GPCR激动剂.pdf

式(I)的化合物，或其药学可接受的盐是GPCR激动剂，并用于治疗肥胖和糖尿病。

1、  式(I)的化合物或其药学可接受的盐：

其中V为任选地被C_1-4烷基取代的含有最多4个选自O、N和S的杂原子的5元杂芳基环；
A为-CH＝CH-或(CH₂)_n；
B为-CH＝CH-或(CH₂)_n，其中CH₂基团中的一个可被O、NR⁵、S(O)_m、C(O)、C(O)NR⁵、CH(NR⁵R⁵⁵)、CH(OH)、C(O)O、C(O)S、SC(O)或OC(O)代替；
n独立地为0、1、2或3；
m独立地为0、1或2；
x为0、1、2或3；
y为1、2、3、4或5；
条件是x+y为2、3、4或5；
G为CHR¹²或NR²；
R¹为苯基或含有最多4个选自O、N和S的杂原子的5-或6-元杂芳基，它们中任何一个可任选地被一个或多个选自卤素、C_1-4烷基、C_1-4氟烷基、C_1-4羟基烷基、C_2-4烯基、C_2-4炔基、C_3-7环烷基、芳基、OR⁶、CN、NO₂、-(CH₂)_j-S(O)_mR⁶、-(CH₂)_j-C(O)NR⁶R⁶⁶、NR⁶R⁶⁶、NR¹⁰C(O)R⁶、NR¹⁰C(O)NR⁶R⁶⁶、NR¹⁰SO₂R⁶、SO₂NR⁶R⁶⁶、C(O)R¹⁰、C(O)OR¹⁰、-(CH₂)_j-(4-至7-元杂环基)或-(CH₂)_j-(5-至6-元杂芳基)的取代基取代；条件是R¹不为任选取代的3-或4-吡啶基、4-或5-嘧啶基或2-吡嗪基；
j为0、1或2；
R²为C(O)OR³、C(O)NR³R¹³、C_1-4亚烷基-C(O)OR³、C(O)C(O)OR³、S(O)₂R³、C(O)R³或P(O)(O-Ph)₂；或杂环基或杂芳基，两者中任何一个可任选地被一个或两个选自C_1-4烷基、C_1-4烷氧基或卤素的基团取代；
R³为C_1-8烷基、C_2-8烯基或者C_2-8炔基，它们中任何一个可任选地被一个或多个卤原子、NR⁴R⁴⁴、OR⁴、C(O)OR⁴、OC(O)R⁴或氰基取代且其所含的CH₂基团可被O或S代替；或者为C_3-7环烷基、芳基、杂环基、杂芳基、C_1-4亚烷基C_3-7环烷基、C_1-4亚烷基芳基、C_1-4亚烷基杂环基或C_1-4亚烷基杂芳基，它们中任何一个可被一个或多个选自卤素、C_1-4烷基、C_1-4氟烷基、OR⁴、CN、NR⁴R⁴⁴、SO₂Me、NO₂或C(O)OR⁴的取代基取代；
R⁴和R⁴⁴独立地为氢或C_1-4烷基；或者R⁴和R⁴⁴可共同形成5-或6-元杂环；
R⁵和R⁵⁵独立地表示氢或C_1-4烷基；
R⁶和R⁶⁶独立地为氢或可任选地被卤素、羟基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷硫基、C_3-7杂环基、-C(O)OR¹⁴或N(R¹⁰)₂取代的C_1-4烷基；或者为C_3-7环烷基、芳基、杂环基或杂芳基，其中这些环状基团可被一个或多个选自卤素、C_1-4烷基、C_1-4氟烷基、OR⁹、CN、SO₂CH₃、N(R¹⁰)₂和NO₂的取代基取代；或者R⁶和R⁶⁶可共同形成任选地被羟基、C_1-4烷基或C_1-4羟基烷基取代并任选地含有选自O和NR¹⁰的另外的杂原子的4-至6-元杂环，或者R⁶⁶为C_1-4烷氧基；
R⁹为氢、C_1-2烷基或C_1-2氟烷基；
R¹⁰独立地为氢或C_1-4烷基；或者基团N(R¹⁰)₂可形成任选地含有选自O和NR¹⁰的另外的杂原子的4-至7-元杂环；
R¹²为C_3-6烷基；
R¹³和R¹⁴独立地为氢或C_1-4烷基。

2、  根据权利要求1的化合物或其药学可接受的盐，其中V代表含有最多3个选自O、N和S的杂原子的下式的5-元杂芳基环：

其中W、X和Y代表杂原子的位置，或相反代表CH。

3、  根据权利要求2的化合物或其药学可接受的盐，其中W、X和Y中的两个为N，而另一个为O。

4、  根据权利要求2或3的化合物或其药学可接受的盐，其中W为N。

5、  根据前述权利要求中任一项的化合物或其药学可接受的盐，其中基团A和B中的n不都代表0。

6、  根据前述权利要求中任一项的化合物或其药学可接受的盐，其中A为(CH₂)_n，其中n为0、1或2。

7、  根据权利要求6的化合物或其药学可接受的盐，其中在A中，n为0。

8、  根据前述权利要求中任一项的化合物或其药学可接受的盐，其中B为(CH₂)_n，其中n为1、2或3。

9、  根据权利要求8的化合物或其药学可接受的盐，其中在B中，n为2或3。

10、  根据权利要求9的化合物或其药学可接受的盐，其中在B中，n为2。

11、  根据前述权利要求中任一项的化合物或其药学可接受的盐，其中R¹为苯基或含有最多两个选自O、N和S的杂原子的6-元杂芳基，两者中任何一个可任选地被取代。

12、  根据权利要求11的化合物或其药学可接受的盐，其中R¹为任选取代的苯基。

13、  根据前述权利要求中任一项的化合物或其药学可接受的盐，其中G为NR²。

14、  根据前述权利要求中任一项的化合物或其药学可接受的盐，其中x和y各自代表1。

15、  根据权利要求1至13中任一项的化合物或其药学可接受的盐，其中x和y各自代表2。

16、  根据前述权利要求中任一项的化合物或其药学可接受的盐，其中R²为C(O)OR³、C(O)NR³R¹³或杂芳基。

17、  根据权利要求16的化合物或其药学可接受的盐，其中R²为C(O)OR³。

18、  据前述权利要求中任一项的化合物或其药学可接受的盐，其中R³代表任选地被一个或多个卤原子或氰基取代且其所含的CH₂基团可被O或S代替的C_1-8烷基、C_2-8烯基或C_2-8炔基；或者C_3-7环烷基或芳基，两者中任何一个可被一个或多个选自卤素、C_1-4烷基、C_1-4氟烷基、OR⁴、CN、NR⁴R⁴⁴、NO₂或C(O)OC_1-4烷基的取代基取代。

19、  根据权利要求18的化合物或其药学可接受的盐，其中R³代表任选地被一个或多个卤原子或氰基取代且其所含的CH₂基团可被O或S代替的C_2-5烷基；或者任选地被卤素、C_1-4烷基、C_1-4氟烷基、OR⁴、CN、NR⁴R⁴⁴、NO₂或C(O)OC_1-4烷基取代的C_3-5环烷基。

20、  式(Ib)的根据权利要求1的化合物或其药学可接受的盐：

其中：
R^a和R^c独立地代表氢、氟、氯、甲基或CN；
R^b代表S(O)_mR⁶、C(O)NR⁶R⁶⁶、SO₂NR⁶R⁶⁶、NR¹⁰C(O)R⁶、NR¹⁰SO₂R⁶、NR¹⁰C(O)NR⁶R⁶⁶或5-元杂芳基；
R³代表C_2-5烷基或C_3-5环烷基，其可任选地被甲基取代；
m代表1或2；
R⁶和R⁶⁶独立地代表氢或C_1-4烷基，其可任选地被羟基或NH₂取代，可选地，R⁶和R⁶⁶可共同形成任选地被OH或CH₂OH取代的5-或6-元杂环；且
R¹⁰独立地为氢或C_1-4烷基；或者基团N(R¹⁰)₂可形成任选地含有选自O和NR¹⁰的另外的杂原子的4-至7-元杂环。

21、  如实施例1至238中任一个所定义的通式(I)的化合物或其药物学可接受的盐。

22、  药物组合物，其包含根据权利要求1至21中任一项的化合物或其药物学可接受的盐；以及药学可接受的载体。

23、  治疗其中GPR119起作用的疾病或病症的方法，其包括向有此需要的个体给药有效量的根据权利要求1至21中任一项的化合物或其药学可接受的盐的步骤。

24、  调节过饱的方法，其包括向有此需要的个体给药有效量的根据权利要求1至21中任一项的化合物或其药学可接受的盐的步骤。

25、  治疗肥胖的方法，其包括向有此需要的个体给药有效量的根据权利要求1至21中任一项的化合物或其药学可接受的盐的步骤。

26、  治疗糖尿病的方法，其包括向有此需要的个体给药有效量的根据权利要求1至21中任一项的化合物或其药学可接受的盐的步骤。

27、  治疗代谢综合征(X综合征)、葡萄糖耐量降低、高脂血症、高甘油三酯血症、高胆固醇血症、低HDL水平或高血压的方法，其包括向有此需要的患者给药有效量的根据权利要求1至21中任一项的化合物或其药学可接受的盐的步骤。

28、  根据权利要求1至21中任一项的化合物或其药学可接受的盐，其用作药物。

29、  根据权利要求1至21中任一项的化合物或其药学可接受的盐，其用于制备治疗或预防如权利要求23至27中任一项所定义的疾病或病症的药物。

30、  根据权利要求1至21中任一项的化合物或其药学可接受的盐，其用于治疗或预防如权利要求23至27中任一项所定义的疾病或病症。

31、  式(XXVII)的化合物：

或其药学可接受的盐，其中基团R¹、A、V、B、x和y如权利要求1中所定义。

GPCR激动剂
发明背景
本发明涉及G-蛋白偶联受体(GPCR)激动剂。特别地，本发明涉及用于治疗肥胖例如作为过饱调节剂，以及用于治疗糖尿病的GPCR激动剂。
肥胖以脂肪组织质量相对于身体大小过量为特征。临床上，体脂质量通过身体质量指数(BMI；体重(kg)/身高(m)²)或腰围来评估。当BMI大于30时，个体被认为是肥胖的并且具有确定的源自超重的医学后果。体重增加尤其是腹部体脂导致的体重增加与患糖尿病、高血压、心脏病以及多种其他健康并发症例如关节炎、中风、胆囊疾病、肌肉和呼吸问题、背痛以及甚至某些癌症的风险增加有关，这在一段时期以来已成为公认的医学观点。
治疗肥胖的药理学方法主要涉及通过改变能量摄取和消耗之间的平衡来减少脂肪质量。大量研究已经明确确定了肥胖与能量动态平衡的调节所涉及的脑回路之间具有联系。直接和间接证据表明血清素途径、多巴胺能途径、肾上腺素能途径、胆碱能途径、内源性大麻素途径、类阿片途径和组胺能途径以及众多神经肽途径(如神经肽Y和黑皮质素(melanocortin))与能量摄取和消耗的中枢控制有关。下丘脑中枢还可以感知与维持体重以及肥胖度有关的外围激素如胰岛素和瘦素，以及源自脂肪组织的肽。
针对与胰岛素依赖性I型糖尿病以及非胰岛素依赖性II型糖尿病有关的病理生理学的药物存在许多潜在的副作用并且在大多数患者中并不能充分解决血脂异常以及高血糖症的问题。治疗方法使用饮食、锻炼、降血糖药物以及胰岛素，通常集中于个体患者的需要，但对新型的抗糖尿病药物，尤其是能够较好地耐受且具有更少的副作用的新型抗糖尿病药物的需要一直存在。
类似地，以高血压及其相关的病理包括动脉硬化、脂血症、高血脂以及高胆固醇血症为特征的代谢综合征(综合征X)被认为与受激发时可导致血糖水平异常的胰岛素敏感性降低有关。心肌缺血以及微脉管疾病被确认为是与未被治疗或控制不佳的代谢综合征有关的病态。
人们对新型抗肥胖和抗糖尿病药物，尤其是对具有良好耐受性且具有很少副作用的新型抗肥胖和抗糖尿病药物的需要一直存在。
GPR119(过去称为GPR116)是在同时公开了人和大鼠受体的WO00/50562中被鉴定为SNORF25的GPCR，US 6,468,756也公开了小鼠受体(编号：AAN95194(人)、AAN95195(大鼠)、AAN95196(小鼠))。
在人中，GPR119在胰腺、小肠、结肠以及脂肪组织中表达。人GPR119受体的表达谱表明它具有作为治疗肥胖和糖尿病的靶标应用的潜力。
国际专利申请WO2005/061489(在本申请的优先权日后公布)公开了作为GPR119受体激动剂的杂环衍生物。
本发明涉及用于治疗肥胖例如作为过饱的外周调节剂，以及用于治疗糖尿病的GPR119激动剂。
发明概述
式(I)的化合物：

或其药学可接受的盐是GPR119激动剂，并用作肥胖和糖尿病的预防性治疗或治疗性治疗。
发明详述
本发明涉及式(I)的化合物或其药学可接受的盐：

其中V为任选地被C_1-4烷基取代的含有最多4个选自O、N和S的杂原子的5元杂芳基环；
A为-CH＝CH-或(CH₂)_n；
B为-CH＝CH-或(CH₂)_n，其中CH₂基团中的一个可被O、NR⁵、S(O)_m、C(O)或C(O)NR⁵、CH(NR⁵R⁵⁵)、CH(OH)、C(O)O、C(O)S、SC(O)或OC(O)代替；
n独立地为0、1、2或3；
m独立地为0、1或2；
x为0、1、2或3；
y为1、2、3、4或5；
条件是x+y为2、3、4或5；
G为CHR¹²或NR²；
R¹为苯基或含有最多4个选自O、N和S的杂原子的5-或6-元杂芳基，它们中任何一个可任选地被一个或多个选自卤素、C_1-4烷基、C_1-4氟烷基、C_1-4羟基烷基、C_2-4烯基、C_2-4炔基、C_3-7环烷基、芳基、OR⁶、CN、NO₂、-(CH₂)_j-S(O)_mR⁶、-(CH₂)_j-C(O)NR⁶R⁶⁶、NR⁶R⁶⁶、NR¹⁰C(O)R⁶、NR¹⁰C(O)NR⁶R⁶⁶、NR¹⁰SO₂R⁶、SO₂NR⁶R⁶⁶、C(O)R¹⁰、C(O)OR¹⁰、-(CH₂)_j-(4-至7-元杂环基)或-(CH₂)_j-(5-至6-元杂芳基)的取代基取代；条件是R¹不为任选取代的3-或4-吡啶基、4-或5-嘧啶基或2-吡嗪基；
j为0、1或2；
R²为C(O)OR³、C(O)NR³R¹³、C_1-4亚烷基-C(O)OR³、C(O)C(O)OR³、S(O)₂R³、C(O)R³或P(O)(O-Ph)₂；或杂环基或杂芳基，两者中任何一个可任选地被一个或两个选自C_1-4烷基、C_1-4烷氧基或卤素的基团取代；
R³为C_1-8烷基、C_2-8烯基或者C_2-8炔基，它们中任何一个可任选地被一个或多个卤原子、NR⁴R⁴⁴、OR⁴、C(O)OR⁴、OC(O)R⁴或氰基取代且其所含的CH₂基团可被O或S代替；或者为C_3-7环烷基、芳基、杂环基、杂芳基、C_1-4亚烷基C_3-7环烷基、C_1-4亚烷基芳基、C_1-4亚烷基杂环基或C_1-4亚烷基杂芳基，它们中任何一个可任选地被一个或多个选自卤素、C_1-4烷基、C_1-4氟烷基、OR⁴、CN、NR⁴R⁴⁴、SO₂Me、NO₂或C(O)OR⁴的取代基取代；
R⁴和R⁴⁴独立地为氢或C_1-4烷基；或者R⁴和R⁴⁴可共同形成5-或6-元杂环；
R⁵和R⁵⁵独立地表示氢或C_1-4烷基；
R⁶和R⁶⁶独立地为氢或C_1-4烷基，其可任选地被卤素、羟基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷硫基、C_3-7杂环基、-C(O)OR¹⁴或N(R¹⁰)₂取代；或者为C_3-7环烷基、芳基、杂环基或杂芳基，其中这些环状基团可被一个或多个选自卤素、C_1-4烷基、C_1-4氟烷基、OR⁹、CN、SO₂CH₃、N(R¹⁰)₂和NO₂的取代基所取代；或者R⁶和R⁶⁶可共同形成任选地被羟基、C_1-4烷基或C_1-4羟基烷基取代的并任选地含有选自O和NR¹⁰的另外的杂原子的4-至6-元杂环，或者R⁶⁶为C_1-4烷氧基；
R⁹为氢、C_1-2烷基或C_1-2氟烷基；
R¹⁰独立地为氢或C_1-4烷基；或者基团N(R¹⁰)₂可形成任选地含有选自O和NR¹⁰的另外的杂原子的4-至7-元杂环；
R¹²为C_3-6烷基；且
R¹³和R¹⁴独立地为氢或C_1-4烷基。
式(I)的化合物的分子量优选低于800，更优选低于600，特别是低于500。
在式(I)的化合物中，V优选为含有最多3个选自O、N和S的杂原子的下式的5-元杂芳基环：

