳烃基；
R_h为氢、羟基或者未取代或被1-3个各自独立地取代基取代的下列基团：C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷氧基C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷氧基、C₂-C₆烯基、C₂-C₆炔基、C₃-C₈环烷基、苯基、苯酚基、苄基、萘基、C₅-C₁₀芳香性杂环基或C₄-C₇饱和杂环基；所述杂环包括1-3个选自N、O和S中的杂原子；所述取代基选自下列原子或基团：C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷氧基C₁-C₆烷基、卤素、氨基、硝基、巯基、羟基、-CN和-CF₃；
R_d是：(1)饱和或者不饱和的五元或者六元环，该环包括至少一个碳原子，0～4个选自N、O和S中的杂原子；(2)饱和或者不饱和的C₈-C₁₀骈合的环，其中该环包括至少一个碳原子，0～4个选自N、O和S中的杂原子；在(1)和(2)中所包括的杂环可以是饱和的也可以是不饱和的；且可以有如下取代基：卤素、腈基、羟基、-(CH₂)_1-4OH、-N(R_a)(R_b)、硝基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷氧基、卤代的C₁-C₆烷基、卤代的C₁-C₆烷氧基、-(CH₂)_0-4C(＝O)N(R_a)(R_b)、-(CH₂)_0-4CO₂R_a、-(CH₂)_0-4SO₂R_a、-(CH₂)_1-4N(R_a)(R_b)、-(CH₂)_0-4N(R_a)C(＝O)(R_b)、-(CH₂)_0-4SO₂N(R_a)(R_b)、-(CH₂)_0-4N(R_a)SO₂(R_b)、C₂-C₈烷氧烷基、卤代的C₂-C₈烷氧烷基、苯基或苄基；
R_e为：氢、卤素、羟基、氨基、硝基、-CN、C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷氧基、卤代的C₁-C₆烷基、卤代的C₁-C₆烷氧基、C₂-C₈烷氧烷基、卤代的C₂-C₈烷氧烷基、-(CH₂)_0-6N(R_a)(R_b)、-(CH₂)_0-6R_c、-O(CH₂)_0-6R_c、-O(CH₂)_0-6OR_c、-(CH₂)_0-6Rd、-O(CH₂)_0-6Rd、-C(＝O)N(R_a)(R_b)、-(CH₂)_1-6C(＝O)N(R_a)(R_b)、-(CH₂)_0-6N(R_a)C(＝O)(R_b)、-SO₂R_a、-SO₂R_d、-SO₂(CH₂)_1-6R_d、-(CH₂)_1-6SO₂R_a、-(CH₂)_0-6SO₂N(R_a)(R_b)、-(CH₂)_0-6N(R_a)SO₂(R_b)、-(CH₂)_0-6CO₂R_a、-(CH₂)_0-6SR_a、C₂-C₆烯基、-O-C_1-6烷基-OR_a、-O-C_1-6烷基-SR_a、-O-C_1-6烷基-N(R_a)C(＝O)(R_b)、-O-C_1-6烷基-N(R_a)(R_b)、-N(R_a)-C_1-6烷基-SR_a、-N(R_a)-C_1-6烷基-OR_a、-N(R_a)-C_1-6烷基-N(R_a)(R_b)、-N(R_a)-C_1-6烷基-N(R_a)C(＝O)(R_b)、-C_2-6烯基-R_d、-C_2-6炔基-R_d、-(CH₂)_0-6SO₂N(R_a)(R_d)、-(CH₂)_0-6SO₂N(R_a)(-C_1-6-R_d)、-(CH₂)_0-6S(O)_nR_d、-(CH₂)_0-6C(O)(CH₂)_0-6R_d或-(CH₂)_0-6S(O)_n-C_1-6R_d，其中n＝0、1或2；
R_c为：芳基或取代的芳基；所述取代基为卤素、氰基、氨基、羟基、-(CH₂)_1-4OH、-N(R_a)(R_b)、硝基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷氧基、卤代的C₁-C₆烷基、卤代的C₁-C₆烷氧基、-(CH₂)_0-4C(＝O)N(R_a)(R_b)、-(CH₂)_0-4CO₂R_a、-(CH₂)_0-4O₂R_a、-(CH₂)_1-4N(R_a)(R_b)、-(CH₂)_0-4N(R_a)C(＝O)(R_b)、-(CH₂)_0-4SO₂N(R_a)(R_b)、-(CH₂)_0-4N(R_a)SO₂(R_b)、C₂-C₈烷氧烷基或卤代的C₂-C₈烷氧烷基。

2、  根据权利要求1所述的5，8-二取代-1，6-二氮杂萘-7-羰酰胺类化合物，其特征在于，为结构通式II表示的化合物：

其中，R₁、R₂、R₆和B的定义与权利要求1相同。

3、  根据权利要求2所述的5，8-二取代-1，6-二氮杂萘-7-羰酰胺类化合物，其特征在于，
R₁和R₂各自独立地为氢、卤素、-CN、-CF₃、-NO₂、羟基、氨基、C₁-C₆烷基氨基、C₁-C₆烷基杂环基氨基、C₆-C₁₀芳基氨基、C₁-C₈烷氧基、C₃-C₈环烷氧基、C₁-C₆烷基硅氧基、C₁-C₆烷基杂环基C₁-C₈烷基氧基、杂环基C₁-C₈烷基氧基、杂环基羰基C₁-C₈烷基氧基或C₆-C₁₀芳基C₁-C₈烷基氧基；其中的杂环基是指含有1～3个选自N、O和S中的杂原子的三元至七元脂肪环；
R₆为氢、卤素、
B为氨基C₁-C₆烷基、C₁-C₄烷基氨基C₁-C₄烷基、C₁-C₄烷氧基羰基C₁-C₄烷基、C₁-C₄烷基磺酰氨基C₁-C₄烷基、苯甲酰氨基C₁-C₄烷基、氨基苯基、氨基C₃-C₆环烷基或卤代苄基，或者B与所连接的N形成R为H、C₁-C₆烷基、C₃-C₈环烷基或C₆-C₁₀芳基。

4、  根据权利要求3所述的5，8-二取代-1，6-二氮杂萘-7-羰酰胺类化合物，其特征在于，
R₁和R₂各自独立地为氢、卤素、-CN、-CF₃、氨基、C₁-C₄烷基氨基、C₁-C₄烷基杂环基氨基、C₁-C₄烷氧基、C₃-C₆环烷氧基、C₁-C₄烷基硅氧基、C₁-C₄烷基杂环基C₁-C₄烷基氧基、杂环基C₁-C₄烷基氧基或杂环基羰基C₁-C₄烷基氧基；其中的杂环基是指含有1～2个选自N和O的杂原子的三元至七元脂肪环；
R₆为氢、卤素、
B为氨基C₁-C₆烷基、C₁-C₄烷基氨基C₁-C₄烷基、C₁-C₄烷氧基羰基C₁-C₄烷基、C₁-C₄烷基磺酰氨基C₁-C₄烷基、苯甲酰氨基C₁-C₄烷基、氨基苯基、氨基C₃-C₆环烷基或卤代苄基，或者B与所连接的N形成R为H或C₁-C₄烷基。

5、  根据权利要求4所述的5，8-二取代-1，6-二氮杂萘-7-羰酰胺类化合物，其特征在于，为结构通式III表示的化合物：

其中，R₁、R₂和R₆的定义与权利要求4相同。

6、  根据权利要求1所述的5，8-二取代-1，6-二氮杂萘-7-羰酰胺类化合物，其特征在于，具体为：





7、  权利要求1-5所述的5，8-二取代-1，6-二氮杂萘-7-羰酰胺类化合物的制备方法，其特征在于，为下述制备方法中的任意一种：
(1)将化合物1吡啶2，3-二酸酐选择性酯化得到化合物2，化合物3以酰氯形式选择性还原得到化合物4，化合物4通过Mitsunobo反应得到化合物5，化合物5在碱性条件下关环得到1，6-二氮杂萘羰酸甲酯6，化合物6与含R₆的化合物反应得到5-R₆-1，6-二氮杂萘羰酸甲酯7；化合物7作为共同中间体，可以通过三条路线制备目标化合物；
第一条路线，化合物7与含R₇的化合物酰胺化得到1，6-二氮杂萘羰酰胺化合物8，化合物8的8位羟基用Ts保护得到化合物9，化合物9与相应的胺发生芳基亲核取代反应得到5，8-二取代-1，6-二氮杂萘-7-羰酰胺类化合物；
第二条路线，化合物7在碱性条件下回流水解得到化合物11，化合物11在三光气、DIPEA和DMF中与苯胺反应得到化合物S26-1，然后采用第一条路线的方法将8位羟基用Ts保护再与相应的胺发生芳基亲核取代反应，制得5，8-二取代-1，6-二氮杂萘-7-羰酰胺类化合物；
第三条路线，首先将化合物7的8位羟基用Ts保护得到化合物12，然后与相应的胺发生芳基亲核取代反应得到化合物13，化合物13在碱性条件下水解生成化合物14，化合物14在偶联试剂EDCI、HOBT、DIPEA存在下与相应的胺生成酰胺，再脱去官能团上的保护基，生成5，8-二取代-1，6-二氮杂萘-7-羰酰胺类化合物；

其中，R₆和B的定义与通式I中相同；R₇为其中A、L、R₁、R₂、R₃和R₄的定义与通式I中相同；
反应试剂和条件：(a)异丙醇，回流；(b)二氯亚砜，回流；(c)硼氢化钠，四氢呋喃，0℃；(d)TsNHCH₂COOCH₃，DEAD，三苯基膦，四氢呋喃，0℃；(e)甲醇钠，甲醇，0℃～室温；(f)NBS，二氯甲烷，室温；(g)胺，甲苯，回流24小时；(h)TsCl，三乙胺，三氯甲烷；(i)胺，四氢呋喃，回流；(j)LiOH溶液/甲醇，或NaOH溶液/THF，回流；(k)二(三氯甲基)碳酸酯，DIPEA，DMF，苯胺；(l)EDCI，HOBT，DIPEA，胺，二氯甲烷；(m)三氟醋酸/二氯甲烷；
(2)化合物S3-1与NIS在二氯甲烷中常温下搅拌得到化合物S28-1，化合物S28-1与TsCl、三乙胺在二氯甲烷中回流得到化合物S28-2，化合物S28-2与反式1，4-环己二胺在三乙胺和四氢呋喃中加热回流得到化合物S28-3，化合物S28-3在氯化钯、三苯基膦、碘化亚铜、碳酸钾和THF中回流与丙炔酸甲酯反应得到化合物S28-4，化合物S28-4在三氟醋酸/二氯甲烷中脱去Boc得到5，8-二取代-1，6-二氮杂萘-7-羰酰胺类化合物；

(3)化合物12与单Boc保护的反式1，4-环己二胺在K₂CO₃和四氢呋喃中加热回流得到化合物S30-1，化合物S30-1在NaOH溶液/THF中生成化合物S30-2；化合物S30-2在EDCI、HOBT、DIPEA和二氯甲烷中，与相应的胺反应3h得到化合物S30-3；化合物S30-3在20％的三氟醋酸/二氯甲烷中脱除Boc生成5，8-二取代-1，6-二氮杂萘-7-羰酰胺类化合物；


8、  权利要求1-6中任一项所述的5，8-二取代-1，6-二氮杂萘-7-羰酰胺类化合物在制备治疗肿瘤的药物中的应用。

9、  根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述的肿瘤是由MDA-MB-435，Hct116 p53-/-，Hct116 p53+/+，Mcf-7，NIH 189，SkBr-3，LnCap，LnHer，HT 29或HEY肿瘤细胞恶性增殖引起的。

10、  根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述的肿瘤为乳腺癌、结肠癌、卵巢癌或前列腺癌。

11、  一种用于治疗肿瘤的药物组合物，其特征在于，该组合物包含治疗有效量的权利要求1-5中任一项所述的5，8-二取代-1，6-二氮杂萘-7-羰酰胺类化合物中的一种或多种。

