本申请是同名发明名称的中国专利申请第200880100551.8号的 分案申请，原案国际申请号为PCT/EP2008/059775，国际申请日为2008 年7月25日。
技术领域
本发明涉及20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯 (20,23-dipiperidinyl-5-O-mycaminosyl-tylonolide)的溶剂化和 非溶剂化晶型和制备这类晶型的方法、包含(或衍生自)这类晶型的药 物、制备包含(或衍生自)这类晶型的药物的方法、使用这类晶型的治 疗方法和包含这类晶型的试剂盒。
背景技术
长期以来已知大环内酯类可有效治疗人、家畜类、家禽和其它动 物的感染性疾病。早期的大环内酯类包括16-元大环内酯类，例如泰 洛星A：
例如，参见美国专利US4,920,103(第5栏，12-38行)。另外， 参见美国专利US4,820,695(第7栏，1-32行)和EP0103465B1(第 5页，第3行)。数年来，已经研究了各种泰洛星衍生物，目的在于提 高抗菌活性和选择性。
泰洛星衍生物包括，例如：
泰洛星B(也称作desmycocin)，
泰洛星C(也称作大菌素)和
泰洛星D(也称作瑞洛霉素).
泰洛星衍生物还包括，例如美国专利US6,514,946中讨论的化合 物，其结构对应式(I)：
其中：
R1和R3各自是甲基，且R2是氢；R1和R3各自是氢，且R2是甲基； 或R1，R2和R3各自是氢；且
R4和R6各自是甲基，且R5是氢；R4和R6各自是氢，且R5是甲基； 或R4，R5和R6各自是氢。
这类化合物包括，例如20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内 酯，它具有如下结构：
认为这些化合物且特别是20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐 内酯因安全而有效地治疗例如巴斯德菌病、牛呼吸系统疾病和猪呼吸 系统疾病而具有药物代谢动力学和药效学属性。涉及这些化合物在治 疗家畜类和家禽疾病中的应用的讨论包括在美国专利US6,514,946 中。将该讨论引入本专利作为参考。申请人并未发现描述有20,23-二 哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的任意稳定的晶型。
鉴于大环内酯类在治疗多血症的病理学症状中的重要性，所以对 成本有效的、高产率的制备大环内酯类的方法存在持续需求。还存在 对大环内酯晶型的需求，例如，大环内酯晶型表现出有利的物理稳定 性、化学稳定性、包装特性、热力学特性、动力学特性、表面特性、 机械特性、过滤特性或化学纯度；或可以有利地用于制备表现出这类 特性的固态形式。如下披露的内容满足了这些需求。
发明内容
本发明涉及20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的晶型。
简言之，本发明部分涉及20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内 酯的第一种晶型(在本专利中鉴定为“多晶型I”)。多晶型I的特征 一般可以在于：例如，具有以下特征中的至少一种(且一般是一种以 上)：
a.包含在一个或多个选自约2935、约1633、约1596、约1712、 约1683和约781cm-1的频率下的吸收谱带的FT-拉曼光谱；
b.包含至少一个选自5.0(±0.2)和5.6(±0.2)度2θ的峰的 粉末X-射线衍射光谱；
c.包含在一个或多个选自约2932、约1711、约1682、约1635、 约1599、约1442、约1404、约1182、约1079、约1053、约1008、 约985、约842和约783cm-1的频率下的吸收谱带的衰减全反射红外 光谱；
d.约192至约195℃的熔点；或
e.约57J/g的熔融焓。
本发明部分涉及第二种20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内 酯晶型(在本专利中鉴定为“多晶型II”)。多晶型II的特征一般可 以在于：例如，具有以下特征中的至少一种(且一般是一种以上)：
a.包含在一个或多个选自约2929、约1625、约1595、约1685 和783cm-1的频率下的吸收谱带的FT-拉曼光谱；
b.包含在6.5(±0.2)度2θ的峰的粉末X-射线衍射光谱；
c.包含在一个或多个选自约2935、约1736、约1668、约1587、 约1451、约1165、约1080、约1057、约1042、约1005、约981、约 838和约755cm-1的频率下的吸收谱带的衰减全反射红外光谱；
d.约113至约119℃的熔点；或
e.约15J/g的熔融焓。
本发明部分涉及第三种20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内 酯晶型(在本专利中鉴定为“多晶型III”)。多晶型III的特征一般 可以在于：例如，具有以下特征中的至少一种(且一般是一种以上)：
a.包含在一个或多个选自约2943、约2917、约1627、约1590、 约1733、约1669、约1193、约1094和约981cm-1的频率下的吸收谱 带的FT-拉曼光谱；
b.包含至少一个选自5.6(±0.2)和6.1(±0.2)度2θ的峰的 粉末X-射线衍射光谱；
c.包含在一个或多个选自约2931、约1732、约1667、约1590、 约1453、约1165、约1081、约1057、约1046、约1005、约981、约 834和约756cm-1的频率下的吸收谱带的衰减全反射红外光谱；
d.约107至约134℃的熔点；或
e.约38J/g的熔融焓。
本发明部分涉及第四种20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内 酯晶型(在本专利中鉴定为“多晶型IV”)。多晶型IV的特征一般可 以在于：例如，具有以下特征中的至少一种(且一般是两种)：
a.包含在一个或多个选自约3559、约2933、约1743、约1668、 约1584、约1448、约1165、约1075、约1060、约1045、约1010、 约985、约839和约757cm-1的频率下的吸收谱带的衰减全反射红外 光谱；或
b.约149至约155℃的熔点。
本发明还部分涉及20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的 溶剂化晶型。
在某些实施方案中，溶剂化晶型包括20,23-二哌啶基-5-O-碳霉 糖基-太乐内酯的乙酸乙酯(或“EtOAc”)、乙醇或二乙基酮溶剂化晶 型以及与乙酸乙酯、乙醇或二乙基酮溶剂化晶型为同晶型的任意其它 结晶溶剂化物。这些结晶溶剂化物在本专利中共同被鉴定为“Sl结晶 溶剂化物”。
在某些实施方案中，溶剂化晶型包括20,23-二哌啶基-5-O-碳霉 糖基-太乐内酯的叔丁基甲基醚(或“tBME”)溶剂化晶型以及与tBME 溶剂化晶型为同晶型的任意其它结晶溶剂化物。这些结晶溶剂化物在 本专利中共同被鉴定为“S2结晶溶剂化物”。
在某些实施方案中，溶剂化晶型包括20,23-二哌啶基-5-O-碳霉 糖基-太乐内酯的四氢呋喃(或“THF”)溶剂化晶型以及与THF溶剂化 晶型为同晶型的任意其它结晶溶剂化物。这些结晶溶剂化物在本专利 中共同被鉴定为“S3结晶溶剂化物”。
在某些实施方案中，溶剂化晶型包括20,23-二哌啶基-5-O-碳霉 糖基-太乐内酯的乙酸甲酯或甲酸乙酯溶剂化晶型以及与乙酸甲酯或 甲酸乙酯溶剂化晶型为同晶型的任意其它结晶溶剂化物。这些结晶溶 剂化物在本专利中共同被鉴定为“S4结晶溶剂化物”。
本发明还部分涉及包含20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内 酯的组合物。在这些实施方案中，组合物中20,23-二哌啶基-5-O-碳 霉糖基-太乐内酯的用量(一般至少是可检测的用量)由上述溶剂化或 非溶剂化的20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯晶型组成。
本发明还部分涉及治疗疾病，例如巴斯德菌病、猪呼吸系统疾病 或牛呼吸系统疾病的方法。该方法包括：
合并含有效量的上述晶体的组合物与至少一种赋形剂以形成药物 组合物；
并且对有此治疗需要的动物给予该药物组合物。
在某些这类实施方案中，例如，将含治疗有效量的晶体的组合物 溶于液体赋形剂以形成溶液，由此可以将其用于胃肠外或口服给药。 在其它这类实施方案中，将含治疗有效量的晶体的组合物混悬于液体 赋形剂中以形成混悬液，由此可以将其用于胃肠外或口服给药。
本发明还部分涉及治疗有效量的上述含晶体的组合物在制备治疗 动物疾病(例如巴斯德菌病、猪呼吸系统疾病或牛呼吸系统疾病)的药 物中的应用。
本发明还部分涉及通过一种方法制备的药物组合物，该方法包括 合并至少一种赋形剂与治疗有效量的上述含晶体的组合物。在某些这 类实施方案中，例如，将治疗有效量的上述含晶体的组合物溶于液体 赋形剂以形成溶液，由此可以将其用于胃肠外或口服给药。在其它这 类实施方案中，例如，将治疗有效量的含晶体的组合物混悬于液体赋 形剂中以形成混悬液，由此可以将其用于胃肠外或口服给药。
本发明还部分涉及试剂盒，该试剂盒包括：治疗有效量的上述含 晶体的组合物和用于合并含晶体的组合物与至少一种赋形剂的说明 书。
该试剂盒可以进一步(或可替代选择地)包括额外的成分，例如一 种或多种赋形剂、一种或多种额外的药物或生物材料和/或一种或多种 诊断用具。
申请人发明的其它方面和权益对本领域技术人员而言可以通过阅 读本说明书显而易见。
附图说明
图1表示20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型I的 示例性粉末X-射线衍射(“PXRD”)光谱。
图2表示20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型I的 示例性傅里叶变换拉曼(“FT-拉曼”)光谱。
图3表示20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型I的 与傅里叶变换红外光谱(“TG-FTIR”)结合的示例性热重法结果。
图4表示20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型I的 示例性示差扫描量热法(“DSC”)结果。
图5表示20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型I的 示例性动态水蒸汽吸附(“DVS”)结果。
图6表示20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型I的 示例性衰减全反射红外(“ATR-IR”)光谱(或“吸收谱带分布”)。
图7表示含20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型I 的nujol混悬液的示例性IR光谱。
图8表示20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型II 的示例性PXRD光谱。
图9表示20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型II 的示例性FT-拉曼光谱。
图10表示20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型II 的示例性TG-FTIR结果。
图11表示20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型II 的示例性DSC结果。连续线对应第一次扫描，虚线对应第二次扫描。
图12表示20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型II 的示例性DVS结果。
图13表示20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型II 的示例性ATR-IR光谱。
图14表示含20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型 II的nujol混悬液的示例性IR光谱。
图15表示20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型III 的示例性PXRD光谱。
图16表示20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型III 的示例性FT-拉曼光谱。
图17表示20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型III 的示例性TG结果。
图18表示20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型III 的示例性DSC结果。连续线对应第一次扫描，虚线对应第二次扫描。
图19表示20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型III 的示例性DVS结果。
图20表示20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型III 的示例性ATR-IR光谱。
