一种利用拉沙里菌素发酵液制备拉沙里菌素的方法技术领域
本发明属于抗生素提取技术领域，特别是涉及一种利用拉沙里菌素发酵液制备拉
沙里菌素的方法。
背景技术
拉沙里菌素是由Streptomyces lasaliensis菌种发酵产生的一种聚醚类抗生素，
它可使孢子和裂殖体膨胀而杀死球虫，故又称离子载体型抗球虫药物。拉沙里菌素和其他
化学合成的抗球虫药无交叉耐药性，除有效防治畜禽球虫病之外，还广泛用于牛的饲料添
加剂，具有促生长、提高饲料利用率、改善繁殖性能、预防多种代谢性疾病的作用。
目前，国内尚无拉沙里菌素提取工艺报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种工艺简单，生产周期短，生产成本低，且提取收率高，
产品有效含量高的利用拉沙里菌素发酵液制备拉沙里菌素的方法。
为实现上述目的所采取的技术方案为：
一种利用拉沙里菌素发酵液制备拉沙里菌素的方法，其特征在于其工艺步骤为：首先
将拉沙里菌素发酵液进行预处理，然后采用有机溶剂A混合液进行浸提，所得拉沙里菌素有
机溶液再经纯化水萃取、有机溶剂B反萃取后，再用树脂吸附，结晶得到拉沙里菌素；
所述预处理是指将拉沙里菌素发酵液调节 pH10-11，充分搅拌后静置，板框过滤，水顶
洗，干燥得到干菌渣；
所述有机溶剂A混合液为异辛烷或三甲基戊烷或庚烷与甲醇的混合液，其中甲醇含量
8-10%；
所述有机溶剂B是醋酸丁酯或乙酸乙酯。
所述预处理过程中，搅拌时间60-80min，静置时间40-60min，饮用水顶洗15-
35min。
所述预处理过程中，干燥采用微波干燥，控制微波频率为800-900MH，干燥后的物
质水分＜2%。
所述采用有机溶剂A混合液进行浸提过程为：在预处理后的干菌渣中加入有机溶
剂A混合液，在搅拌转速40-60r/min下浸提200-240min，然后过滤即可。
所述有机溶剂A混合液的用量为：V有机溶剂A混合液:M菌渣=2-3L:1kg。
所述纯化水萃取过程为：在拉沙里菌素有机溶液中加入纯化水，在搅拌转速70-
90r/min，温度35-40℃，pH9-10条件下，搅拌40-60min，然后静置120-150min，分层，得到拉
沙里菌素水溶液，其中V纯化水: V拉沙利菌素有机溶液=3-5L:1L。
所述有机溶剂B反萃取过程为：在萃取溶液中加入有机溶剂B，在搅拌转速70-90r/
min，温度45-50℃，pH2-3条件下，搅拌40-60min，然后静置150-180min，分层即可，其中有机
溶剂B用量为：V纯化水: V有机溶剂B=1-2L:1L。
所述树脂吸附过程中，树脂柱径高比为1:8-9，流速控制在15-17ml/min，吸附剂为
聚丙烯酰胺，其用量：M吸附剂(kg)=（发酵效价×发酵液体积）/1000×0.7。
所述结晶过程为：将树脂吸附后的拉沙里菌素有机溶液升温至75-85℃，在压力-
0.1MPa-0.05 MPa下回收有机溶剂，即可。
调整pH用碱液或酸液，所述碱液为质量浓度为30-40%的氢氧化钠或碳酸钠或氨
水，所述酸液为质量浓度为20-40%的硫酸或盐酸。
本发明实现了发酵液中拉沙里菌素有效分离和纯化，产品有效含量达到98%，提取
总收率达到了80%以上，产品质量符合相关兽药典质量标准，同时本发明工艺简单，生产周
期短，生产成本低，有利于提高拉沙里菌素国际市场竞争力。
具体实施方法
下面用实例予以说明本发明，应该理解的是，实例是用于说明本发明而不是对本发明
的限制。本发明的范围与核心内容依据权利要求书加以确定。
下述实施例中的拉沙里菌素发酵液来源：拉沙里菌素生产采用专有的拉沙里链霉
菌为产生菌，以油、淀粉、黄豆饼粉、酵母粉等原材料配制成培养液，经三级发酵生物合成拉
沙里菌素。
实施例1
拉沙里菌素发酵液10m3，效价为25203ug/ml，发酵总亿为252.03。
发酵液预处理：拉沙里菌素发酵液中加入30%氢氧化钠溶液， pH调节至10，搅拌