其中W、X和Y代表杂原子的位置，或相反代表CH。
V可以代表的特定杂环包括噁二唑、噁唑、异噁唑、噻二唑、噻唑、咪唑和吡唑。特定的V基团为噁二唑如1，2，4-噁二唑。
适当地，W、X和Y中的至少两个代表N。
优选地，W、X和Y中的两个为N，而另一个为O。
W优选为N。
优选地，基团A和B不都代表键，即：在各种情况下n不为0。
A优选为(CH₂)_n，其中n优选为0、1或2，更优选为0。
适当地，B为-CH＝CH-或(CH₂)_n，其中CH₂基团之一可被O、NR⁵、S(O)_m、C(O)、C(O)NR⁵、CH(NR⁵R⁵⁵)、C(O)O、C(O)S、SC(O)或OC(O)代替。
B优选为(CH₂)_n，其中n优选为1、2或3，更优选为2或3，特别是2。
当B中的CH₂基团之一被代替时，它优选地被O或NR⁵代替，更优选地被O代替。在本发明的一个实施方案中，B中的CH₂基团被代替。在本发明的另一实施方案中，B中的CH₂基团不被代替。
适当地，R¹为苯基或含有最多4个选自O、N和S的杂原子的5-或6-元杂芳基，它们中任何一个可任选地被一个或多个选自卤素、C_1-4烷基、C_1-4氟烷基、C_1-4羟基烷基、C_2-4烯基、C_2-4炔基、C_3-7环烷基、芳基、OR⁶、CN、NO₂、S(O)_mR⁶、CON(R⁶)R⁶⁶、NR⁶R⁶⁶、NR¹⁰C(O)R⁶R⁶⁶、NR¹⁰C(O)R⁶、NR¹⁰SO₂R⁶、SO₂NR⁶R⁶⁶、C(O)R¹⁰、C(O)OR¹⁰、4-至7-元杂环基或5-或6-元杂芳基的取代基取代；条件是R¹不为任选取代的3-或4-吡啶基、4-或5-嘧啶基或2-吡嗪基。
在本发明的一个实施方案中，R¹为苯基或含有最多4个选自O、N和S的杂原子的5-或6-元杂芳基，它们中任何一个可任选地被一个或多个选自卤素、C_1-4烷基、C_1-4氟烷基、C_1-4羟基烷基、C_2-4烯基、C_2-4炔基、C_3-7环烷基、芳基、OR⁶、CN、NO₂、S(O)_mR⁶、CON(R⁶)R⁶⁶、NR⁶R⁶⁶、NR¹⁰C(O)R⁶、NR¹⁰SO₂R⁶、SO₂NR⁶R⁶⁶、C(O)R¹⁰、C(O)OR¹⁰、4-至7-元杂环基或5-或6-元杂芳基的取代基取代；条件是R¹不为任选取代的3-或4-吡啶基、4-或5-嘧啶基或2-吡嗪基。
R¹优选为苯基或含有最多两个N杂原子的6-元杂芳基，两个环中任何一个可任选地被取代，特别是任选地被苯基取代。当R¹为苯基或6-元杂芳基时，其优选在间位和/或对位取代。
R¹杂芳基的实例包括噁唑基、异噁唑基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、呋喃基、哒嗪基或2-吡啶基。
对于R¹的优选的取代基为卤素、C_1-4烷基、C_1-4氟烷基、C_2-4烯基、C_2-4炔基、CN、S(O)_mR⁶、NR¹⁰C(O)NR⁶R⁶⁶、C(O)NR⁶R⁶⁶、SO₂NR⁶R⁶⁶、NR¹⁰SO₂R⁶、COR¹⁰、C(O)OR¹⁰或5-或6-元杂芳基；特别地为卤素(如：氟或氯)、C_1-4烷基、C_1-4氟烷基、C_2-4烯基、C_2-4炔基、CN、S(O)_mR⁶、NR¹⁰C(O)NR⁶R⁶⁶、C(O)NR⁶R⁶⁶或SO₂NR⁶R⁶⁶或5-元杂芳基；特别地为氟、氯、甲基、S(O)_mR⁶(如：其中m为1或2)、NR¹⁰C(O)NR⁶R⁶⁶、C(O)NR⁶R⁶⁶或SO₂NR⁶R⁶⁶或5-元杂芳基。
R¹的取代基的另外的基团为卤素、C_1-4烷基、C_1-4氟烷基、C_2-4烯基、C_2-4炔基、CN、S(O)_mR⁶、C(O)NR⁶R⁶⁶、SO₂NR⁶R⁶⁶、NR¹⁰SO₂R⁶、COR¹⁰、C(O)OR¹⁰或5-或6-元杂芳基；特别地为卤素(如：氟或氯)、C_1-4烷基、C_1-4氟烷基、C_2-4烯基、C_2-4炔基、CN、S(O)_mR⁶、C(O)NR⁶R⁶⁶或SO₂NR⁶R⁶⁶或5-元杂芳基；特别地为氟、氯、甲基、S(O)_mR⁶(如：其中m为1或2)、C(O)NR⁶R⁶⁶或SO₂NR⁶R⁶⁶。
适当地，j为0或1。在本发明的一个实施方案中，j代表0。在本发明的第二实施方案中，j代表1。
G优选为NR²。
在本发明的一个实施方案中，x+y为2、3或4。适当地，x为1或2且y为1或2。在本发明的优选的实施方案中，x和y各自代表1。在本发明的更优选的实施方案中，x和y各自代表2。
R²优选为C(O)OR³、C(O)NR³R¹³、C_1-4亚烷基-C(O)OR³、C(O)C(O)OR³、杂环基、杂芳基、S(O)₂R³、C(O)R³或P(O)(O-Ph)₂；特别地为C(O)OR³、C(O)NR³R¹³、C_1-4亚烷基-C(O)OR³、杂芳基、S(O)₂R³或C(O)R³；特别地为C(O)OR³、C(O)NR³R¹³、杂芳基、S(O)₂R³或C(O)R³。更优选地，R²为C(O)OR³、C(O)NR³R¹³或杂芳基。R²最优选为C(O)OR³。当R²为杂芳基时，该杂芳基环优选为含有最多4个选自N、O和S的杂原子的5-或6-元杂芳基环，适当地为吡啶基如2-吡啶基、噁二唑基或嘧啶基，优选为嘧啶基，特别地为嘧啶-2-基。R²可代表的杂环包括含有1或2个N或O原子的4-至7-元环，R²可代表的杂环的实例包括氮杂环丁烷、吡咯烷、哌啶和哌嗪。R²杂环基也可含有另外的杂原子，如：吗啉。
优选地，R³代表任选地被一个或多个卤原子、NR⁴R⁴⁴、OR⁴、C(O)OR⁴、OC(O)R⁴或氰基取代且其所含的CH₂基团可被O或S代替的C_1-8烷基、C_2-8烯基或C_2-8炔基；或者C_3-7环烷基、芳基或C_1-4烷基C_3-7环烷基，它们中任何一个可被一个或多个选自卤素、C_1-4烷基、C_1-4氟烷基、OR⁴、CN、NR⁴R⁴⁴、NO₂或C(O)OC_1-4烷基的取代基取代。更优选地，R³代表任选地被一个或多个卤原子或氰基取代且其所含的CH₂基团可被O或S代替的C_1-8烷基、C_2-8烯基或C_2-8炔基；或者C_3-7环烷基或芳基，两者中任何一个可被一个或多个选自卤素、C_1-4烷基、C_1-4氟烷基、OR⁴、CN、NR⁴R⁴⁴、NO₂或C(O)OC_1-4烷基的取代基取代。最优选的R³基团为C_2-5烷基，如：任选地被一个或多个卤原子或CN取代且其所含的CH₂基团可被O或S代替的C_2-5烷基；或者任选地被C_1-4烷基取代的C_3-5环烷基。在本发明的一个实施方案中，由R³表示的基团未被取代。典型的R³基团包括乙基、正丙基、异丙基、1-甲基环丙-1-基、环丙基甲基、1-甲基环丙-1-基甲基、叔丁基、环丁基和1-甲基环丁-1-基。
适当地，R⁴和R⁴⁴独立地为氢或甲基，特别是甲基。
适当地，R⁵代表氢或甲基，特别是甲基。
适当地，R⁶和R⁶⁶独立地为氢或C_1-4烷基，其可任选地被卤素(如：氟)、羟基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷硫基、C_3-7杂环基或N(R¹⁰)₂取代；或者为C_3-7环烷基、芳基、杂环基或杂芳基，其中这些环状基团可被一个或多个选自卤素、C_1-4烷基、C_1-4氟烷基、OR⁹、CN、SO₂CH₃、N(R¹⁰)₂和NO₂的取代基取代；或者R⁶和R⁶⁶可共同形成任选地被羟基、C_1-4烷基或C_1-4羟基烷基取代的5-或6-元杂环；或者R⁶⁶为C_1-4烷氧基。
在本发明的一个实施方案中，R⁶和R⁶⁶独立地为氢或C_1-4烷基，其可任选地被卤素(如：氟)、羟基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷硫基、C_3-7杂环基、-C(O)OR¹⁴或N(R¹⁰)₂取代；或者为C_3-7环烷基、芳基、杂环基或杂芳基取代，其中这些环状基团可被一个或多个选自卤素、C_1-4烷基、C_1-4氟烷基、OR⁹、CN、SO₂CH₃、N(R¹⁰)₂和NO₂的取代基取代。
当基团R⁶连接至亚砜或砜时，R⁶优选为任选取代的C_1-4烷基或任选取代的C_3-7环烷基，更优选为任选取代的C_1-4烷基。当基团R⁶连接至C(O)N时，R⁶优选为氢、任选取代的C_1-4烷基或任选取代的C_3-7环烷基，更优选为任选取代的C_1-4烷基。典型的R⁶基团包括甲基、乙基、丙基、丁基、氢、环丙基、甲氧基甲基、甲氧基乙基、甲氧基丙基、羟基乙基、羟基丙基、四氢吡喃和哌啶。典型的R⁶⁶基团包括氢、甲基和乙基。典型的由R⁶和R⁶⁶形成的环包括吗啉、吡咯烷、氮杂环丁烷、哌嗪和哌啶。
R⁹优选为C_1-2烷基或C_1-2氟烷基。
适当地，R¹⁰为氢、甲基或叔丁基。
适当地，R¹²为苯基。
适当地，R¹⁴为氢或甲基。
R¹³和R¹⁵优选独立地为氢或甲基。
m优选为1或2。
一组化合物为式(Ia)的那些：

其中：
B代表(CH₂)_n，其中n为2或3且CH₂基团中的一个可被O或NR⁵代替；
R¹、V、R³和R⁵为上文对于式(I)的化合物所描述的。
对于式(Ia)的化合物，适当地，V代表噁二唑，如：1，2，4-噁二唑。
一组式(Ia)的化合物为式(Ib)的那些：

其中：
R^a和R^c独立地代表氢、氟、氯、甲基或CN；
R^b代表S(O)_mR⁶、C(O)NR⁶R⁶⁶、SO₂NR⁶R⁶⁶、NR¹⁰C(O)R⁶、NR¹⁰SO₂R⁶、NR¹⁰C(O)NR⁶R⁶⁶或5-元杂芳基；
R³代表C_2-5烷基或C_3-5环烷基，其可任选地被甲基取代；
m代表1或2；
R⁶和R⁶⁶独立地代表氢或可任选地被羟基或NH₂取代的C_1-4烷基，可选地，R⁶和R⁶⁶可共同形成任选地被OH或CH₂OH取代的5-或6-元杂环；且
R¹⁰独立地为氢或C_1-4烷基；或者基团N(R¹⁰)₂可形成任选地含有选自O和NR¹⁰的另外的杂原子的4-至7-元杂环。
对于式(Ib)的化合物，适当地，B代表-CH₂-O-。
对于式(Ib)的化合物，适当地，R^b代表S(O)_mR⁶、C(O)NR⁶R⁶⁶、NR¹⁰C(O)NR⁶R⁶⁶、5-元杂芳基或SO₂NR⁶R⁶⁶。可选地，对于式(Ib)的化合物，R^b代表NR¹⁰C(O)R⁶或NR¹⁰SO₂R⁶。
尽管各个变量的优选基团已概括地对各个变量单独列在上文，但本发明优选的化合物包括其中式(I)至式(Ib)的若干或各个变量均选自各个变量中优选的、更优选的或特别列出的基团的化合物。因此，本发明旨在包括优选的、更优选的以及特别列出的基团的所有组合。
可被提及的本发明的特定化合物是包括在实施例中的化合物及其药学可接受的盐。
可任选地使用下列条件(单独地或以任何组合)以从本发明的范围内排除某些化合物：
i)当R¹代表氟苯基或二氟苯基时，A和B代表键，x代表1，y代表3，适当地，G不代表NC(O)O-氟苯基。
ii)当G代表CHR¹²且R¹²为戊基时，x代表2，y代表2，A代表键且V代表1，3，4-噁二唑，适当地，R¹不代表被3-二甲氨基吡咯烷-1-基取代的苯基。
iii)当R¹代表苯基时，A代表-CH₂-，B代表键，x代表0，y代表4且G代表NR²，适当地，R²不代表S(O)₂R³。
iv)当R¹代表取代的呋喃时，A和B代表键，x代表0，y代表4且G代表NR²，适当地，R²不代表S(O)₂-CH₂-环己基。
v)当R¹代表4-甲磺酰基苯基时，A代表键，B代表-CH₂CH₂-，x代表2且y代表2，适当地，G不代表N-环丙基。
vi)当x代表0时，y代表3且B代表键，适当地，G不代表NC(O)R³。
除非另有说明，当用于本文时，“烷基”以及具有前缀“烷(alk)”的其他基团，比如例如烯基、炔基等，意指可为直链或支链或其组合的碳链。烷基的实例包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、仲丁基以及叔丁基、戊基、己基、庚基等。“烯基”、“炔基”以及其他类似术语包括具有至少一个不饱和碳碳键的碳链。
术语“氟烷基”包括被一个或多个氟原子取代的烷基，如：CH₂F、CHF₂和CF₃。
术语“环烷基”意指不含杂原子的碳环，并包括单环和双环饱和及部分饱和的碳环。环烷基的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环庚基。部分饱和的环烷基的实例包括环己烯和2，3-二氢化茚。环烷基典型地总共含有3至10个环碳原子，例如：3至6个或8至10个。
术语“卤素”包括氟、氯、溴和碘原子(特别是氟或氯)。
术语“芳基”包括苯基和萘基，特别是苯基。
除非另有说明，术语“杂环基”和“杂环”包括4-至10-元单环和双环饱和环(如：4-至7-元单环饱和环)，并含有最多三个选自N、O和S的杂原子。杂环的实例包括氧杂环丁烷、四氢呋喃、四氢吡喃、氧杂环庚烷、氧杂环辛烷、硫杂环丁烷(thietane)、四氢噻吩、四氢噻喃、硫杂环庚烷(thiepane)、硫杂环辛烷(thiocane)、氮杂环丁烷、吡咯烷、哌啶、氮杂环庚烷(azepane)、氮杂环辛烷(azocane)、[1，3]二噁烷、噁唑烷、哌嗪等。杂环的其他实例包括含硫环的氧化形式。因此，四氢噻吩1-氧化物、四氢噻吩1，1-二氧化物、四氢噻喃1-氧化物和四氢噻喃1，1-二氧化物也被认为是杂环。
除非另有说明，术语“杂芳基”包括含有最多4个选自N、O和S的杂原子的单环和双环5-至10-元(如：单环5-或6-元)杂芳基环。这样的杂芳基环的实例为呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、三唑基、噁二唑基、噻二唑基、四唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基和三嗪基。双环杂芳基包括其中5-或6-元杂芳基环稠合到苯基或另一杂芳基的双环杂芳基。这样的双环杂芳环的实例为苯并呋喃、苯并噻吩、吲哚、苯并噁唑、苯并噻唑、吲唑、苯并咪唑、苯并三唑、喹啉、异喹啉、喹唑啉、喹喔啉和嘌呤。优选的杂芳基是含有最多4个选自N、O和S的杂原子的单环5-或6-元杂芳基环。
本文描述的化合物可含有一个或多个不对称中心并可因此产生非对映异构体和光学异构体。本发明包括所有这样可能的非对映异构体以及它们的外消旋混合物、它们的基本纯的拆分的对映异构体、所有可能的几何异构体及其药学可接受的盐。上述式(I)并未在某些位置显示确定的立体化学。本发明包括式(I)的所有立体异构体及其药学可接受的盐。此外，还包括立体异构体的混合物以及分离的特定立体异构体。在用于制备这样的化合物的合成操作过程中，或者在使用本领域技术人员已知的外消旋化或差向异构化方法中，这样的方法的产物可为立体异构体的混合物。
当式(I)的化合物的互变异构体存在时，除非特别标明或另有说明，本发明包括任何可能的互变异构体及其药学可接受的盐、和其混合物。
当式(I)的化合物及其药学可接受的盐以溶剂合物或多晶型形式存在时，本发明包括任何可能的溶剂合物和多晶型形式。形成溶剂合物的溶剂类型没有特别限制，只要该溶剂是药理学可接受的。例如：可以使用水、乙醇、丙醇、丙酮等。
术语“药学可接受的盐”是指由药学可接受的无毒碱或酸制备的盐。当本发明的化合物为酸性时，其相应的盐可方便地由药学可接受的无毒碱，包括无机碱和有机碱来制备。由这样的无机碱得到的盐包括铝盐、铵盐、钙盐、铜(一价和二价)盐、铁盐、亚铁盐、锂盐、镁盐、钾盐、钠盐和锌盐等。特别优选的是铵盐、钙盐、镁盐、钾盐和钠盐。由药学可接受的有机无毒碱得到的盐包括伯胺、仲胺和叔胺，以及环胺和取代的胺如天然存在的和合成的取代的胺。可由之形成盐的其他药学可接受的有机无毒碱包括精氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱、N’，N’-二苄基乙二胺、二乙胺、2-二乙氨基乙醇、2-二甲氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、葡糖胺、氨基葡糖、组氨酸、哈胺(hydrabamine)、异丙胺、赖氨酸、甲基葡糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、多胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨丁三醇等。
当本发明的化合物为碱性时，其相应的盐可以方便地由药学可接受的无毒酸包括无机酸和有机酸来制备。这样的酸包括例如乙酸、苯磺酸、苯甲酸、樟脑磺酸、柠檬酸、乙磺酸、反丁烯二酸、葡萄糖酸、谷氨酸、氢溴酸、盐酸、羟乙磺酸、乳酸、马来酸、苹果酸、扁桃酸、甲磺酸、粘酸、硝酸、双羟萘酸、泛酸、磷酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸、对甲苯磺酸等。
由于式(I)的化合物旨在用于药学用途，它们优选以基本纯的形式提供，例如至少60％的纯度，更适当地为至少75％的纯度，尤其是至少98％的纯度(％为重量比重量)。
式(I)的化合物可如下制备，其中为了说明性的目的，-V-表示为如下式的基团：

