背景技术
丙型肝炎病毒(HCV)是主要的人类病原体，其在世界范围内感染估计一 亿七千万人，大致是1型人类免疫缺陷病毒感染数量的5倍。这些HCV感 染个体中相当大的部分发展成严重的进行性肝脏疾病，包括肝硬化和肝细 胞癌(Lauer，G.M.；Walker，B.D.N.Engl.J.Med.2001，345，41-52)。
HCV是正链RNA病毒。基于对所推断氨基酸序列进行的比较和5’-非 翻译区的广泛相似性，已经把HCV归类为黄病毒科中独立的属。黄病毒科 的所有成员都具有包封的病毒体，其含有的正链RNA基因组通过翻译单一 的连续的可读框而编码所有已知的病毒专属性蛋白质。
在整个HCV基因组的核苷酸和所编码的氨基酸序列中发现了相当程度 的异质性。已经表征了至少6种主要的基因型，并且已经描述了多于50种 的亚型。HCV的主要基因型在世界范围内的分布是不同的，并且HCV遗传 异质性的临床重要性仍然是难以确定的，尽管对基因型对发病和治疗的可 能影响行了大量的研究。
单链HCV RNA基因组的长度大约是9500个核苷酸，并且具有单一的 可读框(ORF)，其编码由大约3000个氨基酸组成的单一的大的多蛋白。在 被感染的细胞中，这种多蛋白在多个位点被细胞蛋白酶和病毒蛋白酶裂解， 从而产生结构蛋白和非结构(NS)蛋白。就HCV来说，成熟的非结构蛋白 (NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A和NS5B)的产生受到两种病毒蛋白酶的 影响。认为第一种病毒蛋白酶是金属蛋白酶，并且在NS2-NS3接合处进行 裂解；第二种病毒蛋白酶是包含在NS3的N-末端区域内的丝氨酸蛋白酶(也 称为NS3蛋白酶)，并且介导NS3下游的所有随后裂解，既在NS3-NS4A裂 解位点以顺式进行裂解，又在其余的NS4A-NS4B、NS4B-NS5A、NS5A-NS5B 位点以反式进行裂解。NS4A蛋白似乎具有多种功能，其充当NS3蛋白酶 的辅因子，并且可能有助于NS3及其它病毒复制酶组分的膜定位。NS3蛋 白与NS4A形成复合物，这似乎是在所有位点进行加工活动由此提高蛋白 质水解效率所必需的。NS3蛋白还显示出三磷酸核苷酶和RNA解旋酶活性。 NS5B(也称为HCV聚合酶)是依赖于RNA的RNA聚合酶，在HCV的复制 中涉及所述酶。在“Structural Analysis of the Hepatitis C Virus RNA Polymerase in Complex with Ribonucleotides(Bressanelli；S.et al.，Journal of Virology 2002， 3482-3492)和Defrancesco and Rice，Clinics in Liver Disease 2003，7，211-242 中描述了HCV NS5B蛋白。
目前，最有效的HCV疗法使用α-干扰素和利巴韦林的组合，其在40％ 的患者中产生持续的效果(Poynard，T.et al.Lancet 1998，352，1426-1432)。最 新的临床结果证明，作为单一疗法，PEG化的α-干扰素优于未修饰的α-干 扰素(Zeuzem，S.et al.N.Engl.J.Med.2000，343，1666-1672)。然而，即使就 涉及PEG化α-干扰素和利巴韦林组合的实验性治疗方案而言，相当多的患 者也没有出现病毒载量的持续减少。因此，就开发用于治疗HCV感染的有 效疗法而言，存在明显和迫切的需要。
已经披露了HCV NS5B抑制剂。参见WO 2006/046039；WO 2006/046030；WO 2006/029912；WO 2005/080399；WO 2005080399；WO 2005014543；WO 200307945；WO 2003010140；WO 2003010141；WO 200204425；WO 200147883；Harper，S.A.et al.J.Med.Chem.2005，48，4547； 和Harper，S.A.et al.J.Med.Chem.2005，48，1314；以及其中引用的参考文 献。
发明内容
本发明涵盖式I化合物、其可药用盐、组合物和使用这些化合物的治疗 方法。
本发明一个方面为式I化合物或其可药用盐：
其中
R1为-CO2R5或-CONR6R7；
R2为羟基、烷氧基、苄基氧基、-NR8R9或
R3为氢、卤素、烷基、烯基、羟基、苄基氧基或烷氧基；
R4为C5-7环烷基；
R5为氢或烷基；
R6为氢、烷基、环烷基、烷氧基或-SO2R10；
R7为氢、烷基或环烷基；
或NR6R7一起为吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、N-(烷基)哌嗪基 (N-(alkyl)piperazinyl，N上取代有烷基的哌嗪基)、高吗啉基 (homomorpholinyl)、高哌啶基(homopiperidinyl)、吗啉基或硫吗啉基；
R8为氢、烷基、环烷基、羟基烷基、烷氧基烷基、氨基烷基、烷基氨 基烷基、二烷基氨基烷基、(CO2R5)烷基或(CON(R5)(R5))烷基；
R9为氢、烷基、环烷基、羟基烷基、二羟基烷基、烷氧基烷基、氨基 烷基、烷基氨基烷基、二烷基氨基烷基、(CO2R5)烷基或(CON(R5)(R5))烷基；
或-NR8R9一起为吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、高吗啉基、高哌啶基、 吗啉基或硫吗啉基，并且被0-2个选自下述的取代基取代：卤素、羟基、烷 基、羟基烷基、烷氧基烷基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、氨基烷基、 烷基氨基烷基、二烷基氨基烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、N-(烷基) 哌嗪基、吗啉基、硫吗啉基和吡啶基；和
R10为烷基、卤代烷基、环烷基、苯基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、 苄基氨基或(苄基)(烷基)氨基；
或R10为吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、高吗啉基、高哌啶基、吗啉基或 硫吗啉基，并且被0-2个选自下述的取代基取代：卤素和烷基。
本发明另一个方面为式I化合物或其可药用盐：
其中
R1为-CO2R5或-CONR6R7；
R2为羟基、烷氧基或-NR8R9；
R3为氢、卤素、烷基、烯基、羟基、苄基氧基或烷氧基；
R4为C5-7环烷基；
R5为氢或烷基；
R6为氢、烷基、环烷基、烷氧基或-SO2R10；
R7为氢、烷基或环烷基；
R8为氢、烷基、环烷基、羟基烷基、烷氧基烷基、氨基烷基、烷基氨 基烷基、二烷基氨基烷基、(CO2R5)烷基或(CON(R5)(R5))烷基；
R9为氢、烷基、环烷基、羟基烷基、烷氧基烷基、氨基烷基、烷基氨 基烷基、二烷基氨基烷基、(CO2R5)烷基或(CON(R5)(R5))烷基；
或-NR8R9一起为吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、高吗啉基、高哌啶基、 吗啉基或硫吗啉基，并且被0-2个选自下述的取代基取代：卤素、羟基、烷 基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、氨基烷基、烷基氨基烷基、二烷基氨 基烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、N-(烷基)哌嗪基、吗啉基和硫吗啉基； 以及
R10为烷基、卤代烷基、环烷基、氨基、烷基氨基，或二烷基氨基；
或R10为吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、高吗啉基、高哌啶基、吗啉基或 硫吗啉基，并且被0-2个选自下述的取代基取代：卤素和烷基。
本发明另一个方面为式I化合物或其可药用盐：
其中
R1为-CO2R5或-CONR6R7；
R2为羟基、烷氧基或-NR8R9；
R3为氢、卤素、烷基或烷氧基；
R4为C5-7环烷基；
R5为氢或烷基；
R6为氢、烷基、环烷基、烷氧基或-SO2R10；
R7为氢、烷基或环烷基；
R8为氢、烷基、环烷基、羟基烷基、烷氧基烷基、氨基烷基、烷基氨 基烷基或二烷基氨基烷基；
R9为氢、烷基、环烷基、羟基烷基、烷氧基烷基、氨基烷基、烷基氨 基烷基或二烷基氨基烷基；
或-NR8R9一起为吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、高吗啉基、高哌啶基、 吗啉基或硫吗啉基，并且被0-2个选自下述的取代基取代：卤素、羟基、烷 基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、N-(烷基) 哌嗪基、吗啉基和硫吗啉基；
R10为烷基、卤代烷基、环烷基、氨基、烷基氨基或二烷基氨基；
或R10为吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、高吗啉基、高哌啶基、吗啉基或 硫吗啉基，并且被0-2个选自下述的取代基取代：卤素和烷基。
本发明另一个方面为式I化合物，其中R1为羧基。
本发明另一个方面为式I化合物，其中R1为-CONR6R7，R6为-SO2R10， 以及R7为氢。
本发明另一个方面为式I化合物，其中R2为-NR8R9。
本发明另一个方面为式I化合物，其中R3为氢。
本发明另一个方面为式I化合物，其中R3为卤素、烷基或烷氧基。
本发明另一个方面为式I化合物，其中R4为环己基。
本发明另一个方面为式I化合物，其中R10为二烷基氨基。
本发明另一个方面为式I化合物，其中R10为吡咯烷基、哌啶基、哌嗪 基、高吗啉基、高哌啶基、吗啉基或硫吗啉基，并且被0-2个选自下述的取 代基取代：卤素和烷基。
任何变量(包括R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9和R10)的任何范 围可独立与任何其它变量的范围一起使用。
除非另有说明，这些术语具有下述意义。“烷基”的意思是由1至6个碳 所组成的直链或支链烷基。“烯基”的意思是由2至6个碳所组成且具有至少 一个双键的直链或支链烷基。“环烷基”的意思是由3至7个碳所组成的单环 环系。“羟基烷基”、“烷氧基”及具有经取代烷基部份的其它术语包括由针对 所述烷基部份的1至6个碳原子所组成的直链与支链异构体。“卤代烷基” 与“卤代烷氧基”包括所有卤化异构体，从单卤素取代的烷基至全卤素取代的 烷基。“芳基”包括碳环芳族取代基与杂环芳族取代基。括号与多重括号术语 意在向本领域技术人员阐明键合关系。例如，如((R)烷基)那样的术语指进 一步被取代基R取代的烷基取代基。
作为用于画出一些化合物结构的软件所形成的人为结构式(artifact)，一 些化合物省略了氢(特别是与杂原子相连的氢)。当本领域技术人员可合理理 解氢应该是所述化合物的部分时，本说明书应该被阅读为包括所省略的氢。
本发明包括所述化合物的所有可药用盐形式。可药用盐为其中抗衡离 子不会显著地助长化合物的生理活性或毒性且其本身作为药理等价物的那 些可药用盐。这些盐可根据一般有机技术使用商购试剂来制备。一些阴离 子盐形式包括醋酸盐、醋硬脂酸盐(acistrate)、苯磺酸盐、溴化物、氯化物、 柠檬酸盐、富马酸盐、葡萄糖醛酸盐、氢溴酸盐、盐酸盐、氢碘酸盐、碘 化物、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、硝酸盐、双羟萘酸盐、磷酸盐、琥 珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐及昔萘酸盐(xinofoate)。一些阳离 子盐形式包括铵盐、铝盐、苄星(benzathine)盐、铋盐、钙盐、胆碱盐、二 乙胺盐、二乙醇胺盐、锂盐、镁盐、葡甲胺盐、4-苯基环己胺盐、哌嗪盐、 钾盐、钠盐、丁三醇胺(tromethamine)盐及锌盐。
本发明的一些化合物具有不对称碳原子(例如下文中的化合物)。本发明 包括所有立体异构形式，包括对映异构体与非对映异构体以及立体异构体 的混合物如外消旋体。一些立体异构体可使用本领域中已知的方法来制备。 所述化合物的立体异构混合物与相关中间体的立体异构混合物可根据本领 域中已知的方法来分离成单独的异构体。当在以下方案和表格中描绘分子 结构时使用的楔形线(wedge)和虚线(hash)仅意在表示相对立体化学，而不应 该被解释为暗示绝对立体化学指定。
合成方法
式I化合物可通过本领域已知的方法(包括如下描述的那些方法)来制 备。一些试剂和中间体是本领域已知的。其它试剂和中间体可通过本领域 已知的方法使用容易获得的物质来制备。用于描述式I化合物合成的变量仅 意在说明如何制备，而不应该与在权利要求书和说明书其它段落中使用的 变量相混淆。
用在方案中的缩写通常符合本领域使用的惯例。一些例子如下所述： THF指的是四氢呋喃；DMF指的是N，N-二甲基甲酰胺；RCM指的是环合 易位(ring-closing methasis)；Boc指的是叔丁氧基羰基；TFA指的是三氟乙 酸；DMA指的是N，N-二甲基乙酰胺；PPh3指的是三苯基膦；OAc指的是 乙酸酯或乙酸盐；Me指的是甲基；COD(或cod)指的是1，5-环辛二烯；dtbpy 指的是4，4’-二叔丁基-2，2’-联吡啶；dba指的是二亚苄基丙酮 (dibenzylideneacetone)；Xantphos指的是4，5-二(二苯基膦基)-9，9-二甲基黄嘌 呤；aq指的是含水溶液；EtOH指的是乙醇；MeOH指的是甲醇；TBTU指 的是2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基四氟硼酸盐；DMSO指的是二 甲基亚砜；HATU指的是O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基六氟 磷酸盐；EEDQ指的是2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1，2-二氢喹啉；WSC指的是 1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基碳二亚胺盐酸盐；DMAP指的是4-二甲基氨 基吡啶；n-Bu指的是正丁基；BEMP指的是2-叔丁基亚氨基-2-二乙基氨基 -1，3-二甲基全氢-1，3，2-二氮杂磷杂环己烯(聚合物结合的)；DIPEA指的是二 异丙基乙基胺；以及TEA指的是三乙胺。
可用于合成式I化合物的一些二酯中间体可通过使用方案1中描绘的一 般方法学来制备。
方案1.
1H-吲哚-6-甲酸与环己酮的缩合可产生3-环己烯基-1H-吲哚-6-甲酸。该 吲哚酸可先后经受还原和酯化，从而得到3-环己基-1H-吲哚-6-甲酸甲酯。
可选择地，3-环己基-1H-吲哚-6-甲酸甲酯可以按以下两步操作来制备， 所述两步操作包括对1H-吲哚-6-甲酸进行最初酯化(例如使用重氮甲烷的醚 (ether)溶液)，随后与环己酮缩合，然后进行还原。
所得吲哚酯用三溴化吡啶鎓(pryridinium tribromide)于THF和氯仿的混 合物中的溶液处理，这可产生2-溴-3-环己基-1H-吲哚-6-甲酸甲酯。该中间 体可用在各种偶联中，例如使用合适的钯催化剂来与2-甲酰基-苯基硼酸偶 联，从而产生所示的芳族醛中间体。对这类化合物进行的NMR分析表明， 有时观察到所述芳基醛如下所示与相关的环合半缩醛胺(ring-closed hemiaminal)平衡存在。
然后，这些中间体可被转化成吲哚并苯并氮杂二酯中间体，例如通过 在DMF中用2-(二甲氧基磷酰基)丙烯酸甲酯在碳酸铯的影响下经由连续的 麦克尔(Michael)反应和Horner Emmons反应进行处理。
所得二酯中间体可被转化成环丙基衍生物，例如如方案2所示。
方案2.
稠合的环丙基二酯衍生物可通过本领域已知的方法来产生，所述方法 包括在DMSO中所述吲哚并苯并氮杂二酯中间体在强碱性条件下用碘化 三甲基氧化锍(trimethyl sulfoxonium iodide)处理。这些化合物中的脂肪族酯 部分可使用四正丁基氢氧化铵于甲醇中的溶液来选择性水解，并且所得单 酸可随后与多种选择的伯胺和仲胺缩合，从而得到以上方案中描绘的甲酰 胺(carboxamide)。这些中间体可经受额外的水解反应，从而得到8-环己基- 环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸。此外，这些化合物可在与合 适磺酰脲(sulfonyl urea)进行的额外偶联反应中作为中间体，从而可产生酰基 磺酰脲化合物(acyl sulfonyl urea compound)。
在可选择的方法中，吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-10-甲酸酯中间体可首 先经受碱催化的选择性水解反应，这导致混合酸-酯类化合物的产生(参见方 案3)。随后与胺偶联可产生甲酰胺。可对这些中间体进行环丙烷化，例如 通过在碱性条件下用碘化三甲基氧化锍处理，从而产生稠合有环丙基环的 衍生物。随后对剩余的酯部分进行水解，这可产生式I的羧酸化合物。这些 化合物可被转化成它们的相应酰基磺酰脲衍生物。
方案3.
可用于制备其它实施例的额外方法学如方案4所示。
方案4.
2-溴-3-环己基-1H-吲哚-6-甲酸(方案1)可使用例如1，1’-羰基二咪唑与 1，8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯于无水THF中的溶液来与各种磺酰脲缩 合。所得酰基硫酰胺(acyl sulfamide)可经受已知的偶联反应，例如使用苏楚 基(Suzuki)偶联条件来与各种2-甲酰基苯基硼酸或2-甲酰基苯基硼酸酯进行 偶联反应，从而提供所绘类型的环状半缩醛胺中间体。可随后使用前述反 应顺序来将这些化合物转化成吲哚并苯并氮杂衍生物。相关的稠合环丙基 酯衍生物可通过本领域已知的方法来产生，所述方法包括在DMSO中所述 吲哚并苯并氮杂酯在强碱性条件下用碘化三甲基氧化锍处理。所得稠合环 丙烷中的残留脂肪族酯部分可被水解，并且产物酸可使用例如O-(1H-苯并 三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基四氟硼酸盐和二异丙基乙基胺于DMSO中 的溶液来与各种胺缩合，从而得到环丙基甲酰胺的实施例。
可用于合成一些其它化合物的中间体涉及如方案5所示来制备(+/-)-8- 环己基-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-(甲氧基羰基)-环丙并[d]吲哚并 [2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸叔丁酯。
方案5.
该方法学涉及对所示吲哚甲酯进行碱催化水解，然后使所得产物与亚 硫酰氯和叔丁醇钾反应，或所得产物用碳酸银和叔丁基溴进行烷化。所得 化合物可使用与前述相似的化学方法来转化，从而提供方案5所示的混合 酯吲哚并苯并氮杂
所得(+/-)-8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-(甲氧基羰基)-环丙并 [d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸叔丁酯可用在如下可选择的方法中， 可如方案6所示使用所述可选择的方法来制备酰基硫酰胺(acylsulfamide)化 合物和酰基磺酰胺(acylsulfonamide)化合物。
方案6.
