吡唑类衍生物 【发明领域】
本发明涉及某些抑制p38 MAP激酶的吡唑衍生物，含有它们的药物组合物、其应用方法和制备这些化合物的方法。背景信息和相关内容
TNF和IL-1业已在许多慢性炎症和自身免疫性疾病相关的病理过程中成为核心参与者。IL-1涉及介导或恶化疾病，如类风湿性关节炎((参见，Arend，W.P.Arthritis & Rheumatism 38(2)：151-160，(1995))、骨关节炎、骨吸收、中毒性休克综合症、结核病、动脉粥样硬化、糖尿病、何杰金氏病、(参见，Benharroch，D.等.Euro.Cytokine Network7(1)：51-57)和阿尔茨海默病。已经发现过度或失调的TNF生产参与介导或恶化疾病，如类风湿性关节炎((参见，Maini，R.N.等APMIS.105(4)：257-263，(1997)；Feldmann，M.，J.of the Royal College of Physicians of London30(6)：560-570，(1996)；Lorenz，H.M.等J.of Immunology 156(4)：1646-1653，(1996))、骨关节炎、脊椎炎、脓毒症、脓毒性休克((参见，Abraham，E.等JAMA.277(19)：1531-1538，(1997)、成人呼吸窘迫综合征、哮喘((参见，Shah，A.等.Clin.& Exp.Allergy 1038-1044，(1995)和Lassalle，P.等Clin.& Exp.Immunol.94(1)：105-110，(1993))、骨吸收病、热病((参见，Cooper，A.L.等Am.J.of Physiology 267(6 Pt.2)：1431-1436))、脑脊髓炎、脱髓鞘作用((参见，Klindert，W.E.等J.ofNeuroimmunol.72(2)：163-168，(1997))和牙周疾病。
IL-1和TNF受体拮抗剂的临床试验显示，阻断这些细胞因子通过其受体发出信号的能力可以在人体中明显改善炎性疾病。所以，这些炎症细胞因子的调控被认为是一种最有效的阻断慢性炎症并具有阳性治疗效果的策略。p38 MAP激酶也表现出在TNF和IL-1的翻译控制中起重要作用，而且参与这些分子的生物化学信号((参见，Lee，J.C.等.Nature.372(6508)：739-46，(1994))。结合p38 MAP的化合物可以有效抑制骨吸收、炎症以及其他免疫和基于炎症的病变。p38 MAP激酶的特征及其在TNF和IL-1的生物合成中的核心作用使这种激酶在由这些细胞因子所介导疾病的治疗中引人注目。
所以，人们希望提供p38 MAP激酶抑制剂，并且因而得到一种对抗促炎细胞因子如TNF和IL-1介导的疾病的方法。本发明满足了这个及其相关需要。发明概述
在第一个方面中，本发明提供选自式(I)表示的化合物组的化合物：其中：
R1是氢或酰基；
R2是氢或烷基；
A是芳基或杂芳基环；
B是芳基或杂芳基环；
R3选自：
(a)氨基、烷基氨基或二烷基氨基；
(b)酰基氨基；
(c)任选取代的杂环基；
(d)任选取代的芳基或杂芳基；
(e)含杂原子烷基；
(f)含杂原子烯基；
(g)含杂原子炔基；
(h)含杂原子烷氧基；
(i)含杂原子烷基氨基；
(j)任选取代的杂环基烷基；
(k)任选取代地杂环基烯基；
(l)任选取代的杂环基炔基；
(m)任选取代的环烷氧基、环烷基烷氧基、杂环基烷氧基或杂环氧基；
(n)任选取代的杂环基烷基氨基；
(o)任选取代的杂环基烷基羰基；
(p)含杂原子烷基羰基；
(q)任选取代的环烷基氨基；
(r)-NHSO2R6，其中R6是烷基、含杂原子烷基或任选取代的杂环基
烷基；
(s)-NHSO2NR7R8，其中R7和R8彼此独立地是氢、烷基或含杂原子
烷基；
(t)-Y-(烯基)-R9，其中：
Y是单键、-O-、-NH-或-S(O)n-(其中n是0-2的整数)；和R9是氰
基、任选取代杂芳基、-COOH、-COR10、-COOR11、
-CONR12R13、-SO2R14、-SO2NR15R16、-NHSO2R17或
-NHSO2NR18R19，其中R10是烷基或任选取代的杂环，R11是烷
基，并且R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18和R19彼此独立地是
氢、烷基或含杂原子烷基；
(u)-C(＝NR20)(NR21R22)，其中R20、R21和R22独立地是氢、烷基或羟
基；或R20和R21一起为-(CH2)n-，其中n是2或3，且R22是氢或烷
基；(v)-NHC(X)NR23R24，其中X是-O-或-S-，和R23和R24彼此独立地是 氢、烷基或含杂原子烷基；(w)-CONR25R26，其中R25和R26独立地表示氢、烷基、含杂原子烷 基或任选取代杂环基烷基，或R25和R26与它们相连的氮一起构成 任选取代的杂环基环；(x)-S(O)nR27，其中n是0至2的整数，和R27是烷基、含杂原子烷 基、任选取代环烷基、任选取代的杂环基烷基；或-NR28R29，其 中R28和R29彼此独立地是氢、烷基或含杂原子烷基；(y)环烷基烷基、环烷基炔基和环烷基炔基，它们均任选地被烷 基、卤素、羟基或氨基取代；(z)芳基氨基亚烷基或杂芳基氨基亚烷基；(aa)Z-亚烷基-NR30R31或Z-亚烷基-OR32，其中Z是-NH-、-N(烷基)-
或-O-，并且R30、R31和R32彼此独立地是氢、烷基或含杂原子
烷基；(bb)-OC(O)-亚烷基-CO2H或-OC(O)-NR′R″(其中R′和R″独立地是氢
或烷基)(cc)杂芳基亚烯基或杂芳基亚炔基；(dd)X-(亚烷基)CH[(CR′R″)mOR40][(CR′R″)nOR40]，
其中：
X是-O-、-NH-、-NR-(其中R是烷基)，或-S(O)p-(其中p是0至2的整数)；
R40是酰基；C(O)OR41(其中R41是氢、烷基或环烷基)；
C(O)ONR41R42(其中R41定义如上且R42是氢或烷基)；或
C(O)NR41R42(其中R41和R42定义如上)；
R′和R″独立地是氢或烷基；而且m和n独立地是0至3的整数，条
件是m和n不同时为0；(ee)X-(亚烷基)-CH(OH)CH2NHR50，其中：
X是-O-、-NH-、-NR-(其中R是烷基)，或-S(O)n-(其中n是0至2
的整数)；和R50是C(O)OR51和C(O)NR51R52(其中R51是氢、烷基
或环烷基且R52是氢或烷基)；和(ff)X-(亚烷基)-CH(NR50)-CH2OH，其中：
X是-O-、-NH-、-NR-(其中R是烷基)，或-S(O)n-(其中n是0至2
的整数)；和R50是C(O)OR51和C(O)NR50R52(其中R51是氢、烷基
或环烷基且R52是氢或烷基)；R4选自： (a)氢；(b)卤素；(c)烷基；(d)烷氧基；和(e)羟基；R5选自： (a)氢； (b)卤素； (c)烷基； (d)卤代烷基； (e)硫代烷基； (f)羟基； (g)氨基； (h)烷基氨基； (i)二烷基氨基； (j)含杂原子烷基； (k)任选取代杂环； (l)任选取代杂环基烷基； (m)任选取代杂环基烷氧基； (n)烷基磺酰基； (o)氨基磺酰基、一烷基氨基磺酰基或二烷基氨基磺酰基； (p)含杂原子烷氧基；和 (q)羧基；R6选自： (a)氢；(b)卤代；(c)烷基；和(d)烷氧基；和
其前药、各种异构体、异构体的混合物和药学可接受的盐。
在第二方面中，本发明提供含有治疗有效量的式(I)化合物或其药学可接受的盐以及药学可接受的赋形剂的药物组合物。
在第三方面中，本发明提供一种治疗哺乳动物中通过给药p38 MAP激酶抑制剂可治疗的疾病的方法，该方法包括施用治疗有效量的式(I)化合物或其药学可接受盐。
在第四方面中，本发明提供制备式(I)的化合物的方法。发明详述定义
除非另外指出，说明书和权利要求书中所用的下列术语具有下面的含义：
“烷基”是指1-6个碳原子的直链饱和单价烃基或3-6个碳原子的支链饱和单价烃基，例如甲基、乙基、丙基、2-丙基、戊基等。
″亚烷基″是指1-6个碳原子的直链饱和二价烃基或3-6个碳原子的支链饱和二价烃基，例如亚甲基、亚乙基、亚丙基、2-甲基亚丙基、亚戊基等。
″烯基″是指2-6个碳原子的直链单价烃基或3-6个碳原子的支链单价烃基，它们含有至少一个双键，例如乙烯基、丙烯基等。
“亚烯基”是指2-6个碳原子的直链单价烃基或3-6个碳原子的支链二价烃基，它们含有至少一个双键，例如亚乙烯基、亚丙烯基等。
″炔基″是指2-6个碳原子的直链单价烃基或3-6个碳原子的支链二价烃基，它们含有至少一个叁键，如乙炔基、丙炔基等。
″亚炔基″是指2-6个碳原子的直链二价烃基或3-6个碳原子的支链单价烃基，它们含有至少一个叁键，例如亚乙炔基、亚丙炔基等。
″烷氧基″是指基团-OR，其中R是定义如上的烷基，例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、2-丙氧基等。
″酰基″是指基团-C(O)R，其中R是氢、烷基、环烷基或卤代烷基，例如乙酰基、三氟乙酰基等。
″酰基氨基″是指基团-NRC(O)R′，其中R是氢或烷基，并且R′是烷基、含杂原子烷基或任选取代杂环基烷基，例如乙酰基氨基、2-氨基-2-甲基丙酰胺等。
″卤代″是指氟、氯、溴或碘，优选氟和氯。
″卤代烷基″是指被一个或多个相同或不同的卤素原子取代的烷基，例如-CH2CI、-CF3、-CH2CF3、-CH2CCl3等。
″芳基″是指6-10个环原子的单环或双环烃基，例如苯基、1-萘基、2-萘基等。芳基环可以任选地与5-、6-或7-元单环饱和环稠合，所述的单环饱和环任选地含有1或2个独立选自氧、氮或硫的杂原子，其余的环原子是C，其中1或2个碳原子任选地被羰基替代。典型的具有稠合环芳基包括但不限于2，3-二氢苯并[1，4]二噁烷、色满、异色满、2，3-二氢苯并呋喃、1，3-二氢异苯并呋喃、苯并[1，3]二氧杂环戊烯、1，2，3，4-四氢异喹啉、1，2，3，4-四氢喹啉、2，3-二氢-1H-吲哚、2，3-二氢-1H-异吲哚、苯并咪唑-2-酮、3H-苯并噁唑-2-酮等。
″杂芳基″是指含有1、2或3个环杂原子的具有5至10个环原子的单价单环或双环芳族基团，所述的杂原子选自N、O或S，其余的环原子是C。该术语也包括那些环内杂原子业已被氧化或季化的基团，例如形成N-氧化物或季铵盐。典型实例包括但不限于：噻吩基、苯并噻吩基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、喹啉基、喹喔啉基、咪唑基、呋喃基、苯并呋喃基、噻唑基、异噁唑基、苯并异噁唑基、苯并咪唑基、三唑基、吡唑基、吡咯基、吲哚基、2-吡啶酮基、4-吡啶酮基、N-烷基-2-吡啶酮基、吡嗪酮基、哒嗪酮基、嘧啶酮基、噁唑酮基，和它们的相应N-氧化物，(例如吡啶基N-氧化物、喹啉基N-氧化物)、其季铵盐等。
″环烷基″是指具有3-8个环原子的环状非芳族烃基，其中一个或两个C原子任选地被羰基替代。典型实例包括但不限于：环丙基、环戊基、环己基等。
″杂环″或″杂环基″是指具有3-8个环原子的环状非芳族基团，其中1、2或3个环原子是选自N、O或S(O)n(其中n是0至2的整数)的杂原子，其余的环原子是C，其中1或2个C原子任选地被羰基替代。该术语也包括那些环氮原子业已被氧化或季铵化的基团，例如形成N-氧化物或季铵盐。典型实例包括但不限于四氢吡喃基、四氢呋喃基、四氢苯硫基、1-哌啶基、4-吗啉基、1-哌嗪基、1-吡咯烷基、环氧乙基、二噁烷基、1，3-二氧戊环基、2、2-二甲基-1，3-二氧戊环基(dioxalanyl)、环丁砜基、2-噁唑烷酮基(oxazolidonyl)、2-咪唑啉酮基、S，S-二氧代-硫代吗啉等。
″杂环基氨基″是指4-8个环原子的饱和单价环状基团，其中至少一个环原子是N并且任选地含有一个选自N或O的附加环原子，其余的环原子是C。该术语包括但不限于，例如1-吡咯烷基、1-哌啶基、4-吗啉基、1-哌嗪基等。
″任选取代芳基、杂芳基、环烷基或杂环基″是指定义如上的芳基、杂芳基、环烷基或杂环基环，它们独立地被1或2个选自下列的取代基任选取代：烷基、苯基、苄基、卤代烷基、含杂原子烷基、卤素、氰基、环烷基、酰基、-OR(其中R是氢或烷基)、-NRR′(其中R和R′独立地选自氢、烷基或酰基)、-NHCOR(其中R是烷基)、-NRS(O)nR′(其中R是氢或烷基，n是0至2的整数和R′是氢、烷基或含杂原子烷基)、-NRS(O)nNR′R″(其中R是氢或烷基，n是0至2的整数并且R′和R″独立地是氢、烷基或含杂原子烷基)，-S(O)nR(其中n是0至2的整数和R是氢、烷基或含杂原子烷基)、-S(O)″NRR′(其中n是0至2的整数并且R和R′独立地是氢、烷基或含杂原子烷基)、-COOR、-(亚烷基)COOR(其中R是氢或烷基)、-CONR′R″或-(亚烷基)CONR′R″(其中R′和R″独立地是氢或烷基)。
″含杂原子烷基″是指带有1、2或3个选自-NRaRb、-Rc的取代基的定义如上的烷基，其中Ra、Rb和Rc彼此独立地是氢、烷基、环烷基或酰基，或Ra和Rb一个构成杂环氨基。典型实例包括但不限于羟甲基、乙酰氧基甲基、3-羟丙基、1，2-二羟基-乙基、2-甲氧基乙基、2-氨基乙基、2-二甲基氨基乙基、2-乙酰基氨基乙基、3(吡咯烷-1-基)乙基等。
″含杂原子烯基″是指带有1、2或3个选自-NRaRb、-Rc或-S(O)nRd的取代基的定义如上的烯基，其中Ra、Rb和Rc彼此独立地是氢或烷基，并且Rd是烷基或-NRR′(其中R和R′彼此独立地是氢或烷基)。典型实例包括但不限于：3-羟基-1-丙烯基、3-氨基丙-1-烯基、2-氨基磺酰基乙烯基、2-甲基磺酰基乙烯基等。
″含杂原子炔基″是指带有1或2个选自-NRaRb、-ORc、-S(O)nRd或-S(O)nNRR′(其中R和R′彼此独立地是氢或烷基)的取代基的炔基，其中Ra、Rb和Rc彼此独立地是氢或烷基，并且Rd是烷基且n是0-2个整数。典型实例包括但不限于：3-羟基-1-丙炔基、3-二甲基氨基丙-1-炔基等。
″含杂原子烷氧基″是指基团-OR，其中R是定义如上的含杂原子烷基，例如2-羟基乙氧基、3-羟基丙氧基、2，3-二羟基丙氧基、2，3-二羟基-1-甲基丙氧基、2-氨基乙氧基等。
″含杂原子烷基氨基″是指基团-NRaRb，其中Ra是氢或烷基，和Rb是定义如上的含杂原子烷基，例如2-羟基乙基氨基、3-二甲基氨基丙基氨基等。
″任选取代的杂环基烷基″是指基团-RaRb，其中Ra是亚烷基，并且R是定义如上的任选取代杂环基，例如2-(吗啉-4-基)乙基、3-(哌啶-1-基)-2-甲基丙基等。
