一种稳定的甲基纳曲酮注射液及其制备方法 技术领域：
本发明涉及一种稳定的药物注射液及其制备方法，具体涉及一种甲基纳曲酮或其可药用盐，并以柠檬酸缓冲盐和选自硫脲、半胱氨酸、L-半胱氨酸、缬氨酸、L-缬氨酸、烟酰胺的一种或多种抗氧剂作为附加剂，尤其是溴化甲基纳曲酮成为有效成分的注射液。
背景技术：
溴化甲基纳曲酮(methylnaltrexone bromide)的化学结构式为：
化学名称是17-环丙甲基-4，5-环氧-3，14-二羟基-17-甲基-6-氧-，溴化物(5a)
溴化甲基纳曲酮为白色或类白色结晶性粉末，溶于水，无吸湿性，熔点为251℃，pH大约为4.6，辛醇/水分配系数(logP)为-1.12。
溴化甲基纳曲酮注射液为无色或几乎无色的澄明溶液。
溴化甲基纳曲酮是由Wyeth Pharmaceuticals公司和Progenics Pharmaceuticals，Inc.公司联合开发的外周阿片受体拮抗剂，FDA批准其注射液(规格：12mg/0.6ml)的商品名是RELISTOR，临床上主要用于治疗由阿片治疗引起的便秘。
WO02098422公开了一种用甲基纳曲酮治疗因阿片诱导的免疫抑制疾病(如HIV)的方法，在该专利的说明书中提到甲基纳曲酮的注射剂，其活性物质用量为0.05-0.5mg/kg，缓冲液为乙酸缓冲液(1-2％W/V)、柠檬酸缓冲液(1-3％W/V)，防腐剂选自三氯丁醇、尼泊金甲等。
世界专利WO2008019115公开了甲基纳曲酮或其可药用盐的注射剂，包括钙盐和螯合剂作为稳定剂，也可用含钙盐的螯合剂作为稳定剂。该专利还公开了甲基纳曲酮注射液的制备方法：先制备含有甲基纳曲酮或其可药用盐、等渗调节剂和钙盐螯合剂的溶液；灭菌该溶液并分装至一个或多个密封容器内。
普罗热尼奇制药公司申请的中国专利CN1767831公开了包含甲基纳曲酮或其盐的溶液的药物制剂，主要特征在于经高压灭菌后或室温下放置6个月，甲基纳曲酮的降解浓度不超过2％。其从属权利要求分别限定该制剂含有螯合剂(EDTA等)，缓冲液(柠蒙酸等)、pH值为2-6、抗氧剂、等渗剂、低温防护剂(多元醇)或阿片物质，甲基纳曲酮浓度为0.1-100mg/ml。其中，抗氧剂选自抗坏血酸衍生物、丁羟基茴醚、丁羟甲苯、没食子酸烷基酯、焦亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、连二亚硫酸钠、巯基乙醇酸钠、甲醛次硫酸氢钠、生育酚及其衍生物、硫代甘油和亚硫酸钠。
本发明人在研制溴化甲基纳曲酮注射液过程中意外发现，在pH3～4范围内，以柠檬酸、柠檬酸三钠(或柠檬酸盐缓冲液)作为缓冲剂、以氯化钠作为等渗调节剂，以一种或多种选自硫脲、半胱氨酸、L-半胱氨酸、缬氨酸、L-缬氨酸、烟酰胺的物质作为抗氧剂，在没有螯合剂存在的情况下，制得的溴化甲基纳曲酮注射液的稳定性比按上市RELISTOR的处方制备的样品更好。并且我们通过药理试验证明该配方制得的注射液无溶血性、血管刺激性和过敏反应。由于溴化甲基纳曲酮化学结构式中含有酚羟基，容易被氧化，所以我们除了在处方中加入抗氧剂外，还在制备工艺中进行充氮保护，使其与氧气进一步隔离，此工艺不仅提高了本品的稳定性，还简单可行，易于工业化生产。
发明内容：
本发明的供了一种稳定的甲基纳曲酮注射液，含有甲基纳曲酮或其可药用盐和附加剂，其特征在于：附加剂包括(a)柠檬酸盐缓冲液，和(b)一种或多种抗氧剂。其中，所说的甲基纳曲酮的可药用盐为无机盐，如盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐以及其它有机酸盐，优选为氢溴酸盐，即溴化甲基纳曲酮。
