技术领域
本发明涉及在空气中捕集微生物、化学物质等被检测物的被检测物捕 集用具及其使用方法。
背景技术
以往,作为捕集空气中漂浮的微生物、化学物质等被检测物的技术, 周知有通过过滤器吸引空气,而利用过滤器使被检测物分离的技术。而且, 作为捕集空气中漂浮的微生物的捕集用具,已知有将通过从常温进行升温 而从凝胶相变成溶胶的载体配置在捕集盘上的技术(例如,参照专利文献 1)。该捕集用具组装在冲击方式的空气采样器上使用,在由空气采样器吸 引的空气与载体碰撞时,与空气相伴的微生物被凝胶状的载体捕集。然后, 被捕集到的微生物与由于升温而溶胶化了的载体一起从捕集盘被取出,根 据规定的计数方法进行计数。
另一方面,作为微生物的计数方法,已知有对从微生物提取的ATP(三 磷酸腺苷)进行定量而间接对微生物进行计数的所谓ATP法(例如,参照 专利文献2)。该ATP法构成为,通过使ATP提取试剂与捕集到的微生物 接触而提取微生物内在的ATP,根据使发光试剂与该ATP反应时的发光强 度而对微生物进行计数。
根据该ATP法,例如在对根据平板培养基中培养的微生物的群体数所 捕集到的微生物进行计数的计数方法中需要几天时间的情况下,能够将从 捕集微生物开始到该计数为止的时间飞跃性地缩短1小时至几小时左右。
然而,该ATP法由于基于微弱的发光强度对微生物进行计数,因此需 要极力减少成为干扰主要原因的物质混入到成为计数对象的样品中的可 能性。
专利文献1:日本特开2009-131186号公报
专利文献2:日本特开平11-137293号公报
然而,以往的捕集用具(例如,参照专利文献1)由于捕集盘上的载 体露出,因此从通过空气采样器将微生物捕集到载体后,直到将其供应给 微生物的计数为止期间,例如检查对象外的多余的微生物或其它成为干扰 主要原因的物质有可能会混入载体。尤其是在捕集到微生物的检查场所与 微生物的计数设施之间相分离的情况下,由此产生的污染的可能性进一步 增加。
也就是说,在以往的捕集用具(例如,参照专利文献1)中,由于载 体在从空气采样器卸下后到微生物的计数为止期间会被污染,因此有可能 无法对在检查场所捕集到的微生物准确地进行计数。
发明内容
因此,本发明的课题在于提供一种能够更准确地检测在检查场所捕集 到的微生物等被检测物的被检测物捕集用具及其使用方法。
解决所述课题的本发明的被检测物捕集用具的特征在于,
具有:捕集被检测物时朝上且检测所述被检测物时朝下的在一面侧对 捕集所述被检测物的载体进行保持的捕集盘;以及以在捕集所述被检测物 时露出所述载体的方式设置成可装卸、且以在检测所述被检测物时覆盖所 述载体的方式相对于所述捕集盘配置的壳体,所述捕集盘具有将所述一面 侧与另一面侧连结的贯通孔,所述捕集盘的所述贯通孔将在所述一面侧与 所述壳体之间形成的空间和外部连结,在所述捕集盘的下表面,绕所述贯 通孔以能够收容环状的所述载体的方式竖立设置有内外双层的环状肋,所 述载体由通过加热而从凝胶相变成溶胶的材料形成,在所述环状肋彼此之 间填充有所述载体。
并且,解决所述课题的本发明的被检测物捕集用具的使用方法,该被 检测物捕集用具具有:在捕集被检测物时朝上且检测所述被检测物时朝下 的一面侧对捕集被检测物的载体进行保持的捕集盘;和以在捕集被检测物 时露出所述载体的方式设置成可装卸、且以在检测所述被检测物时覆盖所 述载体的方式相对于所述捕集盘配置的壳体,所述捕集盘具有将在所述一 面侧与所述壳体之间形成的空间和外部连结的贯通孔,所述被检测物捕集 用具的使用方法的特征在于,在所述捕集盘的下表面,绕所述贯通孔以能 够收容环状的所述载体的方式竖立设置有内外双层的环状肋,所述载体由 通过加热而从凝胶相变成溶胶的材料形成,在所述环状肋彼此之间填充有 所述载体,所述使用方法包括:取下所述壳体而使所述载体露出的第一工 序;相对于露出的所述载体进行所述被检测物的捕集操作的第二工序;在 进行了所述捕集操作后,以覆盖所述载体的方式相对于所述捕集盘再次配 置所述壳体的第三工序;经由形成于所述捕集盘的所述贯通孔,将用于检 测所述被检测物的试剂注入到所述壳体内的第四工序。
发明效果
根据本发明,能够提供一种能够更准确地检测在检查场所捕集到的微 生物等被检测物的被检测物捕集用具及其使用方法。
附图说明
图1是安装有本发明的实施方式的被检测物捕集用具的微生物计数装 置的结构说明图。