中间体叔丁酯吲哚并苯并氮杂的环丙烷化和随后叔丁酯基团的裂解 可产生相关的吲哚酸，所述吲哚酸可与各种磺酰胺和磺酰脲偶联。随后对 剩余的酯部分进行水解，这得到相关的桥接酸(bridged acid)，所述桥接酸可 使用例如O-(1H-苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基四氟硼酸盐和二异丙 基乙基胺于DMSO中的溶液来与各种胺偶联，从而提供其它甲酰胺实施例。
所讨论的一些化合物以立体异构体的混合物的形式存在。本发明涵盖 所述化合物的所有立体异构体。分离和分开立体异构混合物的方法是本领 域众所周知的。一种方法如下所示，并且涉及如方案7所示来合成非对映 异构的酰胺。也可制备非对映异构的酯。
方案7.
一些非对映异构的酰胺可使用反相HPLC来分开，从而提供具有光学 活性的甲酰胺。随后，可对这些化合物进行水解，并且如方案8所示，所 得光学活性酸可使用例如O-(1H-苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基四氟 硼酸盐和二异丙基乙基胺于DMSO中的溶液来与各种胺偶联，从而提供具 有光学活性的其它实施例。
方案8.
也可使用其它标准酸-胺偶联方法来得到具有光学活性的甲酰胺。
稠合苯并氮杂杂环化合物中芳基部分的官能团(functionality)变化可 如方案1所示来实现，例如通过使用作为吲哚溴化物中间体偶联配体 (coupling partner)的各种硼酸。
可选择地，可对这些中间体的芳基部分中经合适保护的反应性官能团 进行脱保护，然后可使用本领域已知的方法来进行随后的衍生化，所述方 法中的一些实施例描绘在方案9中。
方案9.
在其它变化中，可将上述方案中描绘的中间体酚转化成三氟甲磺酸酯 (triflate)衍生物，所述三氟甲磺酸酯衍生物可使用各种偶联反应来用于制备 芳基经官能化的其它实施例，所述偶联反应中的一些概述在方案10中。
方案10.
在方案10所示实施例的情况下，可对产物酯进行水解，随后如上所述 来与各种磺酰脲偶联，从而提供其它酰基硫酰胺实施例。
生物学方法
当在以下HCV RdRp检测中测定时，式I化合物展现了对抗HCV NS5B的 活性。
对HCV NS5B RdRp进行克隆、表达及纯化
将对HCV基因型1b的NS5B蛋白进行编码的cDNA克隆至pET21a表达载 体中。将所述蛋白质表达成截掉C末端的18个氨基酸(the protein was expressed with an 18amino acid C-terminal truncation)以提高溶解度。大肠杆 菌感受态细胞系BL21(DE3)用于所述蛋白质的表达。使培养物在37℃生长约 4小时，直到培养物达到600纳米处的光密度为2.0。使培养物冷却至20℃， 并用1mM IPTG进行诱导。加入新鲜的氨苄青霉素至最终浓度为50微克/毫 升，并使细胞在20℃生长过夜。
使细胞沉淀(3升)溶解以供纯化，得到15-24毫克经纯化的NS5B。溶胞缓 冲液由20mM Tris-HCl(pH 7.4)、500mM NaCl、0.5％Triton X-100、1mM DTT、 1mM EDTA、20％甘油、0.5毫克/毫升溶菌酶、10mM MgCl2、15微克/毫升 脱氧核糖核酸酶I及完全TM蛋白酶抑制剂药片(Roche)所组成。加入溶胞缓 冲液后，使用组织匀浆器来使经冷冻的细胞沉淀重新悬浮。为了降低样品 的粘度，使用与Branson超声波处理器相连的微尖头来使溶胞产物的等分液 在冰上接受超声波处理。经超声波处理的溶胞产物在4℃以100,000×g离心1 小时，并过滤经过0.2微米滤器单元(Corning)。
使用三个连续的色谱步骤来纯化蛋白质：肝素琼脂糖CL-6B、PolyU琼 脂糖4B及HiTrap SP琼脂糖(Pharmacia)。色谱缓冲液与溶胞缓冲液相同，但 不含有溶菌酶、脱氧核糖核酸酶I、MgCl2或蛋白酶抑制剂，且缓冲液的NaCl 浓度根据将蛋白质加载至色谱柱上的需要而调整。各色谱柱以NaCl梯度液 洗脱，所述梯度液的长度在5至50个柱体积之间变化，这取决于色谱柱的类 型。在最终色谱步骤后，所得到的酶纯度＞90％(基于SDS-PAGE分析)。将酶 分成等分液，并贮存在-80℃。
标准HCV NS5B RdRp酶检测
在96孔板(Costar 3912)中在最终体积为60微升的情况下进行HCV RdRp 基因型1b检测。检测缓冲液由20mM Hepes(pH 7.5)、2.5mM KCl、2.5mM MgCl2、1mM DTT、1.6单位RNAse抑制剂(PromegaN2515)、0.1毫克/毫升 BSA(Promega R3961)及2％甘油所组成。所有化合物在DMSO中连续稀释(3 倍)并在水中进一步稀释，以使DMSO在检测中的最终浓度为2％。HCV RdRp 基因型1b酶在最终浓度为28nM时使用。聚A(polyA)模板在6nM时使用，且 生物素化的寡dT12引物在最终浓度为180nM时使用。模板是商购得到的 (Amersham 27-4110)。生物素化的引物由Sigma Genosys制备。3H-UTP在 0.6μCi(0.29μM总UTP)时使用。通过加入酶来引发反应，在30℃孵育60分钟， 并通过加入25微升含有SPA珠粒(4微克/微升，Amersham RPNQ 0007)的 50mM EDTA来停止。在室温孵育＞1小时后，将板在Packard Top Count NXT 上读取。
经修改的HCV NS5B RdRp酶检测
经修改的酶检测基本上按照关于标准酶检测所描述的那样来进行，不 同的是，将生物素化的寡dT12引物预捕获在链霉抗生物素(streptavidin)涂覆 的SPA珠粒上，其方式是将引物与珠粒在检测缓冲液中混合，并在室温孵育 一小时。离心除去未结合的引物。使与引物结合的珠粒重新悬浮在20mM Hepes缓冲液(pH 7.5)中，并在引物的最终浓度为20nM以及珠粒的最终浓度 为0.67微克/微升时用于检测。检测中的加入顺序如下：将酶(14nM)加到经 稀释的化合物中，接着加入模板(0.2nM)、3H-UTP(0.6μCi，0.29μM)及与引物 结合的珠粒的混合物，以引发反应，所给浓度为最终浓度。使反应在30℃ 进行4小时。
化合物的IC50值使用七种不同的[I]([I]为抑制浓度)来确定。使用方程式 y＝A+((B-A)/(1+((C/x)^D)))通过抑制作用来计算IC50值。
FRET检测制剂
为了进行HCV FRET筛选检测，使用96孔细胞培养板。FRET肽(Anaspec， Inc.)(Taliani et al.，Anal.Biochem.1996，240，60-67)在其一端附近含有荧光供 体即EDANS，并且在另一端附近含有受体即DABCYL。通过供体与受体之 间的分子间共振能量转移(RET)来使所述肽的荧光淬灭，但当NS3蛋白酶使 所述肽裂解时，产物不再发生RET淬灭，且供体的荧光变得显而易见。检测 试剂如下制备：将得自Promega(#E153A)的5×细胞荧光素酶细胞培养物溶胞 试剂(cell Luciferase cell culture lysis reagent)用dH2O稀释至1×，加入NaCl至最 终为150mM，并且将FRET肽自2mM储备液稀释至最终为20μM。
为了制备板，带有或不带有海紫罗兰属荧光素酶(Renilla luciferase)报告 子基因的HCV复制子细胞用胰蛋白酶处理，并置于96孔板的各孔中，其中 将经滴定的测试化合物加到第3列至第12列中；第1列和第2列含有对照化合 物(HCV蛋白酶抑制剂)，且最底行含有不带有化合物的细胞。然后，将板置 于37℃的CO2培养箱中。
检测
加入上述测试化合物(FRET检测制剂)后，在不同时间将板取出，且向 每个孔中加入Alamar蓝色溶液(Trek Diagnostics，#00-100)，作为细胞毒性的 测量方法。在Cytoflour 4000仪器(PE Biosystems)中读取后，将板以PBS冲洗， 然后通过向每个孔中加入30微升上述FRET肽检测试剂(FRET检测制剂)而 用于FRET检测。接着，将板置于Cytoflour 4000仪器中，其已被设定成激发 波长为340nm/发射波长为490nm，以自动模式历时20次循环，且板在动态模 式中读取。典型地，在读取后使用终点分析的信号对噪声为至少三倍。或 者，在Alamar蓝色读取后，将板以PBS冲洗，加入不带有酚红的50微升 DMEM(高葡萄糖)，然后使用Promega Dual-Glo Luciferase Assay System，将 板用于荧光素酶检测。
通过对相对的HCV复制子抑制作用及相对的细胞毒性值进行定量而对 化合物进行分析。为了计算细胞毒性值，将得自对照孔的平均Alamar蓝色 荧光信号设定为100％无毒性。接着，将各化合物测试孔中的各个信号除以 平均对照信号并乘以100％，以确定细胞毒性百分比。为了计算HCV复制子 抑制值，平均背景值得自在检测结束时含有最高量HCV蛋白酶抑制剂的两 个孔。这些值类似于得自天然Huh-7细胞的那些值。
然后，将背景值从得自对照孔的平均信号中扣除，且将此值用作100％ 活性。接着，将各化合物测试孔中的各个信号除以背景扣除后的平均对照 值并乘以100％，以确定活性百分比。将蛋白酶抑制剂滴定的EC50值计算成 可使FRET或荧光素酶活性降低50％的浓度。针对化合物板所得到的两个值 即细胞毒性百分比与活性百分比用于确定有待进一步分析的重要化合物。
式I化合物的代表性数据报道在表1中。
表1.
IC50：A＞1μM；B为0.097μM-1μM；EC50：C＞10μM；D为1μM-10μM； E为1.0μM-0.02μM；F＞0.12μM。使用预孵育方案来确定IC50值。使用FRET 测定来确定EC50值。
此外，在美国专利申请11/181,639(2005年7月14日提交)中披露的化 合物在这些测定中显示出具有活性(参见表2)。
表2
药物组合物和治疗方法
式I化合物展现出对抗HCV NS5B的活性，且可用于治疗HCV与HCV感 染。因此，本发明的另一个方面为一种组合物，其包含式I化合物或其可药 用盐及可药用载体。
本发明的另一个方面为一种组合物，其还包含具有抗HCV活性的化合 物。
本发明的另一个方面为一种组合物，其中具有抗HCV活性的化合物为 干扰素。在本发明的另一个方面，所述干扰素选自干扰素α2B、PEG化的 (pegylated)干扰素α、同感干扰素(consensus interferon)、干扰素α2A及淋巴细 胞样干扰素τ。
本发明的另一个方面为一种组合物，其中具有抗HCV活性的化合物为 环孢菌素。在本发明的另一个方面，所述环孢菌素为环孢菌素A。
本发明的另一个方面为一种组合物，其中具有抗HCV活性的化合物选 自白细胞介素2、白细胞介素6、白细胞介素12、可提高1型辅助T细胞应答 发展的化合物、干扰RNA、反义RNA、Imiqimod、利巴韦林、5’-单磷酸肌 苷脱氢酶抑制剂、金刚烷胺及金刚乙胺。
本发明的另一个方面为一种组合物，其中具有抗HCV活性的化合物可 有效抑制靶标的功能以治疗HCV感染，所述靶标选自HCV金属蛋白酶(HCV metalloprotease)、HCV丝氨酸蛋白酶(HCV serine protease)、HCV聚合酶(HCV polymerase)、HCV解螺旋酶(HCV helicase)、HCV NS4B蛋白(HCV NS4B protein)、HCV进入(HCV entry)、HCV组装(HCV assembly)、HCV释出(HCV egress)、HCV NS5A蛋白(HCV NS5A protein)、IMPDH及核苷类似物 (nucleoside analog)。
本发明的另一个方面为一种组合物，其包含式I化合物或其可药用盐、 可药用载体、干扰素及利巴韦林。
本发明的另一个方面为一种抑制HCV复制子(HCV replicon)功能的方 法，其包括使HCV复制子与式I化合物或其可药用盐接触。
本发明的另一个方面为一种抑制HCV NS5B蛋白功能的方法，其包括使 HCV NS5B蛋白与式I化合物或其可药用盐接触。
本发明的另一个方面为治疗患者中HCV感染的方法，其包括向所述患 者给予治疗有效量的式I化合物或其可药用盐。在另一个实施方案中，所述 化合物可有效抑制HCV复制子的功能。在另一个实施方案中，所述化合物 可有效抑制HCV NS5B蛋白的功能。
本发明的另一个方面为治疗患者中HCV感染的方法，其包括向所述患 者给予治疗有效量的式I化合物或其可药用盐，并且给予(之前、之后或同时) 另一种具有抗HCV活性的化合物。
本发明的另一个方面为其中其它具有抗HCV活性的化合物为干扰素的 方法。
本发明的另一个方面为其中所述干扰素选自干扰素α2B、PEG化的干扰 素α、同感干扰素、干扰素α2A及淋巴细胞样干扰素τ的方法。
本发明的另一个方面为其中其它具有抗HCV活性的化合物为环孢菌素 的方法。
本发明的另一个方面为其中所述环孢菌素为环孢菌素A的方法。
本发明的另一个方面为其中其它具有抗HCV活性的化合物选自白细胞 介素2、白细胞介素6、白细胞介素12、可提高1型辅助T细胞应答发展的化 合物、干扰RNA、反义RNA、Imiqimod、利巴韦林、5’-单磷酸肌苷脱氢酶 抑制剂、金刚烷胺及金刚乙胺的方法。
本发明的另一个方面为其中其它具有抗HCV活性的化合物可有效抑制 靶标功能以治疗HCV感染的方法，所述靶标选自HCV金属蛋白酶、HCV丝 氨酸蛋白酶、HCV聚合酶、HCV解螺旋酶、HCV NS4B蛋白、HCV进入、 HCV组装、HCV释出、HCV NS5A蛋白、IMPDH及核苷类似物。
本发明的另一个方面为其中其它具有抗HCV活性的化合物可有效抑 制HCV生命循环中靶标的功能而非抑制HCV NS5B蛋白的功能的方法。
“治疗有效”的意思是提供有意义的患者益处所需要的药物量，如肝炎与 HCV感染领域中的执业医师所理解的那样。
“患者”的意思是被HCV病毒感染且适于治疗的人们，如肝炎与HCV感 染领域中的执业医师所理解的那样。
“治疗”、“疗法”、“给药方案”、“HCV感染”及相关术语如肝炎与HCV感 染领域中的执业医师所理解的那样来使用。
本发明的化合物一般以药物组合物的形式来给予，所述组合物包含治 疗有效量的式I化合物或其可药用盐及可药用载体，且可含有常规的赋形剂。 治疗有效量为提供有意义的患者益处所需要的量。可药用载体为具有可接 受安全性的常规已知载体。组合物涵盖所有常见的固体形式与液体形式， 包括胶囊剂、片剂、锭剂与粉末剂以及液体混悬剂、糖浆剂、酏剂及溶液 剂。组合物使用一般制剂技术来制备，且常规的赋形剂(诸如粘合剂与润湿 剂)与介质(诸如水与醇)通常用于组合物。
固体组合物通常被配制成剂量单位，且每份剂量提供约1至1000毫克活 性成份的组合物是优选的。剂量的一些实例为1毫克、10毫克、100毫克、 250毫克、500毫克及1000毫克。一般而言，其它药物可按与临床上所使用 的经典单位范围相似的单位范围存在。典型地，其为0.25-1000毫克/单位。
液体组合物通常在剂量单位范围内。一般而言，液体组合物的单位剂 量范围可以是1-100毫克/毫升。剂量的一些实例为1毫克/毫升、10毫克/毫升、 25毫克/毫升、50毫克/毫升及100毫克/毫升。一般而言，其它药物可按与临 床上所使用的经典单位范围相似的单位范围存在。典型地，其为1-100毫克/ 毫升。
本发明涵盖所有常规的给药模式，且口服方法与肠胃外方法是优选的。 一般而言，给药方案可类似于临床上所使用的其它药物。典型地，每日剂 量可以是每日1-100毫克/公斤体重。一般而言，口服方式需要较多的化合物， 而肠胃外方式需要较少的化合物。然而，具体的给药方案可由医师通过合 理的医药判断来确定。
本发明也涵盖在组合疗法中给予所述化合物的方法。即所述化合物可 与可用于治疗肝炎及HCV感染的其它药物一起使用，但所述化合物与所述 其它药物分开使用。在这些组合方法中，式I化合物通常可搭配其它药物而 以每日1-100毫克/公斤体重的每日剂量来给予。其它药物一般可按治疗上所 使用的量来给予。然而，具体的给药方案可由医师通过合理的医药判断来 确定。
适于组合物及方法的化合物的一些实例列在表3中。
表3.