图21表示含20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型 III的nujol混悬液的示例性IR光谱。
图22表示20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型IV 的示例性PXRD光谱。
图23表示20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型IV 的示例性DSC结果。
图24表示20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型IV 的示例性ATR-IR光谱。
图25表示含20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型 IV的nujol混悬液的示例性IR光谱。
图26表示20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的乙酸乙酯 S1结晶溶剂化物样品的示例性PXRD光谱。
图27表示20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的乙酸乙酯 S1结晶溶剂化物样品的示例性FT-拉曼光谱。
图28表示20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的乙酸乙酯 S1结晶溶剂化物样品的示例性TG-FTIR结果。
图29表示20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的乙醇S1结 晶溶剂化物样品的示例性TG-FTIR结果。
图30表示20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的二乙基酮 S1结晶溶剂化物样品的示例性TG-FTIR结果。
图31表示20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的tBMES2 结晶溶剂化物样品的示例性PXRD光谱。
图32表示20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的tBMES2 结晶溶剂化物样品的示例性FT-拉曼光谱。
图33表示20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的tBMES2 结晶溶剂化物样品的示例性TG-FTIR结果。
图34表示20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的THFS3结 晶溶剂化物样品的示例性PXRD光谱。
图35表示20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的THFS3结 晶溶剂化物样品的示例性FT-拉曼光谱。
图36表示20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的THFS3结 晶溶剂化物样品的示例性TG-FTIR结果。
图37表示20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的乙酸甲酯 S4结晶溶剂化物样品的示例性PXRD光谱。
图38表示20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的乙酸甲酯 S4结晶溶剂化物样品的示例性FT-拉曼光谱。
图39表示20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的乙酸甲酯 S4结晶溶剂化物样品的示例性TG-FTIR结果。
图40表示20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的甲酸乙酯 S4结晶溶剂化物样品的示例性TG-FTIR结果。
具体实施方式
本优选实施方案的详细描述的意图仅在于使本领域技术人员熟知 申请人的发明、其原理及其实际应用，以便本领域技术人员以多种方 式适用和实施本发明，因为它们可以以最佳方式适合于具体应用的需 求。尽管示出了本发明的优选实施方案，但是本详细描述及其具体实 施例的目的仅在于示例。因此，本发明并不限于本说明书中所述的优 选实施方案并且可以进行各种改变。
A.20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的晶型
大环内酯类且特别是20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯 的化学和物理特性在其商业化研发中通常是重要的。这些特性包括， 例如：(1)物理稳定性；(2)化学稳定性；(3)包装特性，例如摩尔 体积、密度和吸湿性；(4)热力学特性，例如熔化温度，蒸气压和溶 解度；(5)动力学特性，例如溶出度和稳定性(包括在环境条件下，尤 其是对湿度和在贮存条件下的稳定性)；(6)表面特性，例如表面积、 湿润性、界面张力和形状；(7)机械特性，例如硬度、拉伸强度、压 制性、操作性、流动性和掺合性；(8)过滤特性；和(9)化学纯度。 这些特性例如可以影响包含20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内 酯的药物组合物的加工和贮存。尽管申请人认为本专利中所述的 20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的所有固态形式均是治疗有 效的，一般可期望在一种或多种上述特性方面提供比其它20,23-二哌 啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的固态形式更改善的固态形式，因为它 们是可以用作制备期望的固态形式的方法中的中间体的固态形式。
根据本发明，已经制备了20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内 酯的几种晶型。这些晶型一般具有一种或多种上述比20,23-二哌啶基 -5-O-碳霉糖基-太乐内酯的其它固态形式有利的化学和/或物理特性 和/或可用作制备20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的一种或 多种其它固态形式的中间体。已经发现的20,23-二哌啶基-5-O-碳霉 糖基-太乐内酯的具体晶型包括如下：
(1)与20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的其它固态形 式相比具有独特特性的20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的 第一种无水和非-溶剂化晶型(本专利中被鉴定为“多晶型I”)；
(2)与20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的其它固态形 式相比具有独特特性的20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的 第二种无水和非-溶剂化晶型(本专利中被鉴定为“多晶型II”)；
(3)与20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的其它固态形 式相比具有独特特性的20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的 第三种无水和非-溶剂化晶型(本专利中被鉴定为“多晶型III”)；
(4)与20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的其它固态形 式相比具有独特特性的20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的 第四种无水和非-溶剂化晶型(本专利中被鉴定为“多晶型IV”)；
(5)20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的同晶型乙酸乙 酯、乙醇和二乙基酮溶剂化晶型(本专利中共同被鉴定为“S1结晶溶 剂化物”)；
(6)20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的叔丁基甲基醚溶 剂化晶型(本专利中被鉴定为“S2结晶溶剂化物”)；
(7)20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的四氢呋喃溶剂化 晶型(本专利中被鉴定为“S3结晶溶剂化物”)；和
(8)20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的同晶型乙酸甲酯 和甲酸乙酯溶剂化晶型(本专利中共同被鉴定为“S4结晶溶剂化物”)；
在某些实施方案中，本发明涉及20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基- 太乐内酯的多晶型I。制备多晶型I的示例性方法包括，例如实施例3 (F部分)和实施例12-16中所示的那些。基于申请人的观察结果，认 为多晶型I在环境温度下一般具有高于20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖 基-太乐内酯的其它上述固态形式的稳定性，特别是在没有溶剂存在 下。在许多实施方案中，期望使用固态形式，例如多晶型I，它一般 无需特殊的加工或贮存条件，并且避免了对频繁的设备更换的需求。 例如，在制备过程(例如在研磨以获得具有减小粒度和表面积增加的材 料的过程中)中选择物理稳定的固态形式可以避免对专门的加工条件 和一般与这类专门加工条件相关的成本增加的需求。类似地，选择在 宽范的贮存条件下物理稳定的固态形式(尤其是认为在20,23-二哌啶 基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯产物寿命过程中可能出现的不同可能的贮 存条件)可以有助于避免可能导致产物损失或产物效力降低的20,23- 二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯中的多晶型或其它降解的改变。因 此，选择具有更高物理稳定性的固态形式提供了超过20,23-二哌啶基 -5-O-碳霉糖基-太乐内酯的稳定性较低的固态形式的有意义的有益 性。多晶型I例如在环境条件(例如25℃)下也倾向于表现出低于 20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的其它固态形式的吸水性。 进一步推定多晶型I表现出比20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内 酯的其它固态形式更有利的包装特性、热力学特性、动力学特性、表 面特性、机械特性、过滤特性或化学纯度。
可以使用各种分析技术鉴定多晶型I。在某些实施方案中，将多 晶型I定义为具有以下特征中的一种(一般为两种、三种、四种或全部 五种)：
a.包含在一个或多个选自约2935、约1633、约1596、约1712、 约1683和约781cm-1的频率下的吸收谱带的FT-拉曼光谱；
b.包含至少一个选自5.0(±0.2)和5.6(±0.2)度2θ的峰的 粉末X-射线衍射光谱；
c.包含在一个或多个选自约2932、约1711、约1682、约1635、 约1599、约1442、约1404、约1182、约1079、约1053、约1008、 约985、约842和约783cm-1的频率下的吸收谱带的衰减全反射红外 光谱；
d.约192至约195℃的熔点；或
e.约57J/g的熔融焓。
在某些实施方案中，将多晶型I定义为具有包含在2935cm-1处的 吸收谱带的FT-拉曼光谱。在其它实施方案中，将多晶型I定义为具 有包含在约1633cm-1处的吸收谱带的FT-拉曼光谱。
在某些实施方案中，将多晶型I定义为具有包含在5.0(±0.2) 度2θ的峰的粉末X-射线衍射光谱。
在某些实施方案中，将多晶型I定义为具有包含在一个或多个选 自约1711、约1682、约1635、约1599、约1404、约1182、和约783 cm-1的频率下的吸收谱带的衰减全反射红外光谱。在某些这类实施方 案中，例如，将多晶型I定义为具有包含在一个或多个选自约1711 和约1682cm-1的频率下的吸收谱带的衰减全反射红外光谱。在其它这 类实施方案中，将多晶型I定义为具有包含在一个或多个选自约1635、 约1404和约1182cm-1的频率下的吸收谱带的衰减全反射红外光谱。
在某些实施方案中，将多晶型I定义为具有以下特征的一种(且一 般为两种或全部三种)：
a.基本上如图1中所示的粉末X-射线衍射光谱，
b.基本上如图2中所示的FT-拉曼光谱，或
c.基本上如图6中所示的衰减全反射红外光谱。
