仿生酶型水溶性亚硝酸盐复合降解剂的制备方法.pdf

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摘要
申请专利号:

CN201010591004.3

申请日:

2010.12.16

公开号:

CN102077931A

公开日:

2011.06.01

当前法律状态:

撤回

有效性:

无权

法律详情:

发明专利申请公布后的视为撤回IPC(主分类):A23L 1/015申请公布日:20110601|||实质审查的生效IPC(主分类):A23L 1/015申请日:20101216|||公开

IPC分类号:

A23L1/015; A23L1/275; A23L1/226; A23L1/29

主分类号:

A23L1/015

申请人:

集美大学

发明人:

马建华; 黄丽萍

地址:

361021 福建省厦门市集美区银江路185号

优先权:

专利代理机构:

厦门市新华专利商标代理有限公司 35203

代理人:

朱凌

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内容摘要

本发明公开了一种仿生酶型水溶性亚硝酸盐复合降解剂的制备方法,其步骤包括复合色素溶液的制备、复合聚阳离子溶液的制备、复合型香辛料溶液的制备,将复合型香辛料溶液加热、搅拌、过滤、静置后,搅拌下依次加入复合聚阳离子溶液与复合色素溶液,充分搅拌均匀等。由于本发明以水溶性天然无毒色素为基料,纯净水为载体,辅以麦芽酚、聚阳离子、复合磷酸盐,按以上配方配制的绿色仿生酶型亚硝酸盐复合降解剂,不仅对亚硝酸盐具有很好的清除作用,而且对有毒亚硝胺的合成也具有明显的阻断作用。添加于加工食品中,不仅可有效降解亚硝酸盐,而且具有上色、调味及一定的抗氧化、抗菌活性。丰富食品的保健功能,有益人体健康。

权利要求书

1: 一种仿生酶型水溶性亚硝酸盐复合降解剂的制备方法, 其特征在于 : 它包括以下步 骤: (1) 复合色素溶液的制备 : (11) 将板栗壳在 35-65℃烘干、 粉碎, 用 5-60%(V/V) 乙醇 溶液作为提取剂, 用微波萃取仪进行微波萃取, 设定微波萃取条件为 : 温度 40-65℃, 压 力为 1-5 标准大气压, 功率为 300-500W ; (12) 待反应结束后冷却至 20-38℃, 过滤, 经旋转 蒸发仪减压浓缩成暗红色浸膏, 真空干燥后得板栗壳色素, 称重 ; (13) 分别在不锈钢或搪 瓷等稳定材料制成的容器中 , 加入蒸馏水、 离子交换水、 纯净水、 凉开水中的一种, 在 5-450C 搅拌下依次加入 0.01-10%(W/V) 板栗壳色素或其它具有光稳定性、 含量为 0.01-10%(W/V) 具有抗氧化性的天然食用色素, 和水溶性防腐剂制成复合色素溶液 ; (2) 复合聚阳离子溶液的制备 : 分别在用合成树脂、 不锈钢或搪瓷等稳定材料制成的容 器中加入 1-3% 醋酸水溶液, 搅拌下依次加入含量为 0.01-3%(W/V) 的天然聚阳离子、 含量为 0.01-0.5mg/100g 的活性型维生素 B2、 含量为 0.1- 136g/100g 的 Vc 溶液制成复合聚阳离 子溶液 ; (3) 复合型香辛料溶液的制备 : 分别在用合成树脂、 不锈钢或搪瓷等稳定材料制成的容 器中加入蒸馏水, 依次加入含量为 0.01-30 mg/kg 的水溶性单一或由复合天然香辛料的提 取物、 含量为 0.1-1.5%(W/W) 的磷酸盐制成复合型香辛料溶液 ; (4) 将复合型香辛料溶液加热至 45-1000C, 搅拌 1-45min, 过滤, 滤液在 15-1000C 保温 0.5-2h 后室温静置 10-60min, 搅拌下依次加入复合聚阳离子溶液与复合色素溶液 , 充分 搅拌均匀。
2: 根据权利要求 1 所述的仿生酶型水溶性亚硝酸盐复合降解剂的制备方法, 其特征在 于: 步骤 (13) 中所述的抗氧化性的天然食用色素为多酚类衍生物色素、 酮类衍生物色素、 醌类衍生物色素中的一种。
3: 根据权利要求 2 所述的仿生酶型水溶性亚硝酸盐复合降解剂的制备方法, 其特征在 于: 所述的多酚类衍生物为花青素或儿茶素。
4: 根据权利要求 2 所述的仿生酶型水溶性亚硝酸盐复合降解剂的制备方法, 其特征在 于: 所述的酮类衍生物为姜黄或红曲。
5: 根据权利要求 2 所述的仿生酶型水溶性亚硝酸盐复合降解剂的制备方法, 其特征在 于: 所述的醌类衍生物为虫胶或胭脂虫红。
6: 根据权利要求 1 所述的仿生酶型水溶性亚硝酸盐复合降解剂的制备方法, 其特征在 于: 步骤 (13) 中所述的水溶性防腐剂为山梨酸钾, 含量为 0.02%— 10%( W/V) 。
7: 根据权利要求 1 所述的仿生酶型水溶性亚硝酸盐复合降解剂的制备方法, 其特征在 于: 步骤 (3) 中所述的复合天然香辛料为 0.005mg~25mg/kg 的麦芽酚或乙基麦芽酚。
8: 根据权利要求 1 所述的仿生酶型水溶性亚硝酸盐复合降解剂的制备方法, 其特征在 于: 步骤 (3) 中所述的复合天然香辛料为花椒、 八角、 桂皮、 果皮中的一种。
9: 根据权利要求 1 所述的仿生酶型水溶性亚硝酸盐复合降解剂的制备方法, 其特征在 于: 步骤 (3) 中所述的单一或复合天然香辛料提取物为香精或酊剂, 或以上两种或多种香 料的复合物。
10: 根据权利要求 1 所述的仿生酶型水溶性亚硝酸盐复合降解剂的制备方法, 其特征 在于 : 步骤 (3) 中所述的磷酸盐为三聚磷酸钠、 六偏磷酸钠、 焦磷酸钠、 磷酸三钠、 磷酸氢二 2 钠、 磷酸 二氢钠、 酸式焦磷酸钠、 焦磷酸二氢二钠中的一种。