5，8-二取代-1，6-二氮杂萘-7-羰酰胺类化合物及其制备方法、组合物和用途
技术领域
本发明涉及医药技术领域，具体涉及5，8-二取代-1，6-二氮杂萘-7-羰酰胺类化合物，本发明还涉及5，8-二取代-1，6-二氮杂萘-7-羰酰胺类化合物的制备方法。多种肿瘤细胞(MDA-MB-435，Hct116p53-/-，Hct116p53+/+，Mcf-7，NIH189，SkBr-3，LnCap，LnHer，HT29，HEY)抑制生长实验表明，该类化合物具有良好的抗肿瘤活性，可以用于治疗由肿瘤细胞恶性增殖引起的疾病。本发明还涉及包含上述化合物的药物组合物。
背景技术
肿瘤(Cancer，tumor，neoplasm)的特点是细胞或变异细胞异常增殖，常形成肿块。临床上将人体瘤分为良性和恶性两大类。良性肿瘤(Benignneoplasm)称为瘤。恶性肿瘤(Malignant neoplasm)根据发生部位不同，又分为：癌(Carcinoma)、肉瘤(Sarcoma)、母细胞瘤(Blastoma)、白血病(Leukemia)。良性肿瘤和恶性肿瘤的主要差别为：良性肿瘤包在荚膜内，增殖慢，不侵入周围组织，即不转移；恶性肿瘤不包在荚膜内，增殖迅速，能侵入周围组织(转移)，潜在的危险大。恶性肿瘤是一种严重威胁人类健康的常见病和多发病，人类因恶性肿瘤而引起的死亡是所有疾病死亡率的第二位，仅次于心脑血管疾病。
抗肿瘤药是指抗恶性肿瘤的药，又称抗癌药。自四十年代氮芥用于治疗恶性肿瘤以来，对于肿瘤的化学治疗已经有了很大的发展，已由单一的化学治疗进入了联合治疗和综合化疗的阶段，并且能成功的治愈病人或明显延长病人的寿命，因此，抗肿瘤药物在肿瘤治疗中占有越来越重要的地位。此外，在对肿瘤的研究过程中，对肿瘤特性的研究和分子生物学、细胞生物学的研究进展，为抗肿瘤药物的研究提供了新的方向和新的作用靶点，相继产生了一批具有新颖化学结构或独特作用机制的化合物。
近年来，酪氨酸蛋白酶(Protein tyrosine kinase，PTK)的研究已引起广泛的兴趣。酪氨酸蛋白酶激酶是信号传递过程种的重要因子，参与一系列细胞功能，与细胞生长、分化、增殖密切相关[Microsc Res Tech.2003 Jan1；60(1)：70-5]，[Trends Pharmacol Sci.2002 Dec；23(12)：576-82]。
许多癌症基因的表达产物也都具有PTK活性，很多恶性转化细胞中的PTK活性远远高于正常细胞。因此若能抑制PTK活性，就有可能阻断肿瘤细胞的生长。PTK已经成为引人注目的抗肿瘤药物新靶点[Curr Drug Targets.2003 Feb；4(2)：113-21]。
发明人对5，8-二取代-1，6-二氮杂萘-7-碳酰胺类化合物的研究起源于该类结构较为新颖，而且与一些血管内皮生长因子抑制剂，EGFR抑制剂结构很相似。
引起发明人兴趣的相关文献如下列出：
WO98/13350中披露了一系列喹啉类血管内皮生长因子抑制剂。其中也包括1，8-二氮杂萘类衍生物，例如该专利中的实施例53：2-乙酰氨基-5-(2-氟-5-羟基-4-甲基苯胺)-1，8-二氮杂萘。
WO99/32450中披露了4-羟基喹啉-2-羧酸胺衍生物用于治疗疱疹病毒感染。
WO98/11073中披露了8-羟基喹啉-7-羧酸胺衍生物用于治疗疱疹病毒感染。
WO02/30931中披露了8-羟基-1，6-二氮杂萘-7-碳酰胺类化合物用于治疗HIV-1病毒感染。
发明内容
本发明的一个目的是公开一类具有全新结构、强效抗肿瘤活性的5，8-二取代-1，6-二氮杂萘-7-羰酰胺类化合物。
本发明的另一目的是提供上述5，8-二取代-1，6-二氮杂萘-7-羰酰胺类化合物的制备方法。
本发明的还一目的是提供上述5，8-二取代-1，6-二氮杂萘-7-羰酰胺类化合物在医药领域的用途，它们可以用于治疗包括乳腺癌在内的多种肿瘤疾病。通过筛选，首次发现5，8-二取代-1，6-二氮杂萘-7-羰酰胺在20μM内对下列细胞有高效的抑制活性：人乳腺癌细胞MDA-MB-435，p53缺失的低分化结肠腺癌细胞Hct116p53-/-，p53富集的低分化结肠腺癌细胞Hct116p53+/+，人乳腺癌细胞Mcf-7，NIH 189，人乳腺癌细胞SkBr-3，前列腺癌细胞LnCap，LnHer，人结肠癌细胞HT 29，人卵巢癌细胞HEY。
本发明的再一目的是提供一种包含治疗有效量的5，8-二取代-1，6-二氮杂萘-7-羰酰胺类化合物的药物组合物。
根据本发明，所述的抗肿瘤活性的5，8-二取代-1，6-二氮杂萘-7-羰酰胺类化合物如下面的结构通式I所示：

其中，
A为：(1)苯环；(2)C₈-C₁₀骈合成的双碳环，其中一个是苯环，另一个为饱和的或者不饱和的环；(3)8～10个原子骈合成的环，并含有0-3个选自N、O和S中的杂原子，其中一个是芳环或者芳杂环，另一个为饱和的或者不饱和的碳环或杂环；(4)含有1～3个选自N、O和S中的杂原子的五元或六元芳杂环；或(5)含有0～3个选自N、O和S中的杂原子的三元至七元脂肪环；
L是：(1)直接键；(2)C₁-C₆烷基；(3)C₂-C₆烯基；(4)(C₀-C₆烷基)-(C₃-C₆环烷基)-(C₀-C₆烷基)；或(5)(C₀-C₆烷基)-M-(C₀-C₆烷基)，其中M为N(R_a)、OC(＝O)或C(＝O)O；其中，(3)中的烯基和(2)、(4)、(5)中的烷基可以被1-3个各自独立的取代基取代，所述取代基选自下列原子或基团之中：C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷氧基C₁-C₆烷基、C₃-C₈环烷基、卤素、氨基、巯基、羟基、-CF₃、-CN、-NO₂、-NR_aR_b、-NR_aCOR_b、-NR_aCOOR_b、-NR_aSO₂R_b、-COOR_b、-COR_b、-CONR_aR_b、-SO₂R_b、-SO₂NR_aR_b、-OR_a和-OCOR_b；
R₁、R₂、R₃、R₄和R₆各自独立地为氢、卤素、羟基、巯基、-CF₃、-CN、-NO₂或者未取代或各自独立地被1-3个取代基取代的下列基团：C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷氧基、C₂-C₆烯基、C₂-C₆炔基、C₃-C₈环烷基、C₃-C₈环烷氧基、硅氧基、氨基、苯基、苄基、萘基、C₅-C₁₀芳香性杂环基或C₃-C₇饱和杂环基；所述取代基选自下列原子或基团之中：C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷氧基C₁-C₆烷基、杂环基、杂环基羰基、C₁-C₆烷基杂环基、C₆-C₁₀芳基、C₃-C₈环烷基、卤素、巯基、羟基、-CF₃、-CN、-NO₂、-NR_aR_b、-NR_aCOR_b、-NR_aCOOR_b、-NR_aSO₂R_b、-COOR_b、-COR_b、-CONR_aR_b、-SO₂R_b、-SO₂NR_aR_b、-OR_a和-OCOR_b，且NR_aR_b可共同组成环胺；所述杂环包括1-3个选自N、O和S中的杂原子；
R₅为氢、羟基或者未取代或被1-3个各自独立的取代基取代的下列基团：C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷氧基C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷氧基、C₂-C₆烯基、C₂-C₆炔基、C₃-C₈环烷基、苯基、苄基、萘基、C₅-C₁₀芳香性杂环基或C₄-C₇饱和杂环基；所述杂环包括1-3个选自N、O和S中的杂原子；所述取代基选自下列原子或基团：C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷氧基C₁-C₆烷基、卤素、氨基、硝基、巯基、羟基、-CN和-CF₃；
B为：(1)R_d或R_e；(2)含有0～3个选自N、O和S中的杂原子的三元至七元脂肪环，杂环上有1-3个各自独立的从R_d或R_e中选取取代基取代；(3)含有1-3个选自N、O和S中的杂原子的五元或六元杂芳环，杂环上有1-3个各自独立的从R_d或R_e中选取取代基的取代基；或(4)8～10个碳原子骈合成的环，并含有0-3个选自N、O和S中的杂原子，其中一个是芳环，另一个为饱和的或者不饱和的碳环或杂环；杂环上有1-3个各自独立的从R_d或R_e中选取取代基的取代基；
R_a为氢、C₁-C₆烷基、C₃-C₈环烷基或C₆-C₁₀芳烃基；
R_b为氢、羟基或者未取代或被1-3个各自独立地取代基取代的下列基团：C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷氧基C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷氧基、C₂-C₆烯基、C₂-C₆炔基、C₃-C₈环烷基、苯基、苯酚基、苄基、萘基、C₅-C₁₀芳香性杂环基或C₄-C₇饱和杂环基；所述杂环包括1-3个选自N、O和S中的杂原子；所述取代基选自下列原子或基团：C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷氧基C₁-C₆烷基、卤素、氨基、硝基、巯基、羟基、-CN和-CF₃；
R_d是：(1)饱和或者不饱和的五元或者六元环，该环包括至少一个碳原子，0～4个选自N、O和S中的杂原子；(2)饱和或者不饱和的C₈-C₁₀骈合的环，其中该环包括至少一个碳原子，0～4个选自N、O和S中的杂原子；在(1)和(2)中所包括的杂环可以是饱和的也可以是不饱和的；且可以有如下取代基：卤素、腈基、羟基、-(CH₂)_1-4OH、-N(R_a)(R_b)、硝基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷氧基、卤代的C₁-C₆烷基、卤代的C₁-C₆烷氧基、-(CH₂)_0-4C(＝O)N(R_a)(R_b)、-(CH₂)_0-4CO₂R_a、-(CH₂)_0-4SO₂R_a、-(CH₂)_1-4N(R_a)(R_b)、-(CH₂)_0-4N(R_a)C(＝O)(R_b)、-(CH₂)_0-4SO₂N(R_a)(R_b)、-(CH₂)_0-4N(R_a)SO₂(R_b)、C₂-C₈烷氧烷基、卤代的C₂-C₈烷氧烷基、苯基或苄基；
R_e为：氢、卤素、羟基、氨基、硝基、-CN、C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷氧基、卤代的C₁-C₆烷基、卤代的C₁-C₆烷氧基、C₂-C₈烷氧烷基、卤代的C₂-C₈烷氧烷基、-(CH₂)_0-6N(R_a)(R_b)、-(CH₂)_0-6R_c、-O(CH₂)_0-6R_c、-O(CH₂)_0-6OR_c、-(CH₂)_0-6R_d、-O(CH₂)_0-6R_d、-C(＝O)N(R_a)(R_b)、-(CH₂)_1-6C(＝O)N(R_a)(R_b)、-(CH₂)_0-6N(R_a)C(＝O)(R_b)、-SO₂R_a、-SO₂R_d、-SO₂(CH₂)_1-6R_d、-(CH₂)_1-6SO₂R_a、-(CH₂)_0-6SO₂N(R_a)(R_b)、-(CH₂)_0-6N(R_a)SO₂(R_b)、-(CH₂)_0-6CO₂R_a、-(CH₂)_0-6SR_a、C₂-C₆烯基、-O-C_1-6烷基-OR_a、-O-C_1-6烷基-SR_a、-O-C_1-6烷基-N(R_a)C(＝O)(R_b)、-O-C_1-6烷基-N(R_a)(R_b)、-N(R_a)-C_1-6烷基-SR_a、-N(R_a)-C_1-6烷基-OR_a、-N(R_a)-C_1-6烷基-N(R_a)(R_b)、-N(R_a)-C_1-6烷基-N(R_a)C(＝O)(R_b)、-C_2-6烯基-R_d、-C_2-6炔基-R_d、-(CH₂)_0-6SO₂N(R_a)(R_d)、-(CH₂)_0-6SO₂N(R_a)(-C_1-6-R_d)、-(CH₂)_0-6S(O)_nR_d、-(CH₂)_0-6C(O)(CH₂)_0-6R_d或-(CH₂)_0-6S(O)_n-C_1-6R_d(n＝0、1或2)。
R_c为：芳基或取代的芳基；所述取代基为卤素、氰基、氨基、羟基、-(CH₂)_1-4OH、-N(R_a)(R_b)、硝基、C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷氧基、卤代的C₁-C₆烷基、卤代的C₁-C₆烷氧基、-(CH₂)_0-4C(＝O)N(R_a)(R_b)、-(CH₂)_0-4CO₂R_a、-(CH₂)_0-4SO₂R_a、-(CH₂)_1-4N(R_a)(R_b)、-(CH₂)_0-4N(R_a)C(＝O)(R_b)、-(CH₂)_0-4SO₂N(R_a)(R_b)、-(CH₂)_0-4N(R_a)SO₂(R_b)、C₂-C₈烷氧烷基或卤代的C₂-C₈烷氧烷基。
本发明的结构通式I表示的化合物中优选的化合物可以用结构通式II表示：

其中，R₁、R₂、R₆和B的定义与通式I中相同，并进一步优选：
R₁和R₂各自独立地为氢、卤素、-CN、-CF₃、-NO₂、羟基、氨基、C₁-C₆烷基氨基、C₁-C₆烷基杂环基氨基、C₆-C₁₀芳基氨基、C₁-C₈烷氧基、C₃-C₈环烷氧基、C₁-C₆烷基硅氧基、C₁-C₆烷基杂环基C₁-C₈烷基氧基、杂环基C₁-C₈烷基氧基、杂环基羰基C₁-C₈烷基氧基或C₆-C₁₀芳基C₁-C₈烷基氧基；其中的杂环基是指含有1～3个选自N、O和S中的杂原子的三元至七元脂肪环；R₆为氢、卤素、B为氨基C₁-C₆烷基、C₁-C₄烷基氨基C₁-C₄烷基、C₁-C₄烷氧基羰基C₁-C₄烷基、C₁-C₄烷基磺酰氨基C₁-C₄烷基、苯甲酰氨基C₁-C₄烷基、氨基苯基、氨基C_3-C₆环烷基或卤代苄基，或者B与所连接的N形成R为H、C₁-C₆烷基、C₃-C₈环烷基或C₆-C₁₀芳基。
结构通式II进一步优选：
R₁和R₂各自独立地为氢、卤素、-CN、-CF₃、氨基、C₁-C₄烷基氨基、C₁-C₄烷基杂环基氨基、C₁-C₄烷氧基、C₃-C₆环烷氧基、C₁-C₄烷基硅氧基、C₁-C₄烷基杂环基C₁-C₄烷基氧基、杂环基C₁-C₄烷基氧基或杂环基羰基C₁-C₄烷基氧基；其中的杂环基是指含有1～2个选自N和O的杂原子的三元至七元脂肪环；
R₆为氢、卤素、
B为氨基C₁-C₆烷基、C₁-C₄烷基氨基C₁-C₄烷基、C₁-C₄烷氧基羰基C₁-C₄烷基、C₁-C₄烷基磺酰氨基C₁-C₄烷基、苯甲酰氨基C₁-C₄烷基、氨基苯基、氨基C₃-C₆环烷基或卤代苄基，或者B与所连接的N形成R为H或C₁-C₄烷基。
进一步地，上述结构通式II表示的化合物中优选的化合物可以用结构通式III表示：