60min，然后静置40min，经板框过滤得到拉沙里菌素湿菌渣，采用饮用水顶洗15min，微波干
燥，频率为800MH，干燥结束，菌渣重量为2.1吨，水分含量为1.8%。
有机溶剂浸提：干菌渣中加入混合有机溶剂异辛烷（甲醇含量为8%）4.2m3，搅拌转
速控制在40r/min，时间为200min，然后过滤得到拉沙里菌素有机溶液4.1m3。
萃取：拉沙里菌素有机溶液中加入纯化水12.3 m3，搅拌转速控制70r/min，温度控
制在35℃，30%氢氧化钠调节pH至9，继续搅拌40min，静置120min，然后分层，得到拉沙里菌
素水溶液12.2m3。
反萃取：拉沙里菌素水溶液中加入有机溶剂醋酸丁酯12.2m3，搅拌转速控制70r/
min，温度控制在45℃，20%硫酸溶液调节pH至2，继续搅拌40min，静置150min，然后分层，得
到拉沙里菌素有机溶液12m3。
吸附：树脂柱中加入固定相吸附剂聚丙烯酰胺，总量为176.4kg,树脂柱径高比为
1:8，拉沙里菌素有机溶液加入树脂柱，流动相为有机溶剂醋酸丁酯，流动相的流速控制在
15ml/min。吸附工艺结束，收集拉沙里菌素有机溶液9.3m3，化学效价为22060ug/ml。
结晶是指拉沙里菌素有机溶液升温至75℃，压力控制在-0.05 MPa，回收有机溶
剂。结晶结束，得到拉沙里菌素220.59kg，含量为98.2%，收率为81.4%。
实施例2
拉沙里菌素发酵液10m3，效价为25186ug/ml，发酵总亿为251.86。
发酵液预处理：拉沙里菌素发酵液中加入33%碳酸钠溶液， pH调节至10.2，搅拌
65min，然后静置45min，经板框过滤得到拉沙里菌素湿菌渣，采用饮用水顶洗20min，微波干
燥，频率为830MH，干燥结束，菌渣重量为2吨，水分含量为1.6%。
有机溶剂浸提：干菌渣中加入混合有机溶剂三甲基戊烷（甲醇含量为8.5%）4.6m3，
搅拌转速控制在45r/min，时间为210min，然后过滤得到拉沙里菌素有机溶液4.5m3。
萃取：拉沙里菌素有机溶液中加入纯化水15.8m3，搅拌转速控制75r/min，温度控
制在36℃，33%碳酸钠调节pH至9.2，继续搅拌45min，静置130min，然后分层，得到拉沙里菌
素水溶液15.7m3。
反萃取：拉沙里菌素水溶液中加入有机溶剂乙酸乙酯12.1m3，搅拌转速控制75r/
min，温度控制在46℃，25%盐酸溶液调节pH至2.3，继续搅拌45min，静置160min，然后分层，
得到拉沙里菌素有机溶液12m3。
吸附：树脂柱中加入固定相吸附剂聚丙烯酰胺，总量为176.3kg,树脂柱径高比为
1:8.2，拉沙里菌素有机溶液加入树脂柱，流动相为有机溶剂乙酸乙酯，流动相的流速控制
在15.5ml/min。吸附工艺结束，收集拉沙里菌素有机溶液9.4m3，化学效价为21945ug/ml。
结晶是指拉沙里菌素有机溶液升温至78℃，压力控制在-0.06 MPa，回收有机溶
剂。结晶结束，得到拉沙里菌素206.27kg，含量为98.4%，收率为81.9%。
实施例3
拉沙里菌素发酵液10m3，效价为25064ug/ml，发酵总亿为250.64。
发酵液预处理：拉沙里菌素发酵液中加入35%氨水溶液， pH调节至10.5，搅拌
70min，然后静置50min，经板框过滤得到拉沙里菌素湿菌渣，采用饮用水顶洗25min，微波干
燥，频率为850MH，干燥结束，菌渣重量为1.95吨，水分含量为1.3%。
有机溶剂浸提：干菌渣中加入混合有机溶剂庚烷（甲醇含量为9%）4.9m3，搅拌转速
控制在50r/min，时间为220min，然后过滤得到拉沙里菌素有机溶液4.8m3。
萃取：拉沙里菌素有机溶液中加入纯化水19.2m3，搅拌转速控制80r/min，温度控
制在38℃，35%氨水调节pH至9.5，继续搅拌50min，静置140min，然后分层，得到拉沙里菌素
水溶液19.1m3。
反萃取：拉沙里菌素水溶液中加入有机溶剂醋酸丁酯12.7m3，搅拌转速控制80r/