图2是示出图1的微生物计数装置中的被检测物捕集用具的搭载部附 近的情况的立体图。
图3是示出在图1的微生物计数装置中的被检测物捕集用具的搭载部 搭载有被检测物捕集用具的情况的剖视图。
图4是示出微生物计数装置基于控制部的指令而进行动作的工序的流 程图。
图5是本实施方式的被检测物捕集用具的立体图。
图6是图5的被检测物捕集用具的分解立体图,(a)是从斜上方向下 看时的分解立体图,(b)是从斜下方向上看时的分解立体图。
图7是图5的VII-VII剖视图。
图8是用于说明利用本发明的实施方式的被检测物捕集用具捕集微生 物的方法的立体图。
图9(a-1)至(a-4)是用于说明微生物计数装置内的被检测物捕 集用具的使用方法的被检测物捕集用具的剖视图,(b-1)至(b-4)是 放大示出对应于(a-1)至(a-4)的场景中的过滤器附近的情况的示意 图。
附图符号说明:
1 被检测物捕集用具
2 试剂盒
3 盖体
4 捕集盘
5 载体
6 壳体
7 过滤器
7a 亲水性过滤器
7b 疎水性过滤器
10 微生物计数装置
31 第二卡合爪(卡合部)
41 贯通孔
50 空气采样器(捕集装置)
64a 排出开口
66 内部空间(空间)
108 控制部
R 试剂
B 微生物(被检测物)
EX ATP提取液
具体实施方式
接下来,参照适当附图,详细说明本发明的实施方式的被检测物捕集 用具。在此,以捕集漂浮在空气中的微生物(细菌、真菌等)作为被检测 物的被检测物捕集用具为例进行说明,但本发明的被检测物捕集用具也可 以捕集金属或化学物质的微细粒子作为被检测物,被检测物并未限定为固 体,也可以是雾。
以下,说明安装有本实施方式的被检测物捕集用具的微生物计数装置 的整体结构及该微生物计数装置中的微生物的计数原理,然后说明本实施 方式的被检测物捕集用具及其使用方法。
(微生物计数装置的整体结构)
如图1所示,微生物计数装置10是以ATP法为基准对样品中包含的 微生物进行计数的装置,在筐体101内具备:搭载内部具有样品的被检测 物捕集用具1(参照图2)的搭载部102、功能液体罐105、热水供给部103、 吸引单元104、配置多个试剂R的试剂盒2、分注单元106、发光强度测 定单元107、控制部108。
此外需要说明的是,在图1中,为了便于作图,筐体101及试剂盒2 由双点划线表示,并省略了被检测物捕集用具1的记载。
如图2所示,搭载部102具有收容被检测物捕集用具1(壳体6)的 凹部102a,在该搭载部102中设有卡合环102b。而且,在凹部102a的周 围配置的、换言之形成凹部102a的铝材中埋设有后述的加热器102c(参 照图3)。此外,凹部102a的形成中也可以取代该铝材而使用其它高导热 性部件。
卡合环102b配置在凹部102a的开口缘。如后面详细说明所示,该卡 合环102b通过与被检测物捕集用具1的壳体6上设置的第一卡合爪62a 卡合,而将壳体6支承于搭载部102。此外,卡合环102b具有收纳壳体6 的第一卡合爪62a的平面形状的切口102d,并且在与形成有凹部102a的 装置主体10a之间以能够接受第一卡合爪62a的厚度形成间隙G。
也就是说,在将壳体6装嵌在凹部102a内时,第一卡合爪62a经由 切口102d进入到凹部102a内,通过使壳体6旋转而使第一卡合爪62a滑 入到间隙G中,从而壳体6与卡合环102b卡合。
就配置在此种凹部102a中的被检测物捕集用具1而言,如图3所示, 取下被检测物捕集用具1的盖体3,如后面详细说明所示,配置在壳体6 内的捕集盘4露出。
此外,在图3中,符号41是用于向壳体6的内部空间66内注入试剂 R(参照图1)或热水的贯通孔,符号5是配置在捕集盘4的里侧的载体, 符号64a是壳体6的排出开口,符号7设置在该排出开口64a的过滤器, 符号104a是与壳体6连接的吸引单元104(参照图1)的吸引头。此外, 内部空间66相当于权利要求书的范围所述的“空间”。
并且,如图3所示,在通过卡合环102b由搭载部102支承的被检测 物捕集用具1中,具有贯通孔41的捕集盘4配置在壳体6的上方,作为 样品的载体5在捕集盘4的里侧且配置在壳体6的内部空间66内。
另外,由搭载部102支承的被检测物捕集用具1在从凹部102a向上 方突出的壳体6部分上配置有捕集盘4。此外,加热器102c只要能够将包 围由搭载部102支承的被检测物捕集用具1的壳体6的凹部102a(铝材) 升温到规定温度即可,不管何种方法,但优选筒式加热器等。