其中，R₁、R₂和R₆的定义同上与通式II中相同。
通式I所述的5，8-二取代-1，6-二氮杂萘-7-羰酰胺类化合物，具体地，为下述化合物：






或者S28
S30
本发明结构通式I表示的化合物通过下面的方法制备：

其中，R₆和B的定义与通式I中相同；R₇为其中A、L、R₁、R₂、R₃和R₄的定义与通式I中相同，并优选为表中所示的基团。
反应试剂和条件：(a)异丙醇，回流，68％；(b)二氯亚砜，回流；(c)硼氢化钠，四氢呋喃，0℃，两步产率38％；(d)TsNHCH₂COOCH₃，DEAD(偶氮二甲酸二乙酯)，三苯基膦，四氢呋喃，0℃；(e)甲醇钠，甲醇，0℃～室温，两步产率65％；(f)NBS(N-溴代丁二酰亚胺)，二氯甲烷，室温，产率85％；(g)胺，甲苯，回流24小时，产率88％；(h)TsCl，三乙胺，三氯甲烷，产率90％；(i)胺，四氢呋喃，回流，产率75％-85％；(j)LiOH溶液/甲醇，或NaOH溶液/THF，回流；(k)二(三氯甲基)碳酸酯，DIPEA，DMF，苯胺；(l)EDCI，HOBT，DIPEA，胺，二氯甲烷；(m)三氟醋酸/二氯甲烷。
(1)化合物S1-S25和S29，S31-S43的合成方法如下：将化合物1吡啶2，3-二酸酐选择性酯化得到化合物2，产率68％。化合物3以酰氯形式选择性还原得到化合物4，产率为38％。化合物4通过Mitsunobo反应得到化合物5，化合物5在甲醇钠下关环得到1，6-二氮杂萘羰酸甲酯6，两步产率65％。化合物6与含R₆的化合物(如N-碘代丁二酰亚胺或N-溴代丁二酰亚胺)反应得到5-R₆-1，6-二氮杂萘羰酸甲酯7，产率85％。化合物7与含R₇的胺酰胺化得到1，6-二氮杂萘羰酰胺化合物8，产率88％。化合物8的8位羟基用Ts保护以90％产率得到化合物9。化合物9的合成路线见参考文献WO2002030426和WO2002030930。化合物9与相应的胺发生芳基亲核取代反应得到一系列5，8-二取代-1，6-二氮杂萘-7-羰酰胺类化合物S1-S25和S29，S31-S43，产率75％-85％。
(2)化合物S26的合成方法如下：化合物7在1N LiOH溶液/甲醇中回流5h得到化合物11，化合物11在三光气、DIPEA(二异丙基乙胺)和DMF(N，N-二甲基甲酰胺)中与苯胺反应2h得到化合物S26-1。化合物S26-1再由与制备S15相似的合成方法制得5，8-二取代-1，6-二氮杂萘-7-羰酰胺类化合物S26。
(3)化合物S27的合成方法如下：化合物7与TsCl和三乙胺在二氯甲烷中回流5小时得到化合物12，化合物12与对氟苄胺在三乙胺和四氢呋喃中加热回流8小时得到化合物13，化合物13在1N NaOH溶液/THF中60℃下10h生成化合物14。化合物14与胺在EDCI(1-乙基-3-(3-二甲胺丙基)碳二亚胺)、HOBT(1-羟基苯并三唑)、DIPEA(二异丙基乙胺)和二氯甲烷中，常温下反应3h得到化合物15。化合物15在20％的三氟醋酸/二氯甲烷中脱除Boc生成5，8-二取代-1，6-二氮杂萘-7-羰酰胺类化合物S27。

(4)化合物S28的合成方法如下：化合物S3-1与NIS(N-碘代丁二酰亚胺)在二氯甲烷中常温下搅拌1小时得到化合物S28-1，化合物S28-1与TsCl、三乙胺在二氯甲烷中回流5小时得到化合物S28-2，化合物S28-2与反式1，4-环己二胺在三乙胺、四氢呋喃中加热回流8小时得到化合物S28-3，化合物S28-3在氯化钯、三苯基膦、碘化亚铜、碳酸钾和THF中回流与丙炔酸甲酯反应得到化合物S28-4，化合物S28-4在20％三氟醋酸/二氯甲烷中脱去Boc得到5，8-二取代-1，6-二氮杂萘-7-羰酰胺类化合物S28。

(5)、化合物S30的合成方法如下：化合物12与单Boc保护的反式1，4-环己二胺在K₂CO₃和四氢呋喃中加热回流8小时得到化合物S30-1，化合物S30-1在1N NaOH溶液/THF中60度下10h生成化合物S30-2。化合物S30-2在EDCI、HOBT、DIPEA和二氯甲烷中，常温下与相应的胺反应3h得到化合物S30-3。化合物S30-3在20％的三氟醋酸/二氯甲烷中脱除Boc生成5，8-二取代-1，6-二氮杂萘-7-羰酰胺类化合物S30。

通过对多种肿瘤细胞株筛选，申请人发现：上述结构通式I表示的化合物在20μM内对下列细胞有高效的抑制活性：MDA-MB-435，Hct116p53-/-，Hct116p53+/+，Mcf-7，NIH 189，SkBr-3，LnCap，LnHer，HT 29，HEY。
因此，结构通式I表示的化合物能够有效的治疗MDA-MB-435，Hct116p53-/-，Hct116p53+/+，Mcf-7，NIH 189，SkBr-3，LnCap，LnHer，HT 29，HEY肿瘤细胞恶性增殖引起的疾病。
制剂学上允许的含有结构通式I表示的化合物的药物组合物同样能起到有效的治疗MDA-MB-435，Hct116p53-/-，Hct116p53+/+，Mcf-7，NIH 189，SkBr-3，LnCap，LnHer，HT 29，HEY肿瘤细胞恶性增殖引起的疾病。
具体实施方式
抗肿瘤活性测试：
本发明中的典型的化合物以及它们针对多种肿瘤细胞(MDA-MB-435，Hct116p53-/-，Hct116p53+/+，Mcf-7，NIH 189，SkBr-3，LnCap，LnHer，HT 29，HEY)的半生长抑制活性数据(IC₅₀)均在标准条件下测定。
例：化合物对人乳腺癌细胞MDA-MB-435、SKBr-3的生长抑制实验。
(1)主要试剂的产生方法和来源
RPMII640购自Gibco公司；磺酰罗丹明B由Sigma公司购得；三氯醋酸(TCA)、醋酸(HAC)和Tris base unbuffer均为分析纯。
(2)实验操作步骤(磺酰罗丹明B(SRB)蛋白染色法)
根据细胞生长速率，分别将处于对数生长期的人乳腺癌细胞MDA-MB-435、SKBr-3以90μl/孔接种于96孔培养板，贴壁生长24小时，再加药10μl/孔。每个浓度设三复孔。并设相应浓度的生理盐水溶媒对照及无细胞凋零孔。肿瘤细胞在37℃、5％CO₂条件下培养72小时，然后倾去培养液，用10％冷TCA固定细胞，4℃放置1小时后，用蒸馏水洗涤5次，空气中自然干燥。然后加入由1％冰醋酸配制的SRB(Sigma)4mg/mL溶液100μl/孔，室温中染色15分钟，去上清液，用1％醋酸洗涤5次，空气干燥，最后加入150μl/孔的Tris溶液，酶标仪(VERSAmax)540nm波长下测定A值。
(3)计算方法
以肿瘤细胞系A492为例，用下列公式计算肿瘤细胞生长的抑制率：
抑制率＝(A492对照孔-A492给药孔)/A492对照孔×100％
活性数据见表格1和2。表中空格表示未进行相关测试，无相关数据。
表1  化合物针对多种肿瘤细胞株的抗肿瘤活性数据(IC₅₀/μM)


表2  化合物针对多种肿瘤细胞株的抗肿瘤活性IC₅₀(μM)

本发明的代表性化合物S24、S26对多种肿瘤细胞显示良好的抗肿瘤活性，IC₅₀达到1μM。
基于结构通式I表示的化合物对多种肿瘤细胞有良好的抑制活性，申请人进一步对5，8-二取代-1，6-二氮杂萘-7-羰酰胺类化合物的抗肿瘤机理进行了研究。申请人采用酶联免疫吸附测定(ELISA)发现5，8-二取代-1，6-二氮杂萘-7-羰酰胺类化合物在10μM下对酪氨酸激酶(EGFR，Src，KDR)有很好的活性，见表3。表中空格表示未进行相关测试，无相关数据。
表3  化合物在10μM下对酪氨酸激酶(EGFR，Src，KDR)的抑制率


从表3的实验结果可以看出，本发明的化合物有效作用于上述酪氨酸激酶，是结构新颖的酪氨酸激酶抑制剂。其中以S25对Src抑制活性最好，在10μM下抑制率高达90％。
制备实施例：
下面结合制备实施例对本发明作进一步描述，但不限制本发明。
化合物的¹H-NMR光谱数据测量使用Varian Mercury-300MHz或Varian Mercury-400MHz核磁共振，元素分析使用Vario EL测定仪，熔点用Buchi-510毛细管法测定，温度未经校正。红外光谱由Bio-Rad FTS-185红外光谱仪测定；质谱EI-MS用Finnigan MAT 95质谱仪，ESI-MS使用Finnigan LCQ Deca质谱仪测定。比旋光由P-1030(A012360639)自动旋光仪测定。快速柱层析在硅胶H(10-40μM)上进行。试剂纯化参照Purification of laboratory Chemicals；D.D.Perrin；W.L.F.Armarego andD.R.Perrin Eds.，Pergamon Press：Oxiford，1980。
部分化合物的纯度由双系统分析HPLC测定。柱子的型号为：Vydac C18column(10×250mm)。254nm紫外检测器。
系统A：使用的溶剂系统为：0.05％三氟醋酸的甲醇溶液/0.05％三氟醋酸的水溶液，在20分钟内梯度由30％到90％，流速为2mL/min。
系统B：使用的溶剂系统为：0.05％三氟醋酸，95％的乙腈的水溶液/0.05％三氟醋酸的水溶液，在20分钟内梯度由30％到90％，流速为2mL/min。
吡啶-2，3-二甲酸-2-异丙酯(2)

将化合物1吡啶2，3-二酸酐(48.1g，0.32mol)溶解在100mL的2-异丙醇中加热回流16小时，然后将溶液冷却到-20℃得到白色固体化合物2(44.4g，68％)。熔点：140-141℃；¹H NMR(CDCl₃，300MHz)：δ8.87(d，J＝4.2Hz，1H)，8.35(d，J＝7.8Hz，1H)，7.55(dd，J＝5.1，8.1Hz，1H)，5.36(septet(七重峰)，J＝6.3Hz，1H)，1.41(d，J＝6.3Hz，6H)。
3-羟基甲基-吡啶-2-甲酸异丙酯(4)

将化合物2(52.7g，0.25mol)溶解在400mL的二氯亚砜中加热回流至溶液成均相，然后旋干溶剂。加2×50mL无水THF旋蒸，去除残留的二氯亚砜。将所得到的红色液体溶于400mL无水THF中冷却到0℃，分批加入硼氢化钠(28.6g，0.76mol)，0℃下搅拌4个小时，将反应溶液小心的倒入冰水中，3×200mL二氯甲烷萃取，加无水Na₂SO₄干燥。柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶2)得到黄色固体化合物4(18.8g，38％)。¹H NMR(CDCl₃，300MHz)δ8.69(dd，J＝1.5，4.7Hz，1H)，7.88(dd，J＝1.5，7.7Hz，1H)，7.46(dd，J＝4.7，7.8Hz，1H)，5.35(septet，J＝6.4Hz，1H)，4.81(m，2H)，1.45(d，J＝6.3Hz，6H).EI-MS m/z：195(M)⁺。
3-{[甲氧羰基甲基-(甲苯-4-磺酰基)-氨基]-甲基}-吡啶-2-羧酸异丙酯(5)

将化合物4(1.734g，8.89mmol)，2-对甲苯磺酰胺基乙酸甲酯(TsNHCH₂COOCH₃)(2.163g，8.89mmol)，以及三苯基膦(3.499g，13.338mmol)溶解在100mL无水THF中，冷却到0℃，充氮气保护。DEAD(2.165mL，13.338mmol)溶解在10mL无水THF中，逐滴加入DEAD。撤去冰浴，搅拌两小时后旋干得到红色油状液体化合物5直接用于下步反应。
8-羟基-1，6-二氮杂萘-7-羧酸甲酯(6)

将上步反应得到的化合物5(8.89mmol)溶解在50mL无水甲醇里，冷却到0℃。缓慢加入甲醇钠(1.681g，31.123mmol)。撤去冰浴，搅拌3个小时。旋掉溶剂，加20mL水，20mL乙酸乙酯，有机相用饱和碳酸钠反萃。合并水相，调pH到7，维持水相pH到7，用二氯甲烷萃取5次。有机相用无水硫酸钠干燥，柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝2∶1)得到灰白色固体化合物6(0.62g，二步产率65％)。熔点：179-180℃；¹H NMR(CDCl₃，300MHz)δ11.79(s，1H)，9.20(s，1H)，8.85(s，1H)，8.32(d，J＝8.2Hz，1H)，7.71(dd，J＝4.1，8.2Hz，1H)，4.12(s，3H)。
5-溴-8-羟基-1，6-二氮杂萘-7-羧酸甲酯(7-1)

