显示亲神经活性、神经调节剂活性、脑血管活性和抗卒中活性的药物制剂.pdf

本发明涉及药物，特别涉及显示亲神经活性和脑血管活性的药理学和药物制剂。本发明的新颖性在于N-氨甲酰基-甲基-4-苯基-2-吡咯烷酮药剂，其注射到有机体内以动物百分之百存活率、消除不同病因的脑卒中的神经综合征的发展、使脑的受损面积和它所致的破坏性发展局部化的形式而显示普遍的显著反应。已证实的是本发明的药剂能显示普遍的亲神经(神经调节剂)活性并产生神经保护性脑血管活性。

权利要求书
1、  N-氨甲酰基-甲基-4-苯基-2-吡咯烷酮(Phenotropil)作为显示亲神经—神经调节剂活性、脑血管活性和抗卒中活性的药剂的用途。

说明书显示亲神经活性、神经调节剂活性、脑血管活性和抗卒中活性的药物制剂
技术领域
本发明涉及医药领域，特别是药理学领域，并涉及这样的药物制备物，其对中枢神经系统(CNS)和脑血管功能状况显示复杂的多元活性。
现有技术
大量涉及不同药理学基团的亲神经和脑血管药物制剂被用于以不同病理的卒中(stroke)为主的脑血管疾病CNS病理的复杂疗法中。每一种包括在综合治疗当中的不同药理学方向的制备物均意在特异性消除精神神经综合征和疾病的症状群中的某些或其他症状的强度。多药疗法具有一系列显著的缺点，这些缺点与制定合理的给药剂量方案以及同时应用多种药物制剂的方案的复杂性相关，又与预测它们的功效和耐受量以及可能的协同副作用相关。
发明内容
本发明的目的是从神经精神药理学角度开发通用的药物制剂。
如果这个目的可以达到，将可达到以下的技术效果：药物制剂在单一治疗时能够对脑神经和脑血管疾病中的中枢神经系统(CNS)和脑血管功能状态产生复杂效果，以及具有阻止中枢神经系统(CNS)疾病病理学发展的治疗和预防特性。
上述技术效果得以实现依赖于N-氨甲酰基-甲基-4-苯基-2-吡咯烷酮(Phenotropil)作为显示亲神经—神经调节剂活性、脑血管活性和抗卒中活性的药剂的应用，已知N-氨甲酰基-甲基-4-苯基-2-吡咯烷酮用作抗高血压和抗缺血药剂(在缺血性心脏病(IHD)中)(USSR发明人证书No.797219，A61K21/40，3C07D207/26；RF专利No.2183117，C1，A61K31/40；欧亚专利No.002380，B1，A61K31/4015)；具有益智活性的药剂和药物组合物(RF专利No.2050851，C1，A61K31/40；RF专利No.2240783，C1，A61K9/20，31/40，A61P25/28)；和用作具有抗抑郁活性的药剂(RF专利No.2232578，C1，A61K31/41，52，A61P25/24)。
该药剂对于急性脑血管疾病病理的效果没有被记载。提议使用N-氨甲酰基-甲基-4-苯基-2-吡咯烷酮(Phenotropil)作为亲神经性神经调节剂型脑血管活性抗卒中治疗剂，与应用涉及不同药理学基团的药剂相比，它具有很多优点，也就是：显著的多重疗效；服用简单且可以任意药物形式应用；相对低毒性(LD30＝800mg/Kg)；没有显著的负作用；依疗程使用没有成瘾性、依赖性或耐药性，该药剂在有机体内不发生代谢并且以原型排出体外。
作为评估Phenotropil所述效果的模型，选择了脑血管病理的最严重的和最常见的形式—卒中，对该疾病迄今为止仍没有疗效显著的治疗方法。在发达国家，脑血管疾病在引起死亡的疾病中排在第三位，并且通常较其他疾病更容易致残。与大多数其他疾病相比，大量劳动力人口数量的损失造成了更严重的经济负担(参见：Ye.I.Gusev，V.I.Skvortsova等，2003；N.V.Vereschagin，N.V.Varakin，2001；T.R.Harrison等，1997)。在卒中过程中存在两个主要的发展方向：溶栓、神经调节和神经保护。溶栓的效果已经被多数临床研究证实；对于显示神经调节剂活性和神经保护活性的药学药剂，目前正在积极地寻找。
研究按照RF卫生部在2000年出版的新药理学基础中关于实验(临床前期)研究手册中的方法执行。研究得出的结果已经进行了统计学分析。每组的均值和标准差都已经被计算。实验组与对照组之间差异的统计学准确性已经通过Studentt检验、percent-square检验和Mann-Whitney检验评估。组间差异准确性被认定为p<0.05。(参见：V.P.Borovkov，2001；S.Glanz，1999)。