图1所示的功能液体罐105积存杀菌蒸馏水等液体。该液体例如为了 后述的被检测物捕集用具1的载体5(参照图3)的过滤速度的提高或清 洗而添加在壳体6(参照图3)内,而且充满在后述的分注单元106的注 射器泵106c的配管系统中。此外,还可以在该功能液体罐105中积存缓 冲液。
热水供给部103对从功能液体罐105供给来的杀菌蒸馏水等进行升温 而供给。更详细来说,热水供给部103是将热水经由捕集盘4的贯通孔41 (参照图3)注入到壳体6的内部空间66(参照图3)中的部件,虽然未 图示,但能列举有例如通过蠕动泵将来自筒式加热器的热水经由通过柔性 管等形成的喷嘴喷出的部件。此外,该喷嘴通过具备沿水平及垂直方向移 动的机构,而根据需要经由捕集盘4的贯通孔41(参照图3)插入到壳体 6的内部空间66(参照图3)内。
图1所示的吸引单元104是通过对注入到壳体6的内部空间66(参照 图3)内的热水或后述的试剂R等进行吸引而将它们经由过滤器7(参照 图3)排出的部件。该吸引单元104例如能够由所述的吸引头104a(参照 图3)、经由规定的配管与该吸引头104a连接的未图示的吸引泵及废液罐 等构成。
此外,本实施方式中的吸引单元104还具备升降装置(未图示),该 升降装置为了使吸引头104a(参照图3)相对于由搭载部102支承的壳体 6(参照图3)能够连结及分离而使吸引头104a上下移动。
图1所示的试剂盒2是将ATP法所需的多个试剂R一起配置的部件。 试剂盒2配置在搭载部102附近的预定的位置。该试剂盒2以使接下来说 明的分注单元106的分注喷嘴106a能够以预定的顺序将试剂R分注到被 检测物捕集用具1的壳体6内及发光强度测定单元107的发光用管107a 内的方式将试剂R定位。即,如后所述,试剂R的位置(坐标)存储在控 制分注单元106的控制部108中。
此外,作为ATP法所需的试剂R,例如列举有将存在于捕集到的微生 物的细胞外的ATP消去的ATP消去试剂、提取微生物内在的ATP的ATP 提取试剂、以及使从微生物提取的ATP发光的ATP发光试剂等。
作为ATP消去试剂,例如,列举有ATP分解酶。
作为ATP提取试剂,例如,列举有杀藻胺、三氯醋酸、三羟甲基氨基 甲烷缓冲液等。
作为ATP发光试剂,例如,列举有荧光素酶·荧光素试剂。
此外,在试剂R中可以包含发光强度测定单元107的修正试剂、杀菌 的纯水等。
图1所示的分注单元106是将所述试剂R分注到被检测物捕集用具1 的壳体6内的部件。而且,分注单元106是将试剂R或壳体6(参照图3) 内的后述的ATP提取液分注到发光强度测定单元107的发光用管107a内 的部件。
该分注单元106由通过细管形成的分注喷嘴106a、使分注喷嘴106a 沿三轴方向移动的促动器106b、通过规定的柔性配管与分注喷嘴106a连 接的注射器泵106c、用于通过该注射器泵106c将杀菌蒸馏水等从功能液 体罐105向分注喷嘴106a供给的未图示的配管等构成。
作为图1所示的发光强度测定单元107,列举有具备接受从壳体6(参 照图3)内分注来的后述的ATP提取液而使ATP发光的发光用管107a和 具有检测该ATP的发光强度的光电子倍增管等的光检测部主体107b的部 件。
图1所示的控制部108整体性地统一控制微生物计数装置10,并且在 将被检测物捕集用具1(参照图3)搭载于搭载部102后,以接下来说明 的步骤控制热水供给部103、吸引单元104、分注单元106及发光强度测 定单元107。此种控制部108包含CPU、ROM、RAM、各种接口、电子 回路等而构成。
(微生物计数装置的动作及微生物的计数原理)
接下来,说明控制部108执行的步骤并说明该微生物计数装置10的 动作及微生物的计数原理。接下来参照的图4是示出微生物计数装置基于 控制部的指令进行动作的工序的流程图。
在图1所示的微生物计数装置10中,在将被检测物捕集用具1(参照 图3)搭载于搭载部102后,通过接通未图示的起动开关,而控制部108 执行以下的步骤。
如图4所示,控制部108以对加热器102c(参照图3)通电的方式向 规定的逆变器等输出指令而使加热器102c发热。即,控制部108通过加 热器102c使被检测物捕集用具1的载体5(参照图3)升温(步骤S201)。 其结果是,载体5由于溶胶化而从捕集盘4(参照图3)剥落到壳体6(参 照图3)内的底部。
