一种西贝碱的制备方法 技术领域：
本发明涉及一种西贝碱的制备方法，尤其是一种采用超临界CO2提取，柱层析吸附分离纯化制备西贝碱的方法。
背景技术：
西贝碱又叫西贝素，是一种生物碱。
分子式：C27H43NO3；分子量：429.64；
分子结构式：
性质：西贝碱是一种无色棱柱状结晶，熔点269℃，易溶于氯仿、乙酸乙酯，溶于甲醇、乙醇、丙酮、乙醚，不溶于水及石油醚。
药理研究表明，西贝碱对离体豚鼠回肠、兔十二指肠和大鼠子宫及整体狗小肠有明显的松弛作用，对卡巴胆碱引起的豚鼠离体气管收缩有较强的抑制作用，其解痉作用类似罂粟碱，能对抗氯化乙酰胆碱、二磷酸组胺和氯化钡所引起的痉挛；同时也能扩张外周血管，但对心电图无影响。
百合属百合科(Liliaceae)草本植物，其地下鳞茎近球形或圆锥形，表面类白色。作为常用中草药，化痰止咳润肺，川贝母用于肺虚久咳，虚劳咳嗽，燥热咳嗽，肺痈，瘰疬，痈肿，乳痈；伊贝母用于肺热咳嗽，干咳少痰，阴虚劳嗽，咳痰带血。主要成分为生物碱，并含皂苷及微量金属元素。
国内从植物中提取西贝碱，原料主要是伊贝母和川贝母。西贝碱在伊贝母和川贝母中含量较低，现有提取工艺多是乙醇渗漉提取、氨水及混合溶液浸提。如宋卫中发表的“正交实验优选咳安含片提取工艺”，该文献采用70％乙醇渗漉提取，提取时间长。赵德永发表的“4种川贝母的总皂苷、总生物碱及西贝素的含量测定”，该文献采用氨水湿润、乙醚-氯仿-乙醇浸提，氯仿萃取，溶剂消耗量大，且未分离得到西贝素单体。朱子清【天然药物成分提取分离与制备，中国医药科技出版社，1994：346.】提出用碳酸钠溶液拌和，苯、酸依次提取，碱化，乙醚反复萃取，无水碳酸钾干燥，过氧化铝柱，经乙酸乙酯-甲醇-氨水(20∶1∶1)洗脱，得西贝碱结晶，该方法操作繁琐，溶剂复杂，有机溶剂残留多。因此提供一种操作简单、快速、提率高、纯度高的西贝碱制备工艺具有现实意义。
发明内容：
本发明的目的是为了提供一种从伊贝母或川贝母中制备西贝碱的方法。该工艺提取率高，纯度理想，易扩大工业生产。
本发明是采用以下技术方案实现的：
一种西贝碱的制备方法，其特征在于包含以下步骤：
1)超临界CO2萃取：将原料粉碎60-100目，加入碱性乙醇溶液浸泡；通CO2乙酸乙酯作夹带剂，收集萃取物；
2)树脂吸附：将上述萃取物加入大孔树脂，先用石油醚洗脱杂质，再经乙酸乙酯-乙醇-石油醚混合溶液梯度洗脱，薄层色谱法检测，收集洗脱液；
3)重结晶：上述洗脱液回收试剂至小体积，放置结晶，滤出结晶物加石油醚洗涤，95％乙醇回流饱和溶解，结晶1-3次，滤出低温干燥即得产品。
所述的原料为百合科植物新疆贝母、伊犁贝母、卷叶贝母、甘肃贝母或暗紫贝母的鳞茎。
所述静态浸泡溶剂：碱性乙醇为pH10的乙醇，乙醇浓度为70-90％，碱可选氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠或氨水，浸泡1-3小时。
所述超临界萃取条件：夹带剂加入量为原料量的10-20％，萃取压力25-40MPa，提取温度40-60℃，CO2流量1-5ml/g生药/min，动态提取150min-250min；解析压力6-15MPa，解析温度50-60℃。
所述大孔树脂吸附条件：大孔树脂可选用D101、D180、HPD100或AB-8大孔吸附树脂。
所述梯度洗脱条件：先乙酸乙酯-乙醇-石油醚(2∶1∶2)4-5倍柱体积洗脱，TLC检测，有西贝碱流出，再改用乙酸乙酯-乙醇-石油醚(8∶1∶1)洗脱，至无西贝碱流分。
所述结晶条件：西贝碱流分浓缩至其体积的1/4-1/5，重结晶2-3次，养晶时间至少8小时。
综上所述，本发明存在以下优点：超临界CO2萃取提取率高，溶剂用量小，性质稳定，生产安全，产品纯度高。
下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施方式：
下述实施例中西贝碱的检测采用薄层色谱法(参照2005年版中国药典伊贝母鉴别项下)，
具体方法如下：
薄层色谱条件：
薄层板：2％氢氧化钠制备的薄层板；
展开剂：氯仿-乙酸乙酯-甲醇-水(8∶8∶3∶2)10℃以下放置的下层溶液；
展开，晾干，喷以稀碘化铋钾试液和3％亚硝酸钠醇试液，在与对照品色谱相同的位置上显相同地棕色斑点。
实施例1：