实施例1.利用出血性卒中模型(大脑内创伤后血肿)研究Phenotropil的抗卒中活性
实验使用体重从200克到250克的白色远系繁殖的雄性大鼠。大鼠饲养在人工饲养环境，自由进食和水，在昼夜自然交替环境下。为了在用水合氯醛(400mg/Kg)麻醉的大鼠中产生出血性卒中(HS)，对大鼠进行脑功能区定位颅骨切开术(stereotaxic craniotomy)，之后用mandarin刀破坏内囊区域中的脑组织，从大鼠舌下取的血(0.02至0.03mL)被注射到破坏区域。如此，局部自发出血性双侧卒中在内囊区域产生(直径2mm，深度3mm)并且不损害上述局部的大脑结构和新皮层。假手术(falsely operated)的动物和喂食生理盐水的HS动物作为对照组动物。术后5小时Phenotropil以100mg/Kg剂量应用特殊的管子胃内给药，并且之后在每日的该时间±3分钟给药、持续7天。
手术期间和术后立即有40％大鼠死亡。观察HS后一小时内存活的大鼠14天。Phenotropil的影响用动物的存活率、在改良I.V.Gannushkina(1977)和Rotarod检验中记为McGrow卒中指标评分的神经缺陷水平、在单杠上引体向上(chinning up)测试中的肌张力(muscular tonus)的保持、在旷场试验中的定向和探查行为来评估。认知功能的研究通过被动回避反应的条件反射(CRPA)在标准个体(standard unit)上进行。CRPA重复性测试(为维持记忆曲线(memory trail))在训练后24小时内以及术后第3、7和14天进行。当评估洞穴反射(burrow-reflex)维持时，记录首次进入暗室的潜伏时间。
术后第一天在几乎所有HS动物中发现生理盐水背景下的神经学异常(90％到100％)，出现行为软弱无力、动作迟缓，四肢虚弱，而在假手术的大鼠中出现上述症状的只占30％到40％(见表1)。Phenotropil背景的HS病例中，神经学异常比例为40％到50％并且与假手术组大鼠差异不明显。神经学异常表现为环形场地运动(manege movement)，并且四肢麻痹在接受Phenotropil治疗的卒中的动物中缺失，而在HS+生理盐水组中，出现深度神经学异常的动物的比例分别为40％、30％和30％。
因此，在HS急性期，Phenotropil表现出明显的亲神经活性和脑血管活性并减少了神经状态的异常。
HS大鼠肌张力的记录显示在卒中后第三天肌张力的减弱见于平均40％到50％的大鼠，和在第七天和第十四天见于38％到36％大鼠(见表2)。接受Phenotropil的大鼠中在42％到33％的动物中观察到肌张力减弱。在Phenotropil引入七天后发现25％的大鼠肌张力减弱，并且第十四天时这个数字降到16％，与卒中组相比这个数字是统计学上可靠的(见表2)。
HS大鼠运动协调能力异常动力学的研究显示，在第一天到第三天，运动协调异常见于48％到50％的动物，在第七天到第十四天见于38％到45％的存活动物(见表3)。Phenotropil剂量100mg/Kg时能降低大鼠运动协调异常。在卒中后第七天到第十四天获得显著的和统计学上可靠的结果(见表3)。
啮齿类动物的洞穴反射是对有限阴暗空间的天生反射。在术后第一天，全部动物维持洞穴反射，但是在HS组和一次应用Phenotropil的背景下出现反射的潜伏时间延长了(见表4)。
研究中发现在整个实验中一直使用生理盐水(原始(intact)动物)的对照组大鼠，当CRPA在训练(在暗室黑暗区域的痛觉苦刺激)后24小时重复时，80％的动物记住了目前的卒中并且在整个观察时间内不进入“危险”的暗室。在训练后一天，对照正常大鼠和假手术大鼠很好的记起了在暗室中目前的卒中，并且70％到80％的动物没有进入危险区域。其他大鼠进入黑暗区域的潜伏期很长(见表5a)。出血性卒中(HS)大鼠进入暗室的潜伏时间在训练一天后确实减少。仅有25％的动物没有进入暗室，也就是，它们回忆起目前的卒中，而75％大鼠的记忆被干扰(见表5a)。
Phenotropil在100mg/Kg剂量下，在术后5小时内一次给药(训练后一天内重复进行CRPA)，使得获得记忆的动物数量增加到40％(HS动物—25％)，并延长了进入黑暗危险区域的潜伏时间。然而，Phenotropil一次给药后的该有益效果与原始动物中的该效应相比在统计学上是不可靠的，但是与HS组大鼠比较，它使得进入暗室的潜伏时间延长48％并且使得一天后保持记忆的动物的数量增加60％。