说明书


仿生酶型水溶性亚硝酸盐复合降解剂的制备方法

    技术领域 本发明涉及一种复合化合物溶液的制备方法, 特别是涉及一种仿生酶型水溶性亚 硝酸盐复合降解剂的制备方法。
     背景技术 亚硝酸盐是肉类加工时常用的腌制剂 , 不仅能使肉制品呈良好色泽 , 而且还具有 防腐和增强风味的作用。但是 , 过量亚硝酸盐具有致癌作用 , 还会使血红蛋白失去携氧功 能 , 因此研究食物中的亚硝酸盐残留及其降解情况 , 对食品工业及人类健康都具有十分重 要的意义。植物界亚硝酸还原酶 (nitrite reductase , NiR) 存在绿色组织的叶绿体中, 它可有效催化降解亚硝酸盐。 然而天然亚硝酸还原酶提取较繁琐、 价高、 影响其活性的影响 因子也较多。
     发明内容 本发明的目的在于提供一种安全无毒的具有亚硝酸还原酶催化降解亚硝酸盐、 阻 断 N- 亚硝胺生成活性的水溶性绿色的仿生酶型水溶性亚硝酸盐复合降解剂的制备方法。
     为实现上述目的, 本发明的技术解决方案是 : 本发明是一种仿生酶型水溶性亚硝酸盐复合降解剂的制备方法, 它包括以下步骤 : (1) 复合色素溶液的制备 : (11) 将板栗壳在 35-65℃烘干、 粉碎, 用 5-60%(V/V) 乙醇 溶液作为提取剂, 用微波萃取仪进行微波萃取, 设定微波萃取条件为 : 温度 40-65℃, 压 力为 1-5 标准大气压, 功率为 300-500W ; (12) 待反应结束后冷却至 20-38℃, 过滤, 经旋转 蒸发仪减压浓缩成暗红色浸膏, 真空干燥后得板栗壳色素, 称重 ; (13) 分别在不锈钢或搪 瓷等稳定材料制成的容器中 , 加入蒸馏水、 离子交换水、 纯净水、 凉开水中的一种, 在 5-450C 搅拌下依次加入 0.01-10%(W/V) 板栗壳色素或其它具有光稳定性、 含量为 0.01-10%(W/V) 具有抗氧化性的天然食用色素, 和水溶性防腐剂制成复合色素溶液 ; (2) 复合聚阳离子溶液的制备 : 分别在用合成树脂、 不锈钢或搪瓷等稳定材料制成的容 器中加入 1-3% 醋酸水溶液, 搅拌下依次加入含量为 0.01-3%(W/V) 的天然聚阳离子、 含量为 0.01-0.5mg/100g 的活性型维生素 B2、 含量为 0.1- 136g/100g 的 Vc 溶液制成复合聚阳离 子溶液 ; (3) 复合型香辛料溶液的制备 : 分别在用合成树脂、 不锈钢或搪瓷等稳定材料制成的容 器中加入蒸馏水, 依次加入含量为 0.01-30 mg/kg 的水溶性单一或由复合天然香辛料的提 取物、 含量为 0.1-1.5%(W/W) 的磷酸盐制成复合型香辛料溶液 ; (4) 将复合型香辛料溶液加热至 45-1000C, 搅拌 1-45min, 过滤, 滤液在 15-1000C 保温 0.5-2h 后室温静置 10-60min, 搅拌下依次加入复合聚阳离子溶液与复合色素溶液 , 充分 搅拌均匀。
     步骤 (13) 中所述的抗氧化性的天然食用色素为多酚类衍生物色素、 酮类衍生物色 素、 醌类衍生物色素中的一种。
     所述的多酚类衍生物为花青素或儿茶素。
     所述的酮类衍生物为姜黄或红曲。
     所述的醌类衍生物为虫胶或胭脂虫红。
     步骤 (13) 中所述的水溶性防腐剂为山梨酸钾, 含量为 0.02%— 10%( W/V) 。
     步骤 (3) 中所述的复合天然香辛料为 0.005mg~25mg/kg 的麦芽酚或乙基麦芽酚。
     步骤 (3) 中所述的复合天然香辛料为花椒、 八角、 桂皮、 果皮中的一种。
     步骤 (3) 中所述的单一或复合天然香辛料提取物为香精或酊剂, 或以上两种或多 种香料的复合物。
     步骤 (3) 中所述的磷酸盐为三聚磷酸钠、 六偏磷酸钠、 焦磷酸钠、 磷酸三钠、 磷酸氢 二钠、 磷酸 二氢钠、 酸式焦磷酸钠、 焦磷酸二氢二钠中的一种。
     采用上述方案后, 由于本发明以水溶性天然无毒色素为基料, 纯净水为载体, 辅以 (配以) 麦芽酚、 聚阳离子、 复合磷酸盐。按以上配方配制的绿色仿生酶型亚硝酸盐复合降 解剂, 不仅对亚硝酸盐具有很好的清除作用, 而且对有毒亚硝胺的合成也具有明显的阻断 作用。 添加于加工食品中, 不仅可有效降解亚硝酸盐, 而且具有上色、 调味及一定的抗氧化、 抗菌活性。丰富食品的保健功能, 有益人体健康。
     下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明。 具体实施方式
     一、 实施例 本发明是一种仿生酶型水溶性亚硝酸盐复合降解剂的制备方法, 它包括以下步骤 : (1) 复合色素溶液的制备 : (11) 将板栗壳在 35-65℃烘干、 粉碎, 用 5-60%(V/V) 乙醇 溶液作为提取剂, 用微波萃取仪进行微波萃取, 设定微波萃取条件为 : 温度 40-65℃, 压 力为 1-5 标准大气压, 功率为 300-500W ; (12) 待反应结束后冷却至 20-38℃, 过滤, 经旋转 蒸发仪减压浓缩成暗红色浸膏, 真空干燥后得板栗壳色素, 称重 ; (13) 分别在不锈钢或搪 瓷等稳定材料制成的容器中 , 加入蒸馏水、 离子交换水、 纯净水、 凉开水中的一种, 在 5-450C 搅拌下依次加入 0.01-10%(W/V) 板栗壳色素或其它具有光稳定性、 含量为 0.01-10%(W/V) 具有抗氧化性的天然食用色素, 