″任选取代杂环基烯基″是指基团-RaRb，其中Ra是亚烯基且Rb是定义如上的任选取代杂环基，例如3-(吗啉-4-基)丙-1烯基、3-(哌啶-1-基)丙-1-烯基、3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙-1-烯基等。
″任选取代杂环基炔基″是指基团-RaRb，其中Ra是炔基且Rb是定义如上的任选取代杂环基，例如3-(吗啉-4-基)丙-1-炔基、3-(哌啶-1-基)-1-炔基等。
″任选取代环烷氧基″是指基团-OR，其中R是定义如上的任选取代环烷基，例如环戊氧基、环己氧基等。
″任选取代杂环氧基″是指基团-OR，其中R是定义如上的任选取代杂环基，例如哌啶-2-基氧基、吡咯烷-3-基氧基、哌嗪-2-基氧基等。
″任选取代杂环基烷氧基″是指基团-OR，其中R是定义如上的任选取代杂环基烷基，例如2-(吗啉-4-基)-乙氧基、3-(哌嗪-1-基)丙氧基、2-(2-氧代吡咯烷-1-基)乙氧基等。
″任选取代环烷基氨基″是指基团-NRaRb，其中Ra是氢或烷基且Rb是定义如上的任选取代环烷基，例如环丙基氨基、环己基氨基、3，4-二羟基环戊基氨基等。
″任选取代的杂环基烷基氨基″是指基团-NRaRb其中Ra是氢或烷基，且Rb是定义如上的任选取代杂环基烷基，例如2-(吡咯烷-2-基)乙基氨基、 3-(哌啶-1-基)丙基氨基等。
″任选取代杂芳烷氧基″是指基团-O-Ra，其中Ra是杂芳烷基，例如2-(吡啶-3-基)乙氧基、2-[3(2H)-哒酮-1-基]乙氧基等。
″任选″或″任选地″是指随后描述的事件或环境可以存在但不一定存在，而且这种描述包括该事件或环境存在的情况以及其中该事件或环境不存在的情况。譬如，″任选被烷基一取代或二取代的芳基″是指该烷基可能存在但不一定存在，而且这种描述包括芳基被烷基一取代或二取代的情形以及其中该芳基没有被烷基取代的情形。
″氨基保护基″是指那些保护氮原子在合成过程中不发生不需要反应的有机基团，例如苄基、苄氧基羰基(CBZ)、叔丁氧基羰基(Boc)、三氟乙酰基等。
本发明的化合物可以具有一个或多个不对称中心；此类化合物可以制备成(R)-或(S)立体异构体或其混合物。除非另外指出，说明书和权利要求书中具体化合物的描述或命名包括两种对映异构体及其混合物、外消旋物等等。所属技术领域熟知测定立体异构体的立体化学和分离的方法(参见″Advanced Organic Chemistry″第四章，第4版J.March，JohnWiley和Sons，New York，1992)。
″药学可接受赋形剂″是指可以有效制备药学组合物的通常是安全、无毒并且既无生物学活性也无不良作用的赋形剂，而且包括兽医以及人类药用可接受的赋形剂。说明书和权利要求书中使用的″药学可接受赋形剂″包括一种或一种以上的赋形剂。
化合物的″药学可接受盐″是指药学可接受并具有母体化合物的预期药理学活性的化合物。此类盐包括：
(1)酸加成盐，与无机酸形成的酸加成盐，所述的无机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等；或与有机酸形成的酸加成盐，有机酸例如是乙酸、丙酸、己酸、环戊烷丙酸、羟基乙酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、琥珀酸、苹果酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、3-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、1，2-乙烷-二磺酸、2-羟基乙磺酸、苯磺酸、4-氯代苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲苯磺酸、樟脑磺酸、4-甲基双环[2.2.2]-辛-2-烯-1-甲酸、葡庚糖酸、4，4′-亚甲基双-(3-羟基-2-烯-1-甲酸)、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、叔丁基乙酸、十二烷基硫酸、葡糖酸、谷氨酸、羟基萘甲酸、水杨酸、硬脂酸、粘康酸等；或
(2)当母体化合物中存在的酸性质子被金属离子代替时生成的盐，所述的金属离子例如是碱金属离子、碱土金属离子或铝离子；或与有机碱配位时生成的盐，所述的有机碱例如是乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、氨丁三醇、N-甲基葡糖胺等。
″前药″是指任何当将此类前药施用给哺乳动物对象时可以释放出式(I)的活性母体药物的化合物。式(I)的化合物的前药是通过修饰式(I)的化合物中存在的官能团来制得，制备所采用的方式应使该修饰可以体内裂解释放出母体化合物。前药包括式(I)的化合物，其中式(I)的化合物中羟基、氨基或巯基分别与任何可以在体内裂解再生出游离羟基、氨基或巯基的基团结合。前药的实例包括但不限于式(I)的化合物中的羟基的酯(例如，醋酸酯、甲酸酯或苯甲酸酯衍生物)、氨基甲酸酯(例如N，N-二甲基氨基羰基)，等等。
疾病的″治疗″或″疗法″包括：
(1)预防疾病，也就是使疾病的临床症状不会在哺乳动物中发展，所述的哺乳动物可能与该疾病接触或易患有该疾病但不曾经历或显现出疾病的该症状，
(2)抑制疾病，也就是阻止或减轻该疾病或其临床症状的发展，或
(3)缓解疾病，也就是引起疾病或其临床症状的退化。
″治疗有效量″是指当施用给哺乳动物治疗疾病时，足以治疗该疾病的化合物的量。″治疗有效量″应根据化合物、疾病及其严重性、被治疗哺乳动物的体重等来改变。命名法
本发明的化合物的命名和编号方式说明如下。
本申请中所用的命名法一般是以IUPAC推荐的为基础，例如式(I)的化合物，其中：
其中R1、R2、R4、R6是氢，是4-(3-羟丙基)苯基，和是4-氟苯基，其被命名为5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[4-(3-羟丙基)-苯甲酰基]吡唑。
其中R1、R2、R4、R6是氢，是3-[3-(吗啉-4-基)丙-1-炔基]-苯基，和是4-氟苯基，其被命名为5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(3-吗啉-4-基-丙-1-炔基)苯甲酰基]吡唑。
本发明的代表化合物为下述化合物：I.式(I)的化合物，其中R1、R2和R4是氢，B是苯基并且其他基团定义如下：表中所列的化合物121-145如实施例14、15、19和23所述。优选实施方案
尽管在发明概述中规定了本发明的最广义的定义，而某些式(I)的化合物是优选的。
譬如，一组优选的化合物是其中R3选自下列的那些：
(a)任选取代杂环基；
(b)芳基或杂芳基，两者都任选被选自卤素、烷基、氨基、烷氧基、
羧基、低级烷氧基羰基、SO2R′(其中R′是烷基)或SO2NHR′R″(其中
R′和R″独立地是氢或烷基)的取代基取代；
(c)含杂原子烷基；
(d)含杂原子的烯基；
(e)含杂原子烷基氨基；
(f)含杂原子烷氧基；
(g)任选取代的杂环基烷基；杂环氧基；环烷氧基或环烷基烷氧基；
(h)任选取代的杂环基烯基；
(i)任选取代的杂环基炔基；
(j)任选取代的杂环基烷氧基
(k)任选取代的杂环基烷基氨基或环烷基氨基；
(l)任选取代的杂环基烷基羰基；
(k)-Y-(亚烷基)-R9，其中Y是单键、-O-或-NH-，并且R9是任选取代的
杂芳基、CONR12R13、SO2R14、-SO2NR15R16-NHSO2R17或
-NHSO2NR18R19，其中R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18和R19彼此
独立地是氢、烷基或含杂原子烷基；
(l)环烷基烷基、环烷基炔基和环烷基炔基，它们均被烷基、卤素、
羟基或氨基任选取代；
(m)芳基氨基亚烷基或杂芳基氨基亚烷基；或
(n)Z-亚烷基-NR30R31，其中Z是-NH-、-N(烷基)-或-O-，并且R30和R31
彼此独立地是氢、烷基或含杂原子烷基。
在上述优选组中，更优选那些其中A和B是芳基、优选是苯基的化合物。
在上述优选和更优选组中，甚至更优选的化合物组是其中：
R1是氢；
R2是氢或烷基，优选氢或甲基，更优选氢；
R4是氢、卤素或烷基，优选氢、氯、氟或甲基，更优选氢；
R5是卤素或烷基；和
R6是氢、卤素，烷基或烷氧基。
在上述优选和更优选组中，特别优选的化合物组是其中R3位于3位，并且其为任选取代的杂芳基，优选吡啶基、N-氧化哌啶基或吡啶酮基。
另一组特别优选的化合物是其中R3位于3位，并且其为任选取代的苯基，优选氨磺酰基苯基、烷基氨磺酰基苯基、羧基苯基、羧酰氨基苯基、烷氧基羰基苯基、烷基氨基羰基苯基或二烷基氨基羰基苯基。
第三组特别优选的化合物是其中：
R3位于3位且选自：
(a)含杂原子烷基；
(b)含杂原子烷氧基；
(c)含杂原子烷基氨基；
(d)任选取代的杂环基烷基；
(e)任选取代的杂环基烷氧基、环烷氧基；或环烷基烷氧基；
(f)任选取代的杂环基烷基氨基；
(g)-Y-(亚烷基)-R9，其中Y是单键、-O-或-NH-，并且R9是任选
取代杂芳基、-CONR12R13、SO2R14、-SO2NR15R16-NHSO2R17
或-NHSO2NR18R19，其中R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18
和R19彼此独立地是氢、烷基或含杂原子烷基；或
(h)Z-亚烷基-NR30R31，其中Z是-NH-、-N(烷基)-或-O-，并且R30
和R31彼此独立地是氢、烷基或含杂原子烷基。
在上述优选组中，一组优选的化合物是其中R3位于3位且是含杂原子烷基的化合物。
优选基团R3是2-二甲基氨基乙基、3-二甲基氨基丙基、4-二甲基氨基丁基、羟基甲基、1，2-二羟基乙基、3-羟基-3-甲基丁基或3-羟基丁基。
另一组优选的化合物是其中R3选自下列的化合物：氨基、3-二甲基氨基丙氧基、2-二甲基氨基乙氧基、2-羟基乙氧基、2-二甲基氨基乙基氨基、3-二甲基氨基丙基氨基、3-二甲基氨基丙-1-烯基、3-二甲基氨基丙-1-炔基和2-二甲基氨基乙基羰基。
另一组优选的R3选自3-(吗啉-4-基)丙氧基、2-(吗啉-4-基)乙氧基、3-(吗啉-4-基)丙基、2-(吗啉-4-基)乙基、4-(吗啉-4-基)丁基、3-(吗啉-4-基)丙基氨基、2-(吗啉-4-基)-乙基氨基、3-(吗啉-4-基)-丙-1-烯基、3-(吗啉-4-基)丙-1-炔基、4-甲基哌嗪-1-基、哌嗪-1-基、吡啶-3-基、吗啉-4-基甲基羰基、3-二甲基氨基丙-1-烯基、3-二甲基氨基丙-1-炔基、2-氨基磺酰基乙基、2-氨基磺酰基乙烯基、乙酰基氨基和三氟乙酰基氨基，优选2-(吗啉-4-基)乙氧基和3-(吗啉-4-基)-丙基。
第四组特别优选的化合物是其中R5是卤素或烷基，且R6是氢、卤素或烷基，优选R5是4-F或2-Me且R6是氢，或者R5是2-F且R6是4-F。
另一组优选的化合物是其中A和B是芳基，优选苯基，并且R3位于3位，并且其选自：含杂原子烷氧基、任选取代杂环基烷氧基、任选取代环烷氧基和任选取代杂环基烷基氨基。
优选的R3包括2，2-(二羟基甲基)乙氧基、2，3-二羟基-丙氧基、(2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4(S)-基)甲氧基、(2，2-二乙基-1，3-二氧戊环-4(S)-基)甲基氨基、(1，3-二氧戊环-2-酮-4(R)-基)甲氧基、(2-硫基-1，3-二氧戊环-4-基)甲氧基、(2，2-二乙基-1，3-二氧戊环-4(S)-基)甲氧基、2-甲基-2-乙基-1，3-二氧戊环-4(S)-基)甲氧基和3，4-(二羟基)环戊基氧基。
在上述优选组中，另一优选组的化合物是那些其中：
R1是氢，
R2是氢或烷基，优选氢或甲基；
R4是氢或烷基；
R5是卤素；和
R6是氢或烷基。
另一优选组的化合物是其中R3位于3位且其选自：
(a)-S(O)nR27，其中n是0至2的整数，和R27是烷基、含杂原子烷基、任
选取代的环烷基、任选取代的杂环基烷基或-NR28R29，其中R28和
R29彼此独立地是氢、烷基或含杂原子烷基；
(b)X-(亚烷基)CH[(CR′R″)mOR40][(CR′R″)nOR40]，其中X是-O-、
-NH-、-NR-(其中R是烷基)或-S(O)p-(其中p是0至2的整数)；
R40是酰基；C(O)OR41(其中R41是氢、烷基或环烷基)；
C(O)ONR41R42(其中R41定义如上且R42是氢或烷基)；或
C(O)NR41R42(其中R41和R42定义如上)；
R′和R″独立地是氢或烷基；和
m和n独立地是0-3的整数，条件是m和n不同时为0；
(c)X-(亚烷基)-CH(OH)CH2NHR50，其中：
X是-O-、-NH-、-NR-(其中R是烷基)，或-S(O)n-(其中n是0-2的整
数)；R50是C(O)OR″和C(O)NR51R52(其中R″是氢、烷基或环烷基且
R52是氢或烷基)；和
(d)X-(亚烷基)-CH(NR50)-CH2OH，其中：
X是-O-、-NH-、-NR-(其中R是烷基)，或-S(O)n-(其中n是0-2的整
数)；R50是C(O)OR″和C(O)NR51R52(其中R51是氢、烷基或环烷基且
R52是氢或烷基)。
在这组中优选的R3包括2(S)，3-(二乙酰氧基)丙氧基、2(S)，3-(二异丁酰氧基)丙氧基、2(S)，3-(二新戊酰氧基)丙氧基和2(S)，3-(二甲氧基羰基氧基)。
特别优选的化合物实例是：
5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(2-吗啉-4-基乙氧基)苯甲酰基]吡唑；
5-氨基-1-(2，4-二氟苯基)-4-[3-(3-吗啉-4-基丙基)苯甲酰基]-吡唑；
5-氨基-4-(3-氨基苯甲酰基)-1-(4-氟苯基)吡唑；
5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(3-吗啉-4-基丙基)苯甲酰基]吡唑.；
5-氨基-4-[3-(2-氨基磺酰基乙烯基)苯甲酰基]-1-(4-氟苯基)-吡唑.；
5-氨基-4-(3-乙酰基氨基苯甲酰基)-1-苯基吡唑；
5-氨基-4-[3-(2-氨基乙基)苯甲酰基]-1-(4-氟苯基)吡唑；
5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(3-吗啉-4-基丙基氨基)苯甲酰基]-吡唑；