对记忆受损的HS动物进行手术后3天，上述的数字在同样水平(见表5a)。在注射3次Phenotropil后，发现进入暗室的潜伏时间延长，不进入暗室的动物的数量也增加了，但是即使Phenotropil的这些效果与假手术组相比也是统计学上不可靠的(见表5a)，但是与使用生理盐水的HS组相比是有显著区别的和可靠的。
在训练后的7和14天内，原始动物和假手术动物回忆起了不良条件并执行CRPA(见表5b)。与它们相比，在HS和训练后第7到14天，动物对于暗室中疼痛刺激的记忆被有效地干预。而且，记忆受损的情况与术后1和3天内的数字相比更为显著。因此，在7天内仅有16％的动物回忆起了不良刺激，而其他大鼠已经在28秒之内进入危险黑暗区域。在14天内仅有9％保持CRPA(见表5b)。
Phenotropil以100mg/Kg剂量连续7天被注射到大鼠体内，在HS术后第7天和第14天在卒中后期对记忆异常进行重建。发现在该药剂的影响下回忆起不良条件的大鼠在统计学上有明显可靠的增加(升到40％)(对HS大鼠—9％)。进入危险暗室的潜伏时间与HS-大鼠的相比明显增加3倍(见表5b)。
因此，在二次注射后Phenotropil能够重建在被动避免条件反射模型中的出血性卒中所干扰的记忆。
旷场法条件中定位和探查行为的研究显示，HS大鼠中在术后第一天运动活性和探查行为的总指标有显著的下降(几乎2倍)。类似的大鼠标记行为也在HS后第14天被观察到，尽管动物稍微活跃一些(见表6)。当HS后3天Phenotropil的效果被记录，它能增加行为总指标至原始动物和假手术组动物的行为指标水平(见表6)。在注射后7天记录Phenotropil的效果，运动行为的总指标与HS组相比增加了2.7倍(见表6)。在术后14天Phenotropil的促进运动行为的效果被维持。
在表7中可以看出在术后14天中假手术组大鼠有一只动物死亡。HS+生理盐水组在第一天23％的动物死亡，到第14天这个系数达到57％。Phenotropil以100mg/Kg剂量，一天注射一次注射七天，可以完全阻止动物死亡。
研究结果显示，与假手术组动物相比，出血性卒中(大脑内外伤后血肿)大鼠中发现了以下情况：明显的神经损伤、运动协调能力的损伤、训练过程和记忆的减弱，和动物死亡率的增加。而且，直到观察的第14天加重的病理症候学依然显著。
Phenotropil当在术后5小时内以100mg/Kg剂量注射到动物体内，之后每天一次、持续7天，结果是卒中和卒中后的异常得到明显改善。卒中后一天内该药剂改善了神经学异常的McGrow评分，当在卒中后第7天和第14天的过程中使用时，它增加了肌张力并且改善了运动协调性。当第二次使用Phenotropil时，重建被卒中干扰的记忆，在卒中后第7天和第14天改善被动避免的条件反射的重复。Phenotropil的最显著的效果是它完全阻止出血性卒中动物死亡的能力。
因此，持续注射Phenotropil(100mg/Kg，体内)7天，对出血性卒中(大脑内外伤后血肿)大鼠模型显示显著的抗卒中活性，表现在改善神经学状况、一般行为、认知功能，且最重要的是防止动物死亡。
实施例2.Phenotropil对急性缺血性卒中模型效果的评估
对于大脑中动脉末梢闭塞(OMCA)的大鼠，使用局部脑缺血模型进行研究，该研究由S.T.Chen首次描述(1989)。用水合氯醛麻醉(300mg/Kg，腹膜内注射)，动物的头部在一侧固定好，左侧朝上。在切开左耳与左眼中间部的皮肤后，颞部的肌肉纤维被分离提升至颅骨表面。使用0.5mm直径钻头的牙钻机器，在鳞状骨和额骨之间的缝隙区域制造一个直径大约3-4mm的孔，从而暴露出大脑中动脉和大脑下静脉交叉的区域。
使用显微镜(Olympus SZ-CTV)，在高放大倍率(14.0×3.3)视野下，一个特殊的金属钩被放置在左侧大脑中动脉下。使用电凝法闭塞大脑中动脉，闭塞部位接近大脑中动脉分成额分支和顶分支的部位。此时，在显微镜视野下，观察到闭塞部位上游沿大脑中动脉血流停止。术后伤口被分层缝合，并闭塞身体同侧的颈动脉。
大脑组织应用2，3，5-三苯四唑氯化物(TTC)利用组织化学染色法染色，来评估药剂对缺血部位的影响(Bederson J.B.等，1986)。