且R¹、A、B、x、y、G、W、X和Y如上所定义。
其中X＝N、Y＝O且W＝N的式(I)的化合物可以依照路线1中阐明的方法制备。式2的腈或可商购或可使用已知技术合成。在适当的溶剂如醇-水中，在升温下用羟胺处理式2的化合物以得到式3的偕胺肟(A.R.Martin等人，J.Med.Chem.，2001，44，1560进一步描述了偕胺肟的合成)。之后将式3的化合物与式4的酸缩合，式4的酸或可商购或可使用已知技术容易地合成。所述缩合首先通过如形成混合酸酐来活化式4的化合物(其中，在适当的碱如三乙胺存在下，在适当的溶剂如THF或甲苯中用氯甲酸酯如氯甲酸异丁酯处理所述酸)，之后加入式3的化合物。可选地，式4的化合物可通过转化为酰基卤被活化，酰基卤在适当的溶剂如CH₂Cl₂-DMF中用例如草酰氯处理所述酸得到。将式3的偕胺肟与式4的酸缩合产生的中间体溶于适当的溶剂如甲苯或二甲苯中并加热回流，同时通过Dean-Stark装置或分子筛除去水分，以形成式(I)的噁二唑。可选地，可以首先在适当的溶剂如THF中用适当的碱如氢化钠，然后用式5的酯处理式3的偕胺肟。加热该混合物还产生式(I)的噁二唑(该方法由R.H.Mach等人，Bioorg.Med.Chem.，2001，9，3113进一步阐述)。
路线1

其中X＝O、Y＝N且W＝N的式(I)的化合物可以依照路线2中概述的方法制备。式6的腈或可商购或可使用已知技术合成。如上所述，这些被转化为式7的相应的偕胺肟，并随后与式8的酸缩合，所述酸可商购或可由本领域技术人员容易地合成。该缩合反应以与路线1中描述的相似的方法进行，以获得相应的式(I)的噁二唑。
路线2

其中X＝N、Y＝N且W＝O的式(I)的化合物可以如路线3中概述的方法合成。式9的酰氯或可商购或可使用已知方法合成。式10的酰基肼可通过例如用肼处理相应的酯的乙醇溶液容易地获得(详情参见K.M.Kahn等人，Bioorg.Med.Chem.，2003，11，1381)。在适当的溶剂如吡啶中用式10的酰基肼处理式9的酰氯得到式11的化合物(由V.N.Kerr等人，J.Am.Chem.Soc.，1960，82，186进一步阐述)，之后在升温下由POCl₃将其转化为式(I)的化合物(该方法由S-A.Chen等人，J.Am.Chem.Soc.，2001，123，2296进一步描述)。类似地，其中X＝Y＝W＝N的式(I)的化合物可通过将10的氨基腙类似物与适当的活化的羧酸衍生物如9缩合制备。该反应中的反应基团可以交换，即：式R¹-A-C(＝NH)NHNH₂的氨基腙可通过与活化的羧酸衍生物LG-C(＝O)-B-环进行缩合形成式(I)的化合物，其中LG为卤素或氧羰基(P.H.Olesen等人，J.Med.Chem.，2003，46，3333-3341)。
路线3

其中X＝N、Y＝N且W＝S的式(I)的化合物也可由式11的化合物与Lawesson′s试剂在适当的溶剂如甲苯或乙腈中加热制备(D.Alker等人，J.Med.Chem.，1989，32，2381-2388)。其中X＝S、Y＝N且W＝N的式(I)的化合物可由式12的化合物合成(路线4)，式12的化合物可商购，或可在标准条件下由相应的羰基化合物与Lawesson′s试剂容易地合成。在适当的溶剂如二氯甲烷中，在约20℃用式13的化合物处理式12的化合物得到式14的化合物。式13的化合物可通过用Meerwein′s试剂处理相应的二甲基酰胺得到(详情参见M.Brown US 3,092,637)。之后使用羟胺-O-磺酸在碱如吡啶存在下，在适当的溶剂如甲醇中环化式14的化合物(详情参见MacLeod等人，J.Med.Chem.，1990，33，2052)。
路线4

其中X＝N、Y＝S且W＝N的式(I)的区域异构衍生物可按类似的方式通过对换反应物的官能团，从而使R¹片段含有缩醛部分且含有G的环片段含有硫代羰基来形成。
其中W＝O、X＝N且Y＝CH的式(I)的化合物可以由式15的化合物(路线5)形成。式15的化合物可商购或使用已知技术合成。式16的氯化物可商购，或可使用标准条件将相应的酮氯化来容易地合成，例如将氯气通入所述酮的甲醇溶液中(详情参见R.Gallucci & R.Going，J.Org.Chem.，1981，46，2532)。在适当的溶剂如甲苯中，将式15的化合物与式16的氯化物混合，并在例如约100℃加热得到式(I)的化合物(详情参见A.Hassner等人，Tetrahedron，1989，45，6249)。其中W＝O、X＝CH且Y＝N的式(I)的化合物可按类似的方式通过对换各反应物的官能团，从而使R¹片段含有卤代酮部分且含有G的环片段含有C(O)NH₂来形成。
路线5

可选地，其中X＝S、W＝N且Y＝CH的式(I)的化合物还可由式16的化合物形成。将式15的化合物与五硫化磷加热，接着加入式16的化合物，再进一步加热得到式(I)的化合物(详情参见R.Kurkjy & E.Brown，J.Am.Chem.Soc.，1952，74，5778)。其中X＝CH、W＝N且Y＝S的区域异构化合物可按类似的方式通过对换各反应物的官能团，从而使R¹片段含有卤代酮部分且含有G的环片段含有C(O)NH₂来形成。
其中W＝N、X＝O且Y＝CH的式I的化合物可由式15和式17的化合物在类似于路线5中概述的条件下形成(路线6)。其中W＝S、X＝N且Y＝CH的式I的化合物也可由式15与式17的化合物使用上述涉及五硫化磷的条件形成。
路线6

其中X＝O、Y＝N且W＝CH的以及其中X＝N、Y＝O且W＝CH的式(I)的化合物可由式20的化合物形成(路线7)。用其中Q为醇盐或氯化物的式19的化合物酰化式18的化合物可在标准条件下发生，例如用适当的碱如二异丙基氨基锂或乙醇钾，在适当的溶剂如四氢呋喃中，通常在低温下将酮18去质子化。在适当的溶剂如乙醇中于升温下如75℃用羟胺处理式20的化合物，生成式(I)的化合物，其为异噁唑的两种区域异构体的混合物。使用常规分离技术如硅胶色谱可以分离各异构体(详情参见M.Rowley等人，J.Med.Chem.，1997，40，2374)。
路线7

其中X＝S、Y＝N且W＝CH的式(I)的化合物可以通过下述方法形成：用氧化铂在适当的溶剂如乙醇中氢化其中X＝O、Y＝N且W＝CH的式(I)的化合物，之后与五硫化磷加热生成其中X＝S、Y＝N且W＝CH的式(I)的化合物(详情参见G.Wiegand等人，J.Med.Chem.，1971，14，1015)。关于合成其中X＝N、Y＝S且W＝CH的区域异构体的详情，参见G.Wiegand，同前。
其中X＝N、Y＝N且W＝CH的式(I)的化合物可以由式20的化合物形成。在适当的溶剂如甲醇中用肼处理式20的化合物会生成其中X＝N、Y＝N且W＝CH的式(I)的化合物(R.Baker等人，J.Med.Chem.，1997，40，2374进一步阐述了该方法)。
其中X＝CH、Y＝N且W＝N的式(I)的化合物可如路线8中描述的合成。式23的溴化物或可商购，或者可由相应的酮，通过如用Br₂和HBr处理所述酮的水溶液来合成(如J.Y.Becker等人，Tetrahedron Lett.，2001，42，1571所述)。式22的脒可由已知方法合成，例如通过在适当的溶剂如乙醇中用氨处理相应的式21的亚氨酸烷基酯来合成(如D.A.Pearson等人，J.Med.Chem.，1996，39，1372所详述的)。而式21的亚氨酸酯则可通过例如在适当的溶剂如甲醇中用HCl处理相应的腈生成(详情参见J.P.Lokensgard等人，J.Org.Chem.，1985，50，5609)。式22的脒与式23的溴化物在适当的溶剂如DMF中反应得到式(I)的化合物(由N.J.Liverton等人，J.Med.Chem.，1999，42，2180阐述)。
路线8

其中X＝N、Y＝CH且W＝N的区域异构化合物可按类似的方式通过对换各反应物的官能团，从而使R¹片段含有脒部分且R²片段含有溴化物来形成。
其中X＝CH、Y＝CH且W＝N的式(I)的化合物可以根据路线9中描述的合成。式25的二酮可通过例如可商购或者使用已知技术容易地合成的式24的酮与式23的溴化物在适当的溶剂如苯中使用适当的催化剂缩合来容易地得到。O.G.Kulinkovich等人，Synthesis，2000，9，1259描述了说明性的实例。使用Paal-Knorr反应，可以用例如碳酸铵在适当的溶剂如乙醇中在升温下处理式25的二酮(详情参见R.A.Jones等人，Tetrahedron，1996，52，8707)以得到式(I)的化合物。
路线9

其中R²含有氨基甲酸酯或磺酰胺的式(I)的化合物可以如路线10中描述的合成。其中P代表适当的保护基如叔丁氧羰基(Boc)的式26的化合物可以如上述路线1-9中概述的合成。首先在适当条件下除去保护基以得到式27的化合物。在Boc基的情况下，这可以通过在适当的溶剂如CH₂Cl₂中用适当的酸如三氟乙酸处理式26的化合物来完成。在适当的溶剂如CH₂Cl₂中在适当的碱如三乙胺存在下用通常可商购的或者可容易地合成的式28的氯甲酸酯处理式27的化合物得到式(I)的化合物。类似地，在适当的溶剂如CH₂Cl₂中在适当的碱如三乙胺存在下可将式27的化合物与通常可商购的或者可容易地合成的式29的磺酰氯反应得到式(I)的化合物。其中R²含有脲部分的式(I)的化合物可以通过将式27的化合物与式O＝C＝N-R³的异氰酸酯反应来制备。此外，其中R²为杂芳基的式(I)的化合物可通过将胺27与适当的杂芳基氯或杂芳基溴在Pd(0)催化下在适当的配体和碱存在下反应来制备(Urgaonkar，S.；Hu，J.-H.；Verkade，J.G.J.Org.Chem.2003，68，8416-8423)。
路线10

其中R²含有酰胺基的式(I)的化合物可由式27的化合物与适当的酸(R³COOH)或其活化的衍生物在形成酰胺键的反应中合成。
其中B含有R⁵为氢的NR⁵基团的式(I)的化合物还可使用本领域技术人员已知的标准技术转化为其中R⁵为C_1-4烷基的式(I)的化合物。
其中R¹为任选地被CN取代的吡啶基的式(I)的化合物可以由相应的未取代的吡啶通过Reissert反应制备(Fife，W.K.J.Org.Chem.1983，48，1375-1377)。类似的反应可以用于制备其中R¹为任选地被卤素取代的吡啶基的化合物(Walters，M.A.；Shay，J.J.Tetrahedron Lett.1995，36，7575-7578)。通过过渡金属催化的交叉偶联反应，其中R¹为任选地被卤素取代的吡啶基的化合物可以转化为其中R¹为任选地被C_1-4烷基取代的吡啶基的相应化合物(Fürstner，A.等人，J.Am.Chem.Soc.2002，124，13856-13863)。
其中X＝N、Y＝N、U＝N且W＝CH的式(I)的化合物可如下文路线11中所示的合成。由M.Meldal等人，Journal of Organic Chemistry(2002)，67(9)，3057-3064描述了说明性的实例。式30的叠氮化物或者可商购或者可例如使用已知技术由用叠氮化物离子置换相应的卤化物来合成；或者在酸性介质中通过相应的胺与亚硝酸钠反应来合成。式31的炔可商购或可通过已知方法如通过炔化物离子与硼烷(参见Journal of Organic Chemistry(1981)，46(11)2311-2314)或醛或酮的反应来合成。
路线11

其中X＝N、Y＝CH、U＝N且W＝CH的式(I)的化合物可如路线12中所示，通过式33的1，3-二羰基化合物(或它们的等价物如烯醇醚)与式32的肼的反应来合成。式32的肼为可商购的或可通过已知方法合成，如通过相应的胺与亚硝酸钠反应并将所得重氮盐与还原剂如亚硫酸钠反应来合成。
路线12

其他式(I)的化合物可通过类似于上述的方法或者通过本领域已知的方法制备。
式(I)的化合物的制备的进一步细节见实施例。
式(I)的化合物可以单独制备或者作为包含至少2种，例如5-1000种式(I)的化合物，并且更优选10-100种式(I)的化合物的化合物库来制备。化合物库可使用本领域技术人员已知的方法使用溶液或者固相化学，通过组合的“分裂和混合”方法或者通过多重平行合成(multiple parallel synthesis)来制备。
在式(I)的化合物的合成期间，中间体化合物中的不稳定官能团如羟基、羧基和氨基可被保护。保护基可以在合成式(I)的化合物的任何阶段除去，或者可以存在于最终的式(I)的化合物上。关于可保护各种不稳定官能团的方法以及裂解所得被保护的衍生物的方法的全面论述在例如Protective Groups in Organic Chemistry，T.W.Greene及P.G.M.Wuts，(1991)，Wiley-Interscience，New York，第2版中给出。
如上述定义的任何新的中间体及其在合成式(I)的化合物中的用途也因此包括在本发明的范围内。例如，式(XXVII)的化合物：

