含1,3二杂苯并五元环的异羟肟酸类衍生物、其制备方法和用途.pdf

本发明涉及感染相关的药物领域，具体而言，本发明涉及具有抑制肽脱甲酰化酶(PDF)作用而产生抗菌性能的含1，3-二杂苯并五元环的异羟肟酸类衍生物或其盐、其制备方法、它们的药物组合物，以及在制备抗菌药物方面的应用。其中，各基团定义如说明书所述。

1.  具有通式I的化合物或其药学上可接受的盐及其合成方法和用途

其中，
X＝O、NH、S；
R₁为H、含C₁-C₅的直链或支链烷基；
R₂、R₃为H或C₁-C₅直链或支链烷基、-OR′、-SR′、-卤素、-CN、-NHCOR′、-N(R′)₂、-NO₂、-COOR′、CONR′等取代基；其中，R’为含H、C₁-C₅的直链或支链烷基、芳基、环状烷基、环状饱和杂环基；R₂和R₃可以采用相同或不同的取代基。

2.  权利要求1所定义的通式I化合物或其药学上可接受的盐，其中优选，
X＝O、NH、S；
R₁为：H、异丙基、甲基、乙基、正丙基、正丁基、异丁基、叔丁基；
R₂和R₃为：H、甲基、乙基、正丙基、异丙基；羟基、甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、甲巯基、乙巯基；氟、氯、溴、-CN、-N(C₁-C₃)₂、-NHCOR′、-NO₂、-COOR′、CONR′，其中，R’为甲基、乙基、正丙基或异丙基、苯基、取代的苯基、环状烷基、环状饱和杂坏基。
R₂和R₃可以采用相同或不同的取代基。

3.  权利要求1所定义的通式I化合物或其药学上可接受的盐，选自：
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-[1-(S)-(苯并咪唑-2-基)-2-甲基]丙基丁二酰胺
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-[1-(S)-(5-哌啶碳酰基-苯并咪唑-2-基)-2-甲基]丙基丁二酰胺
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-[1-(S)-(5-甲基-苯并咪唑-2-基)-2-甲基]丙基丁二酰胺
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-[1-(S)-(5-甲氧基-苯并咪唑-2-基)-2-甲基]丙基丁二酰胺
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-[1-(S)-(5-吗啉碳酰基-苯并咪唑-2-基)-2-甲基]丙基丁二酰胺
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-{1-(S)-[5-(4-甲氧苯胺基-碳酰基)-苯并咪唑-2-基]-2-甲基}丙基丁二酰胺
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-[1-(S)-(5-环己胺碳酰基-苯并咪唑-2-基)-2-甲基]丙基丁二酰胺
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-[1-(S)-(5，6-二甲基-苯并噻唑-2-基)-2-甲基]丙基丁二酰胺
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-[1-(S)-(苯并噁唑-2-基)]乙基丁二酰胺
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-(5-甲硫基-苯并噁唑-2-基)甲基丁二酰胺
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-(5-氯-苯并噁唑-2-基)甲基丁二酰胺
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-(6-二甲氨基-苯并噁唑-2-基)甲基丁二酰胺
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-(6-乙酰氨基-苯并噁唑-2-基)甲基丁二酰胺
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-(6-氨甲酰基-苯并噁唑-2-基)甲基丁二酰胺
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-(6-腈基-苯并噁唑-2-基)甲基丁二酰胺
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-(5-硝基-苯并噁唑-2-基)甲基丁二酰胺

4.  合成权利要求1-3之一的通式I化合物的方法，包括以下步骤：
将VI溶于干燥THF，加1-羟基苯并三氮唑和DCC，自然升至室温反应3h，过滤，滤液中加入V，充分反应IV得。将IV溶于甲醇，加入5％Pd/C，常压H₂还原，反应完全后，过滤除去Pd/C，滤液减压浓缩得类白色固体。事先将4，6-二甲氧基-2-氯-1，3，5-三嗪(CDMT)和(R)-(+)-2-丁基-丁二酸-4-叔丁基单酯溶于干燥二氯甲烷，冰盐浴下滴加N-甲基吗啉，充分反应后，加入上步所得类白色固体，冰盐浴下反应一定时间后，室温反应过夜，得III。III先与无水甲酸室温搅拌10h，再在4-二甲氨基吡啶(DMAP)和DCC催化下，0℃反应得II。II在NaCN存在的情况下与羟胺反应得到I。