和水溶性防腐剂制成复合色素溶液 ; (2) 复合聚阳离子溶液的制备 : 分别在用合成树脂、 不锈钢或搪瓷等稳定材料制成的容 器中加入 1-3% 醋酸水溶液, 搅拌下依次加入含量为 0.01-3%(W/V) 的天然聚阳离子、 含量为 0.01-0.5mg/100g 的活性型维生素 B2、 含量为 0.1- 136g/100g 的 Vc 溶液制成复合聚阳离 子溶液 ; (3) 复合型香辛料溶液的制备 : 分别在用合成树脂、 不锈钢或搪瓷等稳定材料制成的容 器中加入蒸馏水, 依次加入含量为 0.01-30 mg/kg 的水溶性单一或由复合天然香辛料提取 物、 含量为 0.1-1.5%(W/W) 的磷酸盐制成复合型香辛料溶液 ; (4) 将复合型香辛料溶液加热至 45-1000C, 搅拌 1-45min, 过滤, 滤液在 15-1000C 保温 0.5-2h 后室温静置 10-60min, 搅拌下依次加入复合聚阳离子溶液与复合色素溶液 , 充分 搅拌均匀。
     在上述实施例中, 步骤 (13) 中所述的抗氧化性的天然食用色素为多酚类衍生物色 素、 酮类衍生物色素、 醌类衍生物色素中的一种。所述的多酚类衍生物为花青素或儿茶素。所述的酮类衍生物为姜黄或红曲。所述的醌类衍生物为虫胶或胭脂虫红。
     步骤 (13) 中所述的水溶性防腐剂为山梨酸钾, 含量为 0.02%— 10%( W/V) 。
     步骤 (3) 中所述的复合天然香辛料为 0.005mg~25mg/kg 的麦芽酚或乙基麦芽酚。
     步骤 (3) 中所述的复合天然香辛料为花椒、 八角、 桂皮、 果皮 (为柚子皮、 橘皮) 中的 一种。
     步骤 (3) 中所述的单一或复合天然香辛料提取物为香精或酊剂, 或以上两种或多 种香料的复合物。
     步骤 (3) 中所述的磷酸盐为三聚磷酸钠、 六偏磷酸钠、 焦磷酸钠、 磷酸三钠、 磷酸氢 二钠、 磷酸 二氢钠、 酸式焦磷酸钠、 焦磷酸二氢二钠中的一种。
     在本实施例中, 各成分功能为 : 抗氧化天然食用色素、 维生素 : 亚硝酸盐及亚硝胺生成阻断。
     聚阳离子 : 亚硝酸盐及亚硝胺生成阻断、 抗菌。
     磷酸盐 : 品质改良剂 ; 持水剂、 金属离子络合剂。
     活性型维生素 : 转递氢离子的辅酶。
     天然香辛料 : 风味剂、 抗氧化剂。 实施例 1 : 本发明是一种仿生酶型水溶性亚硝酸盐复合降解剂的制备方法, 它包括以下步骤 : (1) 复合色素溶液的制备 : (11) 将板栗壳在 35℃烘干、 粉碎, 用 5%(V/V) 乙醇溶液作 为提取剂, 用微波萃取仪进行微波萃取, 设定微波萃取条件为 : 温度 40℃, 压力为 1 标准 大气压, 功率为 300W ; (12) 待反应结束后冷却至 20℃, 过滤, 经旋转蒸发仪减压浓缩成暗 红色浸膏, 真空干燥后得板栗壳色素, 称重 ; (13) 分别在不锈钢或搪瓷等稳定材料制成的 容器中 , 加入蒸馏水、 离子交换水、 纯净水、 凉开水中的一种, 在 50C 搅拌下依次加入 0.01% (W/V) 板栗壳色素或含量为 0.01%(W/V) 具有抗氧化性的花青素、 姜黄、 虫胶和含量为 0. 02% W/V) 的山梨酸钾, 制成复合色素溶液 ; (2) 复合聚阳离子溶液的制备 : 分别在用合成树脂、 不锈钢或搪瓷等稳定材料制成的 容器中加入 1% 醋酸水溶液, 搅拌下依次加入含量为 0.01%(W/V) 的天然聚阳离子、 含量为 0.01mg/100g 的活性型维生素 B2、 含量为 0.1g/100g 的 Vc 溶液制成复合聚阳离子溶液 ; (3) 复合型香辛料溶液的制备 : 分别在用合成树脂、 不锈钢或搪瓷等稳定材料制成的容 器中加入蒸馏水, 依次加入含量为 0.01mg/kg 的水溶性单一或由 0.005mg/kg 花椒的提取的 香精或酊剂、 含量为 0.1%(W/W) 的三聚磷酸钠制成复合型香辛料溶液 ; (4) 将复合型香辛料溶液加热至 450C, 搅拌 1min, 过滤, 滤液在 150C 保温 0.5h 后室温 静置 10min, 搅拌下依次加入复合聚阳离子溶液与复合色素溶液 , 充分搅拌均匀。
     实施例 2 : 本发明是一种仿生酶型水溶性亚硝酸盐复合降解剂的制备方法, 它包括以下步骤 : (1) 复合色素溶液的制备 : (11) 将板栗壳在 65℃烘干、 粉碎, 用 60%(V/V) 乙醇溶液作 为提取剂, 用微波萃取仪进行微波萃取, 设定微波萃取条件为 : 温度 65℃, 压力为 5 标准 大气压, 功率为 500W ; (12) 待反应结束后冷却至 38℃, 过滤, 经旋转蒸发仪减压浓缩成暗红 色浸膏, 真空干燥后得板栗壳色素, 称重 ; (13) 分别在不锈钢或搪瓷等稳定材料制成的容 器中 , 加入蒸馏水、 离子交换水、 纯净水、 凉开水中的一种, 在 450C 搅拌下依次加入 10% (W/
     V) 板栗壳色素或含量为 10%(W/V) 的抗氧化性的天然食用色素儿茶素、 红曲胭脂虫红和含 量为 10%( W/V) 的山梨酸钾, 制成复合色素溶液 ; (2)复合聚阳离子溶液的制备 : 分别在用合成树脂、 不锈钢或搪瓷等稳定材料制成 的容器中加入 3% 醋酸水溶液, 搅拌下依次加入含量为 3%(W/V) 的天然聚阳离子、 含量为 0.5mg/100g 的活性型维生素 B2、 含量为 136g/100g 的 Vc 溶液制成复合聚阳离子溶液 ; (3) 复合型香辛料溶液的制备 : 分别在用合成树脂、 不锈钢或搪瓷等稳定材料制成的 容器中加入蒸馏水, 依次加入含量为 30 mg/kg 的水溶性单一或由八角提取的酊剂、 含量为 1.5%(W/W) 的六偏磷酸钠, 制成复合型香辛料溶液 ; (4) 将复合型香辛料溶液加热至 1000C, 搅拌 45min, 过滤, 滤液在 1000C 保温 2h 后室温 静置 60min, 搅拌下依次加入复合聚阳离子溶液与复合色素溶液 , 充分搅拌均匀。