或其盐或被保护的衍生物，其中基团R¹、A、V、B、x和y如上对于式(I)的化合物所定义。在式(XXVII)的化合物中，当R¹代表联苯基时，A和B代表键，x代表2，适当地，y不代表2。
落入式(XXVII)的范围的实例化合物为4-[5-(4-甲磺酰基苯基)-[1，2，4]噁二唑-3-基甲氧基]哌啶。
如上文所示，式(I)的化合物用作GPR119激动剂，例如用于治疗和/或预防肥胖和糖尿病。对于这样的应用，式(I)的化合物会通常以药物组合物的形式给药。
本发明还提供了式(I)的化合物或其药学可接受的盐，其用作药物。
本发明还提供了包含式(I)的化合物与药学可接受的载体的药物组合物。
优选地，所述组合物由药学可接受的载体和无毒的治疗有效量的式(I)的化合物或其药学可接受的盐组成。
此外，本发明还提供了药物组合物，其通过调节GPR119治疗疾病，例如通过调节过饱导致预防性地或治疗性地治疗肥胖，或用于治疗糖尿病，所述药物组合物包含药学可接受的载体和无毒的治疗有效量的式(I)的化合物或其药学可接受的盐。
所述药物组合物可以任选地包含其他治疗性成分或辅剂。所述组合物包括适于口服、直肠、局部以及肠胃外(包括皮下、肌内以及静脉内)给药的组合物，但在任何给定的情况下，最合适的途径将取决于特定的主体以及正被给药的活性成分所用于治疗的病症的性质和严重性。所述药物组合物可方便地采用单位剂量的形式并通过药学领域熟知的任一方法制备。
实际上，可以依照常规药物混合技术将式(I)的化合物或其药学可接受的盐作为活性成分与药物载体充分混合。根据给药(如口服或肠胃外(包括静脉内))所需的制剂形式不同，该载体可以采取多种不同的形式。
因此，所述药物组合物可以作为适于口服给药的离散单位呈现，例如各自含有预定量的活性成分的胶囊剂、扁囊剂或片剂。此外，所述组合物可作为散剂、颗粒剂、溶液剂、含水液体中的混悬剂、非水液体、水包油型乳剂或者油包水型液体乳剂呈现。除了上面列出的常见剂型以外，式(I)的化合物或其药学可接受的盐还可通过控释方式和/或递送装置给药。所述组合物可通过任何药学方法制备。通常，这样的方法包括将活性成分与作为一种或多种必需成分的载体相接触的步骤。通常，所述组合物通过将活性成分与液体载体或分散良好的固体载体或其两者均匀、充分地混合来制备。之后可以将该产品便利地制成期望呈现的形式。
式(I)的化合物或其药学可接受的盐还可与一种或多种其他治疗活性化合物一同被包含在药物组合物中。
所采用的药物载体可以是例如固体、液体或气体。固体载体的实例包括乳糖、石膏粉、蔗糖、滑石、明胶、琼脂、果胶、阿拉伯胶、硬脂酸镁以及硬脂酸。液体载体的实例为糖浆、花生油、橄榄油和水。气体载体的实例包括二氧化碳和氮气。
在制备用于口服剂型的组合物中，可以使用任何便利的药物介质。例如水、二醇、油、醇、调味剂、防腐剂、着色剂等可用于形成口服液体制剂例如混悬剂、酏剂以及溶液剂；而载体如淀粉、糖、微晶纤维素、稀释剂、粒化剂、润滑剂、粘合剂、崩解剂等可用于形成口服固体制剂例如散剂、胶囊剂和片剂。当使用固体药物载体时，由于它们便于给药，因此片剂和胶囊剂为优选的口服剂量单位。任选地，片剂可通过标准的含水或无水技术进行包衣。
含有本发明的组合物的片剂可以任选地与一种或多种助剂或辅剂通过压制或模塑来制备。压制片剂可以在适当的机器中通过压制任选地与粘合剂、润滑剂、惰性稀释剂、表面活性剂或分散剂混合的自由流动形式如粉末或颗粒形式的活性成分来制备。模塑片剂可以通过在适当的机器中，将经惰性液体稀释剂湿润的粉末状化合物的混合物进行模塑制得。各种片剂优选地含有约0.05mg至约5g的活性成分，且各种扁囊剂或胶囊剂优选含有约0.05mg至约5g的活性成分。
例如，旨在向人口服给药的制剂可以含有约0.5mg至约5g的活性剂，所述活性剂与占组合物总量的约5％至约95％不等的适当且方便量的载体材料混合。单位剂量形式通常会含有约1mg至约2g的活性成分，典型地为25mg、50mg，、100mg、200mg、300mg、400mg、500mg、600mg、800mg或1000mg。
适于肠胃外给药的本发明的药物组合物可以制备为活性化合物在水中的溶液剂或混悬剂的形式。可包含适当的表面活性剂，例如：羟丙基纤维素。也可以在甘油、液体聚乙二醇及其在油中的混合物中制备分散体。此外，可以包含防腐剂以防止微生物的有害生长。
适于注射应用的本发明的药物组合物包括无菌水溶液或分散体。此外，所述组合物可以为用于临时制备这样的无菌可注射溶液或分散体的无菌粉末的形式。在所有情况下，最终的可注射形式必需是无菌的并且必需是有效的便于注射的流体。所述药物组合物在生产和储存条件下必须是稳定的；因此，优选地应该在抗微生物如细菌和真菌的污染作用下保存。所述载体可为含有例如水、乙醇、多元醇(如：甘油、丙二醇和液体聚乙二醇)、植物油及其适当的混合物的溶剂或者分散介质。
本发明的药物组合物可以为适于局部使用的形式，例如：气雾剂、乳膏剂、软膏剂、洗剂、撒粉等。此外，所述组合物可为适用于经皮装置的形式。这些制剂可使用式(I)的化合物或其药学可接受的盐通过常规加工方法制备。例如：乳膏剂或软膏剂通过混合亲水材料和水以及约5重量％至约10重量％的化合物以产生具有所需稠度的乳膏剂或软膏剂来制备。
本发明的药物组合物可以采用其中载体为固体的适于直肠给药的形式。优选所述混合物形成单位剂量的栓剂。适当的载体包括可可脂以及通常用于本领域的其他材料。可方便地通过首先将该组合物与软化或融化的载体混合，之后冷却并在模子中成型来形成栓剂。
除了上述载体成分外，如果合适，上述药物制剂可包含一种或多种其他载体成分，例如：稀释剂、缓冲剂、调味剂、粘合剂、表面活性剂、增稠剂、润滑剂、防腐剂(包括抗氧化剂)等。此外，还可以包含其他辅剂以使该制剂与目标接受者的血液等渗。含有式(I)的化合物或其药学可接受的盐的组合物也可以制备成散剂或液体浓缩剂的形式。
通常，近似每天0.01mg/kg至约150mg/kg体重的剂量水平可用于治疗上述病症，或可选地每名患者每天约0.5mg至约7g。例如：通过以每天每公斤体重约0.01至50mg，或者可选地每名患者每天约0.5mg至约3.5g的化合物给药可以有效治疗肥胖。
然而，应理解，对于任何特定患者的具体剂量水平将取决于许多因素，包括：年龄、体重、一般健康、性别、饮食、给药时间、给药途径、排泄率、药物组合以及经历治疗的特定疾病的严重性。
式(I)的化合物可用于治疗其中GPR119起作用的疾病或病症。
因此，本发明还提供治疗其中GPR119起作用的疾病或病症的方法，其包括向有此需要的受试者给药有效量的式(I)的化合物或其药学可接受的盐的步骤。GPR119在其中起作用的疾病或病症包括肥胖和糖尿病。在本申请的上下文中，肥胖的治疗意在涵盖例如通过降低食欲和体重、维持体重的减轻及防止反弹来治疗诸如肥胖以及与食物摄取过多相关的其他饮食失调的疾病或病症以及糖尿病(包括1型和2型糖尿病、葡萄糖耐量降低、胰岛素抵抗以及糖尿病并发症例如神经病、肾病、视网膜病、白内障、心血管并发症以及脂血异常(dyslipidaemia))。以及治疗对摄取的脂肪的敏感性异常从而导致功能性消化不良的患者。本发明的化合物也可用于治疗代谢疾病，例如：代谢综合征(X综合征)、葡萄糖耐量降低、高脂血症、高甘油三酯血症、高胆固醇血症、低HDL水平和高血压。
本发明的化合物可提供与用于治疗上述病症的经由不同机理起作用的化合物相比的优点，因为它们可提供β细胞保护、增加的cAMP和胰岛素分泌以及缓慢的胃排空。
本发明还提供调节过饱的方法，其包括向有此需要的个体给药有效量的式(I)的化合物或其药学可接受的盐的步骤。
本发明还提供治疗肥胖的方法，其包括向有此需要的个体给药有效量的式(I)的化合物或其药学可接受的盐的步骤。
本发明还提供治疗糖尿病(包括1型和2型糖尿病，特别是2型糖尿病)的方法，其包括向有此需要的患者给药有效量的式(I)的化合物或其药学可接受的盐的步骤。
本发明还提供治疗代谢综合征(X综合征)、葡萄糖耐量降低、高脂血症、高甘油三酯血症、高胆固醇血症、低HDL水平或高血压的方法，其包括向有此需要的患者给药有效量的式(I)的化合物或其药学可接受的盐的步骤。
本发明还提供用于治疗上述定义的病症的式(I)的化合物或其药学可接受的盐。
本发明还提供式(I)的化合物或其药学可接受的盐在制备用于治疗上述定义的病症的药物中的应用。
在本发明的方法中，术语“治疗”包括治疗性和预防性治疗两者。
式(I)的化合物或其药学可接受的盐可以单独给药或者与一种或多种其他治疗活性化合物联合给药。所述其他治疗活性化合物可以用于治疗与式(I)的化合物所治疗的相同或不同的疾病或病症。所述治疗活性化合物可以同时给药、连续给药或者单独给药。
式(I)的化合物可与用于治疗肥胖和/或糖尿病的其他活性化合物一起给药，例如：胰岛素和胰岛素类似物、胃脂肪酶抑制剂、胰脂肪酶抑制剂、磺酰脲及类似物、双胍类、α2激动剂、格列酮类、PPAR-γ激动剂、混合的PPAR-α/γ激动剂、RXR激动剂、脂肪酸氧化抑制剂、α-葡糖苷酶抑制剂、二肽基肽酶IV抑制剂、GLP-1激动剂如GLP-1类似物和模拟物、β-激动剂、磷酸二酯酶抑制剂、降脂药、糖原磷酸化酶抑制剂、减肥药如胰脂肪酶抑制剂、MCH-1拮抗剂和CB-1拮抗剂(或反相激动剂)、淀粉状蛋白毒素(amylin)拮抗剂、脂氧合酶抑制剂、生长抑素(somostatin)类似物、葡糖激酶活化剂、胰高血糖素拮抗剂、胰岛素信号传导激动剂、PTP1B抑制剂、糖异生抑制剂、抗脂肪分解(antilypolitic)剂、GSK抑制剂、甘丙肽(galanin)受体激动剂、厌食药、CCK受体激动剂、瘦素、血清素能/多巴胺能减肥药、重摄取抑制剂如西布曲明、CRF拮抗剂、CRF结合蛋白、拟甲状腺素化合物、醛糖还原酶抑制剂、糖皮质激素受体拮抗剂、NHE-1抑制剂或山梨醇脱氢酶抑制剂。
包括式(I)的化合物或其药学可接受的盐以及至少一种其他减肥药的给药的联合治疗代表本发明的另一方面。
本发明还提供治疗哺乳动物如人中的肥胖的方法，该方法包括向有此需要的哺乳动物给药有效量的式(I)的化合物或其药学可接受的盐以及另一种减肥药。
本发明还提供式(I)的化合物或其药学可接受的盐以及另一种减肥药用于治疗肥胖的用途。
本发明还提供式(I)的化合物或其药学可接受的盐在制备用于与另一种减肥药联合使用以治疗肥胖的药物中的用途。
式(I)的化合物或其药学可接受的盐以及其他减肥药可以共同给药(co-administration)、连续给药或者单独给药。
共同给药包括给药包含式(I)的化合物或其药学可接受的盐和其他减肥药的制剂，或者同时或单独给药各药物的不同制剂。当式(I)的化合物或其药学可接受的盐以及其他减肥药的药理学特性允许时，两种药物共同给药可能是优选的。
本发明还提供式(I)的化合物或其药学可接受的盐与另一种减肥药在制备用于治疗肥胖的药物中的用途。
本发明还提供包含式(I)的化合物或其药学可接受的盐与另一种减肥药以及药学可接受的载体的药物组合物。本发明还涵盖这样的组合物在上述方法中的应用。
GPR119激动剂与中枢作用的减肥药组合具有特别用途。
根据本发明的该方面用于组合治疗的其他减肥药优选为CB-1调节剂，如：CB-1拮抗剂或反向激动剂。CB-1调节剂的实例包括SR141716(利莫那班)和SLV-319((4S)-(-)-3-(4-氯苯基)-N-甲基-N-[(4-氯苯基)磺酰基]-4-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-1-甲酰胺)，以及在EP576357、EP656354、WO03/018060、WO 03/020217、WO 03/020314、WO 03/026647、WO 03/026648、WO 03/027076、WO 03/040105、WO03/051850、WO 03/051851、WO03/053431、WO 03/063781、WO 03/075660、WO 03/077847、WO 03/078413、WO 03/082190、WO 03/082191、WO 03/082833、WO 03/084930、WO03/084943、WO 03/086288、WO 03/087037、WO 03/088968、WO 04/012671、WO 04/013120、WO 04/026301、WO 04/029204、WO 04/034968、WO04/035566、WO 04/037823、WO 04/052864、WO 04/058145、WO04/058255、WO 04/060870、WO 04/060888、WO 04/069837、WO04/069837、WO 04/072076、WO 04/072077、WO 04/078261和WO04/108728以及其中所公开的文献中公开的那些化合物。
显示GPR119在其中起作用的其他疾病或病症包括WO 00/50562和US 6,468,756中描述的那些，例如：心血管疾病、高血压、呼吸疾病、妊娠异常、胃肠道病症、免疫病症、肌骨骼病症、抑郁、恐惧症、焦虑症、情绪障碍和阿尔茨海默病。
包括但不限于本说明中所引用的专利和专利申请的所有出版物都引入本文作为参考，正如分别具体地说明各单独的出版物都全文引入本文作为参考一样。
本发明现在将参考下列的实施例来描述，这些实施例是为说明性的目的而不该解释为对本发明范围的限制。
实施例
缩写
Boc：叔丁氧羰基；t-Bu：叔丁基；DCM：二氯甲烷；DMAP：4-二甲氨基吡啶；DMF：N，N-二甲基甲酰胺；h：小时；DMSO：二甲亚砜；EDC：1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐；EtOAc：乙酸乙酯；HOBt：1-羟基苯并三唑水合物；HPLC：高效液相色谱法；mCPBA：3-氯过氧苯甲酸；IH：异己烷；Me：甲基；min：分钟；RP-HPLC：反相高效液相色谱法；rt：室温；RT：保留时间；TFA：三氟乙酸；THF：四氢呋喃。
LCMS方法1
LCMS数据如下获得：Waters Xterra MS C18，5μm(4.6x50mm，流速1.5mL/min)，以含0.1％v/v氨的H₂O-MeCN梯度洗脱12分钟，在215和254nm进行UV检测。梯度信息：0.0-8.0分钟：梯度从95％H₂O-5％MeCN至5％H₂O-95％MeCN；8.0-9.9分钟：保持在5％H₂O-95％MeCN；9.9-10.0分钟：恢复至95％H₂O-5％MeCN；10.0-12.0分钟：保持在95％H₂O-5％MeCN。使用电喷雾离子源以正(ESI⁺)或负(ESI^-)的模式获得质谱。
LCMS方法2
LCMS数据如下获得：Waters Atlantis C18，3μ(3.0x20mm，流速0.85mL/min)，以含0.1％v/v HCO₂H的H₂O-MeCN梯度洗脱6.5分钟，在220nm进行UV检测。梯度信息：0.0-0.3分钟：100％H₂O；0.3-4.25分钟：梯度至10％H₂O-90％CH₃CN；4.25-4.4分钟：梯度至100％CH₃CN；4.4-4.9分钟：保持在100％MeCN；4.9-6.0分钟：恢复至100％H₂O；5.00-6.50分钟：保持在100％H₂O。使用电喷雾离子源以正离子(ESI⁺)或负离子(ESI^-)的模式获得质谱。在Varian Mercury 400波谱仪上在400MHz操作，记录¹H nmr谱。以相对于四甲基硅烷(δ＝0)的ppm报道化学位移。
使用Phenomenex^TM C₁₈柱(210×21mm)用H₂O-CH₃CN溶液以20mL/分钟的流速洗脱来进行HPLC，在220nm下进行UV检测。典型的梯度：0-0.5分钟，10％CH₃CN-90％H₂O；0.5-10分钟，梯度至90％CH₃CN-10％H₂O并在90％CH₃CN-10％H₂O保持5分钟；15-16分钟，恢复至10％CH₃CN-90％H₂O。
3-羟甲基氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯：Slusarchyk S.A.等人，Bioorg.Med.Chem.Lett.，2002，12，3235-3238；(4-氰基苯基)氨基甲酸叔丁酯：Sendzik M.等人，Tetrahedron Lett.2003，44，8697-8700。
制备例1：4-羧基甲氧基哌啶-1-羧酸叔丁酯