其中：R1、R2、R3的定义同上文所述，R为适当的氨基保护基团。

5.  权利要求1-3所定义的通式I化合物或其药学上可接受的盐在制备抗菌药物方面的应用。

6.  一种药物组合物，含有权利要求1-3之一的通式I化合物或其药学上可接受的盐，以及适当的载体或赋形剂。

7.  权利要求6所述的药物组合物，其中，所述的组合物为固体口服制剂、液体口服制剂或注射剂。

含1，3-二杂苯并五元环的异羟肟酸类衍生物、其制备方法和用途
技术领域
本发明涉及感染相关的药物领域，具体而言，本发明涉及具有抑制肽脱甲酰化酶(PDF)作用而产生抗菌性能的含1，3-二杂苯并五元环的异羟肟酸类衍生物、其制备方法、它们的药物组合物，以及在制备抗菌药物方面的应用。
背景技术
人类一直面临的最严重的问题之一就是与感染疾病的长期斗争。近年来，由于抗生素的广泛使用，耐药菌大量增加和蔓延，迫切需要研究新的抗菌药物。肽脱甲酰酶(Peptide deformylase，PDF)所催化的肽脱甲酰化是大肠杆菌和绝大部分细菌代谢中的必需过程。由于PDF在细菌中广泛分布，PDF抑制剂有可能成为广谱的抗菌药物，因此，PDF酶抑制剂类成为一个诱人的新抗生素靶点。文献报道的有PDF抑制活性的化合物有以下几类：放线酰胺菌素[Chen，D.Z.et al.(2000)Biochemistry.39，1256-1262；Apfel，C.M.et al.(2001)Antimicrob Agents Chemother.45(4)1053-1057；Apfel，C.M.etal.(2001)Antimicrob Agents Chemother.45(4)1058-1064.]；D.V.Patel，et al WO9957097(VERSICOR，INT.US)；非肽类[Jayasekera，M.M.K.et al.(2000)Arch BiochemBiophys.381，313-316.]；异羟肟酸[Apfel，C.et al.(2000)J.Med.Chem.43，2324-2331.]，[Apfel，C.et al，(2001)J.Med.Chem.44，1847-1852.]；肽醛类[Durand，D.J.et al.(1999)ArchBiochem Biophys.367(2)297-302.]，其它[Huntington，K.M.et al.(2000)Biochemistry.39(15)4543-4551.]。含异噁唑的异羟肟酸系列化合物[王建武，徐为人，贾炯等，CN2003101069275]。
发明内容
本发明的一个目的是针对抗菌药物在临床上普遍存在耐药现象的缺点和不足，从新的机制上寻找活性更好的抗菌药物。提供了具有通式I的化合物或其药学上可接受的盐。
本发明另一个目的是提供具有通式I结构的化合物或其药学上可接受的盐的制备方法。
本发明的再一个目的是提供含有通式I化合物或其药学上可接受的盐作为有效成分，以及一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂的药用组合物，及其在预防和治疗敏感细菌引起的感染中的应用。
现结合本发明的目的对本发明逐一加以描述：
本发明的通式I化合物具有下述结构式：