本发明的甲基纳曲酮注射液，其中甲基纳曲酮的浓度为1.0～50.0mg/ml，优选为10～30mg/ml，更优选20mg/ml。
本发明的甲基纳曲酮注射液，其pH范围是3.0～4.0。
本发明的甲基纳曲酮注射液，其柠檬酸盐缓冲液的浓度范围为：0.5mg/ml～10mg/ml。
本发明的甲基纳曲酮注射液，其所述的抗氧剂选自下列试剂中的一种或多种：硫脲、半胱氮酸、L-半胱氨酸、缬氨酸、L-缬氨酸、烟酰胺，其浓度范围为：0.01～5mg/ml。
在一具体实施方案中，本发明的甲基纳曲酮注射液，含有甲基纳曲酮或其可药用盐，其浓度为1.0～50.0mg/ml，浓度为0.5mg/ml～10mg/ml的柠檬酸盐缓冲液，和一种或多种选自硫脲、半胱氨酸、L-半胱氨酸、缬氨酸、L-缬氨酸和烟酰胺一组的抗氧剂。其中甲基纳曲酮的浓度优选10-30mg/ml，更优选20mg/ml。在该实施方案中还进一步包括等渗剂氯化钠。该实施方案的注射液的PH为3.0-4.0。
在另一具体实施方案中，本发明的甲基纳曲酮注射液，含有甲基纳曲酮或其可药用盐，其浓度为1.0～50.0mg/ml，浓度为0.5mg/ml～10mg/ml的柠檬酸盐缓冲液，和一种或多种选自硫脲、半胱氨酸、L-半胱氨酸、缬氨酸、L-缬氨酸和烟酰胺一组的抗氧剂，其浓度范围为：0.01～5mg/ml，该注射液的PH为3.0～4.0。其中，甲基纳曲酮的浓度优选10-30mg/ml，更优选20mg/ml。PH可用酸或碱来调节，如盐酸、氢溴酸、柠檬酸或其缓冲液、氢氧化钠溶液等。在该实施方案中还进一步包括等渗剂氯化钠。
在又一具体实施方案中，本发明的甲基纳曲酮注射液，含有甲基纳曲酮或其可药用盐，其浓度为1.0～50.0mg/ml、优选10-30mg/ml，柠檬酸盐缓冲液，其浓度为0.5mg/ml～10mg/ml，一种或多种选自硫脲、半胱氨酸、L-半胱氨酸、缬氨酸、L-缬氨酸和烟酰胺一组的抗氧剂，其浓度为0.01～5mg/ml，和一种氯化钠的等渗剂，该注射液的PH为3.0～4.0。其中，甲基纳曲酮的浓度优选10-30mg/ml，更优选20mg/ml。PH可用酸或碱来调节，如盐酸、氢溴酸、柠檬酸或其缓冲液、氢氧化钠溶液等，优选盐酸或氢氧化钠溶液。
在再一具体实施方案中，本发明的甲基纳曲酮注射液，由甲基纳曲酮或其可药用盐，其浓度为1.0～50.0mg/ml、优选10-30mg/ml，柠檬酸盐缓冲液，其浓度为0.5mg/ml～10mg/ml，一种或多种选自硫脲、半胱氨酸、L-半胱氨酸、缬氨酸、L-缬氨酸和烟酰胺一组的抗氧剂，其浓度为0.01～5mg/ml，一种氯化钠的等渗剂和注射用水组成。其中，该注射液的PH为3.0～4.0，PH可用酸或碱来调节，如盐酸、氢溴酸、柠檬酸或其缓冲液、氢氧化钠溶液等，优选盐酸或氢氧化钠溶液；甲基纳曲酮地浓度更优选20mg/ml。
在上述所有具体实施方案中，所说的甲基纳曲酮的可药用盐为无机盐，如盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐，以及其它有机酸盐，优选为氢溴酸盐，即溴化甲基纳曲酮；氯化钠作为等渗调节剂，其浓度为范围为1mg/ml～20mg/ml，优选5mg/ml～10mg/ml。
在上述所有具体实施方案中，其中，柠檬酸盐缓冲液的浓度优选1mg/ml～5mg/ml(以柠檬酸和柠檬酸三钠重量之和计)。柠檬酸盐缓冲液可以通过柠檬酸和氢氧化钠反应制得；也可以通过柠檬酸钠和盐酸反应制得；还可以通过一定重量配比的柠檬酸和柠檬酸钠混合而得，其中，柠檬酸和柠檬酸钠的重量比范围为1∶10至10∶1，优选1∶1.5至1.5∶1，按浓度计，二者的浓度范围均可为0.5mg/ml～5mg/ml，优选1mg/ml～1.5mg/ml。柠檬酸盐缓冲液的制备可用缓冲液常规制备方法制备。