接下来,控制部108向热水供给部103(参照图1)输出指令,而将 热水注入壳体6(参照图3)内(步骤S202)。其结果是,促进载体5(参 照图3)的溶胶化,并且通过热水将载体5稀释。
接下来,控制部108向吸引单元104(参照图1)输出指令,将吸引 头104a(参照图3)与壳体6(参照图3)连接并进行吸引,而对壳体6 (参照图3)的内容物进行过滤(步骤S203)。其结果是,由载体5捕集 到的微生物由过滤器7(参照图3)分离保持,并且稀释后的载体5被过 滤后而向壳体6外排出。
接下来,控制部108再次向热水供给部103输出指令,而将热水分注 到壳体6(参照图3)内(步骤S204)。然后,再次对该热水进行过滤(步 骤S205)。由此对壳体6内进行清洗,提高过滤器7的微生物回收率。
接下来,控制部108向分注单元106(参照图1)输出指令,将试剂 盒2的ATP消去试剂分注到壳体6(参照图3)内(步骤S206)。其结果 是,将存在于过滤器7上的微生物的细胞外的ATP消去。
接下来,控制部108向吸引单元104(参照图1)输出指令,对壳体6 (参照图3)的内容物进行过滤(步骤S207)。其结果是,微生物由过滤 器7(参照图3)分离保持,并且ATP消去试剂及热水被过滤后向壳体6 外排出。
向分注单元106(参照图1)输出指令,将试剂盒2的ATP发光试剂 分注到发光用管107a(参照图1)中(步骤S208)。
接下来,控制部108向发光强度测定单元107(参照图1)输出指令 而将光检测部主体107b(参照图1)接通(步骤S209)。
接下来,控制部108向分注单元106(参照图1)输出指令,将试剂 盒2的ATP提取液分注到壳体6(参照图3)内(步骤S210)。其结果是, 从由过滤器7保持的微生物提取ATP并在过滤器7上调制样品液。
步骤S208、S209的结果是,发光强度测定单元107的光检测部进行 发光用管107a中的ATP发光试剂的背景的测定。
接下来,控制部108向分注单元106(参照图1)输出指令,将壳体6 内的ATP提取液分注到进行了背景测定的发光用管107a中(步骤S211)。 其结果是,在发光用管107a内,由于ATP提取液与步骤S208中先分注的 ATP发光试剂的反应而发光。
接下来,控制部108对发光强度测定单元107(参照图1)的光检测 部主体107b(参照图1)检测ATP的发光而输出的信号进行数字处理,基 于单一光子计数法来测定发光强度(步骤S212)。然后,控制部108基于 表示预先存储的ATP量(amol)与发光强度(CPS)的关系的校准线,运 算分注到发光用管107a中的ATP提取液包含的ATP量(amol),并且基 于该ATP量(amol)以及步骤S210中调制出的样品液中的ATP提取液量, 作为载体5包含的微生物等量的ATP换算值而进行微生物的计数(步骤 S213)。
(被检测物捕集用具)
接下来,说明本实施方式的被检测物捕集用具1。在以下的说明中, 被检测物捕集用具1的上下方向以接下来参照的图5所示的上下方向为基 准。图5是本实施方式的被检测物捕集用具的立体图。图6是图5的被检 测物捕集用具的分解立体图,(a)是从斜上方向下看时的分解立体图,(b) 是从斜下方向上看时的分解立体图。图7是图5的VII-VII剖视图。
本实施方式的被检测物捕集用具1在捕集空气中的被检测物即微生物 时,配置在后述的冲击型的空气采样器50(参照图8)上使用,在对捕集 到的微生物进行计数时,搭载在所述的微生物计数装置10上使用。此外, 如后面详细说明所示,被检测物捕集用具1在微生物的捕集时和计数时, 上下(上下方向)颠倒使用。
如图5所示,被检测物捕集用具1的上部形成为大致圆筒形状,并且 其下部形成为朝向下方缩径的大致圆锥形状。并且,在后面详细进行说明, 该被检测物捕集用具1的上部与空气采样器50(参照图8)卡合而捕集微 生物,其下部与微生物计数装置10卡合而将捕集到的微生物供应于计数。
此外,在图5中,符号3是盖体,符号6是壳体,符号31是与后述 的空气采样器50(参照图8)卡合的第二卡合爪,符号62a是与微生物计 数装置10卡合的第一卡合爪。此外,空气采样器50相当于权利要求书的 范围所述的“捕集被检测物的捕集装置”,第二卡合爪31相当于权利要求 书的范围所述的“卡合部”。