其中，
X＝O、NH、S；
R₁为H、含C₁-C₅的直链或支链烷基；
R₂、R₃为H或C₁-C₅直链或支链烷基、-OR′、-SR′、-卤素、-CN、-NHCOR′、-N(R′)₂、-NO₂、-COOR′、CONR′等取代基；其中，R’为含H、C₁-C₅的直链或支链烷基、芳基、环状烷基、环状饱和杂环基；R₂和R₃可以采用相同或不同的取代基。
优先以下通式I化合物或其药学上可接受的盐，其中，
X＝O、NH、S；
R₁为：H、异丙基、甲基、乙基、正丙基、正丁基、异丁基、叔丁基；
R₂和R₃为：H、甲基、乙基、正丙基、异丙基；羟基、甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、甲巯基、乙巯基；氟、氯、溴、-CN、-N(C₁-C₃)₂、-NHCOR′、-NO₂、-COOR′、CONR′，其中，R’为甲基、乙基、正丙基或异丙基、苯基、取代的苯基、环状烷基、环状饱和杂坏基。
R₂和R₃可以采用相同或不同的取代基。
更优选的本发明通式I化合物，选自：
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-[1-(S)-(苯并咪唑-2-基)-2-甲基]丙基丁二酰胺
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-[1-(S)-(5-哌啶碳酰基-苯并咪唑-2-基)-2-甲基]丙基丁二酰胺
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-[1-(S)-(5-甲基-苯并咪唑-2-基)-2-甲基]丙基丁二酰胺
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-[1-(S)-(5-甲氧基-苯并咪唑-2-基)-2-甲基]丙基丁二酰胺
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-[1-(S)-(5-吗啉碳酰基-苯并咪唑-2-基)-2-甲基]丙基丁二酰胺
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-{1-(S)-[5-(4-甲氧苯胺基-碳酰基)-苯并咪唑-2-基]-2-甲基}丙基丁二酰胺
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-[1-(S)-(5-环己胺碳酰基-苯并咪唑-2-基)-2-甲基]丙基丁二酰胺
(R)-2-丁基-N⁴-基-N¹-[1-(S)-(5，6-二甲基-苯并噻唑-2-基)-2-甲基]丙基丁二酰胺
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-[1-(S)-(苯并噁唑-2-基)]乙基丁二酰胺
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-(5-甲硫基-苯并噁唑-2-基)甲基丁二酰胺
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-(5-氯-苯并噁唑-2-基)甲基丁二酰胺
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-(6-二甲氨基-苯并噁唑-2-基)甲基丁二酰胺
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-(6-乙酰氨基-苯并噁唑-2-基)甲基丁二酰胺
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-(6-氨甲酰基-苯并噁唑-2-基)甲基丁二酰胺
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-(6-腈基-苯并噁唑-2-基)甲基丁二酰胺
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-(5-硝基-苯并噁唑-2-基)甲基丁二酰胺
本发明所述通式I化合物通过以下通式步骤合成：
将VI溶于干燥THF，加1-羟基苯并三氮唑和DCC，自然升至室温反应3h，过滤，滤液中加入V，充分反应IV得。将IV溶于甲醇，加入5％Pd/C，常压H₂还原，反应完全后，过滤除去Pd/C，滤液减压浓缩得类白色固体。事先将4，6-二甲氧基-2-氯-1，3，5-三嗪(CDMT)和(R)-(+)-2-丁基-丁二酸-4-叔丁基单酯溶于干燥二氯甲烷，冰盐浴下滴加N-甲基吗啉，充分反应后，加入上步所得类白色固体，冰盐浴下反应一定时间后，室温反应过夜，得III。III先与无水甲酸室温搅拌10h，再在4-二甲氨基吡啶(DMAP)和DCC催化下，0℃反应得II。II在NaCN存在的情况下与羟胺反应得到I。