本发明的某些实施方案涉及包含20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基 -太乐内酯的组合物，其中在该组合物中至少可检测量的20,23-二哌 啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯是多晶型I。在某些这类实施方案中， 例如，在该组合物中至少约50%(或至少约75%、至少约85%、至少约 90%、至少约95%、至少约99%或至少约99.9%)的20,23-二哌啶基-5-O- 碳霉糖基-太乐内酯是多晶型I。在其它这类实施方案中，在该组合物 中治疗有效量的20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯是多晶型 I。仍然在其它这类实施方案中，在该组合物中的20,23-二哌啶基 -5-O-碳霉糖基-太乐内酯是基本上相-纯的20,23-二哌啶基-5-O-碳 霉糖基-太乐内酯的多晶型I。
在其它实施方案中，本发明涉及20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基- 太乐内酯的多晶型II。制备多晶型II的方法包括，例如如实施例4 中所示的方法。与多晶型I一样，多晶型II在例如环境条件下倾向于 表现出比20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的其它固态形式 更低的吸水性。推定多晶型II表现出比20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖 基-太乐内酯的其它固态形式更有利的物理代谢、化学稳定性、包装特 性、热力学特性、动力学特性、表面特性、机械特性、过滤特性或化 学纯度。多晶型II还可用作制备其它固态形式的中间体。表1概括了 这类方法的实例。
表1
多晶型II在制备20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的其 它晶型中的用途
可以使用各种分析技术鉴定多晶型II。在某些实施方案中，将多 晶型II定义为具有以下特征的一种(且一般为以下特征的两种、三种、 四种或全部五种)：
a.包含在一个或多个选自约2929、约1625、约1595、约1685 和783cm-1的频率下的吸收谱带的FT-拉曼光谱；
b.包含在6.5(±0.2)度2θ的峰的粉末X-射线衍射光谱；
c.包含在一个或多个选自约2935、约1736、约1668、约1587、 约1451、约1165、约1080、约1057、约1042、约1005、约981、约 838和约755cm-1的频率下的吸收谱带的衰减全反射红外光谱；
d.约113至约119℃的熔点；或
e.约15J/g的熔融焓。
在某些实施方案中，将多晶型II定义为具有包含在约2929cm-1处的吸收谱带的FT-拉曼光谱。在其它实施方案中，将多晶型II定 义为具有包含在约1685cm-1处的吸收谱带的FT-拉曼光谱。
在某些实施方案中，将多晶型II定义为具有包含在6.5(±0.2) 度2θ的峰的粉末X-射线衍射光谱。
在某些实施方案中，将多晶型II定义为具有以下特征的一种(且 一般是两种或全部三种)：
a.基本上如图8中所示的粉末X-射线衍射光谱，
b.基本上如图9中所示的FT-拉曼光谱，或
c.基本上如图13中所示的衰减全反射红外光谱。
本发明的某些实施方案涉及包含20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基 -太乐内酯的组合物，其中在该组合物中至少可检测量的20,23-二哌 啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯是多晶型II。在某些这类实施方案中， 例如，在该组合物中至少约50%(或至少约75%、至少约85%、至少约 90%、至少约95%、至少约99%或至少约99.9%)的20,23-二哌啶基-5-O- 碳霉糖基-太乐内酯是多晶型II。在其它这类实施方案中，在该组合 物中治疗有效量的20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯是多晶 型II。仍然在其它这类实施方案中，在该组合物中，20,23-二哌啶基 -5-O-碳霉糖基-太乐内酯是基本上相-纯的20,23-二哌啶基-5-O-碳 霉糖基-太乐内酯的多晶型II。
在其它实施方案中，本发明涉及20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基- 太乐内酯的多晶型III。制备多晶型III的示例性方法包括，例如如 实施例7、10和11中所示的方法。认为多晶型III表现出高于20,23- 二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的其它固态形式的稳定性。推定多 晶型III表现出比20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的其它固 态形式更有利的包装特性、热力学特性、动力学特性、表面特性、机 械特性、过滤特性或化学纯度。多晶型III例如还可用作制备20,23- 二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型I。例如，可以通过将多 晶型III溶于tBME/庚烷溶剂并且除去溶剂而得到。例如，参见实施 例15。
可以使用各种分析技术鉴定多晶型III。在某些实施方案中，将 多晶型III定义为具有以下特征的一种(且一般为两种、三种、四种或 全部五种)：
a.包含在一个或多个选自约2943、约2917、约1627、约1590、 约1733、约1669、约1193、约1094和约981cm-1的频率下的吸收谱 带的FT-拉曼光谱；
b.包含至少一个选自5.6(±0.2)和6.1(±0.2)度2θ的峰的 粉末X-射线衍射光谱；
c.包含在一个或多个选自约2931、约1732、约1667、约1590、 约1453、约1165、约1081、约1057、约1046、约1005、约981、约 834和约756cm-1的频率下的吸收谱带的衰减全反射红外光谱；
d.约107至约134℃的熔点；或
e.约38J/g的熔融焓。
在某些实施方案中，将多晶型III定义为具有包含在一个或多个 选自约2943、约2917、约1590、约1733、约1669、约1193、约1094 和约981cm-1的频率下的吸收谱带的FT-拉曼光谱。在某些这类实施 方案中，例如，将多晶型III定义为具有包含在一个或多个选自约 2943、约2917、约1590、约1733、约1094和约981cm-1的频率下的 吸收谱带的FT-拉曼光谱。
在某些实施方案中，将多晶型III定义为具有包含在6.1(±0.2) 度2θ的峰的粉末X-射线衍射光谱。
在某些实施方案中，将多晶型III定义为具有以下特征的一种(且 一般是两种或全部三种)：
a.基本上如图15中所示的粉末X-射线衍射光谱，
b.基本上如图16中所示的FT-拉曼光谱，或
c.基本上如图20中所示的衰减全反射红外光谱。
本发明的某些实施方案涉及包含20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基 -太乐内酯的组合物，其中在该组合物中至少可检测量的20,23-二哌 啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯是多晶型III。在某些这类实施方案中， 例如，在该组合物中至少约50%(或至少约75%、至少约85%、至少约 90%、至少约95%、至少约99%或至少约99.9%)的20,23-二哌啶基-5-O- 碳霉糖基-太乐内酯是多晶型III。在其它这类实施方案中，在该组合 物中治疗有效量的20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯是多晶 型III。仍然在其它这类实施方案中，在该组合物中20,23-二哌啶基 -5-O-碳霉糖基-太乐内酯是基本上相-纯的20,23-二哌啶基-5-O-碳 霉糖基-太乐内酯的多晶型III。
在其它实施方案中，本发明涉及20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基- 太乐内酯的多晶型IV。制备多晶型IV的方法包括，例如如实施例23 中所示的方法。推定多晶型IV表现出比20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖 基-太乐内酯的其它固态形式更有利的物理稳定性、化学稳定性、包装 特性、热力学特性、动力学特性、表面特性、机械特性、过滤特性或 化学纯度。
可以使用各种分析技术鉴定多晶型IV。在某些实施方案中，将多 晶型IV定义为具有以下特征的一种(且一般为两种)：
a.包含在一个或多个选自约3559、约2933、约1743、约1668、 约1584、约1448、约1165、约1075、约1060、约1045、约1010、 约985、约839和约757cm-1的频率下的吸收谱带的衰减全反射红外 光谱；或
b.约149至约155℃的熔点。
在某些实施方案中，将多晶型IV定义为具有包含在1743cm-1处 的吸收谱带的衰减全反射红外光谱。在其它实施方案中，将多晶型IV 定义为具有包含在3559cm-1处的吸收谱带的衰减全反射红外光谱。
在其它实施方案中，将多晶型IV定义为具有以下特征的一种(且 一般为两种)：
a.基本上如图22中所示的粉末X-射线衍射光谱，或
b.基本上如图24中所示的衰减全反射红外光谱。
本发明的某些实施方案涉及包含20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基 -太乐内酯的组合物，其中在该组合物中至少可检测量的20,23-二哌 啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯是多晶型IV。在某些这类实施方案中， 例如，在该组合物中至少约50%(或至少约75%、至少约85%、至少约 90%、至少约95%、至少约99%或至少约99.9%)的20,23-二哌啶基-5-O- 碳霉糖基-太乐内酯是多晶型IV。在其它这类实施方案中，在该组合 物中治疗有效量的20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯是多晶 型IV。仍然在其它这类实施方案中，在该组合物中，20,23-二哌啶基 -5-O-碳霉糖基-太乐内酯是基本上相-纯的20,23-二哌啶基-5-O-碳 霉糖基-太乐内酯的多晶型IV。
在其它实施方案中，20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的 晶型包括溶剂化晶型。在某些实施方案中，特别关注的溶剂化晶型是 可以转化为更理想的固态形式的那些。在其它实施方案中，20,23-二 哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的药学可接受的溶剂化晶型直接用于 药物组合物。例如，推定某些结晶溶剂化物倾向于表现出比20,23-二 哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的其它固态形式更有利的物理稳定 性、化学稳定性、包装特性、热力学特性、动力学特性、表面特性、 机械特性、过滤特性或化学纯度。还认为溶剂化晶型均可以对例如固 体剂型提供一定范围的不同溶出度。当直接用于药物组合物时，溶剂 化晶型优选基本上不包括非药学可接受的溶剂。
在某些实施方案中，20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的 晶型包括20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的S1结晶溶剂化 物。制备乙酸乙酯S1结晶溶剂化物的示例性方法包括，例如实施例3 (E部分)，6，8和9中所示的那些。制备乙醇S1结晶溶剂化物的方法 包括，例如实施例17中所示的方法。制备二乙基酮S1结晶溶剂化物 的方法包括，例如实施例18中所示的方法。乙酸乙酯S1结晶溶剂化 物例如可用作制备其它固态形式的中间体。表2概括了这类方法的实 施例。
表2
乙酸乙酯结晶溶剂化物在制备20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基- 太乐内酯的其它晶型中的用途
在某些实施方案中，20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的 晶型包括20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的S2结晶溶剂化 物。制备S2结晶溶剂化物的方法包括，例如实施例19中所示的方法。 认为S2结晶溶剂化物(即tBME溶剂化晶型)特别可以直接适用于药物 组合物。这种结晶溶剂化物在例如60℃和1mbar(绝对值)下表现出 稳定性1天。
在某些实施方案中，20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的 晶型包括20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的S3结晶溶剂化 物。制备S3结晶溶剂化物的方法包括，例如实施例20中所示的方法。
在某些实施方案中，20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的 晶型包括20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的S4结晶溶剂化 物。制备乙酸甲酯S4结晶溶剂化物的方法包括，例如实施例21中所 示的方法。并且制备甲酸乙酯S4结晶溶剂化物的方法包括，例如实施 例22中所示的方法。