     实施例 3 : 本发明是一种仿生酶型水溶性亚硝酸盐复合降解剂的制备方法, 它包括以下步骤 : (1) 复合色素溶液的制备 : (11) 将板栗壳在 50 ℃烘干、 粉碎, 用 30%(V/V) 乙醇溶液 作为提取剂, 用微波萃取仪进行微波萃取, 设定微波萃取条件为 : 温度 48℃, 压力为 3 标 准大气压, 功率为 400W ; (12) 待反应结束后冷却至 30℃, 过滤, 经旋转蒸发仪减压浓缩成 暗红色浸膏, 真空干燥后得板栗壳色素, 称重 ; (13) 分别在不锈钢或搪瓷等稳定材料制成 的容器中 , 加入蒸馏水、 离子交换水、 纯净水、 凉开水中的一种, 在 250C 搅拌下依次加入 5% (W/V) 板栗壳色素或含量为 5%(W/V) 的抗氧化性的花青素、 红曲、 虫胶和含量为 5%( W/ V) 为山梨酸钾, 制成复合色素溶液 ; (2)复合聚阳离子溶液的制备 : 分别在用合成树脂、 不锈钢或搪瓷等稳定材料制成 的容器中加入 2% 醋酸水溶液, 搅拌下依次加入含量为 2%(W/V) 的天然聚阳离子、 含量为 0.2mg/100g 的活性型维生素 B2、 含量为 80g/100g 的 Vc 溶液制成复合聚阳离子溶液 ; (3) 复合型香辛料溶液的制备 : 分别在用合成树脂、 不锈钢或搪瓷等稳定材料制成的容 器中加入蒸馏水, 依次加入含量为 20 mg/kg 的水溶性单一或 16mg/kg 的桂皮提取的香精、 含量为 1%(W/W) 磷酸氢二钠, 制成复合型香辛料溶液 ; (4) 将复合型香辛料溶液加热至 700C, 搅拌 30min, 过滤, 滤液在 600C 保温 1h 后室温静 置 40min, 搅拌下依次加入复合聚阳离子溶液与复合色素溶液 , 充分搅拌均匀。
     二、 本发明亚硝酸盐清除率的测定 : 盐酸萘乙二胺法 : 取 6 支 2 5-50 mL 比色管, 均加入模拟胃液 A 或 B (模拟胃液 A : 称取 2.0gNaC1(AR) 加去离子水溶解, 加入 7mL 浓 HC1, 加去离子水定容至 1000 mL ; 模拟胃液 B : 分别称取 2 .0gNaC1(AR) 与 3.2g 胃蛋白酶, 加去离子水分别溶解, 加入 7mL 浓 HC1, 去离子水定容 至 1000mL。 )1 0 mL,在 3 7℃水浴 1 0 mi n 取出,分别加入 0.01% ,0.05 % ,0.1 % , 0.3%, 0.5 %,1 %的样品水溶液 2mL,再加入 5 g / m L 的亚硝 酸钠标液 2m L, 分别 在 3 7℃水浴 l 0、3 O、6 0mi n 取出,立即加入 0.4 %对氨基苯磺酸 2 mL,混 匀 ,静置 5 mi n 后 ,各加 1.0 mL 0.2%盐酸萘乙 二胺溶液 ,静置 10mi n,加水至 刻度混匀 , 在 523n m 下测定吸光度 A1, 同时做以去离子水代替亚硝酸钠 标液的空白 对照实验测定吸光度 A01 与以去离子水作为空白对照实验测定吸光度 A02。 亚硝酸盐清除率 % =[ (A02 + A01 一 A1 ) / A02 ]×1 0 0实验结果 : 随着浓度 的提高与处理时间的延长 , 样品液对亚硝酸盐的清除率提 高, 且在模拟胃液 A 中清除效果优于模拟 胃液 B 。在浓度为 1 % ,模拟胃液 A 中处理 6 0 mi n 时对亚硝酸盐的清除 率最高,达到 97.3 %。
     亚硝胺阻断率 测 定 ( 采用分光光度法 ) 结果 : 取 6 支 2 5 mL 比色管 中加入模拟 胃酸 1 0 mL, 在 3 7℃水浴 5-10 mi n 取出 ,加 入 0.01 % ,0.40 % ,0.15%, 0.5 % , 0.65%, 1 % 的样品水溶液 2 mL ,再 加入 1 mm o l / L 的二甲胺溶液 1 mL , 1mmo l / L 的 Na NO, 溶液 1 mL, 用蒸 馏水稀释至刻度 , 在 3 7℃下恒温 1 h 。用移液管吸取 1 mL 上述溶液加到试 管 中, 加 人 质 量 分 数 0.5% N a 2 C O 溶液 0.5m L, 于紫外分析仪上斜放照射 l 5 mi n(254nm) 。取出后加 入质 量 分数 1 % 对 氨基 苯磺 酸 1.5mL, 再加入质量分数 0.15 %. 萘胺 1.5 mL,去离子水 0.5 mL, 摇匀静置 5min 在 520n m 下测定吸光度 A1 , 同时做以去离子水代替亚硝酸钠标液的空 白对照实验测定吸光度 A01 与以去离子水代替 样品溶液的空白对照实验测定吸光度 A02。 阻断率/ % =[(A02 + A01 一 A1 ) / A02 ]×1 0 0 实验结果 : 亚硝胺的阻断率与样品液的浓度成线性关系且差异极显著, 阻断率随着样 品液浓度提高而迅速提高。在 3 7℃、 样品浓度为 1 % , pH=3、 反应 20- 6 0 mi n 条件下 对亚硝胺合成 的阻断率 最高可达 63%。8