其中：R1、R2、R3的定义同上文所述，R为适当的氨基保护基团。
本发明所述式I化合物的药学上可接受的盐，根据不同衍生物可以含有酸性或碱性基团，酸性基团可与碱性物质(如碱金属或碱土金属的氢氧化物、碳酸盐和碳酸氢盐)反应，它们包括，但不限于：氢氧化钠，氢氧化钾，氢氧化钙，碳酸钠等形成药学上可接受的盐，如相应的钠盐，钾盐或钙盐等等。也可采用常见的有机碱如甲胺、三乙胺、葡甲胺等生成盐；碱性基团可以与各种无机酸(如，盐酸、硫酸、硝酸、磷酸等，但不仅限于此)或有机酸(甲酸、乙酸、柠檬酸、草酸、富马酸、马来酸、氨基酸等等，但不仅限于此)生成盐。
本发明所述式I化合物或其药学上可接受的盐，可以与一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂共同制成药物组合物。该药物组合物可以制成固体口服制剂、液体口服制剂、注射剂等剂型。所述固体及液体口服制剂包括：片剂、分散片、糖衣剂、颗粒剂、干粉剂、胶囊剂和溶液剂。所述的注射剂包括：小针、大输液、冻干粉针等。
本发明通式I化合物的生物活性通过以下方式测定：
培养基：M-H肉汤培养基、M-H琼脂培养基；标准菌种：金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯杆菌，藤黄八叠球菌，以上菌种均购于中国药品生物制品检定所。
仪器与设备：YXQGO2电热压力蒸气消毒器、TJ型洁净工作台、Forma Scientific二氧化碳隔水式培养箱、sartoriusBS124S电子天平、针式滤器0.22μm直径滤膜(水膜)、25cm*25cm玻璃平皿、96孔板。
样品配制：精确称量约1.6mg样品，加适量DMSO溶解后，加生理盐水稀释到5ml，用0.22μm直径滤膜过滤除菌得2ml，再用肉汤稀释到5ml，得到浓度为：128μg/ml的药液，然后用肉汤培养基进行倍比稀释得到浓度为：64，32，16，8，4，2μg/ml的药液备用。
菌液的配制：在无菌条件下，用无菌接种环取2-3个湿润的菌落，加入到5ml生理盐水中，浊度相当于第一个麦氏管的浊度，此时，菌液中的细菌含量是1×10⁸CFU/ml.备用。
样品的抗菌活性测定：在96孔板上的第A行与第H行分别加入200μl的肉汤培养基和200μl的菌液作为对照，第1列-第8列依次加入8个样品，浓度从B到G由大到小(32，16，8，4，2，1).以观察到的澄清最低浓度为MIC.
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的说明。需要说明的是，下述实施例仅是用于说明，而并非用于限制本发明。本领域技术人员根据本发明的教导所做出的各种变化均应在本申请权利要求所要求的保护范围之内。
实施例1
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-[1-(S)-(苯并咪唑-2-基)-2-甲基]丙基丁二酰胺的合成
(1)N-苄氧羰基-(1S)-(1-苯并咪唑-2-基)-2-甲基丙胺

将Z-Valine(1.38g，5.5mmol)溶于干燥THF，加入1-羟基苯并三氮唑(0.82g，6.05mmol)，0℃下分批加入DCC(1.2g，5.8mmol)，自然升至室温反应3h，过滤，滤液中加入邻苯二胺(0.54g，5mmol)，室温反应7h，过滤，滤液减压浓缩，残余物硅胶柱粗分(二氯甲烷∶甲醇＝20∶1)，得浅黄色固体1.19g。
将上步所得固体溶于8mL冰醋酸，70-75℃反应7h，减压蒸去醋酸，残余物硅胶柱分离(石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1)，得浅黄色固体0.79g，收率71％，mp 182-184℃；[α]_D²⁵＝-58.5(c1，MeOH)；¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ0.93(d，J＝6.7Hz，3H)，1.05(d，J＝6.5Hz，3H)，2.45-2.55(m，1H)，4.66(t，J＝8Hz，1H)，4.98(d，J＝12Hz，1H)，5.10(d，J＝12Hz，1H)，6.09(d，J＝7.8Hz，1H)，7.19-7.28(m，7H)，7.45-7.53(m，2H).
(2)N-[1-(S)-(苯并咪唑-2-基)-2-甲基]丙基-(R)-2-叔丁氧羰甲基己酰胺