5-氨基-4-[3-(2-氨基磺酰基乙基)苯甲酰基]-1-(4-氟苯基)吡唑；
5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(吡啶-3-基)苯甲酰基]吡唑；
5-氨基-1-(2-甲基苯基)-4-[3-(吡啶-3-基)苯甲酰基]吡唑；
5-氨基-1-(2-甲基苯基)-4-[3-(N-氧代吡啶-3-基)苯甲酰基]吡唑；
5-氨基-4-[3-(2，3-二羟基丙氧基)苯甲酰基]-1-(4-氟苯基)吡唑.；
5-氨基-4-[3-(1，2-二羟基乙基)苯甲酰基]-1-(4-氟苯基)吡唑；
5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-氨磺酰基苯甲酰基]吡唑；
5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-{3-[(2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4(S)-基)甲氧基]苯甲酰基}吡唑；
5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-{3-[2(S)，3-(二乙酰氧基)丙氧基]苯甲酰基}吡唑；
5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-{3-[2(S)，3-(二甲氧基羰基氧基)丙氧基]苯甲酰基}吡唑；
5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-{3-[(1，3-二氧戊环-2-酮-4(R)-基)甲氧基]苯甲酰基}吡唑；
5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-{3-[(2-硫基-1，3-二氧戊环-4-基)甲氧基]苯甲酰基}吡唑；通用合成路线
本发明的化合物可以通过反应路线中所示的方法制备。
制备这些化合物所使用的起始原料和试剂或者得自商业供应商，例如Aldrich Chemical Co.(Milwaukee，Wisconsin，USA)、Bachem(Torrance，California，USA)、Emka-Chemie或Sigma(St.Louis，Missouri，USA)，或者通过所属领域技术人员已知的方法按照参考文献中规定的过程制备，例如Fieser和Fieser所著的《Reagents for Organic Synthesis》1-17卷(JohnWiley和Sons，1991)；Rodd的《Chemistry of Carbon Compounds》1-5卷和增补(Elsevier Science Publishers，1989)；《Organic Reactions》1-40卷(John Wiley和Sons，1991)，March的《Advanced Organic Chemistry》(JohnWiley和Sons，第4版)，和Larock的《Comprehensive OrganicTransformations》(VCH Publishers Inc.，1989)。这些反应路线仅仅举例说明一些可以合成本发明化合物的方法，并且所属领域技术人员参考本文内容可以完成和提出对这些反应路线的多种改进。
反应的起始原料和中间体可以被分离，并且如果需要可以利用常规技术纯化，包括但不限于过滤、蒸馏、结晶、色谱等。可以用常规方式测定这些物质的特征，包括物理常数和光谱数据。式(I)的化合物的制备
合成路线A、B和C描述了制备式(I)的化合物的方法。
反应路线A
其中R2是氢且其他基团如发明概述中定义的式(I)的化合物制备如下：
方法(a)
方法(b)
一般地，式(I)的化合物可以按照下述方法(a)或(b)制备。方法(a)
式1的2-酮基乙腈[其中Z是卤素(如溴或碘)、烷氧基、硝基或乙酰基氨基]与N，N-二苯基甲脒的反应生成式2的2-酮基-3-苯基氨基-丙烯腈。该反应是在高度沸腾的芳族烃如甲苯、二甲苯等中加热下发生。
通常，式1的化合物或者商购，或者它们可以通过所属技术领域熟知的方法制备。譬如，式1的2-芳酰基乙腈类化合物如4-甲氧基苯甲酰基乙腈、3-硝基苯甲酰基乙腈可以商购。其他的化合物可以通过用碱如正丁基锂处理乙腈，随后令生成的乙腈阴离子与Sjogren，E.B.等，J.Med.Chem，34，3295，(1991)所述的芳酰基/杂芳酰基卤化物或芳基/杂芳基酯反应制备。
式2的2-酮基-3-苯基氨基丙烯腈与式3的肼的反应得到式4的5-氨基-4-酮基吡唑。该反应一般在极性溶剂如乙醇、异丙醇等中进行。式2的芳基/杂芳基肼类化合物如2-或3-氯苯基肼、2-、3-或4-氟苯基肼、苯基肼，2-肼基吡啶、2-肼基苯并噻唑、2-肼基喹啉等可以商购。
化合物4随后通过所属领域熟知的方法转化为式(I)的化合物，其中R′是氢且R3如发明概述中定义。某些此类方法如下文所述。(i)其中R3是杂环基烷氧基的式(I)的化合物可以通过下列方法制备：
(a)其中R3是杂环基烷氧基的式(I)化合物可以由其中Z是烷氧基的式4的化合物制得，如下所示：
其中R3是杂环基烷氧基的式(I)化合物可以由其中Z是烷氧基的式4的的化合物制备，首先使烷氧基脱烷基化生成相应的其中Z是羟基的式5的化合物，随后与杂环基烷基卤化物[例如4-(2-氯乙基)吗啉、1-(2-氯乙基)吡咯烷等]反应。该脱烷基化反应或者用三溴化硼在卤代有机溶剂(如二氯甲烷)中进行，或者通过在纯盐酸吡啶盐中加热4。烷基化反应是在碱(如碳酸钾、碳酸铯等)的存在下在极性有机溶剂(如乙腈、二甲基甲酰胺、丙酮等)中进行。
(b)另外地，在上述反应条件下，通过5与烷基卤化物反应可以连接上杂环基烷基，随后所得的卤代烷氧基中间体与杂环基(如哌嗪、吗啉、吡咯烷等)反应。烷基二卤化物如1-溴-2-氯乙烷、1-氯-3-碘丙烷等可以商购。
(c)通过把式5的化合物转化为双羟基烷氧基衍生物(如实施例24的二醇)，随后用酮或醛在酸性条件下处理，可以制得其中R3是杂环基烷氧基(例如在实施例25中，其中该杂环是任选取代环状缩酮)的其他式(I)的化合物。
(d)通过把式5的化合物转化为双羟基烷氧基衍生物(如实施例24的二醇)，随后用羰基化试剂如光气、双光气和三光气处理，可以制得其中R3是杂环基烷氧基(例如在实施例28中，其中该杂环是任选取代环状碳酸酯)的其他式(I)的化合物。(ii)其中R3是-O-(亚烷基)-R9(其中R9是-COOH、-COR10、-COOR11或-CONR12R13)的式(I)的化合物可以由式5的化合物如下所述制备：
其中R3是-O-(亚烷基)-COOR″的式(I)的化合物是通过式5的化合物与式X-(亚烷基)CO2R11的烷基化试剂(其中X是卤素基团)反应制备。酯基的水解产生游离酸(R9是-COOH)，如果需要，通过在适当偶联剂(如羰基二咪唑、N，N-二环己基碳二亚胺等)的存在下用式NR12R13的胺(其中R12和R13如发明概述中定义)处理该酸，其可以被转化为其中R9＝-CONR12R13的式(I)的化合物。
其中R9是-COR10的式(I)的化合物可以由其中R9是-COOH的式(I)的化合物制备，首先将该酸转化为Weinreb酰胺，随后分别用格氏试剂或式R10MgBr或R10Li的有机锂试剂处理。(iii)通过将式5的化合物转化为双羟基烷氧基衍生物(如实施例24的二醇)，随后用酸酐R40C(O)OC(O)R40、酰氯R40C(O)Cl或氯甲酸酯ClC(O)OR41处理，可以制备其他的其中R3是X(亚烷基)CH[(CR′R″)OR40][(CR′R″)nOR40]{如在实施例26和27中，其中X是-O-；R40是酰基或C(O)OR41(其中R41是氢、烷基或环烷基)；R′和R″是氢；m是0；和n是1}的式(I)化合物。
通过把式5的化合物转化为双羟基烷氧基衍生物(例如实施例24的二醇)，随后用烷基氨基甲酰氯R41R42NC(O)Cl处理可以制备其他的其中R3是X(亚烷基)CH[(CR′R″)mOR40][(CR′R″)nOR40]{其中X是-O-；R40是C(O)NR41R42(其中R41是氢、烷基或环烷基和R42是氢或烷基)；R′和R″是氢；m是0；和n是1)的式(I)的化合物。(iv)由其中Z是硝基的式4的化合物通过把该硝基还原为氨基，且随后按照上述方法进行可以制备其中R3是-NH-(亚烷基)-R9的式(I)的化合物，其中R9是-COOH、-COR10、-COOR11、-CONR12R13或杂环基烷基氨基。(v)其中R3是含杂原子烯基、含杂原子炔基、杂环基-烯基、杂环基炔基、含杂原子烷基或杂环基烷基的式(I)的化合物可以按照下面所述方法制备。
通过其中Z是卤素的式4化合物在钯(II)催化剂(如二氯双(三苯基膦)-钯(II))的存在下、在有机碱(如二异丙胺)中分别与含杂原子烯烃、含杂原子炔烃、杂环基烯烃或杂环基炔烃反应可以制得其中R3是含杂原子烯基、含杂原子炔基、杂环基烯基或杂环基炔基的式(I)的化合物。含杂原子烯烃化合物、含杂原子炔烃化合物如烯丙基醇、炔丙基醇、3-丁炔-1-醇、炔丙基胺可以商购。杂环基烯烃可以通过炔基卤化物与杂环化合物反应来制成。譬如，通过炔丙基溴与吗啉反应可以制得2-吗啉-1-基丙-1-炔。双键或叁键在催化氢化反应条件下的还原反应产生其中R3是杂环基烷基或含杂原子烷基的相应式(I)的化合物。(vi)由其中R3是氨基的式(I)的化合物通过PCT申请WO 97/46524所述的合成方法可以制备其中R3是-NHSO2R6、-NHSO2NR7R8或NHC(X)R23R24(其中X是-O-或-S-)的式(I)的化合物。
其中R1是酰基的式(I)的化合物可以通过在酰化反应条件下其中R1是氢的相应式(I)的化合物与式R1COL的酰化试剂反应来制备，其中L是的离去基团，例如卤素。该反应是在碱如氢氧化钠、碳酸铯等的存在下进行。方法(b)
另外地，式(I)的化合物可以由其中Z定义如上的式6的酯制备，首先利用上述方法(a)(i-v)中所述的反应条件使Z式6化合物中的Z基团转化为所需的R3基团。7与乙腈阴离子的缩合生成式8的2-酮基乙腈，随后利用上述方法(a)所述的反应条件将其转化为式(I)的化合物。
其中R2是硫代烷基或烷基的式(I)的化合物可以按照美国专利5,712,303中所述的方法制备。反应路线B
其中R2是氢且其他基团如发明概述中定义的式(I)的化合物的另一种制备方法如下所述。
式9的2-氰基-3-乙氧基丙烯酸酯与式3的肼缩合生成式10的5-氨基-4-乙氧基羰基吡唑。该缩合反应在适当极性有机溶剂如乙醇、异丙醇等中进行。10与水性碱(例如氢氧化钠、氢氧化锂等)在醇有机溶剂(如甲醇、乙醇等)中水解反应，生成相应的式11的5-氨基-4-羧基吡唑。11用二吡啶基二硫化物处理，随后所得的硫代吡啶基酯衍生物12与有机金属试剂如格氏试剂或上述有机锂试剂反应，得到式(I)的化合物。反应路线C
其中R2是氢且其他基团如发明概述中定义的式(I)的化合物的另一种制备方法如下所述。
式11的5-氨基-4-羧基吡唑的热脱羧作用生成相应的式13的5-氨基吡唑。随后化合物13按照上述(a)或(b)的方法转化为式(I)的化合物。
在方法(a)中，13的化合物被转化为式(I)的化合物，首先用适当的氨基保护基(如叔丁氧基羰基等)保护化合物13的氨基，生成相应的式14的氨基保护化合物。在有机金属置换反应条件下，用式R3COL的酸衍生物处理14，其中L是离去基团[例如烷氧基(优选甲氧基或乙氧基)、二烷基氨基，优选N，O-二甲基羟基氨基]，随后脱去氨基保护基得到式(I)的化合物。亲核取代是在2个当量的烷基锂(例如叔丁基锂等)的存在下并在非质子有机溶剂如四氢呋喃中进行。用于脱除氨基保护基的反应条件取决于保护基的本质。譬如，如果叔丁氧基羰基是保护基，则用酸如三氟乙酸盐酸等处理就可脱除。
式R3COL的酸衍生物可以利用有机化学领域中熟知的方法制备。譬如，其中L是N，O-二甲基羟基氨基的酸衍生物可以由其相应的酸制备，首先用适当的氯化试剂(如草酰氯)把酸转化为酰氯，随后用N，O-二甲基羟基胺盐酸盐在有机碱如三乙胺的存在下处理。
在方法(b)中，式10的化合物溴化成为式15的5-氨基-4-溴-吡唑。该溴化反应采用适当的溴化试剂如N-溴代琥珀酰胺、在适当极性有机溶剂如二甲基甲酰胺中进行。随后利用上述合成路线C方法(a)所述的反应条件把化合物15转化为式(I)的化合物。实用性、实验和给药实用性
式(I)的化合物是p38 MAP激酶抑制剂，由此式(I)的化合物和含有它们的组合物可以有效治疗疾病，如类风湿性关节炎、骨关节炎、脊椎炎、骨吸收病、脓毒病、脓毒性休克、中毒性休克综合征、内毒素性休克、结核病、动脉粥样硬化、糖尿病、成人呼吸窘迫综合征、慢性肺部炎性疾病、热病、牙周疾病、溃疡性结肠炎、pyresis、阿尔茨海默病和帕金森氏病。实验
通过实施例15所述的体外试验来证实式(I)的化合物抑制p38 MAP激酶的能力。实施例16和17详述的体内试验分别验证了式(I)的化合物抑制TNF-α的释放的能力。
利用实施例18中所述的大鼠中佐剂诱发的关节炎来测定本发明的化合物的抗炎活性。给药和药物组合物
通常，本发明的化合物可以以治疗有效量通过任何适合类似用途的药物给药的可接受方式施用。本发明的化合物的实际用量，即活性成分的用量将取决于多种因子，例如被治疗疾病的严重性、对象的年龄和相对健康状况、所用化合物的效价、给药的途径和形式以及其他因素。
式(I)的化合物的治疗有效量可以是约0.1-50mg/kg接受者体重/天，优选约1-30mg/kg/天。因此，为了对70kg的人给药，剂量范围首选约70mg至2.1g/天。
通常，本发明的化合物作为药物组合物通过任何一种下列途径给药：口服，系统性(如经皮、鼻内或利用栓剂)或非肠道(例如肌肉内、静脉内或皮下)给药。优选的给药方式是利用常规每天剂量方案口服给药，其可以根据病痛的程度加以调整。组合物可以采取片剂、丸剂、胶囊、半固体、粉末、缓释制剂、溶液、混悬液、酏剂、气溶胶或任何适当的组合物的形式。
剂型的选择取决于不同的因素，例如给药的方式(例如，对于口服给药，优选制剂为片剂、丸剂或胶囊的形式)和药物的生物利用度。目前，基于通过增加表面积(即减小粒度)可以提高生物利用度的原理，已经开发出药物制剂，尤其是生物利用度低的药物。譬如，U.S.专利4,107,288描述了颗粒大小在10-1,000nm范围内的药物制剂，其中活性物质负载在大分子的交联基质上。U.S.专利号5,145,684描述了药物制剂的制备，其中的药物在表面改性剂的存在下被粉碎成纳米颗粒(平均粒度400nm)并且分散在液体介质中，得到具有非常高的生物利用度的药物制剂。