常温下将NBS(30mg，0.167mmol)加入到化合物6(34mg，0.167mmol)的1mL CH₂Cl₂溶液中，搅拌1小时。过滤，干燥得到白色固体化合物7-1(30mg，产率85％)；¹H NMR(d₆DMSO，300MHz)δ9.26(dd，J＝1.5，4.2Hz，1H)，8.59(dd，J＝1.6，8.4Hz，1H)，8.00(dd，J＝4.2，8.4Hz，1H)，3.94(s，3H)。
N-(4-氟-苄基)-5-溴-8-羟基-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(8-1)

将化合物7-1(25mg，0.0883mmol)和4-氟苄胺(12mg，0.0883mmol)2mL甲苯在氮气保护下加热回流20小时，冷却至室温。过滤，固体用0.5mL甲醇洗，得到白色固体化合物8-1，熔点：178-180℃；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ13.31(s，1H)，9.20(dd，J＝1.4，4.2Hz，1H)，8.54(dd，J＝1.4，8.8Hz，1H)，8.17(m，1H)，7.74(dd，J＝4.4，8.6Hz，1H)，7.38(dd，J＝5.4，8.4Hz，2H)，7.07(t，J＝8.4Hz，2H)，4.67(d，J＝6.3Hz，2H).EI-MS m/z：375(M)⁺，377(M+2)₊；元素分析理论值C₁₆H₁₁BrFN₃O₂：C 51.08，H 2.95，N 11.17；实际值C 51.45，H 3.05，N 11.03。
甲苯-4-磺酸5-溴-7-(4-氟-苄基氨基甲酰)-1，6-二氮杂萘-8-羧酸酯(9-1)

将对甲苯磺酰氯(268mg，1.4mmol)加入到化合物8-1(283mg，0.75mmol)，三乙胺(161.92mg，1.6mmol)的5mL氯仿溶液中。50℃搅拌5小时后依次用5mL的饱和氯化铵，饱和食盐水洗，干燥。柱层析(二氯甲烷∶甲醇＝40∶1)得到白色固体化合物9-1(360mg，产率90％)，熔点：152-154℃；¹H NMR(CDCl₃)：δ9.03(dd，1H，J＝1.5，4.2Hz)，8.58(dd，1H，J＝1.5，8.7Hz)，7.96(m，1H)，7.94(d，2H，J＝8.1Hz)，7.69(dd，1H，J＝4.2，8.7Hz)，7.36(m，2H)，7.32(d，2H，J＝8.1Hz)，7.04(t，2H，J＝8.7Hz)，4.60(d，J＝6.6Hz，2H)，2.47(s，3H)；EI-MS m/z：530(M+1)⁺，532(M+3)⁺；元素分析理论值C₂₄H₂₀BrFN₄O：C 52.09，H 3.23，N 7.92；实际值C 51.94，H 3.17，N 7.94。
N-(4-氟-苄基)-8-(3-氨基-丙基氨基)-5-溴-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S1)

将化合物9-1甲苯-4-磺酸5-溴-7-(4-氟-苄基氨基甲酰)-1，6-二氮杂萘-8-羧酸酯(53mg，0.1mmol)，丙二胺(1.0mmol)，三乙胺(30mg，0.3mmol)，加入到5mL THF(四氢呋喃)中，加热回流8小时，旋干THF，加入20mL CH₂Cl₂(二氯甲烷)，依次用20mL的饱和Na₂CO₃水溶液，20mL的饱和氯化铵水溶液，20mL的饱和食盐水洗，无水Na₂SO₄干燥。碱性氧化铝柱层析(二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)，得到黄色固体化合物S1。产率：75-85％。熔点：78-80℃；¹H NMR(CDCl₃，300MHz)：δ9.60(t，1H，J＝5.4Hz)，8.97(d，1H，J＝3Hz)，8.42(d，1H，J＝8.4Hz)，8.32(t，1H，J＝6.0Hz)，7.60(dd，1H，J＝4.5，8.4Hz)，7.36(m，2H)，7.04(t，2H，J＝8.7Hz)，4.60(d，2H，J＝6.6Hz)，4.19(q，2H，J＝6.3Hz)，3.96(t，2H，J＝6.6Hz)，1.93(m，2H)；EI-MS m/z：431(M)⁺，433(M+2)⁺；分析HPLC t_R＝19.083min，100％(A)，t_R＝12.928min，100％(B)。
N-(4-氟-苄基)-8-(2-氨基-乙基氨基)-5-溴-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S2)

化合物S2的制备方法与化合物S1的制备方法类似，除了用乙二胺代替丙二胺。黄色固体，产率：75-85％。熔点：82-84℃；¹H NMR(CDCl₃，300MHz)：δ9.73(m，1H)，8.94(d，1H，J＝3Hz)，8.40(d，1H，J＝8.4Hz)，8.30(m，1H)，7.57(dd，1H，J＝4.5，8.4Hz)，7.33(m，2H)，7.02(t，2H，J＝8.4Hz)，4.59(d，2H，J＝6.6Hz)，4.19(q，2H，J＝6.3Hz)，3.09(t，2H，J＝6.3Hz)；EI-MS m/z：417(M)⁺，419(M+2)⁺；分析HPLC t_R＝19.475min，100％(A)，t_R＝11.792min，99.29％(B)。
N-(4-氟-苄基)-8-羟基-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S3-1)

化合物S3-1的制备方法与化合物8-1的制备方法类似，除了用化合物6代替化合物7-1。白色固体，产率：75-85％。¹H NMR(300MHz，CDC1₃)δ9.18(dd，J＝1.8，4.5Hz，1H)，8.64(s，1H)，8.42(m，1H)，8.28(dd，J＝1.8，8.4Hz，1H)，7.65(dd，J＝4.2，8.4Hz，1H)，7.38(m，2H)，7.06(m，2H)，4.68(d，J＝6.0Hz，2H)。
甲苯-4-磺酸7-(4-氟-苄基氨基甲酰)-1，6-二氮杂萘-8-羧酸酯(S3-2)

化合物S3-2的制备方法与化合物9-1的制备方法类似，除了用化合物S3-1代替化合物8-1。白色固体，产率：85-95％。¹H NMR(CDCl₃)：δ9.11(s，1H)，9.02(dd，1H，J＝1.5，4.2Hz)，8.34(dd，1H，J＝1.5，8.7Hz)，8.12(m，1H)，7.95(d，2H，J＝8.1Hz)，7.61(dd，1H，J＝4.2，8.7Hz)，7.37(m，2H)，7.33(d，2H，J＝8.1Hz)，7.04(t，2H，J＝8.7Hz)，4.62(d，J＝6.0Hz，2H)，2.47(s，3H)；EI-MS m/z：452(M+1)⁺。
8-(3-氨基丙氨)-N-(4-氟苄基)-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S3)

化合物S3的制备方法与化合物S1的制备方法类似，除了用化合物S3-2代替化合物9-1。棕色固体，产率：75-85％。熔点：62-64℃；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ9.59(d，1H，J＝7.5Hz)，8.91(dd，1H，J＝1.5，3.9Hz)，8.62(t，1H，J＝6.3Hz)，8.19(s，1H)，8.08(dd，1H，J＝1.5，8.4Hz)，7.48(dd，1H，J＝4.2，8.4Hz)，7.34(m，2H)，7.02(t，2H，J＝8.7Hz)，4.60(d，2H，J＝6.3Hz)，4.23(q，2H，J＝6.6Hz)，2.91(t，2H，J＝6.6Hz)，2.00(s，2H)，1.89(m，2H)；EI-MS m/z：353(M)⁺；分析HPLC t_R＝18.167min，100％(A)，t_R＝12.742min，98.29％(B)。
8-(3-(二甲氨基)丙氨基)-N-(4-氟-苄基)-5-溴-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S4)

化合物S4的制备方法与化合物S1的制备方法类似，最后一步用二甲基氨基丙二胺代替丙二胺。黄绿色固体，产率：75-85％。熔点：60-62℃；¹HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ9.74(t，1H，J＝6.6Hz)，8.94(dd，1H，J＝1.8，4.2Hz)，8.42(dd，1H，J＝1.5，8.4Hz)，8.31(t，1H，J＝6.3Hz)，7.68(dd，1H，J＝4.2，8.4Hz)，7.35(m，2H)，7.04(t，2H，J＝8.7Hz)，4.61(d，2H，J＝6.0Hz)，4.17(q，2H，J＝6.6Hz)，2.54(m，2H)，1.96(m，2H)；EI-MS m/z：459(M)⁺，461(M+2)⁺；分析HPLC t_R＝18.867min，100％(A)，t_R＝12.808min，100％(B)。
2-(7-(4-氟苄氨基甲酰)-5-溴-1，6-二氮杂萘-8-氨基)醋酸甲酯(S5)

化合物S5的制备方法与化合物S1的制备方法类似，最后一步用甘氨酸甲酯代替丙二胺。黄绿色固体，产率：75-85％。熔点：184-185℃；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ10.17(br，1H)，8.86(dd，1H，J＝1.5，4.2Hz)，8.43(dd，1H，J＝1.5，8.4Hz)，8.34(t，1H，J＝6.0Hz)，7.58(dd，1H，J＝4.2，8.4Hz)，7.36(m，2H)，7.04(t，2H，J＝8.7Hz)，4.82(s，2H)，4.63(d，2H，J＝6.3Hz)，3.73(s，3H)；EI-MS m/z：446(M)⁺，448(M+2)⁺；分析HPLC t_R＝21.025min，100％(A)，t_R＝16.158min，100％(B)。
5-溴-8-(3-甲磺酰氨基-丙氨基)-1，6-二氮杂萘-7-羧酸-4-氟-苄酰胺(S6)

化合物S6的制备方法与化合物S1的制备方法类似，最后一步用N-(3-氨基丙基)-甲磺酰胺代替丙二胺。黄色固体，产率：75-85％。熔点：153-155℃；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ9.21(m，1H)，9.11(dd，1H，J＝1.8，4.2Hz)，8.53(dd，1H，J＝1.5，8.4Hz)，8.40(t，1H，J＝6.3Hz)，7.68(dd，1H，J＝4.2，8.4Hz)，7.35(m，2H)，7.05(t，2H，J＝8.7Hz)，6.61(t，1H，J＝6.0Hz)，4.61(d，2H，J＝6.0Hz)，4.14(m，2H)，3.42(q，2H，J＝6.0Hz)，2.91(s，3H)，2.01(m，2H)；EI-MS m/z：509(M)⁺，511(M+2)⁺；分析RP-HPLC t_R＝20.833min，100％(A)，t_R＝6.067min，99.46％(B)。
8-(3-(苯甲酰胺)丙氨基)-N-(4-氟苄基)-5-溴-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S7)

化合物S7的制备方法与化合物S1的制备方法类似，最后一步用N-(3-氨基丙基)-苯甲酰胺代替丙二胺。棕色固体，产率：75-85％。熔点：144-146℃；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ9.63(br，1H)，8.83(dd，1H，J＝1.8，4.2Hz)，8.43(dd，1H，J＝1.5，8.4Hz)，8.34(t，1H，J＝6.3Hz)，7.75(d，2H，J＝6.9Hz)，7.57(dd，1H，J＝4.2，8.4Hz)，7.50-7.32(m，5H)，7.04(t，2H，J＝8.7Hz)，6.68(br，1H)，4.59(d，2H，J＝6.6Hz)，4.26(t，2H，J＝6.6Hz)，3.66(q，2H，J＝6.3Hz)，2.08(m，2H)；EI-MS m/z：535(M)⁺，537(M+2)⁺；分析RP-HPLC t_R＝6.408min，100％(A)，t_R＝6.208min，100％(B)。
N-(4-氟苄基)-8-(6-氨基己氨基)-5-溴-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S8)

化合物S8的制备方法与化合物S1的制备方法类似，最后一步用己二胺代替丙二胺。黄绿色固体，产率：75-85％。熔点：108-112℃；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ9.65(br，1H)，8.91(dd，1H，J＝1.8，4.2Hz)，8.38(dd，1H，J＝1.5，8.4Hz)，8.30(t，1H，J＝6.3Hz)，7.56(dd，1H，J＝4.2，8.4Hz)，7.35(m，2H)，7.03(t，2H，J＝8.7Hz)，4.60(d，2H，J＝6.6Hz)，4.26(m，2H)，2.75(m，2H)，1.8-1.15(m，8H)；EI-MS m/z：473(M)⁺，475(M+2)⁺；分析HPLC t_R＝19.558min，100％(A)，t_R＝13.508min，96.32％(B)。
8-(4-氨基苯胺)-N-(4-氟苄基)-5-溴-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S9)

化合物S9的制备方法与化合物S1的制备方法类似，最后一步用对苯二胺代替丙二胺。深红色固体，产率：75-85％。熔点：190-192℃；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ10.64(s，1H)，8.73(dd，1H，J＝1.8，4.2Hz)，8.44(dd，1H，J＝1.5，8.4Hz)，8.38(t，1H，J＝6.3Hz)，7.54(dd，1H，J＝4.2，8.4Hz)，7.36(m，2H)，7.03(t，2H，J＝8.7Hz)，6.80(d，2H，J＝8.4Hz)，6.56(d，2H，J＝8.4Hz)，4.60(d，2H，J＝6.6Hz)；EI-MS m/z：465(M)⁺，467(M+2)⁺；分析HPLC t_R＝16.067min，100％(A)，t_R＝10.667min，99.18％(B)。
8-(3-氨基苯胺)-N-(4-氟苄基)-5-溴-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S10)