将上步产物(0.72g，1.65mmol)溶于甲醇(15mL)，加入5％Pd/C 145mg，常压H₂还原，3h后TLC检查原料反应完全，过滤除去Pd/C，滤液减压浓缩得类白色固体498mg。
将4，6-二甲氧基-2-氯-1，3，5-三嗪(CDMT)(318.5mg，1.82mmol)和(R)-(+)-2-丁基-丁二酸-4-叔丁基单酯(379mg，1.65mmol)溶于干燥二氯甲烷(10mL)，冰盐浴下滴加N-甲基吗啡啉(200mg，1.98mmol)，反应4h后，加入上步所得类白色固体498mg，冰盐浴下反应2h后，室温反应过夜。过滤除去沉淀，以少量二氯甲烷洗涤沉淀，合并洗液和滤液，依次用水、0.5N盐酸、饱和NaHCO₃、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥后减压浓缩得白色固体，将此粗产物以硅胶柱分离(二氯甲烷∶甲醇＝30∶1)得白色固体830mg，收率90％；mp 70-72℃；¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ0.65(t，J＝6.8Hz，3H)，0.80(d，J＝6.7Hz，3H)，0.96(d，J＝6.6Hz，3H)，1.00-1.30(m，6H)，1.37(s，9H)，2.18-2.25(m，2H)，2.42(dd，J＝9，16Hz，1H)，2.71-2.76(m，1H)，4.87(t，J＝8.5Hz，1H)，7.11-7.18(m，2H)，7.44(d，J＝6.8Hz，1H)，7.55(d，J＝6.8Hz，1H)，8.30(d，J＝8.8Hz，1H)，12.19(s，1H)；ESI-MS m/z 402[M+H]⁺.
(3)N-[1-(S)-(苯并咪唑-2-基)-2-甲基]丙基-(R)-2-甲氧羰甲基己酰胺

将上步产物(815mg，1.58mmol)溶于无水甲酸10mL，室温搅拌10h，减压浓缩，得白色固体710mg。
将上步所得固体溶于CH₂Cl₂(10mL)，加入甲醇1.5mL和4-二甲氨基吡啶(DMAP)(19mg，0.155mmol)，0℃下分批加入DCC(335mg，1.63mmol)，0℃继续搅拌反应0.5h，室温反应12h，过滤，减压浓缩得白色固体，粗产物硅胶柱分离(石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1)得白色固体550mg，收率70％；mp 165-168℃；¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ0.64(t，J＝6.8Hz，3H)，0.80(d，J＝6.7Hz，3H)，0.94(d，J＝6.7Hz，3H)，1.00-1.42(m，6H)，2.19-2.28(m，1H)，2.36(dd，J＝5.2，16Hz，1H)，2.54(dd，J＝9.3，16Hz，1H)，2.72-2.80(m，1H)，3.55(s，3H)，4.86(t，J＝8.5Hz，1H)，7.10-7.16(m，2H)，，7.44(dd，J＝2.1，6.4Hz，1H)，7.55(dd，J＝1.7，6.8Hz，1H)，8.34(d，J＝9.2Hz，1H)，12.20(s，1H)；ESI-MS m/z 360[M+H]⁺.
(4)(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-[1-(S)-(苯并咪唑-2-基)-2-甲基]丙基丁二酰胺