商品名 抑制剂的类型或靶标的类型 来源公司 Omega IFN IFN-ω BioMedicines Inc.，Emeryville，CA BILN-2061 丝氨酸蛋白酶抑制剂 Boehringer Ingelheim Pharma KG， Ingelheim，Germany Summetrel 抗病毒 Endo Pharmaceuticals Holdings Inc.， Chadds Ford，PA RoferonA IFN-α2a F.Hoffmann-La Roche LTD，Basel， Switzerland Pegasys PEG化的IFN-α2a F.Hoffmann-La Roche LTD，Basel， Switzerland Pegasys和Ribavirin PEG化的IFN-α2a/利巴韦林 F.Hoffmann-La Roche LTD，Basel， Switzerland CellCept HCV IgG免疫抑制剂 F.Hoffmann-La Roche LTD，Basel， Switzerland Wellferon 淋巴细胞样IFN-αnl GlaxoSmithKline plc，Uxbridge，UK Albuferon-α 白蛋白IFN-α2b Human Genome Sciences Inc.， Rockville，MD Levovirin 利巴韦林 ICN Pharmaceuticals，Costa Mesa，CA IDN-6556 胱天蛋白酶(caspase)抑制剂 Idun Pharmaceuticals Inc.，San Diego， CA IP-501 抗纤维变性 Indevus Pharmaceuticals Inc.， Lexington，MA Actimmune INF-γ InterMune Inc.，Brisbane，CA Infergen A IFN干扰素α-1(IFN alfacon-1) InterMune Pharmaceuticals Inc.， Brisbane，CA ISIS 14803 反义 ISIS Pharmaceuticals Inc，Carlsbad， CA/Elan Phamaceuticals Inc.，New York，NY JTK-003 RdRp抑制剂 Japan Tobacco Inc.，Tokyo，Japan Pegasys和Ceplene PEG化的IFN-α2a/免疫调节剂 Maxim Pharmaceuticals Inc.，San Diego，CA
Ceplene 免疫调节剂 Maxim Pharmaceuticals Inc.，San Diego，CA Civacir HCV IgG免疫抑制剂 Nabi Biopharmaceuticals Inc.，Boca Raton，FL Intron A和Zadaxin IFN-α2b/α1-胸腺素 RegeneRx Biopharmiceuticals Inc.， Bethesda，MD/SciClone Pharmaceuticals Inc，San Mateo，CA Levovirin IMPDH抑制剂 Ribapharm Inc.，Costa Mesa，CA Viramidine IMPDH抑制剂 Ribapharm Inc.，Costa Mesa，CA Heptazyme 核酶 Ribozyme Pharmaceuticals Inc.， Boulder，CO IntronA IFN-α2b Sche ring-Plough Corporation， Kenilworth，NJ PEG-Intron PEG化的IFN-α2b Schering-Plough Corporation， Kenilworth，NJ Rebetron IFN-α2b/利巴韦林 Schering-Plough Corporation， Kenilworth，NJ Rebavirin 利巴韦林 Schering-Plough Corporation， Kenilworth，NJ PEG-Intron/Rebavirin PEG化的IFN-α2b/利巴韦林 Schering-Plough Corporation， Kenilworth，NJ Zadazim 免疫调节剂 SciClone Pharmaceuticals Inc.，San Mateo，CA Rebif IFN-β1a Serono，Geneva，Switzerland IFN-β和EMZ701 IFN-β和EMZ701 TFansition Therapeutics Inc.，Ontario， Canada T67 β-微管蛋白抑制剂 Tularik Inc.，South San Francisco，CA VX-497 IMPDH抑制剂 Vertex Pharmaceuticals Inc.， Cambridge，MA VX-950/LY-570310 丝氨酸蛋白酶抑制剂 Vertex Pharmaceuticals Inc.， Cambridge，MA/Eli Lilly and Co.Inc.， Indianapolis，IN Omniferon 天然IFN-α Viragen Inc.，Plantation，FL XTL-002 单克隆抗体 XTL Biopharmaceuticals Ltd.， Rehovot，Isreal
具体实施方式
在前面方案中说明的式I化合通常可通过反相色谱法(使用制备性C-18 柱，使用甲醇-水(含有0.1％三氟乙酸(TFA))的梯度，以及使用Shimadzu高效 液相制备性色谱系统(使用XTERRA 30×100mm S5柱，流速为40mL/min，12 分钟梯度))来纯化。Emrys Optimizer个人微波反应器用于微波辅助反应。分 子量和纯度通常使用Shimadzu LCMS(使用Phenomenex-Luna 3.0×50mm S10 反相柱，使用4mL/分钟的流速，使用甲醇/H2O(含有0.1％TFA)的梯度[历时2 分钟从0％至100％，运行时间为3分钟])来确定。通常在Bruker 500或300MHz 设备上得到NMR谱。制备性硅胶板为20×20cm，其中硅胶GF为1000微米层。
中间体1
3-环己烯基-1H-吲哚-6-甲酸.
在22℃将环己酮(96mL，0.926mol)加到搅拌的吲哚-6-甲酸甲酯(50.0g， 0.335mol)于甲醇(920mL)中的溶液中。历时10分钟逐份加入甲醇钠的甲醇溶 液(methanolic sodium methoxide)(416mL，浓度为25％w/w，1.82摩尔)。将混合 物回流搅拌18小时，冷却到室温，浓缩，用冷水稀释，并用36％HCl溶液酸 化。过滤收集所得沉淀物，用冷水洗涤，并用五氧化二磷(0.1mm)干燥，得 到标题化合物，其为褐色固体(80.9g，97.5％收率)。
中间体2
3-环己基-1H-吲哚-6-甲酸.
将3-环己烯基-1H-吲哚-6-甲酸(38g)加到帕尔瓶(Parr bottle)中，然后加入 甲醇(100mL)和THF(100mL)。瓶用氩气冲洗，并加入10％钯/炭(1.2g)。然后 将烧瓶抽空，随后再充填H2至压力为55psi(磅/平方英寸)，并将所得混合物 在室温震摇18小时。然后催化剂通过过滤通过硅藻土来除去。浓缩滤液， 得到所期望的产物，其为浅紫色固体(30.6g，79％)。ESI-MS m/z 244(MH+)。
中间体3
3-环己基-1H-吲哚-6-甲酸甲酯.
将亚硫酰氯(1mL)加到搅拌的3-环己基-1H-吲哚-6-甲酸(30.4g，0.125摩 尔)于甲醇(300mL)中的混合物中。将混合物回流搅拌18小时，用脱色炭处理， 并过滤。将滤液浓缩至约150mL，此时发生结晶。将滤液冷却至室温，并过 滤。固体用冷甲醇洗涤，然后用乙醚洗涤，得到所期望的产物，其为浅紫 色固体(22.2g，69％收率)。ESI-MS m/z 258(MH+)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ 1.35(m，4H)，1.63(s，1H)，1.78(m，3H)，2.06(d，J＝8.05Hz，2H)，3.90(m，1H)， 7.08(d，J＝1.83Hz，1H)，7.62(s，1H)，7.65(s，1H)，7.74(d，J＝1.46Hz，1H)，7.77(d， J＝1.46Hz，1H)，8.08(s，1H)。
中间体4
1H-吲哚-6-甲酸甲酯.
将重氮甲烷的乙醚溶液(620mL)缓慢加到冷却(-15℃)并搅拌的吲哚-6- 甲酸(45g，0.27摩尔)于乙醚(250mL)中的悬浮液中。一旦加入，就将反应混合 物在-15℃再搅拌1小时，之后通过缓慢加入乙酸(50mL)来将反应淬灭。然后 将所得混合物减压浓缩，并使用硅胶(60-120)快速色谱法(使用DCM(二氯甲 烷)作为洗脱剂)来纯化残余物。
中间体5
3-环己基-1H-吲哚-6-甲酸甲酯.
将环己酮(42.46mL，0.40摩尔)一次性加到搅拌的吲哚-6-甲酸甲酯(47.8g， 0.27摩尔)于无水二氯甲烷(500mL)中的溶液中。然后将反应混合物冷却至 10℃，并滴加三氟乙酸(63.13mL，0.8摩尔)，然后加入三乙基甲硅烷(triethyl silane)(174.5mL，1.09摩尔)。一旦加入，就使温度升至室温，之后将其再搅 拌12小时。然后加入二氯甲烷(200mL)，并且反应混合物先后用10％碳酸氢 钠溶液和盐水洗涤。有机层用硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。所得残余 物通过硅胶(60-120)快速色谱法(使用己烷-乙酸乙酯(9.5∶0.5)混合物作为洗 脱剂)来纯化。合并均质馏分(homogeneous fraction)，并蒸发，得到60g所期 望的产物(85％)。有关该物质的分析性数据与就通过上述可选择路线制备的 样品而观察到的分析性数据相一致。
中间体6
2-溴-3-环己基-1H-吲哚-6-甲酸甲酯.
将无水三溴化吡啶鎓(12.0g，38mmol)一次性加到搅拌并冷却(冰/水浴) 的3-环己基-1H-吲哚-6-甲酸甲酯(7.71g，30mmol)于THF(80mL)和氯仿(80mL) 的混合物中的溶液中。将烧瓶从冷却浴中取出，并在室温继续搅拌2小时。 混合物相继用1M NaHSO3溶液(2×50mL)和1N HCl溶液(50mL)洗涤。然后其 用无水硫酸钠干燥，过滤，并浓缩。浓缩物用己烷处理，并过滤收集所得 沉淀物，得到所期望的产物，其为灰白色固体(5.8g，58％)。1H NMR(300MHz， CDCl3)δ1.38(m，3H)，1.85(m，7H)，2.81(m，1H)，7.71(m，2H)，8.03(s，1H)， 8.47(s，1H)。
将己烷母液浓缩，并将残余物溶解在己烷/乙酸乙酯(5∶1)中。使溶液通 过硅胶垫(用相同的溶剂)。浓缩洗脱液，然后加入己烷(10mL)，这导致额外 产物的沉淀，过滤收集所述额外产物，得到2.8g(28％)所期望的产物。
中间体7
11-环己基-6-羟基-6H-异吲哚并[2，1-a]吲哚-3-甲酸甲酯.
在氮气下将搅拌的2-溴-3-环己基-1H-吲哚-6-甲酸甲酯(10.1g，30mmol)、 2-甲酰基苯基硼酸(5.4g，36mmol)、LiCl(3.8g，90mmol)和Pd(PPh3)4(1.6g， 1.38mmol)于1M Na2CO3溶液(40mL)和1∶1EtOH-甲苯(180mL)中的混合物在 85℃加热3小时。然后将反应混合物冷却至室温，并用EtOAc(2×100mL)萃取。 萃取物相继用水和盐水洗涤，然后干燥(MgSO4)，过滤，并真空浓缩，得到 13.3g粗制产物。该物质用DCM和己烷研磨，得到纯的所期望产物(7.52g， 70％)。LC-MS：m/e 360(M-H)；344(M-17)+。1H NMR(400MHz，氯仿-D)δppm 1.33-1.60(m，4H)1.77-2.01(m，6H)2.80(d，J＝11.83Hz，1H)3.02-3.18(m， 1H)3.89(s，3H)6.49(d，J＝11.33Hz，1H)7.34(t，J＝7.55Hz，1H)7.46(t，J＝7.55Hz， 1H)7.62(d，J＝7.30Hz，1H)7.66-7.74(m，2H)7.77(d，J＝7.81Hz，1H)8.21(s，1H)。
中间体8
13-环己基-6-(甲氧基羰基)-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-10-甲酸甲 酯.
在氮气下将搅拌的11-环己基-6-羟基-6H-异吲哚并[2，1-a]吲哚-3-甲酸甲 酯(3.61g，10mmol)、Cs2CO3(3.91g，12mmol)和2-(二甲氧基膦酰基)丙烯酸甲酯 (trimethyl 2-phosphonoacetate)(2.86g，14mmol)于无水DMF(40mL)中的悬浮液 在60℃加热3小时。将所得黄色悬浮液冷却至室温，并在剧烈搅拌下加入水。 形成黄色沉淀物，过滤收集所述沉淀物。滤渣(filtrand)用水洗涤，然后风干 过夜，得到标题化合物，其为黄色粉末(4.124g，96％)。LC/MS：m/e 430(MH+)。 1H NMR(400MHz，氯仿-D)δppm 1.30-1.46(m，J＝14.86Hz，2H)1.55(s， 2H)1.77(s，2H)1.85-2.18(m，4H)2.76-2.89(m，1H)3.84(s，3H)3.95(s，3H)4.19(s， 1H)5.68(s，1H)7.38-7.63(m，4H)7.74(dd，J＝8.44，1.39Hz，1H)7.81-7.98(m， 2H)8.29(d，J＝1.01Hz，1H)。
中间体9
13-环己基-6-(羧基)-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-10-甲酸甲酯.
将13-环己基-6-(甲氧基羰基)-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-10-甲酸甲 酯(308mg，0.72mmol)溶解在N，N-二甲基甲酰胺(5mL)中，并用LiOH(173mg， 7.2mmol)处理。将混合物在50℃加热4小时，之后真空除去溶剂。将残余物 溶解在H2O(5mL)中，并且所得混合物通过加入10％HCl水溶液来酸化。过滤 收集形成的沉淀物，并风干，得到标题化合物，其为亮黄色固体(290mg， 97％)。ESI-MS m/z[M+1]＝415。
中间体10
13-环己基-6-(吗啉-4-基羰基)-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-10-甲酸 甲酯.
将TBTU(145mg，0.45mmol)加到搅拌的13-环己基-6-(羧基)-7H-吲哚并 [2，1-a][2]苯并氮杂-10-甲酸甲酯(125mg，0.30mmol)、吗啉(26μL，0.30mmol) 和N，N-二异丙基乙基胺(200μL，1.15mmol)于DMF(2mL)中的溶液中。将混合 物在22℃搅拌20分钟。然后将所得溶液注射到Shimadzu反相制备性HPLC 上。将含有产物的馏分在Speed上浓缩，留下13-环己基-6-(吗啉-4-基羰 基)-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-10-甲酸甲酯，其为黄色固体(64mg， 44％)。ESI-MS m/z 487(MH+)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ1.21(m，1H)， 1.34-1.55(m，3H)，1.77(m，2H)，1.91(m，1H)，2.06(m，3H)，2.83(m，1H)， 2.97-3.85(m，8H)，3.97(s，3H)，4.45(m，1H)，5.07(m，1H)，6.89(s，1H)，7.41(d， 1H)，7.49(m，2H)，7.57(m，1H)，7.75(m，1H)，7.89(d，J＝8.55Hz，1H)，8.15(s， 1H)。
中间体11
2-溴-3-环己基-1H-吲哚-6-甲酸.
向2-溴-3-环己基-1H-吲哚-6-甲酸甲酯(8.0g，23.79mmol)于 THF/MeOH(30mL/30mL)中的溶液中加入10N NaOH溶液(23.8mL， 238mmol)。将反应混合物在40℃搅拌6小时，然后在室温搅拌过夜。接着将 其浓缩，并用浓HCl溶液酸化至pH～4。收集棕色固体，其为粗制产物(7.6g， 99％收率)。MS m/322(MH+)，保留时间：3.696分钟。
中间体12
2-溴-3-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1H-吲哚-6-甲酰胺.
在22℃将1，1’-羰基二咪唑(1.17g，7.2mmol)加到搅拌的2-溴-3-环己基 -1H-吲哚-6-甲酸(2.03g，6.3mmol)于THF(6mL)中的溶液中。立即放出CO2， 当放出减慢时，将溶液在50℃加热1小时，然后冷却至22℃。加入N，N-二甲 基硫酰胺(0.94g，7.56mmol)，然后滴加DBU(1.34g，8.8mmol)于THF(4mL)中的 溶液。继续搅拌24小时。将混合物在乙酸乙酯和稀HCl之间分配。乙酸乙酯 层先后用水和盐水洗涤，然后用Na2SO4干燥。浓缩萃取物至干，留下标题 化合物，其为浅黄色易碎泡沫状物(2.0g，74％，＞90％纯度(通过NMR推测))。 1H NMR(300MHz，DMSO-D6)δppm 1.28-1.49(m，3H)1.59-2.04(m， 7H)2.74-2.82(m，1H)2.88(s，6H)7.57(dd，J＝8.42，1.46Hz，1H)7.74(d，J＝8.78Hz， 1H)7.91(s，1H)11.71(s，1H)12.08(s，1H)。
中间体13
3-环己基-N-(N，N-二甲基氨磺酰基)-2-(2-甲酰基-4-甲氧基苯基)-1H-吲 哚-6-甲酰胺.
将2-溴-3-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1H-吲哚-6-甲酰胺(4.28g， 0.01摩尔)、2-甲酰基-4-甲氧基苯基硼酸(2.7g，0.015摩尔)、2-二环己基膦基 -2’，6’-二甲氧基-联苯(41mg，0.0001摩尔)、乙酸钯(11.2mg)和经微细研磨的碳 酸钾(4.24g，0.02摩尔)于甲苯(30mL)中的混合物在氮气下回流搅拌30分钟， 此时LC/MS分析表明反应完成。然后反应混合物用乙酸乙酯和水稀释，接 着用过量稀HCl酸化。然后收集乙酸乙酯层，并用稀HCl、水和盐水洗涤。 然后干燥(硫酸镁)有机溶液，过滤，并浓缩，得到胶状物。胶状物用己烷 (250ml)和乙酸乙酯(25mL)稀释，并将混合物在22℃搅拌20小时，在此期间 产物转化成亮黄色颗粒状固体(4.8g)，所述固体不经进一步纯化即直接使用。
中间体14
6-甲酯基-13-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并 氮杂-10-甲酰胺.
将3-环己基-N-(N，N-二甲基氨磺酰基)-2-(2-甲酰基-4-甲氧基苯基)-1H- 吲哚-6-甲酰胺(4.8g，0.01摩尔)、碳酸铯(7.1g，0.02摩尔)和2-(二甲氧基膦酰基) 丙烯酸甲酯(2.86g，0.014摩尔)于DMF(28mL)中的混合物在55℃的油浴温度 搅拌20小时。将混合物倒入冰-水中，并用稀HCl酸化，从而使粗制产物沉 淀。收集固体，干燥，并在SiO2(110g)上进行快速色谱(使用含有2％乙酸的 乙酸乙酯和二氯甲烷(1∶10)溶液)。合并均质馏分，并蒸发，得到标题化合物， 其为浅黄色固体(3.9g，71％收率)。MS：552(M＝H+)。
中间体15
13-环己基-3-甲氧基-6-(甲氧基羰基)-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂 -10-甲酸.
在氮气下将三氟乙酸(30mL)滴加到搅拌的13-环己基-3-甲氧基-7H-吲哚 并[2，1-a][2]苯并氮杂-6，10-二甲酸10-(叔丁基)酯·6-(甲基)酯(10g，20mmol) 于二氯乙烷(30mL)中的浆液中。将透明深绿色溶液在室温搅拌2.5小时，浓 缩至干，并与EtOAc(乙酸乙酯)(100mL)一起搅拌过夜。过滤收集固体，用 EtOAc和Et2O(乙醚)洗涤，得到13-环己基-3-甲氧基-6-(甲氧基羰基)-7H-吲哚 并[2，1-a][2]苯并氮杂-10-甲酸(8.35g，18.8mmol，94％)，其为黄色固体，所 述固体不经进一步纯化即使用。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.13-2.16(m， 10H)，2.74-2.88(m，1H)，3.84(s，3H)，3.89(s，3H)，4.06-4.29(m，1H)，5.54-5.76(m， 1H)，6.98(d，J＝2.6Hz，1H)，7.08(dd，J＝8.4，2.6Hz，1H)，7.52(d，J＝8.4Hz，1H)， 7.78(dd，J＝8.8，1.1Hz，1H)，7.80(s，1H)，7.86(d，J＝8.8Hz，1H)，8.34(d，J＝1.1Hz， 1H)。LCMS：m/e 446(M+H)+，保留时间：3.21分钟，柱B，4分钟梯度。
中间体16
13-环己基-10-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2] 苯并氮杂-6-甲酸甲酯.
将1，1’-羰基二咪唑(1.82g，11.2mmol)加到13-环己基-3-甲氧基-6-(甲氧基 羰基)-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-10-甲酸(3.85g，8.65mmol)于 THF(15mL)中的浆液中。将反应混合物在60℃加热1.5小时，冷却至室温， 用环丙基磺酰胺(1.36g，11.2mmol)处理，搅拌10分钟，然后通过滴加 DBU(2.0mL，13mmol)于THF(3mL)中的溶液来处理。将反应混合物在室温搅 拌过夜，用EtOAc(100mL)稀释，并用H2O(～30mL)、1N HCl(水溶液)(2×50mL) 和盐水(～30mL)洗涤。合并的水层用EtOAc(100mL)萃取，并且有机层用1N HCl(水溶液)(～50mL)洗涤。合并的有机层用盐水(～30mL)洗涤，干燥 (MgSO4)，过滤，并浓缩。将残余物与Et2O(～100mL)一起搅拌2小时，过滤 收集固体，用Et2O冲洗，并干燥，得到13-环己基-10-((环丙基磺酰基)氨甲酰 基)-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-6-甲酸甲酯(4.24g，7.73mmol， 89％)，其为浅黄色固体，所述固体不经进一步纯化即使用。1H NMR(300MHz， CDCl3)δ1.08-2.13(m，14H)，2.73-2.87(m，1H)，3.13-3.24(m，1H)，3.82(s，3H)， 3.89(s，3H)，4.04-4.27(m，1H)，5.50-5.71(m，1H)，6.98(d，J＝2.6Hz，1H)，7.08(dd， J＝8.8，2.6Hz，1H)，7.44(dd，J＝8.4，1.1Hz，1H)，7.50(d，J＝8.8Hz，1H)，7.80(s，1H)， 7.86(d，J＝8.4Hz，1H)，8.11(br s，1H)，8.78(br s，1H)。LCMS：m/e 549(M+H)+， 保留时间：3.79分钟，柱B，4分钟梯度。
中间体17
13-环己基-10-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2] 苯并氮杂-6-甲酸.
将13-环己基-10-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-3-甲氧基-7H-吲哚并 [2，1-a][2]苯并氮杂-6-甲酸甲酯(1.0g，1.8mmol)溶解在MeOH/THF(1∶1， 24mL)中，并用1M NaOH水溶液(5mL)处理。将反应混合物在60℃搅拌并加 热1.5小时，然后冷却至室温。透明溶液用1M HCl水溶液(5mL)中和，然后 浓缩，从而除去有机溶剂。过滤收集所得固体，用H2O洗涤，并真空干燥， 得到13-环己基-10-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2] 苯并氮杂-6-甲酸(1.0g，1.7mmol，94％)，其为亮黄色固体(带有0.75当量的 THF)，所述固体不经进一步纯化即使用。1H NMR(300MHz，CD3OD)δ 1.11-2.24(m，17H，3H来自THF)，2.81-2.96(m，1H)，3.17-3.28(m，1H)， 3.69-3.79(m，3H，来自THF)，3.94(s，3H)，4.07-4.33(m，1H)，5.55-5.81(m，1H)， 7.14-7.24(m，2H)，7.55-7.64(m，2H)，7.88-7.94(m，2H)，8.20(br s，1H)。LCMS： m/e 535(M+H)+，保留时间：3.73分钟，柱B，4分钟梯度。
中间体18
13-环己基-10-((异丙基磺酰基)氨甲酰基)-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2] 苯并氮杂-6-甲酸甲酯.
将1，1’-羰基二咪唑(262mg，1.62mmol)加到13-环己基-3-甲氧基-6-(甲氧 基羰基)-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-10-甲酸(603mg，1.36mmol)于 THF(3mL)中的浆液中。将反应混合物在60℃加热1.5小时，冷却至室温，用 丙-2-磺酰胺(200mg，1.62mmol)处理，搅拌10分钟，然后通过滴加 DBU(0.27mL，1.8mmol)于THF(0.75mL)中的溶液来处理。将反应混合物在室 温搅拌过夜，用EtOAc(15mL)稀释，并用H2O(～5mL)、1N HCl(水溶 液)(2×10mL)和盐水(～5mL)洗涤。合并的水层用EtOAc(15mL)萃取，并且有 机层用1N HCl(水溶液)(～10mL)洗涤。合并的有机层用盐水(～5mL)洗涤，干 燥(MgSO4)，过滤，并浓缩。将残余物与Et2O(～15mL)一起搅拌2小时，过滤 收集固体，用Et2O冲洗，并干燥，得到13-环己基-10-((异丙基磺酰基)氨甲酰 基)-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-6-甲酸甲酯(640mg，1.2mmol， 85％)，其为亮黄色固体，所述固体不经进一步纯化即使用。1H NMR(300MHz， CDCl3)δ1.12-2.13(m，10H)，1.47(d，J＝7.0Hz，6H)，2.73-2.86(m，1H)，3.82(s， 3H)，3.89(s，3H)，4.06-4.26(m，1H)，4.09(七重峰，J＝7.0Hz，1H)，5.51-5.71(m， 1H)，6.98(d，J＝2.6Hz，1H)，7.08(dd，J＝8.4，2.6Hz，1H)，7.44(dd，J＝8.4，1.5Hz， 1H)，7.50(d，J＝8.4Hz，1H)，7.80(s，1H)，7.87(d，J＝8.4Hz，1H)，8.10(d，J＝1.5Hz， 1H)，8.57(s，1H)。LCMS：m/e 551(M+H)+，保留时间：3.87分钟，柱B，4分 钟梯度。
中间体19
10-((氨基磺酰基)氨甲酰基)-13-环己基-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯 并氮杂-6-甲酸甲酯.
将1，1’-羰基二咪唑(1.23g，7.60mmol)加到13-环己基-3-甲氧基-6-(甲氧基 羰基)-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-10-甲酸(2.6g，5.8mmol)于THF(11mL) 中的浆液中。将反应混合物在60℃加热1.5小时，冷却至室温，用硫酰胺(1.12g， 11.7mmol)处理，搅拌10分钟，然后通过滴加DBU(1.8mL，11.7mmol)于 THF(3mL)中的溶液来处理。将反应混合物在室温搅拌3小时，用EtOAc(80mL) 和CH2Cl2(100mL)稀释，并浓缩至干。残余物用CH2Cl2(100mL)稀释，并用 1N HCl(水溶液)(2×100mL)洗涤。合并的水层用CH2Cl2(100mL)萃取，合并的 有机层用半饱和盐水(1/2saturated brine)(～50mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤， 并浓缩。将残余物与Et2O(～75mL)一起搅拌1小时，过滤收集固体，用Et2O 冲洗，并干燥，得到10-((氨基磺酰基)氨甲酰基)-13-环己基-3-甲氧基-7H-吲 哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-6-甲酸甲酯(2.8g，5.3mmol，91％)，其为亮黄色固 体，所述固体不经进一步纯化即使用。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ 1.08-2.10(m，10H)，2.71-2.84(m，1H)，3.79(s，3H)，3.89(s，3H)，4.00-4.18(m，1H)， 5.50-5.64(m，1H)，5.68(s，2H)，6.97(d，J＝2.6Hz，1H)，7.07(dd，J＝8.8，2.6Hz，1H)， 7.46(dd，J＝8.4，1.5Hz，1H)，7.49(d，J＝8.8Hz，1H)，7.78(s，1H)，7.82(d，J＝8.4Hz， 1H)，8.10(br s，1H)，9.49(s，1H)。LCMS：m/e 524(M+H)+，保留时间：3.60分 钟，柱B，4分钟梯度。
中间体20
10-((氨基磺酰基)氨甲酰基)-13-环己基-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯 并氮杂-6-甲酸.
将10-((氨基磺酰基)氨甲酰基)-13-环己基-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2] 苯并氮杂-6-甲酸甲酯(725mg，1.39mmol)溶解在MeOH/THF(1∶1，16mL)中， 并用1M NaOH水溶液(3mL)处理。将反应混合物在60℃搅拌并加热0.5小时， 然后冷却至室温。反应溶液用MeOH/H2O(2∶1，15mL)稀释，用1M HCl水溶液 (3mL)中和，并浓缩，从而除去有机溶剂。过滤收集所得固体，用H2O洗涤， 并真空干燥，得到10-((氨基磺酰基)氨甲酰基)-13-环己基-3-甲氧基-7H-吲哚 并[2，1-a][2]苯并氮杂-6-甲酸(650g，1.3mmol，92％)，其为亮黄色固体，所述 固体不经进一步纯化即使用。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.16-2.22(m，10H)， 2.82-2.96(m，1H)，3.94(s，3H)，4.07-4.29(m，1H)，5.57-5.80(m，1H)，7.14-7.23(m， 2H)，7.55-7.63(m，2H)，7.88-7.94(m 2H)，8.18(s，1H)。LCMS：m/e 510(M+H)+， 保留时间：2.85分钟，柱B，4分钟梯度。
实施例1
(+/-)-8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-1a-(吗啉-4-基羰基)-环丙并[d]吲哚并 [2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸甲酯.
将碘化三甲基氧化锍(660mg，3.0mmol)加到NaH(124mg，浓度为60％的 油分散液，3.1mmol)于DMSO(20mL)中的悬浮液中。将反应混合物在室温搅 拌15分钟。之后加入13-环己基-6-(吗啉-4-基羰基)-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并 氮杂-10-甲酸甲酯(484mg，1.0mmol)于DMSO(10mL)中的溶液。然后将反应 混合物在室温搅拌3小时，接着在50℃搅拌过夜。通过加入水来将反应淬灭， 此时形成灰白色沉淀物，过滤收集所述沉淀物。然后该物质通过制备性反 相HPLC来纯化，得到产物，其为浅黄色固体(330mg，66％收率)。MS m/z 499(MH+)，保留时间：3.818分钟。
实施例2
(+/-)-8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-1a-(吗啉-4-基羰基)-环丙并[d]吲哚并 [2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸.
向(+/-)-8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-1a-(吗啉-4-基羰基)-环丙并[d]吲哚并 [2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸甲酯(235mg，0.471mmol)于THF/甲醇混合物 (6.0mL/6.0mL)中的溶液中加入2N NaOH溶液(2.0mL)。在微波条件下将反应 混合物在90℃加热15分钟。然后对其进行浓缩，用1N HCl溶液酸化，并用 乙酸乙酯(2×50mL)萃取。合并有机层，干燥(MgSO4)，过滤，并减压浓缩。 然后残余物通过反相制备性HPLC来纯化，得到产物，其为灰白色固体 (165mg，，72％收率)。MS m/z 499(MH+)，保留时间：3.663分钟。1H NMR(500MHz，CD3OD)δppm。观察到化合物以相互转化的旋转异构体 (rotamer)的形式存在，如化合物的NMR谱所证实的那样。
实施例3和4
(+)8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-1a-(吗啉-4-基羰基)-环丙并[d]吲哚并 [2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸和(-)8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-1a-(吗啉-4-基羰 基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸.(仅指相对立体化学).
使用如下提供的手性反相制备性HPLC方法，对(+/-)-8-环己基 -1，1a，2，12b-四氢-1a-(吗啉-4-基羰基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂 -5-甲酸的外消旋样品进行拆分，得到所存在各对映异构体的样品。方法 细节：Chiralpak AD半制备性柱，20×250mm，10μm；流动相：0.05％TFA/EtOH； 温度：环境温度；以7.0mL/min的流速运行45分钟；在213nm进行UV检测； 注射：2mL浓度为～15mg/mL的乙醇溶液。
实施例5
(+/-)-8-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，1a，2，12b-四氢-1a-(吗啉-4-基 羰基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰胺.
将2M草酰氯(0.093mL，0.186mmol)于CH2Cl2中的溶液滴加到(+/-)-8-环 己基-1，1a，2，12b-四氢-1a-(吗啉-4-基羰基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮 杂-5-甲酸(45mg，0.093mmol)于CH2Cl2(10mL)中的溶液(含有一滴DMF)中。 将反应混合物在室温搅拌2小时，之后将其浓缩，并高真空干燥。接着将残 余物溶解在THF(10mL)中，并加入N，N-二甲基硫酰胺(23mg，0.186mmol)和 DIPEA(0.049mL，0.279mmol))于THF(2mL)中的溶液。随后加入 DMAP(10mg)，然后将反应混合物在室温搅拌10分钟，接着在50℃搅拌过夜。 然后将其冷却，并减压浓缩混合物。所得残余物通过制备性反相HPLC来纯 化，得到产物，其为黄色固体(5.0mg，9％收率)。MS m/z 591(MH+)，保留时 间：3.525分钟。1H NMR(300MHz，CD3OD)δppm。观察到化合物以相互转 化的旋转异构体的形式存在，如化合物的NMR谱所证实的那样。
实施例6
(+/-)-8-环己基-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮 杂-1a，5(2H)-二甲酸二甲酯.
将碘化三甲基氧化锍(1.44g，6.528mmol)加到NaH(162mg，浓度为60％的 油分散液，6.746mmol)于DMSO(30mL)中的悬浮液中，并将反应混合物在室 温搅拌30分钟。然后加入13-环己基-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂 -6，10-二甲酸二甲酯(1.0g，2.176mmol)于DMSO(10mL)中的溶液，并将所得 混合物在室温搅拌2小时，然后在50℃搅拌过夜。随后通过加入水来将反应 淬灭，之后形成灰白色沉淀物，过滤收集所述沉淀物。然后该物质使用硅 胶快速色谱法(使用己烷至25％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂)来纯化。合并均质 馏分，并真空蒸发，得到产物，其为灰白色固体(815mg，79％收率)。MS m/z 474(MH+)，保留时间：4.161分钟。
实施例7
(+/-)-8-环己基-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮 杂-1a，5(2H)-二甲酸(5-甲基)酯.
向(+/-)-8-环己基-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并 氮杂-1a，5(2H)-二甲酸二甲酯(800，1.69mmol)于THF(25mL)中的溶液中加 入1M n-Bu4NOH(四正丁基氢氧化铵)于甲醇中的溶液(2.5mL，2.5mmol)。将 反应混合物在室温搅拌3天，然后在40℃加热3小时。将其浓缩，用1N HCl 溶液酸化，并用乙酸乙酯(2×30mL)萃取。合并有机层，干燥(MgSO4)，过滤， 并减压浓缩，得到产物，其为浅黄色固体(750mg，97％收率)。MS m/z 460(MH+)，保留时间：4.001分钟。1H NMR(300MHz，CD3OD)δppm。观察 到化合物以相互转化的旋转异构体的形式存在，如化合物的NMR谱所证实 的那样。
实施例8
8-环己基-1a-[[2，6-二甲基-吗啉-4-基]羰基]-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基- 环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸甲酯.
将TBTU(105mg，0.326mmol)和DIPEA(0.19mL，1.09mmol)加到(+/-)-8-环 己基-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a，5(2H)- 二甲酸(5-甲基)酯(100mg，0.218mmol)于DMSO(2.0mL)中的溶液中。将混合 物在室温搅拌15分钟，之后加入顺式-2，6-二甲基吗啉(37.5mg，0.326mmol)， 然后将反应混合物在室温搅拌过夜。接着对所得混合物进行浓缩，并且残 余物通过制备性反相HPLC来纯化，得到标题化合物，其为白色固体(76mg， 63％收率)。MS m/z 557(MH+)，保留时间：3.941分钟。1H NMR(500MHz， CD3OD)δppm。观察到化合物以相互转化的旋转异构体的形式存在，如化合 物的NMR谱所证实的那样。
实施例9
(+/-)-8-环己基-1a-[[(顺式)-2，6-二甲基-吗啉-4-基]羰基]-1，1a，2，12b-四氢 -11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸.
将2M NaOH溶液(1.0mL)加到相对-8-环己基-1a-[[(顺式)-2，6-二甲基-吗 啉-4-基]羰基]-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮 杂-5-甲酸甲酯 (rel-8-cyclohexyl-1a-[[(cis)-2，6-dimethyl-4-morpholinyl]carbonyl]-1，1a，2，12b-tet rahydro-11-methoxy-cycloprop[d]indolo[2，1-a][2]benzazepine-5-carboxylic acid， methyl ester)(73mg，0.131mmol)于THF/甲醇混合物(2.0mL/2.0mL)中的溶液 中。在微波条件下将反应混合物在90℃加热10分钟。然后将其浓缩，用1N HCl溶液酸化，并用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。合并有机层，干燥(MgSO4)， 过滤，并减压浓缩，得到标题化合物，其为浅黄色固体(70mg，98％收率)。 MS m/z 543(MH+)，保留时间：3.808分钟。1H NMR(500MHz，CD3OD)δppm。 观察到化合物以相互转化的旋转异构体的形式存在，如化合物的NMR谱所 证实的那样。
实施例10
8-环己基-11-甲氧基N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，1a，2，12b-四氢-1a-[[(顺 式)-2，6-二甲基-吗啉-4-基]羰基]-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲 酰胺.