如图6(a)及(b)所示,被检测物捕集用具1从其上方朝向下方以 盖体3、捕集盘4、载体5、壳体6、过滤器7及过滤器固定环8的顺序将 它们相互组装而构成。
盖体3是为了堵塞后述的壳体6的上部开口而配置的部件,呈上方开 口的有底的圆筒形状。并且,在盖体3的周面的上端缘,所述的第二卡合 爪31以向径向的外侧延伸的方式沿周向等间隔排列形成。此外,本实施 方式中的第二卡合爪31对应于后述的空气采样器50的卡合凹部53(参照 图8)的数目而形成三个。
在盖体3的周面的下端缘,第三卡合爪32以向径向的外侧延伸的方 式沿周向等间隔排列并形成三个。该第三卡合爪32嵌入到后述的壳体6 的第一L字槽61a中,与壳体6连结成使盖体3装卸自如。
如图6(b)所示,盖体3的底部的外表面由向下方突出的多个条平行 排列的凹凸面形成。该底部的外表面由于为凹凸面,因此在与接下来说明 的捕集盘4的上表面接触配置时,能减少接触面积。该凹凸面例如在所述 的微生物计数装置10的搭载部102(参照图2)配置被检测物捕集用具1, 从壳体6取下盖体3时,将捕集盘4留在壳体6侧,而容易与捕集盘4分 离。而且,如后所述,在通过空气采样器50(参照图8)捕集到微生物后, 根据需要进行保冷而将其输送到微生物的计数设施(例如,微生物计数装 置10(参照图1)的配置设施)时,偶尔在盖体3与捕集盘4之间存在结 露,但这种情况下,凹凸面也容易与捕集盘4分离。此外,该凹凸面并不 局限于所述条,也可以由多个突起形成,例如,能够由梨皮状、布纹等褶 皱形成。
另外,如图6(b)所示,在盖体3的底部的外表面上形成有向下方突 出的圆柱状的突起33。该突起33的外径比接下来说明的捕集盘4的贯通 孔41的内径略小。而且,该突起33的高度与该贯通孔41的长度相等。
如图6(a)及(b)所示,捕集盘4呈圆盘形状。在该捕集盘4的中 央部形成有上下贯通该捕集盘4的贯通孔41。
如图6(a)所示,该捕集盘4的上表面以能够与所述的盖体3的底部 的外表面接触的方式成为平坦面。
另外,在捕集盘4的下表面上,绕贯通孔41以能够收容接下来说明 的环状的载体5的方式竖立设置有内外双层的环状肋42a、42b。
此外,捕集盘4的外径设定在后述的壳体6的下侧圆筒部62的内径 以上且上侧圆筒部61的内径以下的范围内,但优选设定为与上侧圆筒部 61的内径大致相同。而且,图6(b)所示的捕集盘4的外侧的环状肋42b 的外径设定为后述的下侧圆筒部62的内径以下,但优选设定为与下侧圆 筒部62的内径大致相同。
如后所述,载体5是配置在空气采样器50(参照图8),接受空气采 样器50吸引空气时的空气流,并且捕集与该空气相伴的微生物的部件。
该载体5由通过从常温进行升温而从凝胶相变成溶胶的材料形成。作 为该载体5的材料,优选在30℃以上相变成溶胶的材料,更优选在37~ 40℃液化的材料。其中,优选明胶、明胶与甘油的混合物、及N-丙烯酰基 甘氨酰胺与N-甲基丙烯酰基-N′-生物素基亚丙基二胺的10∶1的共聚物。
如上所述,载体5呈环形状,如图6(b)所示,优选与捕集盘4的环 状肋42a、42b彼此之间形成的空间为相同形状。
此外,载体5通过在环状肋42a、42b彼此之间的空间中涂敷或填充 所述的材料而形成,但也可以将独立的环形状的部件嵌入配置在所述的空 间中。
如图6(a)及(b)所示,具有与所述盖体3的外径大致相同内径的 上侧圆筒部61、具有比该上侧圆筒部61的内径更缩径的内径的下侧圆筒 部62、具有从该下侧圆筒部62的内径逐渐缩径的内径的倒圆锥形状的锥 部(ロト部)64、及设置在该锥部64的最下部形成的排出开口64a的出 口周围的过滤器安装部65从壳体6的上方朝下方以该顺序一体构成壳体6。
如上所述,在上侧圆筒部61的内周面上,供盖体3的第三卡合爪32 嵌入的第一L字槽61a沿内周在与第三卡合爪32对应的位置上形成三处。
下侧圆筒部62经由搁板部63与上侧圆筒部61连接。
在该下侧圆筒部62的外周面上形成有与所述的微生物计数装置10的 卡合环102b(参照图2)卡合的第一卡合爪62a。该第一卡合爪62a以向 下侧圆筒部62的径向的外侧延伸的方式沿周向等间隔排列形成。此外, 本实施方式中的第一卡合爪62a形成四个。
锥部64由于内径朝下方逐渐缩径,因此内容物容易朝最下部的排出 开口64a(参照图6(b))流下。