为此，OMCA后72小时内麻醉动物被断头，将它们的脑组织从头盖中取出。
制备厚度为1mm的六片额叶切片，之后用TTC染色。然后，每一片染色的切片被两面扫描并应用MOCHA软件(Jandel Scientific，version1.2.0.0)用计算机测量面积。同侧脑半球的面积(IH)和损伤面积(DA)。病灶体积占身体同侧脑半球的体积的百分比按照以下公式计算：V(DA)/V(IH)＝(S(DA)1+S(DA)2+...+S(DA)6)/(S(IH)1+S(IH)2+...+S(IH)6)，其中S(DA)和S(IH)是每一切片DA和IH的面积(Roda J.M.等，1995)。
为评估对动物行为和状态的干扰的动力学，应用神经精神药理学中的一种复杂方法(T.A.Voronina，2000)。用被动避免的条件反射模型来研究大鼠的训练和记忆(CRPA，来自Lafayette Instrument Co.，USA的单位(unit)＂被动避免＂)。动物术后24小时内进行CRPA训练，训练后一天重复反射3分钟(180秒)。
动物的神经状况由蒙古沙鼠的McGrow′s卒中指标评分(Stroke-index scale)确定(McGrow，1977)，该评分由I.V.Gannushkina修正(1996)。评估用记分方式执行。如果几个神经学缺陷的症状在动物中存在，动物状况的严重程度由相应得分的总数决定。计数具有较轻(卒中指数从0.5到2.5)的神经学症状的大鼠和具有较重(卒中指数从3到10)的神经学症状的大鼠的数目。
研究使用Vistar系雄性大鼠(250-300克)，所述大鼠在动物饲养中心自由进食和进水并且在12小时昼夜交替环境下饲养。在研究期间，实验动物被随机分配在11个组中。Phenotropil以100mg/Kg、200mg/Kg和300mg/Kg剂量术前60分钟经腹膜内注射到三组动物体内并在术后5分钟内经腹膜内注射到三组动物体内。生理盐水被注射到假手术组动物体内。之后，所述的溶液在第2天和第3天被注射1次。所述的溶液严格地在每天的同一时间±3分钟时注射。
记录为McGrow卒中指标评分的动物的神经学状况分析显示全部的手术动物有轻微的神经学状况的损伤，表现为震颤、易激性下降、动作迟缓、单侧轻度睑下垂。神经学状况的损伤在术后72小时的发展变化显示在表8中。
需要指出的是在第一天已经出现的震颤和动作迟缓在术前接受Phenotropil治疗的动物中出现频率较低(见表8)。在第2天和第3天确认软弱无力、动作迟缓、震颤出现在未接受药物的大脑中动脉闭塞对照组动物中，则术后阶段接受Phenotropil治疗的动物显示了更迅速的阳性动力学：伴有震颤和动作迟缓的动物的数目在第2天明显下降。动物中左侧轻度睑下垂的出现和发展可以是术后水肿的证据。
在研究CRPA模型的训练和记忆过程期间，发现的结果记录在表9中。OMCA动物产生了明显的记忆损伤。在Phenotropil背景下，与第5组相比，OMCA的全部组的动物进入暗室黑暗区域的潜伏时间明显延长。当Phenotropil被预防性使用60分钟到OMCA时，代表药剂的高度的亲神经效果的这些指标在第1组和第2组之间没有显著差异。
在术后72小时内对照组动物损伤面积(第5组)是身体同侧半球面积的11.5±0.98％(计算公式是上面给出的)。动物的下列指标被记录，所述动物术前60min接受100mg/Kg、200mg/Kg和300mg/Kg剂量的Phenotropil：7.4±0.72％(第6组)；6.52±0.58％(第7组)；6.03±0.75％(第8组)。术后注射Phenotropil(在大脑中动脉闭塞5分钟内)以100mg/Kg，200mg/Kg，300mg/Kg剂量得出以下结果：11+0.87％(第9组)；10.79+0.97％(第10组)；9.5+0.94％(第11组)(见表10)。
工作结果显示Phenotropil在术后时期能够保护记忆功能，改善动物的神经学状态，该效果通过与对照组5相比CRPA首次进入室内黑暗区域的潜伏时间的延长、动物更积极的行为、和更少的震颤次数来证实。药剂的预防性注射(术前60分钟)导致了相对对照组动物结果而言损伤病灶面积明显的下降：100mg/Kg-下降36％；200mg/Kg-下降43％；300mg/Kg-下降48％。术后5分钟注射Phenotropil100mg/Kg，200mg/Kg和300mg/Kg，分别导致了脑损伤面积下降4％、6％和17％。
