小麦田的田间除草方法 【技术领域】
本发明涉及小麦田的田间除草方法，使用磺酰脲化合物作为除草剂。
背景技术
磺酰脲类化合物作为除草剂已有许多专利报道，美国专利US 5160365、US 5591694和US6228808报道了下式结构的化合物：
这些商品化的磺酰脲除草剂品种在其分子中的杂环上都具有双取代的结构特征。美国杜邦公司的G.Levitt特别指出，磺酰脲分子必须在其杂环部分的4，6两个位置上都有取代基才有足够的除草活性(参见Synthesisand Chemistry of Agrochemicals II，ACS Symposium Series No.443，Washington DC：American Chemistry Society，1991，16-31)。进一步的研究表明，磺酰脲类除草剂对植物体内特有的靶酶乙酰羟酸合成酶(也称乙酰乳酸合成酶，缩写为AHAS或ALS)有超高效抑制活性，AHAS对植物体内支链氨基酸合成过程起重要的催化作用，受到抑制后会导致植物生长停滞甚至死亡(参见Synthesis and Chemistry of Agrochemicals II，ACSSymposium Series No.443，Washington DC：American Chemistry Society，1991，32-50)。
中国专利CN 1106393A公开了下述的通式磺酰脲化合物，但未公开其中的所有化合物详细的生物活性测试结果、具体应用对象及应用剂量。也未涉及进一步的对AHAS酶抑制活性测试试验结果。
【发明内容】
本发明的目的在于提供一种小麦田的田间除草方法，它是使用上述的通式磺酰脲化合物中的特定磺酰脲化合物，用作小麦田的除草剂，对杂草具有很高的活性，除对双子叶杂草有很好活性外，对稗草等单子叶杂草也有一定的活性，它对小麦地安全性高，可直接使用于小麦田的田间除草。
本发明是使用有效量的活性成分下式(I)化合物用于小麦田的除草：
上述化合物应用于小麦田除草，每亩有效成分0.25-2克，优选地为0.5-1克，在小麦播后苗前土表喷雾，或苗后茎叶处理，可有效防除阔叶类杂草，防效与商品化品种巨星(tribenuron-methyl)相当，而对稗草的防效要优于巨星。化合物对AHAS酶的抑制常数与巨星相当，表明是一类强AHAS抑制剂，通过抑制杂草的AHAS酶活性而达到除草之目的。
本发明的方法除去小麦田的杂草，对杂草具有很高的活性，除对双子叶杂草有很好活性外，对稗草等单子叶杂草也有较好活性，它对小麦的安全性高，对于野油菜、反枝苋等双子叶杂草防除效果显著。
本发明实质性特点可从下述实施例中得以体现，但这些实施例仅作为说明，而不是对本发明进行限制。
【具体实施方式】
实施例1：
式(I)化合物的制备
在100mL反应瓶中加入4.3g(0.02mol)邻甲氧羰基苯磺酰胺，35mL甲苯和7.0g草酰氯，在60℃反应2小时后，回流12小时，冷却，过滤，蒸去溶剂和过量草酰氯。将残留物加入含2.5g 2-氨基-4-甲氧基嘧啶及30mL乙腈的反应瓶中，反应2小时后过滤，将所得固体纯化，得3.3g淡黄色固体，即化合物(I)，总收率45％。熔点185-186℃。
用实施例1所制得化合物(I)进行下述试验。
实施例2：对AHAS酶的抑制常数Ki
Ki指的是酶和抑制剂复合物的离解常数，一般将离解50％时抑制剂的浓度(摩尔浓度)定义为离解常数(亦称抑制常数)。拟南芥AHAS的基因(pET-ATAHAS：T86-CHis)由大肠杆菌(BL21(DE3))超量表达，经培养和诱导后离心收集所得细胞，再经粉碎和提取后，提取液通过固定金属亲和色谱纯化后得纯的AHAS，置于缓冲液中-70℃保存。将冷冻的酶溶解稀释，使最终的吸光度小于2以进行Ki的测定。反应液体积为250μL，含有50mM、PH值为7.0的K2HPO4/KH2PO4缓冲体系，50mM的丙酮酸钠，10mM的MgCl2，1mM的二磷酸硫胺(ThDP)，10μM的黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)，不同浓度的待测磺酰脲样品及AHAS，反应在37℃下引发30min，加入25μL 10％的H2SO4停止反应。将体系在60℃中加热15min，使生成的乙酰乳酸全部转化成3-羟基-2-丁酮，然后加入250μL0.5％的肌酸和250μL5％的α-萘酚(在4MNaOH中)，在60℃中再加热15min，冷却15min，读取525nM的吸光度。Ki由公式Vmax(app)＝Vmax/(1+[I]/Ki)用GraFit统计软件计算得到。表1为测试结果。
实施例3：温室盆栽药效试验
在直径8cm的塑料小杯中放入80g风干土，加入32ml水，播种后覆盖0.5-1.0cm厚土壤，于温室中培养，幼苗出土前以塑料覆盖。每天加足量水以保持正常生长。用溶解在无毒溶剂中的待测药剂在出苗前做土壤处理，以空白作对照。第15天调查结果，测定地上部鲜重，以鲜重抑制百分率来表示药效。
表2为温室盆栽药效试验结果。
实施例4：对作物的安全性试验
在塑料小杯中或瓦盆中放入200g或400g风干土，加入80ml或160ml水，播种后覆盖0.5-1.0cm厚土壤，于温室中培养，幼苗出土前以塑料覆盖。每天加足量水以保持正常生长。以空白作对照，处理后第35天调查结果，测定地上部鲜重，以鲜重抑制百分率来表示安全性。表3为安全性试验结果。
表1对AHAS酶的抑制常数药剂I巨星(tribenuron-methyl)Ki(μmol/L)0.5602±0.0193 0.3162±0.0210
表2温室盆栽药效(鲜重抑制百分率)代号剂量(克有效成分/亩)野油菜反枝苋稗草马唐I0.2583.483.334.23.80.590.888.949.711.51.092.891.756.320.22.095.291.774.434.64.096.291.782.646.2巨星10％可湿性粉剂0.2588.469.435.124.00.590.280.639.635.61.092.283.346.240.42.095.288.948.148.14.096.691.759.551.9
表3对作物的安全性(鲜重抑制百分率)药剂剂量(克有效成分/亩)小麦谷子水稻大豆棉花I206.627.933.5043.830.668.842.433.1823.743.210047.358.4巨星10％可湿性粉剂2044.810027.611.04063.410032.8727.8