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1、10申请公布号CN102077931A43申请公布日20110601CN102077931ACN102077931A21申请号201010591004322申请日20101216A23L1/015200601A23L1/275200601A23L1/226200601A23L1/2920060171申请人集美大学地址361021福建省厦门市集美区银江路185号72发明人马建华黄丽萍74专利代理机构厦门市新华专利商标代理有限公司35203代理人朱凌54发明名称仿生酶型水溶性亚硝酸盐复合降解剂的制备方法57摘要本发明公开了一种仿生酶型水溶性亚硝酸盐复合降解剂的制备方法,其步骤包括复合色素溶液的制备。

2、、复合聚阳离子溶液的制备、复合型香辛料溶液的制备,将复合型香辛料溶液加热、搅拌、过滤、静置后,搅拌下依次加入复合聚阳离子溶液与复合色素溶液,充分搅拌均匀等。由于本发明以水溶性天然无毒色素为基料,纯净水为载体,辅以麦芽酚、聚阳离子、复合磷酸盐,按以上配方配制的绿色仿生酶型亚硝酸盐复合降解剂,不仅对亚硝酸盐具有很好的清除作用,而且对有毒亚硝胺的合成也具有明显的阻断作用。添加于加工食品中,不仅可有效降解亚硝酸盐,而且具有上色、调味及一定的抗氧化、抗菌活性。丰富食品的保健功能,有益人体健康。51INTCL19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书2页说明书5页CN102077934A1。

3、/2页21一种仿生酶型水溶性亚硝酸盐复合降解剂的制备方法,其特征在于它包括以下步骤1)复合色素溶液的制备(11)将板栗壳在3565烘干、粉碎,用560(V/V)乙醇溶液作为提取剂,用微波萃取仪进行微波萃取,设定微波萃取条件为温度4065,压力为15标准大气压,功率为300500W;(12)待反应结束后冷却至2038,过滤,经旋转蒸发仪减压浓缩成暗红色浸膏,真空干燥后得板栗壳色素,称重;(13)分别在不锈钢或搪瓷等稳定材料制成的容器中,加入蒸馏水、离子交换水、纯净水、凉开水中的一种,在5450C搅拌下依次加入00110(W/V)板栗壳色素或其它具有光稳定性、含量为00110(W/V)具有抗氧化性。

4、的天然食用色素,和水溶性防腐剂制成复合色素溶液;(2)复合聚阳离子溶液的制备分别在用合成树脂、不锈钢或搪瓷等稳定材料制成的容器中加入13醋酸水溶液,搅拌下依次加入含量为0013W/V的天然聚阳离子、含量为00105MG/100G的活性型维生素B2、含量为01136G/100G的VC溶液制成复合聚阳离子溶液;(3)复合型香辛料溶液的制备分别在用合成树脂、不锈钢或搪瓷等稳定材料制成的容器中加入蒸馏水,依次加入含量为00130MG/KG的水溶性单一或由复合天然香辛料的提取物、含量为0115W/W的磷酸盐制成复合型香辛料溶液;(4)将复合型香辛料溶液加热至451000C,搅拌145MIN,过滤,滤液在。

5、151000C保温052H后室温静置1060MIN,搅拌下依次加入复合聚阳离子溶液与复合色素溶液,充分搅拌均匀。2根据权利要求1所述的仿生酶型水溶性亚硝酸盐复合降解剂的制备方法,其特征在于步骤(13)中所述的抗氧化性的天然食用色素为多酚类衍生物色素、酮类衍生物色素、醌类衍生物色素中的一种。3根据权利要求2所述的仿生酶型水溶性亚硝酸盐复合降解剂的制备方法,其特征在于所述的多酚类衍生物为花青素或儿茶素。4根据权利要求2所述的仿生酶型水溶性亚硝酸盐复合降解剂的制备方法,其特征在于所述的酮类衍生物为姜黄或红曲。5根据权利要求2所述的仿生酶型水溶性亚硝酸盐复合降解剂的制备方法,其特征在于所述的醌类衍生物。