所述的组合物一般含有与至少一种药学可接受赋形剂联合的式(I)的化合物。可接受的赋形剂是无毒，协助给药并对式(I)的化合物的治疗效益没有不良影响。此类赋形剂可以是任何所属领域技术人员常用的固体、液体、半固体，或这在气溶胶组合物的情况中是气体赋形剂。
固体药物赋形剂包括淀粉、纤维素、滑石、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明胶、麦芽、稻米、面粉、白垩、硅胶、硬脂酸镁、硬脂酸钠、甘油单硬脂酸酯、氯化钠、干燥脱脂乳等。液体和半固体赋形剂可以选自甘油、丙二醇、水、乙醇和多种油，包括那些石油、动物、植物或合成来源的油，例如花生油、大豆油、矿物油、芝麻油等。优选的液体载体，特别是对于可注射溶液来说，包括水、盐水、含水葡萄糖和二醇类化合物。
压缩气体可以用来分散本发明的化合物成为气溶胶形式。适合这种目的的惰性气体为氮气、二氧化碳等。
其他适用的药物赋形剂及其制剂公开在Remington′s PharmaceuticalSciences，E.W.Martin编辑(Mack Publishing Company，18版，1990)中。
化合物在制剂中的含量可以在所属领域可利用的全部范围内变化。通常，以重量百分比(wt％)基，制剂应基于该制剂总重量的约0.01-99.99(wt％)，余量为一种或多种适当的药用赋形剂。更加可取地，所述的化合物是以约1-80(wt％)的水平存在。实施例14中公开在含有式(I)的化合物的代表性药物制剂。实施例
下面给出制备方法和实施例以确保所属领域技术人员可以更加清楚地理解和实施本发明。它们不应被视为限定本发明的范围，而仅仅是举例说明和它们的例子。表I中括号内的数字是指CPD号。实施例15-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-{3-(吗啉-4-基)丙-1-炔基}苯甲酰基]吡唑(3)步骤1
-78℃下将正丁基锂(214ml，340mmol，1.6M的己烷溶液)滴加到乙腈(23.8ml，460mmol)在干燥四氢呋喃(1000ml)中的溶液内。搅拌反应混合物20分钟后，在20分钟内低聚4-溴苯甲酰氯在干燥四氢呋喃(50ml)中的溶液。1小时后，加入饱和氯化铵(200ml)且令该反应混合物升至室温。产物用乙醚提取且用1N盐酸(400ml)洗涤。真空除去有机物，把残余物溶于乙酸乙酯。加入氢氧化铵得到固体，过滤该固体，重新溶于乙酸乙酯并用2N盐酸洗涤。有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥且真空浓缩得到2-(3-溴苯甲酰基)-乙腈(16.6g)，其为固体。步骤2
将2-(3-溴苯甲酰基)乙腈(16.5g，73.6mmol)和N，N二苯基甲脒(14.5g，73.6mmol)在二甲苯(100ml)中的混合物在氮气氛下加热回流。3小时后，将反应混合物冷却至室温，用乙醚稀释，得到2-(3-溴苯甲酰基)-3-苯基氨基-丙烯腈(17.9g)，其为固体。步骤3
4-氟苯基肼(4.25g，33.7mmol)和2-(3-溴苯甲酰基)-3-苯基氨基丙烯腈(10.0g，30.7mmol)在乙醇(100ml)中的混合物在氮气氛下加热回流。4小时后，令反应混合物冷却至室温，用己烷稀释得到5-氨基-4-(3-溴苯甲酰基)-1-(4-氟苯基)吡唑(9.7g)，其为固体。
在步骤3中用上述2，4-二氟苯基肼代替4-氟苯基肼得到5-氨基-4-(3-溴苯甲酰基)-1-(2，4-二氟苯基)吡唑。步骤4
将5-氨基-4-(3-溴苯甲酰基)-1-(4-氟苯基)吡唑(1.3g，4.16mmol)、4-(丙-2-炔基)吗啉(2.1g，16.6mmol)[其制备是通过把吗啉(14.7ml，168mmol)在乙醚(50ml)中的溶液在30分钟内滴加到存在于乙醚(50ml)中的羟丙基溴(7.5ml，84mmol)中并加热该反应混合物至回流。16小时后，反应混合物冷却至室温，且经布氏漏斗(Buchner funnel)过滤。浓缩滤液并通过快速色谱纯化(梯度洗脱，20-100％EtOAc/己烷)得到4-(丙-2-炔基)吗啉(5.0g)]、双(三苯基膦)-氯化钯(0.29g，0.42mmol)和碘化铜(0.079g，0.42mmol)在二异丙胺(60ml)中的混合物在氩气下加热至70℃。10小时后，令该反应混合物冷却至室温，用乙酸乙酯稀释，用盐水洗涤并用硫酸钠干燥。真空除去有机物。粗产物通过快速色谱纯化(洗脱梯度，EtOAc-5％MeOH/EtOAc，含有0.2％NH4OH)，得到5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(3-吗啉-4-基丙-1-炔基)苯甲酰基]-吡唑，其被转化为盐酸盐，且在甲醇/乙酸乙酯/己烷的混合物中重结晶，得到(1.4g)的纯净产物。
按照上述实施例1所述方法进行但步骤4中的4-(丙-2-炔基)-吗啉被下列物质代替：1-(丙-2-炔基)-4-甲基哌嗪，1-(丙-2-炔基)哌啶，2-丙炔-1-醇，1-二甲基氨基-2-丙炔，和2-甲基-3-丁炔-2-醇；分别得到5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-{3-[3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙-1-炔基]-苯甲酰基}吡唑二盐酸盐(8)，5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-{3-(哌啶-1-基)丙-1-炔基}苯甲酰基]吡唑盐酸盐(9)，5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(3-羟基丙-1-炔基)苯甲酰基]吡唑(7)，5-氨基-4-[3-(3-二甲基氨基丙-1-炔基)苯甲酰基]-1-(4-氟苯基)吡唑盐酸盐(12)，和5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(3-羟基-3-甲基-丁-1-炔基)苯甲酰基]吡唑(87)。
按照上面实施例1所述的方法但步骤3中的4-氟苯基肼被2，4-二氟苯基肼代替，同时步骤4中的4-(丙-2-炔基)吗啉被3-乙炔基哌啶代替，得到5-氨基-1-(2，4-二氟苯基)-4-[3-(3-吡啶基乙炔基)苯甲酰基]吡唑(88)，用3-(S，S-二氧代-硫代吗啉-4-基)-1-丙炔代替可以得到5-氨基-1-(2，4-二氟苯基)-4-[3-{3-(S，S-二氧代-硫代吗啉-4-基)-1-丙炔基}苯甲酰基]吡唑(89)，和用1-乙炔基环戊醇代替得到5-氨基-1-(2，4-二氟苯基)-4-[3-{2-(1-羟基环戊基)乙炔基}-苯甲酰基]吡唑(94)。实施例25-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(3-吗啉-4-基丙基)苯甲酰基]-吡唑盐酸(6)
5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(3-吗啉-4-基丙-1-炔基)-苯甲酰基]吡唑(0.45g，1.0mmol)[按照实施例1制备]和5％Pd/C(0.07g)在乙醇(20ml)中的混合物在氮气氛下搅拌。16小时后，反应混合物经硅藻土(Celite)过滤且真空浓缩滤液。粗产物通过快速色谱纯化(洗脱梯度，EtOAc-15％MeOH/EtOAc，其中含有0.2％NH4OH)。把产物转化为盐酸盐，并且甲醇/乙酸乙酯的混合物重结晶，得到5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(3-吗啉-4-基丙基)苯甲酰基]吡唑.HCl(0.3g，mpt.211.9-212.6C)，其为固体。
按照上面实施例2所述方法进行，但5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(3-吗啉-4-基丙-1-炔基)苯甲酰基]吡唑用下面化合物代替：5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-{3-[3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙-1-炔基]-苯甲酰基}吡唑，5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-{3-(哌啶-1-基)丙-1-炔基}苯甲酰基]吡唑，5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(3-羟基丙-1-炔基)苯甲酰基]吡唑，5-氨基-4-[3-(3-二甲基氨基丙-1-炔基)苯甲酰基]-1-(4-氟苯基)吡唑，5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(3-羟基-3-甲基-1-丁炔基)苯甲酰基]吡唑，5-氨基-1-(2，4-二氟苯基)-4-[3-(3-吡啶基乙炔基)苯甲酰基]吡唑，5-氨基-1-(2，4-二氟苯基)-4-[3-{3-(S，S-二氧代-硫代吗啉-4-基)-1-丙炔基}苯甲酰基]吡唑，5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-{2-(1-羟基环戊基)乙炔基}苯甲酰基]-吡唑，和5-氨基-1-(2，4-二氟苯基)-4-[3-{2-(1-羟基环戊基)乙炔基}苯甲酰基]-吡唑，分别得到5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-{3-[3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基]苯甲酰基}吡唑(30)；5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(3-哌啶-1-基丙基)苯甲酰基]吡唑(32)；5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(3-羟丙基)苯甲酰基]吡唑；5-氨基-4-[3-(3-二甲基氨基丙基)苯甲酰基]-1-(4-氟苯基)吡唑；5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(3-羟基-3-甲基丁基)苯甲酰基]吡唑(90)，5-氨基-1-(2，4-二氟苯基)-4-[3-(3-吡啶基乙基)苯甲酰基]吡唑(91)，5-氨基-1-(2，4-二氟苯基)-4-[3-{3-(S，S-二氧代-硫代吗啉-4-基)丙基}苯甲酰基]吡唑(92)，5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-{2-(1-羟基环戊基)乙基}苯甲酰基]吡唑(93)，和5-氨基-1-(2，4-二氟苯基)-4-[3-{2-(1-羟基环戊基)乙基}苯甲酰基]吡唑(94)。实施例35-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-{2-(吗啉-4-基)乙氧基}苯甲酰基]吡唑盐酸盐(14)步骤1
3-羟基苯甲酸甲酯(8.0g，56mmol)和4-(2-氯乙基)-吗啉盐酸盐(15.7g，84mmol)和碳酸钾(11.5g，83mmol)在甲苯(50ml)中的混合物加热回流。4天后，令反应混合物冷却至室温且用乙酸乙酯稀释。有机层用水洗涤，随后用稀盐酸提取。分离酸性层，用5N氢氧化钠碱化，产物提取到乙酸乙酯中。真空除去有机物并残余物通过快速色谱纯化(洗脱梯度3％丙酮/二氯甲烷)，得到3-(2-吗啉-4-基乙氧基)苯甲酸甲酯(9.0g)，其为固体。步骤2
-78℃下，把二异丙基氨化锂(18.8ml，37mmol，2.0M溶液，在庚烷/四氢呋喃/苯甲酸乙酯中)滴加到在干燥四氢呋喃(50ml)中的乙腈中(1.58g，37mmol)。搅拌该反应混合物30分钟之后，在10分钟内滴加3-(2-吗啉-4-基乙氧基)苯甲酸甲酯在干燥四氢呋喃(50ml)中的溶液。15分钟之后，加入水且令反应混合物升至室温。分离水层和用稀盐酸酸化至pH7。产物提取到乙酸乙酯中，用水和盐水洗涤，用硫酸镁干燥。真空除去有机物得到2-[3-(2吗啉-4-基乙氧基)苯基]乙腈(5.0g)，其为油，该产物戊烯进一步纯化就可以用于下步。步骤3
氮气氛下将2-[3-(2-吗啉-4-基乙氧基)苯基]乙腈(5.0g)和N，N-二苯基甲脒(5.0g，25.5mmol)在二甲苯(150ml)中的混合物在100℃加热。3小时后，令反应混合物冷却至室温，用己烷稀释得到2-[3-(2-吗啉-4-基乙氧基)苯甲酰基]-3-苯基氨基-丙烯腈(5.0g)，其为固体。步骤4
氮气氛下将4-氟苯基肼(1.0g，6.8mmol)和2-[3-(2-吗啉-4-基乙氧基)-苯甲酰基]-3-苯基氨基丙烯腈(2.0g，5.3mmol)在乙醇(30ml)中的混合物加热回流。6小时后，令反应混合物冷却至室温，用水稀释。产物提取到乙酸乙酯中，有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥并真空浓缩。利用快速色谱纯化(洗脱梯度：CH2Cl2-3％MeOH/CH2Cl2)，得到5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(2-吗啉-4-基乙氧基)苯甲酰基]吡唑，将其转化为盐酸盐(0.7g，mpt.191.6-192.5℃)。
步骤4中的4-氟苯基肼被下列化合物代替：2-氟苯基肼和2，6-二氯苯基肼，分别得到：5-氨基-1-(2-氟苯基)-4-[3-(2-吗啉-4-基乙氧基)苯甲酰基]吡唑(97)，和5-氨基-1-(2，6-二氯苯基)-4-[3-(2-吗啉-4-基乙氧基)苯甲酰基]吡唑(98)。实施例45-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(吡啶-3-基)苯甲酰基]吡唑(20)步骤1