化合物S10的制备方法与化合物S1的制备方法类似，最后一步用间苯二胺代替丙二胺。黄色固体，产率：75-85％。熔点：167-169℃；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ10.54(s，1H)，8.85(dd，1H，J＝1.8，4.2Hz)，8.47(dd，1H，J＝1.5，8.4Hz)，8.38(t，1H，J＝6.3Hz)，7.59(dd，1H，J＝4.2，8.4Hz)，7.35(m，2H)，7.04(t，2H，J＝8.7Hz)，6.95(t，1H，J＝8.0Hz)，6.36(d，1H，J＝8.0Hz)，6.28(m，2H)，4.61(d，2H，J＝6.3Hz)，3.56(br，2H)；EI-MS m/z：465(M)⁺，467(M+2)⁺；分析HPLC t_R＝16.292min，100％(A)，t_R＝11.067min，100％(B)。
N-(4-氟苄基)-5-溴-8-(1-哌嗪)-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S11)

化合物S11的制备方法与化合物S1的制备方法类似，最后一步用哌嗪代替丙二胺。棕色固体，产率：75-85％。熔点：191-195℃；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ9.07(dd，1H，J＝1.5，4.2Hz)，8.59(t，1H，J＝6.0Hz)，8.53(dd，1H，J＝1.5，8.4Hz)，7.63(dd，1H，J＝4.2，8.4Hz)，7.39(m，2H)，7.04(t，2H，J＝8.7Hz)，4.66(d，2H，J＝6.3Hz)，3.59(t，4H，J＝4.5Hz)，3.13(t，4H，J＝4.5Hz)，2.74(br，1H)；EI-MS m/z：443(M)⁺，445(M+2)⁺；分析HPLC t_R＝19.808min，100％(A)，t_R＝12.050min，96.48％(B)。
叔丁基4-(7-(4-氟苄氨基甲酰)-5-溴-1，6-二氮杂萘-8-氨基)哌嗪-1-羧酸酯(S12)

化合物S12的制备方法与化合物S1的制备方法类似，最后一步用哌嗪-1-羧酸叔丁酯代替丙二胺。黄色固体，产率：75-85％。熔点：118-122℃；¹HNMR (300MHz，CDCl₃)：δ9.02(dd，1H，J＝1.5，4.2Hz)，8.47(dd，1H，J＝1.8，8.4Hz)，8.18(t，1H，J＝8.7Hz)，7.59(dd，1H，J＝4.2，8.4Hz)，7.35(m，2H)，6.99(t，2H，J＝8.7Hz)，4.61(d，2H，J＝6.3Hz)，3.59(s，4H)，3.47(s，4H)，1.49(s，9H)；EI-MS m/z：543(M)⁺，545(M+2)⁺；分析HPLC t_R＝20.483min，100％(A)，t_R＝14.767min，99.35％(B)。
N-(4-氟苄基)-5-溴-8-(哌啶-4-氨基)-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S13)

化合物S13的制备方法与化合物S1的制备方法类似，最后一步用4-氨基-哌啶代替丙二胺。黄绿色固体，产率：75-85％。熔点：＞200℃；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ8.94(dd，1H，J＝2.1，4.2Hz)，8.46(dd，1H，J＝1.8，8.4Hz)，8.32(t，1H，J＝6.0Hz)，7.63(dd，1H，J＝4.2，8.4Hz)，7.33(m，2H)，7.02(t，2H，J＝8.7Hz)，5.27(m，1H)，4.56(d，2H，J＝6.0Hz)，3.39(m，2H)，2.31(m，2H)，1.84(m，2H)；EI-MS m/z：571(M)⁺，573(M+2)⁺；分析HPLC t_R＝6.292min，100％(A)，t_R＝12.658min，100％(B)。
4-(7-(4-氟苄氨基甲酰)-5-溴-1，6-二氮杂萘-8-氨基)哌啶-1-叔丁基羧酸酯(S14)

化合物S14的制备方法与化合物S1的制备方法类似，最后一步用哌啶-1-羧酸叔丁酯代替丙二胺。黄色固体，产率：75-85％。熔点：134-137℃；¹HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ8.96(dd，1H，J＝1.5，3.9Hz)，8.44(dd，1H，J＝1.5，8.4Hz)，8.32(t，1H，J＝6.0Hz)，7.61(dd，1H，J＝4.2，8.4Hz)，7.35(m，2H)，7.04(t，2H，J＝8.7Hz)，5.18(m，1H)，4.60(d，2H，J＝6.0Hz)，3.99(m，2H)，3.05(m，2H)，2.06(m，2H)，1.62(m，2H)；1.45(s，9H)；EI-MS m/z：557(M)⁺，559(M+2)⁺；分析HPLC t_R＝23.967min，100％(A)，t_R＝19.517min，100％(B)。
8-((1r，4r)-4-氨基环己氨基)-N-(4-氟苄基)-5-溴-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S15)

化合物S15的制备方法与化合物S1的制备方法类似，最后一步用反式1，4-环己二胺代替丙二胺。黄绿色固体，产率：75-85％。熔点：147-152℃；¹HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ9.63(d，1H，J＝7.5Hz)，8.94(dd，1H，J＝1.5，3.9Hz)，8.40(dd，1H，J＝1.5，8.4Hz)，8.33(t，1H，J＝6.0Hz)，7.58(dd，1H，J＝4.2，8.4Hz)，7.35(m，2H)，7.04(t，2H，J＝8.7Hz)，4.97(m，1H)，4.60(d，2H，J＝6.0Hz)，2.76(m，1H)，2.18(m，2H)，1.92(m，4H)，1.42(m，4H)；EI-MS m/z：471(M)⁺，473(M+2)⁺；HR-EIMS理论值C₂₂H₂₃N₅OFBr：471.1070，实际值：471.1063.分析HPLC t_R＝5.325min，93.63％(A)，t_R＝12.692min，99.60％(B)。
N-(4-氟-苄基)-5-(1，1-二氧-1⁶-过氢-1，2-噻嗪-2-基)-8-羟基-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S16-1)

将过氢-1，2-噻嗪-1，1-二氧化物(制备参考J.Org.Chem.1987，52，2162)(135mg，1mmol)，N-(4-氟-苄基)-5-溴-8-羟基-1，6-二氮杂萘-7-羧酰胺8-1(375mg，1mmol)，以及氧化亚铜(170mg，1.2mmol)加入到1mL吡啶中，氮气保护，加热回流16小时.反应体系冷却至室温，过滤，滤渣用10mL氯仿洗，旋干滤液加入20mL氯仿，1.2g EDTA，120mL水，搅拌16小时，有机相用无水硫酸钠干燥.柱层析(二氯甲烷∶甲醇＝70∶1)得到浅黄色固体化合物S16-1z。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ13.34(br，1H)，9.19(dd，J＝1.5，4.2Hz，1H)，8.61(d，J＝1.5，8.7Hz，1H)，7.96(m，1H)，7.69(dd，J＝4.8，8.7Hz，1H)，7.37(m，2H)，7.07(t，J＝8.6Hz，2H)，4.67(m，2H)，3.93(m，2H)，3.30(t，J＝6.3Hz，2H)，2.45-2.36(m，2H)，2.18-2.15(m，1H)，1.85-1.82(m，1H)；EI-MSm/z：430(M)⁺；分析HPLC t_R＝17.042min，100％(A)，t_R＝12.350min，99.45％(B)。
甲苯-4-磺酸5-(1，1-二氧-1λ⁶-过氢-1，2-噻嗪-2-基)-7-(4-氟-苄基氨基甲酰)-1，6-二氮杂萘-8-羧酸酯(S16-2)

化合物S16-2的制备方法与化合物9-1的制备方法类似，除了用化合物S16-1代替化合物8-1。白色固体，产率：85-95％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ8.92(d，1H，J＝3.9Hz)，8.60(d，1H，J＝8.4Hz)，7.93(d，2H，J＝8.1Hz)，7.59(dd，1H，J＝4.2，8.7Hz)，7.49(m，1H)，7.36(m，4H)，7.05(t，2H，J＝8.7Hz)，4.63(d，J＝6.0Hz，2H)，4.03(m，2H)，3.31(m，2H)，2.47(s，3H)，2.36(m，2H)，1.66(m，2H)；EI-MS m/z：584(M)⁺。
8-((1，4反式)-4-氨基环己氨基)-5-(1，1-二氧-1λ⁶-过氢-1，2-噻嗪-2-基)-1，6-二氮杂萘-7-羧酸4-氟苄酰胺(S16)

化合物S16的制备方法与化合物S15的制备方法类似，除了用化合物S16-2代替化合物9-1。黄绿色固体，产率：75-85％。熔点：174-176℃；¹H NMR(CDCl₃，300MHz)δ9.65(d，1H，J＝7.8Hz)，8.92(m，1H)，8.48(dd，1H，J＝1.5，8.7Hz)，8.07(m，1H)，7.54(dd，1H，J＝4.2，8.4Hz)，7.34(dd，2H，J＝5.4，8.4Hz)，7.04(t，2H，J＝8.4Hz)，5.00(m，1H)，4.56(m，2H)，3.92(m，1H)，3.74(m，1H)，3.24(m，2H)，2.75(m，1H)，2.40(m，1H)，2.20(m，4H)，1.90(m，2H)，1.65(m，2H)，1.43(m，4H)；EI-MS m/z：526(M)⁺；分析HPLC t_R＝17.875min，95.23％(A)，t_R＝7.375min，100％(B)。
N-苄基-5-溴-8-羟基-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S17-1)

化合物S17-1的制备方法与化合物8-1的制备方法类似，除了用苄胺代替对氟苄胺。黄色固体，产率：75-85％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ9.19(dd，J＝4.2Hz，1H)，8.54(d，J＝7.8Hz，1H)，8.21(m，1H)，7.74(dd，J＝4.2，7.8Hz，1H)，7.40-7.29(m，5H)，4.70(d，J＝6.0Hz，2H)。
甲苯-4-磺酸5-溴-7-苄基氨基甲酰-1，6-二氮杂萘-8-羧酸酯(S17-2)

化合物S17-2的制备方法与化合物9-1的制备方法类似，除了用化合物S17-1代替化合物8-1。白色固体，产率：85-95％。¹H NMR(CDCl₃)：δ9.04(dd，1H，J＝1.5，4.2Hz)，8.56(dd，1H，J＝1.8，8.7Hz)，7.93(m，3H)，7.68(dd，1H，J＝4.5，8.7Hz)，7.38-7.30(m，7H)，4.62(d，J＝6.0Hz，2H)，2.46(s，3H)。
8-((1r，4r)-4-氨基环己氨基)-N-苄基-5-溴-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S17)

化合物S17的制备方法与化合物S15的制备方法类似，除了用化合物S17-2代替化合物9-1。黄绿色固体，产率：75-85％。熔点：123-126℃；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ9.62(d，1H，J＝7.5Hz)，8.94(dd，1H，J＝1.5，3.9Hz)，8.41(d，1H，J＝8.4Hz)，8.31(m，1H)，7.58(dd，1H，J＝4.2，8.4Hz)，7.37-7.27(m，5H)，4.97(m，1H)，4.63(d，2H，J＝6.0Hz)，2.76(m，1H)，2.18(m，2H)，1.92(m，4H)，1.42(m，4H)；EI-MS m/z：453(M)⁺，455(M+2)⁺；分析HPLC t_R＝5.8min，100％(A)，t_R＝8.79min，95.72％(B)。
N-(4-甲氧基-苄基)-5-溴-8-羟基-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S18-1)

化合物S18-1的制备方法与化合物8-1的制备方法类似，除了用对甲氧基苄胺代替对氟苄胺。黄色固体，产率：75-85％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ9.19(d，J＝4.2Hz，1H)，8.53(d，J＝8.1Hz，1H)，8.12(m，1H)，7.72(dd，J＝4.2，8.7Hz，1H)，7.33(d，J＝8.4Hz，2H)，6.91(t，J＝8.7Hz，2H)，4.63(d，J＝6.6Hz，2H)，3.80(s，3H)。分析HPLC t_R＝22.47min，99.99％(A)，t_R＝14.81min，99.81％(B)。
甲苯-4-磺酸5-溴-7-(4-甲氧基-苄基氨基甲酰)-1，6-二氮杂萘-8-羧酸酯(S18-2)

化合物S18-2的制备方法与化合物9-1的制备方法类似，除了用化合物S18-1代替化合物8-1。白色固体，产率：85-95％。¹H NMR(CDCl₃)：δ8.98(dd，1H，J＝1.5，4.2Hz)，8.52(dd，1H，J＝1.5，8.7Hz)，7.90(d，2H，J＝8.4Hz)，7.87(m，1H)，7.65(dd，1H，J＝4.2，8.4Hz)，7.31-7.27(m，4H)，6.87(d，2H，J＝8.4Hz)，4.52(d，2H，J＝5.7Hz)，3.78(s，3H)，2.44(s，3H)。
8-((1r，4r)-4-氨基环己氨基)-N-(4-甲氧苄基)-5-溴-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S18)

化合物S18的制备方法与化合物S15的制备方法类似，除了用化合物S18-2代替化合物9-1。黄绿色固体，产率：75-85％。熔点：96-99℃；¹HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ9.64(d，1H，J＝8.1Hz)，8.93(dd，1H，J＝1.2，4.2Hz)，8.40(dd，1H，J＝1.2，8.4Hz)，8.23(m，1H)，7.58(dd，1H，J＝4.2，8.4Hz)，7.30(d，2H，J＝8.4Hz)，6.89(d，2H，J＝8.4Hz)，4.95(m，1H)，4.56(d，2H，J＝6.3Hz)，3.80(s，3H)，2.75(m，1H)，2.63(m，1H)，2.18(m，2H)，1.85(m，4H)，1.34(m，4H)；EI-MS m/z：483(M)⁺，485(M+2)⁺；分析HPLC t_R＝22.367min，97.28％(A)，t_R＝13.950min，97.37％(B)。
N-(5-(1，3-苯并二噁茂)甲基)-5-溴-8-羟基-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S19-1)