在室温下，将氢化钠(596mg在油中的60％分散液，14.9mmol)分批加入叔丁基-4-羟基哌啶-1-甲酸酯(1.0，5mmol)在无水THF(20mL)中的搅拌溶液中。15分钟后加入溴乙酸(1.38g，9.94mmol)并继续搅拌5h。加入额外的溴乙酸(5mmol)及氢化钠(5mmol)并继续搅拌24h。用水(2mL)终止反应并用乙酸乙酯(20mL)稀释，然后用饱和NaHCO₃(20mL)水溶液洗涤。用稀HCl将水相酸化至pH2并将沉淀萃取入乙酸乙酯(50mL)中，干燥(MgSO₄)、蒸发有机相并通过快速色谱法(IH-EtOAc中的5％AcOH，7∶3至1∶1)纯化残余物，得到标题酸：RT＝2.89分钟；m/z(ES⁺)＝260.3[M+H]⁺。
制备例2：3-羧基甲氧基甲基氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯

氩气下，向氢化钠(120mg在油中的60％分散液，3.2mmol)和3-羟甲基氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(400mg，2.13mmol)的冰冷的混合物中缓慢加入无水DMF(5mL)。搅拌15分钟后，一次性加入固体碘乙酸钠(666mg，3.20mmol)并继续搅拌48h。将所得混合物在水(15mL)和EtOAc(15mL)之间分配，再用饱和Na₂CO₃(2×10mL)水溶液萃取有机相。用浓HCl酸化合并的水相至pH2，并用EtOAc(2×60mL)萃取。用盐水(20mL)洗涤有机物、干燥(MgSO₄)并蒸发，得到标题酸：δ_H(CDCl₃)1.44(s，9H)，2.81(m，1H)，3.71(d，2H)，3.73(dd，2H)，4.02(t，2H)，4.13(s，2H)。
制备例3：5-甲磺酰基吡啶-2-羧酸乙酯

向2-溴-5-甲磺酰基吡啶(200mg，960μmol)和NEt₃(334μL，2.4mmol)在无水DMF(1.6mL)中的搅拌溶液中加入Pd(OAc)₂(50mg)。加入乙醇(570μL)和1，3-双(二苯膦基)丙烷(39mg，95μmol)并在一氧化碳气氛中将所得混合物在80℃下加热72h。除去溶剂后，将残余物在EtOAc(50mL)和盐水(10mL)之间分配，分离所得有机相并干燥(MgSO₄)。除去溶剂并通过柱色谱法(IH-EtOAc 4∶1)纯化残余物，得到标题酯：δ_H(CDCl₃)1.48(3H，t)，3.15(3H，s)，4.54(2H，q)，8.33(1H，d)，8.40(1H，dd)，9.28(1H，d)。
制备例4：1-(4-环丙硫基苯基)乙酮

将三氯化铝(1.3g，9.74mmol)在无水CH₂Cl₂(30mL)中的搅拌溶液冷却至0℃并加入乙酰氯(544μL，7.65mmol)，确保整个过程中温度不超过10℃。搅拌0.5h后，加入环丙硫基苯(1mL，6.96mmol)和另外的乙酰氯(544μL)，并将所得混合物搅拌18h，再次保持温度低于10℃。将反应混合物倾至冰(40g)上并用EtOAc(2×80mL)萃取。用水(30mL)、饱和NaHCO₃水溶液(30mL)和盐水(30mL)洗涤合并的有机物，然后干燥(MgSO₄)。除去溶剂并通过柱色谱法(IH)纯化，得到标题酮：δ_H(CDCl₃)0.73(2H，m)，1.16(2H，m)，2.21(1H，m)，2.58(3H，s)，7.42(2H，d)，7.88(2H，d)。
制备例5：4-环丙硫基苯甲酸

在65℃下加热1-(4-环丙硫基苯基)乙酮(991mg，5.15mmol)和粉末状KOH(2.89g，51.5mmol)在DMF(120mL)中的混合物。18h后，除去溶剂，加入水(40mL)并用乙醚(40mL)洗涤水相，然后用浓HCl酸化至pH2。用EtOAc(5×30mL)萃取混合物，并干燥(MgSO₄)合并的有机物。除去溶剂后，通过柱色谱法(DCM+10％MeOH+1％AcOH)纯化残余物，得到标题酸：δ_H(CDCl₃)0.74(2H，m)，1.17(2H，m)，2.22(1H，m)，7.43(2H，d)，8.01(2H，d)。
制备例6：4-甲氧基甲硫基苯甲酸甲酯

将4-巯基苯甲酸甲酯(500mg，2.97mmol)和NEt₃(600μL，4.31mmol)在无水THF(5.5mL)中的搅拌溶液冷却至0℃并用甲氧基甲基氯(271μL，3.57mmol)处理。36h后，用饱和NH₄Cl水溶液终止反应并用乙醚(2×50mL)萃取。用饱和NaHCO₃水溶液(20mL)和盐水(10mL)洗涤合并的有机物，然后干燥(MgSO₄)并蒸发。通过柱色谱法(IH-Et₂O 9∶1)纯化残余物，得到标题硫醚：δ_H(CDCl₃)3.45(3H，s)，3.91(3H，s)，5.05(2H，s)，7.50(2H，d)，7.95(2H，d)。
制备例7：4-(2-甲氧基乙硫基)苯甲酸甲酯

使用类似于制备例6中描述的方法，将甲氧基乙基氯与4-巯基苯甲酸甲酯反应，得到标题化合物：δ_H(CDCl₃)3.20(2H，t)，3.39(3H，s)，3.64(2H，t)，3.91(3H，s)，7.34(2H，d)，7.94(2H，d)。
制备例8：反式N-羟基-4-戊基环己基甲脒

将碳酸钾(2.49g，18mmol)与NH₂OH·HCl(2.50g，36mmol)在水(15mL)中的溶液加入反式4-戊基环己腈(4.30g，24mmol)中并将混合物加热到80℃。然后加入足够的乙醇(约45mL)，得到均质溶液。10h后，冷却该溶液，用水(200mL)稀释并通过过滤收集固体物质。将该固体溶于EtOAc(150mL)中，用盐水(50mL)洗涤将所得溶液，干燥(MgSO₄)并蒸发至15mL体积。加入己烷(60mL)以沉淀标题化合物：RT＝2.86分钟；m/z(ES⁺)＝213.2[M+H]⁺。
制备例9：4-氨基甲酰基甲氧基哌啶-1-羧酸叔丁酯

将4-羧基甲氧基哌啶-1-羧酸叔丁酯(制备例1，14.13g，54.7mmol)和三乙胺(7.68mL，65.6mmol)在无水THF(250mL)中的溶液冷却至0℃并滴加氯甲酸异丁酯(8.51mL，65.6mmol)。在0℃下搅拌30分钟后，将反应混合物冷却至-20℃并通过套管快速加入-70℃的0.7M氨无水DCM(250mL，180mmol)溶液中。将反应物升温至室温并搅拌1h。用DCM(250mL)稀释混合物，用饱和NaHCO₃水溶液(200mL)、0.5M HCl水溶液(200mL)和盐水(200mL)洗涤，然后干燥(MgSO₄)。蒸发溶剂并通过快速色谱法(IH-THF 3∶7)纯化残余物，得到标题化合物：δ_H(CDCl₃)1.49(9H，s)，1.53-1.60(2H，m)，1.85-1.92(2H，m)，3.11(2H，m)，3.58(1H，m)，3.76-3.83(2H，m)，3.98(2H，s)，6.19(1H，bs)，6.56(1H，s)。
制备例10：4-氰基甲氧基哌啶-1-羧酸叔丁酯

将4-氨基甲酰基甲氧基哌啶-1-羧酸叔丁酯(制备例9，235mg，910μmol)及三乙胺(140μl，1mmol)在无水DCM(5mL)中的溶液冷却至0℃并滴加三氯乙酰氯(174mg，960μmol)在无水DCM(1mL)中的溶液。在室温下将反应混合物搅拌1h，除去溶剂并通过快速色谱法(IH-EtOAc，1∶1)纯化残余物，得到标题化合物：δ_H(CDCl₃)1.50(9H，s)，1.58-1.65(2H，m)，1.89-1.95(2H，m)，3.20(2H，m)，3.74-3.79(3H，m)，4.33(2H，s)。
制备例11：4-(N-羟基甲脒基甲氧基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

将碳酸钾(119mg，860μmol)及NH₂OH·HCl(119mg，1.71mmol)在水(0.5mL)中的溶液加入在乙醇(2mL)中的4-氰基甲氧基哌啶-1-羧酸叔丁酯(制备例10，206mg，857μmol)中。将混合物在75℃下加热0.75h，冷却并蒸发乙醇。用EtOAc(50mL)稀释残余物并用水(2×10mL)及盐水(10mL)洗涤，然后干燥(MgSO₄)。除去溶剂，得到标题化合物：δ_H(CDCl₃)1.50(9H，s)，1.50-1.60(2H，m)，1.85-1.92(2H，m)，3.13(2H，m)，3.56(1H，m)，3.77-3.84(2H，m)，4.05(2H，s)，4.82(2H，s)；RT＝2.70分钟，m/z(ES⁺)＝274.0[M+H]⁺。
制备例12：2-氟-4-甲磺酰基苯甲酸

将3-氟-4-甲基苯胺(3.67g，29.3mmol)、二甲基二硫醚(39.6mL，440mmol)和亚硝酸叔丁酯(4.70mL，39.2mmol)在1，2-二氯乙烷(400mL)中的混合物在60℃下加热10分钟。滴加3-氟-4-甲基苯胺(33.0g，264mmol)在1，2-二氯乙烷(100mL)中的溶液，同时加入亚硝酸叔丁酯(38.0mL，317mmol)并将温度保持在60℃附近。加入反应物后，移去热源并将反应物搅拌1h。加入水(200mL)并将反应混合物剧烈搅拌10分钟。分离有机相并用水(100mL)和1M HCl水溶液(200mL)洗涤，然后干燥(MgSO₄)并蒸发。通过蒸馏(50℃/0.9Torr)分离2-氟-1-甲基-4-甲硫基苯并立即如下使用：在剧烈搅拌下，将该硫醚(10.0g，64.1mmol)在水(200mL)中的混合物加热至100℃。经20分钟分批甲入高锰酸钾(45.6g，289mmol)并继续加热35分钟，然后经烧结漏斗(sinter)过滤。冷却滤液并用EtOAc(3×200mL)萃取，用浓HCl将水相酸化至pH1并用EtOAc(4×150mL)萃取。用盐水(100mL)洗涤合并的有机物、干燥(MgSO₄)并真空浓缩。加入Et₂O，通过过滤收集沉淀并风干，得到标题化合物：δ_H(CD₃OD)3.19(3H，s)，7.81-7.86(2H，m)，8.14-8.18(1H，m)。
制备例13：2-氟-4-甲磺酰基苯甲酰胺

向2-氟-4-甲磺酰基苯甲酸(4.91g，22.5mmol)在无水THF(200mL)中的溶液中加入干燥NEt₃(4.71mL，33.8mmol)并将溶液冷却至0℃。经由注射器经10分钟加入纯的氯甲酸异丁酯(3.50mL，27.0mmol)并将反应混合物升温至室温。1.25h后，加入DCM(200mL)并将容器冷至-78℃，将氨(约3L)冷凝入反应混合物中并继续搅拌20分钟。升温至室温后，用DCM(200mL)稀释溶液并用饱和NaHCO₃水溶液(200mL)洗涤。分离水相并用DCM(3×100mL)萃取。用盐水(100mL)洗涤合并的有机物，干燥(MgSO₄)并蒸发，得到标题化合物：δ_H(CD₃OD)3.19(3H，s)，7.81-7.88(2H，m)，7.96-8.00(1H，m)。
制备例14：2-氟-4-甲磺酰基苄腈

经注射器用三氯乙酰氯(2.16mL，19.4mmol)处理2-氟-4-甲磺酰基苯甲酰胺(3.50g，16.1mmol)和NEt₃(2.81mL，20.1mmol)在DCM(100mL)中的搅拌悬浮液。升温至室温并搅拌2h后，用DCM(50mL)稀释反应混合物并用饱和NaHCO₃水溶液(100mL)洗涤。分离水层并用DCM(100mL)萃取，用盐水(100mL)洗涤合并的有机物，干燥(MgSO₄)并蒸发。通过快速色谱法(EtOAc-IH 45∶55)纯化残余物，得到标题化合物：δ_H(CD₃Cl₃)3.12(3H，s)，7.84-7.92(3H，m)。
制备例15：4-氨基-2-氟苄腈

向2-氟-4-硝基苄腈(50.0g，301mmol)在EtOH(600mL)中的搅拌溶液中加入饱和氯化铵水溶液(50mL)和乙酸(3mL)，接着加入铁粉(2g，35.7mmol)。回流下加热混合物并经4h时间分批加入更多铁粉(123g，2.20mol)。将反应物再加热1h，然后使其冷却至室温，然后通过硅藻土短柱过滤。蒸发滤液至于并将残余物质在EtOAc(500mL)和水(200mL)之间分配。用水(50mL)和盐水(100mL)洗涤有机相，然后干燥(MgSO₄)并蒸发，得到标题化合物：δ_H(d₆-DMSO)6.41-6.46(2H，m)，6.52(2H，br s)，7.37-7.41(1H，m)。
制备例16：3，5-二氟-4-甲硫基苄腈

将3，4，5-三氟苯甲醛(6.89g，43mmol)在无水THF(100mL)中的搅拌溶液冷却至0℃并分小批经20分钟加入甲硫醇钠(3.26g，46mmol)。将混合物升温至室温并搅拌18h，然后倾入水中并用DCM(3×200mL)萃取。用盐水(50mL)洗涤后，干燥(MgSO₄)合并的有机物并蒸发。通过柱色谱法(IH-EtOAc-DCM 93∶5∶2)纯化残余物，得到3，5-二氟-4-甲硫基苯甲醛：δ_H(CDCl₃)2.54(3H，s)，7.35(2H，d)，9.86(1H，t)。首先用NH₂OH·HCl(778mg，11.2mmol)在水(5mL)中的溶液处理该醛(1.0g，5.32mmol)在EtOH(12mL)中的搅拌溶液，接着用K₂CO₃(780mg，5.64mmol)在水(10mL)中的溶液处理。1h后，真空除去EtOH并用EtOAc(100mL)萃取剩下的水相。干燥(MgSO₄)有机相，蒸发并通过柱色谱法(IH-EtOAc 9∶1)纯化残余物，得到3，5-二氟-4-甲硫基苯甲醛肟：δ_H(CDCl₃)2.50(3H，s)，7.14(2H，d)，7.47(1H，s)和8.03(1H，s)。回流下将该肟的样品(1.14g，5.6mmol)、对甲苯磺酸(1.07g，5.6mmol)和乙酸(45mL)加热20h。冷却后，蒸发溶剂并加入Na₂CO₃水溶液(10mL)，确保水溶液的pH为8。用DCM(2×100mL)萃取混合物，并干燥(MgSO₄)合并的有机层，蒸发并通过柱色谱法(IH-EtOAc 9∶1)纯化残余物，得到标题腈：δ_H(CDCl₃)2.58(3H，s)，7.20(2H，d)。
制备例17：2-氟-4-甲硫基苄腈