本发明的某些实施方案涉及包含20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基 -太乐内酯的组合物，其中在该组合物中至少可检测量的20,23-二哌 啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯是上述涉及的结晶溶剂化物形式之一。 在某些实施方案中，例如，在该组合物中至少约50%(或至少约75%、 至少约85%、至少约90%、至少约95%、至少约99%或至少约99.9%)的 20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯是结晶溶剂化物形式。在某 些这类实施方案中，在该组合物中至少约50%(或至少约75%、至少约 85%、至少约90%、至少约95%、至少约99%或至少约99.9%)的20,23- 二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯是乙酸乙酯S1结晶溶剂化物。在其 它实施方案中，在该组合物中治疗有效量的20,23-二哌啶基-5-O-碳 霉糖基-太乐内酯是上述结晶溶剂化物形式之一。仍然在其它这类实施 方案中，在该组合物中20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯对上 述结晶溶剂化物形式之一而言是基本上相-纯的。在某些这类实施方案 中，例如，在该组合物中20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯是 基本上相-纯的乙酸乙酯S1结晶溶剂化物。
在其它实施方案中，本发明涉及两种或多种固态形式的组合，所 述的固态形式选自多晶型I，多晶型II，多晶型III，多晶型IV和 20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的溶剂化晶型。这种组合可 以用于制备例如具有不同溶出特性的固体药物组合物，包括控释组合 物。在一个实施方案中，组合包含至少可检测量的多晶型I，剩余的 是一种或多种固态形式的20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯， 其选自多晶型II，多晶型III，多晶型IV和溶剂化晶型。在另一个实 施方案中，组合包含至少可检测量的多晶型II，剩余的是一种或多种 固态形式的20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯，其选自多晶型 I，多晶型III，多晶型IV和溶剂化晶型。在另一个实施方案中，组 合包含至少可检测量的多晶型III，剩余的是一种或多种固态形式的 20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯，其选自多晶型I，多晶型 II，多晶型IV和溶剂化晶型。在另一个实施方案中，组合包含至少可 检测量的多晶型IV，剩余的是一种或多种固态形式的20,23-二哌啶基 -5-O-碳霉糖基-太乐内酯，其选自多晶型I，多晶型II，多晶型III 和溶剂化晶型。
根据20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的固态形式的指 定应用的不同，加工考虑可以有利于选择特定固态形式或这类固态形 式的特定组合。制备20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的固态 形式(或具有最低相纯度的20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯 的固态形式)的便利性一般在固态形式之间彼此不同。
固态形式的表征
技术
使用几种不同技术表征了根据本发明制备的20,23-二哌啶基 -5-O-碳霉糖基-太乐内酯的固态形式的样品。这些技术包括如下。
使用BrukerD8AdvanceX-射线衍射仪，应用CuKα射线(计算d值的波长：)；35kV/45mA管功率；VANTECl检测器；和0.017°2θ步长，105±5秒/步和2°-50°2θ扫描范围，获得所有样品（但除多晶型IV以外）的粉末X-射线衍射(“PXRD”)光谱。使用具有12mm直径和0.1mm深度的单晶硅样品架。使用SiemensD5000x-射线衍射仪，应用DiffractPlus软件，0.04°2θ步长，2秒步时间，5.0°-80.0°2θ扫描范围，设定在V20的发散狭缝，设定在V20的防散射狭缝，检测器狭缝输出，旋转，40kV发生器电压，30mA发生器电流，高灵敏度闪烁计数器和Cux-线管，获得多晶型IV的PXRD光谱。
使用具有Nd：YAG激光的BrukerRFS100FT-拉曼光谱仪，应用 1064nm激发波长，100mW激光功率，Ge-检测器，64次扫描，50-3500 cm-1范围，2cm-1分辨率和铝样品架，获得傅里叶变换拉曼(“FT-拉曼”) 光谱。
使用NetzschThermo-MicrobalanceTG209与BrukerVector22 FT-IR光谱仪，应用铝坩锅(具有微孔或开口)，N2气氛，10℃/min的 加热速率和25-250℃的温度范围，获得与傅里叶变换红外光谱结合的 热重法(“TG-FTIR”)测量值。
使用PerkinElmerTGS2热重分析仪，应用铝坩锅(开口)，N2氛，10℃/min的加热速率和25-500℃的温度范围，获得热重法(“TG”) 测量值。
使用PerkinElmerDSC7差示扫描热计，应用金坩锅；10℃/min 的加热速率，获得多晶型I，II和III的示差扫描量热(“DSC”)测量 值。在除去任何残留溶剂和湿气后在惰性气体环境(即，无氧存在)中 封闭的密封样品盘中进行这些测量。使用多晶型I晶型一次扫描。该 扫描在-50℃至约210℃进行。对多晶型II和III进行两次扫描，其 中第一次扫描在-50℃至150℃进行，第二次扫描在-50℃至200℃进 行。使用MettlerDSC-822e，应用铝坩锅、作为覆盖气体的空气、 10K/min的加热速率、30至200℃的加热范围和5mg样品大小，对多 晶型IV获得DSC测量值。申请人认为DSC特别易于变化且由此应谨慎 使用。
使用ProjektMesstechnikSPS11-100n水蒸汽吸附分析仪，获 得动态水蒸汽吸附(“DVS”)测量值。将样品放入微量天平上的铝坩锅 并且使其在25℃和50%相对湿度下平衡，然后在25℃下启动如下预定 的湿度程序：50-95-0-50%相对湿度和使用每小时5%相对湿度改变的 扫描和在极端值下的等湿度平衡期。
使用来自PortmannInstrumentsAG(现在的Varian)的 ExcaliburFT-IR光谱仪获得红外(“IR”)光谱。使用两种技术。第 一种技术是衰减全反射(“ATR”)红外光谱法。为了使用ATR获得光谱， 将一刮刀尖样品放在ATR池的样品区上(转矩120n*cm)，并且记录 3600至700cm-1的红外光谱。第二种技术使用nujol形式的在平底乳 钵中的样品(即nujol混悬液)。为了使用这种样品获得光谱，将一刮 刀尖样品在研钵中与2或3滴nujol一起充分研磨至获得均匀糊剂。 由此将该糊剂涂布在NaCl板上，使用第二个NaCl板压制成薄均匀薄 膜。就这些样品而言，记录3600至600cm-1的红外光谱。
最终，申请人对有关20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的 固态形式的形状和大小进行了各种观察并且将那些观察结果概括如 下。然而，申请人注意到该信息应谨慎使用，因为根据用于制备固态 形式的方法的不同，可能存在晶型的其它形状和/或大小。
多晶型I
下列讨论提供了各种观察到的多晶型I的特征。
i.多晶型I的外观
多晶型I一般是小颗粒的形式。
ii.多晶型I的粉末X-射线衍射光谱
多晶型I的观察到的PXRD光谱如图1中所示，相应的数据如下表 3中所示：
表3
多晶型I的X-射线衍射数据
光谱的特征包括在2θ=5.0°和5.6°的起始峰。
使用某些样品，PXRD光谱显示出被非晶形20,23-二哌啶基-5-O- 碳霉糖基-太乐内酯污染至一定程度。然而，认为在对应上述PXRD光 谱的样品中则基本上不存在这种非晶形物质。
iii.多晶型I的FT-拉曼光谱
多晶型I的观察到的FT-拉曼光谱如图2中所示，并且相应的数 据如下表4中所示：
表4
多晶型I的FT-拉曼数据
光谱特征包括在2935cm-1，1633cm-1和1596cm-1的强峰和在1712 cm-1，1683cm-1和781cm-1的较小峰。
iv.多晶型I的热重分析
图3表示对多晶型I的TG-FTIR分析结果。在60至180℃的温度 范围内观察到0.6%的重量损失。申请人认为这可归因于失水量。由于 该量较小，所以申请人进一步认为这种失水量因表面吸附的水导致， 而非水合物导致。
v.多晶型I的示差扫描量热法
图4表示对多晶型I的DSC分析结果。在195℃处存在尖锐的熔 点峰，且熔融焓ΔHfus为57J/g。正如下文所示，它们均高于多晶型II 和III的熔点和熔融焓。在图4中，Tg阶段几乎不能辨别。认为这证 实了该样品是高于90%的结晶。
独立地分析多晶型I的样品以便测定熔点。具有约98%(w/w)纯 度的样品表现出192至195℃的熔点。
vi.多晶型I的动态水蒸汽吸附
图5表示多晶型I的DVS分析结果。在25℃下进行这种分析。观 察到在95%相对湿度下最大吸水量低于1%(重量)。
vii.多晶型I的IR光谱
图6表示多晶型I的ATR-IR光谱，图7提供了nujol混悬液中的 多晶型I的IR光谱。相应的数据如下表5中所示：
表5
多晶型I的IR数据
光谱、特别是ATR光谱的特征包括在2932cm-1，1711cm-1，1682 cm-1，1599cm-1，1442cm-1，1182cm-1，1079cm-1，1053cm-1，1008cm-1， 985cm-1，842cm-1和783cm-1的强吸收谱带。在1711cm-1和1682cm-1处的吸收谱带对该多晶型物而言表现为特别独特。在1635cm-1，1404 cm-1和1182cm-1处的吸收谱带对该多晶型物而言也表现为特别独特。
多晶型II
下列讨论提供了对多晶型II的各种观察到的特征。
i.多晶型II的外观
多晶型II一般是具有至多几百微米大小的菱晶形式。
ii.多晶型II的粉末X-射线衍射光谱
对多晶型II观察到的PXRD光谱如图8中所示，相应的数据如下 表6中所示：
表6
多晶型II的X-射线衍射数据
光谱特征包括在2θ=6.5°处的起始和最强峰
iii.多晶型II的FT-拉曼光谱
对多晶型II观察到FT-拉曼光谱的如图9中所示，相应的数据如 下表7中所示：
表7
多晶型II的FT-拉曼数据
位置(cm-1) 强度 2929 0.435 1685 0.044 1625 0.550 1595 1.118 1451 0.114 1361 0.062 1311 0.100 1270 0.085 1248 0.100 1195 0.074 1117 0.060 1095 0.075 1023 0.073 984 0.047 925 0.051 873 0.058 783 0.084 513 0.063 379 0.066 87 0.198
光谱特征包括在2929cm-1，1625cm-1和1595cm-1处的强峰；和 在1685cm-1和783cm-1处的较小、但尖锐的峰。
iv.多晶型II的热重分析
图10表示对多晶型II的TG-FTIR分析结果。主要在50至100℃ 温度范围观察到0.7%的重量损失。申请人认为这可归因于失水量。分 解在高于220℃的温度下开始。
v.多晶型II的示差扫描量热法
图11表示对多晶型II的DSC分析结果。第一次扫描(连续线)在 113℃表现出熔点峰，且熔融焓ΔHfus=15J/g。第二次扫描(虚线)表 现出玻璃化转变温度(“Tg”)为96.1℃。未观察到重结晶。
独立地分析多晶型II的样品以便测定熔点。具有约96%(w/w)纯 度的样品表现出熔点为113至119℃。
vi.多晶型II的动态水蒸汽吸附
图12表示对多晶型II的DVS分析结果。该分析在25℃下进行。 观察到在95%相对湿度下的最大吸水量为约2%(重量)。
vii.多晶型II的IR光谱
图13表示多晶型II的ATR-IR光谱，图14提供了在nujol混悬 液中的多晶型II的IR光谱。相应数据如下表8中所示：
表8
多晶型II的IR数据
光谱、特别是ATR光谱的特征包括在2935cm-1，1736cm-1，1668 cm-1，1587cm-1，1451cm-1，1165cm-1，1080cm-1，1057cm-1，1042cm-1， 1005cm-1，981cm-1，838cm-1和755cm-1的强吸收谱带。
多晶型III
下列讨论提供了对多晶型III的各种观察的特征。
i.多晶型III的外观
多晶型III一般是细针晶形式。
ii.多晶型III的粉末X-射线衍射光谱
对多晶型III观察到的PXRD光谱如图15中所示，相应的数据如 下表9中所示：
表9
多晶型III的X-射线衍射数据
光谱特征包括在2θ=6.1°处的最强峰，伴随在2θ=5.6°处的较 小峰。观察到这两个峰的相对强度因批量与批量的不同而改变，如同 在该光谱中的其它峰的相对强度。这种变化对PXRD来说并不常见。通 常它们源于取向效应，特别是就各向异性(即，针样和板样)晶体而言。 然而，这些变化一般不会影响对多晶型的鉴定，因为它通常取决于峰 位置而非强度。