过滤器安装部65对应于以堵塞排出开口64a(参照图6(b))的出口 的方式配置的过滤器7的形状,一体形成有形成薄的圆盘状的空间的过滤 器收容部65a(参照图6(b))和支承过滤器固定环8的圆筒形状的环支 承部65b。
在环支承部65b的内周面上形成有供后述的形成在过滤器固定环8上 的第四卡合爪82a嵌入的第二L字槽65c。该第二L字槽65c沿周向等间 隔地并列形成四个。
本实施方式的过滤器7是膜滤器,如上所述,以堵塞排出开口64a的 出口的方式,换言之,配置在排出开口64a的外侧并从排出开口64a侧依 次重叠有亲水性过滤器7a和疎水性过滤器7b。
亲水性过滤器7a及疎水性过滤器7b可以使用市售品。作为亲水性过 滤器7a,列举有例如MF-Millipore(日本Millipore社制),Durapore(日 本Millipore社制),Isopore(日本Millipore社制)等。
作为疎水性过滤器7b,列举有例如Mytex(日本Millipore社制),聚 丙烯预滤器(日本Millipore社制)等。
所述过滤器7当然可以使用比排出开口64a的内径大的外径的部件。
如图6(a)及(b)所示,过滤器固定环8是在壳体6(锥部64)上 固定过滤器7的部件,在经由过滤器7与锥部64的排出开口64a连通的 位置上具有贯通孔81。
该过滤器固定环8具备:与所述的过滤器安装部65的环支承部65b 的内径大致相同外形的环主体82;形成在该环主体82的下方,比环主体 82的外径大的直径的凸缘部83。
另外,如图6(a)所示,过滤器固定环8还具备:一体形成在环主体 82的上表面,嵌入到壳体6的过滤器收容部65a的内侧的嵌入部84;竖 立设置在该嵌入部84中的贯通孔81的开口周围的环状肋85。此外,过滤 器7被该环状肋85按压到排出开口64a(参照图6(b))的出口周围。
并且,在环主体82的周面上,第四卡合爪82a以向径向的外侧延伸 的方式沿周向等间隔地形成四个。该第四卡合爪82a形成在所述环支承部 65b的与第二L字槽65c相对应的位置,通过嵌入到第二L字槽65c,而 将过滤器固定环8与壳体6连结成装卸自如。
以上,如图7所示,被检测物捕集用具1在壳体6的所述搁板部63 的上方载置捕集盘4,壳体6和盖体3经由该捕集盘4通过所述第一L字 槽61a及第二卡合爪31连结在一起。此时,捕集盘4的贯通孔41由盖体 3的突起33密封。
此外,壳体6和盖体3通过使壳体6和盖体3相对旋转而从第一L字 槽61a拔出第二卡合爪31,从而能够解除该连结。
并且,过滤器7以堵塞锥部64的排出开口64a的出口的方式配置在 过滤器收容部65a,并且过滤器安装部65及过滤器固定环8通过所述第二 L字槽65c及第四卡合爪82a连结在一起,锥部64的排出开口64a和过滤 器固定环8的贯通孔81经由过滤器7相互连通。此时,如上所述,过滤 器7被过滤器固定环8的环状肋85按压到排出开口64a的出口周围而被 牢固地固定。
在此种被检测物捕集用具1中,向壳体6内分注所述的试剂R(参照 图1)等时,如图3所示,贯通孔41以与接收试剂等的内部空间66连通 的方式进行开口,但在分注试剂R之前,盖体3的突起33将贯通孔41密 封。而且,锥部64的排出开口64a的出口由分离微生物的过滤器7堵塞。 其结果是,内部空间66成为至少将微生物与外部环境隔开的空间(密闭 空间)。并且,由捕集盘4保持的载体5配置在该密闭空间内。
以上的被检测物捕集用具1能够由能够成形过滤器7以外部件的树脂 形成。其中优选聚丙烯。
(被检测物捕集用具的使用方法)
接下来,说明本实施方式的被检测物捕集用具1的使用方法。
在此,首先说明利用被检测物捕集用具1捕集微生物的方法。接下来 参照的图8是用于说明利用本发明的被检测物捕集用具捕集微生物的方法 的立体图。
如图8所示,提供给微生物的捕集时的被检测物捕集用具1使用将保 持载体5的捕集盘4载置在盖体3上的部件。即,在图7所示的被检测物 捕集用具1中,使用上下颠倒且在盖体3侧保留捕集盘4的状态下取下壳 体6及过滤器固定环8的部件。此外,壳体6从盖体3的取下如接下来说 明所示,在空气采样器50的底座52上定位并配置盖体3后,如上所述, 通过使壳体6和盖体3相对旋转而从第一L字槽61a(参照图6(a))拔 出第二卡合爪31(参照图6(a))来解除该连结。
该被检测物捕集用具1载置在空气采样器50的主体部51的上方形成 的俯视呈圆形的底座52上。此外,如上所述,在底座52上形成有接受盖 体3的第二卡合爪31的卡合凹部53,被检测物捕集用具1被定位在底座 52的中央部。