将上步产物(320mg，0.678mmol)溶于4mL甲醇/四氢呋喃溶液(1∶1)中，加入50％的羟胺溶液(0.42mL，6.78mmol)，加入30mg NaCN，室温搅拌反应5h，TLC监测原料反应完全，加几滴冰醋酸调节pH＝6，减压浓缩，残余物硅胶柱分离(二氯甲烷∶甲醇＝20∶1)得白色固体176mg白色固体，收率70％；mp 132-134℃；¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ0.65(t，J＝6.9Hz，3H)，0.80(d，J＝6.7Hz，3H)，0.94(d，J＝6.7Hz，3H)，1.01-1.42(m，6H)，2.06(dd，J＝7.4，14.5Hz，1H)，2.21-2.30(m，2H)，2.70-2.75(m，1H)，4.87(t，J＝8.4Hz，1H)，7.12-7.14(m，2H)，7.50(brs，2H)。
实施例2
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-[1-(S)-(5-哌啶碳酰基-苯并咪唑-2-基)-2-甲基]丙基丁二酰胺的合成
参照实施例1的方法，将3，4-二氨基-苯甲酰哌啶代替邻苯二胺作为反应物V，得到白色固体，收率：77％；m.p.138-140℃；[α]_D²⁰＝-78.3(c 0.3，MeOH).¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：0.62(t，J＝6.7Hz，3H)，0.81(d，J＝6.6Hz，3H)，0.96(d，J＝6.6Hz，3H)，1.03-1.38(m，6H)，1.50-1.61(m，6H)，2.05(dd，J＝7.4，14.5Hz，1H)，2.19-2.32(m，2H)，2.70-2.77(m，1H)，3.33-3.60(m，4H)，4.87(t，J＝8.4Hz，1H)，7.15(brs，1H)，7.46-7.56(m，2H).
实施例3
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-[1-(S)-(5-甲基-苯并咪唑-2-基)-2-甲基]丙基丁二酰胺的合成
参照实施例1的方法，将4-甲基-邻苯二胺代替邻苯二胺作为反应物V，得到白色固体，收率：65％；m.p.134-135℃；[α]_D²⁰＝-101.7(c 0.3，MeOH).¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：0.66(t，J＝6.8Hz，3H)，0.80(d，J＝6.7Hz，3H)，0.93(d，J＝6.7Hz，3H)，1.05-1.40(m，6H)，2.06(dd，J＝7.2，14.4Hz，1H)，2.19-2.27(m，2H)，2.39(s，3H)，2.72-2.75(m，1H)，4.85(t，J＝8.4Hz，1H)，6.95(d，J＝7.8Hz，1H)，7.24-7.38(m，2H)。
实施例4
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-[1-(S)-(5-甲氧基-苯并咪唑-2-基)-2-甲基]丙基丁二酰胺的合成
参照实施例1的方法，将4-甲氧基-邻苯二胺代替邻苯二胺作为反应物V，得到白色固体，收率：75％；m.p.123-125℃；[α]_D²⁵＝-85.0(c 0.3，MeOH).¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：0.66(t，J＝6.9Hz，3H)，0.79(d，J＝6.7Hz，3H)，0.93(d，J＝6.6Hz，3H)，1.04-1.38(m，6H)，2.05(dd，J＝7.4，14.5Hz，1H)，2.19-2.26(m，2H)，2.71-2.74(m，1H)，3.76(s，3H)，4.83(t，J＝8.4Hz，1H)，6.77(s，1H)，6.94(brs，1H)，7.40(brs，1H)。
实施例5
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-[1-(S)-(5-吗啉碳酰基-苯并咪唑-2-基)-2-甲基]丙基丁二酰胺的合成
参照实施例1的方法，将3，4-二氨基-苯甲酰吗啉代替邻苯二胺作为反应物V，得到白色固体，收率：80％；m.p.142-144℃；[α]_D²⁰＝-70.0(c 0.3，MeOH).¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：0.63(t，J＝6.5Hz，3H)，0.81(d，J＝6.6Hz，3H)，0.95(d，J＝6.6Hz，3H)，1.00-1.40(m，6H)，2.05(dd，J＝7.4，14Hz，1H)，2.20-2.31(m，2H)，2.72-2.75(m，1H)，3.51-3.60(m，8H)，4.86(t，J＝8.3Hz，1H)，7.20(d，J＝7.8Hz，1H)，7.55(brs，2H)，8.34(d，J＝8.7Hz，1H)。
实施例6
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-{1-(S)-[5-(4-甲氧苯胺基-碳酰基)-苯并咪唑-2-基]-2-甲基}丙基丁二酰胺的合成