iii.多晶型III的FT-拉曼光谱
对多晶型III观察到的FT-拉曼光谱如图16中所示，相应的数据 如下表10中所示：
表10
多晶型III的FT-拉曼数据
光谱特征包括在2943cm-1，2917cm-1，1627cm-1和1590cm-1的 强峰；和在1733cm-1，1669cm-1，1193cm-1，1094cm-1和981cm-1 的较小峰。
iv.多晶型III的热重分析
样品的TG-FTIR分析显示在达220℃时的重量损失为1.7%，其中 大部分重量损失发生在50至120℃。推定这种重量损失归因于样品中 的水或乙腈(IR-检测器对乙腈的灵敏度低)。
图17表示对多晶型III的TG分析结果。在至多200℃观察到低 于0.05%的重量损失。分解在高于270℃的温度下开始。
v.多晶型III的示差扫描量热法
图18表示对多晶型III的DSC分析结果。第一次扫描(连续线) 在134℃表现出熔点峰，且熔融焓ΔHfus=38J/g。在冷却时，物质固 化成非晶态。第二次扫描(虚线)表现出Tg为96℃，在195℃下重结晶 并且再次熔化。
独立地分析多晶型III的样品以便测定熔点。具有约99%纯度的 样品表现出122-126℃的熔点。
vi.多晶型III的动态水蒸汽吸附
图19表示对多晶型III的DVS分析结果。该分析在25℃下进行。 在70至85%相对湿度下观察到约6%的吸水量。
vii.多晶型III的IR光谱
图20表示多晶型III的ATR-IR光谱，图21提供了nujol混悬液 中的多晶型III的IR光谱。相应数据如下表11中所示：
表11
多晶型III的IR数据
光谱、特别是ATR光谱的特征包括在2931cm-1，1732cm-1，1667 cm-1，1590cm-1，1453cm-1，1165cm-1，1081cm-1，1057cm-1，1046cm-1， 1005cm-1，981cm-1，834cm-1和756cm-1的强吸收谱带。
多晶型IV
下列讨论提供了多晶型IV的各种观察到的特征。
i.多晶型IV的粉末X-射线衍射光谱
对多晶型IV观察到的PXRD光谱如图22中所示且相应数据如下表 12中所示：
表12
ii.多晶型IV的示差扫描量热法
图23表示对多晶型IV的DSC分析结果。曲线在155℃处显示峰， 认为它对应多晶型IV。曲线还在191℃处显示峰，认为它对应多晶型 I。认为样品包含多晶型I和IV，或者在加热过程中多晶型IV转化为 多晶型I。
独立地分析多晶型IV样品以便测定熔点。约90.0%(w/w)纯的样 品表现出149至152℃的熔点。
iv.多晶型IV的IR光谱
图24表示多晶型IV的ATR-IR光谱，图25提供了nujol混悬液 中的多晶型IV的IR光谱。相应数据如下表13中所示。
表13
多晶型IV的IR数据
光谱、特别是ATR光谱的特征包括在2933cm-1，1743cm-1，1668 cm-1，1584cm-1，1448cm-1，1165cm-1，1075cm-1，1060cm-1，1045cm-1， 1010cm-1，985cm-1，839cm-1和757cm-1的强吸收谱带。在3559cm-1处的吸收谱带对该多晶型物而言表现为特别独特。
S1结晶溶剂化物
下列讨论提供了S1结晶溶剂化物的各种观察到的特征。尽管如下 的PXRD和FT-拉曼数据对应乙酸乙酯S1结晶溶剂化物，但是该数据 一般也适合于表征二乙基酮结晶溶剂化物和乙醇结晶溶剂化物，因为 它们与乙酸乙酯结晶溶剂化物为同晶型。
i.乙酸乙酯S1结晶溶剂化物的外观
乙酸乙酯S1结晶溶剂化物一般是针晶形式，或具有分解成纤维的 倾向的较大晶体。
ii.乙酸乙酯S1结晶溶剂化物的粉末X-射线衍射光谱
对乙酸乙酯S1结晶溶剂化物观察到的PXRD光谱如图26中所示且 相应数据如下表14中所示：
表14
乙酸乙酯S1结晶溶剂化物的X-射线衍射数据
光谱特征包括在2θ=5.6°和6.1°处的起始峰。
iii.乙酸乙酯S1结晶溶剂化物的FT-拉曼光谱
对乙酸乙酯S1结晶溶剂化物观察到的FT-拉曼光谱如图27中所 示且相应数据如下表15中所示：
表15
乙酸乙酯S1结晶溶剂化物的FT-拉曼数据
位置(cm-1) 强度 2936 0.212 2877 0.098 2857 0.078 2775 0.040 1745 0.012 1669 0.029 1625 0.198 1586 0.363 1451 0.058 1392 0.022 1300 0.033 1271 0.039 1244 0.030 1215 0.021 1193 0.029 1118 0.028 1097 0.037 1040 0.034 1008 0.024 978 0.038 911 0.018 882 0.024 833 0.018 812 0.017 781 0.023 554 0.012 504 0.029 445 0.019 398 0.021 84 0.076
光谱特征包括在2936cm-1，1625-1627cm-1和1586cm-1的强峰； 和在1745cm-1，1669cm-1和978cm-1的较小、但尖锐的峰。
iv.S1结晶溶剂化物的热重分析法
图28，29和30分别表示乙酸乙酯S1结晶溶剂化物、乙醇S1结 晶溶剂化物和二乙基酮S1结晶溶剂化物的TG-FTIR结果。这些结果证 实存在具有约1个溶剂分子/20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内 酯分子的结晶溶剂化物，推定是基本上纯的20,23-二哌啶基-5-O-碳 霉糖基-太乐内酯。乙酸乙酯S1结晶溶剂化物因乙酸乙酯释放而产生 约4.1%的重量损失。这相当于乙酸乙酯与20,23-二哌啶基-5-O-碳霉 糖基-太乐内酯的摩尔比为0.36。乙醇S1结晶溶剂化物因乙醇释放(S1 结晶溶剂化物还可以包含少量水，该水也可以释放)而在达200℃产生 约6.6%的重量损失。这相当于乙醇与20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基- 太乐内酯的摩尔比为1.1。二乙基酮S1结晶溶剂化物因二乙基酮释放 而产生10%的重量损失。这相当于二乙基酮与20,23-二哌啶基-5-O- 碳霉糖基-太乐内酯的摩尔比为1.0。将这些结果概括在表16中
表16
S1结晶溶剂化物的TG-FTIR结果
就每种结晶溶剂化物而言，重量损失从40至50℃开始。这表明 相对低的稳定性且与例如通过在环境温度下真空干燥，乙酸乙酯结晶 溶剂化物易于被转化为多晶型III的观察结果一致。例如，参见实施 例7。乙酸乙酯结晶溶剂化物的结果表明溶剂分子可以被水替代，并 且该结果与多晶型III的DVS结果一致。
S2结晶溶剂化物
下列讨论提供了S2结晶溶剂化物的观察到的特征
i.tBMES2结晶溶剂化物的外观
tBMES2结晶溶剂化物一般是难以确定的晶体形式并且与乙酸乙 酯S1结晶溶剂化物晶体相比，不会表现出分解为纤维的倾向。
ii.tBMES2结晶溶剂化物在tBME中的溶解度
tBMES2结晶溶剂化物在tBME中的溶解度在40至50mg/ml。因 此，该溶解度比多晶型II在tBME中的溶解度至少低一个数量级。
iii.tBMES2结晶溶剂化物的粉末X-射线衍射光谱
对tBMES2结晶溶剂化物观察到的PXRD光谱如图31中所示且相 应数据如下表17中所示：
表17
tBMES2结晶溶剂化物的X-射线衍射数据
光谱特征包括在2θ=6.1°，10.0°，10.3°，17.0°，18.6°和20.1° 处具有类似强度的几个峰。
iv.tBMES2结晶溶剂化物的FT-拉曼光谱
对tBMES2结晶溶剂化物观察到的FT-拉曼光谱如图32中所示且 相应数据如下表18中所示：
表18
tBMES2结晶溶剂化物的FT-拉曼数据
位置(cm-1) 强度 2928 0.369 2883 0.184 1674 0.049 1623 0.353 1587 0.701 1445 0.108 1393 0.039 1318 0.067 1296 0.056 1276 0.066 1244 0.089 1190 0.073 1154 0.034 1126 0.053 1069 0.051 1038 0.058 1007 0.040 979 0.044 890 0.040 838 0.033 780 0.056 728 0.063 503 0.045 439 0.035 418 0.035 85 0.128
光谱特征包括在2928cm-1，1623cm-1和1587cm-1的强峰；和在 1674cm-1，1244cm-1，1190cm-1，780cm-1和728cm-1的较小、但尖 锐的峰。
v.tBMES2结晶溶剂化物的热重分析
图33表示tBMES2结晶溶剂化物样品的TG-FTIR结果。约8.7-10% 的重量损失因tBME释放而发生。这种重量损失对应于0.8-0.9tBME 分子/20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯分子，推定是基本上纯 的20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯。几乎所有的重量损失均 发生在90℃以上，当温度增加至高于100℃时，陡阶跃。因此，大部 分重量损失发生在高于tBME沸点的温度。tBME结晶溶剂化物表现为 比乙酸乙酯S1结晶溶剂化物更稳定。通过去溶剂化实验证实了这种稳 定性，其中在环境温度和70℃下真空干燥时，未观察到溶剂损耗。
S3结晶溶剂化物
下列讨论提供了S3结晶溶剂化物的各种观察到的特征。
i.THFS3结晶溶剂化物的外观
THFS3结晶溶剂化物一般是不规则的大块形式，并且与S1晶体 溶剂化物相比，不会表现出分解为纤维的倾向。
ii.THFS3结晶溶剂化物的粉末X-射线衍射光谱
对THFS3结晶溶剂化物观察到的PXRD光谱如图34中所示且相应 数据如下表19中所示：
表19
THFS3结晶溶剂化物的X-射线衍射数据
光谱特征包括在2θ=6.2°，10.1°，10.5°，13.6°，16.7°，17.2°， 18.8°和20.5°处具有类似强度的几个峰。
iii.THFS3结晶溶剂化物的FT-拉曼光谱
对THFS3结晶溶剂化物观察到的FT-拉曼光谱如图35中所示且 相应数据如下表20中所示。
表20
THFS3结晶溶剂化物的FT-拉曼数据
位置(cm-1) 强度 2928 0.340 2883 0.192 1673 0.051 1622 0.405 1586 0.828 1451 0.111 1394 0.039 1318 0.074 1296 0.066 1269 0.073 1244 0.092 1191 0.080 1127 0.057 1067 0.052 1040 0.066 980 0.051 910 0.052 890 0.045 839 0.036 782 0.057 503 0.041 438 0.037 419 0.036 100 0.138
光谱特征包括在2928cm-1，1622cm-1和1586cm-1的强峰；和在 1673cm-1，1244cm-1，1191cm-1和782cm-1的较小、但尖锐的峰。
iv.THFS3结晶溶剂化物的热重分析
图36表示THFS3结晶溶剂化物的TG-FTIR结果。大部分重量损 失发生在高于THF沸点的温度。特别地，低于10%的重量损失发生在 60至100℃，而约80%的重量损失发生在110至180℃。结果表明约 8.1%的重量损失在高于100℃的温度因THF释放而发生。这相当于约 0.8THF分子/20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯分子，推定是 基本上纯的20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯。
S4结晶溶剂化物
下列讨论提供了S4结晶溶剂化物的各种观察到的特征。尽管PXRD 和FT-拉曼数据对应乙酸甲酯S4结晶溶剂化物，但是该数据一般也适 合于表征甲酸乙酯结晶溶剂化物，因为它与乙酸甲酯结晶溶剂化物同 晶型。
i.乙酸甲酯S4结晶溶剂化物的外观
乙酸甲酯S4结晶溶剂化物包含一些发育良好的菱晶。该晶体与 S1溶剂化物晶体相比，不会表现出分解为纤维的倾向。
ii.乙酸甲酯S4结晶溶剂化物的粉末X-射线衍射光谱
对乙酸甲酯S4结晶溶剂化物观察到的PXRD光谱如图37中所示且 相应数据如下表21中所示：
表21
乙酸甲酯S4结晶溶剂化物的X-射线衍射数据
光谱特征包括在2θ=6.3°，10.1°，10.5°，14.8°，16.8°，17.4°， 18.9°和20.9°处具有类似强度的几个峰。
iii.乙酸甲酯S4结晶溶剂化物的FT-拉曼光谱
对乙酸甲酯S4结晶溶剂化物观察到的FT-拉曼光谱如图38中所 示且相应数据如下表22中所示：
表22
乙酸甲酯S4结晶溶剂化物的FT-拉曼数据
位置(cm-1) 强度 2949 0.205 2934 0.223 1740 0.019 1671 0.034 1619 0.242 1581 0.468 1452 0.075 1394 0.027 1318 0.047 1296 0.045 1269 0.048 1243 0.058 1191 0.054 1155 0.024 1128 0.038 1091 0.037 1040 0.048 1008 0.031 981 0.041 889 0.028 864 0.023 841 0.039 815 0.017 782 0.039 641 0.021 502 0.026 436 0.027 419 0.024 92 0.100