将2M草酰氯于CH2Cl2中的溶液(0.1mL，0.2mmol)滴加到相对-8-环己基 -1a-[[(顺式)-2，6-二甲基-吗啉-4-基]羰基]-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-环丙并 [d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸(54mg，0.1mmol)于CH2Cl2(10mL)中的 溶液(含有一滴DMF)中。将反应混合物在室温搅拌2小时，之后将其浓缩， 并高真空干燥。将所得残余物溶解在THF(10mL)中，并加入N，N-二甲基硫酰 胺(24.8mg，0.2mmol)和DIPEA(0.052mL，0.3mmol))于THF(2mL)中的溶液。接 着加入DMAP(10mg)，然后将反应混合物在室温搅拌10分钟，接着在50℃搅 拌过夜。随后将其浓缩，并且残余物通过制备性反相HPLC来纯化，得到标 题化合物，其为白色固体(19.0mg，31％收率)。MS m/z 649(MH+)，保留时间： 3.685分钟。1H NMR(500MHz，CD3OD)δppm。观察到化合物以相互转化的 旋转异构体的形式存在，如化合物的NMR谱所证实的那样。
实施例11
(+/-)-8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-[(吗啉-4-基羰基)氨基]-环 丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸甲酯.
向在氮气下搅拌的氢化钠(浓度为60％的矿物油分散液，870mg，22mmol) 于DMSO(18mL)中的浆液中加入碘化三甲基氧化锍(4.8g，22mmol)。将反应 混合物搅拌30分钟，然后加入13-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-3-甲氧基 -7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-6-甲酸甲酯·10-甲酰胺(5.0g，9.1mmol)于 DMSO(20mL)中的溶液(烧瓶用DMSO(2×6mL)冲洗)。将反应混合物搅拌10 分钟，倒入0.1N HCl(225mL)中，搅拌30分钟，然后过滤收集固体。将固体 溶解在CH2Cl2(120mL)中，用H2O(50mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，并浓缩 至干。残余物通过硅胶色谱法(Biotage Horizon，40S)(0-5％MeOH/CH2Cl2)来 纯化，将经纯化的物质浓缩至干，溶解在Et2O(50mL)中，并用己烷(50mL) 破碎(crash out)。将浆液搅拌2小时，然后过滤收集固体，得到产物，其为浅 黄色固体(3.3g，5.9mmol，65％)。阻转异构体(atrope isomer)的混合物。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.63(s，0.55H)，8.56(s，0.45H)，8.19(d，J＝1.5Hz， 0.55H)，7.96(d，J＝1.1Hz，0.45H)，7.84(d，J＝8.4Hz，0.45H)，7.83(d，J＝8.4Hz， 0.55H)，7.43-7.34(m，1H)，7.25(d，J＝8.4Hz，0.45H)，7.23(d，J＝8.4Hz，0.55H)， 7.11(d，J＝2.6Hz，0.55H)，7.00(d，J＝2.6Hz，0.45H)，6.94-6.86(m，1H)，5.39(d， J＝15.0Hz，0.55H)，5.15(d，J＝15.0Hz，0.45H)，4.06(d，J＝15.0Hz，0.45H)，3.87(s， 3H)，3.79(s，1.35H)，3.52(s，1.65H)，3.41(d，J＝15.0Hz，0.55H)，3.05(s，6H)， 2.97-2.58(m，2H)，2.10-1.13(m，11.55H)，0.36(t，J＝6.2Hz，0.45H)。LCMS：m/e 564(M-H)-，保留时间：3.11分钟，柱A，4分钟梯度。
实施例12
(+/-)-8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧 基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸.
向(+/-)-8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-[(吗啉-4-基羰基)氨基]- 环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸甲酯(100mg，0.177mmol)于 THF/甲醇混合物(2.0mL/2.0mL)中的溶液中加入2N NaOH溶液(1.0mL)。在微 波条件下将反应混合物在90℃加热5分钟。然后对其进行浓缩，用1N HCl 溶液酸化，并用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。合并有机层，干燥(MgSO4)，过滤， 并浓缩。残余物通过制备性HPLC来纯化，得到所期望的产物，其为浅黄色 固体(59mg，60％收率)。MS m/z 552(MH+)，保留时间：3.850分钟。1H NMR(300MHz，MeOD)δppm 0.25(m，0.38H)1.14-2.22(m，11.62H)2.69-2.98(m， 2H)3.02(s，2.28H)3.02(s，3.72H)3.41(d，J＝15.00Hz，0.62H)3.88(s，3H)4.01(d， J＝15.00Hz，0.38H)5.26(d，J＝15.00Hz，0.38H)5.45(d，J＝14.64Hz， 0.62H)6.94-7.02(m，1H)7.13(d，J＝2.56Hz，0.38H)7.21(d，J＝2.20Hz， 0.62H)7.26(d，J＝8.42Hz，0.62H)7.30(d，J＝8.78Hz，0.38H)7.53(dd，J＝8.42， 1.46Hz，0.62H)7.61(dd，J＝8.60，1.65Hz，0.38H)7.85(d，J＝8.42Hz，0.62H)7.89(d， J＝8.42Hz，0.38H)8.10(s，0.38H)8.28(d，J＝1.46Hz，0.62H)。
实施例13
(1aR)-[部分]-8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢 -11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸.
将10N NaOH溶液(2.0mL，20mmol)和4mL水加到(1aR)-[部分]-8-环己基 -N5-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，12b-二氢-N1a-[(2R，3S)-3-羟基-4，7，7-三甲基二环 [2.2.1]庚-2-基]-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a，5(2H)-二 甲酰胺(160mg，0.228mmol)于THF/MeOH(7mL/7mL)中的溶液中。在微波条 件下将反应混合物在120℃加热1小时。然后将其浓缩，用浓HCl溶液酸化， 并用乙酸乙酯萃取2次(2×30mL)。合并有机层，干燥(MgSO4)，过滤，并真 空浓缩，得到橙色油状物。然后粗制产物通过制备性HPLC柱来纯化，得到 产物，其为浅黄色固体(80mg，64％收率)。平均比旋光(specific rotation)： -130.85°；溶剂：MeOH；波长：589nm；50cm池。MS m/552(MH+)，保留 时间：3.760分钟。1H NMR(500MHz，MeOD)δppm 0.27(m，0.38H)1.14-2.22(m， 11.62H)2.76(m，0.38H)2.80-2.92(m，1H)2.92-3.09(m，6.62H)3.45(d，J＝14.95Hz， 0.62H)3.90(s，1.86H)3.91(s，1.14H)4.04(d，J＝15.26Hz，0.38H)5.28(d，J＝15.26Hz， 0.38H)5.47(d，J＝15.26Hz，0.62H)6.95-7.05(m，1H)7.15(d，J＝2.75Hz， 0.38H)7.23(d，J＝1.83Hz，0.62H)7.28(d，J＝8.55Hz，0.62H)7.33(d，J＝8.54Hz， 0.38H)7.54(dd，J＝8.39，1.68Hz，0.62H)7.63(dd，J＝8.55，1.53Hz，0.38H)7.86(d， J＝8.55Hz，0.62H)7.91(d，J＝8.55Hz，0.38H)8.11(d，J＝1.22Hz，0.62H)8.29(d， J＝1.22Hz，0.38H)。观察到产物以相互转化的旋转异构体的形式存在，如化 合物的NMR谱所证实的那样。
实施例14
(1aS)-[部分]-8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢 -11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸.
将10N NaOH溶液(1.8mL，18mmol)和4mL水加到(1aS)-[部分]-8-环己基 -N5-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，12b-二氢-N1a-[(2R，3S)-3-羟基-4，7，7-三甲基二环 [2.2.1]庚-2-基]-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a，5(2H)-二 甲酰胺(130mg，0.185mmol)于THF/MeOH(7mL/7mL)中的溶液中。在微波条 件下将反应混合物在120℃加热1小时。将其浓缩，用浓HCl溶液酸化，并用 乙酸乙酯萃取两次(2×30mL)。合并有机层，干燥(MgSO4)，过滤，并真空浓 缩，得到橙色油状物。然后粗制产物通过制备性HPLC柱来纯化，得到产物， 其为浅黄色固体(68mg，67％收率)。MS m/552(MH+)，保留时间：3.773分钟。 1H NMR(500MHz，MeOD)δppm 0.27(m，0.38H)1.14-2.22(m，11.62H)2.76(m， 0.38H)2.80-2.92(m，1H)2.92-3.09(m，6.62H)3.45(d，J＝14.95Hz，0.62H)3.90(s， 1.86H)3.91(s，1.14H)4.04(d，J＝15.26Hz，0.38H)5.28(d，J＝15.26Hz， 0.38H)5.47(d，J＝15.26Hz，0.62H)6.95-7.05(m，1H)7.15(d，J＝2.75Hz， 0.38H)7.23(d，J＝1.83Hz，0.62H)7.28(d，J＝8.55Hz，0.62H)7.33(d，J＝8.54Hz， 0.38H)7.54(dd，J＝8.39，1.68Hz，0.62H)7.63(dd，J＝8.55，1.53Hz，0.38H)7.86(d， J＝8.55Hz，0.62H)7.91(d，J＝8.55Hz，0.38H)8.11(d，J＝1.22Hz，0.62H)8.29(d， J＝1.22Hz，0.38H)。观察到产物以相互转化的旋转异构体的形式存在，如化 合物的NMR谱所证实的那样。
实施例15
(+/-)-8-环己基-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮 杂-1a，5(2H)-二甲酸5-(1，1-二甲基乙基)酯·1a-(甲基)酯.
在氮气下将氢化钠(96mg，4mmol)加到搅拌的氯化三甲基氧化锍(567mg， 4.4mmol)于无水DMSO(10mL)中的悬浮液中。将所得混合物在室温搅拌 30-45分钟，然后分小份加入纯净的13-环己基-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2] 苯并氮杂-6，10-二甲酸10-(1，1-二甲基乙基)酯·6-(甲基)酯(1.0g，2mmol)。悬 浮液用DMSO(5mL)稀释，并在50℃加热3-4小时。使反应混合物冷却至室温， 并加入水。固体分离出来，其通过过滤来收集，用水洗涤，然后风干过夜， 得到1.15g粗制产物。该物质通过快速柱色谱法(硅胶，3％MeOH/DCM)来纯 化，得到纯的标题化合物(0.96g)。LC/MS：保留时间：3.816分钟；m/e 516(MH+)。1H NMR(400MHz，CDCl3)。观察到产物以相互转化的旋转异构 体的形式存在，如化合物的NMR谱所证实的那样。
实施例16
(+/-)-8-环己基-11-(甲基氧基)-1a-((甲基氧基)羰基)-1，1a，2，12b-四氢环丙 并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸.
将(+/-)-8-环己基-11-(甲基氧基)-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯 并氮杂-1a，5(2H)-二甲酸5-(1，1-二甲基乙基)酯·1a-(甲基)酯(0.60g， 1.16mmol)溶解在1，2-二氯乙烷(10mL)中，加入三氟乙酸(10mL)，在氮气下 将反应混合物在室温搅拌，并通过HPLC进行监测，直到完成。真空除去挥 发物，向残余物中加入苯，并真空共沸除去三氟乙酸，得到产物，其为黄 色泡沫状物。1H NMR(500MHz，氯仿-D)δppm 0.34-0.48(m，0.4H)0.91(s， 0.4H)1.17-1.33(m，2H)1.32-1.49(m，3H)1.58(d，J＝13.12Hz，0.5H)1.64-1.86(m， 3.5H)1.87-2.16(m，4.5H)2.59-2.70(m，0.4H)2.79(t，J＝12.51Hz， 0.4H)2.84-2.99(m，1.3H)3.45(d，J＝15.26Hz，0.6H)3.58(d，J＝1.53Hz， 1.7H)3.81(d，J＝1.53Hz，1.2H)3.83-3.95(m，3H)4.09(d，J＝15.26Hz，0.4H)5.21(d， J＝14.95Hz，0.4H)5.45(d，J＝14.95Hz，0.6H)6.88-6.97(m，1H)7.02(d，J＝2.44Hz， 0.4H)7.14(s，0.6H)7.26-7.33(m，1H)7.74-7.92(m，2H)8.21(s，0.4H)8.43(s，0.6H)。 MS m/z 460(MH+)。
实施例17
(+/-)-8-环己基-5-(环丙基磺酰基氨甲酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基- 环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a-甲酸.
将(+/-)-8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-(甲氧基羰基)-环丙并[d] 吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸(1当量)和羰基二咪唑(1.5当量)于无水 THF中的混合物在50℃加热30分钟，然后使其冷却至室温。然后依次加入1 当量的环丙基磺酰胺和1，8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯(2当量)。将所得混 合物在室温搅拌过夜。用酸性水溶液进行后处理后，经分离的粗制产物通 过制备性HPLC来纯化。然后中间体酯使用1N NaOH于THF-MeOH中的溶液 来水解，得到标题化合物。LC/MS：保留时间：2.030分钟；m/e 549(MH+)。 1H NMR(400MHz，CDCl3)。观察到产物以相互转化的旋转异构体的形式存 在，如化合物的NMR谱所证实的那样。
实施例18
(+/-)-8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-[(吗啉-4-基羰基)氨基]-环 丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸甲酯.
在圆底烧瓶中向碘化三甲基氧化锍(199mg，0.906mmol)和NaH(38mg， 浓度为60％的油分散液，0.953mmol)的混合物中加入DMSO(5mL)。将反应混 合物在室温搅拌0.5小时。然后加入13-环己基-10-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨 基]羰基]-3-(甲氧基)-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-6-甲酸甲酯(125mg， 0.227mmol)。将反应混合物在室温搅拌3小时。然后将其在50℃加热3小时。 反应用水淬灭，并用1N HCl溶液酸化。收集浅黄色固体，其为粗制产物 (106mg，83％收率)，然后6mg粗制产物通过制备性HPLC柱来纯化，得到浅 黄色固体，其为纯的外消旋化合物(1.8mg)。MS m/z 566(MH+)，保留时间： 3.850分钟。1H NMR(500MHz，MeOD)δppm 0.28(m，0.36H)1.19-2.20(m， 11.64H)2.70-3.02(m，2H)3.03(s，2.16H)3.05(s，3.84H)3.49(d，J＝15.26Hz， 0.64H)3.54(s，1.92H)3.83(s，1.08H)3.91(s，3H)4.08(d，J＝15.26Hz，0.36H)5.29(d， J＝15.26Hz，0.36H)5.50(d，J＝14.95Hz，0.64H)6.98-7.06(m，1H)7.16(d，J＝2.44Hz， 0.36H)7.23(d，J＝2.44Hz，0.64H)7.30(d，J＝8.55Hz，0.64H)7.34(d，J＝8.55Hz， 0.36H)7.56(dd，J＝8.55，1.53Hz，0.64H)7.63(dd，J＝8.55，1.53Hz，0.36H)7.88(d， J＝8.55Hz，0.64H)7.91(d，J＝8.55Hz，0.36H)8.12(s，0.36H)8.33(d，J＝1.53Hz， 0.64H)。观察到产物以相互转化的旋转异构体的形式存在，如化合物的NMR 谱所证实的那样。
实施例19
(+/-)-8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-[(吗啉-4-基羰基)氨基]-环 丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸.
向(+/-)-8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-[(吗啉-4-基羰基)氨基]- 环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸甲酯(100mg，0.177mmol)于 THF/甲醇混合物(2.0mL/2.0mL)中的溶液中加入2N NaOH溶液(1.0mL)。在微 波条件下将反应混合物在90℃加热5分钟。然后将其浓缩，用1N HCl溶液酸 化，并用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。合并有机层，干燥(MgSO4)，并浓缩。残 余物通过制备性HPLC来纯化，得到浅黄色固体，其为最终产物(59mg，60％ 收率)。MS m/z 552(MH+)，保留时间：3.850分钟。1H NMR(300MHz，MeOD)δ ppm 0.25(m，0.38H)1.14-2.22(m，11.62H)2.69-2.98(m，2H)3.02(s，2.28H)3.02(s， 3.72H)3.41(d，J＝15.00Hz，0.62H)3.88(s，3H)4.01(d，J＝15.00Hz，0.38H)5.26(d， J＝15.00Hz，0.38H)5.45(d，J＝14.64Hz，0.62H)6.94-7.02(m，1H)7.13(d，J＝2.56Hz， 0.38H)7.21(d，J＝2.20Hz，0.62H)7.26(d，J＝8.42Hz，0.62H)7.30(d，J＝8.78Hz， 0.38H)7.53(dd，J＝8.42，1.46Hz，0.62H)7.61(dd，J＝8.60，1.65Hz，0.38H)7.85(d， J＝8.42Hz，0.62H)7.89(d，J＝8.42Hz，0.38H)8.10(s，0.38H)8.28(d，J＝1.46Hz， 0.62H)。观察到产物以相互转化的旋转异构体的形式存在，如化合物的NMR 谱所证实的那样。
实施例20
(+/-)-8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-(苯 基甲氧基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸甲酯.
在圆底烧瓶中向碘化三甲基氧化锍(687mg，3.122mmol)和NaH(131mg， 浓度为60％的油分散液，3.276mmol)的混合物中加入DMSO(20mL)。将反应 混合物在室温搅拌0.5小时。然后加入13-环己基-10-[[[(二甲基氨基)磺酰基] 氨基]羰基]-3-(苯基甲氧基)-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-6-甲酸甲酯 (490mg，0.78mmol)。将反应混合物在室温搅拌3小时。然后将其在50℃加热 过夜。用水将反应淬灭，并用1N HCl溶液酸化。收集浅黄色固体，其为粗 制产物，然后通过制备性HPLC柱对10mg粗制产物进行纯化，得到黄色固体， 其为纯的外消旋化合物(8.3mg)。MS m/z 642(MH+)，保留时间：4.085分钟。 1H NMR(500MHz，MeOD)δppm 0.27(m，0.35H)1.18-2.20(m，11.65H)2.73(m， 0.35H)2.79-3.01(m，1.65H)3.03(s，2.1H)3.05(s，3.9H)3.47(d，J＝15.26Hz， 0.65H)3.53(s，1.95H)3.82(s，1.05H)4.07(d，J＝15.26Hz，0.35H)5.19(s，2H)5.28(d， J＝15.26Hz，0.35H)5.48(d，J＝14.95Hz，0.65H)7.04-7.12(m，1H)7.23(d，J＝2.44Hz， 0.35H)7.25-7.38(m，2.65H)7.39-7.45(m，2H)7.48-7.52(m，2H)7.56(d，J＝8.55Hz， 0.65H)7.63(d，J＝8.55Hz，0.35H)7.87(d，J＝8.55Hz，0.65H)7.91(d，J＝8.55Hz， 0.35H)8.11(s，0.35H)8.32(s，0.65H)。观察到产物以相互转化的旋转异构体的 形式存在，如化合物的NMR谱所证实的那样。
实施例21
(+/-)-8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-(苯 基甲氧基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸.