将4-氨基-2-氟苄腈(4.00g，29.4mmol)、二甲基二硫醚(40.6mL，452mmol)和亚硝酸叔丁酯(4.80mL，40.1mmol)在1，2-二氯乙烷(800mL)中的混合物加热至60℃，保持10分钟。滴加4-氨基-2-氟苄腈(37.0g，272mmol)在1，2-二氯乙烷(250mL)中的悬浮液，同时加入亚硝酸叔丁酯(43.3mL，362mmol)，将温度保持在大约60℃。加入反应物后，移去油浴并将反应物搅拌2h。加入水(200mL)并将反应混合物剧烈搅拌10分钟。分离各层，用水(100mL)、2M HCl水溶液(200mL)、盐水(100mL)洗涤有机相，然后干燥(MgSO₄)，过滤并减压浓缩。将残余物吸附在硅胶上，然后经柱色谱法(EtOAc-IH，1∶9)纯化，得到标题化合物：δ_H(CDCl₃)2.52(3H，s)，6.99-7.07(2H，m)，7.46-7.49(1H，m)。
制备例18：4-氰基-2-氟苯甲酸甲酯

将4-氰基-2-氟苯甲酸(2g，12.11mmol)的悬浮液悬浮于甲苯(5mL)中并加入足量MeOH(约10mL)以得到澄清溶液。滴加三甲基甲硅烷基重氮甲烷(7.87mL在己烷中的2M溶液，15.75mmol)，得到黄色溶液，将其再搅拌10分钟。然后滴加乙酸，直至得到无色溶液，然后用EtOAc(50mL)稀释该无色溶液。用饱和Na₂CO₃水溶液(20mL)和盐水(20mL)洗涤有机溶液，然后干燥(MgSO₄)。蒸发溶剂，得到标题酯：δ_H(CDCl₃)3.98(3H，s)，7.47(1H，dd)，7.53(1H，dd)，8.06(1H，t)。
制备例19：4-氰基-2-氟苯磺酰胺

向3-氟-4-甲硫基苄腈(1.5g，8.9mmol)在DCM(75mL)中的溶液中加入水(15mL)。轻轻地向剧烈搅拌的混合物中鼓入氯气50分钟。分离有机相，干燥(MgSO₄)并蒸发。将残余物溶于亚硫酰氯(25mL)中并在90℃下加热6.5h，除去溶剂，得到4-氰基-2-氟苯磺酰氯：δ_H(CDCl₃)7.67(1H，d)，7.70(1H，d)，8.14(1H，dd)。向该磺酰氯(80mg，365μmol)的搅拌溶液中鼓入氨气10分钟。然后除去溶剂并通过柱色谱法(IH-EtOAc 2∶1)纯化残余物，得到标题腈：δ_H(d₆-DMSO)7.88(1H，dd)，7.95(2H，br s)7.96(1H，t)，8.11(1H，dd)。
制备例20：3-氯-4-甲硫基苄腈

向3-氯-4-氟苄腈(10g，64mmol)在无水DMF(200mL)中的搅拌溶液中加入固体甲硫醇钠(5.4g，77mmol)。将所得混合物在80℃下加热18h，冷却并蒸发溶剂。将残余物在EtOAc(250mL)和水(150mL)之间分配，再用EtOAc(250mL)萃取水相。用水(2×100mL)和盐水(100mL)洗涤合并的有机物，然后干燥(MgSO₄)并蒸发，得到标题腈：δ_H(CDCl₃)2.53(3H，s)，7.20(1H，d)，7.52(1H，dd)，7.60(1H，d)。
使用制备例20中概述的方法，通过硫醇盐与合适的4-氟苄腈的反应来制备表1中列出的化合物。
表1

使用制备例11中概述的方法，通过相应的腈与羟胺的反应来制备表2中列出的偕胺肟。
表2


制备例42：1-叠氮基-4-甲磺酰基苯

在冰水浴上冷却4-甲磺酰基苯胺(1.0g，5.84mmol)在TFA(1mL)中的搅拌溶液并滴加亚硝酸钠(3.1g，36.5mmol)在冷水(10mL)中的溶液，接着滴加叠氮化钠(3.25g，50mmol)在水(10mL)中的溶液。使反应物升温至室温并在30分钟后，通过分批加入固体NaHCO₃进行中和。用EtOAc(100mL)萃取混合物，干燥(MgSO₄)并蒸发，得到标题化合物：δ_H(CDCl₃)3.08(3H，s)，7.21(2H，d)，7.98(2H，d)。
制备例43：4-溴甲基-1-(4-甲磺酰基苯基)-1H-[1，2，3]三唑

将1-叠氮-4-甲磺酰基苯(1.35g，6.85mmol)和丙-2-炔-1-醇(280mg，5mmol)在甲苯(50mL)和THF(50mL)的混合物中的搅拌溶液在100℃下加热17h。冷却后，除去溶剂并通过柱色谱法(EtOAc)纯化残余物，得到[1-(4-甲磺酰基苯基)-1H-[1，2，3]三唑-4-基]甲醇和[3-(4-甲磺酰基苯基)-3H-[1，2，3]三唑-4-基]甲醇的不可分的混合物：RT＝2.32分钟；m/z(ES⁺)＝254.0[M+H]⁺。将该醇混合物样品(277mg，1.03mmol)溶于DCM(5mL)中并加入亚硫酰氯(600μL，8.22mmol)。搅拌17h后，除去溶剂并通过柱色谱法(IH-EtOAc 1∶1)纯化残余物，得到4-氯甲基-1-(4-甲磺酰基苯基)-1H-[1，2，3]三唑和5-氯甲基-1-(4-甲磺酰基苯基)-1H-[1，2，3]三唑的混合物：RT＝2.72分钟；m/z(ES⁺)＝272.0[M+H]⁺。将该氯化物混合物(430mg，1.58mmol)、LiBr(1.41g，15.8mmol)和丙酮(10mL)的溶液加热回流3h。然后除去溶剂，用DCM (20mL)吸收残余物并用水(10mL)洗涤。将有机相通过疏水玻璃料，蒸发并通过柱色谱法(IH-EtOAc 7∶3)纯化残余物，得到标题溴化物：RT 2.65分钟(方法2)；m/z(ES⁺)＝318.0[M+H]⁺。
制备例44：4-溴甲基-1-(4-甲磺酰基苯基)-1H-吡唑

用氢化钠(30mg在油中的60％分散液，750μmol)处理4-吡唑羧酸乙酯(102mg，730μmol)在无水DMSO(2mL)中的溶液。搅拌30分钟后，加入1-氟-4-甲磺酰基苯(127mg，730μmol)并将所得混合物在160℃下加热18h。然后将冷却的混合物倾入水(5mL)中，通过过滤收集沉淀并风干，得到1-(4-甲磺酰基苯基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯：RT＝3.09分钟；m/z(ES⁺)＝295.1[M+H]⁺。将该酯的样品(810mg，2.76mmol)溶于无水THF(10mL)中，在氩气下冷却至0℃并加入LiAlH₄(3mL在THF中的1M溶液，3mmol)。搅拌1h后，通过加入含有水(1mL)的THF(20mL)终止反应并用Rochelle’s盐水溶液(0.5M，10mL)稀释。用EtOAc(2×100mL)萃取混合物，干燥(MgSO₄)合并的有机物并蒸发，得到[1-(4-甲磺酰基苯基)-1H-吡唑-4-基]甲醇：RT＝2.30分钟；m/z(ES⁺)＝253.0[M+H]⁺。用亚硫酰氯(370μL，5.0mmol)处理在干燥DCM(15mL)中的该醇的样品(570mg，2.25mmol)和DMF(10μL)。搅拌17h后，除去溶剂并通过柱色谱法(IH-EtOAc 1∶1)纯化残余物，得到4-氯甲基-1-(4-甲磺酰基苯基)-1H-吡唑：RT＝3.01分钟；m/z(ES⁺)＝271.0[M+H]⁺。将该氯化物(212mg，780μmol)和LiBr(347mg，3.9mmol)在丙酮(50mL)中的混合物加热回流3h，冷却并除去溶剂。用CH₂Cl₂(20mL)吸收残余物，用水(10mL)洗涤并通过疏水玻璃料来干燥有机相。蒸发得到标题溴化物：RT 3.09分钟(方法2)；m/z(ES⁺)＝315.0[M+H]⁺。
制备例45：2，5-二氟-4-甲硫基苯甲酸

用甲苯(15mL)稀释2，4，5-三氟苯甲酸(2g，11.4mmol)的甲醇(5mL)溶液并滴加三甲基甲硅烷基重氮甲烷(6.8mL在己烷中的2M溶液，13.7mmol)。5分钟后，加入100μL冰醋酸并用EtOAc(100mL)稀释混合物，用水和盐水洗涤，然后干燥(MgSO₄)。蒸发溶剂，得到2，4，5-三氟苯甲酸甲酯：δ_H(CDCl₃)3.94(3H，s)，7.01(1H，dt)，7.80(1H，ddd)。将该酯(1.0g，5.7mmol)在无水DMF(15mL)中的搅拌溶液冷却至-78℃并加入甲硫醇钠(402mg，5.7mmol)在无水DMF中的悬浮液。经2.5h使混合物升温至室温并倾至水(25mL)中。在萃取入EtOAc(150mL)后，用水(20mL)洗涤有机相，干燥(MgSO₄)并蒸发至干。通过柱色谱法(IH-DCM 7∶3)纯化残余物，得到2，5-二氟-4-甲硫基苯甲酸甲酯：δ_H(CDCl₃)2.50(3H，s)，3.92(3H，s)，6.91(1H，dd)，7.57(1H，dd)。用LiOH(645mg，15mmol)处理该酯(300mg，1.4mmol)在MeOH(15mL)中的溶液，并在室温下将混合物搅拌2h。用浓HCl酸化至pH 1后，蒸发甲醇至小体积并通过过滤收集标题酸：δ_H(CDCl₃)2.48(3H，s)，6.89(1H，dd)，7.57(1H，dd)。
制备例46：4-(2-羧基乙氧基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

在充入氩气的烧瓶中混合固体4-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯(3g，14.9mmol)和氢化钠(42mg在油中的60％分散液，1mmol)。加入丙烯酸甲酯(13.4mL，149mmol)并在室温下将混合物搅拌18h。真空除去残留溶剂并通过柱色谱法(IH-EtOAc 9∶1然后1∶1)纯化残余物，得到4-(2-甲氧羰基乙氧基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：δ_H(CDCl₃)1.46(9H，s)，1.52(2H，m)，1.81(2H，m)，2.59(2H，t)，3.12(2H，ddd)，3.48(1H，dddd)，3.70(3H，s)，3.72(2H，m)，3.74(2H，t)。将该酯的样品(933mg，3.25mmol)溶于MeOH(10mL)中并加入NaOH水溶液(3.25mL 2M溶液，6.5mmol)。搅拌1h后，蒸发溶剂，将残余物溶于水(50mL)中并用乙醚(20mL)洗涤。用稀HCl将水相酸化至pH2并萃取入EtOAc(100mL)中。干燥(MgSO₄)有机相并除去溶剂，得到标题酸：δ_H(CDCl₃)1.46(9H，s)，1.54(2H，m)，1.82(2H，m)，2.64(2H，t)，3.12(2H，ddd)，3.51(1H，dddd)，3.72(2H，m)，3.75(2H，t)。
制备例47：5-氯-3-(4-甲磺酰基苯基)-[1，2，4]噁二唑

将N-羟基-4-甲磺酰基苄脒(2.14g，10mmol)和吡啶(1mL)在无水DMF(15mL)中的搅拌溶液冷却至0℃并一次性加入纯的氯甲酸甲酯(0.85mL，11mmol)。将混合物升温至室温并在1.5h后蒸发溶剂，加入水(20mL)和在EtOAc中的2％MeOH(150mL)。分离水层并再次用在EtOAc中的2％MeOH萃取。用盐水洗涤合并的有机物，并干燥(MgSO₄)。除去溶剂，并将残余物溶于吡啶(10mL)中。加热回流3h后，蒸发吡啶，得到3-(4-甲磺酰基苯基)-[1，2，4]噁二唑-5-醇：δ_H(d₆-DMSO)3.29(3H，s)，8.06(2H，d)，8.12(2H，d)。在温和回流下加热溶于POCl₃(30mL)中的3-(4-甲磺酰基苯基)-[1，2，4]噁二唑-5-醇的样品(1.23g，5.15mmol)并加入吡啶(0.42mL，5.12mmol)和4-DMAP(4mg)。继续加热22h，之后使混合物冷却并倾至冰/水(300mL)上。用EtOAc(3×150mL)萃取水层，用盐水洗涤合并的有机物，干燥(MgSO₄)并蒸发，得到标题氯代噁二唑：δ_H(d₆-DMSO)3.30(3H，s)，8.14(2H，d)，8.24(2H，d)。
制备例48：4-(2-乙氧羰基-1-羟基乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

向4-(2-乙氧羰基乙酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(2.69g，8.98mmol)在EtOH(80mL)中的溶液中加入固体硼氢化钠(374mg，9.88mmol)。在室温下搅拌0.5h后，蒸发溶剂并通过柱色谱法(IH-EtOAc)纯化残余物，得到标题酯：δ_H(CDCl₃)1.25(2H，m)，1.29(3H，t)，1.46(9H，s)，1.52(1H，m)，1.60(1H，m)，1.85(1H，dddd)，2.42(1H，dd)，2.53(1H，dd)，2.67(2H，br t)，3.02(1H，d)，3.79(1H，m)，4.16(2H，m)，4.19(2H，q)。
制备例49：3-氟-4-甲基亚磺酰基苯甲酸和3-氟-4-甲磺酰基苯甲酸

经大约1h分批用甲硫醇钠(2.47g，35.2mmol)处理氩气下的3，4-二氟苯甲醛(5.0g，35.2mmol)在干燥乙腈(50mL)中的搅拌溶液。18h后，用EtOAc(50mL)稀释反应混合物并用饱和NaHCO₃水溶液(2×10mL)和饱和NH₄Cl水溶液(20mL)洗涤。干燥(MgSO₄)有机相，蒸发并通过柱色谱法(IH-EtOAc 9∶1然后7∶3)纯化残余物，得到3-氟-4-甲硫基苯甲醛：δ_H(CDCl₃)2.54(3H，s)，7.32(1H，t)，7.51(1H，dd)，7.63(1H，dd)，9.92(1H，d)。将该硫醚的样品(1.0g，5.38mmol)悬浮在水中，然后加入NaH₂PO₄(705mg，5.88mmol)、叔丁醇(44mL)和亚氯酸钠(1.59g，63mmol)。剧烈搅拌1.5h后，减压除去叔丁醇并加入EtOAc(50mL)。用1M NaOH水溶液(3×20mL)萃取混合物并用稀HCl将合并的萃取液酸化至pH2。将沉淀萃取入经干燥(MgSO₄)的EtOAc并蒸发，得到标题亚砜和砜的不可分的混合物：亚砜RT＝2.22分钟(方法2)，m/z(ES⁺)＝203.0[M+H]⁺；砜RT＝2.22分钟(方法2)，m/z(ES⁺)＝219.0[M+H]⁺。
合成噁二唑的一般方法
方法A：
4-[5-(3-氰基-4-甲氧基苯基)-[1，2，4]噁二唑-3-基甲氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例1)

超声并加热4-(N-羟基甲脒基甲氧基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(制备例11，150mg，0.36mmol)和KO^tBu(49mg，0.44mmol)在DMSO(1mL)中的混合物直至获得可使用的溶液，然后将其加入3-氰基-4-甲氧基苯甲酸甲酯(71mg，0.4mmol)中。将反应混合物在60℃下搅拌15h，用乙酸(5滴)中和并通过RP-HPLC纯化，得到标题化合物：δ_H(CDCl₃)1.49(9H，s)，1.68(2H，m)，1.95(2H，m)，3.12(2H，m)，3.72(1H，m)，3.84(2H，m)，4.08(3H，s)，4.75(2H，s)，7.17(1H，d)，8.36(1H，dd)，8.41(1H，d)。
方法B：
4-[5-(4-甲磺酰基苯基)-[1，2，4]噁二唑-3-基甲氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例2)

用EDC(76mg，0.44mmol)处理4-甲磺酰基苯甲酸(88mg，0.44mmol)和HOBt(60mg，0.44mmol)在THF(0.8mL)中的溶液，随后用4-(N-羟基甲脒基甲氧基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(制备例11，109mg，0.4mmol)在THF(0.4mL)中的悬浮液处理。在室温下将混合物搅拌过夜。加入KO^tBu(205mg，1.83mmol)在THF(0.6mL)中的溶液，引起形成稠的固体沉淀。加入足量THF(0.3mL)以得到流体混合物，将其再搅拌2h。蒸发溶剂，将残余物溶于DMSO(0.3mL)、MeOH(0.4mL)和DCM(0.4mL)的混合物中并通过RP-HPLC纯化，得到标题化合物：δ_H(CDCl₃)1.49(9H，s)，1.68(2H，m)，1.95(2H，m)，3.15(3H，s)，3.16(2H，m)，3.75(1H，m)，3.84(2H，m)，4.80(2H，s)，8.17(2H，d)，8.41(2H，d)。
方法C：
4-[5-(2-氟-4-甲磺酰基苯基)-[1，2，4]噁二唑-3-基甲氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例3)