此外,在图8中,符号54是主体部51的吸引口,符号55是空气采 样器50的喷嘴头。
即,在捕集该微生物的方法中,如图8所示,一体取下壳体6及过滤 器固定环8,露出了载体5的被检测物捕集用具1载置在底座52上,并以 覆盖该底座52的方式配置喷嘴头55。此处的使载体5露出的工序相当于 权利要求书的范围的“使载体露出的第一工序”。
并且,驱动主体部51内配置的未图示的风扇而从吸引口54吸引空气 时,从喷嘴头55内设置的多个微细喷嘴(未图示)向载体5喷射空气流。 其结果是,与向载体5喷射的空气相伴的微生物被载体5捕集。即,使载 体5朝向上方进行微生物的捕集操作。
此时,如图8所示,由于通过盖体3的突起33密封捕集盘4的贯通 孔41(参照图7),因此捕集盘4的载体5侧的面成为齐面,而抑制接受 的空气流的紊乱。其结果是,载体5能够高效地捕集微生物。
空气采样器50吸引预定的空气量时,该被检测物捕集用具1进行的 微生物的捕集工序结束。该捕集工序相当于权利要求书的范围的“进行被 检测物的捕集操作的第二工序”。
该捕集工序结束时,再次将壳体6及过滤器固定环8一体安装于盖体 3,而再次返回图7所示的被检测物捕集用具1的状态。该工序相当于权 利要求书的范围的“以覆盖所述载体的方式相对于所述捕集盘再次配置所 述壳体的第三工序”。
接下来,说明对捕集到的微生物进行计数的微生物计数装置10内的 被检测物捕集用具1的使用方法。
如上所述,所述的捕集工序结束而再次返回图7所示的状态的被检测 物捕集用具1以原封不动的状态被用户输送到微生物计数装置10内(参 照图2)。
接下来,如上所述,用户从壳体6取下配置在搭载部102上的被检测 物捕集用具1的盖体3(参照图3)。
接下来参照的图9(a-1)至(a-4)是用于说明微生物计数装置内 的被检测物捕集用具的使用方法的被检测物捕集用具的剖视图,图9(b -1)至(b-4)是放大示出与图9(a-1)至(a-4)相对应的情况下的 过滤器附近的情况的示意图。
此外,在图9(b-1)至(b-4)中,符号B所示的微生物实际上是 微米级的大小,ATP实际上是分子级的大小,图9(b-1)至(b-4)未 示出它们的相对的大小。
在所述的步骤S201(参照图4)中载体5升温时,如图9(a-1)所 示,由捕集盘4保持的载体5产生溶胶化而沿壳体6的锥部64剥落。此 时,如图9(b-1)所示,由空气采样器50(参照图8)捕集到的微生物 B与载体5一起滞留在过滤器7上。
接下来,在所述的步骤S202(参照图4)中向壳体6内注入热水HW 时,进一步促进载体5的溶胶化,并且由热水稀释。此时,如图9(a-2) 所示,由于过滤器7的下侧由疎水性过滤器7b构成,因此稀释并包含载 体5的热水HW滞留在壳体6内。然后,微生物B与稀释并包含载体5 的热水HW一起滞留在过滤器7上。此外,图9(a-2)中,符号4是捕 集盘,符号64是锥部(以下的图中,该符号相同)。
接下来,在所述的步骤S203(参照图4)中,对壳体6内的内容物进 行过滤时,壳体6内的稀释并包含载体5的热水HW(参照图9(a-2)) 如图9(a-3)所示排出。此时,如图9(b-3)所示,稀释并包含载体5 的热水HW中的微生物B由过滤器7分离而保持。
此外,如图9(b-3)所示,本实施方式中的过滤器7为了成为亲水 性过滤器7a和疎水性过滤器7b的双层结构,而与以往的ATP法中使用的 仅由亲水性过滤器的过滤器形成的结构不同,在疎水性过滤器7b的作用 下,只要不进行吸引或加压过滤,就能够在上部保持液体,因此能够在过 滤器7上进行ATP提取等试剂反应处理。
然后,在所述的步骤S206(参照图4)中,将ATP消去试剂分注到壳 体6内后,在所述的步骤S210(参照图4)中,将ATP提取试剂分注到壳 体6内。
所述试剂的分注工序相当于权利要求书的范围的“将所述试剂注入到 所述壳体内的第四工序”。
然后,在所述的步骤S210(参照图4)中,如图9(a-4)所示,ATP 提取液EX滞留在被注入有ATP提取试剂的壳体6内。此时,如图9(b -4)所示,在ATP提取液EX中存在有与微生物B的数量相对应的量的 ATP。
然后,在所述的步骤S211(参照图4)中,通过将图9(b-4)所示 的ATP提取液EX分注到发光用管107a(参照图1),而被检测物捕集用 具1的使用方法的一连串的工序结束。