化合物S19-1的制备方法与化合物8-1的制备方法类似，除了用5-(1，3-苯并二噁茂)甲胺代替对氟苄胺。黄色固体，产率：75-85％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ13.32(s，1H)，9.20(dd，J＝1.5，3.9Hz，1H)，8.54(dd，J＝1.2，8.4Hz，1H)，8.11(m，1H)，7.72(dd，J＝4.2，8.4Hz，1H)，6.89-6.79(m，3H)，5.97(s，2H)，4.60(d，J＝6.3Hz，2H)。
甲苯-4-磺酸5-溴-7-(5-(1，3-苯并二噁茂)甲基氨基甲酰)-1，6-二氮杂萘-8-羧酸酯(S19-2)

化合物S19-2的制备方法与化合物9-1的制备方法类似，除了用S19-1代替化合物8-1。白色固体，产率：85-95％。¹H NMR(CDCl₃)：δ9.01(dd，1H，J＝1.2，4.2Hz)，8.54(dd，1H，J＝1.5，8.7Hz)，7.91(d，2H，J＝8.1Hz)，7.87(m，1H)，7.67(dd，1H，J＝4.2，8.4Hz)，7.33(d，2H，J＝8.1Hz)，6.86-6.75(m，3H)，5.94(s，3H)，4.51(d，2H，J＝6.0Hz)，2.46(s，3H)。
8-((1r，4r)-4-氨基环己氨基)-N-(5-(1，3-苯并二噁茂)甲基)-5-溴-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S19)

化合物S19的制备方法与化合物S15的制备方法类似，除了用化合物S19-2代替化合物9-1。黄绿色固体，产率：75-85％。熔点：131-134℃；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ9.62(d，1H，J＝8.4Hz)，8.93(dd，1H，J＝1.2，4.2Hz)，8.40(dd，1H，J＝1.2，8.4Hz)，8.23(m，1H)，7.58(dd，1H，J＝4.2，8.4Hz)，6.87-6.76(m，3H)，5.94(s，2H)，4.95(m，1H)，4.53(d，2H，J＝6.0Hz)，2.75(m，1H)，2.18(m，2H)，1.92(m，4H)，1.34(m，4H)；EI-MS m/z：401(M)⁺，403(M+2)⁺；分析HPLC t_R＝14.43min，100％(A)，t_R＝5.54min，100％(B)。
N-((S)-1-(4-氟苯基)乙基)-5-溴-8-羟基-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S20-1)

化合物S20-1的制备方法与化合物8-1的制备方法类似，除了用(S)-1-(4-氟苯基)乙胺代替对氟苄胺。黄色固体，产率：75-85％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ13.30(s，1H)，9.17(dd，J＝1.5，4.2Hz，1H)，8.53(dd，J＝1.5，8.4Hz，1H)，8.03(d，J＝8.1Hz，1H)，7.71(dd，J＝4.2，8.4Hz，1H)，7.40(m，2H)，7.06(d，J＝8.7Hz，2H)，5.30(m，1H)，1.67(d，J＝6.9Hz，3H)。
甲苯-4-磺酸5-溴-7-((S)-1-(4-氟苯基)乙基氨基甲酰)-1，6-二氮杂萘-8-羧酸酯(S20-2)

化合物S20-2的制备方法与化合物9-1的制备方法类似，除了用化合物S20-1代替化合物8-1。白色固体，产率：85-95％。¹H NMR(CDCl₃)：δ9.01(dd，1H，J＝1.2，4.2Hz)，8.56(d，1H，J＝8.7Hz)，7.88(d，2H，J＝8.1Hz)，7.84(m，1H)，7.67(dd，1H，J＝4.5，8.7Hz)，7.40(m，2H)，7.28(d，2H，J＝8.7Hz)，5.26(m，1H)，2.45(s，3H)，1.60(d，6H，J＝6.9Hz).
8-((1r，4r)-4-氨基环己氨基)-5-溴-N-((S)-1-(4-氟苯基)乙基)-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S20)

化合物S20的制备方法与化合物S15的制备方法类似，除了用化合物S20-2代替化合物9-1。黄绿色固体，产率：75-85％。熔点：129-131℃；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ9.57(d，1H，J＝7.5Hz)，8.93(dd，1H，J＝1.5，3.9Hz)，8.41(dd，1H，J＝1.5，8.4Hz)，8.21(m，1H)，7.58(dd，1H，J＝4.2，8.4Hz)，7.37(m，2H)，7.01(t，2H，J＝8.7Hz)，5.24(m，1H)，4.97(m，1H)，4.93(m，1H)，2.76(m，1H)，2.18(m，2H)，1.92(m，2H)，1.60(d，3H，J＝6.9Hz)，1.42(m，4H)；EI-MS m/z：485(M)⁺，487(M+2)⁺；分析HPLC t_R＝14.31min，94.70％(A)，t_R＝8.33min，100％(B)。
N-((2-呋喃)甲基)-5-溴-8-羟基-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S21-1)

化合物S21-1的制备方法与化合物8-1的制备方法类似，除了用2-呋喃甲胺代替对氟苄胺。黄色固体，产率：75-85％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ13.20(brs，1H)，8.19(dd，1H，J＝1.5，4.2Hz)，8.54(dd，1H，J＝1.5，8.4Hz)，8.13(m，1H)，7.73(dd，1H，J＝4.2，8.4Hz)，7.42(m，1H)，6.37(m，2H)，4.70(d，2H，J＝6.0Hz).EI-MS m/z：347(M)⁺，349(M+2)⁺。
甲苯-4-磺酸5-溴-7-((2-呋喃)甲基氨基甲酰)-1，6-二氮杂萘-8-羧酸酯(S21-2)

化合物S21-2的制备方法与化合物9-1的制备方法类似，除了用化合物S21-1代替化合物8-1。白色固体，产率：85-95％。¹H NMR(CDCl₃)：δ9.03(dd，1H，J＝1.5，4.2Hz)，8.56(dd，1H，J＝1.5，8.7Hz)，7.91(d，2H，J＝8.1Hz)，7.89(m，1H)，7.68(dd，1H，J＝4.2，8.7Hz)，7.40(m，1H)，7.32(d，2H，J＝8.1Hz)，6.33(m，2H)，4.58(d，2H，J＝6.0Hz)，2.47(s，3H)。
8-((1r，4r)-4-氨基环己氨基)-5-溴-N-((2-呋喃)甲基)-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S21)

化合物S21的制备方法与化合物S15的制备方法类似，除了用化合物S21-2代替化合物9-1。黄绿色固体，产率：75-85％。熔点：96-98℃；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ9.56(d，1H，J＝8.1Hz)，8.90(dd，1H，J＝1.5，3.9Hz)，8.37(d，1H，J＝8.4Hz)，8.23(m，1H)，7.54(dd，1H，J＝4.2，8.4Hz)，7.36(s，1H)，6.30(m，2H)，4.93(m，1H)，4.57(d，2H，J＝6.0Hz)，2.71(m，1H)，2.18(m，2H)，1.92(m，4H)，1.42(m，4H)；EI-MS m/z：443(M)⁺，445(M+2)⁺；分析HPLC t_R＝5.91min，100％(A)，t_R＝6.55min，100％(B)。
N-(3-甲氧基-苄基)-5-溴-8-羟基-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S22-1)

化合物S22-1的制备方法与化合物8-1的制备方法类似，除了用3-甲氧基苄胺代替对氟苄胺。黄色固体，产率：75-85％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ9.14(dd，J＝1.5，4.2Hz，1H)，8.48(dd，J＝1.5，8.4Hz，1H)，8.26(m，1H)，7.68(dd，J＝4.2，8.4Hz，1H)，7.23(m，2H)，6.84(m，2H)，4.64(d，J＝6.0Hz，2H)，3.78(s，3H)。
甲苯-4-磺酸5-溴-7-(3-甲氧基-苄基氨基甲酰)-1，6-二氮杂萘-8-羧酸酯(S22-2)

化合物S22-2的制备方法与化合物9-1的制备方法类似，除了用化合物S22-1代替化合物8-1。白色固体，产率：85-95％。¹H NMR(CDCl₃)：δ8.97(dd，1H，J＝1.5，4.2Hz)，8.50(dd，1H，J＝1.8，7.5Hz)，7.94(m，1H)，7.88(d，2H，J＝8.4Hz)，7.64(dd，1H，J＝4.2，8.4Hz)，7.28(d，2H，J＝8.4Hz)，7.25(m，1H)，6.92(m，2H)，6.80(m，1H)，5.68(d，2H，J＝6.0Hz)，3.78(s，3H)，2.42(s，3H)。
8-((1r，4r)-4-氨基环己氨基)-N-(3-甲氧苄基)-5-溴-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S22)

化合物S22的制备方法与化合物S15的制备方法类似，除了用化合物S22-2代替化合物9-1。黄绿色固体，产率：75-85％。熔点：84-87℃；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ9.62(d，1H，J＝8.4Hz)，8.92(dd，1H，J＝1.5，4.2Hz)，8.39(dd，1H，J＝1.5，8.4Hz)，8.31(m，1H)，7.56(dd，1H，J＝4.2，8.4Hz)，7.30(d，2H，J＝8.4Hz)，6.89(d，2H，J＝8.4Hz)，4.95(m，1H)，4.56(d，2H，J＝6.3Hz)，3.80(s，3H)，2.75(m，1H)，2.63(m，1H)，2.18(m，2H)，1.85(m，4H)，1.34(m，4H)；EI-MS m/z：483(M)⁺，485(M+2)⁺；分析HPLC t_R＝5.71min，100％(A)，t_R＝8.80min，99.27％(B)。
N-苯乙基-5-溴-8-羟基-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S23-1)

化合物S23-1的制备方法与化合物8-1的制备方法类似，除了用2-苯基乙胺代替对氟苄胺。黄色固体，产率：75-85％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ9.18(dd，J＝1.5，4.2Hz，1H)，8.53(dd，J＝1.5，8.4Hz，1H)，7.93(m，1H)，7.71(dd，J＝4.2，8.4Hz，1H)，7.73-7.18(m，10H)，3.75(q，2H，J＝6.9Hz)，2.98(m，4H)，2.76(m，2H).EI-MS m/z：371(M)⁺，373(M+2)⁺。
甲苯-4-磺酸5-溴-7-(苯乙基氨基甲酰)-1，6-二氮杂萘-8-羧酸酯(S23-2)

化合物S23-2的制备方法与化合物9-1的制备方法类似，除了用S23-1代替化合物8-1。白色固体，产率：85-95％。¹H NMR(CDCl₃)：δ8.98(dd，1H，J＝3.6Hz)，8.51(d，1H，J＝8.4Hz)，7.90(d，2H，J＝7.8Hz)，7.65(dd，1H，J＝4.2，8.4Hz)，7.64(m，1H)，7.35-7.21(m，7H)，3.63(q，2H，J＝6.9Hz)，2.90(t，2H，J＝8.1Hz)，2.44(s，3H)。
8-((1r，4r)-4-氨基环己氨基)-N-苯乙基-5-溴-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S23)

化合物S23的制备方法与化合物S15的制备方法类似，除了用化合物S23-2代替化合物9-1。黄绿色固体，产率：75-85％。熔点：64-65℃；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ9.60(d，1H，J＝8.4Hz)，8.93(d，1H，J＝3.9Hz)，8.40(d，1H，J＝8.4Hz)，8.11(m，1H)，7.57(dd，1H，J＝4.2，8.4Hz)，7.36-7.24(m，5H)，4.93(m，1H)，3.65(m，2H)，2.95(m，2H)，2.75(m，1H)，2.18(m，2H)，1.94(m，2H)，1.42(m，4H)；EI-MS m/z：467(M)⁺，469(M+2)⁺；分析HPLC t_R＝15.05min，97.78％(A)，t_R＝8.30min，99.26％(B)。
N-(4-氯-苄基)-5-溴-8-羟基-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S24-1)

化合物S24-1的制备方法与化合物8-1的制备方法类似，除了用4-氯苄胺代替对氟苄胺。黄色固体，产率：75-85％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ9.20(d，J＝3.9Hz，1H)，8.54(d，J＝9Hz，1H)，8.19(m，1H)，7.74(dd，J＝4.2，8.4Hz，1H)，7.35-7.23(m，8H)，4.67(d，J＝6.3Hz，2H)，2.85(s，2H)。
甲苯-4-磺酸5-溴-7-(4-氯-苄基氨基甲酰)-1，6-二氮杂萘-8-羧酸酯(S24-2)

化合物S24-2的制备方法与化合物9-1的制备方法类似，除了用化合物S24-1代替化合物8-1。白色固体，产率：85-95％。¹H NMR(CDCl₃)：δ9.01(dd，1H，J＝1.5，4.2Hz)，8.56(dd，1H，J＝1.5，8.7Hz)，7.98(m，1H)，7.92(d，2H，J＝8.4Hz)，7.68(dd，1H，J＝4.2，8.7Hz)，7.32-7.30(m，6H)，4.61(d，J＝6.0Hz，2H)，2.46(s，3H)。
8-((1r，4r)-4-氨基环己氨基)-N-(4-氯苄基)-5-溴-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S24)

化合物S24的制备方法与化合物S15的制备方法类似，除了用化合物S24-2代替化合物9-1。黄绿色固体，产率：75-85％。熔点：128-130℃；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ9.60(d，1H，J＝8.1Hz)，9.30(dd，1H，J＝1.5，4.2Hz)，8.40(dd，1H，J＝1.2，8.7Hz)，8.33(m，1H)，7.58(dd，1H，J＝4.2，8.4Hz)，7.30(s，4H)，4.96(m，1H)，4.59(d，2H，J＝6.0Hz)，2.77(m，1H)，2.17(m，2H)，1.94(m，2H)，1.43-1.24(m，4H)；EI-MS m/z：487(M)⁺，489(M+2)⁺；HR-EIMS理论值C₂₂H₂₃N₅OClBr：487.0775，实际值：487.0774.分析HPLC t_R＝30.39min，95.29％(A)，t_R＝20.43min，100％(B)。
N-(2，4-二氯苄基)-5-溴-8-羟基-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S25-1)