参照实施例1的方法，将3，4-二氨基-N-(4-甲氧苯基)-苯甲酰胺代替邻苯二胺作为反应物V，得到白色固体，收率：70％；m.p.201-203℃；[α]_D²⁰＝-78.3(c 0.3，MeOH).¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：0.65(t，J＝6.4Hz，3H)，0.82(d，J＝6.0Hz，3H)，0.96(d，J＝6.5Hz，3H)，1.04-1.37(m，6H)，2.06(dd，J＝6.8，14.4Hz，1H)，2.21-2.41(m，2H)，2.73-2.76(m，1H)，3.75(s，3H)，4.89(t，J＝8.2Hz，1H)，6.93(d，J＝8.8Hz，2H)，7.54(d，J＝8Hz，1H)，7.70(d，J＝8Hz，2H)，7.78-7.80(m，1H)，8.23(s，1H).IR(KBr)v/cm^-1：3299，3035，2918，1641，1621，1530。
实施例7
(R)2-丁基-N⁴-羟基-N¹-[1-(S)-(5-环己胺碳酰基-苯并咪唑-2-基)-2-甲基]丙基丁二酰胺的合成
参照实施例1的方法，将3，4-二氨基-N-(环己基)-苯甲酰胺代替邻苯二胺作为反应物V，得到白色固体，收率：73％；m.p.220-222℃；[α]_D²⁰＝-80.0(c 0.3，MeOH).¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ：0.65(t，J＝6.6Hz，3H)，0.80(d，J＝6.5Hz，3H)，0.95(d，J＝6.6Hz，3H)，1.03-1.34(m，12H)，1.74-1.89(m，4H)，2.05(dd，J＝7.3，14.6Hz，1H)，2.22-2.32(m，2H)，2.72-2.75(m，1H)，3.73-3.80(m，1H)，4.87(t，J＝8.2Hz，1H)，7.47-7.55(m，1H)，7.68(s，1H)，7.90-8.12(m，2H)。
实施例8
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-[1-(S)-(5，6-二甲基-苯并噻唑-2-基)-2-甲基]丙基丁二酰胺的合成
参照实施例1的方法，将4，5-二甲基-2-胺基-苯硫酚代替邻苯二胺作为反应物V，得到白色固体，收率：67％；m.p.144-145℃。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ：0.65(t，J＝6.8Hz，3H)，0.80(d，J＝6.7Hz，3H)，0.92(d，J＝6.7Hz，3H)，1.05-1.40(m，6H)，2.05(dd，J＝7.2，14.4Hz，1H)，2.18-2.26(m，2H)，2.34(s，6H)，2.72-2.75(m，1H)，4.85(t，J＝8.4Hz，1H)，7.55(s，1H)，7.68(s，1H)。
实施例9
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-[1-(S)-(苯并噁唑-2-基)]乙基丁二酰胺的合成
参照实施例1的方法，将2-胺基-苯酚代替邻苯二胺作为反应物V，氨基保护的丙氨酸作为反应物VI，得到白色固体，收率75％；mp 138-139℃；¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ0.65(t，J＝6.9Hz，3H)，0.82(d，J＝6.7Hz，3H)，1.01-1.42(m，6H)，2.21-2.30(m，2H)，2.70-2.75(m，1H)，4.87(t，J＝8.4Hz，1H)，7.22-7.34(m，2H)，7.64(brs，2H)。
实施例10
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-(5-甲硫基-苯并噁唑-2-基)甲基丁二酰胺的合成
参照实施例1的方法，将4-甲硫基-2-胺基苯酚二代替邻苯二胺作为反应物V，氨基保护的甘氨酸作为IV也反应得到白色固体，收率：72％；m.p.154-156℃。1HNMR(DMSO-d6，400MHz)δ：0.66(t，J＝6.8Hz，3H)，1.05-1.40(m，6H)，2.19-2.27(m，2H)，2.51(s，3H)，2.74-2.76(m，1H)，4.56(s，2H)，6.97(d，J＝7.8Hz，1H)，7.35-7.58(m，2H)。
实施例11
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-(5-氯-苯并噁唑-2-基)甲基丁二酰胺的合成
参照实施例1的方法，将4-氯-2-胺基-苯酚代替邻苯二胺作为反应物V，氨基保护的甘氨酸作为IV也反应得到白色固体，收率：70％；m.p.131-133℃。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ：0.66(t，J＝6.8Hz，3H)，1.05-1.40(m，6H)，2.19-2.27(m，2H)，2.74-2.76(m，1H)，4.58(s，2H)，7.45-7.78(m，3H)。
实施例12