向粗制(+/-)-8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢 -11-(苯基甲氧基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸甲酯于 THF/甲醇混合物(8.0mL/8.0mL)中的溶液中加入2N NaOH溶液(4.0mL)。在微 波条件下将反应混合物在85℃加热10分钟。然后将其浓缩，并用1N HCl溶 液酸化。收集浅橙色固体，其为粗制酸(480mg，98％收率)，然后通过制备性 HPLC柱对10mg粗制产物进行纯化，得到浅黄色固体，其为纯的外消旋化合 物(8.5mg)。MS m/z 628(MH+)，保留时间：4.055分钟。1H NMR(500MHz， MeOD)δppm 0.28(m，0.38H)1.17-2.23(m，11.62H)2.76(m，0.38H)2.81-2.91(m， 1H)2.93-3.01(m，0.62H)3.03(s，2.28H)3.04(s，3.72H)3.46(d，J＝14.96Hz， 0.62H)4.06(d，J＝15.26Hz，0.38H)5.21(s，2H)5.29(d，J＝15.26Hz，0.38H)5.48(d， J＝14.95Hz，0.62H)7.05-7.12(m，1H)7.24(d，J＝2.44Hz，0.38H)7.27-7.39(m， 2.62H)7.39-7.46(m，2H)7.48-7.57(m，2.62H)7.63(dd，J＝8.55，1.22Hz， 0.38H)7.87(d，J＝8.55Hz，0.62H)7.91(d，J＝8.54Hz，0.38H)8.12(s，0.38H)8.30(s， 0.62H)。
实施例22
(+/-)-8-环己基-1，12b-二氢-11-(苯基甲氧基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2] 苯并氮杂-1a，5(2H)-二甲酸5-(甲基)酯.
在圆底烧瓶中向碘化三甲基氧化锍(1196mg，5.433mmol)和NaH(225mg， 浓度为60％的油分散液，5.614mmol)的混合物中加入DMSO(20mL)。将反应 混合物在室温搅拌0.5小时。然后加入13-环己基-3-(苯基甲氧基)-7H-吲哚并 [2，1-a][2]苯并氮杂-6，10-二甲酸二甲酯(970mg，1.811mmol)。将反应混合物 在室温搅拌3小时。然后将其在50℃加热2天。用水将反应淬灭，并用1N HCl 溶液酸化。收集黄色固体(975mg，98％收率)。MS m/z 550(MH+)，保留时间： 4.580分钟。
向(+/-)-8-环己基-1，12b-二氢-11-(苯基甲氧基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2] 苯并氮杂-1a，5(2H)-二甲酸二甲酯(210mg，0.382mmol)于THF(10mL)中的溶 液中加入1M Bu4NOH(四丁基氢氧化铵)于甲醇中的溶液(0.46mL， 0.46mmol)。将反应混合物在40℃加热3小时。然后将其浓缩，用1N HCl溶 液酸化，并用乙酸乙酯(2×30mL)萃取。合并有机层，干燥(MgSO4)，并浓缩， 得到棕色的固体，其为产物(200mg，98％收率)。MS m/z 536(MH+)，保留时 间：4.361分钟。1H NMR(300MHz，MeOD)δppm 0.24(m，0.38H)0.91(m， 0.38H)1.15-2.23(m，11.24H)2.69-3.05(m，2H)3.41(d，J＝15.00Hz，0.62H)3.93(s， 1.86H)3.95(s，1.14H)4.01(d，J＝15.01Hz，0.38H)5.14-5.28(m，2.38H)5.43(d， J＝15.00Hz，0.62H)7.04(d，J＝2.56Hz，0.38H)7.07(d，J＝1.83Hz， 0.62H)7.18-7.46(m，5H)7.46-7.54(m，2H)7.65(d，J＝8.78Hz，0.62H)7.73(d， J＝8.78Hz，0.38H)7.82(d，J＝8.42Hz，0.62H)7.87(d，J＝8.78Hz，0.38H)8.11(s， 0.38H)8.38(s，0.62H)。
实施例23
(+/-)-8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-1a-(吗啉-4-基羰基)-11-(苯基甲氧基)-环 丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸甲酯.
向(+/-)-8-环己基-1，12b-二氢-11-(苯基甲氧基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2] 苯并氮杂-1a，5(2H)-二甲酸5-(甲基)酯(345mg，0.644mmol)于DMSO(10.0mL) 中的溶液中加入TBTU(310mg，0.966mmol)和DIPEA(0.56mL，3.22mmol)。将 反应混合物在室温搅拌15分钟。然后加入吗啉(0.084mL，0.966mmol)，并将 反应混合物在室温搅拌3小时。然后加入水，并用1N HCl溶液酸化。收集浅 黄色固体，其为产物(360mg，92％收率)。MS m/z 605(MH+)，保留时间：4.168 分钟。1H NMR(500MHz，氯仿-D)δppm 0.35(m，0.34H)0.95(m， 0.34H)1.07-1.54(m，5.32H)1.62-2.10(m，6H)2.31-2.42(m，0.34H)2.43-2.51(m， 0.66H)2.73(m，0.34H)2.81-2.94(m，0.66H)2.96-3.16(m，5H)3.48-3.76(m， 3.66H)3.88(s，3H)4.11(d，J＝14.95Hz，0.34H)4.63(d，J＝14.95Hz， 0.34H)4.95-5.14(m，2.66H)6.92(dd，J＝8.24，2.44Hz，0.34H)6.94-6.99(m， 0.66H)7.10(s，0.34H)7.13(s，0.66H)7.17-7.44(m，6H)7.64-7.71(m， 1H)7.73-7.83(m，1H)7.96(s，0.34H)7.99(s，0.66H)。
实施例24
(+/-)-8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-1a-(吗啉-4-基羰基)-11-羟基-环丙并[d]吲 哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸甲酯.
向8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-1a-(吗啉-4-基羰基)-11-(苯基甲氧基)-环丙 并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸甲酯(270mg，0.446mmol)于乙酸乙 酯(15mL)中的溶液中加入10％Pd/炭(15mg)。将反应混合物在氢气气囊下搅 拌过夜。催化剂用硅藻土过滤，并用甲醇/乙酸乙酯洗涤。浓缩滤液，得到 橙色固体，其为产物(210mg，91％收率)。MS m/z 515(MH+)，保留时间：3.693 分钟。1H NMR(500MHz，MeOD)δppm 0.22(m，0.22H)1.05(m， 0.22H)1.19-1.66(m，5.56H)1.75-2.20(m，6H)2.45(m，0.22H)2.60(m， 0.78H)2.81-3.08(m，1H)3.18-3.27(m，2H)3.40-3.87(m，6.78H)3.95(s， 2.34H)3.98-4.05(m，0.88H)4.15(d，J＝14.95Hz，0.22H)5.11(d，J＝15.26Hz， 0.78H)6.81-6.91(m，1H)7.03(d，J＝2.44Hz，0.22H)7.07(d，J＝2.44Hz， 0.78H)7.24(d，J＝8.24Hz，1H)7.68-7.77(m，1H)7.85-7.91(m，1H)8.11(s， 0.78H)8.17(s，0.22H)。
实施例25
(+/-)-8-环己基-11-乙氧基-1，1a，2，12b-四氢-1a-(吗啉-4-基羰基)-环丙并[d] 吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸甲酯.
向(+/-)-8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-1a-(吗啉-4-基羰基)-11-羟基-环丙并[d] 吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸甲酯(50mg，0.0972mmol)于DMF(2mL)中 的溶液中加入NaH(4.7mg，浓度为60％的油分散液，0.117mmol)。将反应混合 物在室温搅拌0.5小时。然后加入碘乙烷(0.012mL，0.146mmol)。将反应混合 物在室温搅拌1小时。用水将其淬灭，并用1N HCl溶液酸化。收集淡黄色固 体，其为产物(50mg，95％收率)。MS m/z 543(MH+)，保留时间：3.995分钟。 1H NMR(500MHz，MeOD)δppm 0.22(m，0.3H)1.06(m，0.3H)1.19-1.65(m， 8.4H)1.71-2.19(m，6H)2.51(m，0.3H)2.62(m，0.7H)2.78-3.88(m，9.7H)3.95(s， 2.1H)4.00(s，0.9H)4.09-4.20(m，2.3H)4.85(m，0.3H)5.09(d，J＝15.26Hz， 0.7H)6.97(dd，J＝8.39，2.59Hz，0.3H)7.00(dd，J＝8.55，2.75Hz，0.7H)7.16(d， J＝2.75Hz，0.3H)7.18(d，J＝2.75Hz，0.7H)7.31(d，J＝8.55Hz，1H)7.68-7.76(m， 1H)7.85-7.92(m，1H)8.10(s，0.7H)8.15(s，0.3H)。
实施例26
(+/-)-8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-11-(1-甲基乙氧基)-1a-(吗啉-4-基羰基)- 环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸甲酯.
向(+/-)-8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-1a-(吗啉-4-基羰基)-11-羟基-环丙并[d] 吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸甲酯(50mg，0.0972mmol)于DMF(2mL)中 的溶液中加入NaH(4.7mg，浓度为60％的油分散液，0.117mmol)。将反应混合 物在室温搅拌0.5小时。然后加入2-碘丙烷(24.8mg，0.146mmol)。将反应混合 物在室温搅拌过夜。用水将其淬灭，并用1N HCl溶液酸化。收集淡黄色固 体，其为产物(46mg，85％收率)。MS m/z 557(MH+)，保留时间：4.043分钟。 1H NMR(500MHz，MeOD)δppm 0.24(m，0.28H)1.07(m，0.28H)1.23-1.66(m， 11.56H)1.73-2.20(m，6H)2.51(m，0.28H)2.63(m，0.72H)2.80-3.87(m， 9.72H)3.96(s，2.16H)4.00(s，0.84H)4.15(d，J＝15.26Hz，0.28H)4.69-4.75(m， 1.28H)5.11(d，J＝15.26Hz，0.72H)6.97(dd，J＝8.55，2.75Hz，0.28H)7.00(dd， J＝8.70，2.59Hz，0.72H)7.15(d，J＝2.44Hz，0.28H)7.17(d，J＝2.44Hz，0.72H)7.31(d， J＝8.54Hz，1H)7.66-7.78(m，1H)7.82-7.93(m，1H)8.12(s，0.72H)8.17(s，0.28H)。
实施例27
(+/-)-8-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，1a，2，12b-四氢-1a-(吗啉-4-基 羰基)-11-(苯基甲氧基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰胺.
向(+/-)-8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢 -11-(苯基甲氧基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸(470mg， 0.749mmol)于DMSO(15.0mL)中的溶液中加入TBTU(360mg，1.123mmol)和 DIPEA(0.65mL，3.745mmol)。将反应混合物在室温搅拌15分钟。然后加入吗 啉(0.098mL，1.123mmol)，并将反应混合物在室温搅拌3小时。然后加入水， 并用1N HCl溶液酸化。收集浅黄色固体，其为粗制产物。通过制备性HPLC 柱对其进行纯化，得到橙色固体，其为最终产物(180mg，34％收率)。MS m/z 697(MH+)，保留时间：3.935分钟。1H NMR(300MHz，MeOD)δppm 0.16(m， 0.28H)1.06(m，0.28H)1.15-1.64(m，5.44H)1.67-2.20(m，6H)2.49(m， 0.28H)2.62(m，0.72H)2.75-3.81(m，15.72H)4.11(d，J＝15.00Hz，0.28H)4.90(m， 0.28H)5.09(d，J＝15.37Hz，0.72H)5.19(s，1.44H)5.21(s，0.56H)7.02-7.14(m， 1H)7.18-7.54(m，7H)7.56-7.66(m，1H)7.90(d，J＝8.42Hz，0.28H)7.92(d， J＝8.78Hz，0.72H)8.02(s，0.72H)8.07(s，0.28H)。
实施例28
(+/-)-8-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，1a，2，12b-四氢-11-羟基-1a-(吗 啉-4-基羰基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰胺.
向(+/-)-8-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，1a，2，12b-四氢-1a-(吗啉-4- 基羰基)-11-(苯基甲氧基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰胺 (160mg，0.23mmol)于甲醇(20mL)中的溶液中加入10％Pd/炭(50mg)。将反应 混合物在氢气气囊下搅拌过夜。催化剂用硅藻土过滤，并用甲醇洗涤。浓 缩滤液，得到黄色固体，其为产物(114mg，82％收率)。MS m/z 607(MH+)， 保留时间：3.420分钟。1H NMR(500MHz，MeOD)δppm 0.17(m，0.26H)1.07(m， 0.26H)1.20-1.65(m，5.48H)1.73-2.20(m，6H)2.45(m，0.26H)2.61(m， 0.74H)2.80-3.86(m，15.74H)4.15(d，J＝14.95Hz，0.26H)4.71-4.76(m， 0.26H)5.12(d，J＝14.95Hz，0.74H)6.83-6.90(m，1H)7.03(d，J＝2.44Hz， 0.26H)7.08(d，J＝2.44Hz，0.74H)7.22-7.27(m，1H)7.59-7.64(m，1H)7.88-7.95(m， 1H)8.03(s，0.74H)8.09(s，0.26H)。
实施例29
(+/-)-8-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-11-乙氧基-1，1a，2，12b-四氢 -1a-(吗啉-4-基羰基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰胺.
向(+/-)-8-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，1a，2，12b-四氢-11-羟基 -1a-(吗啉-4-基羰基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰胺(30mg， 0.0494mmol)于DMF(1mL)中的溶液中加入NaH(4.4mg，浓度为60％的油分散 液，0.109mmol)。将反应混合物在室温搅拌0.5小时。然后加入碘乙烷 (0.004mL，0.0494mmol)。将反应混合物在室温搅拌过夜。用水将其淬灭，并 用1N HCl溶液酸化。收集淡黄色固体，其为粗制产物，通过制备性HPLC柱 对其进行纯化，得到浅黄色固体，其为最终产物(16mg，51％收率)。MS m/z 635(MH+)，保留时间：3.741分钟。1H NMR(500MHz，MeOD)δppm 0.19(m， 0.25H)1.09(m，0.25H)1.20-1.65(m，8.5H)1.71-2.21(m，6H)2.52(m， 0.25H)2.64(m，0.75H)2.79-3.88(m，15.75H)4.11-4.24(m，2H)4.80-4.84(m， 0.25H)5.13(d，J＝15.26Hz，0.75H)6.95-7.05(m，1H)7.16(d，J＝2.44Hz， 0.25H)7.19(d，J＝2.75Hz，0.75H)7.30-7.38(m，1H)7.62(d，J＝8.55Hz， 1H)7.89-7.97(m，1H)8.04(s，0.75H)8.09(s，0.25H)。
实施例30
(+/-)-8-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-11-(1-甲基乙氧基)-1a，2，12b-四 氢-1a-(吗啉-4-基羰基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰胺.
向(+/-)-8-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，1a，2，12b-四氢-11-羟基 -1a-(吗啉-4-基羰基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰胺(30mg， 0.0494mmol)于DMF(1mL)中的溶液中加入NaH(4.4mg，浓度为60％的油分散 液，0.109mmol)。将反应混合物在室温搅拌0.5小时。然后加入2-碘丙烷(8.4mg， 0.04948mmol)。将反应混合物在室温搅拌过夜。用水将其淬灭，并用1N HCl 溶液酸化。收集淡黄色固体，其为粗制产物，通过制备性HPLC柱对其进行 纯化，得到浅黄色固体，其为最终产物(23.2mg，72％收率)。MS m/z 649(MH+)，保留时间：3.836分钟。1H NMR(500MHz，MeOD)δppm 0.19(m， 0.27H)1.08(m，0.27H)1.20-1.65(m，11.46H)1.73-2.21(m，6H)2.51(m， 0.27H)2.63(m，0.73H)2.78-3.85(m，15.73H)4.15(d，J＝14.95Hz， 0.27H)4.69-4.80(m，1.27H)5.11(d，J＝15.26Hz，0.73H)6.94-7.03(m，1H)7.15(d， J＝2.75Hz，0.27H)7.17(d，J＝2.44Hz，0.73H)7.31(d，J＝8.55Hz，1H)7.58-7.66(m， 1H)7.88-7.95(m，1H)8.03(s，0.73H)8.09(s，0.27H)。
实施例31
(+/-)-8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-11-(1-甲基乙基)-1a-(吗啉-4-基羰基)-环 丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸甲酯.
在氮气下向微波反应管中装入InCl3(77mg，0.155mmol)。然后将其密封， 并加入THF(3mL)。在-78℃加入异丙基溴化镁于THF中的溶液(0.47mL，1.0M 溶液，0.47mmol)，并搅拌0.5小时。然后将反应混合物温热至室温，并加入 (+/-)-8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-1a-(吗啉-4-基羰基)-11-[[(三氟甲基)磺酰基] 氧基]-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸甲酯(100mg，0.155mmol) 和PdCl2(PPh3)2(10.9mg，0.0155mmol)于THF(2mL)中的溶液。在微波条件下将 反应混合物在100℃加热2小时。然后用甲醇将其淬灭，并浓缩。残余物通 过制备性HPLC柱来纯化，得到浅黄色固体，其为产物(12mg，14％收率)。 MS m/z 541(MH+)，保留时间：4.188分钟。1H NMR(500MHz，甲醇-D4)δppm 0.19(m，0.28H)1.02(m，0.28H)1.15-1.62(m，11.44H)1.64-2.18(m，6H)2.51(m， 0.28H)2.59(m，0.72H)2.63-2.70(m，1H)2.83-3.85(m，9.72H)3.92(s，3H)4.08(d， J＝15.26Hz，0.28H)4.77-4.81(m，0.28H)5.06(d，J＝15.26Hz，0.72H)7.19-7.31(m， 2H)7.40(s，0.28H)7.45(s，0.72H)7.67-7.73(m，1H)7.87(d，J＝8.55Hz，1H)8.08(s， 0.72H)8.13(s，0.28H)。
实施例32
(+/-)-8-环己基-11-乙氧基-1，1a，2，12b-四氢-1a-(吗啉-4-基羰基)-环丙并[d] 吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸.