化合物S25-1的制备方法与化合物8-1的制备方法类似，除了用2，4-二氯苄胺代替对氟苄胺。黄色固体，产率：75-85％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ9.20(d，J＝1.5，4.2Hz，1H)，8.55(d，J＝7.8Hz，1H)，8.27(m，1H)，7.75(dd，J＝4.2，7.8Hz，1H)，7.42(m，3H)，4.76(d，J＝6.3Hz，2H)。
甲苯-4-磺酸5-溴-7-(2，4-二氯-苄基氨基甲酰)-1，6-二氮杂萘-8-羧酸酯(S25-2)

化合物S25-2的制备方法与化合物9-1的制备方法类似，除了用S25-1代替化合物8-1。白色固体，产率：85-95％。¹H NMR(CDCl₃)：δ9.02(dd，1H，J＝1.5，4.2Hz)，8.57(dd，1H，J＝1.8，8.7Hz)，8.08(m，1H)，7.90(d，2H，J＝8.4Hz)，7.68(dd，1H，J＝4.2，8.7Hz)，7.42(m，2H)，7.32(d，2H，J＝8.4Hz)，7.24(m，1H)，4.67(d，J＝6.3Hz，2H)，2.47(s，3H).
8-((1r，4r)-4-氨基环己氨基)-N-(2，4-二氯苄基)-5-溴-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S25)

化合物S25的制备方法与化合物S15的制备方法类似，除了用化合物S25-2代替化合物9-1。黄绿色固体，产率：75-85％。熔点：72-74℃；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ9.55(d，1H，J＝7.8Hz)，8.94(dd，1H，J＝1.5，3.9Hz)，8.41(d，1H，J＝7.2Hz)，8.40(m，1H)，7.59(dd，1H，J＝1.5，8.7Hz)，7.37(s，2H)，7.23(m，1H)，4.96(m，1H)，4.67(d，2H，J＝6.0Hz)，2.76(m，1H)，2.18(m，2H)，1.87(m，2H)，1.37(m，4H)；EI-MS m/z：521(M)⁺；HR-EIMS理论值C₂₂H₂₂N₅OCl₂Br：521.0385，实际值：521.0388.分析HPLC t_R＝29.56min，94.27％(A)，t_R＝23.65min，95.94％(B)。
5-溴-8-羟基-1，6-二氮杂萘-7-羧酸(11)

将化合物7-1(150mg，0.735mmol)溶解在4.5mL甲醇和2.2mL 1NLiOH溶液中，加热回流5h。冷却至室温后滴加2.1mL 1N HCl溶液调节pH至3左右，旋蒸掉大部分甲醇，加稀的NaHCO₃溶液调节pH至5，过滤，烘干，得固体化合物11(116mg，81％)。¹H NMR(300MHz，CD₃OD)：δ9.21(s，1H)，8.57(d，1H，J＝7.8Hz)，7.97(s，1H).EI-MS m/z：269(M)⁺。
N-苯基-5-溴-8-羟基-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S26-1)

0度下，将三光气(150mg，0.735mmol)加入到化合物11(0.234mmol，45mg)，DIPEA(0.398mmol，160μL)的DMF溶液中。搅拌1h后，常温下加过量的苯胺，搅拌16个小时后，加入50mL饱和食盐水和二氯甲烷，有机相用5×50mL饱和水食盐水洗。无水硫酸钠干燥，过滤，旋干得粗品化合物S26-1，直接用于下步反应。
甲苯-4-磺酸5-溴-7-苯基氨基甲酰-1，6-二氮杂萘-8-羧酸酯(S26-2)

化合物S26-2的制备方法与化合物9-1的制备方法类似，除了用化合物S26-1代替化合物8-1。白色固体，产率：85-95％。¹H NMR(CDCl₃)：δ9.36(s，1H)，9.14(dd，1H，J＝1.5，4.2Hz)，8.59(dd，1H，J＝1.8，8.4Hz)，7.88(d，2H，J＝8.1Hz)，7.73(dd，1H，J＝4.2，8.4Hz)，7.63(d，2H，J＝8.1Hz)，7.34(m，4H)，7.13(m，1H)，2.35(s，3H)。
8-((1r，4r)-4-氨基环己氨基)-N-苯基-5-溴-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S26)

化合物S26的制备方法与化合物S15的制备方法类似，除了用化合物S26-2代替化合物9-1。黄绿色固体，产率：75-85％。熔点：208-210℃；¹H NMR(300MHz，CD₃OD)：δ10.12(s，1H)，9.02(d，1H，J＝4.2Hz)，8.55(d，1H，J＝8.7Hz)，7.77(dd，1H，J＝4.2，8.7Hz)，7.71(m，2H)，7.31(m，2H)，7.14(m，1H)，4.98(m，1H)，3.18(m，1H)，2.33(m，2H)，2.11(m，2H)，1.53(m，4H)；EI-MSm/z：471(M)⁺，473(M+2)⁺；分析HPLC t_R＝15.07min，97.83％(A)，t_R＝9.25min，94.67％(B)。
甲苯-4-磺酸5-溴-7-甲氧甲酰-1，6-二氮杂萘-8-羧酸酯(12)

化合物12的制备方法与化合物9-1的制备方法类似，除了用7-1代替化合物8-1。白色固体，产率：85-95％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ9.06(dd，1H，J＝1.5，4.2Hz)，8.60(dd，1H，J＝1.5，8.7Hz)，7.86(d，2H，J＝8.4Hz)，7.72(dd，1H，J＝4.2，8.4Hz)，7.34(d，2H，J＝8.4Hz)，3.83(s，3H)，2.47(s，3H)；EI-MS m/z：436(M)⁺。
8-(4-氟苄基氨基)-5-溴-1，6-二氮杂萘-7-羧酸甲酯(13)

化合物13的制备方法与化合物S15的制备方法类似，除了用对氟苄胺代替反式1，4-环己二胺。浅绿色固体，产率：85-95％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ9.15(m，1H)，8.93(dd，1H，J＝1.5，4.2Hz)，8.48(dd，1H，J＝1.8，8.4Hz)，7.64(dd，1H，J＝4.2，8.4Hz)，7.37-7.32(m，2H)，7.02(m，2H)，5.30(d，2H，J＝6.0Hz)，3.97(s，3H)。
8-(4-氟苄基氨基)-5-溴-1，6-二氮杂萘-7-羧酸(14)

化合物14的制备方法与化合物11的制备方法类似，除了用化合物13代替化合物7-1。浅绿色固体，产率：85-95％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ9.37(m，1H)，8.96(dd，1H，J＝1.5，4.2Hz)，8.48(dd，1H，J＝1.8，8.4Hz)，7.67(dd，1H，J＝4.5，8.4Hz)，7.35(m，2H)，6.99(m，2H)，5.42(d，2H，J＝5.7Hz)；
化合物15

将EDCI(40mg，0.2mmol)加入到化合物14(37.6mg，0.1mmol)，单Boc保护的反式1，4-环己二胺(33.6mg，0.15mmol)，HOBT(27mg，0.2mmol)和DIPEA(26mg，0.2mmol)的15mL无水二氯甲烷中，常温下搅拌3h。用15mL饱和NaHCO₃溶液，饱和氯化铵溶液，饱和食盐水依次洗涤，无水Na₂SO₄干燥，浓缩。柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝4∶1)纯化，得浅绿色粉末化合物15(50mg，95％)。熔点：189-191℃；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ8.90(dd，1H，J＝1.5，3.9Hz)，8.42(dd，1H，J＝1.5，8.4Hz)，7.81(m，1H)，7.57(dd，1H，J＝4.2，8.4Hz)，7.37(m，2H)，6.97(m，2H)，5.33(s，2H)，4.40(m，1H)，3.80(m，1H)，3.48(m，2H)，2.06(m，4H)，1.45(s，9H)，1.36(m，4H)。
8-(4-氟苄胺基)-N-((1r，4r)-4-氨基环己基)-5-溴-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S27)

化合物S27由化合物15在TFA/DCM中脱Boc制得。黄绿色固体，产率：95％。熔点：210-213℃；¹H NMR(300MHz，d⁶-DMSO)：δ9.07(d，1H，J＝3Hz)，8.47(d，1H，J＝8.7Hz)，8.25(d，1H，J＝7.8Hz)，7.86(dd，1H，J＝4.2，8.4Hz)，7.40(m，2H)，7.15(m，2H)，5.26(s，2H)，3.72(m，2H)，2.99(m，2H)，2.73(m，1H)，1.93(m，4H)，1.48(m，4H)；EI-MS m/z：471(M)⁺，473(M+2)⁺；分析HPLC t_R＝26.14min，100％(A)，t_R＝29.26min，100％(B)。
N-(4-氟-苄基)-5-碘-8-羟基-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S28-1)

化合物S28-1的制备方法与化合物7-1的制备方法类似，除了用化合物S3-1代替化合物6，用NIS代替NBS。黄色固体。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ13.27(s，1H)，9.14(dd，J＝1.8，4.2Hz，1H)，8.36(dd，J＝1.5，8.4Hz，1H)，8.20(m，1H)，7.71(dd，J＝4.5，8.4Hz，1H)，7.39(m，2H)，7.05(m，2H)，4.67(d，J＝6.3Hz，2H).EI-MS m/z：423(M)⁺。
甲苯-4-磺酸5-碘-7-(4-氟-苄基氨基甲酰)-1，6-二氮杂萘-8-羧酸酯(S28-2)

化合物S28-2的制备方法与化合物9-1的制备方法类似，除了用化合物S28-1代替化合物8-1。白色固体。¹H NMR(CDCl₃)：δ8.09(dd，1H，J＝1.5，4.5Hz)，8.38(dd，1H，J＝1.5，8.4Hz)，7.97(m，1H)，7.92(d，2H，J＝8.1Hz)，7.65(dd，1H，J＝4.2，8.4Hz)，7.37(m，2H)，7.32(d，2H，J＝8.1Hz)，7.04(m，2H)，4.61(d，J＝6.0Hz，2H)，2.46(s，3H)。
8-((1r，4r)-4-氨基环己氨基)-N-(4-氟苄基)-5-碘-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S28-3)

化合物S28-3的制备方法与化合物S15的制备方法类似，除了用化合物S28-2代替化合物9-1。黄绿色固体，产率：75-85％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ9.65(d，1H，J＝6.0Hz)，8.86(dd，1H，J＝1.2，3.3Hz)，8.32(m，1H)，8.23(dd，1H，J＝1.2，6.3Hz)，7.56(dd，1H，J＝3.3，6.3Hz)，7.34(m，2H)，7.04(m，2H)，4.93(m，1H)，4.60(d，2H，J＝4.8Hz)，4.38(m，1H)，3.49(m，1H)，2.18(m，2H)，2.06(m，2H)，1.45(s，9H)，1.29(m，4H)。
化合物S28-4

将化合物S28-3(10mg，0.016mmol)，丙炔酸甲酯(2.7mg，0.032mmol)，氯化钯(1mg，0.05mmol)，三苯基膦(2.6mg，0.01mmol)，碘化亚铜(2.0mg，0.01mmol)，和碳酸钾(4mg，0.03mmol)溶于3mL THF中，氮气保护，加热回流14小时。反应体系冷却，旋干THF，加入20mL二氯甲烷，饱和食盐水洗两次，有机相用无水硫酸钠干燥。硅胶柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1)得到黄绿色固体化合物S28-4(6.0mg，65％)。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ10.47(m，1H)，8.91(dd，1H，J＝1.8，4.2Hz)，8.57(m，1H)，8.51(dd，1H，J＝1.5，8.7Hz)，7.58(dd，1H，J＝4.5，8.4Hz)，7.35(m，2H)，7.06(m，2H)，5.14(m，1H)，4.59(d，2H，J＝6.0Hz)，4.39(m，1H)，3.87(s，3H)，3.50(m，1H)，2.23(m，2H)，2.06(m，2H)，1.43(s，9H)，1.35(m，4H)；EI-MS m/z：575(M)⁺。
3-{5-[8-((1r，4r)-4-氨基环己氨基)-7-(4-氟苄基氨基甲酰)-1，6-二氮杂萘基]}丙炔酸甲酯(S28)

化合物S28由化合物S28-4在TFA/DCM中脱Boc得到。黄绿色固体，产率：95％。熔点：116-118℃；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ10.82(m，1H)，9.67(dd，1H，J＝1.8，8.7Hz)，8.89(dd，1H，J＝1.8，3.9Hz)，8.65(m，1H)，7.59(dd，1H，J＝4.2，8.7Hz)，7.42(m，2H)，7.02(m，2H)，5.20(m，1H)，4.61(d，2H，J＝6.3Hz)，3.92(s，3H)，2.68(m，1H)，2.25(m，2H)，1.97(m，2H)，1.42(m，4H)；EI-MS m/z：589(M+CF₃COOH)⁺；分析HPLC t_R＝22.23min，96.12％(A)，t_R＝22.10min，92.83％(B)。
N-(4-氟苄基)-5-溴-8-(4-(异丁酰胺)哌啶-1-基)-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S29)

化合物S29的制备方法与化合物S15的制备方法类似，除了用4-(异丁酰胺)哌啶代替反式1，4-环己二胺。黄绿色固体，产率：75-85％。熔点：200-202℃；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ9.05(dd，1H，J＝1.8，4.2Hz)，8.63(m，1H)，8.52(dd，1H，J＝1.8，8.4Hz)，7.62(dd，1H，J＝4.2，8.4Hz)，7.39(m，2H)，7.07(m，2H)，5.33(m，1H)，4.66(d，2H，J＝6.0Hz)，4.09(m，1H)，3.63(m，2H)，3.44(m，2H)，1.98(m，4H)，1.22(d，2H，J＝3.9Hz)；EI-MS m/z：527(M)⁺，529(M+2)⁺；分析HPLC t_R＝4.62min，99.41％(A)，t_R＝19.22min，92.63％(B)。
叔丁基(1r，4r)-4-(7-(甲氧碳酰基)-5-溴-1，6-二氮杂萘-8-氨基)环己氨基甲酸酯(S30-1)