可以看出当需要较高剂量的时候，缺血型卒中的“剂量—效果”依赖关系在卒中的急性表现阶段是最重要的。Phenotropil在剂量为300mg/Kg时并且特别是在预防性使用的时候表现出它的最佳效果。
实施例3.Phenotropil注射10天的抗卒中活性评价
研究按照实施例2中记载的方法在2组动物中进行(每第2组0只大鼠)。Phenotropil(300mg/Kg)和等体积的生理盐水经腹膜内注射10天(在每天的同一时间±3分钟)，第一天从术后5分钟开始。实验性研究大鼠要选择相似体重的大鼠(270克±10克)。
身体同侧脑半球的体积由实验的第3天和第10天决定，脑半球和脑损伤面积的病理形态学状况也被研究。
每组的损伤面积的瘢痕在第10天被记录。与接受Phenotropil治疗的组的大鼠不同，在对照组中观察到脑半球的萎缩(收缩到受损面积)，而在第10天在Phenotropil组中脑半球没有发生萎缩。身体同侧脑半球的体积在第1组动物中平均被缩小了10％(见表11)。在第2组中脑半球的体积没有发生可靠的改变，这就是即使是短期使用Phenotropil的治疗效果的证据。
做过的研究显示Phenotropil显示出显著且普遍的亲神经活性和脑血管活性，在CNS病理为实验性出血性和缺血性卒中的条件中具有抗卒中活性。
在各种病因的脑血管病理的CNS异常的急性期使用Phenotropil的背景下，功能记忆标准、行为反应、运动活性和肌张力被重建，在疾病研究足够早的时期，可去除明显的神经学缺陷并完全恢复精神神经状况。
出血性卒中注射药剂的最小治疗剂量(100mg/Kg)能够100％阻止动物死亡。同时，对照组有57％的大鼠死亡。
在缺血性卒中中，在术前60分钟注射Phenotropil并一天一次持续三天，平均缩减了42％的脑损伤面积(当剂量是300mg/Kg时缩减的面积为48％)，这就证实了其预防和治疗脑血管异常和CNS疾病发展的使用效果和前景。在卒中的急性发作阶段，通过以100、200和300mg/Kg剂量在术后5分钟内注射Phenotropil和随后的3天给药计划，该指标表现出较不显著的效果(在300mg/Kg剂量下为17％)，但是当治疗过程延长到10天则产生了阻止脑中破坏性改变的效果。
发现的Phenotropil对不同病因的卒中的效果超越了其单独的药理学性质，这在前面已经说明，并且显示Phenotropil是一种新一代药物的母体药物，它能产生普遍的神经学活性和能够保证CNS功能状态的相称的(神经调节剂)重建，从而根据一些或其他CNS异常或疾病，导致产生不同的多重效应，包括脑血管—神经保护活性。
参考书目
1、N.V.Vereschagin，Yu.Ya.Varakin.Stroke registers in Russia：results and methodologicalaspects of the problem//Journ.of neurol.and psychiatr.，named after S.S.Korsakov(Supplement＂Stroke＂).-M.，2001.No.1，第34-40页。
2、Internal diseases，T.R.Harrison等著M.：Meditsina，1997.V.10,494页。
3、T.A.Voronina，R.U.Ostrovskaya.Methodical Guidance on studying nootropic activityof pharmacological substances//In the book：Manual on experimental(preclinical)studiesof new pharmacological substances.M.，2000.第153-158页。
4、T.A.Voronina，S.B.Seredenin.Methodical Guidance on studying tranquilizing(anxiolytic)action of pharmacological substances//In the book：Manual onexperimental(preclinical)studies of new pharmacological substances.M.，2000.第126-130页。