氩气氛下将5-氨基-4-(3-溴苯甲酰基)-1-(4-氟苯基)吡唑(0.9g，2.5mmol)[按照上面实施例1所述制备]、吡啶-3-硼酸、1，3-丙二醇环酯(0.5g，3mmol)、磷酸钾(0.8g，3.73mmol)和四(三膦)钯(0.3g，0.25mmol)在二噁烷(20ml)中的混合物在85℃下加热。16小时后，该反应混合物冷却至室温并倾入盐水。产物提取到乙酸乙酯中，用硫酸钠干燥并过滤。真空除去有机层，残余物通过快速色谱纯化(洗脱梯度：40-80％乙酸乙酯/己烷)，得到5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(吡啶-3-基)苯甲酰基]-吡唑(0.50g)，其由乙酸乙酯重结晶(mpt.222.2-223.0)。
5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(吡啶-3-基)苯甲酰基]吡唑用在乙酸乙酯中的碘甲烷处理，得到5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(N-甲基哌啶鎓-3-基)苯甲酰基]吡唑碘化物(59)。
步骤1中的5-氨基-4-(3-溴苯甲酰基)-1-(4-氟苯基)吡唑用5-氨基-4-(3-溴苯甲酰基)-1-(2，4-二氟苯基)吡唑代替，随后转化为盐酸盐，得到5-氨基-1-(2，4-二氟苯基)-4-[3-(吡啶-3-基)苯甲酰基]吡唑.HCl(99)。实施例55-氨基-4-[3-(2-氨基磺酰基乙基)苯甲酰基]-1-(4-氟苯基)吡唑(50)步骤1
氩气下5-氨基-4-(3-溴苯甲酰基)-1-(4-氟苯基)吡唑(1.5g，4.14mmol)[按照上文实施例1所述制备]、乙烯基磺酰胺(1.33g，12.4mmol)、双(三苯基膦)氯化钯(0.3g，0.42mmol)和三乙胺(6ml，43mmol)在二甲基甲酰胺(18ml)中的混合物在100℃下加热。16小时后，令反应混合物冷却至室温且倾入1N盐酸。产物提取到乙酸乙酯，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥并过滤。真空除去有机层，残余物通过快速色谱纯化(洗脱梯度：40-80％乙酸乙酯/己烷)，得到5-氨基-4-[3-(2-氨基磺酰基-乙烯基)苯甲酰基]-1-(4-氟苯基)吡唑，其由甲醇/乙酸乙酯/己烷的混合物重结晶，得到0.78g的预期产物。步骤2
在Parr装置中将5-氨基-4-[3-(2-氨基磺酰基乙烯基)苯甲酰基]-1-(4-氟苯基)-吡唑(2.1g，5.43mmol)和氢氧化钯(0.6g)在甲醇(150ml)中的混合物在50psi氢气氛下振摇。4天后，该反应混合物经Celite过滤且将滤液浓度。残余物通过快速色谱纯化(洗脱梯度：40-100％乙酸乙酯/己烷)，得到粗产物，其由甲醇/乙酸乙酯/己烷重结晶，得到5-氨基-4-[3-(2-氨基-磺酰基乙基)苯甲酰基]-1-(4-氟苯基)吡唑(0.95g，mpt.170-170.4℃)，其为固体。
步骤1中的乙烯基磺酰胺用乙烯基甲基砜代替得到：5-氨基-4-[3-(2-甲基磺酰基乙基)苯甲酰基]-1-(4-氟苯基)吡唑(100)。实施例65-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(吗啉-4-基甲基羰基)-苯甲酰基]吡唑(18)步骤1
氩气下将5-氨基-4-(3-溴苯甲酰基)-1-(4-氟苯基)吡唑(3.5g，9.7mmol)[按照上文实施例1所述制备]、三丁基-(1-乙氧基乙烯基)锡(4.3ml，12.36mmol)和四(三苯基膦)钯(1.0g，0.87mmol)在二甲基甲酰胺(25ml)中的混合物在95℃下加热。16小时后，令反应混合物冷却至室温，并且缓慢加入10％盐酸水溶液(25ml)。30分钟后，反应混合物用乙酸乙酯稀释，经Celite过滤。分离有机层并用盐水洗涤，用硫酸钠干燥且真空浓缩。残余物通过快速色谱纯化(洗脱梯度：10-60％乙酸乙酯/己烷)，得到5-氨基-4-[3-(1-乙氧基乙烯基)苯甲酰基]-1-(4-氟苯基)吡唑，将其溶于四氢呋喃(50ml)。加入1N盐酸(20ml)，该反应混合物在室温下搅拌16小时。分离有机层，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥和真空浓缩。粗产物通过快速色谱纯化(洗脱梯度：20-50％乙酸乙酯/己烷)，随后由乙酸乙酯/己烷的混合物重结晶，得到5-氨基-4-[3-乙酰基苯甲酰基]-1-(4-氟-苯基)吡唑(2.0g)。步骤2
氮气下，向回流的溴化铜(2.2g，9.85mmol)在乙酸乙酯/二氯甲烷(1∶1)(100ml)中的混悬液内加入存在于二氯甲烷(25ml)中的5-氨基4-[3-乙酰基苯甲酰基]-1-(4-氟苯基)吡唑(1.6g，4.95mmol)的溶液。16小时后，浓缩该反应混合物，令残余物在亚硫酸氢钠和乙酸乙酯中分配。分离有机层，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥和真空浓缩。残余物通过快速色谱纯化(洗脱梯度：10-40％乙酸乙酯/己烷)，得到5-氨基-4-[3-(2-溴乙酰基)-苯甲酰基]-1-(4-氟苯基)吡唑(0.47g)，其为固体。步骤3
向吗啉(0.25ml，2.79mmol)在二甲基甲酰胺(5ml)中的溶液内加入存在于二甲基甲酰胺(5ml)中的5-氨基-4-[3-(2-溴乙酰基)苯甲酰基]-1-(4-氟苯基)吡唑(0.22g，0.56mmol)的溶液。16小时后，把反应混合物倾入盐水，产物提取到乙酸乙酯中。分离有机层，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥和真空浓缩。残余物通过快速色谱纯化(洗脱梯度：乙酸乙酯-10％甲醇/乙酸乙酯)，得到5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(吗啉-4-基甲基羰基)苯甲酰基]吡唑(0.05g)，其为固体。实施例75-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(2-羟基乙基)苯甲酰基]吡唑(118)步骤1
0℃下向3-溴苯基乙酸(10g，46.5mmol)在四氢呋喃(100ml)中的溶液内加入乙硼烷(70ml，1.0M溶液，含于四氢呋喃中)。令该反应混合物升至室温。16小时后，使该反应混合物冷却至0℃，滴加入水(50ml)。分离有机层，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥和真空浓缩。残余物通过快速色谱纯化(洗脱梯度：40-60％乙酸乙酯/己烷)，得到3-(2-羟乙基)溴苯(9.0g)。步骤2
0℃下，向3-(2-羟乙基)溴苯(4.0g，20mmol)在二氯甲烷(100ml)中的溶液内加入叔丁基二甲基甲硅烷基氯(3.6g，24mmol)、二甲基氨基吡啶(0.61g，5mmol)和三乙胺(3.6ml，25.9mmol)。1小时后，该反应混合物用盐水、饱和氯化铵洗涤，用硫酸钠干燥和真空浓缩。残余物通过快速色谱纯化(洗脱梯度：0-10％己烷/乙酸乙酯)，得到3-(2-叔丁基-二甲基甲硅烷氧基乙基)溴苯(6.0g)。步骤3
把(乙氧基亚甲基)氰基乙酸乙酯(26ml，154mmol)和4-氟苯基肼(19.4g，154mmol)在乙醇(125ml)中的混合物加热回流。16小时后，令该反应混合物冷却至室温。过滤出过滤并干燥，得到5-氨基-4-乙基羧基-1-(4-氟苯基)吡唑(28g)，将其悬浮在1N氢氧化锂(100ml)和甲醇(250ml)的混合物中。将该反应混合物加热回流。16小时后，该反应混合物经烧结漏斗(sinterfunnel)过滤，滤液用2N盐酸(65ml)过滤。过滤出固体并干燥，得到5-氨基-4-羧基-1-(4-氟苯基)吡唑(21g)。步骤4
室温下搅拌5-氨基-4-羧基-1-(4-氟苯基)吡唑(15g，68mmol)、aldrathiol-2(14.9g，68mmol)和三苯基膦(17.8g，68mmol)在乙腈(21)中的混合物。16小时后，过滤出产物并干燥，得到5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-(2-吡啶基硫代羧基)-吡唑(14g)。步骤5
向含有镁屑(0.386g，15.9mmol)和四氢呋喃(10ml)的烘干烧瓶中加入3-(2-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基)溴苯(5.0g，15.9mmol)，将该反应混合物加热回流。3小时后，令反应混合物冷却至室温，加入5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-(2-吡啶基硫代羧基)吡唑(2.37g，7.6mmol)，连续搅拌16小时。将反应混合物真空浓缩。把残余物溶于乙酸乙酯，用氯化铵水溶液和盐水洗涤，并且用硫酸钠干燥。真空除去有机物，残余物通过快速色谱纯化(洗脱梯度：10-30％乙酸乙酯/己烷)，得到5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(2-叔丁基二甲基-甲硅烷氧基乙基)苯甲酰基]吡唑(1.20g)。步骤6
向5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(2-叔丁基二甲基-甲硅烷氧基乙基)-苯甲酰基]吡唑(1.2g，3.0mmol)在四氢呋喃(25ml)中的溶液内加入叔丁基氟化铵(3.6ml，3.6mmol，1M的四氢呋喃溶液)。1小时后，将该反应混合物倾入盐水，产物提取到乙酸乙酯。有机层用硫酸钠干燥，过滤和真空浓缩。残余物通过快速色谱纯化(洗脱梯度：40-100％乙酸乙酯/己烷)，得到5-氨基1-(4-氟苯基)-4-[3-(2-羟基乙基)苯甲酰基]吡唑(0.8g)。实施例85-氨基-1-(4-氟苯基)-4-{3-[4-甲基哌嗪-1-基)乙基)-苯甲酰基]吡唑二盐酸盐(31)的合成步骤1
向5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(2-羟基乙基)-苯甲酰基]吡唑(0.8g，2.5mmol)在吡啶(10ml)中的溶液内加入甲磺酰氯(0.29ml，3.7mmol)。2小时后，将反应混合物倾入2N盐酸(40ml)，产物提取到乙酸乙酯。有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤和真空浓缩。残余物通过快速色谱纯化(洗脱梯度：40-100％乙酸乙酯/己烷)，得到5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(2-甲磺酰氧基乙基)苯甲酰基]吡唑(0.87g)。步骤2
5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(2-甲磺酰氧基乙基)苯甲酰基]吡唑(0.22g，0.55mmol)、N-甲基哌嗪(0.18ml，1.64mmol)和碳酸钾(0.22g，1.64mmol)在二甲基甲酰胺(10ml)中的混合物在70℃下加热。4小时后，令反应混合物冷却至室温，倾入水中，产物提取到乙酸乙酯中。有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤和真空浓缩。残余物通过快速色谱纯化(洗脱梯度：乙酸乙酯-20％甲醇/乙酸乙酯)，得到5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-{3-[4-甲基哌嗪-1-基)乙基)苯甲酰基]吡唑，其被转化为盐酸盐(mpt.272.9-273.9)。实施例95-氨基-4-[3-(2-氨基乙基)苯甲酰基]-1-(4-氟苯基)-吡唑盐酸盐(47)步骤1
在室温下搅拌5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(2-甲磺酰氧基-乙基)-苯甲酰基]吡唑(0.40g，0.99mmol)、叠氮化钠(0.19ml，2.97mmol)和碳酸钾(0.41g，2.97mmol)在二甲基甲酰胺(15ml)中的混合物。16小时后，将反应混合物倾入盐水，产物提取到乙酸乙酯中。有机层用硫酸钠干燥，过滤和真空浓缩。残余物通过快速色谱纯化(洗脱梯度：20-50％乙酸乙酯/己烷)，得到5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(2-叠氮基乙基)苯甲酰基]吡唑(0.32g)。步骤2
向5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(2-叠氮基乙基)苯甲酰基]-吡唑(0.31g，0.9mmol)在四氢呋喃(15ml)中的溶液内加入三苯基膦(3.55g，1.36mmol)。48小时后，将反应混合物真空浓缩。把残余物溶于2N氢氧化钠，产物提取到乙酸乙酯中。有机层用硫酸钠干燥，过滤和真空浓缩。该产物转化为其盐酸盐，并且由甲醇-乙酸乙酯的混合物重结晶，得到5-氨基-4-[3-(2-氨基乙基)苯甲酰基]-1-(4-氟苯基)吡唑盐酸盐(0.22g)。实施例105-氨基-4-[3-(叔丁氧基羰基甲氧基)苯甲酰基]-1-(4-氟苯基)吡唑步骤1
含有镁屑(0.408g，179mmol)和四氢呋喃(10ml)的烘干烧瓶中加入3-溴苯甲醚(3.1g，17mmol)，将该反应混合物加热回流。2小时后，令反应混合物冷却至室温，加入5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-(2-吡啶基硫代羧基)吡唑(1.5g，4.8mmol)并连续搅拌1小时。用水中止该反应混合物，产物提取到乙酸乙酯中。有机层用氯化铵水溶液和盐水洗涤，并且用硫酸钠干燥。真空除去有机物，过滤残余物，用己烷洗涤，得到5-氨基-1-(4-氟-苯基)-4-(3甲氧基苯甲酰基)吡唑(1.20g)。步骤2
向5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-(3-甲氧基苯甲酰基)-吡唑(3.0g，10.0mmol)在二氯甲烷(25ml)中的冰冷溶液内加入三溴化硼(51ml，5lmmol，1M溶液，含于二氯甲烷中)。1小时后，将反应混合物倾入盐水，产物提取到乙酸乙酯中。有机层用硫酸钠干燥，过滤和真空浓缩，得到5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-羟基苯甲酰基]-吡唑(2.4g)。步骤3