6、为虫胶或胭脂虫红。6根据权利要求1所述的仿生酶型水溶性亚硝酸盐复合降解剂的制备方法,其特征在于步骤(13)中所述的水溶性防腐剂为山梨酸钾,含量为00210(W/V)。7根据权利要求1所述的仿生酶型水溶性亚硝酸盐复合降解剂的制备方法,其特征在于步骤(3)中所述的复合天然香辛料为0005MG25MG/KG的麦芽酚或乙基麦芽酚。8根据权利要求1所述的仿生酶型水溶性亚硝酸盐复合降解剂的制备方法,其特征在于步骤(3)中所述的复合天然香辛料为花椒、八角、桂皮、果皮中的一种。9根据权利要求1所述的仿生酶型水溶性亚硝酸盐复合降解剂的制备方法,其特征在于步骤(3)中所述的单一或复合天然香辛料提取物为香精或酊剂,。

7、或以上两种或多种香料的复合物。10根据权利要求1所述的仿生酶型水溶性亚硝酸盐复合降解剂的制备方法,其特征在于步骤(3)中所述的磷酸盐为三聚磷酸钠、六偏磷酸钠、焦磷酸钠、磷酸三钠、磷酸氢二权利要求书CN102077931ACN102077934A2/2页3钠、磷酸二氢钠、酸式焦磷酸钠、焦磷酸二氢二钠中的一种。权利要求书CN102077931ACN102077934A1/5页4仿生酶型水溶性亚硝酸盐复合降解剂的制备方法技术领域0001本发明涉及一种复合化合物溶液的制备方法,特别是涉及一种仿生酶型水溶性亚硝酸盐复合降解剂的制备方法。背景技术0002亚硝酸盐是肉类加工时常用的腌制剂,不仅能使肉制品呈良。

8、好色泽,而且还具有防腐和增强风味的作用。但是,过量亚硝酸盐具有致癌作用,还会使血红蛋白失去携氧功能,因此研究食物中的亚硝酸盐残留及其降解情况,对食品工业及人类健康都具有十分重要的意义。植物界亚硝酸还原酶NITRITEREDUCTASE,NIR存在绿色组织的叶绿体中,它可有效催化降解亚硝酸盐。然而天然亚硝酸还原酶提取较繁琐、价高、影响其活性的影响因子也较多。发明内容0003本发明的目的在于提供一种安全无毒的具有亚硝酸还原酶催化降解亚硝酸盐、阻断N亚硝胺生成活性的水溶性绿色的仿生酶型水溶性亚硝酸盐复合降解剂的制备方法。0004为实现上述目的,本发明的技术解决方案是本发明是一种仿生酶型水溶性亚硝酸盐。

9、复合降解剂的制备方法,它包括以下步骤1)复合色素溶液的制备(11)将板栗壳在3565烘干、粉碎,用560(V/V)乙醇溶液作为提取剂,用微波萃取仪进行微波萃取,设定微波萃取条件为温度4065,压力为15标准大气压,功率为300500W;(12)待反应结束后冷却至2038,过滤,经旋转蒸发仪减压浓缩成暗红色浸膏,真空干燥后得板栗壳色素,称重;(13)分别在不锈钢或搪瓷等稳定材料制成的容器中,加入蒸馏水、离子交换水、纯净水、凉开水中的一种,在5450C搅拌下依次加入00110(W/V)板栗壳色素或其它具有光稳定性、含量为00110(W/V)具有抗氧化性的天然食用色素,和水溶性防腐剂制成复合色素溶液。

10、;(2)复合聚阳离子溶液的制备分别在用合成树脂、不锈钢或搪瓷等稳定材料制成的容器中加入13醋酸水溶液,搅拌下依次加入含量为0013W/V的天然聚阳离子、含量为00105MG/100G的活性型维生素B2、含量为01136G/100G的VC溶液制成复合聚阳离子溶液;(3)复合型香辛料溶液的制备分别在用合成树脂、不锈钢或搪瓷等稳定材料制成的容器中加入蒸馏水,依次加入含量为00130MG/KG的水溶性单一或由复合天然香辛料的提取物、含量为0115W/W的磷酸盐制成复合型香辛料溶液;(4)将复合型香辛料溶液加热至451000C,搅拌145MIN,过滤,滤液在151000C保温052H后室温静置1060M。

11、IN,搅拌下依次加入复合聚阳离子溶液与复合色素溶液,充分搅拌均匀。0005步骤(13)中所述的抗氧化性的天然食用色素为多酚类衍生物色素、酮类衍生物色素、醌类衍生物色素中的一种。说明书CN102077931ACN102077934A2/5页50006所述的多酚类衍生物为花青素或儿茶素。0007所述的酮类衍生物为姜黄或红曲。0008所述的醌类衍生物为虫胶或胭脂虫红。0009步骤(13)中所述的水溶性防腐剂为山梨酸钾,含量为00210(W/V)。0010步骤(3)中所述的复合天然香辛料为0005MG25MG/KG的麦芽酚或乙基麦芽酚。0011步骤(3)中所述的复合天然香辛料为花椒、八角、桂皮、果皮中。

12、的一种。0012步骤(3)中所述的单一或复合天然香辛料提取物为香精或酊剂,或以上两种或多种香料的复合物。0013步骤(3)中所述的磷酸盐为三聚磷酸钠、六偏磷酸钠、焦磷酸钠、磷酸三钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、酸式焦磷酸钠、焦磷酸二氢二钠中的一种。0014采用上述方案后,由于本发明以水溶性天然无毒色素为基料,纯净水为载体,辅以(配以)麦芽酚、聚阳离子、复合磷酸盐。按以上配方配制的绿色仿生酶型亚硝酸盐复合降解剂,不仅对亚硝酸盐具有很好的清除作用,而且对有毒亚硝胺的合成也具有明显的阻断作用。添加于加工食品中,不仅可有效降解亚硝酸盐,而且具有上色、调味及一定的抗氧化、抗菌活性。丰富食品的保健功能,有益人。