取贝母药材粉碎60目，取5kg投入提取塔，先加入100mlpH为10的75％乙醇浸泡2小时，密封，将提取温度提高到50℃，分离塔温度调至60℃，提取压力38MPa，解析压力10MPa，CO2气体从钢瓶放出，经过气体净化器后在液化罐中冷至0-5℃，液化。进入储罐用高压计量泵将CO2和500ml乙酸乙酯送入预热器，通过预热器到指定温度和压力，由提取塔下部夹带乙酸乙酯一起进入与物料接触，流速1.0L/min，调节塔内压力，当提取压力至40MPa，解析压力至10MPa，打开调压阀，通过调压阀控制上述参数，动态提取3小时。停机后放出萃取物，收集萃取物，过D101大孔树脂吸附，量取4BV石油醚洗脱杂质后，先用乙酸乙酯-乙醇-石油醚(2∶1∶2)洗脱，薄层检测，有西贝碱流分时再改用乙酸乙酯-乙醇-石油醚(8∶1∶1)洗脱，至无西贝碱流分结束洗脱，收集该段流分，回收试剂至其体积的1/4，放置结晶8小时。滤出粗晶物3.6g，粗结晶物用95％乙醇回流饱和溶解，放置结晶12小时，滤出，重结晶3次，低温干燥得产品1.86g，含量98.8％。
实施例2：
取贝母药材粉碎80目，取8kg投入提取塔，先加入160mlpH为10的80％乙醇浸泡1小时，密封，将提取温度提高到40℃，分离塔温度调至50℃，提取压力35MPa，解析压力8MPa，CO2气体从钢瓶放出，经过气体净化器后在液化罐中冷至0-5℃，液化。进入储罐用高压计量泵将CO2和1200ml乙酸乙酯送入预热器，通过预热器到指定温度和压力，由提取塔下部夹带乙酸乙酯一起进入与物料接触，流速1.0L/min，调节塔内压力，当提取压力至35MPa，解析压力至8MPa，打开调压阀，通过调压阀控制上述参数，动态提取200分钟。停机后放出萃取物，收集萃取物，过HPD100大孔树脂吸附，量取5BV石油醚洗脱杂质后，先用乙酸乙酯-乙醇-石油醚(2∶1∶2)洗脱，薄层检测，有西贝碱流分时再改用乙酸乙酯-乙醇-石油醚(8∶1∶1)洗脱，至无西贝碱流分结束洗脱，收集该段流分，回收试剂至其体积的1/5，放置结晶。滤出粗晶物5.7g，粗结晶物用95％乙醇回流饱和溶解，放置结晶10小时，滤出，重结晶2次，低温干燥得产品2.6g，含量99％。
实施例3：
取贝母药材粉碎100目，取6kg投入提取塔，先加入120mlpH为10的90％乙醇浸泡1小时，密封，将提取温度提高到45℃，分离塔温度调至55℃，提取压力25.5MPa，解析压力6MPa，CO2气体从钢瓶放出，经过气体净化器后在液化罐中冷至0-5℃，液化。进入储罐用高压计量泵将CO2和600ml乙酸乙酯送入预热器，通过预热器到指定温度和压力，由提取塔下部夹带乙酸乙酯一起进入与物料接触，流速1.0L/min，调节塔内压力，当提取压力至35MPa，解析压力至8MPa，打开调压阀，通过调压阀控制上述参数，动态提取200分钟。停机后放出萃取物，收集萃取物，过D180大孔树脂吸附，量取4BV石油醚洗脱杂质后，先用乙酸乙酯-乙醇-石油醚(2∶1∶2)洗脱，薄层检测，有西贝碱流分时再改用乙酸乙酯-乙醇-石油醚(8∶1∶1)洗脱，至无西贝碱流分结束洗脱，收集该段流分，回收试剂至其体积的1/5，放置结晶。滤出粗晶物4.2g，粗结晶物用95％乙醇回流饱和溶解，放置结晶13小时，滤出，重结晶3次，低温干燥得产品2.2g，含量98.7％。
实施例4：
取贝母药材粉碎80目，取2kg投入提取塔，先加入40mlpH为10的85％乙醇浸泡1.5小时，密封，将提取温度提高到40℃，分离塔温度调至60℃，提取压力28MPa，解析压力8MPa，CO2气体从钢瓶放出，经过气体净化器后在液化罐中冷至0-5℃，液化。进入储罐用高压计量泵将CO2和400ml乙酸乙酯送入预热器，通过预热器到指定温度和压力，由提取塔下部夹带乙酸乙酯一起进入与物料接触，流速1.0L/min，调节塔内压力，当提取压力至25MPa，解析压力至6MPa，打开调压阀，通过调压阀控制上述参数，动态提取2小时。停机后放出萃取物，收集萃取物，过AB-8大孔树脂吸附，量取4BV石油醚洗脱杂质后，先用乙酸乙酯-乙醇-石油醚(2∶1∶2)洗脱，薄层检测，有西贝碱流分时再改用乙酸乙酯-乙醇-石油醚(8∶1∶1)洗脱，至无西贝碱流分结束洗脱，收集该段流分，回收试剂至其体积的1/4，放置结晶。滤出粗晶物1.45g，粗结晶物用95％乙醇回流饱和溶解，放置结晶15小时，滤出，重结晶3次，低温干燥得产品0.75g，含量98％。