5、I.V.Gannushkina.Pathophysiological mechanisms of cerebral blood flow andnewdirections in their prophylaxis and treatment//J.of neuropathol.and psychiatr.M.1996.No.1，第14-18页。
6、I.V.Gannushkina.Functional angioarchitecture of brain.M.，Meditsina，1977，第224页。
7、Ye.I.Gusev.The problem of stroke in Russia.//Journ.of neurol.and psychiatr.，namedafter S.S.Korsakov(Supplement＂Stroke＂).M.，2003.No.9，第3-7页。
8、Ye.I.Gusev，V.I.Skvortsova.Cerebral ischemia.M.，Meditsina，2001。
9、Ye.I.Gusev，V.I.Skvortsova，L.V.Stakhovskaya.Epidemiology of stroke in Russia.//Journ.of neurol.and psychiatr.，named after S.S.Korsakov(Supplement＂Stroke＂).M.，2003.No.8，第4-9页。
10、A.N.Makarenko，N.S.Kositsin，S.V.Karpenko，V.A.Mishina.发明证书No.1767518 of 03.11.1990。
11、Manual on experimental(preclinical)studies of new pharmacological substances.M.，2000，第159-161页。
12、Bederson J.B.，Pitts L.H.，Germano S.M.，NishimuraM.C.，Davis R.L，，BartkowskiH.M.Evaluation of 2，3，5-triphenyltetrazolium chloride as a stain for detection andquantification of experimental cerebral infarction in rat//Stroke.-1986.-V.17.-第1304-1308页。
13、Chen S.T.，Hsu C.Y.，Hogan E.L.，Maricq H.，Balentine J.D.A model of focalischemic stroke in the ratreproducible extensive cortical infarction//Stroke.-1989.-V.17，No.4.-第738-743页。
14、Jackowski A.，Crockard A.，Burnstock G.，Ross Russell R.，Kristek F.The timecourse of intracranial pathophysiological changes following experimental subarachnoidhaemorrage in the rat//Journal of cerebral blood flow and metabolism.-1990.-V.10.-第835-849页。
15、Roda J.M.，Carceller F.，Diez-TejedorE.，Avendano C.Reduction of infarct size byintra-arterial nimodipine administered at reperfusion in a ratmodel of partially reversiblebrain focal ischemia//Stroke.-1995.-V.26，No.10，第1888-1892页。