向(+/-)-8-环己基-11-乙氧基-1，1a，2，12b-四氢-1a-(吗啉-4-基羰基)-环丙并 [d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸甲酯(40mg，0.074mmol)于THF/甲醇混 合物(2.0mL/2.0mL)中的溶液中加入2N NaOH溶液(1.0mL)。在微波条件下将 反应混合物在85℃加热5分钟。然后将其浓缩，用1N HCl溶液酸化，并用乙 酸乙酯(2×20mL)萃取。合并有机层，干燥(MgSO4)，并浓缩。残余物通过制 备性HPLC来纯化，得到黄色固体，其为最终产物(28mg，72％收率)。MS m/z 529(MH+)，保留时间：3.865分钟。1H NMR(500MHz，MeOD)δppm 0.23(m， 0.28H)1.05(m，0.28H)1.18-1.64(m，8.44H)1.71-2.19(m，6H)2.50(m， 0.28H)2.61(m，0.72H)2.76-3.87(m，9.72H)4.07-4.20(m，2.28H)4.85(m， 0.28H)5.07(d，J＝15.26Hz，0.72H)6.96(dd，J＝8.39，2.59Hz，0.28H)6.99(dd， J＝8.55，2.75Hz，0.72H)7.15(d，J＝2.44Hz，0.28H)7.17(d，J＝2.44Hz，0.72H)7.29(d， J＝8.55Hz，1H)7.70-7.77(m，1H)7.87(d，J＝8.24Hz，1H)8.11(s，0.72H)8.15(s， 0.28H)。
实施例33
(+/-)-8-环己基-11-(1-甲基乙氧基)-1，1a，2，12b-四氢-1a-(吗啉-4-基羰基)- 环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸.
向(+/-)-8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-11-(1-甲基乙氧基)-1a-(吗啉-4-基羰 基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸甲酯(36mg，0.065mmol)于 THF/甲醇混合物(2.0mL/2.0mL)中的溶液中加入2N NaOH溶液(1.0mL)。在微 波条件下将反应混合物在85℃加热5分钟。然后将其浓缩，用1N HCl溶液酸 化，并用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。合并有机层，干燥(MgSO4)，并浓缩。残 余物通过制备性HPLC来纯化，得到黄色固体，其为最终产物(24mg，68％收 率)。MS m/z 543(MH+)，保留时间：3.931分钟。1H NMR(300MHz，MeOD)δ ppm 0.24(m，0.27H)1.06(m，0.27H)1.11-2.23(m，17.46H)2.52(m，0.27H)2.62(m， 0.73H)2.70-3.90(m，9.73H)4.15(d，J＝15.00Hz，0.27H)4.68-4.78(m，1.27H)5.11(d， J＝15.00Hz，0.73H)6.92-7.04(m，1H)7.13-7.21(m，1H)7.31(d，J＝8.42Hz， 1H)7.67-7.79(m，1H)7.89(d，J＝8.42Hz，1H)8.13(s，0.73H)8.18(s，0.27H)。
实施例34
(+/-)-8-环己基-11-甲基-1，1a，2，12b-四氢-1a-(吗啉-4-基羰基)-环丙并[d]吲 哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸.
向(+/-)-8-环己基-11-甲基-1，1a，2，12b-四氢-1a-(吗啉-4-基羰基)-环丙并[d] 吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸甲酯(14mg，0.027mmol)于THF/甲醇混合 物(2.0mL/2.0mL)中的溶液中加入2N NaOH溶液(0.3mL)。在微波条件下将反 应混合物在85℃加热3分钟。然后将其浓缩，用1N HCl溶液酸化，并用乙酸 乙酯(2×20mL)萃取。合并有机层，干燥(MgSO4)，并浓缩。残余物通过制备 性HPLC来纯化，得到浅黄色固体，其为最终产物(7.5mg，56％收率)。MS m/z 499(MH+)，保留时间：3.855分钟。1H NMR(500MHz，MeOD)δppm 0.22(m， 0.24H)1.06(m，0.24H)1.20-1.65(m，5.52H)1.74-2.21(m，6H)2.44(s，2.28H)2.46(s， 0.72H)2.52(m，0.24H)2.61(m，0.76H)2.80-3.87(m，9.76H)4.13(d，J＝14.95Hz， 0.24H)4.76-4.83(m，0.24H)5.10(d，J＝15.26Hz，0.76H)7.22-7.32(m，2H)7.43(s， 0.24H)7.48(s，0.76H)7.71-7.78(m，1H)7.89(d，J＝8.55Hz，1H)8.14(s， 0.76H)8.18(s，0.24H)。
实施例35
(+/-)-8-环己基-1a-(吗啉-4-基羰基)-11-乙烯基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d] 吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸.
向(+/-)-8-环己基-11-乙烯基-1，1a，2，12b-四氢-1a-(吗啉-4-基羰基)-环丙并 [d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸甲酯(51mg，0.097mmol)于THF/甲醇混 合物(2.0mL/2.0mL)中的溶液中加入2N NaOH溶液(0.5mL)。在微波条件下将 反应混合物在85℃加热3分钟。然后将其浓缩，用1N HCl溶液酸化，并用乙 酸乙酯(2×20mL)萃取。合并有机层，干燥(MgSO4)，并浓缩，得到黄色固体， 其为最终产物(39mg，79％收率)。MS m/z 511(MH+)，保留时间：3.903分钟。 1H NMR(500MHz，MeOD)δppm 0.25(m，0.28H)1.07(m，0.28H)1.19-1.67(m， 5.44H)1.74-2.22(m，6H)2.58(m，0.28H)2.64(m，0.72H)2.79-3.87(m， 9.72H)4.14(d，J＝15.26Hz，0.28H)4.78-4.82(m，0.28H)5.08(d，J＝15.26Hz， 0.72H)5.36(d，J＝10.99Hz，0.72H)5.37(d，J＝10.99Hz，0.28H)5.93(d，J＝17.70Hz， 0.72H)5.95(d，J＝17.71Hz，0.28H)6.78-6.88(m，1H)7.35(d，J＝7.93Hz，1H)7.50(d， J＝7.93Hz，0.28H)7.53(d，J＝8.24Hz，0.72H)7.64-7.79(m，2H)7.90(d，J＝8.55Hz， 1H)8.13(s，0.72H)8.17(s，0.28H)。
实施例36
(+/-)-8-环己基-11-(2-甲基乙基)-1，1a，2，12b-四氢-1a-(吗啉-4-基羰基)-环 丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸.
向(+/-)-8-环己基-11-(2-甲基乙基)-1，1a，2，12b-四氢-1a-(吗啉-4-基羰基)- 环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸甲酯(10mg，0.0185mmol)于 THF/甲醇混合物(2.0mL/2.0mL)中的溶液中加入2N NaOH溶液(0.4mL)。在微 波条件下将反应混合物在85℃加热3分钟。然后将其浓缩，用1N HCl溶液酸 化，并用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。合并有机层，干燥(MgSO4)，并浓缩。残 余物通过制备性HPLC来纯化，得到灰白色固体，其为最终产物(5.0mg，51％ 收率)。MS m/z 527(MH+)，保留时间：4.023分钟。1H NMR(500MHz，MeOD)δ ppm 0.21(m，0.28H)1.04(m，0.28H)1.13-1.63(m，11.44H)1.63-2.20(m， 6H)2.52(m，0.28H)2.61(m，0.72H)2.63-2.72(m，1H)2.77-3.86(m，9.72H)4.11(d， J＝15.26Hz，0.28H)4.86-4.93(m，0.28H)5.08(d，J＝15.26Hz，0.72H)7.18-7.34(m， 2H)7.38-7.53(m，1H)7.67-7.76(m，1H)7.87(d，J＝8.24Hz，1H)8.11(s， 0.72H)8.16(s，0.28H)。
实施例37
(+/-)-8-环己基-11-乙基-1，1a，2，12b-四氢-1a-(吗啉-4-基羰基)-环丙并[d]吲 哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸.
向(+/-)-8-环己基-11-乙烯基-1，1a，2，12b-四氢-1a-(吗啉-4-基羰基)-环丙并 [d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸甲酯(35mg，0.0685mmol)于甲醇/乙酸 乙酯(8mL/8mL)中的溶液中加入10％Pd/炭(5mg)。将反应混合物在氢气气囊 下搅拌过夜。催化剂用硅藻土过滤，并用甲醇/乙酸乙酯洗涤。浓缩滤液， 得到浅黄色固体，其为产物(35mg，99％收率)。MS m/z 513(MH+)，保留时间： 3.933分钟。1H NMR(500MHz，MeOD)δppm 0.22(m，0.25H)1.04(m， 0.25H)1.16-1.64(m，8.5H)1.72-2.19(m，6H)2.53(m，0.25H)2.61(m， 0.75H)2.69-2.79(m，2H)2.80-3.86(m，9.75H)4.09(d，J＝14.95Hz，0.25H)4.81(d， J＝15.26Hz，0.25H)5.06(d，J＝15.26Hz，0.75H)7.22-7.32(m，2H)7.44(s， 0.25H)7.49(s，0.75H)7.70-7.78(m，1H)7.88(d，J＝8.55Hz，1H)8.12(s， 0.75H)8.16(s，0.25H)。
实施例38
(+/-)-8-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-11-乙基-1，1a，2，12b-四氢-1a-(吗 啉-4-基羰基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰胺.
向(+/-)-8-环己基-11-乙基-1，1a，2，12b-四氢-1a-(吗啉-4-基羰基)-环丙并[d] 吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸(30mg，0.0585mmol)于CH2Cl2(5mL)中的 溶液中加入一滴DMF。然后滴加2M草酰氯于CH2Cl2中的溶液(0.059mL， 0.117mmol)。将反应混合物在室温搅拌2小时。然后将其浓缩，并高真空干 燥。然后将其溶解在THF(5mL)中，并加入N，N-二甲基硫酰胺(18mg， 0.146mmol)和BEMP(0.034mL，0.117mmol))于THF(2mL)中的预混合溶液。将 反应混合物在室温搅拌10分钟后，加入DMAP(10mg)和DIPEA(0.4mL)。继 续在室温搅拌过夜。然后将其浓缩，并且残余物通过制备性HPLC柱来纯化， 得到黄色固体，其为最终化合物(11mg，30％收率)。MS m/z 619(MH+)，保留 时间：3.823分钟。1H NMR(500MHz，MeOD)δppm 0.18(m，0.28H)1.09(m， 0.28H)1.22-1.66(m，8.44H)1.74-2.20(m，6H)2.55(m，0.28H)2.64(m， 0.72H)2.70-2.81(m，2H)2.83-3.85(m，15.72H)4.15(d，J＝15.26Hz， 0.28H)4.87-4.91(m，0.28H)5.13(d，J＝15.56Hz，0.72H)7.26-7.35(m，2H)7.46(s， 0.28H)7.51(s，0.72H)7.62(dd，J＝8.24，1.22Hz，0.72H)7.63(dd，J＝8.55，1.53Hz， 0.28H)7.93(d，J＝8.24Hz，0.28H)7.94(d，J＝8.85Hz，0.72H)8.05(d，J＝1.22Hz， 0.72H)8.10(s，0.28H)。
实施例39
(+/-)-8-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢 -1a-(吗啉-4-基羰基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰胺.
向(+/-)-8-环己基-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢-1a-(吗啉-4-基羰基)-环丙并 [d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸(40mg，0.078mmol)于CH2Cl2(5mL)中的 溶液中加入一滴DMF。然后滴加2M草酰氯于CH2Cl2中的溶液(0.078mL， 0.155mmol)。将反应混合物在室温搅拌2小时。然后将其浓缩，并高真空干 燥。随后将其溶解在THF(5mL)中，并加入N，N-二甲基硫酰胺(29mg， 0.234mmol)和BEMP(0.056mL，0.195mmol))于THF(2mL)中的预混合溶液。将 反应混合物在室温搅拌10分钟后，加入DMAP(10mg)。继续在室温搅拌过夜。 然后将其浓缩，并且残余物通过制备性HPLC柱来纯化，得到灰白色固体， 其为最终化合物(10mg，21％收率)。MS m/z 621(MH+)，保留时间：3.633分 钟。1H NMR(500MHz，丙酮)δppm 0.25(m，0.38H)1.12(m，0.38H)1.16-2.24(m， 11.24H)2.55(m，0.38H)2.64(m，0.62H)2.94-3.05(m，3H)3.02(s，3.72H)3.03(s， 2.28H)3.24-3.82(m，6.62H)3.92(s，1.86H)3.93(s，1.14H)4.20(d，J＝14.95Hz， 0.38H)4.94(d，J＝14.95Hz，0.38H)5.19(d，J＝14.95Hz，0.62H)7.03(dd，J＝8.39， 2.59Hz，0.38H)7.06(dd，J＝8.55，2.75Hz，0.62H)7.20(d，J＝2.75Hz，0.62H)7.22(d， J＝2.75Hz，0.38H)7.38(d，J＝8.55Hz，1H)7.73(dd，J＝8.55，1.53Hz，0.62H)7.76(dd， J＝8.24，1.53Hz，0.38H)7.92-8.00(m，1H)8.26(s，0.62H)8.30(s，0.38H)。
实施例40
(+/-)-8-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1a-[[N，N-二甲基]-氨甲酰 基]-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰 胺。MS m/z 579(MH+)，保留时间：3.725分钟。1H NMR(500MHz，MeOD)δppm 0.19(m，0.4H)1.08(m，0.4H)1.18-1.70(m，5.2H)1.72-2.19(m，6H)2.52(m， 0.4H)2.60-3.26(m，13.6H)3.64(d，J＝15.56Hz，0.6H)3.90(s，1.8H)3.92(s， 1.2H)4.17(d，J＝14.95Hz，0.4H)4.78-4.83(m，0.4H)5.09(d，J＝14.95Hz， 0.6H)6.98-7.05(m，1H)7.20(d，J＝1.53Hz，1H)7.33(d，J＝8.54Hz，0.6H)7.34(d， J＝8.54Hz，0.4H)7.58(dd，J＝8.55，1.53Hz，0.6H)7.62(dd，J＝8.55，1.53Hz， 0.4H)7.87-7.94(m，1.6H)8.13(s，0.4H)。
实施例41
(+/-)-8-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1a-[[(3α，5α)-3，5-二甲基-哌嗪-1- 基]羰基]-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂 -5-甲酰胺。MS m/z 648(MH+)，保留时间：3.370分钟。1H NMR(500MHz， MeOD)δppm 0.21(m，0.34H)1.11(m，0.34H)1.16-1.59(m，10.32H)1.66-2.18(m， 7H)2.56(m，0.34H)2.64(m，0.66H)2.78-3.12(m，9H)3.35-3.74(m，2.66H)3.90(s， 1.98H)3.92(s，1.02H)4.04-4.61(m，2.34H)4.90-4.94(m，0.34H)5.09(d，J＝15.26Hz， 0.66H)7.00-7.06(m，1H)7.18(d，J＝2.44Hz，0.34H)7.20(d，J＝2.44Hz， 0.66H)7.34(d，J＝8.54Hz，1H)7.57(d，J＝8.55Hz，0.66H)7.62(d，J＝7.63Hz， 0.34H)7.89(d，J＝8.55Hz，0.66H)7.92(d，J＝8.55Hz，0.34H)7.97(s，0.66H)8.09(s， 0.34H)。
实施例42
(+/-)-8-环己基-1a-[[4-(二乙基氨基)-哌啶-1-基]羰基]-N-[(二甲基氨基)磺 酰基]-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲 酰胺.