光谱特征包括在2949cm-1，2934cm-1，1619-1621cm-1和1581-1584 cm-1的强峰；和在1671cm-1，1243cm-1，1191cm-1，981cm-1和782cm-1的较小、但尖锐的峰。
iv.S4结晶溶剂化物的热重分析
图39和40分别表示乙酸甲酯和甲酸乙酯S4结晶溶剂化物的 TG-FTIR结果。这些结果证实存在结晶溶剂化物。就乙酸甲酯结晶溶 剂化物而言，因释放乙酸甲酯而存在约8.4%的重量损失。并且就甲酸 乙酯结晶溶剂化物而言，存在约7.7%的重量损失。基于观察结果估计 乙酸甲酯结晶溶剂化物具有约0.9乙酸甲酯分子/20,23-二哌啶基 -5-O-碳霉糖基-太乐内酯分子，且甲酸乙酯结晶溶剂化物具有约 0.6～约0.8甲酸乙酯分子/20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯 分子。这些估计推定其基本上是纯的20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基- 太乐内酯。低于10%的重量损失，就乙酸甲酯结晶溶剂化物而言发生 在70至110℃，而就甲酸乙酯结晶溶剂化物而言发生在60至90℃。 对这两种结晶溶剂化物来说，去溶剂化快速进行。去溶剂化在160℃ 时就乙酸甲酯结晶溶剂化物而言接近完成，而就甲酸乙酯结晶溶剂化 物而言在130℃接近完成。
B.使用大环内酯类的药物制备和治疗方法
可以使用上述20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的各种 晶型，例如，用于治疗动物，特别是家畜类和家禽的巴斯德菌病。在 某些实施方案中，大环内酯晶型用于治疗具有与溶血曼海姆菌 （Mannheimiahaemolytica），多杀巴斯德菌（Pasteurella multocida）和睡眠嗜组织菌（Histophilussomni）相关的牛呼吸系 统疾病(BRD)。在其它实施方案中，大环内酯晶型用于治疗具有与胸膜 炎肺炎放线杆菌（Actinobacilluspleuropneumoniae），多杀巴斯 德菌和支气管炎博德特菌（Bordetellabronchiseptica）相关的猪呼 吸系统疾病的猪动物。
一般而言，将治疗有效量的大环内酯给予接受的动物。本专利中 使用的术语“治疗有效量”构成了足以预防、减轻靶标病原体感染风 险、延缓其发作、改善、抑制或根除它的用量。一般而言，将治疗有 效量定义为实现有效控制感染部位的靶标病原体(或当用于预防、减轻 易于受到感染的部位上的感染风险或延缓其发作时)的浓度所必须的 用量。感染部位上(或易于受到感染的部位上)的浓度优选至少等于大 环内酯用于靶标病原体的MIC90水平(最低抑菌浓度，即抑制90%靶标 病原体生长的浓度)。将这种用量分两次或多次的分开剂量给予动物接 受者，不过，优选以单剂量给予。就将大环内酯与其它活性成分共同 给药的程度而言，术语“治疗有效量”意旨共同足以预防、减轻靶标 病原体感染风险、延缓其发作、改善、抑制或根除它的大环内酯和其 它活性成分总量。
影响优选给药方案的因素包括动物接受者的类型(例如种类和品 种)，年龄，体重，性别，膳食，一般状况；病理症状的严重性；用于 给予组合物的设备和所用的给药类型；药理学考虑，例如所给予的具 体组合物的活性、效力、药代动力学和毒理学特性；和该组合物是否 可以作为药物和/或疫苗组合的组成部分给药。因此，所用的实际剂量 可以根据具体的动物患者的不同而改变，且由此可以偏离上述所列的 典型剂量。确定这种剂量调整一般属于本领域技术人员使用常规手段 的范围。
一般而言，可以将大环内酯对动物给药一次，不过，也可以将其 给药多次。
对牛而言，大环内酯的总给药量一般在约0.1至约40mg/kg体重， 更典型的是约1至约10mg/kg体重。例如，在某些实施方案中，对牛 的给药量约为4mg/kg体重。尽管可以将大环内酯对任意年龄的牛给 药，但是在某些实施方案中，将大环内酯对约1个月至约1.5岁或约 6个月至约1岁的牛给药。在某些实施方案中，将大环内酯对进入饲 育场的断乳幼牛给药(通常在约6个月龄)。在其它实施方案中，牛是 约2至约12周龄的幼牛，且为了预防而将大环内酯以约1至约10 mg/kg体重的剂量给药；或为了治疗存在的感染以约2至约20mg/kg 体重的剂量给药。
就猪而言，大环内酯的总给药量一般在约0.1至约50mg/kg体重， 更典型的是约1至约10mg/kg体重。例如，在某些实施方案中，对猪 的给药量约为4mg/kg体重。在其它实施方案中，对猪的给药量约为 5mg/kg体重。尽管可以对任意年龄的猪给予大环内酯，但是在某些 实施方案中，将大环内酯对生长-修整（grower-finisher）的猪给药。
给药方法可以根据动物的不同而改变，但对大的哺乳动物而言， 例如牛、猪和马，优选通过口服或胃肠外给药。“胃肠外给药”包括， 例如皮下注射、静脉内注射、肌内注射、胸骨内注射、粘膜下层注射 和输注。在某些实施方案中，例如，动物接受者是牛且通过皮下例如 在颈部中给予大环内酯组合物。在其它实施方案中，例如，动物接受 者是猪且通过肌内给予大环内酯组合物。
大环内酯晶型可以用于形成药物组合物(或“药物”)。关注这类 组合物可以完整地包含一种或多种这类大环内酯晶型。然而，通常该 组合物也包含其它成分。
组合物中的其它成分可以包括，例如其它活性成分。或者(或另 外)，这类其它成分可以包括一种或多种药学可接受的载体、媒介物和 /或佐剂(统称为“赋形剂”)。这类赋形剂的选择取决于各种因素，例 如给药方式、用于给予组合物的设备；药理学考虑，例如具体组合物 的活性、功效、药代动力学和毒理学特性；组合物中存在的其它活性 成分；和该组合物是否可以作为药物和/和疫苗组合的组成部分给药。
固体大环内酯组合物可以包括，例如糖类，例如乳糖、葡萄糖和 蔗糖；淀粉，例如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素衍生物，例如羧甲 基纤维素钠、乙基纤维素和乙酸纤维素等。
液体大环内酯组合物可以包括，例如水、等渗生理盐水、林格液、 乙醇和/或可以存在磷酸盐缓冲溶液。这类组合物还可以包括油，例如 花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油和/或多 元醇类，例如甘油、丙二醇、山梨醇、甘露糖醇、聚乙二醇和聚(乙二 醇-2-丙二醇-2-聚乙二醇)。另外期望的是例如在某些情况中，组合物 包含一种或多种防腐剂。防腐剂的存在可以例如对组合物或溶剂提供 有益性，从而可以长时间贮存，例如数天、数周、数月或数年。当选 择适当的防腐剂时，考虑的因素包括：例如其抗菌活性；它具有所需 抗菌活性的pH范围；它具有所需抗菌活性时的最低浓度；其水溶性和 其它物理特性(例如导致起泡沫的可能性)；其对胃肠外使用的适合性； 其可能与活性成分的相互作用(例如其对活性成分溶解度的影响)；其 可能与非活性成分的相互作用(例如其对溶剂稳定性的影响)；以及可 适用于生产、销售或使用该组合物或溶剂的任何政府条例。可采用的 防腐剂包括，例如对羟基苯甲酸酯类、丙二醇、苯扎氯铵、苯基乙醇、 氯甲酚、间甲酚、乙醇、苯氧乙醇和苄醇。
有关可以适合于大环内酯组合物的药学可接受的赋形剂的进一步 讨论可以在例如“Gennaro，Remington：TheScienceandPractice ofPharmacy”(第20版，2000)(引入本专利作为参考)中找到。为 了示例，其它合适的赋形剂可以包括，例如着色剂、矫味剂和增稠剂， 例如聚维酮、羧甲基纤维素和/或羟丙基甲基纤维素。
通常，大环内酯占药物组合物的至少约0.5%重量。例如，在用于 猪的某些实施方案中，用于胃肠外给药的大环内酯适当浓度可以在， 例如约5至约500mg/ml、约10至约100mg/ml，或约20至约60mg/ml (例如约40mg/ml)。作为进一步的例证，在用于牛的某些实施方案中， 用于胃肠外给药的大环内酯适当浓度可以在，例如约5mg/ml至约2.0 g/ml、约10mg/ml至约1.0g/ml，50至约500mg/ml，或约100至 约300mg/ml(例如180mg/ml)。
应认为大环内酯浓度可以根据剂型的不同而改变。例如，如果通 过胃肠外给予大环内酯，那么大环内酯浓度优选足以提供在适合于胃 肠外给药的体积中所需的大环内酯治疗有效量。最大可接受体积可以 根据例如用于给药的设备、胃肠外给药类型、动物接受者的大小和使 用者的主观需求的不同而改变。
在某些实施方案中，药物组合物包括通过一种方法形成的液体组 合物，该方法包括将20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的晶型 溶于赋形剂。在其它实施方案中，所述组合物包括通过一种方法形成 的混悬液，该方法包括将20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的 晶型混悬于赋形剂中。
涉及20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯及其衍生物在治 疗家畜类和家禽的疾病中的应用的进一步讨论可以在例如美国专利 US6,514,946中找到。如上所述，将该讨论引入本专利作为参考。
本发明还涉及适用于实施上述治疗方法的试剂盒。在某些实施方 案中，该试剂盒包括治疗有效量的至少一种上述20,23-二哌啶基 -5-O-碳霉糖基-太乐内酯的晶型(例如治疗有效量的多晶型I)和用于 合并该晶型与至少一种赋形剂的说明书，例如用于将所述晶型溶于或 混悬于液体赋形剂的说明书。该试剂盒可以进一步(或者)包含额外成 分，例如一种或多种器械(例如注射器)以便给予包含（或衍生自） 20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的一种或多种晶型、一种或 多种额外药物或生物材料、一种或多种赋形剂和/或一种或多种诊断用 品的组合物。
实施例
下列实施例仅为了示例本发明的实施方案，但不以任何方式对本 说明书的其余部分进行限定。
实施例1.由泰洛星A制备20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐 内酯
A部分.还原氨基化。23-O-Mycinosyl-20-哌啶基-5-O-碳霉糖基- 太乐内酯化合物(2)的制备
将甲苯(19.2kg)，泰洛星A(1)(3.68kg；≥80%泰洛星A； ≥95%泰洛星A，B，C，&D)，哌啶(0.40kg)和甲酸(0.55kg)装入 反应器。将该混合物加热至70-80℃，同时搅拌。然后在该温度下再 持续搅拌1-2小时。通过HPLC监测20-哌啶基-泰洛星化合物(2)的形 成。在反应完成后(≤2%泰洛星A(1))，将产物混合物冷却至环境温 度。
B部分.碳霉糖基氧基(mycarosyloxy)取代基的酸水解。 23-O-mycinosyl-20-哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯化合物(3)的制 备。
将HBr(将48%HBr稀释至24%)加入到A部分的产物混合物中， 同时搅拌并且将该混合物维持在低于40℃。然后，用20分钟相分离 时间来分离产物混合物中的各相。在该相分离过程中产物混合物维持 在20-25℃下。下层相的HPLC用于证实反应完成(≤2%20-哌啶基-泰 洛星化合物(2))。
C部分.碳霉糖基氧基取代基的酸水解。23-羟基-20-哌啶基-5-O- 碳霉糖基-太乐内酯(4)的制备。
将在环境温度下的24%HBr(18.4L)加入到获自B部分的水相中， 随后在约1小时内和搅拌下加热至54±3℃。在该温度下再持续搅拌 2-4小时，同时使用HPLC监测反应。在反应完成后(≤2% 23-O-mycinosyl-20-哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯化合物(3))，使 用-10℃冷却夹套将该混合物冷却至环境温度。冷却后，用二氯甲烷将 该混合物萃取3次(每次9.8kg)。将含水产物冷却至4-8℃，然后缓 慢加入6NNaOH(33.6kg)，将pH调整至≥10。在环境温度下用二氯 甲烷(分别使用32.6kg，29.3kg和24.5kg)将得到的混合物萃取3 次。将合并的有机相加入到单独的反应器中。加入硫酸钠(2.9kg； Na2SO4)并且过滤。然后加入二氯甲烷(4.9kg)并且通过蒸馏除去。溶 解得到的粗产物并且在环境温度下在叔丁基甲基醚(每次6.1kg)中重 结晶两次。然后，用Nutsch滤器分离产物，用叔丁基甲基醚(每次1.0 kg)洗涤两次，在40℃下和真空下的厢式烘燥器中干燥过夜。使用HPLC 分析终产物。
D部分.碘化。活化化合物(5)的制备。
在环境温度下将三苯膦(0.9kg)和吡啶(0.3kg；无水)溶于二氯 甲烷(11.7kg)。然后加入碘(0.8kg)。然后搅拌得到的混合物，直到 全部碘溶解。然后将该混合物冷却至13℃。将冷却的混合物加入到来 自在二氯甲烷(11.7kg)中的C部分的产物中，同时在15±3℃下搅拌。 通过HPLC监测反应，测定在2-2.5小时内完成(≤2%23-羟基-20-哌 啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯化合物)。