13、体健康。0015下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明。具体实施方式0016一、实施例本发明是一种仿生酶型水溶性亚硝酸盐复合降解剂的制备方法,它包括以下步骤1)复合色素溶液的制备(11)将板栗壳在3565烘干、粉碎,用560(V/V)乙醇溶液作为提取剂,用微波萃取仪进行微波萃取,设定微波萃取条件为温度4065,压力为15标准大气压,功率为300500W;(12)待反应结束后冷却至2038,过滤,经旋转蒸发仪减压浓缩成暗红色浸膏,真空干燥后得板栗壳色素,称重;(13)分别在不锈钢或搪瓷等稳定材料制成的容器中,加入蒸馏水、离子交换水、纯净水、凉开水中的一种,在5450C搅拌下依次加入00110(。

14、W/V)板栗壳色素或其它具有光稳定性、含量为00110(W/V)具有抗氧化性的天然食用色素,和水溶性防腐剂制成复合色素溶液;(2)复合聚阳离子溶液的制备分别在用合成树脂、不锈钢或搪瓷等稳定材料制成的容器中加入13醋酸水溶液,搅拌下依次加入含量为0013W/V的天然聚阳离子、含量为00105MG/100G的活性型维生素B2、含量为01136G/100G的VC溶液制成复合聚阳离子溶液;(3)复合型香辛料溶液的制备分别在用合成树脂、不锈钢或搪瓷等稳定材料制成的容器中加入蒸馏水,依次加入含量为00130MG/KG的水溶性单一或由复合天然香辛料提取物、含量为0115W/W的磷酸盐制成复合型香辛料溶液;(。

15、4)将复合型香辛料溶液加热至451000C,搅拌145MIN,过滤,滤液在151000C保温052H后室温静置1060MIN,搅拌下依次加入复合聚阳离子溶液与复合色素溶液,充分搅拌均匀。0017在上述实施例中,步骤(13)中所述的抗氧化性的天然食用色素为多酚类衍生物色素、酮类衍生物色素、醌类衍生物色素中的一种。所述的多酚类衍生物为花青素或儿茶素。说明书CN102077931ACN102077934A3/5页6所述的酮类衍生物为姜黄或红曲。所述的醌类衍生物为虫胶或胭脂虫红。0018步骤(13)中所述的水溶性防腐剂为山梨酸钾,含量为00210(W/V)。0019步骤(3)中所述的复合天然香辛料为0。

16、005MG25MG/KG的麦芽酚或乙基麦芽酚。0020步骤(3)中所述的复合天然香辛料为花椒、八角、桂皮、果皮(为柚子皮、橘皮)中的一种。0021步骤(3)中所述的单一或复合天然香辛料提取物为香精或酊剂,或以上两种或多种香料的复合物。0022步骤(3)中所述的磷酸盐为三聚磷酸钠、六偏磷酸钠、焦磷酸钠、磷酸三钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、酸式焦磷酸钠、焦磷酸二氢二钠中的一种。0023在本实施例中,各成分功能为抗氧化天然食用色素、维生素亚硝酸盐及亚硝胺生成阻断。0024聚阳离子亚硝酸盐及亚硝胺生成阻断、抗菌。0025磷酸盐品质改良剂;持水剂、金属离子络合剂。0026活性型维生素转递氢离子的辅酶。00。

17、27天然香辛料风味剂、抗氧化剂。0028实施例1本发明是一种仿生酶型水溶性亚硝酸盐复合降解剂的制备方法,它包括以下步骤1)复合色素溶液的制备(11)将板栗壳在35烘干、粉碎,用5(V/V)乙醇溶液作为提取剂,用微波萃取仪进行微波萃取,设定微波萃取条件为温度40,压力为1标准大气压,功率为300W;(12)待反应结束后冷却至20,过滤,经旋转蒸发仪减压浓缩成暗红色浸膏,真空干燥后得板栗壳色素,称重;(13)分别在不锈钢或搪瓷等稳定材料制成的容器中,加入蒸馏水、离子交换水、纯净水、凉开水中的一种,在50C搅拌下依次加入001(W/V)板栗壳色素或含量为001(W/V)具有抗氧化性的花青素、姜黄、虫。

18、胶和含量为002W/V)的山梨酸钾,制成复合色素溶液;(2)复合聚阳离子溶液的制备分别在用合成树脂、不锈钢或搪瓷等稳定材料制成的容器中加入1醋酸水溶液,搅拌下依次加入含量为001W/V的天然聚阳离子、含量为001MG/100G的活性型维生素B2、含量为01G/100G的VC溶液制成复合聚阳离子溶液;(3)复合型香辛料溶液的制备分别在用合成树脂、不锈钢或搪瓷等稳定材料制成的容器中加入蒸馏水,依次加入含量为001MG/KG的水溶性单一或由0005MG/KG花椒的提取的香精或酊剂、含量为01W/W的三聚磷酸钠制成复合型香辛料溶液;(4)将复合型香辛料溶液加热至450C,搅拌1MIN,过滤,滤液在15。

19、0C保温05H后室温静置10MIN,搅拌下依次加入复合聚阳离子溶液与复合色素溶液,充分搅拌均匀。0029实施例2本发明是一种仿生酶型水溶性亚硝酸盐复合降解剂的制备方法,它包括以下步骤1)复合色素溶液的制备(11)将板栗壳在65烘干、粉碎,用60(V/V)乙醇溶液作为提取剂,用微波萃取仪进行微波萃取,设定微波萃取条件为温度65,压力为5标准大气压,功率为500W;(12)待反应结束后冷却至38,过滤,经旋转蒸发仪减压浓缩成暗红色浸膏,真空干燥后得板栗壳色素,称重;(13)分别在不锈钢或搪瓷等稳定材料制成的容器中,加入蒸馏水、离子交换水、纯净水、凉开水中的一种,在450C搅拌下依次加入10(W/说。