16、Smith S.，Hodges H.，Sowinski P.Long-Term beneficial effects of BW619C89onneurological deficit，cognitive deficit and brain damage after middle cerebral arteryocclusion in the rat//Neuroscience.-1997.-V.77，No.4，第1123-1135页。
表1.Phenotropil(100mg/Kg，体内给药)在出血性卒中的第1天对大鼠的神经学异常的影响(McGrow评分)

*—与卒中大鼠相比差异的可靠度P≤0.05(χ2)
表2 Phenotropil对动物出血性卒中后在单杠实验中肌张力的影响

a.u.＝绝对单位
*—与假手术组大鼠相比差异的可靠度P≤0.05(χ2)
**—与卒中大鼠相比差异的可靠度P≤0.05(χ2)
表3 Phenotropil对动物出血性卒中后在Rotarod实验中对运动协调能力的影响

a.u.＝绝对单位
*—与假手术组大鼠相比差异的可靠度P≤0.05(χ2)
**—与HS大鼠相比差异的可靠度P≤0.05(χ2)
表4.Phenotropil对进行洞穴反射的影响

表5a.Phenotropil对大脑内外伤后血肿大鼠重复CRPA的影响


*-与假手术大鼠相比差异的可靠度P≤0.05(χ2)
**-与HS大鼠相比差异的可靠度P≤0.05(χ2)
表5b.

*—与假手术大鼠相比差异的可靠度P≤0.05(t检验；χ2)
**—与HS大鼠相比差异的可靠度P≤0.05(t检验；χ2)
表6.Phenotropil在旷场法条件下对出血性卒中后动物定向和探测行为和运动能力的影响


*—与假手术大鼠相比差异的可靠度P≤0.05(t检验；χ2)
**—与HS大鼠相比差异的可靠度P≤0.05(t检验；χ2)
表7.Phenotropil对HS后动物存活率的影响

*—与假手术大鼠相比差异的可靠度P≤0.05(χ2)
**—与HS大鼠相比差异的可靠度P≤0.05(χ2)
表8.OMCA动物神经学异常


记录：数字显示了每组表现出列举的症状的动物的数目。
表9.Phenotropil对术后24小时缺血性卒中急性期(OMCA)接受训练(CRPA)的大鼠的影响和对训练后24小时重复CRPA维持测试的影响
 序号动物分组首次进入暗室区域的潜伏时间1对照：生理盐水101.2±19.02对照：Phenotropilw/o OMCA105.9±25.73生理盐水，假手术69.7±20.74Phenotropil 200mg/Kg，假手术95.9±24.95生理盐水+OMCA48.5±17.5*6Phenotropil 100mg/Kg+OMCA93.6±22.3**7Phenotropil 200mg/Kg+OMCA104.6±18.8**8Phenotropil 300mg/Kg+OMCA90.6±22.6**9OMCA+Phenotropil 100mg/Kg83.3±26.1**10OMCA+Phenotropil 200mg/Kg84.5±19.6**11OMCA+Phenotropil 300mg/Kg67.6±18.4**
*—与第1组相比差异的可靠度P<0.05
**—与第5组相比差异的可靠度P<0.05
表10.OMCA中脑损伤面积的尺寸
 动物分组身体同侧脑半球的体积(IH)，mm3损伤面积的体积(DA)，mm3DA/IH关系，％组5765.6±3.7788±7.5711.5±0.98组6786.6±4.7458.2±5.717.39±0.72*组7739.77±4.849.2±6.136.52±0.58*组8797±4.3348.1±5.996.03±0.75组9787.9±5.2486.5±6.5311±0.87组10794.8±4.2785.9±7.7810.8±0.97组11801.2±3.6376.2±7.599.5±0.94
*与第5组相比p<0.01(对照组动物用OMCAw/o药剂)。
表11.在OMCA中同侧脑半球体积的改变
 序号动物分组在第3天身体同侧脑半球的体积，mm3在第10天身体同侧脑半球的体积，mm31OMCA+生理盐水770.74±72693.53±4.12*OMCA+Phenotropil300mg/Kg772.4±4.5773.17±3.83
*与对照组相比，第1组在第3天差异的可靠度p<0.01。