将5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-羟基苯甲酰基]吡唑(1.0g，3.3mmol)、溴乙酸叔丁酯(1.4g，7.2mmol)和碳酸钾(1g，7.2mmol)在乙腈中的混合物在70℃下加热过夜。冷却该反应混合物，用乙酸乙酯稀释和过滤。真空浓缩滤液，残余物通过快速色谱纯化(洗脱梯度：10％丙酮/己烷)得到5-氨基-4-[3-(叔丁氧基羰基甲基氧基)苯甲酰基]-1-(4-氟苯基)吡唑(1.2g)，其为固体。实施例115-氨基-4-[3-羧基甲氧基)苯甲酰基]-1-(4-氟苯基)吡唑(119)步骤1
室温下搅拌5-氨基-4-[3-(叔丁氧基羰基甲氧基)苯甲酰基]-1-(4-氟苯基)吡唑(1.0g，3.3mmol)和三氟乙酸(15ml，194mmol)在二氯甲烷(15ml)中的混合物过夜。真空除去有机物，把残余物溶于甲苯中。浓缩该溶液，残余物在乙酸乙酯和己烷间研制，得到5-氨基-4-[3-(羧基甲氧基)苯甲酰基]-1-(4-氟苯基)吡唑(0.8g)，其为固体。 实施例125-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(甲基氨基羰基甲氧基)-苯甲酰基]吡唑(34)步骤1
向5-氨基-4-[3-(羧基甲氧基)苯甲酰基]-1-(4-氟苯基)-吡唑(0.5g，1.43mmol)在四氢呋喃(10ml)中的溶液内加入羰基二咪唑(0.3g，1.85mmol)，在60℃下加热该反应混合物。1小时后，加入甲胺(10ml，5mmol，0.5 M溶液，含于四氢呋喃)，该反应在60℃下持续过夜。令反应混合物冷却，用乙酸乙酯稀释。分离有机层，用盐水洗涤并用硫酸钠干燥。真空除去有机物，残余物通过快速色谱纯化(洗脱梯度：20-30％丙酮/己烷)，得到5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(甲基氨基羰基甲氧基)苯甲酰基]吡唑(0.25g，mpt.195.6-196.3 C)，其为固体。
按照上文实施例12进行，但甲胺用吗啉代替得到5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(吗啉-4-基羰基甲氧基)-苯甲酰基]吡唑(35)。实施例135-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-{3-(吗啉-4-基)丙基氨基}苯甲酰基]-吡唑(48)步骤1
在10分钟内间歇地将苯甲酰基乙腈(14.5g，10mmol)加入到冷却的发烟硝酸。搅拌该反应混合物15分钟，随后倾入冰。过滤出固体，由乙醇重结晶，得到2-(3-硝基苯甲酰基)-乙腈(5.4 g)，其为褐色固体。步骤2
在氮气氛下将2-(3-硝基苯甲酰基)乙腈(13.75g，72.3mmol)和N，N-二苯基甲脒(14.2g，72.3mmol)在二甲苯(200ml)中的混合物加热回流。3小时后，令该反应混合物冷却至室温，用二甲苯稀释，得到2-(3-硝基苯甲酰基)-3-苯基氨基-丙烯腈(15.7g)，其为黄色固体。步骤3
在氮气氛下将4-氟苯基肼(2.24g，15.57mmol)和2-(3-硝基苯甲酰基)-3-苯基氨基丙烯腈(4.15g，14.16mmol)在乙醇(50ml)中的混合物加热回流。1稀释后，令反应混合物冷却至室温，继续搅拌3小时。过滤出固体并干燥，得到5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-(3-硝基苯甲酰基)吡唑(4.5g)，其为固体。步骤4
在氮气氛下将5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-(3-硝基苯甲酰基)吡唑(4.0g，24.52)、Fe粉(3.84g，68mmol)和氯化铵(3.84，71.78mmol)在乙醇(135ml)和水(64ml)中的混合物加热回流。1小时后，令反应混合物冷却至室温并搅拌过夜。经Celite过滤该反应混合物并且真空浓缩滤液。残余物在水和乙酸乙酯之间分配。分离有机层，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥和真空浓缩，得到5-氨基-4-(3-氨基-苯甲酰基)-1-(4-氟-苯基)吡唑(3.5g)，其为固体。步骤5
5-氨基4-(3-氨基苯甲酰基)-1-(4-氟苯基)吡唑(0.5g，1.6mmol)、1-溴-3-氯丙烷(0.26g，1.6mmol)和碳酸铯(0.52g，1.6mmol)在二甲基甲酰胺(25ml)中于80℃下加热。2天后，令反应混合物冷却至室温，用乙酸乙酯稀释。有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥和真空浓缩。残余物通过快速色谱纯化(洗脱梯度：20％丙酮/己烷)，得到5-氨基-4-[3-(3-氯丙基氨基)苯甲酰基]-1-(4-氟苯基)吡唑(0.2g)，其为固体。步骤6
将5-氨基-4-[3-(3-氯丙基氨基)苯甲酰基]-1-(4-氟苯基)-吡唑(0.05g，0.13mmol)、吗啉(0.1ml，1.1mmol)、碳酸钾(0.1g)和碘化钾(0.1g)在乙腈(3ml)中的混合物加热回流。2天后，把该反应混合物倾入盐水，产物提取到乙酸乙酯中。分离有机层，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥和真空浓缩。残余物通过快速色谱纯化(洗脱梯度：3％MeOH/CH2Cl2)，得到5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-{-(吗啉-4-基)丙基氨基}-苯甲酰基]吡唑，其为固体。实施例145-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-{2-(哌啶-1-基)乙氧基}苯甲酰基]吡唑盐酸盐(81)步骤1
5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-羟基苯甲酰基]吡唑(得自实施例10，步骤2，1.5g，5.05mmol)与甲苯(50mL)混合。加入2-溴乙醇(1.79mL，25.23mmol)，随后使该反应混合物冷却至0℃。加入三苯基膦(5.425g，20.69mmol)和偶氮二甲酸二乙酯(3.26mL，20.69mmol)。令反应升至室温。搅拌16小时之后，该反应用饱和NH4Cl水溶液中止，用乙酸乙酯提取，干燥(MgSO4)，过滤和真空下浓缩。产物(5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(2-溴乙氧基)苯甲酰基]吡唑)通过柱色谱在硅胶上用40∶1 CH2Cl2/MeOH纯化，随后与一起搅拌20分钟，过滤并干燥，得到0.785g的产物。步骤2
5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(2-溴乙氧基)苯甲酰基]吡唑(0.6g，1.48mmol)与哌啶(1.47mL，14.8mmol)和乙醇(1OmL)混合并加热回流16小时。真空下浓缩该反应混合物。所得的残余物在NaHCO3的饱和水溶液和乙酸乙酯之间分配，并且用乙酸乙酯提取3次。干燥有机提取物(MgSO4)，过滤，真空下浓缩，通过柱色谱在硅胶上用16∶1 CH2Cl2/MeOH纯化。将产物溶解在乙酸乙酯，随后加入盐酸(1.0M，1.0当量)形成盐酸盐，将其过滤并干燥，得到0.413g的5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-{2-(哌啶-1-基)乙氧基}苯甲酰基]-吡唑.HCl(mpt 210.2-21 1.2℃)。
按照步骤2进行，但哌啶被二乙醇胺、二甲胺、N-甲基哌嗪、2-氨基乙醇、双(2-甲氧基乙基)胺、二乙胺、甲胺、氨和3-氧代哒嗪代替，得到下列化合物：实施例155-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(吡啶-2-基甲氧基)苯甲酰基]吡唑(82)
5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-羟基苯甲酰基]吡唑(得自实施例10，步骤2)(0.5g，1.68mmol)、2-吡啶基甲醇(0.81mL，8.41mmol)、三苯基膦(1.81g，6.9mmol)和叠氮基二甲酸二乙酯(1.09mL，6.9mmol))混合在甲苯(50mL)中。将反应混合物搅拌16小时，随后用NH4Cl的饱和水溶液中止，用乙酸乙酯提取3次。产物由乙酸乙酯中被提取到10％的HCl水溶液内。水层用NaOH中和，用乙酸乙酯提取。干燥有机提取物(MgSO4)，过滤和真空下浓缩。残余物通过柱色谱在硅胶上用1∶1己烷/乙酸乙酯纯化，得到0.165g的5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(吡啶-2-基甲氧基)苯甲酰基]吡唑(mpt.176.1-177.3℃)。
2-吡啶基甲醇用乙醇酸(glycolic acid)、1-(2-羟基乙基)-2-吡咯烷酮和4-羟基哌啶代替，得到下列化合物。实施例165-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-异丙基氨基羰基氧基苯甲酰基]吡唑(83)
将5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-羟基苯甲酰基]吡唑(得自实施例10，步骤2)(0.30g，1.01mmol)与K2CO3(0.418g，3.03mmol)和THF(6mL)混合。该混合物在冰浴中冷却，随后加入异氰酸异丙酯(0.12mL，1.21mmol)。令反应升至室温，搅拌16小时。该反应混合物用水中止，提取到乙酸乙酯中，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩至干。将残余物在甲醇和二氯甲烷中搅拌1小时，过滤，得到0.118g的5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-异丙基氨基-羰氧基苯甲酰基]吡唑(mpt.225.2-230.1℃)。
异氰酸异丙酯用异氰酸乙酯代替制得5-氨基-1(4-氟苯基)-4-[3-乙基氨基羰氧基苯甲酰基]吡唑(84)。Mpt.201.2-202.8℃。实施例175-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-碘苯甲酰基]吡唑步骤1
将正丁基锂(30.5ml，76mmol，2.5 M在己烷中的溶液)滴加到二异丙胺(10.6ml，76mmol)在10ml干燥四氢呋喃中的冷却(0℃)溶液内。一旦加料完毕，该溶液在0℃下保持10分钟，随后冷却至-50℃。随后把这个冷却LDA溶液加入到-50℃的乙腈(2.37ml，45.3mmol)和4-碘苯甲酸乙酯(10.0g，36.2mmol)在干燥四氢呋喃(18ml)中的溶液内。一旦加料完毕，在-50℃下搅拌该反应，随后升至0℃。加入饱和氯化铵(20ml)，令该反应混合物升至室温。产物提取到乙醚中，用1N盐酸(50ml)洗涤。有机物用盐水(50ml)洗涤，用MgSO4干燥，随后真空浓缩为红色油。该油经小硅胶塞用3∶1-2∶1己烷/乙酸乙酯作为洗脱剂纯化。真空浓缩柱馏分，得到2-(3-碘苯甲酰基)-乙腈(8.3g)，其为黄色油。步骤2
氮气氛下加热回流2-(3-碘苯甲酰基)乙腈(36.2g，133.5mmol)和N，N-二苯基甲脒(26.2g，133.5mmol)在甲苯(200ml)中的混合物。8小时后，令反应混合物冷却至室温，用乙醚稀释(200ml)，得到2-(3-碘苯甲酰基)-3-苯基氨基丙烯腈(31.2g)，其为固体。步骤3
氮气氛下加热回流4-氟苯基肼(26.6g，211mmol)和2-(3-碘苯甲酰基)-3-苯基氨基丙烯腈(79g，211mmol)在乙醇(400ml)中的混合物。30分钟后，令该反应混合物冷却至室温，用己烷稀释，得到5-氨基-4-(3-碘苯甲酰基)-1-(4-氟苯基)吡唑(75.1g)，其为固体。
步骤3中的4-氟苯基肼用4-甲基苯基肼、3-甲氧基苯基肼、4-氨磺酰基苯基肼、2，4-二甲基苯基肼、2-甲基苯基肼、4-氯-2-甲基苯基肼、4-甲基磺酰基苯基肼、2-乙基苯基肼和2，4-二氟苯基肼代替分别得到：5-氨基-4-(3-碘代苯甲酰基)-1-(4-甲基苯基)吡唑， 5-氨基-4-(3-碘代苯甲酰基)-1-(3-甲氧基苯基)吡唑，5-氨基-4-(3-碘代苯甲酰基)-1-(4-氨磺酰基苯基)吡唑，5-氨基-4-(3-碘代苯甲酰基)-1-(2，4-二甲基苯基)吡唑，5-氨基-4-(3-碘代苯甲酰基)-1-(2-甲基苯基)吡唑，5-氨基-4-(3-碘代苯甲酰基)-1-(4-氯-2-甲基苯基)吡唑，5-氨基-4-(3-碘代苯甲酰基)-1-(4-甲基磺酰基苯基)吡唑，5-氨基-4-(3-碘代苯甲酰基)-1-(2-乙基苯基)吡唑，和5-氨基-4-(3-碘代苯甲酰基)-1-(2，4-二氟苯基)吡唑。实施例185-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(1，2-二羟基乙基)苯甲酰基]吡唑(85)步骤1
向5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-碘代苯甲酰基]吡唑(10g，24.6mmol)在100ml二甲基甲酰胺中的溶液内加入乙烯基三丁基锡(8.57g，27.0mmol)和四(三苯基膦)钯(O)(1.42g，1.23mmol)。所得的溶液用氩气脱气，随后升至100℃达12小时。
令该反应冷却至室温，倾入500ml蒸馏水，用3x100ml 1∶1乙醚/乙酸乙酯提取。有机物用盐水(150ml)洗涤，用MgSO4干燥并真空浓缩为褐色油。该油通过快速色谱用5∶1-4∶1己烷/乙酸乙酯纯化除去杂质并且用3∶1-2∶1己烷/乙酸乙酯洗脱出预期产物。真空浓缩柱馏分，得到5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-乙烯基苯甲酰基]吡唑(4.48g)，其为白色固体。步骤2