min，温度控制在48℃，30%硫酸溶液调节pH至2.5，继续搅拌50min，静置170min，然后分层，
得到拉沙里菌素有机溶液12.6m3。
吸附：树脂柱中加入固定相吸附剂聚丙烯酰胺，总量为175.4kg,树脂柱径高比为
1:8.5，拉沙里菌素有机溶液加入树脂柱，流动相为有机溶剂醋酸丁酯，流动相的流速控制
在16ml/min。吸附工艺结束，收集拉沙里菌素有机溶液9.6m3，化学效价为21542ug/ml。
结晶是指拉沙里菌素有机溶液升温至80℃，压力控制在-0.07 MPa，回收有机溶
剂。结晶结束，得到拉沙里菌素206.8kg，含量为98.7%，收率为82.5%。
实施例4
拉沙里菌素发酵液10m3，效价为24921ug/ml，发酵总亿为249.21。
发酵液预处理：拉沙里菌素发酵液中加入37%碳酸钠溶液， pH调节至10.7，搅拌
75min，然后静置55min，经板框过滤得到拉沙里菌素湿菌渣，采用饮用水顶洗30min，微波干
燥，频率为870MH，干燥结束，菌渣重量为2吨，水分含量为1.4%。
有机溶剂浸提：干菌渣中加入混合有机溶剂异辛烷（甲醇含量为9.5%）5.4m3，搅拌
转速控制在55r/min，时间为230min，然后过滤得到拉沙里菌素有机溶液5.3m3。
萃取：拉沙里菌素有机溶液中加入纯化水23.9m3，搅拌转速控制85r/min，温度控
制在39℃，37%碳酸钠调节pH至9.7，继续搅拌55min，静置150min，然后分层，得到拉沙里菌
素水溶液23.7m3。
反萃取：拉沙里菌素水溶液中加入有机溶剂醋酸丁酯14m3，搅拌转速控制85r/
min，温度控制在49℃，35%盐酸溶液调节pH至2.8，继续搅拌55min，静置180min，然后分层，
得到拉沙里菌素有机溶液13.87m3。
吸附：树脂柱中加入固定相吸附剂聚丙烯酰胺，总量为174.4kg,树脂柱径高比为
1:8.8，拉沙里菌素有机溶液加入树脂柱，流动相为有机溶剂醋酸丁酯，流动相的流速控制
在16.5ml/min。吸附工艺结束，收集拉沙里菌素有机溶液10.2m3，化学效价为20059ug/ml。
结晶是指拉沙里菌素有机溶液升温至80℃，压力控制在-0.07 MPa，回收有机溶
剂。结晶结束，得到拉沙里菌素204.6kg，含量为98.6%，收率为82.1%。
实施例5
拉沙里菌素发酵液10m3，效价为25073ug/ml，发酵总亿为250.73。
发酵液预处理：拉沙里菌素发酵液中加入40%氢氧化钠溶液， pH调节至11，搅拌
80min，然后静置60min，经板框过滤得到拉沙里菌素湿菌渣，采用饮用水顶洗35min，微波干
燥，频率为900MH，干燥结束，菌渣重量为2.1吨，水分含量为1.5%。
有机溶剂浸提：干菌渣中加入混合有机溶剂三甲基戊烷（甲醇含量为10%）6.3m3，
搅拌转速控制在60r/min，时间为240min，然后过滤得到拉沙里菌素有机溶液6.2m3。
萃取：拉沙里菌素有机溶液中加入纯化水31m3，搅拌转速控制90r/min，温度控制
在40℃，37%碳酸钠调节pH至10，继续搅拌60min，静置160min，然后分层，得到拉沙里菌素水
溶液30.8m3。
反萃取：拉沙里菌素水溶液中加入有机溶剂乙酸乙酯15.4m3，搅拌转速控制90r/
min，温度控制在50℃，40%硫酸溶液调节pH至3，继续搅拌60min，静置190min，然后分层，得
到拉沙里菌素有机溶液15.2m3。
吸附：树脂柱中加入固定相吸附剂聚丙烯酰胺，总量为175.5kg,树脂柱径高比为
1:9，拉沙里菌素有机溶液加入树脂柱，流动相为有机溶剂乙酸乙酯，流动相的流速控制在
17ml/min。吸附工艺结束，收集拉沙里菌素有机溶液10.7m3，化学效价为19192ug/ml。
结晶是指拉沙里菌素有机溶液溶液升温至80℃，压力控制在-0.07 MPa，回收有机
溶剂。结晶结束，得到拉沙里菌素205.3kg，含量为98.5%，收率为81.9%。