E部分.氨基化。20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯(6)的 制备
将碳酸钾(1.8kg)，乙腈(16.7kg)和哌啶(1.1kg)加入到D部分 的产物中。然后将得到的混合物加热至78℃，同时蒸馏出二氯甲烷。 在与乙腈进行溶剂交换后，将该混合物在回流状态下搅拌2-2.5小时， 然后冷却至环境温度。然后，过滤出残留的碳酸钾，用乙腈(2.8kg) 洗涤滤饼并且在50℃套夹温度下和真空中蒸馏出溶剂。将得到的残余 物溶于乙酸乙酯(15.8kg)并且与0.5NHCl(35.6kg)混合。在环境 温度下分离各相并且用乙酸乙酯(每次使用15.8kg)将下部的水相萃 取3次。通过添加6NNaOH(6.4kg)将得到的水相设定在pH11，在 环境温度下用二氯甲烷(每次18.7kg)萃取3次。将合并的下部有机 相与硫酸钠(5.3kg)再加入反应器。然后过滤该混合物以形成饼状物， 再用二氯甲烷(4.9kg)洗涤并且在50℃套夹温度下和真空中干燥，形 成大环内酯产物。再将该产物与乙腈(21.7L)混合并且重结晶。用 Nutsch滤器分离得到的晶体，用冷乙腈(每次3.5L)洗涤两次，在40℃ 下和真空中干燥过夜，形成大环内酯(5)产物。使用HPLC证实产物组 成。
实施例2.可替代选择的氨基化。20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基 -太乐内酯(2)的制备
将碳酸钾(0.94kg)，二甲苯(5L)和哌啶(0.55kg)加入到1.0kg 根据D部分的方法制备的活化的化合物(1)中。然后将得到的混合物加 热至95-105℃下15小时。后处理包括将K2CO3溶于水；除去过量的哌 啶；萃取入稀HCl；在pH11下萃取入叔丁基甲基醚；进行溶剂转换 成乙醇；并且沉淀、分离和干燥粗产物。然后使产物从乙酸甲酯或乙 酸乙酯中重结晶。使用HPLC证实产物组成。
实施例3.20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型I 的制备
A部分.还原氨基化。23-O-mycinosyl-20-哌啶基-5-O-碳霉糖基 -太乐内酯化合物(2)的制备
将磷酸泰洛星(1)和二氯甲烷(1.3L/kg磷酸泰洛星)装入反应器 中。将得到的混合物搅拌以产生澄清溶液。然后将哌啶(1.2eq，基于 磷酸泰洛星)，甲酸(4.5eq，基于磷酸泰洛星)和甲苯(6.7L/kg磷酸 泰洛星)依次加入到反应器中。将得到的混合物加热至76℃，同时搅 拌。然后在该温度下持续搅拌2.5小时。然后再加入哌啶(0.1eq，基 于磷酸泰洛星)并且将得到的混合物在76℃下再搅拌1小时。将产物 混合物冷却至50℃。
B部分.碳霉糖基氧基取代基的酸水解。23-羟基-20-哌啶基-5-O- 碳霉糖基-太乐内酯(4)的制备。
在50℃下将HBr水溶液(23.3eq，基于A部分中使用的磷酸泰 洛星)加入到A部分的产物混合物中。将得到的混合物在56℃下搅拌5 小时。HPLC用于监测反应。
获得所需的转化后，立即冷却产物混合物。在25-30℃下用二氯 甲烷将水相萃取两次。然后将水相冷却至0℃并且在≤5℃下用NaOH将 pH调整至10-10.5。然后，在20℃下用二氯甲烷将水相萃取两次。用 NaHCO3水溶液将得到的合并的有机相萃取两次。然后从合并的有机相 中通过蒸馏除去二氯甲烷并且用异丙醇替代。然后，在45℃下加入庚 烷以引发沉淀。然后将该混合物在0℃下搅拌。然后通过过滤分离结 晶产物。用庚烷和异丙醇洗涤分离的晶体，干燥并且使用HPLC分析。
上述方法制备了0.23kg产物/kgA部分中使用的磷酸泰洛星。 该产物可能包含异丙醇。为了除去异丙醇，可以将产物溶于甲苯和二 氯甲烷，随后蒸馏。
C部分.碘化。活化化合物(5)的制备
在25℃下将三苯膦(0.41kg/kgB部分的产物)溶于二氯甲烷(12 L/kg三苯膦，≤100ppmH2O)。然后加入吡啶(0.3kg/kg三苯膦)。然 后在25℃下分5部分加入碘(0.9kg/kg三苯膦)。在25℃下将得到的 混合物搅拌40分钟，然后冷却至-6℃。然后在50分钟内将该混合物 加入到来自B部分的产物中，同时在-6℃下搅拌。然后，持续搅拌7 小时，同时将该混合物维持在-5℃。通过HPLC监测反应(如果未达到 充分转化，则再将该混合物在-5℃下搅拌一定时间，例如1.5小时)。
当达到需要的转化时，在-5℃下用Na2SO3水溶液洗涤产物混合物。 然后通过蒸馏从有机相中除去二氯甲烷并且用四氢呋喃替代。
D部分.氨基化。20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯(6)的 制备
将哌啶(0.55kg/kg来自B部分的产物)加入到来自C部分的产物 中，随后加入碳酸钾(0.94kg/kg来自B部分的产物)。将得到的混合 物加热至55℃，然后维持在该温度下3小时，同时搅拌。然后，在1 小时内将该混合物加热至72℃，然后在该温度下搅拌6小时。使用HPLC 分析产物组成。
一旦获得所需的转化，就将产物混合物冷却至20℃并且加入甲 苯。用水将得到的混合物洗涤两次并且用HCl水溶液将有机相萃取两 次，得到具有pH≤3的水相。将该混合物冷却至0-5℃。
E部分.20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的乙酸乙酯S1 结晶溶剂化物的制备。
在3℃下将根据D部分制备的产物的酸性水溶性与乙酸乙酯(6.7 L/kg来自B部分的产物)合并。在3℃下使用苛性钠将得到的乳液的 pH调整至10.5-11.0。在3℃下分离各相。用水将有机相洗涤一次。 在相分离后，通过蒸馏浓缩有机相，得到乙酸乙酯溶液。在种晶时， 结晶开始。过滤得到的产物而得到乙酸乙酯结晶溶剂化物的滤饼。在 0℃下用庚烷洗涤滤饼。由此得到了约0.78kg粗的湿结晶溶剂化物/kg 来自使用的B部分的产物。
F部分.20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型I的 制备。
将根据E部分形成的洗涤的结晶溶剂化物湿饼与庚烷(6.1L/kg 湿饼)合并。将得到的混悬液加热至72℃并且种晶。然后，在72℃下， 然后在20℃下搅拌该混悬液。然后过滤该混悬液并且用庚烷洗涤得到 的固体并且干燥。由此得到约0.53kg晶型I/kg来自使用的B部分的 产物(或0.68kg晶型I/kg来自使用的E部分的粗的湿结晶溶剂化物 产物)。
实施例4.20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型II 的制备
A部分.活化化合物的制备。
根据实施例1的A-C部分中所述的方法制备23-羟基-20-哌啶基 -5-O-碳霉糖基-太乐内酯(50g)，除了在酸水解反应中使用的酸(即B 和C部分)是HCl而不是HBr。将13℃下的23-羟基-20-哌啶基-5-O- 碳霉糖基-太乐内酯装入含二氯甲烷(在13℃下250ml)的搅拌的反应 器中。将得到的混合物在13℃下搅拌约5分钟。平行地，将二氯甲烷 (在环境温度下250ml)装入单独的反应器中并且开始搅拌。然后向反 应器中装入三苯膦(在环境温度下24.6g)，随后加入吡啶(在环境温 度下7.8ml)，然后加入碘(在环境温度下22.83g)。然后，将该混合 物在环境温度下搅拌2分钟，然后在13℃下使用滴液漏斗与含23-羟 基-20-哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的二氯甲烷混合物合并。将得 到的混合物在13℃下搅拌130分钟，以形成活化产物。
B部分.20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型II的 制备
在13℃下将碳酸钾(51.81g)、然后将乙腈(600ml)且最终将哌 啶(37.1ml)加入到A部分的活化产物中。然后在90分钟内将得到的 混合物加热至78℃，然后在该温度(回流)下再搅拌130分钟。然后在 60分钟内将该混合物冷却至15-25℃并且停止搅拌。然后，过滤出残 留的碳酸钾，用乙腈洗涤滤饼(100ml)，并且在50℃下、60分钟内和 真空中蒸馏出溶剂。将得到的残余物溶于乙酸乙酯(500ml)并且与0.5 NHCl(1000ml)混合。在搅拌5分钟后，停止搅拌并且分离各相。用 乙酸乙酯(每次使用500ml)将下部的水相萃取3次。开始搅拌得到的 水相并且使温度降至5-8℃。然后通过添加6NNaOH(150ml)调整 pH至pH11。然后在环境温度下用二氯甲烷（每次400ml）将调整了 pH的混合物萃取3次。在环境温度下将合并的下部有机相与硫酸钠 (150g)再加入到反应器中。将得到的混合物搅拌15分钟，然后过滤 以形成滤饼，再用二氯甲烷洗涤(100ml)。通过蒸馏除去溶剂，在50℃ 下和真空中将得到的产物干燥60分钟。由此得到57.5g大环内酯粗 产物。
在50℃下使粗产物从乙腈(90ml)中结晶。为了避免油形成，在 环境温度下加入20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的晶种(预 先通过将3g粗的20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯溶于12ml 乙腈并且通过过滤收集环境温度下24小时后形成的晶体而获得该晶 种)。产物作为灰白色固体在环境温度下5h和在5℃下过夜(15h)进 行沉淀。通过过滤分离固体并且用冷乙腈(2x25ml)洗涤两次。将剩余 的固体在减压(8mbar)和40℃下干燥过夜，得到18.2g20,23-二哌 啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯(含量：通过HPLC测定为90%(w/w))。 通过在乙腈中重结晶进一步纯化产物(15g)。由此产生10.7g产物(在 254nm处的HPLC纯度：100%；含量：通过HPLC测定为94%(w/w))。
实施例5.20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型II 在乙腈中的重结晶。
将根据实施例4制备的20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯 的多晶型II(80mg)溶于乙腈(2ml)。过滤得到的溶液并且使乙腈在 环境温度下蒸发而形成晶体。晶体产物的FT-拉曼光谱与实施例4中 的晶体产物的光谱大体相同。
实施例6.20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的乙酸乙酯 S1结晶溶剂化物的制备。
将根据实施例4制备的20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯 的多晶型II(312mg)溶于乙酸乙酯(0.5ml)。溶解完成后几分钟， 新的晶体形成，再过几分钟后，充入溶液。再加入乙酸乙酯(1ml)， 过滤出晶体，在环境温度和大气压下干燥。
实施例7.20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型III 的制备。
通过在环境温度下和真空中，将根据实施例6制备的20,23-二哌 啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的乙酸乙酯S1结晶溶剂化物（50mg）干 燥20小时，制备20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型 III。
实施例8.20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的乙酸乙酯 S1结晶溶剂化物的制备。
将根据实施例4制备的20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯 的多晶型II(146.1mg)溶于乙酸乙酯(0.5ml)，同时搅拌。在结晶 开始后，加入庚烷(5ml)，同时持续搅拌。在3天后过滤出得到的固 体。在环境温度（室温）下进行所有这些步骤。得到的晶体是极细针 晶形式。该晶体的FT-拉曼光谱与来自实施例6的晶体的FT-拉曼光谱 相同。
实施例9.20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的乙酸乙酯 S1结晶溶剂化物的制备。
将根据实施例4制备的20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯 的多晶型II(99.6mg)溶于乙酸乙酯(2ml)。过滤得到的溶液并且将 溶剂蒸发。在蒸发几乎所有溶剂后，残留有非晶形残余物。再加入乙 酸乙酯并且蒸发。在蒸发的不同阶段加入实施例6中制备的少量晶种。 由此得到针状形式的晶体。这些晶体的FT-拉曼光谱与来自实施例6 的晶体的FT-拉曼光谱相同。
实施例10.20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型 III的制备。
通过在约40至约70℃下和真空中，将根据实施例9制备的20,23- 二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的乙酸乙酯S1结晶溶剂化物干燥3 天，制备20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型III。这 些晶体的FT-拉曼光谱与来自实施例7的晶体的FT-拉曼光谱相同。