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-(6-二甲氨基-苯并噁唑-2-基)甲基-丁二酰胺的合成
参照实施例1的方法，将2-胺基-5-二甲氨基-苯酚代替邻苯二胺作为反应物V，氨基保护的甘氨酸作为IV也反应得到自色固体，收率：53％；m.p.156-158℃。1HNMR(DMSO-d6，400MHz)δ：0.67(t，J＝6.8Hz，3H)，1.04-1.39(m，6H)，2.17-2.25(m，2H)，2.73-2.75(m，1H)，2.93(s，6H)，4.36(s，2H)，6.65-7.34(m，3H)。
实施例13
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-[1-(6-乙酰氨基-苯并噁唑-2-基)]甲基丁二酰胺的合成
参照实施例1的方法，将2-胺基-5-乙酰氨基-苯酚代替邻苯二胺作为反应物V，氨基保护的甘氨酸作为IV也反应得到白色固体，收率：63％；m.p.173-175℃。1HNMR(DMSO-d6，400MHz)δ：0.67(t，J＝6.8Hz，3H)，1.04-1.39(m，6H)，2.04(s，3H)，2.17-2.25(m，2H)，2.74-2.76(m，1H)，4.46(s，2H)，7.55-7.74(m，2H)，7.94(s，1H)。
实施例14
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-(6-氨甲酰基-苯并噁唑-2-基)甲基-丁二酰胺的合成
参照实施例1的方法，将3-羟基-4-胺基-苯甲酰氨代替邻苯二胺作为反应物V，氨基保护的甘氨酸作为IV也反应得到白色固体，收率：47％；m.p.203-205℃。1HNMR(DMSO-d6，400MHz)δ：0.69(t，J＝6.8Hz，3H)，1.05-1.39(m，6H)，2.17-2.25(m，2H)，2.74-2.76(m，1H)，4.52(s，2H)，7.75-7.96(m，3H)。
实施例15
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-(6-腈基-苯并噁唑-2-基)甲基-丁二酰胺的合成
参照实施例1的方法，将2-胺基-5-腈基-苯酚代替邻苯二胺作为反应物V，氨基保护的甘氨酸作为IV也反应得到白色固体，收率：51％；m.p.185-187℃。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ：0.69(t，J＝6.8Hz，3H)，1.05-1.39(m，6H)，2.17-2.25(m，2H)，2.74-2.76(m，1H)，4.48(s，2H)，7.45-7.75(m，3H)。
实施例16
(R)-2-丁基-N⁴-羟基-N¹-(5-硝基-苯并噁唑-2-基)甲基丁二酰胺的合成
参照实施例1的方法，将2-胺基-4-硝基-苯酚代替邻苯二胺作为反应物V，氨基保护的甘氨酸作为IV也反应得到白色固体，收率：58％；m.p.235-237℃。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ：0.69(t，J＝6.8Hz，3H)，1.05-1.39(m，6H)，2.17-2.25(m，2H)，2.74-2.76(m，1H)，4.62(s，2H)，7.95-8.25(m，3H)。
实施例17
取实施例12的产物0.2克，加盐酸(1mol/L)溶液适量，微热使溶解，加等体积的无水乙醇，放置，充分结晶，收集得盐酸盐。
实施例18
                    用量/片
实施例1样品         50mg
微晶纤维素          50mg
预胶化淀粉          40mg
聚乙烯吡咯烷酮      3mg
羧甲基淀粉钠盐      5mg
硬脂酸镁            1mg
滑石粉              1mg
将活性成分、预胶化淀粉和微晶纤维素过筛，充分混合，加入聚乙烯吡咯烷酮溶液，混合，制软材，过筛，制湿颗粒，于50-60℃干燥，将羧甲基淀粉钠盐，硬脂酸镁和滑石粉预先过筛，然后加入到上述的颗粒中压片。
实施例19
                    用量/粒
实施例1样品         100mg
微晶纤维素          50mg
预胶化淀粉          40mg
聚乙烯吡咯烷酮      3mg
硬脂酸镁            2mg
滑石粉              1mg
将活性成分、预胶化淀粉和微晶纤维素过筛，充分混合，加入聚乙烯吡咯烷酮溶液，混合，制软材，过筛，制湿颗粒，于50-60℃干燥，将硬脂酸镁和滑石粉预先过筛，然后加入到上述的颗粒中，装胶囊，即得。
实施例20
                    用量/50ml
实施例17样品        500mg
柠檬酸              200mg
NaOH                适量(调pH 4.0-5.0)
蒸馏水              50ml
在蒸馏水中，先加入蒸馏水和柠檬酸，搅拌溶解和后，再加入样品，微热使溶解，调pH值为4.0-5.0，加0.2克活性碳，室温下搅拌20分钟，过滤，滤液，中控测定溶液浓度，按每安瓶5毫升分装，高温灭菌30分钟，即得注射液。
活性测定结果
样品的最小抑菌浓度(MIC，ug/ml)