向5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-乙烯基苯甲酰基]吡唑(4.48g，13.95mmol)在50ml叔丁醇中的混悬液内加入存在于50ml蒸馏水中的N-甲基吗啉N-氧化物(1.79g，15.35mmol)。室温下向该混合物中加入2.5％存在于叔丁醇中的四氧化锇(5.25ml，0.42mmol)。5小时后，该均匀反应用乙酸乙酯(25ml)稀释，分离有机物，用盐水(25ml)洗涤，用MgSO4干燥，随后真空浓缩为褐色油。该油通过快速柱色谱用1∶1己烷/乙酸乙酯纯化除去杂质，并且用乙酸乙酯洗脱出预期产物。真空浓缩柱馏分，得到5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(1，2-二羟基乙基)苯甲酰基]吡唑(4.48g)，其为白色泡沫。由己烷将该泡沫研制为固体(2.36g)。
上述步骤1中的5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-碘代苯甲酰基]吡唑用下列化合物代替：5-氨基-1-(2，4-二氟苯基)-4-[3-碘代苯甲酰基]吡唑，和5-氨基-1-(2-甲基苯基)-4-[3-碘代苯甲酰基]吡唑，分别得到5-氨基-1-(2，4-二氟苯基)-4-[3-(1，2-二羟基乙基)苯甲酰基]吡唑(103)，和5-氨基-1-(2-甲基苯基)-4-[3-(1，2-二羟基乙基)苯甲酰基]吡唑(109)。实施例195-氨基-1-(2，4-二氟苯基)-4-[3-(1-哌啶基甲基)苯甲酰基]吡唑(86)步骤1
向5-氨基-1-(2，4-二氟苯基)-4-[3-(1，2二羟基乙烷)苯甲酰基]吡唑(10.1g，28mmol)在100ml叔丁醇中的混悬液内加入100ml蒸馏水和高碘酸钠(18.06g，84mmol)。2小时后，通过真空过滤收集固体沉淀，用300ml蒸馏水洗涤，真空干燥，得到8.28g的5-氨基-1-(2，4-二氟苯基)-4-[3-甲酰基苯甲酰基]吡唑，其为白色固体。步骤2：
向5-氨基-1-(2，4-二氟苯基)-4-[3-甲酰基苯甲酰基]吡唑(0.3g，0.92mmol)、哌啶(0.1ml，1.0mmol)、乙酸(0.05ml)在1，2-二氯乙烷(5ml)中的溶液内加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.29g，1.37mmol)。室温下搅拌12小时，该反应用10％盐酸和乙酸乙酯(10ml)稀释。分离水层，用氢氧化钠中和至pH9，随后用乙酸乙酯稀释。分离出合并的有机物，用盐水(25ml)洗涤，用MgSO4干燥，随后真空浓缩得到褐色油。该油通过快速柱色谱用1∶1己烷/乙酸乙酯纯化除去杂质，并且用乙酸乙酯洗脱出预期产物。真空浓缩柱馏分，得到5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-(1-哌啶基-甲基)-苯甲酰基]吡唑，其为油(0.211g)。由己烷/乙酸乙酯将该化合物研制为固体。
上述步骤1中的哌啶用下列化合物代替：吗啉，N-甲基哌嗪，4-羟基哌啶，2-氨基吡啶，3-氨基吡啶，4-甲基咪唑，3-氨基吡唑，和2-甲基咪唑，得到下列化合物：实施例205-氨基-1-(3-甲基苯基)-4-[3-{N-氧代吡啶-3-基)1苯甲酰基]吡唑(70)
在氩气氛下，5-氨基-4-(3-碘代苯甲酰基)-1-(2-甲基苯基)吡唑(得自实施例17)(0.98g，2.4mmol)、频哪醇二硼(0.68g，2.7mmol)、[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(0.2g，.24mmol)和乙酸钾(0.72g，7.3mmol)在DMF(10ml)中的混合物在80℃下加热。2小时后，令反应混合物冷却至室温，加入3-溴吡啶N-氧化物(0.47g，2.7mmol)、[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(0.2g，.24mmol)和2M碳酸钠(6.1ml，12.2mmol)，在80℃下加热。16小时后，令反应混合物冷却至室温，倾入盐水，产物提取到乙酸乙酯中。有机层用硫酸钠干燥，过滤，随后将该溶液蒸发至干。残余物通过快速色谱纯化(梯度洗脱：乙酸乙酯-20％甲醇/乙酸乙酯)，由甲醇/乙酸乙酯/己烷重结晶后，得到5-氨基-1-(3-甲基苯基)-4-[3-(N-氧化吡啶-3-基)苯甲酰基]吡唑(0.57g，mpt.190.5-191.2℃)。
5-氨基-4-(3-碘代苯甲酰基)-1-(2-甲基苯基)吡唑/3-溴吡啶N-氧化物用下列化合物代替：5-氨基-4-(3-碘代苯甲酰基)-1-(4-甲基苯基)吡唑/3-溴吡啶，5-氨基-4-(3-碘代苯甲酰基)-1-(3-甲氧基苯基)吡唑/3-溴吡啶，5-氨基-4-(3-碘代苯甲酰基)-1-(4-氨磺酰基苯基)吡唑/3-溴吡啶，5-氨基-4-(3-碘代苯甲酰基)-1-(2，4-二甲基苯基)吡唑/3-溴吡啶，5-氨基-4-(3-碘代苯甲酰基)-1-(2-甲基苯基)吡唑/3-溴吡啶-N-氧化物，5-氨基-4-(3-碘代苯甲酰基)-1-(4-氯-2-甲基苯基)吡唑/3-溴吡啶，5-氨基-4-(3-碘代苯甲酰基)-1-(4-甲基磺酰基苯基)吡唑/3-溴吡啶，5-氨基-4-(3-碘代苯甲酰基)-1-(2-乙基苯基)吡唑/3-溴吡啶，和5-氨基-4-(3-碘代苯甲酰基)-1-(2，4-二氟苯基)吡唑/2-溴咪唑，分别得到下列化合物(如果适当其为盐酸盐)：5-氨基-1-(4-甲基苯基)-4-[3-(吡啶-3-基)苯甲酰基]吡唑(65)，5-氨基-1-(3-甲氧基苯基)-4-[3-(吡啶-3-基)苯甲酰基]吡唑(66)，5-氨基-1-(4-氨磺酰基苯基)-4-[3-(吡啶-3-基)苯甲酰基]吡唑(68)，5-氨基-1-(2，4-二甲基苯基)-4-[3-(吡啶-3-基)苯甲酰基]吡唑(69)，5-氨基-1-(2-甲基苯基)-4-[3-(N-氧代吡啶-3-基)苯甲酰基]吡唑(70)，5-氨基-1-(4-氯-2-甲基苯基)-4-[3-(吡啶-3-基)苯甲酰基]吡唑(73)，5-氨基-1-(4-甲基磺酰基苯基)-4-[3-(吡啶-3-基)苯甲酰基]吡唑(75)，5-氨基-1-(2-乙基苯基)-4-[3-(吡啶-3-基)苯甲酰基]吡唑(76)和5-氨基-1-(2，4-二氟苯基)-4-[3-(咪唑-2-基)苯甲酰基]吡唑(77)。实施例215-氨基-1-(2，4-二氟苯基)-4-[N-氧代吡啶-3-基)苯甲酰基]吡唑(60)
向5-氨基-1-(2，4-二氟苯基)-4-[3-(吡啶-3-基)苯甲酰基]吡唑(4.6g，12.2mmol)在二氯甲烷(100ml)中的溶液内加入3-氯过苯甲酸(5.6g，18.3mmol)，室温下搅拌该混合物。4小时后，加入10％亚硫酸钠水溶液(50ml)。0.5小时后，分离有机层，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥和过滤。把滤液浓缩至干，残余物通过快速色谱纯化(梯度洗脱：乙酸乙酯-30％甲醇/乙酸乙酯)，由甲醇重结晶后，得到5-氨基-1-(2，4-二氟苯基)-4-[3-(N-氧代吡啶-3-基)苯甲酰基]吡唑(1.3g，Mpt.251.1-251.7℃)。实施例225-氨基-1-(2，4-二氟苯基)-4-[吡啶-4-基)苯甲酰基]吡唑(61)
氩气下将5-氨基-4-(3-溴苯甲酰基)-1-(2，4-二氟苯基)吡唑(.93g，2.5mmol)、4-三丁基申锡烷基吡啶(1.0g，2.7mmol)和双(三苯基膦)氯化钯(.17g，2.5mmol)在DMF(15ml)中的混合物在100℃下加热。16小时后，令反应混合物冷却至室温，加入10％氟化钾水溶液(30ml)。1小时后，把反应混合物倾入盐水，用乙酸乙酯提取，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩至干。残余物通过快速色谱纯化(梯度洗脱：50-100％乙酸乙酯/己烷至5％甲醇/乙酸乙酯)，由甲醇/乙酸乙酯重结晶后，得到5-氨基-1-(2，4-二氟苯基)-4-[3-(吡啶-4-基)苯甲酰基]吡唑(0.42g，Mpt.218-226℃)。实施例235-氨基-1-(2，4-二甲基苯基)-4-[3-(吡啶-3-基)苯甲酰基吡唑盐酸盐(69)步骤1
在氮气和-78℃下向正丁基锂(165ml，264mmol)在丁基醚(250ml)中的溶液内加入3-溴吡啶(25.4ml，264mmol)。1小时后，加入二乙基甲氧基硼烷(52ml，396mmol)。令该混合物升至室温。16小时后，加入水和盐水，分离有机层，用硫酸钠干燥，随后浓缩。所得浆液溶于异丙醇(500ml)，冷却，通过过滤分离出产物，得到二乙基(3-吡啶基)硼烷(29.8g)。步骤2
氩气下将二乙基(3-吡啶基)硼烷(176.4g，1.2mole)、3-碘代苯甲酸甲酯(262g，1mole)、磷酸钾(318.4g，1.5mole)和四(三苯基膦)钯(O)(57.8g，.05mole)在DMF(1000ml)中的混合物在80℃下加热。10小时后，该混合物用水稀释并用乙酸乙酯提取。过滤有机层且用水洗涤。向有机馏分中加入浓HCl(65ml)。分离有机层，用HCl水溶液提取。合并的酸提取液用乙酸乙酯处理，随后用50％氢氧化钠水溶液(55ml)处理。分离有机层，用水和饱和碳酸氢钠溶液洗涤，此后用硫酸钠干燥。过滤该溶液，浓缩得到3-(吡啶-3-基)苯甲酸甲酯(145.3g)。步骤3
向3-(吡啶-3-基)苯甲酸甲酯(126.2g，0.59mole)在THF(600ml)中的溶液内加入乙腈(37ml，0.71mole)，冷却该溶液至40℃。滴加二异丙基酰胺锂化物溶液(590ml，1.18mole)。30分钟后，加入甲醇(25ml)，再经过30分钟后，加入水(110ml)。令该反应混合物升至10℃，加入乙酸乙酯。分离各层，并且水层用1M HCl酸化。水层用乙酸乙酯提取，用己烷稀释且用盐水洗涤。浓缩有机相，随后将其与N，N′-二苯基甲脒(120g，0.61mole)混合于800ml的乙酸乙酯中。室温下搅拌该混合物。3天后，通过过滤收集产物，由异丙醇，己烷重结晶，得到2-(3-吡啶-3-基)苯基-3-苯基丙烯腈(100g)。步骤4
氮气下，将2-(3-吡啶-3-基苯基)-3-苯基丙烯腈(1.0g，3mmol)和2，4-二甲基苯基肼(0.4g，3mmol)在乙醇(30ml)中的溶液加热回流。6小时后，令该反应冷却至室温，浓缩至干，残余物通过快速柱色谱纯化(洗脱梯度：40-100％乙酸乙酯/己烷-10％甲醇/乙酸乙酯)。把纯化的残余物溶于乙酸乙酯，加入HCl/乙醚制成盐。由甲醇/乙酸乙酯纯化后分离出5-氨基-1-(2，4二甲基苯基)-4-[3-(吡啶-3-基)苯甲酰基吡唑盐酸盐(0.74g，m.pt.250.7-251.8)。
按照上述实施例23进行，但步骤4中的2，4-二甲基苯基肼分别用下列化合物代替：苯基肼，2-甲基-4-氯苯基肼，4-甲氧基苯基肼，4-甲基磺酰基苯基肼，2-乙基苯基肼，4-异丙基苯基肼，2-甲氧基苯基肼，3-氯-4-甲基苯基肼，3-氟苯基肼，和3-氟-6-甲基苯基肼，得到下列化合物：实施例245-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-{2(R)，3-二羟基丙氧基}苯甲酰基]吡唑(106)步骤1
向5-氨基-4-(3-羟基苯甲酰基)-1-(4-氟苯基)吡唑(0.5g，1.68mmol)在5ml干燥二甲基甲酰胺中的溶液内加入D-口，口-异丙亚基甘油-口-甲苯磺酸酯(0.72g，2.52mmol)，随后加入无水碳酸钾(0.695g，5.04mmol)。氩气下令该反应升温至80℃。24小时后，使该反应冷却至室温，加入另外500mg的D-口，口-异丙亚基甘油-口-甲苯磺酸酯，氩气下令该反应重新升温至80℃。再经过8小时后，令该反应冷却至室温，用蒸馏水(50ml)稀释，产物提取到乙醚中。合并的有机物用盐水(50ml)洗涤，用MgSO4干燥，随后真空浓缩为黄色油。该油通过快速柱色谱在硅胶上用2∶1-1∶1己烷/乙酸乙酯作为洗脱剂纯化。真空浓缩柱馏分得到556mg的预期乙缩醛。步骤2
向上步制得的乙缩醛(0.556g，1.35mmol)在甲醇(10ml)中的溶液内加入蒸馏水(2ml)和对甲苯磺酸一水合物(5mg)。氩气氛下使该溶液升温至80℃。2小时后，令反应混合物冷却至室温，真空浓缩，得到黄色油，将其再次溶于乙酸乙酯(50ml)和饱和碳酸氢钠(50ml)。分离有机层，用MgSO4干燥，随后真空浓缩得到白色固体。由己烷/乙酸乙酯重结晶，得到196mg的预期二醇化合物(Mpt.150.2-153.0℃)。实施例255-氨基-1-(4-氟苯基)-4-{3-[(2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4(S)-基)甲氧基]苯甲酰基}吡唑(170)
向5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-{2(S)，3-二羟基丙氧基}苯甲酰基]吡唑(0.6g，1.6mmol)在30ml丙酮中的溶液内加入氯化锌(0.34g，2.6mmol)。搅拌该反应混合物并加热回流。13小时后，将该反应混合物浓缩至干，产物通过快速柱色谱在硅胶上用40％EtOAc/己烷作为洗脱剂纯化。产物与1∶1乙醚/己烷搅拌，得到5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-{3-[(2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4(S)-基)甲氧基]苯甲酰基}吡唑。
按照上述方法进行，但丙酮用下列化合物代替： 3-戊酮和甲基乙基酮，分别得到下列化合物：5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-{3-[(2，2-二乙基-1，3-二氧戊环-4(S)-基)甲氧基]苯甲酰基}吡唑(173)和5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-{3-[(2-甲基-2-乙基-1，3-二氧戊环-4(S)-基)甲氧基]苯甲酰基}吡唑(174)。实施例265-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-{2(S)，3-(二乙酰氧基)丙氧基}苯甲酰基]吡唑(165)