实施例11.20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型 III的制备。
合并根据实施例4制备的20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内 酯的多晶型II(150.5mg)和乙腈(1ml)，并且进行20至40℃的温度 循环，其中每次加热/冷却步骤和保温之间的时间间隔为1小时。5天 后停止该循环。过滤出得到的晶体(细针晶形式)并且使其在环境温度 下干燥。这些晶体的PXRD光谱与实施例7中的晶体的PXRD光谱相同。
实施例12.20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型I 的制备。
将根据实施例4制备的20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯 的多晶型II(170.5mg)与由庚烷和叔丁基甲基醚(“tBME”)以庚烷 /tBME比为95:5(v/v)组成的溶剂(1ml)一起在环境温度下搅拌4天。 然后，过滤出得到的晶体，再用另外的庚烷/tBME(95:5v/v)溶剂洗 涤并且真空干燥。
实施例13.20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型 I的制备。
将根据实施例4制备的20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯 的多晶型II(147.4mg)溶于tBME(0.5ml)，同时搅拌以形成澄清溶 液。然后加入庚烷，导致轻微沉淀。然后在3天后分离晶体。所有这 些步骤均在环境温度下进行。得到的晶体的FT-拉曼光谱与实施例12 中的晶体的FT-拉曼光谱相同。
实施例14.20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型I 的制备。
将根据实施例4制备的20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯 的多晶型II(164.5mg)与庚烷(1ml)一起在环境温度下搅拌4天。过 滤出得到的固体，用庚烷洗涤并且真空干燥。将该洗涤并且干燥的产 物(90mg)与20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型III (98mg)一起混悬于庚烷中并且搅拌。将温度维持在25℃下10天，除 了在第5夜过程中温度曾意外短暂地升高至60℃。得到的晶体的FT- 拉曼光谱与实施例12中的晶体的FT-拉曼光谱相同。
实施例15.20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型I 的制备。
将20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型III(171.8 mg)混悬于由庚烷和tBME以庚烷/tBME比95:5(v/v)组成的溶剂(1ml) 中。将得到的溶液搅拌9天。过滤出固体并且用庚烷(1ml)洗涤。所 有这些步骤均在环境温度下进行。得到的晶体的FT-拉曼光谱与实施 例12中的晶体的FT-拉曼光谱相同。
实施例16.20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型I 的制备。
将20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型II(173.4 mg)混悬于庚烷和tBME以庚烷/tBME比95:5(v/v)组成的溶剂(1ml) 中。将得到的溶液搅拌9天。过滤出固体并且用庚烷(1ml)洗涤。所 有这些步骤均在环境温度下进行。5天时和9天结束时的晶体的FT- 拉曼光谱与实施例12中的晶体的FT-拉曼光谱相同。
实施例17.20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的乙醇S1 结晶溶剂化物的制备。
将根据实施例4制备的20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯 的多晶型II(150mg)溶于乙醇(1ml)。过滤后，在环境温度下蒸发 乙醇。形成固体，将其再次溶于乙醇(1ml)。过滤后，在环境温度下 蒸发乙醇。所得晶体的PXRD和FT-拉曼光谱与实施例6的晶体产物的 相应光谱相同。
实施例18.20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的二乙基酮 S1结晶溶剂化物的制备。
将根据实施例4制备的20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯 的多晶型II(206.6mg)溶于二乙基酮(0.5ml)，然后静置过夜。第 二天早晨，通过过滤获得晶体。得到的晶体的PXRD光谱与实施例6 的晶体产物的PXRD光谱相同。
实施例19.20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的tBME S2结晶溶剂化物的制备。
将根据实施例4制备的20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯 的多晶型II(304mg)溶于叔丁基甲基醚(0.5ml)。过夜，在容器底 部上形成大的晶体。在刮取时，在15分钟内整个溶液体积内充满了晶 体。再加入叔丁基甲基醚(1ml)。然后过滤晶体并且在环境温度下干 燥。
尽管该方法可成功地重复而形成S2溶剂化物晶体，但是通过将额 外量的20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型II溶于叔 丁基甲基醚、接种来自第一批的S2溶剂化物晶体并且除去叔丁基甲基 醚，可以形成额外批量的S2溶剂化物晶体。在一个实施方案中，通过 将20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型II(245.7mg) 溶于叔丁基甲基醚(0.5ml)，并且在环境温度下缓慢蒸发部分溶剂而 制备S2结晶溶剂化物。在无晶体形成后，再加入叔丁基甲基醚，随后 接种来自第一批的S2溶剂化物晶体。然后完全蒸发溶剂。这些晶体的 FT-拉曼光谱与来自第一批的晶体的FT-拉曼光谱近似相同。在进一步 的测试中，在环境温度下将晶体真空干燥20小时，然后再次在约70℃ 下的真空中干燥24小时。每次干燥步骤后的晶体的FT-拉曼光谱与来 自第一批的FT-拉曼光谱相同。
实施例20.20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的四氢呋喃 S3结晶溶剂化物的制备。
将根据实施例4制备的20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯 的多晶型II(150mg)溶于四氢呋喃(1.0ml)。过滤得到的混合物， 然后在环境温度下蒸发溶剂。在相对大比例的溶剂蒸发后产生结晶。
实施例21.20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的乙酸甲酯 S4结晶溶剂化物的制备。
将根据实施例4制备的20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯 的多晶型II(204.0mg)溶于乙酸甲酯(0.5ml)。在溶解过程中开始 重结晶。15分钟后，全部体积充满针晶。过滤出固体。最终晶体是棱 晶形状。
实施例22.20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的甲酸乙酯 S4结晶溶剂化物的制备。
将根据实施例4制备的20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯 的多晶型II(208.3mg)溶于甲酸乙酯(0.5ml)。使烧瓶开放几分钟， 此时物质缓慢结晶成大的针晶。过滤出固体。最终晶体是棱晶形状。 得到的晶体的PXRD光谱与实施例21的晶体产物的PXRD光谱相同。
实施例23.20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的多晶型 IV的制备。
将溶剂-湿润的20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的乙酸 乙酯S1结晶溶剂化物(3.4g，相当于2.0g干产物)与27.7g庚烷(相 当于14g溶剂与1g产物之比)混合。在73-95℃下蒸馏该混合物以 除去8.4g溶剂(合并的乙酸乙酯和庚烷)，由此还导致产物溶解。在 2小时内将该溶液冷却至45℃，导致在45℃下沉淀一定的粘性固体。 将该溶液加热至60℃并且加入晶种(预先通过下列步骤制备这些晶 种：混合粗的20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯(0.9g)与庚 烷(4.5g)，将该混合物在80℃下搅拌8小时，再将该混合物在23℃ 下搅拌21小时，过滤出得到的晶体)。将该溶液冷却至45℃，此时形 成一定量的固体。将该混合物加热至80℃，然后维持在该温度下，同 时搅拌8小时。然后，将该混合物冷却至22℃，导致产物形成于反应 烧瓶的壁上。分离该产物。
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本专利(包括权利要求)中的措词“包含”，“包括”和“含有” 被解释为包含地而非唯一地。这种解释的意图在于与这些措词在美国 专利法中给出的解释相同。
术语“药学可接受的”在本专利中以形容词的方式使用，意指其 修饰的名词适用于药物产品。例如，在用于描述赋形剂或盐时，它将 该赋形剂或盐表征为具有优于任何必须对指定接受动物给予该赋形剂 或盐的有害作用的有益性。
除非本专利中另有表征，否则术语“环境温度”意旨约20至约 25℃的温度。
本专利中作为应用于20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯 的术语“非晶形”意旨固态，其中20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太 乐内酯的分子以混乱排列方式存在并且不形成可辨识的晶格或晶胞。 当进行粉末X-射线衍射时，非晶形20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基- 太乐内酯不会产生任何特征结晶峰。
本专利中作为应用于20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯 的术语“晶型”意旨固态，其中20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐 内酯的分子排列成可辨识的晶格，其：(i)包含可辨识的晶胞和(ii) 在进行粉末X-射线辐射时产生衍射峰。
术语“结晶”可以意旨结晶和/或重结晶，这取决于涉及20,23- 二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的原料物质的制备的适用情况。
术语“直接结晶”意旨20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯 从适当溶剂中直接结晶而不发生20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太 乐内酯的中间体溶剂化固态晶型的形成和去溶剂化。
术语“粒度”意旨如通过本领域众所周知的常规粒度测定技术测 定的颗粒大小，所述的常规粒度测定技术例如激光散射、沉降场流动 分离法、光子相关光谱法或圆盘离心。可以用于测量粒度的技术的非 限制性实例是使用Sympatec粒度分析仪的液体分散技术。
术语“HPLC”意旨高效液相色谱法。
除非本专利中另有表征，否则术语“纯度”意旨根据常规HPLC 分析测定的20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的化学纯度。
本专利中使用的术语“相纯度”意旨20,23-二哌啶基-5-O-碳霉 糖基-太乐内酯在有关通过本专利中所述的X-射线粉末衍射分析方法 测定的20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基-太乐内酯的具体晶型或非晶 形的固态纯度。术语“相-纯”意旨20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖基- 太乐内酯其它固态形式的纯度且不一定意旨在其它化合物方面的高化 学纯度。术语“基本上相-纯的”意旨在20,23-二哌啶基-5-O-碳霉糖 基-太乐内酯的其它固态形式方面至少约90%纯度(例如至少约95%纯 度)。
将本专利中引述的全部参考文献引入本专利中作为参考。
上述优选实施方案的详细描述仅用以使本领域技术人员熟知本发 明、其原理及其实际应用，以便本领域技术人员可以以其多种形式采 用和应用本发明。因此，本发明不限于上述实施方案并且可以以各种 方式变型。