在冰水浴中冷却2-氟-4-甲磺酰基苯甲酸(100mg，460μmol)和三乙胺(64μL，460μmol)在干燥THF(5mL)中的搅拌溶液并加入氯甲酸异丁酯(60μL，460μmol)。将反应混合物升温至室温，在20分钟后加入4-(N-羟基甲脒基甲氧基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(制备例11，104mg，380μmol)并将混合物搅拌过夜。用EtOAc(20mL)稀释反应混合物，用水(20mL)、饱和NaHCO₃水溶液(20mL)、盐水(20mL)洗涤，并干燥(MgSO₄)。除去溶剂并将残余物溶于甲苯(15mL)中，加入4A分子筛(0.25g)并将反应混合物加热回流4天。冷却溶液后，经由硅藻土过滤，蒸发并通过柱色谱法纯化残余物，得到标题化合物：δ_H(CDCl₃)1.47(9H，s)，1.64(2H，m)，1.91(2H，m)，3.13(2H，ddd)，3.14(3H，s)，3.72(1H，tt)，3.81(2H，m)，4.79(2H，s)，7.89(1H，d)，7.91(1H，d)，8.41(1H，t)；RT＝3.65分钟(方法2)，m/z(ES⁺)＝456.1[M+H]⁺。
方法D：
4-[5-(4-甲硫基苯基)-[1，2，4]噁二唑-3-基甲氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例4)

以滴加方式向4-甲硫基苯甲酸(1.23g，7.31mmol)在干燥DCM(25mL)中的悬浮液中加入草酰氯(0.83mL，9.51mmol)。在室温下搅拌2h后，真空除去溶剂和过量的草酰氯。将残余物溶于干燥DCM(30mL)中并加入三乙胺(2.55mL，18.3mmol)，接着加入4-(N-羟基甲脒基甲氧基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(制备例11，2.00g，7.32mmol)的溶液。3h后，加入水(30mL)和DCM(30mL)，分离有机相，干燥(MgSO₄)并蒸发。在氩气下，将残余物溶于无水THF(20mL)中并分批加入氢化钠(287mg，12.0mmol)。搅拌36h后，除去溶剂，加入饱和氯化铵水溶液(30mL)并将所得悬浮液萃取入EtOAc(2×80mL)中。用盐水洗涤合并的有机物，干燥(MgSO₄)并蒸发。然后通过柱色谱法(IH-EtOAc 3∶2)纯化残余物，得到标题化合物：δ_H(CDCl₃)1.50(9H，s)，1.65(2H，m)，1.95(2H，m)，2.60(3H，s)，3.15(2H，m)，3.75(1H，m)，3.80(2H，m)，4.80(2H，s)，7.40(2H，d)，8.05(2H，d)。
方法E：
4-[3-(4-甲硫基苯基)-[1，2，4]噁二唑-5-基甲氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例5)

在冰水浴中冷却4-羧甲氧基哌啶-1-羧酸叔丁酯(制备例1，854mg，2.11mmol)和三乙胺(460μL，3.3mmol)在甲苯(20mL)中的搅拌溶液并加入氯甲酸异丁酯(430μL，3.31mmol)。10分钟后，使反应混合物升温至室温并再搅拌45分钟。然后一次性加入N-羟基-4-甲硫基苄脒(500mg，2.74mmol)并将所得溶液加热回流18h，然后冷却至室温。加入饱和NaHCO₃水溶液并用EtOAc萃取混合物。用水、盐水洗涤有机相，干燥(MgSO₄)并蒸发，通过柱色谱法(IH-EtOAc 17∶3)纯化残余物，得到标题化合物：δ_H(CDCl₃)1.47(9H，s)，1.64(2H，m)，1.91(2H，m)，2.54(3H，s)，3.14(2H，ddd)，3.72(1H，tt)，3.79(2H，m)，4.83(2H，s)，7.33(2H，d)，8.01(2H，d)；RT＝4.20分钟(方法2)，m/z(ES⁺)＝406.1[M+H]⁺。
方法F：
4-[5-(3-氰基-4-氟苯基)-[1，2，4]噁二唑-3-基甲氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例6)

将3-氰基-4-氟苯甲酸(200mg，1.21mmol)、二异丙基乙胺(695μL，4.0mmol)、4-(N-羟基甲脒基甲氧基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(制备例11，364mg，1.33mmol)和HOBt(204mg，1.51mmol)在干燥DMF(10mL)中的溶液搅拌5分钟并加入EDC(280mg，1.46mmol)。再搅拌22h后，将混合物倾入水(5mL)中并用EtOAc(50mL)萃取。用水洗涤有机相，干燥(MgSO₄)，蒸发并将残余物通过硅胶柱(IH-EtOAc 1∶3)。除去溶剂后，将固体残余物悬浮于甲苯中并将混合物加热回流21h。将冷却的溶液蒸发在二氧化硅上并通过柱色谱法(IH-EtOAc 7∶3)纯化，得到标题化合物：δ_H(CDCl₃)1.47(9H，s)，1.63(2H，m)，1.92(2H，m)，3.12(2H，ddd)，3.71(1H，tt)，3.80(2H，m)，4.74(2H，s)，7.44(1H，t)，8.41(1H，ddd)，8.47(1H，dd)；RT＝3.87分钟(方法2)，m/z(ES⁺)＝403.1[M+H]⁺。
使用所示的一般方法合成表3中列出的各噁二唑化合物。
表3












实施例96和97：4-[3-(4-甲基亚磺酰基苯基)-[1，2，4]噁二唑-5-基甲氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯和4-[3-(4-甲磺酰基苯基)-[1，2，4]噁二唑-5-基甲氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

向4-[3-(4-甲硫基苯基)-[1，2，4]噁二唑-5-基甲氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例5，590mg，1.45mmol)在DCM(50mL)中的搅拌溶液中一次性加入mCPBA(540mg，70％纯度，2.19mmol)。1h后，用饱和NaHCO₃水溶液(20mL)洗涤反应混合物，干燥(MgSO₄)有机相并蒸发在二氧化硅上。通过柱色谱法进行纯化，首先用IH-EtOAc 1∶1洗脱，得到标题砜：δ_H(CDCl₃)1.50(9H，s)，1.68(2H，m)，1.95(2H，m)，3.14(3H，s)，3.18(2H，m)，3.77(1H，m)，3.83(2H，m)，4.90(2H，s)，8.12(2H，d)，8.35(2H，d)。再用纯的EtOAc洗脱，得到标题亚砜：δ_H(CDCl₃)1.49(9H，s)，1.67(2H，m)，1.94(2H，m)，2.81(3H，s)，3.18(2H，m)，3.76(1H，m)，3.82(2H，m)，4.89(2H，s)，7.81(2H，d)，8.30(2H，d)。
将该硫化物与一当量mCPBA反应，仅得到该亚砜；与两当量反应，得到作为唯一产物的砜。
使用概述于实施例96和97中的方法，通过用mCPBA氧化来制备表4中列出的化合物，并通过LCMS方法2分析。
表4






实施例147：4-[5-(4-甲磺酰基苯基)-[1，2，4]噁二唑-3-基甲氧基]哌啶-1-羧酸1-甲基环丁酯

用三氟乙酸(3.8mL)处理4-[5-(4-甲磺酰基苯基)-[1，2，4]噁二唑-3-基甲氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例2，760mg，1.74mmol)在DCM(8mL)中的的溶液。18h后，蒸发溶剂并用EtOAc(80mL)吸收残余物，用2M NaOH水溶液(2×10mL)快速洗涤，确保洗涤液pH≥14。干燥(MgSO₄)有机相并蒸发，得到4-[5-(4-甲磺酰基苯基)-[1，2，4]噁二唑-3-基甲氧基]哌啶：RT＝2.07分钟(方法2)，m/z(ES⁺)＝338[M+H]⁺。
在单独的器中，向1-甲基环丁醇(38mg，440μmol)在THF(4mL)中的的溶液中加入三光气(173mg，583μmol)。搅拌1h后，加入三乙胺(123μL，880μmol)并继续再搅拌20分钟，之后将该氯甲酸酯乳状溶液快速加入上述制备的4-[5-(4-甲磺酰基苯基)-[1，2，4]噁二唑-3-基甲氧基]哌啶(51mg，150μmol)在干燥THF(2mL)中的溶液中。搅拌17h后，用DCM稀释反应物并用水洗涤。用DCM再萃取水层，并干燥(MgSO₄)合并的有机萃取液。除去溶剂并通过RP-HPLC纯化残余物，得到标题化合物：δ_H(CDCl₃)1.56(3H，s)，1.66(3H，m)，1.80(1H，m)，1.93(2H，m)，2.13(2H，m)，2.31(2H，m)，3.13(3H，s)，3.15(2H，m)，3.73(1H，m)，3.82(2H，m)，4.77(2H，s)，8.14(2H，d)，8.38(2H，d)；RT＝3.61(方法2)，m/z(ES⁺)＝450.1[M+H]⁺。
根据实施例147中概述的方法，通过将合适的哌啶和必要的氯甲酸酯反应来合成表5中列出的氨基甲酸酯。
表5


实施例163：4-{5-[4-(3-甲氧基丙基氨基甲酰基)苯基]-[1，2，4]噁二唑-3-基甲氧基}哌啶-1-羧酸叔丁酯

用2M NaOH水溶液(1mL)处理4-[5-(4-甲氧羰基苯基)-[1，2，4]噁二唑-3-基甲氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例35，450mg，1.08mmol)在MeOH(20mL)中的剧烈搅拌的悬浮液。2h后，蒸发甲醇并加入水(5mL)。用EtOAc(2×10mL)洗涤该含水混合物，用冰醋酸酸化至pH 4并用EtOAc(3×20mL)萃取。用盐水(10mL)洗涤合并的有机物，并干燥(MgSO₄)。蒸发溶剂，得到4-[5-(4-羧基苯基)-[1，2，4]噁二唑-3-基甲氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯：RT＝3.57分钟(方法2)，m/z(ES⁺)＝404.1[M+H]⁺。
用EDC(25mg，130μmol)处理该酸(40mg，100μmol)和HOBt(17.5mg，130μmol)在干燥THF(2mL)中的搅拌溶液。20分钟后，加入3-甲氧基丙胺(21μL，200μmol)并继续搅拌过夜。用EtOAc(15mL)稀释混合物，用水、饱和碳酸钠水溶液、盐水洗涤，干燥并蒸发，得到标题化合物：δ_H(CDCl₃)1.39(9H，s)，1.56(2H，m)，1.85(4H，m)，3.04(2H，m)，3.34(3H，s)，3.54(4H，m)，3.63(1H，m)，3.82(2H，m)，4.68(2H，s)，7.02(1H，brt)，7.85(2H，d)，8.16(2H，d)；RT＝3.54分钟(方法2)，m/z(ES⁺)＝475.2[M+H]⁺。
以类似于实施例163中描述的方式合成表6中的化合物。
表6







实施例211：2-{4-[5-(4-甲磺酰基苯基)-[1，2，4]噁二唑-3-基甲氧基]哌啶-1-基}嘧啶

搅拌4-[5-(4-甲磺酰基苯基)-[1，2，4]噁二唑-3-基甲氧基]哌啶(见实施例147，50mg，148μmol)、2-溴嘧啶(26mg，164μmol)和DBU(44μL，295μmol)在1，4-二噁烷中的溶液直至原料已被消耗。浓缩混合物并通过柱色谱法(EtOAc)纯化，得到标题化合物：RT＝3.11分钟(方法2)，m/z(ES⁺)＝416.0[M+H]⁺。
通过2-溴嘧啶或2-氟吡啶与合适的哌啶(使用实施例211中描述的方法从相应的哌啶-1-羧酸叔丁酯合成)的反应来合成表7中的化合物。
表7


实施例219：4-{3-[3-氟-4-(2-甲氧基乙磺酰基)苯基]-[1，2，4]噁二唑-5-基甲氧基}哌啶-1-羧酸叔丁酯

在氩气下，将氢化钠(11.5mg在油中的60％分散液，290μmol)悬浮在无水DMF(0.5mL)中并冷却至0℃。经套管加入4-{3-[3-氟-4-(2-羟基乙硫基)苯基]-[1，2，4]噁二唑-5-基甲氧基}哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例69，104mg，229μmol)在无水DMF(1mL)中的溶液并在室温下将混合物搅拌30分钟。加入纯的甲基碘(18μL，290μmol)并继续搅拌18h。除去溶剂并加入乙醚(10mL)和水(2mL)。分离有机物，蒸发并通过制备tlc(IH-EtOAc 1∶1)纯化残余物，得到4-{3-[3-氟-4-(2-甲氧基乙硫基)苯基]-[1，2，4]噁二唑-5-基甲氧基}哌啶-1-羧酸叔丁酯：RT＝4.27分钟(方法2)；m/z(ES⁺)＝468.1[M+H]⁺。使用实施例96和97描述的方法氧化该硫醚的样品，得到标题砜：RT＝3.67分钟(方法2)；m/z(ES⁺)＝500.0[M+H]⁺。
实施例220：4-{2-[3-(4-甲磺酰基苯基)-[1，2，4]噁二唑-5-基氧基]乙基}哌啶-1-羧酸叔丁酯

用氢化钠(17mg在油中的60％分散液，425μmol)处理4-(2-羟基乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(98mg，427μmol)在无水DMF(1.5mL)中的溶液并在氩气下将混合物搅拌35分钟。一次性加入5-氯-3-(4-甲磺酰基苯基)-[1，2，4]噁二唑(制备例47，100mg，388μmol)并继续搅拌20h。除去溶剂并用EtOAc(25mL)和水(10mL)吸收残余物。分离有机相，用盐水洗涤，并干燥(MgSO₄)。除去溶剂并通过柱色谱法(IH-EtOAc 1∶1)纯化残余物质，得到标题醚：RT＝3.94分钟(方法2)；m/z(ES⁺)＝396.0[M+H-C₄H₈]⁺。
使用类似于实施例220中描述的方法制备表8中列出的5-烷氧基-[1，2，4]噁二唑化合物。
实施例221：4-(2-{[3-(4-甲磺酰基苯基)-[1，2，4]噁二唑-5-基]甲基氨基}乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

在室温下将4-(2-氧代乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(300mg，1.32mmol)在甲苯(1mL)中的溶液和甲胺(0.66mL在甲苯中的2M溶液)搅拌1h并除去溶剂。将残余物溶于1∶1THF/MeOH(2mL)中并加入硼氢化钠(60mg，1.58mmol)。搅拌过夜后，用EtOAc(50mL)稀释混合物，用水(10mL)、盐水(10mL)洗涤，并干燥(MgSO₄)。蒸发溶剂，得到粗品4-(2-甲氨基乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，将其溶于无水DMF(1mL)中并加入5-氯-3-(4-甲磺酰基苯基)-[1，2，4]噁二唑(制备例47，100mg，388μmol)中，接着加入三乙胺(54μL，388μmol)。将该混合物在120℃下加热2h，冷却并除去溶剂。通过RP-HPLC(CH₃CN-H₂O)纯化残余物，得到标题化合物：RT＝3.95分钟(方法2)；m/z(ES⁺)＝465.1[M+H]⁺。
通过合适的胺与5-氯-3-(4-甲磺酰基苯基)-[1，2，4]噁二唑的反应类似地制备表8中列出的5-烷基氨基[1，2，4]噁二唑化合物。
表8


实施例228：4-{2-[3-(3-氟-4-甲磺酰基苯基)-[1，2，4]噁二唑-5-基]乙酰基}哌啶-1-羧酸叔丁酯

用戴斯-马丁氧化剂(Dess-Martin periodinane)(229mg，539μmol)处理4-{2-[3-(3-氟-4-甲磺酰基苯基)-[1，2，4]噁二唑-5-基]-1-羟基乙基}哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例142，230mg，490μmol)在DCM(14mL)中的搅拌溶液。1h后，将混合物倾入2M NaOH水溶液(10mL)中并用乙醚(100mL)萃取。用盐水洗涤有机相，干燥(MgSO₄)并蒸发。通过柱色谱法(IH-EtOAc 2∶3)纯化残余物，得到标题化合物：RT＝3.67分钟(方法2)；m/z(ES⁺)＝468.0[M+H]⁺。
实施例229和230：4-[3-(3-氟-4-甲基氨磺酰基苯基)-[1，2，4]噁二唑-5-基甲氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯和4-[3-(4-二甲基氨磺酰基-3-氟苯基)-[1，2，4]噁二唑-5-基甲氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