根据以上的被检测物捕集用具1及其使用方法,使载体5朝向上方进 行微生物的捕集操作后,使载体5朝向下方并经由贯通孔41使试剂与微 生物接触。
因此,根据该被检测物捕集用具1及其使用方法,通过使载体5朝向 上方,容易进行微生物的捕集,并且在使试剂与微生物接触时,即在检测 微生物时,通过使载体5朝向下方,而捕集盘4作为载体5的盖发挥作用。 其结果是,能够防止例如由于从上方落下的尘埃或细菌等而载体5被污染 的情况。
另外,在将被检测物捕集用具1安装于空气采样器50之前及利用空 气采样器50捕集到微生物后,在将该检测物捕集用具1输送到微生物计 数装置10内之前的期间,由于载体5配置在壳体6内的密闭空间内,因 此与以往的载体露出的捕集用具(例如,参照专利文献1)不同,能够防 止载体5被成为微生物的计数的干扰主要原因的物质污染的情况。
其结果是,根据该被检测物捕集用具1及其使用方法,能够更准确地 对在检查场所捕集到的微生物进行计数。
根据以上的被检测物捕集用具1及其使用方法,在将被检测物捕集用 具1安装于空气采样器50之前及利用空气采样器50捕集到微生物之后, 在将该检测物捕集用具1输送到微生物计数装置10内之前期间,由于载 体5配置在壳体6内的密闭空间内,因此与以往的载体露出的捕集用具(例 如,参照专利文献1)不同,能够防止载体5被成为微生物的计数的干扰 主要原因的物质污染的情况。
其结果是,根据该被检测物捕集用具1及其使用方法,能够更准确地 对在检查场所捕集到的微生物进行计数。
另外,根据被检测物捕集用具1及其使用方法,使用微生物计数装置 10而使试剂R与微生物接触时,由于经由捕集盘4的贯通孔41将试剂R 分注到壳体6内,因此壳体6内与其外部的连通被限制成必要最小限度。 其结果是,能够防止壳体6内被成为微生物的计数的干扰主要原因的物质 污染的情况。
另外,根据被检测物捕集用具1及其使用方法,由于具有排出壳体6 的内容物的排出开口64a,且在该排出开口64a配置有分离并保持微生物 的过滤器,因此能够使微生物与试剂R在壳体6内接触。其结果是,与以 往的捕集用具(例如,参照专利文献1)那样使试剂与从捕集用具取出的 微生物接触而对微生物进行计数的情况不同,微生物的计数的干扰主要原 因大幅度地减少。
另外,根据被检测物捕集用具1及其使用方法,由于过滤器7成为亲 水性过滤器7a和疎水性过滤器7b的双层结构,因此由以往的ATP法中使 用的仅亲水性过滤器的过滤器形成,且能够在过滤器7上实施对回收的微 生物的试剂反应处理。
另外,根据被检测物捕集用具1及其使用方法,盖体3在壳体6的相 反侧具备与空气采样器50卡合的第二卡合爪31,如图5所示,在盖体3 与壳体6成为一体的状态下用手指把持壳体6侧,如图8所示,在空气采 样器50上配置盖体3后,从盖体3取下壳体6,从而能够使载体5露出。 即,使载体5露出时,能避免手指触碰到保持载体5的捕集盘4的情况。 因此,根据该被检测物捕集用具1及其使用方法,能够更可靠地防止载体 5被成为微生物的计数的干扰主要原因的物质污染的情况。
另外,根据被检测物捕集用具1及其使用方法,配置于搭载部102而 通过用户从壳体6取下盖体3时,捕集盘4上下(上下方向)颠倒而载体 5朝向内部空间66侧,因此能够更可靠地防止载体5的污染。此外,该作 用效果能够与过滤器7的例如所述的亲水性过滤器7a和疎水性过滤器7b 等的种类或其数量无关地发挥作用。
以上,说明了本发明的实施方式,但本发明并未限定为所述实施方式, 而能够以各种方式进行实施。
在所述实施方式中,设想到利用微生物计数装置10对由被检测物捕 集用具1捕集到的微生物进行计数的情况,但本发明也可以不装入微生物 计数装置10,利用手工作业将试剂R分注到壳体内而通过ATP法对微生 物进行计数。
本发明可以适用于枯草菌等的芽胞形成菌,这种情况下,所述的试剂 中可以包含氨基酸、糖等营养形细胞变换试剂。
另外,在所述实施方式中,通过ATP法进行了微生物的计数,但本发 明也可以基于对从微生物提取的DNA、RNA、NAD等生物体内物质照射 激发光而产生的荧光来进行微生物的计数。
另外,利用被检测物捕集用具1捕集革兰氏阴性杆菌而对其进行计数 时,也可以以其细胞膜中包含的内毒素为指标,基于使鲎与内毒素反应时 的发光强度而对细菌数进行计数。
另外,也可以从过滤器7回收、培养微生物而进行计数。