化合物S30-1的制备方法与化合物S15的制备方法类似，除了用K₂CO₃代替三乙胺。黄绿色固体，产率：75-85％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ8.95(dd，1H，J＝1.5，4.2Hz)，8.88(d，1H，J＝7.5Hz)，8.47(dd，1H，J＝1.5，8.4Hz)，7.64(dd，1H，J＝4.2，8.4Hz)，4.92(m，1H)，4.42(m，1H)，3.97(s，3H)，3.47(m，1H)，2.20(m，2H)，2.05(m，2H)，1.44(s，9H)，1.43-1.23(m，4H)；EI-MS m/z：478(M)⁺，480(M+2)⁺。
5-溴-8-((1r，4r)-4-叔丁氧羰基氨基环己氨基)-1，6-二氮杂萘-7-羧酸(S30-2)

化合物S30-2由化合物S30-1在1N NaOH溶液/THF中，60度下，10h水解制得，黄绿色固体，产率：75-85％。熔点：122-126℃；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ8.96(dd，1H，J＝1.5，4.2Hz)，8.88(d，1H，J＝7.5Hz)，8.45(dd，1H，J＝1.5，8.4Hz)，7.64(dd，1H，J＝4.2，8.4Hz)，4.96(m，1H)，4.41(m，1H)，3.47(m，1H)，2.21(m，2H)，2.08(m，2H)，1.44(s，9H)，1.43-1.23(m，4H)；EI-MSm/z：464(M)⁺，466(M+2)⁺。
化合物S30-3

化合物S30-3的制备方法与化合物15的制备方法类似，除了用化合物S30-2代替化合物14。黄绿色固体，产率：87％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ8.93(dd，J＝1.5，4.2Hz，1H)，8.68(dd，J＝1.5，4.2Hz，1H)，8.43(dd，J＝1.5，8.4Hz，1H)，8.37(d，J＝8.4Hz，1H)，7.61(dd，J＝4.5，8.4Hz，1H)，7.37(dd，J＝4.5，8.4Hz，1H)，6.70(m，1H)，5.61(m，1H)，5.18(m，1H)，4.93(m，1H)，4.69(m，1H)，3.87(m，1H)，3.54(m，1H)，2.87(m，2H)，2.37(m，5H)，2.18(m，2H)，2.06(m，5H)，1.46(s，9H)，1.37(m，2H)；EI-MS m/z：675(M)⁺，677(M+2)⁺。
(8-((1r，4r)-4-氨基环己氨基)-5-溴-1，6-二氮杂萘-7-基)((1S，3s，5R)-3-(3H-[1，2，3]三氮唑[4，5-b]吡啶-3-基)-8-氮杂-二环[3.2.1]辛烷-8-基)甲基酮(S30)

化合物S30由化合物S30-3在TFA/DCM中脱Boc制得。黄绿色固体，产率：75-85％。熔点：135-138℃；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ8.91(d，J＝3.9Hz，1H)，8.68(d，J＝3.9Hz，1H)，8.43(d，J＝7.5Hz，1H)，8.38(d，J＝8.1Hz，1H)，7.61(dd，J＝4.2，8.7Hz，1H)，7.36(dd，J＝4.5，8.1Hz，1H)，6.81(d，J＝9.3Hz，1H)，5.60(m，1H)，5.20(m，1H)，4.69(m，1H)，3.98(brs，1H)，2.86(m，1H)，2.78(m，1H)，2.23-1.93(m，10H)，1.43-1.33(m，4H)；EI-MS m/z：575(M)⁺，577(M+2)⁺；分析HPLC t_R＝7.90min，98.78％(A)，t_R＝10.90min，96.77％(B)。
8-((1r，4r)-4-氨基环己氨基)-N-(3，4-二氯苄基)-5-溴-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S31)

化合物S31的制备方法与化合物S25的制备方法类似。浅黄色固体，产率：75-85％。熔点：141-143℃；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ9.56(d，1H，J＝8.1Hz)，8.94(d，1H，J＝3.9Hz)，8.42-8.35(m，3H)，7.59(dd，1H，J＝4.2，8.7Hz)，7.44-7.38(m，2H)，7.20(m，1H)，4.96(m，1H)，4.57(d，2H，J＝6.0Hz)，2.76(m，1H)，2.18(m，2H)，1.91(m，2H)，1.37(m，4H)；EI-MS m/z：521(M)⁺。
8-((1r，4r)-4-氨基环己氨基)-N-(3-三氟甲基苄基)-5-溴-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S32)

与化合物S25的制备方法类似。黄绿色固体，产率：75-85％。熔点：94-96℃；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ9.59(d，1H，J＝8.2Hz)，8.59(s，1H)，8.42(m，2H)，7.61-7.44(m，5H)，4.97(m，1H)，4.69(d，2H，J＝6.0Hz)，2.78(m，1H)，2.17(m，2H)，2.00-1.83(m，4H)，1.43-1.25(m，4H)；EI-MS m/z：521(M)⁺，523(M+2)⁺。
8-((1r，4r)-4-氨基环己氨基)-N-(3-氯-4-甲氧苄基)-5-溴-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S33)

与化合物S25的制备方法类似。浅黄色固体，产率：68％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ：9.61(d，2H)，8.94(d，1H，J＝6Hz)，8.41(d，1H，J＝8.4Hz)，8.28(brs，1H)，7.59(q，1H，J＝6Hz，8.4Hz)，7.22-7.39(m，2H)，6.91(d，1H，J＝8.4Hz)，4.98(m，1H)，4.54(d，2H)，3.89(s，3H)，3.6(s，1H)，2.82(m，1H)，2.19(d，2H，J＝9.9Hz)，1.95(d，2H，J＝11.7Hz)，1.38(m，4H)；MS-EI m/z：517(calcd：518.83)。
8-((1r，4r)-4-氨基环己氨基)-N-(4-二甲胺基苄基)-5-溴-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S34)

与化合物S25的制备方法类似。浅黄色固体，产率：70％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ：9.7(d，2H)，8.93(d，1H，J＝2.7Hz)，8.38(d，1H，J＝3.9Hz)，8.19(brs，1H)，7.54(q，1H，J＝2.7Hz，3.9Hz)，7.24(d，2H，J＝7.8Hz)，6.72(d，2H，J＝8.7Hz)，45.01(m，1H)，4.5(d，2H)，3.23(m，1H)，2.92(s，6H)，2.29(m，4H)，1.76(d，2H，J＝11.7Hz)，1.43(d，2H，J＝13.2Hz)；MS-EI m/z：496(calcd：497.43)。
8-((1r，4r)-4-氨基环己氨基)-N-(4-苄氧基苄基)-5-溴-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S35)

与化合物S25的制备方法类似。浅黄色固体，产率：85％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ：9.66(d，2H)，8.94(d，1H，J＝4.2Hz)，8.41(d，1H，J＝10.2Hz)，8.25(brs，1H)，7.58(q，1H，J＝4.2Hz，10.2Hz)，7.3-7.45(m，9H)，6.96(d，2H，J＝8.7Hz)，5.06(s，1H)，4.94(m，1H)，4.56(d，2H)，2.76(m，1H)，2.17(d，2H，J＝12.3Hz)，1.9(d，2H，J＝13.5Hz)，1.39(m，4H)；MS-EI m/z：559(calcd：560.48)。
8-((1r，4r)-4-氨基环己氨基)-N-(4-氰基苄基)-5-溴-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S36)

与化合物S25的制备方法类似。浅黄色固体，产率：81％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ9.10(d，1H，J＝8.2Hz)，8.76(s，1H)，8.23(d，1H)，7.46(m，1H)，7.39(d，2H)，7.24(d，2H)，6.80(s，2H)，4.22(m，2H)，3.15(m，1H)，2.0(m，2H)，2.00-1.83(m，4H)，1.43-1.25(m，4H)；EI-MS m/z：478(M)⁺，480(M+2)⁺。
8-((1r，4r)-4-氨基环己氨基)-N-(4-环己基氧苄基)-5-溴-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S37)

与化合物S25的制备方法类似。浅黄色固体，产率：72％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ：9.69(d，2H)，8.95(d，1H，J＝4.5Hz)，8.41(d，1H，J＝8.4Hz)，8.25(brs，1H)，7.58(q，1H，J＝4.5Hz，8.4Hz)，7.27(d，2H，J＝10.8Hz)，6.88(d，2H，J＝8.7Hz)，5.01(m，1H)，4.55(d，2H)，4.22(m，1H)，3.56(m，1H)，3.08(m，1H)，2.27(d，2H，J＝13.5Hz)，2.16(d，2H，J＝13.9Hz)，1.97(m，4H)，1.78(m，4H)，1.31-1.49(m，6H)；EI-MS m/z：551(calcd：552.51)。
8-((1r，4r)-4-氨基环己氨基)-N-(4-(2-吗啡啉基乙氧)苄基)-5-溴-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S38)

与化合物S25的制备方法类似。浅黄色固体，产率：70％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ9.25(d，1H)，8.76(s，1H)，8.32(d，1H)，7.46(m，1H)，6.95(d，2H)，6.65(d，2H)，4.22(s，2H)，4.06(t，2H)，3.52(t，4H)，3.15(m，1H)，2.69(t，2H)，2.37(t，4H)，2.0(s，2H)，2.00-1.83(m，4H)，1.43-1.25(m，4H)；EI-MSm/z：582(M)⁺，584(M+2)⁺。
8-((1r，4r)-4-氨基环己氨基)-N-(4-(2-哌嗪-1-基)乙氧)苄基)-5-溴-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S39)

与化合物S25的制备方法类似。浅黄色固体，产率：66％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ9.25(d，1H)，8.76(s，1H)，8.32(d，1H)，7.46(m，1H)，6.95(d，2H)，6.65(d，2H)，4.22(s，2H)，4.06(t，2H)，3.52(t，4H)，3.15(m，1H)，2.69(t，2H)，2.37(t，4H)，2.10(m，1H)，2.0(s，2H)，2.00-1.83(m，4H)，1.43-1.25(m，4H)；EI-MS m/z：581(M)⁺(计算值：581.2)。
8-((1r，4r)-4-氨基环己氨基)-N-(4-(叔丁基二甲硅氧)苄基)-5-溴-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S40)

与化合物S25的制备方法类似。浅黄色固体，产率：78％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ：9.66(d，1H)，8.94(d，1H，J＝4.2Hz)，8.41(d，1H，J＝10.2Hz)，8.24(brs，1H)，7.58(dd，1H，J＝4.2Hz，10.2Hz)，7.23(d，2H，J＝8.8Hz)，6.82(d，2H，J＝8.4Hz)，4.96(m，1H)，4.56(d，2H)，2.75(m，1H)，2.17(d，2H，J＝12.9Hz)，1.9(d，2H，J＝14.1Hz)，1.34(m，4H)，0.98(s，9H)，0.19(s，1H).EI-MS m/z：583(M)⁺(计算值：583.2)。
8-((1r，4r)-4-氨基环己氨基)-N-(4-(2-吗啡啉基-2-乙酰氧)苄基)-5-溴-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S41)

与化合物S25的制备方法类似。浅黄色固体，产率：68％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ：9.64(d，1H)，8.95(d，1H，J＝3.9Hz)，8.4(d，1H，J＝8.4Hz)，8.28(brs，1H)，7.57(dd，1H，J＝3.9Hz，8.4Hz)，7.31(d，2H，J＝8.7Hz)，6.93(d，2H，J＝8.4Hz)，5.0(m，1H)，4.69(s，2H)，4.56(d，2H)，3.56-3.66(m，8H)，3.22(m，1H)，2.28(m，4H)，1.71-1.82(m，2H)，1.4-1.47(m，2H)；MS-EI m/z：596(计算值：597.5).
8-((1r，4r)-4-氨基环己氨基)-N-(2，4-二甲氧苄基)-5-溴-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S42)

与化合物S25的制备方法类似。浅黄色固体，产率：78％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ：9.63(d，1H)，8.92(d，1H，J＝6Hz)，8.45(brs，1H)，8.39(d，1H，J＝6.9Hz)，7.56(dd，1H，J＝6Hz，6.9Hz)，7.25(d，1H，J＝9Hz)，6.49(d，1H，J＝2.1Hz)，6.45(dd，1H，J＝9，2.1Hz)，4.93(m，1H)，4.55(d，2H)，3.9(s，3H)，3.8(s，3H)，2.75(m，1H)，2.15(d，2H，J＝12Hz)，1.89(d，2H，J＝12.6Hz)，1.37(m，4H)；MS-EI m/z：513(M-1)^-(MW计算值：514.41)。
8-((1r，4r)-4-氨基环己氨基)-N-(3，4-二甲氧苄基)-5-溴-1，6-二氮杂萘-7-羧酸胺(S43)

与化合物S25的制备方法类似。浅黄色固体，产率：78％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ：9.64(d，1H)，8.95(d，1H，J＝4.2Hz)，8.42(d，1H，J＝8.4Hz)，8.26(br s，1H)，7.59(dd，1H，J＝4.2Hz，8.4Hz)，6.84-6.95(m，3H)，4.97(m，1H)，4.57(d，2H)，3.89(s，3H)，3.88(s，3H)，2.79(m，1H)，2.18(d，2H，J＝12.6Hz)，1.93(d，2H，J＝12Hz)，1.3-1.45(m，4H)；MS-EI m/z：513(M-1)^-(MW计算值：514.41)。