用氢化钠(5.6mg在油中的60％分散液，140μmol)处理4-[3-(3-氟-4-氨磺酰基苯基)-[1，2，4]噁二唑-5-基甲氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例70，58mg，130μmol)在无水DMF(3mL)中的搅拌溶液。30分钟后，加入纯的甲基碘(8μL，130μmol)并继续搅拌3h。用EtOAc(50mL)稀释混合物，用水(10mL)和盐水(10mL)洗涤，并干燥(MgSO₄)。蒸发溶剂并通过制备HPLC纯化残余物，得到标题甲基磺酰胺：RT＝3.57分钟(方法2)；m/z(ES⁺)＝415.0[M+H-C₄H₈]⁺和标题二甲基磺酰胺：RT＝3.82分钟(方法2)；m/z(ES⁺)＝485.0[M+H]⁺。
实施例231：4-[1-(4-甲磺酰基苯基)-1H-[1，2，3]三唑-4-基甲氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

在室温下将4-溴甲基-1-(4-甲磺酰基苯基)-1H-[1，2，3]三唑(制备例42，142mg，450μmol)、三氟甲磺酸银(113mg，441μmol)和4-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯(176mg，875μmol)在DCM(5mL)中的混合物搅拌18h。用水(5mL)洗涤后，除去溶剂并通过柱色谱法(IH-EtOAc 1∶1)纯化残余物，得到标题化合物：RT＝3.34分钟(方法2)；m/z(ES⁺)＝437.1[M+H]⁺。
实施例232：4-[1-(4-甲磺酰基苯基)-1H-吡唑-4-基甲氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

使用实施例231中描述的方法，将4-溴甲基-1-(4-甲磺酰基苯基)-1H-吡唑(制备例43)转化为标题化合物：RT＝3.47分钟；m/z(ES⁺)＝436.1[M+H]⁺。
实施例233：4-[5-(4-戊基环己基)-[1，2，4]噁二唑-3-基]苯胺

将{4-[5-(4-戊基环己基)-[1，2，4]噁二唑-3-基]苯基}氨基甲酸叔丁酯(实施例61，26mg，63μmol)在DCM(1mL)和三氟乙酸(1mL)的混合物中的溶液搅拌30分钟。除去溶剂，用DCM(4mL)吸收残余物，用饱和Na₂CO₃水溶液(2mL)洗涤该溶液，并干燥(MgSO₄)。蒸发溶剂，得到标题苯胺：RT＝4.72分钟(方法2)；m/z(ES⁺)＝314.3[M+H]⁺。
实施例234：4-{3-[3-(2-羟基乙基氨基)-4-甲磺酰基苯基]-[1，2，4]噁二唑-5-基甲氧基}哌啶-1-羧酸叔丁酯

在室温下将4-[3-(3-氟-4-甲磺酰基苯基)-[1，2，4]噁二唑-5-基甲氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例134，6.5mg，14μmol)和乙醇胺(60.5μL，1mmol)在DMF(1mL)中的溶液搅拌72h。除去溶剂并通过柱色谱法(EtOAc然后THF)纯化残余物，得到标题化合物：RT＝3.52分钟(方法2)；m/z(ES⁺)＝497.2[M+H]⁺。
实施例235和236：4-[3-(3-二甲氨基-4-甲磺酰基苯基)-[1，2，4]噁二唑-5-基甲氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯和4-[3-(3-氨基-4-甲磺酰基苯基)-[1，2，4]噁二唑-5-基甲氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

在密封管中，将4-[3-(3-氟-4-甲磺酰基苯基)-[1，2，4]噁二唑-5-基甲氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例134，10mg，22μmol)溶于1M NH₃的DMF(1mL)溶液中并在80℃下加热65h。除去溶剂并通过制备薄层色谱法(IH-EtOAc 1∶1)纯化残余物，得到235(作为低极性成分)：RT＝3.77分钟(方法2)，m/z(ES⁺)＝481.3[M+H]⁺；以及236：RT＝3.59分钟；m/z(ES⁺)＝453.3[M+H]⁺。
实施例237：4-[3-(3，4-二氰基苯基)-[1，2，4]噁二唑-5-基甲氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

将氰化钠(23mg，470μmol)和4-[3-(3-氟-4-甲磺酰基苯基)-[1，2，4]噁二唑-5-基甲氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例134，10mg，22μmol)称入小容器中并加入DMSO(0.5mL)。在室温下将混合物搅拌72h，然后用EtOAc(10mL)稀释并用水(2×3mL)和盐水(2mL)洗涤。干燥(MgSO₄)后，除去溶剂并通过柱色谱法(IH-EtOAc 1∶1)纯化残余物，得到标题化合物：RT＝3.81分钟(方法2)；m/z(ES⁺)＝345.2[M+H-C₄H₈]⁺。
实施例238：4-[3-(3-氟-4-丙酰氨基苯基)-[1，2，4]噁二唑-5-基甲氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯

向4-[3-(3-氟-4-硝基苯基)-[1，2，4]噁二唑-5-基甲氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例65，700mg，1.66mmol)在EtOAc(30mL)中的溶液中加入在EtOAc(1mL)中的10％钯炭浆状物(87mg，82μmol)并在氢气氛中将混合物搅拌18h。通过硅藻土垫过滤后，除去溶剂，得到4-[3-(4-氨基-3-氟苯基)-[1，2，4]噁二唑-5-基甲氧基]哌啶-1-羧酸叔丁酯：RT＝3.65分钟(方法2)；m/z(ES⁺)＝393.1[M+H]⁺。首先用三乙胺(117μL，840μmol)处理在无水THF(5mL)中的该丙胺的样品(110mg，281μmol)样品，然后用丙酰氯(49μL，560μmol)处理。搅拌17h后，用EtOAc(80mL)稀释反应混合物，用饱和NaHCO₃水溶液(10mL)、盐水(10mL)洗涤，并干燥(MgSO₄)。除去溶剂并通过柱色谱法(IH-EtOAc 3∶2)纯化残余物，得到标题酰胺：RT＝3.74分钟(方法2)；m/z(ES⁺)＝449.1[M+H]⁺。
本发明的化合物的生物活性可以在以下测定系统中进行测试：
酵母报告基因测定法
基于酵母细胞的报告基因测定法之前已记载于文献(例如，参见Miret J.J.等人，2002，J.Biol.Chem.，277：6881-6887；Campbell R.M.等人，1999，Bioorg.Med.Chem.Lett.，9：2413-2418；King K.等人，1990，Science，250：121-123；WO 99/14344；WO 00/12704；以及US 6，100,042)中。简而言之，已对酵母细胞工程化以使内源性酵母G-α(GPA1)缺失并用由多种技术构建的G-蛋白嵌合体代替之。此外，使内源性酵母GPCR，Ste3缺失从而允许选择的哺乳动物GPCR异源表达。在酵母中，在真核细胞中保守的信息素信号转导途径的元件(例如，促分裂原激活的蛋白激酶途径)驱动Fus1的表达。通过将β-半乳糖苷酶(LacZ)置于Fus1启动子(Fus 1p)的控制下，已建立了其中受体激活导致酶读出(enzymatic read-out)的系统。
通过适应性改变的Agatep等所述的醋酸锂方法(Agatep，R.等人，1998，Transformation of Saccharomyces cerevisiae by the lithiumacetate/single-stranded carrier DNA/polyethylene glycol(LiAc/ss-DNA/PEG)protocol.Technical Tips Online，Trends Journals，Elsevier)转化酵母细胞。简而言之，酵母细胞在酵母胰蛋白胨板(YT)上生长过夜。将载体单链DNA(10μg)、两种Fuslp-LacZ报告基因质粒(一种具有URA选择标记而另一种具有TRP选择标记)各2μg、2μg酵母表达载体(2μg复制源)中的GPR119(人或小鼠受体)以及醋酸锂/聚乙二醇/TE缓冲液移液至微量离心管中。含有受体/无受体对照的酵母表达质粒具有LEU标记。将酵母细胞接种到该混合物中并在30℃下将反应进行60分钟。之后将酵母细胞在42℃下热激15分钟。之后细胞经洗涤并铺在选择平板上。该选择平板是不含LEU、URA和TRP的合成的确定成分的酵母培养基(SD-LUT)。在30℃下温育2-3天后，将选择平板上生长的菌落在LacZ测定法中进行测试。
为了进行β-半乳糖苷酶的荧光酶测定法，将携带人或小鼠GPR119受体的酵母细胞在液体SD-LUT培养基中生长过夜达到未饱和浓度(即细胞仍在分裂并且还没有达到稳定期)。用新鲜的培养基将它们稀释至最佳测定浓度并将90μl的酵母细胞加入到96孔黑色聚苯乙烯板(Costar)上。将溶于DMSO并在10％DMSO溶液中稀释至10X浓度的化合物加入至板中，并将板置于30℃下4h。4h之后，将β-半乳糖苷酶的底物加入至各个孔中。在这些实验中，使用了释放荧光黄的酶的底物荧光黄二(β-D-吡喃半乳糖苷)(FDG)，从而可进行荧光读出(fluorimetric read-out)。每孔加入20μl 500μM FDG/2.5％Triton X100(该洗涤剂是为了使细胞可渗透而必需的)。在将细胞与底物温育60分钟后，每孔加入20μl的1M碳酸钠以终止反应并增强荧光信号。之后将板置于荧光计中于485/535nm处读数。
本发明的化合物给出的荧光信号比背景信号(即在不含化合物的1％DMSO存在下获得的信号)增加了至少约1.5倍。给出至少5倍增加的本发明的化合物可能是优选的。
cAMP测定法
建立了表达重组人GPR119的稳定的细胞系并将该细胞系用于研究本发明的化合物对环AMP(cAMP)的细胞内水平的影响。该细胞单层经磷酸盐缓冲盐水洗涤并在37℃下用补充有1％DMSO的刺激缓冲液中的各种不同浓度的化合物刺激30分钟。之后将细胞溶解并使用Perkin ElmerAlphaScreen^TM(放大发光邻近测定(Amplified Luminescent ProximityHomogeneous Assay))cAMP试剂盒测定cAMP含量。缓冲液和测定条件记载于生产商的方案中。
本发明的化合物产生细胞内cAMP水平的浓度依赖性增加并且EC₅₀通常＜10μM。在cAMP测定法中显示低于1μM的EC₅₀的化合物可能是优选的。
体内饲养研究
本发明的化合物对体重以及食物和水摄取的影响在维持在反向(reverse-phase)光照下的自由进食的雄性Sprague-Dawley大鼠上进行测试。通过适当的给药途径(例如，腹膜内或口服)给药测试化合物和参比化合物并在接下来的24h内进行测定。将大鼠单独饲养在温度为21+4℃，湿度为55+2％的具有金属栅格地板的聚丙烯笼中。将具有笼垫的聚丙烯托盘置于各笼之下以检测任何食物溢出。将动物维持在反相明暗周期下(从09.30-17.30h熄灯8h)，期间用红色光照射房间。在两周的适应期期间，动物可以自由获取普通粉末状鼠料和自来水。鼠料置于具有铝盖的玻璃饲养罐中。在每个盖子上有3-4cm的小孔从而可以通过它获取食物。在黑暗期开始时对动物、饲养罐以及水瓶称重(精确到最接近的0.1g)。向动物给药本发明的化合物后的1、2、4、6和24h陆续测量饲养罐和水瓶并测量与用载体治疗的对照组相比各治疗组间在基线的任何显著性差异。
本发明所选择的化合物在≤100mg/kg的剂量下在一个或多个时间点表现出统计学上显著性的降低食欲作用。
本发明的化合物在胰β细胞(HIT-T15)的体外模型中的抗糖尿病作用
细胞培养物
从ATCC获得HIT-T15细胞(传代60)并在添加10％胎牛血清和30nM亚硒酸钠的RPMI1640培养基中培养。根据文献，全部试验均用低于传代70的细胞完成，所述文献描述了传代数超过81的该细胞系的改变的性质(Zhang HJ，Walseth TF，Robertson RP.Insulin secretion and cAMPmetabolism in HIT cells.Reciprocal and serial passage-dependent relationships.Diabetes.1989 Jan；38(1)：44-8)。
cAMP测定法
在96孔板中以100000细胞/0.1ml/孔在标准培养基中铺板HIT-T15细胞并培养24h，接着弃去该培养基。将细胞与100μl刺激缓冲液(Hanks缓冲盐溶液，5mM HEPES，0.5mM IBMX，0.1％BSA，pH 7.4)在室温下温育15分钟。将其弃去，并用在存在0.5％DMSO的刺激缓冲液中的0.001、0.003、0.01、0.03、0.1、0.3、1、3、10、30μM范围的化合物稀释液替代。将细胞在室温下温育30分钟。接着，每孔加入75ul溶胞缓冲液(5mM HEPES，0.3％Tween-20，0.1％BSA，pH 7.4)并将该板以900rpm振摇20分钟。通过在3000rpm下离心5分钟来除去颗粒物，接着将样品平行两份转移进384孔板，并根据Perkin Elmer AlphaScreen cAMP测定试剂盒指示进行加工。简而言之，设置25μl含有8μl样品、5μl受体珠混合料和12μl检测混合料的反应物，以使最终反应成分的浓度与试剂盒指示中说明的相同。将反应物在室温下温育150分钟，接着使用Packard Fusion装置对该板读数。将cAMP的测量值与已知cAMP量(0.01、0.03、0.1、0.3、1、3、10、30、100、300、1000nM)的标准曲线比较以将读数转换为绝对cAMP量。使用XLfit 3软件分析数据。
发现代表性的本发明的化合物以低于10μM的EC₅₀增加cAMP。在cAMP测定法中显示低于1μM的EC₅₀的化合物可能是优选的。
胰岛素分泌测定法
在12孔板中以106细胞/1ml/孔在标准培养基中铺板HIT-T15细胞并培养3天，接着弃去该培养基。用含有119mM NaCl、4.74mM KCl、2.54mM CaCl₂、1.19mM MgSO₄、1.19mM KH2PO4、5mM NaHCO₃、pH 7.4的10mM HEPES以及1％牛血清蛋白的补充的Krebs-Ringer缓冲液(KRB)将细胞洗两次。在37℃下用1ml KRB培养细胞30分钟，然后将其弃去。接着用KRB第二次培养30分钟，将其收集并用于测量各孔的基础胰岛素分泌水平。接着向平行两份的孔中加入在补充有5.6mM葡萄糖的1mlKRB中的化合物稀释液(0、0.1、0.3、1、3、10uM)。在37℃下温育30分钟后，移出样品以测定胰岛素水平。使用Mercodia大鼠胰岛素ELISA试剂盒，按照生产商的指示，用已知胰岛素浓度的标准曲线完成胰岛素的测量。通过从不存在葡萄糖的预温育物减去基础分泌水平来校正各孔的胰岛素水平。使用XLfit 3软件分析数据。
发现代表性的本发明的化合物以低于10μM的EC₅₀增加胰岛素分泌。在胰岛素分泌测定法中显示低于1μM的EC₅₀的化合物可能是优选的。
口服葡萄糖耐量测试
在雄性C57B1/6或雄性ob/ob小鼠中评价本发明的化合物对口服葡萄糖(Glc)耐量的影响。在Glc给药前5h收回食物并在整个研究中保持收回。在研究期间，小鼠可自由饮水。在动物尾部做出切口，接着取血(20μL)以测量基础Glc水平，45分钟后给药Glc负荷。然后，称重小鼠并口服给药测试化合物或载体(20％的羟丙基-β-环糊精水溶液或25％的Gelucire 44/14水溶液)，30分钟后再次取血样(20μL)并用Glc负荷(2-5g kg^-1口服)治疗。接着在Glc给药后25、50、80、120和180分钟采血样(20μL)。为测量Glc水平，从尾部的切口端采20μL血样至一次性微吸管(Dade DiagnosticsInc.，Puerto Rico)中，并将该样品加入480μL溶血试剂中。接着向在96孔测定板中的180μL Trinders葡萄糖试剂(Sigma酶(Trinder)比色法)中加入平行两份20μL稀释溶血等分试样。混合后，将样品在室温下放置30分钟，然后凭Glc标准品(Sigma葡萄糖/尿素氮结合的标准品组)读数。代表性的本发明的化合物在≤100mg kg^-1的剂量下在统计学上降低了Glc偏移。