本发明还提供了一种稳定的溴化甲基纳曲酮注射液的制备方法，该制备方法是将甲基纳曲酮与氯化钠、抗氧剂和柠檬酸缓冲盐等注射液附加剂溶解于适量注射用水中，配制成溶液，除热原，必要时可用盐酸或氢氧化钠调节溶液pH值至3.0～4.0，精滤、灌装、充氮、封口、灭菌得成品。所得注射液为0.6ml含溴化甲基纳曲酮12mg。
具体的制备方法为：分别称取处方量的溴化甲基纳曲酮、氯化钠、选自硫脲、半胱氨酸、L-半胱氨酸、缬氨酸、L-缬氨酸和烟酰胺一组的抗氧剂、柠檬酸和柠檬酸三钠，用适量注射用水溶解，加入适量的针用活性炭，搅拌除热原，过滤脱炭，得到初滤液，测定pH值，必要时可用盐酸或氢氧化钠溶液调节溶液的pH至3.0～4.0，补加注射用水至配制量，所得溶液用混合纤维素酯微孔滤膜精滤，灌装，充氮，封口，灭菌即得成品。
在一具体实施方案中，本发明的种制备甲基纳曲酮注射液的方法包括以下过程：
a)称取溴化甲基纳曲酮、柠檬酸缓冲盐、一种或多种抗氧剂，用适量注射用水溶解；
b)在上步溶液中加入适量活性炭，搅拌除热原，过滤脱炭，得到滤液；
c)测定滤液的pH值，必要时用盐酸或氢氧化钠调节pH至3.0～4.0，加注射用水至配置量；
d)将上步所得溶液精滤，得滤液，灌于安瓿瓶或管制瓶中，充入无菌的氮气进行保护，封口；然后，
e)用流通蒸汽灭菌，得到溴化甲基纳曲酮注射液成品。
在上述方法中，所述的甲基纳曲酮注射液，包含甲基纳曲酮或其可药用盐和附加剂，其特征在于：附加剂包括(a)柠檬酸盐缓冲液，和(b)一种或多种抗氧剂，其中，甲基纳曲酮其可药用盐为氢溴酸盐，即溴化甲基纳曲酮。
在上述方法中，在步骤a)还可加入等渗调节剂氯化钠，抗氧剂选自硫脲、半胱氨酸、L-半胱氨酸、缬氨酸、L-缬氨酸和烟酰胺的一种或多种。
具体实施例
以下通过实施例进一步阐明本发明，但不限于实施例范围。
实施例1
溴化甲基纳曲酮注射液配方(处方)见表1。
表1溴化甲基纳曲酮注射液处方列表
处方123456(市售处方)溴化甲基纳曲酮0.72g0.48g0.48g0.48g0.24g0.48gNaCl0.168g0.12g0.12g0.12g0.12g0.156g柠檬酸0.036g0.03g0.03g0.03g0.03g-柠檬酸三钠0.026g0.024g0.024g0.024g0.024g-硫脲0.020g0.012g----L-半胱氨酸--0.12g---L-颉氨酸---0.072g--烟酰胺----0.024g- 甘氨酸-----0.0072gEDTA-2Na-----0.0096g注射用水24ml24ml24ml24ml24ml24mlpH值3.203.593.483.573.453.36
制备工艺：
1、称取处方量的原辅料于烧杯中，加入处方量的注射用水，搅拌溶解。
2、加入0.05％的针用活性炭搅拌30min；
3、过滤，测定pH值，必要时用HCl或NaOH调节pH值；
4、用0.22u的混合纤维素酯微孔滤膜精滤；
5、分装于3ml冻干瓶中，每瓶0.6ml；
6、充氮，压塞；
7、用流通蒸汽灭菌，得到溴化甲基纳曲酮注射液。
实施例2
稳定性试验：将样品进行影响因素试验，测第10天的有关物质。
将上述6个处方制得的溴化甲基纳曲酮注射液的样品，分别置于光照、40℃和60℃影响因素试验箱内考察10天，测定其有关物质变化情况，并与0天进行对比，具体数据见表2。
表2 10天影响因素试验结果
结论：采用本发明所制备的注射液样品与国外市售产品处方的样品在相同条件下进行稳定性试验，结果显示本发明的溴化甲基纳曲酮注射液的稳定性比按国外市售处方的样品的稳定性好，且本发明的处方中没有加入螯合剂。