向5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-{2(S)，3-二羟基-丙氧基}苯甲酰基]吡唑(1g，2.7mmol)在吡啶(5ml)中的溶液内加入乙酸酐(0.5ml，5.4mmol)和DMAP(0.066g，0.5mmol)，室温下搅拌该反应。16小时后，把该反应混合物倾入盐水，用EtOAc，用硫酸钠干燥，浓缩至干并且通过快速色谱纯化(梯度洗脱，20-60％EtOAc/己烷)。产物由EtOAc/己烷重结晶，得到0.75g的5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-{2(S)，3-(二乙酰氧基)丙氧基}苯甲酰基]吡唑，
按照上述方法进行，但乙酸酐用下列化合物代替：异丁酰氯，和新戊酰氯，分别得到下列化合物：5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-{2(S)，3-(二异丁酰氧基)丙氧基}苯甲酰基]-吡唑(166)和5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-{2(S)，3-(二新戊酰氧基)丙氧基}苯甲酰基]吡唑(167)。实施例275-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-{2(S)，3-(二甲氧基羰氧基)丙氧基}苯甲酰基]吡唑(168)
向5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-{2(S)，3-二羟基-丙氧基}苯甲酰基]吡唑(1g，2.7mmol)在吡啶(5ml)中的溶液内加入氯甲酸甲酯(2ml，25.4mmol)。4天后，把该反应混合物倾入盐水，用EtOAc提取，用硫酸钠干燥，浓缩至干。残余物通过快速色谱纯化(梯度洗脱，40-80％EtOAc/己烷)，得到0.55g的5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-{2(S)，3-(二甲氧基羰氧基)丙氧基}苯甲酰基]吡唑。实施例285-氨基-1-(4-氟苯基)-4-{3-[(1，3-二氧戊环-2-酮-4(R)-基)甲氧基]苯甲酰基}吡唑(171)
向15.0g(40.4mmol)5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-[3-{2(S)，3-二羟基丙氧基}苯甲酰基]吡唑在150ml THF中的混悬液内加入17ml(168mmol)三乙胺。使该混合物冷却至-5℃，在30分钟内加入18ml的光气(20％in甲苯)同时使反应温度维持在0℃以下。一旦加料完毕，在0℃下继续搅拌该反应1小时。随后加入20ml的蒸馏水和5％HCl，直至该溶液的pH为5-6。30分钟后，加入乙酸乙酯，分离有机层，用盐水洗涤，用MgSO4干燥。过滤且真空浓缩，得到黄色油，其通过快速柱色谱用1∶1-1∶2己烷/乙酸乙酯作为洗脱剂纯化。在浓缩柱馏分时沉淀出预期的碳酸酯，得到7.38g的预期产物。实施例295-氨基-1-(4-氟苯基)-4-噻吩甲酰-吡唑(114)
按照实施例1步骤2进行，但2-(3-溴-苯甲酰基)乙腈被2-(2-噻吩甲酰基)乙腈代替，并且随后进行步骤3，得到5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-(2-噻吩甲酰基)-吡唑。
按照实施例1步骤2进行，但2-(3-溴-苯甲酰基)乙腈被2-(2-呋喃酰基(furanoyl))乙腈代替，并且随后进行步骤3，得到5-氨基-1-(4-氟苯基)-4-(2-呋喃酰基)-吡唑(115)。
按照实施例1步骤2进行，但2-(3-溴-苯甲酰基)乙腈被2-(2-甲基-3-呋喃酰基)乙腈代替，而且步骤3中的4-氟苯基肼用2，4-二氟苯基肼代替，得到5-氨基-1-(2，4-二氟苯基)-4-(2-甲基呋喃-3-酰基)-吡唑(116)。
按照实施例实施例1，步骤2进行，但2-(3-溴-苯甲酰基)乙腈用2-(6-喹啉甲酰基(quinolinoyl))乙腈，而且步骤3中的4-氟苯基肼用2，4-二氟苯基肼代替，得到5-氨基-1-(2，4-二氟苯基)-4-(6-喹啉甲酰基)-吡唑盐酸盐(117)(mpt.220-259.2)。实施例30
下面是含有式(I)化合物的代表性药物制剂。片剂
将下列成分均匀混合且压缩为单一刻痕片。成分 质量/片，mg本发明的化合物 400玉米淀粉 50交联羧甲基纤维素钠 25乳糖 120硬脂酸镁 5胶囊制剂
将下列成分均匀混合且装在硬壳明胶胶囊中。成分 质量/胶囊，mg本发明的化合物 200乳糖，喷干 148硬脂酸镁 2混悬液制剂
把下列成分混合形成口服给药的混悬液成分 含量本发明的化合物 1.0g富马酸 0.5g氯化钠 2.0g对羟基苯甲酸甲酯 0.15g对羟基苯甲酸丙酯 0.05g粒状蔗糖 25.5g山梨糖醇(70％溶液) 12.85gVeegum(胶体镁铝硅酸)K(Vanderbilt Co.) 1.0g矫味剂 0.035ml着色剂 0.5mg蒸馏水 适量至100ml可注射制剂
混合下列成分形成可注射制剂。成分 含量本发明的化合物 0.2g乙酸钠缓冲液，0.4M 2.0mlHCl(1N)或NaOH(1N) 适量至适当pH水(蒸馏，灭菌) 适量至20ml
除了水之外，将上述全部成分混合且在60-70℃下加热同时搅拌。在60℃下加入足够量的水，同时剧烈搅拌使成分乳化。随后加入适量水达到100g。栓剂
制备总重量为2.5g的栓剂，其制备通过将本发明的化合物与WitepsolH-15(饱和植物脂肪酸的甘油三酯；Riches-Nelson，Inc.，NewYork)，并且具有下面的组成：本发明的化合物 500mgWitepsolH-15 余量实施例31p-38(MAP)激酶的抑制…体外试验
利用Ahn，N.G.等J.Biol.Chem.Vol.266(7)，4220-4227，(1991)所述方法的较小改进，通过测量在p-38激酶作用下从γ-33P-ATP转移γ-ATP可以测定本发明的化合物的p-38 MAP激酶抑制活性。
重组p38 MAP激酶的磷酰化形式在E.Coli中用SEK-1和MEKK表达，并且随后利用Nickel柱通过亲和色谱纯化。
磷酰化p38 MAP激酶稀释在激酶缓冲液(20mM 3-(N-吗啉基)丙烷磺酸pH 7.2，25mM β-甘油磷酸酯，5mM乙二醇-双(β-氨基乙基醚)-N，N，N′，N′-四乙酸，1mM钒酸钠，1mM二硫苏糖醇，40mM氯化镁)中。加入溶于DMSO中的试验化合物或仅仅加入DMSO(对照)并且令样本在30℃下培养10分钟。通过加入含有MBP和γ-33ATP的物质混合物引发激酶反应。此后在30℃下继续培养20分钟，加入0.75％磷酸中止该反应。利用磷纤维素膜(Millipore，Bedford，MA)从残余γ-33ATP分离出磷酰化MBP，并且利用闪烁计数器定量测定(Packard，Meriden，CT)。
本发明的化合物在本试验中具有活性。一些本发明化合物的p-38抑制活性(表示为IC50，抑制50％被试验p-38酶时的浓度)是： CPD# IC50，μM CPD# IC50，μM 1 1.81 19 1.45 2 3.29 21 2.18 3 1.78 27 2.72 4 6.18 33 1.12 6 1.74 38 6.31 9 1.32 43 6.52 14 1.27 50 1.25实施例32在IHP1细胞中对LPS诱导的TNF-α生产的抑制作用…体外试验
利用Blifeld，C.等Transplantation，Vol.51(2)，498-503，(1991)所述的方法的小改进测定本发明的化合物抑制TNF-α释放的能力。(a)TNF生物合成的诱导
使THP-1细胞悬浮在培养基[RPMI(Gibco-BR1，Gailthersburg，MD)含有15％胎牛血清，0.02mM 2-巯基乙醇]，达到2.5x106细胞/ml的浓度，随后铺板在96孔平板中(各孔中含0.2ml等份试样)。将试验化合物溶于DMSO，此后用培养基稀释，使DMSO的终浓度为5％。向各孔中加入20μl等份的试验溶液或只含有DMSO的培养基。细胞在37℃下培养30分钟。向孔中加入LPS(Sigma，St.Louis，MO)达到终浓度为0.5μg/ml，并且令细胞继续培养2小时。培养期结束后，收集培养上清液，利用下面所述的ELISA试验测定TNF-α存在的量。(b)ELISA试验：
通过特异性捕捉ELISA试验人体、利用Reimund，J.M.等GUT.Vol.39(5)，684-689(1996)所述的抗TNF-α抗体(2TNF-H22和2TNF-H34)测定TNF-α存在的量。
聚苯乙烯96孔平板用50μl/孔的存在于PBS(10ug/ml)中的抗体2TNFH22涂层并且在4℃的加湿室内培养过夜。平板用PBS洗涤，进而用存在于PBS中的5％脱脂干燥乳室温下封阻1小时且用存在于PBS中的0.1％BSA(牛血清白蛋白)洗涤。
TNF标准品是由人重组TNF-α(R & D Systems，Minneapolis，MN)的储备溶液制备。标准品在该试验中的浓度在开始时为10ng/ml，随后进行6次半对数连续稀释。
25μl等份的上述培养上清液或TNF标准品或仅仅是培养基(对照)与25μl等份的生物素化单克隆抗体2TNF-H34(2μg/ml，存在于含0.1％BSA的PBS中)混合，此后加入到各孔中。室温下培养样本2小时同时轻轻振摇，随后用含0.1％BSA的PBS洗涤3次。向各孔中加入50μl的过氧化酶-链霉抗生物素(Zymed，S.San Francisco，CA)溶液，其中在PBS中含有0.416μg/ml的过氧化物酶-链霉抗生物素和0.1％BSA。室温下样本继续培养1小时，随后用含0.1％BSA的PBS洗涤4次。向各孔中50μl的O-苯二胺溶液(1ug/mlO-苯二胺和0.03％过氧化氢，存在于0.2M柠檬酸盐缓冲液pH 4.5中)并且室温下将样本在避光条件下培养30分钟。分别读取样本和参照物在450nm和650nm下的光密度。利用在450nm下的光密度与所用浓度的相关图形测定TNF-α的水平。
IC50值被定义为试验化合物在450nm的吸光度最大值降低至半数时相对应的浓度。本发明的化合物在本试验中具有活性。所选择的化合物的活性如下所示： CPD# IC50，μM CPD# IC50，μM 1 1.77 21 0.61 2 6.30 27 0.83 4 1.26 33 0.14 6 1.04 38 0.69 10 1.62 43 0.17 13 0.77 50 0.51 19 0.17实施例33大鼠中LPS-诱导的TNF-α生产的抑制作用…体内试验
利用Zanetti，G.；Heumann，D.等″在小鼠中静脉内或腹膜内革兰氏阴性菌刺激后细胞因子生产(Cytokine production after intravenous or peritonealGram-negative bacterial challenge in mice)″J.Immunol.，148，1890，(1992)和Sekut，L.，Menius，J.A.等″高水平的全身或局部肿瘤坏死因子在炎症的不同动物模型中的重要性的评估(Evaluation of the significance of elevatedlevels of systemic and localized tumor necrosis factor in different animalmodels of inflammation)″J.Lab.Clin.Med.，124，813，(1994)所述方法的微小改进测定本发明的化合物体内抑制TNF-α释放的能力。
体重110-140g的雌性Sprague-Dawley大鼠(ChaRles River，Hollister，CA)适应环境1周。包括8只小鼠的组口服施用试验化合物或者只施用载体(对照组)，其中的试验化合物溶于含0.9％氯化钠、0.5％羧甲基纤维素钠、0.4％吐温80、0.9％苄醇(CMC载体)的水载体中。30分钟后，给小鼠腹膜内注射50g/kg的LPS(Sigma，St.Louis，MO)。1.5小时后，通过吸入CO2处死小鼠并通过心穿刺术采集血液。在15,600 Xg下离心5分钟使血液沉降，把血清转移到干净的试管中且在-20℃下冷冻，直至通过ELISA试验按照制造商的方案测定TNF-α(Biosource International，Camarillo，CA)。
所选择的本发明的化合物的TNF-α抑制活性，即在30mg下试验组中TNF-α含量相对于载体处理组(对照组)而言的量度，是： CPD# ％抑制 CPD# ％抑制 3 96 19 76 8 86 34 75 16 86实施例34 大鼠中的佐剂关节炎试验.....体内实验
利用大鼠中佐剂诱发的关节炎测定本发明的化合物的抗炎活性。简单地说，体重120-155g的雌性Sprague Dawley大鼠(ChaRles River，Hollister，CA)在使用之前在室内适应1周环境。在第1天，在尾部的1/4近端部位给动物真皮内注射0.1ml的矿物油(Sigma，St.Louis，MO)混悬液，该混悬液经过热灭菌并含有浓度为1mg/0.1ml的干燥乳酪分支杆菌(Difco，Bacto.，Des.，Lot 115979JA/EXP9/99)。
第7天时，施用存在于CMC载体中的试验化合物直至第18天。在第18天时，在给予化合物之后，称量动物的体重。获得临床评分，用量评估水肿在4个爪子和尾部中的强度。对各个爪子的评分指定为0-4并对尾部指定为0-3，使最大评分为19。当在小关节(指骨内、掌指骨间、跖趾间)或大关节(腕/腕骨，踝/跗骨)中没有炎症迹象(肿胀和红色)时，该多关节动物可以被评分为0。当观察到轻微炎症时该动物被评为1，中等水肿是2，严重水肿是3，并且当存在非常严重的水肿时评分为4。当观察到尾部没有水肿或坏死组织迹象时尾部评分为0，当接种注射位点和邻近周围组织表现出轻度水肿时评分为1，当约1/4的尾部或者发炎或者表现出坏死组织时评分为2，当在1/4的尾部表现出严重的坏死或水肿时评分为3。根据临床评分，在远端胫骨、与跗关节紧邻处横切下后爪。分别称量左和右后爪的重量且记录。
当在本试验中测试时，本发明的化合物具有抗炎活性。
本发明通过举例说明和实施例的方式较详细地加以了描述，目的是澄清和易于理解。对于所属领域技术人员很显然的是，在所附 的范围内内可以进行改变和修改。所以，应理解，上述描述举例说明且不起限定作用。所以，本发明范围的限定不能参照上述描述，而应该参照下面的权利要求书，以及该权利要求书所概括的全部等同范围。
本申请中出于各种目的引用的全部专利、专利申请和文献在此全文引入作为参考，达到与各个专利、专利申请或文献分别代表的相同程度。