20、明书CN102077931ACN102077934A4/5页7V)板栗壳色素或含量为10(W/V)的抗氧化性的天然食用色素儿茶素、红曲胭脂虫红和含量为10(W/V)的山梨酸钾,制成复合色素溶液;(2)复合聚阳离子溶液的制备分别在用合成树脂、不锈钢或搪瓷等稳定材料制成的容器中加入3醋酸水溶液,搅拌下依次加入含量为3W/V的天然聚阳离子、含量为05MG/100G的活性型维生素B2、含量为136G/100G的VC溶液制成复合聚阳离子溶液;(3)复合型香辛料溶液的制备分别在用合成树脂、不锈钢或搪瓷等稳定材料制成的容器中加入蒸馏水,依次加入含量为30MG/KG的水溶性单一或由八角提取的酊剂、含量为15W。

21、/W的六偏磷酸钠,制成复合型香辛料溶液;(4)将复合型香辛料溶液加热至1000C,搅拌45MIN,过滤,滤液在1000C保温2H后室温静置60MIN,搅拌下依次加入复合聚阳离子溶液与复合色素溶液,充分搅拌均匀。0030实施例3本发明是一种仿生酶型水溶性亚硝酸盐复合降解剂的制备方法,它包括以下步骤1)复合色素溶液的制备(11)将板栗壳在50烘干、粉碎,用30(V/V)乙醇溶液作为提取剂,用微波萃取仪进行微波萃取,设定微波萃取条件为温度48,压力为3标准大气压,功率为400W;(12)待反应结束后冷却至30,过滤,经旋转蒸发仪减压浓缩成暗红色浸膏,真空干燥后得板栗壳色素,称重;(13)分别在不锈钢。

22、或搪瓷等稳定材料制成的容器中,加入蒸馏水、离子交换水、纯净水、凉开水中的一种,在250C搅拌下依次加入5(W/V)板栗壳色素或含量为5(W/V)的抗氧化性的花青素、红曲、虫胶和含量为5(W/V)为山梨酸钾,制成复合色素溶液;(2)复合聚阳离子溶液的制备分别在用合成树脂、不锈钢或搪瓷等稳定材料制成的容器中加入2醋酸水溶液,搅拌下依次加入含量为2W/V的天然聚阳离子、含量为02MG/100G的活性型维生素B2、含量为80G/100G的VC溶液制成复合聚阳离子溶液;(3)复合型香辛料溶液的制备分别在用合成树脂、不锈钢或搪瓷等稳定材料制成的容器中加入蒸馏水,依次加入含量为20MG/KG的水溶性单一或1。

23、6MG/KG的桂皮提取的香精、含量为1W/W磷酸氢二钠,制成复合型香辛料溶液;(4)将复合型香辛料溶液加热至700C,搅拌30MIN,过滤,滤液在600C保温1H后室温静置40MIN,搅拌下依次加入复合聚阳离子溶液与复合色素溶液,充分搅拌均匀。0031二、本发明亚硝酸盐清除率的测定盐酸萘乙二胺法取6支2550ML比色管,均加入模拟胃液A或B(模拟胃液A称取20GNAC1AR加去离子水溶解,加入7ML浓HC1,加去离子水定容至1000ML;模拟胃液B分别称取20GNAC1AR与32G胃蛋白酶,加去离子水分别溶解,加入7ML浓HC1,去离子水定容至1000ML。)10ML,在37水浴10MIN取出。

24、,分别加入001,005,01,03,05,1的样品水溶液2ML,再加入5GML的亚硝酸钠标液2ML,分别在37水浴L0、3O、60MIN取出,立即加入04对氨基苯磺酸2ML,混匀,静置5MIN后,各加10ML02盐酸萘乙二胺溶液,静置10MIN,加水至刻度混匀,在523NM下测定吸光度A1,同时做以去离子水代替亚硝酸钠标液的空白对照实验测定吸光度A01与以去离子水作为空白对照实验测定吸光度A02。亚硝酸盐清除率A02A01一A1A02100说明书CN102077931ACN102077934A5/5页8实验结果随着浓度的提高与处理时间的延长,样品液对亚硝酸盐的清除率提高,且在模拟胃液A中清除。

25、效果优于模拟胃液B。在浓度为1,模拟胃液A中处理60MIN时对亚硝酸盐的清除率最高,达到973。0032亚硝胺阻断率测定采用分光光度法结果取6支25ML比色管中加入模拟胃酸10ML,在37水浴510MIN取出,加入001,040,015,05,065,1的样品水溶液2ML,再加入1MMOLL的二甲胺溶液1ML,1MMOLL的NANO,溶液1ML,用蒸馏水稀释至刻度,在37下恒温1H。用移液管吸取1ML上述溶液加到试管中,加人质量分数05NA2CO溶液05ML,于紫外分析仪上斜放照射L5MIN254NM。取出后加入质量分数1对氨基苯磺酸15ML,再加入质量分数015萘胺15ML,去离子水05ML,摇匀静置5MIN在520NM下测定吸光度A1,同时做以去离子水代替亚硝酸钠标液的空白对照实验测定吸光度A01与以去离子水代替样品溶液的空白对照实验测定吸光度A02。阻断率A02A01一A1A02100实验结果亚硝胺的阻断率与样品液的浓度成线性关系且差异极显著,阻断率随着样品液浓度提高而迅速提高。在37、样品浓度为1,PH3、反应2060MIN条件下对亚硝胺合成的阻断率最高可达63。说明书CN102077931A。

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