在室温和氮气下向(+/-)-8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-[(吗啉 -4-基羰基)氨基]-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸(109.7mg， 0.20mmol)、N，N，N’，N’-四甲基四氟硼酸盐(TBTU，302mg，0.94mmol)和 4-(二乙基氨基)哌啶(47mg，0.30mmol)于DMF(2ml)中的混合物中加入N，N-二 异丙基乙基胺(0.21ml，1.21mmol)。将反应混合物在室温搅拌3小时15分钟， 然后浓缩。残余物用水(5ml)稀释。过滤沉淀物，用水(2×2ml)洗涤，并干燥。 固体残余物通过Shimadzu-VP制备性反相HPLC用如下分离方法来纯化，所 述方法为：溶剂A＝10％MeOH-90％H2O-0.1％TFA，溶剂 B＝90％MeOH-10％H2O-0.1％TFA，起始％B＝0，最终％B＝100，梯度时间＝6 分钟，流速＝30mL/min，柱：Xterra Prep MS C185μ30×50mm，馏分收集： 5.98-6.52分钟，得到标题化合物(93mg)，其为浅黄色固体。分析性HPLC方 法：溶剂A＝10％MeOH(甲醇)-90％H2O-0.1％TFA(三氟乙酸)，溶剂 B＝90％MeOH-10％H2O-0.1％TFA，起始％B＝0，最终％B＝100，梯度时间＝2 分钟，流速＝5ml/min，柱：Xterra MS C18S73.0×50mm；
LC/MS：(ES+)m/z(M+H)+＝690.50，HPLC Rt＝2.118分钟。分析性HPLC方法： 溶剂A＝5％MeCN(乙腈)-95％H2O-10mM NH4OAc(乙酸铵)，溶剂 B＝95％MeCN-5％H2O-10mM NH4OAc，起始％B＝0，最终％B＝100，梯度时 间＝2分钟，流速＝5ml/min，柱：Phenomenex Lina C185μm 3.0×50mm；
LC/MS：(ES+)m/z(M+H)+＝690.47，HPLC Rt＝1.263分钟。
实施例43
(+/-)-8-环己基-5-(吗啉代磺酰基氨甲酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基- 环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a-甲酸。LC/MS：保留时间：1.968分 钟；m/e 460(MH+)。1H NMR(400MHz，CDCl3)。观察到化合物以相互转化的 旋转异构体的形式存在，如化合物的NMR谱所证实的那样。
实施例44
(+/-)-8-环己基-N-(吗啉代磺酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-(吗啉 -4-羰基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰胺。LC/MS：保留时间： 1.982分钟；m/e 663(MH+)。观察到化合物以相互转化的旋转异构体的形式 存在，如化合物的NMR谱所证实的那样。1H NMR(400MHz，氯仿-D)δppm 0.36-1.61(m，7H)1.90(d，J＝97.20Hz，6H)2.38-3.82(m，17H)3.88-3.91(m， 3H)3.96-4.24(m，1H)4.63-5.20(m，1H)6.90-6.99(m，1H)7.01-7.13(m， 1H)7.25-7.32(m，1H)7.40-7.56(m，1H)7.84-8.02(m，2H)。
实施例45
(+/-)-8-环己基-5-(4-甲基哌嗪-1-基磺酰基氨甲酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11- 甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a-甲酸。LC/MS：保留时间： 1.687分钟；m/e 607(MH+)。1H NMR(400MHz，CDCl3)。观察到化合物以相互 转化的旋转异构体的形式存在，如化合物的NMR谱所证实的那样。
实施例46
(+/-)-8-环己基-N-(4-甲基哌嗪-1-基磺酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基 -1a-(吗啉-4-羰基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰胺。LC/MS： 保留时间：1.738分钟；m/e 676(MH+)。观察到化合物以相互转化的旋转异 构体的形式存在，如化合物的NMR谱所证实的那样。1H NMR(400MHz，氯 仿-D)δppm 0.31-1.14(m，1H)1.11-2.19(m，11H)2.34-2.58(m，2H)2.80-2.86(m， 3H)2.87-3.85(m，14H)3.87-3.91(m，3H)4.02-4.23(m，3H)4.68-5.17(m， 1H)6.90-6.99(m，1H)6.99-7.12(m，1H)7.27-7.32(m，1H)7.46-7.59(m， 1H)7.85-7.98(m，2H)。
实施例47
(+/-)-8-环己基-5-(环丙基磺酰基氨甲酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基- 环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a-甲酸。LC/MS：保留时间：2.030分 钟；m/e 549(MH+)。1H NMR(400MHz，CDCl3)。观察到化合物以相互转化的 旋转异构体的形式存在，如化合物的NMR谱所证实的那样。
实施例48
(+/-)-8-环己基-N-(环丙基磺酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-(吗啉 -4-羰基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰胺。LC/MS：保留时间： 1.962分钟；m/e 618(MH+)。观察到化合物以相互转化的旋转异构体的形式 存在，如化合物的NMR谱所证实的那样。1H NMR(400MHz，氯仿-D)δppm 0.33-1.58(m，10H)1.66-1.83(m，2H)1.86-2.15(m，4H)2.35-2.63(m， 1H)2.72-3.84(m，10H)3.84-3.92(m，3H)3.93-4.25(m，1H)4.65-5.18(m， 1H)6.88-7.15(m，2H)7.22-7.31(m，1H)7.49-7.65(m，1H)7.82-8.04(m，2H)。
实施例49
8-环己基-N-(环丙基磺酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-[2-[(二甲基 氨基)甲基]吗啉-4-羰基]-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰胺。
LC/MS：保留时间：3.041分钟；m/e 675(MH+)。1H NMR(400MHz，CDCl3)。 观察到化合物以相互转化的旋转异构体的形式存在，如化合物的NMR谱所 证实的那样。
实施例50
(+/-)-8-环己基-N-(环丙基磺酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-(4-吗啉 代哌啶-1-羰基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰胺。LC/MS：保 留时间：1.717分钟；m/e 701(MH+)。观察到化合物以相互转化的旋转异构 体的形式存在，如化合物的NMR谱所证实的那样。1H NMR(400MHz，氯仿 -D)δppm 0.43-1.68(m，12H)1.70-2.11(m，6H)2.18-4.13(m，19H)3.86-3.90(m， 3H)4.22-4.69(m，1H)6.83-7.01(m，1H)7.04-7.11(m，J＝6.92，2.39Hz， 1H)7.20-7.31(m，1H)7.36-7.80(m，J＝87.88Hz，1H)7.86-8.20(m，2H)。
实施例51
(+/-)-8-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，1a，2，12b-四氢-1a-[[(顺 式)-(S)-2-(甲氧基甲基)-吗啉-4-基]羰基]-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂 -5-甲酰胺。
在22℃将TBTU(120mg，0.374mmol)加到搅拌的(+/-)-8-环己基-5-[[[(二 甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基环丙并[d]吲哚并 [2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸(164.4mg，0.298mmol)、(2S)-2-(甲氧基甲基) 吗啉盐酸盐(63mg，0.376mmol)和TEA(152mg，1.50mmol)于DMSO(1mL)中的 溶液中。将混合物搅拌1小时，然后用水稀释。溶液用稀HCl酸化，从而使 产物沉淀，收集所述产物，用冷水洗涤，并用五氧化二磷真空干燥，得到 非对映异构体的混合物(162mg，82％收率)。一部分该物质在Shimadzu制备性 液相色谱(使用30×100mm反相柱和甲醇-水(含有1％TFA)的梯度)上 进行纯化。从含有产物的馏分中除去甲醇。将沉淀的产物萃取到乙酸乙酯 中。洗涤(水、盐水)有机层，干燥(硫酸钠)，并浓缩，得到浅黄色固体。LC/MS： m/z 665(MH+)，保留时间：2.382分钟。Phenomenex-Luna 4.6×50mm S10柱。 梯度条件：历时2分钟从10％MeOH-90％HOH(水)-0.1％TFA至 90％MeOH-10％HOH-0.1％TFA。1H NMR(300MHz，DMSO-D6)δppm 0.72-2.07(m，13H)2.18-2.34(m，1H)2.90(d，J＝3.66Hz，6H)3.12-3.67(m， 7H)3.84(s，3H)3.93-4.46(m，6H)6.93-7.36(m，3H)7.54-7.71(m，J＝8.42Hz， 1H)7.76-7.97(m，1H)8.27(d，J＝47.94Hz，1H)11.51-11.78(m，1H)。
实施例52
8-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，1a，2，12b-四氢-1a-[[(顺式)-(R)-2-(甲 氧基甲基)-吗啉-4-基]羰基]-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰胺.
在22℃将TBTU(110mg，0.342mmol)加到搅拌的(+/-)-8-环己基-5-[[[(二甲 基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2] 苯并氮杂-1a(2H)-甲酸(157.4mg，0.285mmol)、(2R)-2-(甲氧基甲基)吗啉盐 酸盐(67mg，0.399mmol)和TEA(115mg，1.14mmol)于DMSO(1.5mL)中的溶液 中。将混合物搅拌2小时，然后用水稀释。溶液用稀HCl酸化，从而使产物 沉淀，将所述产物萃取到氯仿中。洗涤(水(2×)、盐水)氯仿溶液，干燥(硫酸 镁)，并浓缩，留下产物，其为胶状物(298mg)。产物在制备性硅胶板上进行 纯化。板用二氯甲烷-2％乙酸洗脱。合并含有产物的条带，并用二氯甲烷 -10％MeOH提取。除去溶剂，留下标题化合物，其为非对映异构体的混合物。
LC/MS：m/z 665(MH+)，保留时间：2.382分钟。Phenomenex-Luna 4.6×50mm S10柱。梯度条件：历时2分钟从10％MeOH-90％HOH-0.1％TFA至 90％MeOH-10％HOH-0.1％TFA。1H NMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 0.75-2.15(m，13H)2.88(s，6H)3.12-3.29(m，5H)3.31(s，3H)3.83-3.93(m， 5H)4.55-5.34(m，J＝90.95Hz，1H)6.96-7.09(m，1H)7.11-7.22(m，1H)7.24-7.31(m， 1H)7.57-7.71(m，1H)7.77-7.91(m，1H)8.10-8.38(m，1H)11.21-12.22(1H)。
实施例53
(+/-)-8-环己基-11-(甲基氧基)-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并 氮杂-1a，5(2H)-二甲酸5-(1，1-二甲基乙基)酯·1a-(甲基)酯.
将碘化三甲基氧化锍(7.20g，32.7mmol)悬浮在90mL无水DMSO中，保护 (blanket)在氮气中，并加入95％氢化钠(789mg，31.2mmol)。将反应混合物在 氮气下搅拌25分钟，直到溶液透明。将13-环己基-3-(甲基氧基)-7H-吲哚并 [2，1-a][2]苯并氮杂-6，10-二甲酸10-(1，1-二甲基乙基)酯·6-(甲基)酯(9.00g， 17.9mmol)加到反应混合物中，并将反应混合物加热到65℃并保持4.5小时。 将反应混合物在二氯甲烷和0.1N盐酸之间分配。水相用二氯甲烷萃取。合 并二氯甲烷馏分，用1.0N盐酸洗涤3次，用硫酸钠干燥，并真空除去挥发物， 得到10.9g棕色泡沫状物。将反应混合物与先前实验的反应混合物合并，并 且产物在硅胶上进行色谱分离(用二氯甲烷洗脱)，得到8.3g产物，其为浅色 无定形固体。1H NMR(500MHz，氯仿-D)δppm 0.40(t，J＝6.10Hz， 0.5H)1.17-1.30(m，2H)1.30-1.46(m，3H)1.49-1.61(m，3H)1.63(d，J＝4.27Hz， 9H)1.65-1.71(m，1H)1.71-1.83(m，3H)1.91(d，J＝9.16Hz，1H)1.94-2.15(m， 3H)2.64(dd，J＝9.77，7.02Hz，0.5H)2.77(t，J＝12.05Hz，0.5H)2.85-2.97(m， 1H)3.42(d，J＝14.95Hz，0.6H)3.57(d，J＝1.53Hz，1.5H)3.79(d，J＝1.53Hz， 1.5H)3.88(s，3H)4.02-4.09(m，0.6H)5.19(d，J＝14.95Hz，0.5H)5.42(d，J＝14.65Hz， 0.5H)6.86-6.95(m，1H)7.01(d，J＝2.44Hz，0.5H)7.12(d，J＝1.53Hz， 0.5H)7.26-7.30(m，0.8H)7.63-7.75(m，1H)7.80(t，J＝8.39Hz，1H)8.08(s， 0.5H)8.27(s，0.5H)。MS m/z 516(MH+)。
实施例54
(+/-)-8-环己基-11-((苯基甲基)氧基)-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并 [2，1-a][2]苯并氮杂-1a，5(2H)-二甲酸5-(1，1-二甲基乙基)酯·1a-(甲基)酯.
将碘化三甲基氧化锍(8.51g，38.7mmol)悬浮在100ml无水DMSO中，加入 氢化钠(95％，937mg，37.1mmol)，并在氮气下搅拌30分钟，直到反应混合物 透明且均匀。加入13-环己基-3-((苯基甲基)氧基)-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮 杂-6，10-二甲酸10-(1，1-二甲基乙基)酯·6-(甲基)酯(10.6g，18.4mmol)，并将 反应混合物在氮气气氛下加热至65℃并保持18小时。将反应混合物在二氯 甲烷和1N盐酸之间分配。水相用二氯甲烷萃取，合并有机相，用1N盐酸洗 涤3次，并用硫酸钠干燥。真空除去溶剂，得到11.2g粗制产物，然后将所述 粗制产物与来自先前实验的产物合并。通过硅胶色谱法(用二氯甲烷洗脱) 分离出纯的产物，得到11.9g。1H NMR(500MHz，氯仿-D)δppm 0.40(t， J＝6.10Hz，0.5H)1.09-1.31(m，2.1H)1.32-1.48(m，2.8H)1.48-1.61(m， 2.1H)1.61-1.66(m，9H)1.66-1.85(m，3.5H)1.86-2.18(m，4.3H)2.63(t，J＝8.39Hz， 0.5H)2.78(m，0.5H)2.84-2.97(m，1.1H)3.42(d，J＝14.95Hz，0.5H)3.49-3.63(m， 1.5H)3.73-3.86(m，1.4H)4.06(d，J＝15.26Hz，0.5H)5.06-5.24(m，2.6H)5.42(d， J＝14.95Hz，0.5H)6.93-7.04(m，1H)7.10(s，0.5H)7.22(s，0.6H)7.26-7.31(m， 0.9H)7.31-7.39(m，1.1H)7.39-7.53(m，4.2H)7.68(dd，J＝20.29，8.39Hz， 1.1H)7.80(t，J＝8.39Hz，1H)8.02-8.13(m，0.5H)8.18-8.32(m，0.5H)。MS m/z 592(MH+)。
实施例55
(+/-)-8-环己基-11-羟基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂 -1a，5(2H)-二甲酸5-(1，1-二甲基乙基)酯·1a-(甲基)酯.
将(+/-)-8-环己基-11-((苯基甲基)氧基)-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并 [2，1-a][2]苯并氮杂-1a，5(2H)-二甲酸5-(1，1-二甲基乙基)酯·1a-(甲基)酯 (3.00g，5.1mmol)溶解在75ml不含抑制剂的THF中，并加入70mL甲醇。将内 容物置于氮气下，并向反应混合物中加入304mg 10％钯/炭。将反应混合物 置于氢气(1大气压)(气囊)下，并在室温搅拌18小时。向反应混合物中加入额 外的200mg 10％钯/炭，并将反应混合物在氢气(1大气压)(气囊)下再搅拌21 小时。使反应混合物过滤通过硅藻土，并真空除去挥发物，得到2.7g产物。 1H NMR(500MHz，氯仿-D)δppm 0.32-0.44(m，0.5H)1.11-1.29(m， 2.2H)1.29-1.46(m，3.5H)1.47-1.61(m，2.5H)1.63(d，J＝4.88Hz，9H)1.65-1.83(m， 3.6H)1.85-2.13(m，4.1H)2.59(dd，J＝10.07，7.02Hz，0.5H)2.76(t，J＝12.21Hz， 0.5H)2.81-2.95(m，1H)3.36-3.45(m，0.6H)3.49(s，2.4H)3.56(s，1.4H)3.79(s， 1.2H)4.05(d，J＝15.26Hz，0.5H)5.18(d，J＝15.26Hz，0.6H)5.25(s，0.7H)5.41(d， J＝15.26Hz，0.5H)6.77-6.88(m，1H)6.95(d，J＝2.44Hz，0.5H)7.08(d，J＝2.14Hz， 0.5H)7.21(t，J＝8.39Hz，1.1H)7.63-7.74(m，1H)7.80(t，J＝8.24Hz，1H)8.04-8.10(m， 0.5H)8.19-8.29(m，0.5H)。MS m/z 502(MH+)。MS m/z 500(M-H)-。
实施例56
(+/-)-8-环己基-1a-((甲基氧基)羰基)-11-((苯基甲基)氧基)-1，1a，2，12b-四 氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸.
将(+/-)-8-环己基-11-((苯基甲基)氧基)-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并 [2，1-a][2]苯并氮杂-1a，5(2H)-二甲酸5-(1，1-二甲基乙基)酯·1a-(甲基)酯 (3.00g，5.07mmol)溶解在50mL 1，2-二氯乙烷中，并通过加料漏斗历时5分钟 将50mL三氟乙酸加到反应混合物中。将反应混合物在室温搅拌1小时，然后 真空除去挥发物。残余的三氟乙酸通过与苯共沸来除去，并将灰白色固体 真空干燥，得到2.8g产物。1H NMR(500MHz，氯仿-D)δppm 0.43(t，J＝6.26Hz， 0.4H)1.06-1.16(m，0.3H)1.18-1.33(m，2.4H)1.33-1.50(m，2.7H)1.58(d， J＝13.12Hz，0.5H)1.65-1.72(m，0.7H)1.71-1.85(m，2.7H)1.93(d，J＝7.63Hz， 1.3H)1.96-2.18(m，2.9H)2.61-2.70(m，0.4H)2.80(t，J＝12.21Hz， 0.4H)2.86-2.99(m，1.2H)3.45(d，J＝15.26Hz，0.6H)3.53-3.64(m， 1.8H)3.76-3.86(m，1.1H)4.10(d，J＝15.26Hz，0.4H)5.09-5.19(m，2H)5.22(d， J＝15.26Hz，0.4H)5.38-5.51(m，0.6H)6.95-7.05(m，1H)7.11(d，J＝2.14Hz， 0.4H)7.26-7.31(m，0.7H)7.33-7.40(m，1H)7.43(q，J＝7.43Hz，2H)7.44-7.50(m， 2H)7.72-7.93(m，2H)8.21(s，0.4H)8.37-8.50(m，0.6H)。MS m/z 536(MH+)。MS m/z 534(M-H)-。
实施例57
(+/-)-8-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-1a-(((顺式)-2，6-二甲基-吗啉-4- 基)羰基)-11-((苯基甲基)氧基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并 氮杂-5-甲酰胺.
向搅拌的(+/-)-8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二 氢-11-(苯基甲氧基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸 (1.01g，1.61mmol)于16mL DMF中的溶液中加入TBTU(647mg，2.01mmol)。在 室温将反应混合物在氮气气氛下搅拌20分钟，然后加入DMAP(600mg， 4.91mmol)，接着加入顺式-2，6-二甲基吗啉(0.30mL，2.45mmol)。在室温将反 应混合物在氮气下搅拌38小时，然后将其倒入50mL水中。将盐酸(20ml，0.1N) 加到水性悬浮液中，过滤收集浅黄色固体，并用0.1N盐酸冲洗。将沉淀物 溶解在二氯甲烷中，用0.1N盐酸洗涤2次，用硫酸钠干燥，并真空除去溶剂， 得到1.02g粗制产物。水相用二氯甲烷反萃取，并用硫酸钠干燥，得到0.25g 油状物，其在静置时部分结晶。合并有机分离物，并在硅胶上进行色谱分 离(用5％乙酸乙酯/1％乙酸/二氯甲烷洗脱)，得到0.79g(68％)极淡黄色固体。 1H NMR(500MHz，氯仿-D)δppm 0.37(t，J＝5.34Hz，0.5H)0.89(s， 1H)0.96-1.11(m，2.4H)1.12-1.32(m，5.2H)1.32-1.50(m，2.8H)1.50-1.70(m， 2.2H)1.69-1.87(m，3.7H)1.87-2.08(m，4.6H)2.09(s，1.4H)2.34-2.46(m， 0.6H)2.54-2.64(m，0.8H)2.73-2.85(m，0.8H)2.85-2.96(m，1.3H)2.99(d， J＝20.75Hz，0.7H)3.05(s，5.1H)3.44-3.77(m，1.5H)4.04-4.24(m，1H)4.68(d， J＝14.95Hz，0.5H)5.04(d，J＝16.48Hz，0.4H)5.09-5.19(m，1.8H)6.92-7.06(m， 1H)7.09-7.23(m，1.2H)7.26-7.33(m，1H)7.33-7.52(m，5.5H)7.80-7.91(m， 1H)7.92-8.05(m，1H)8.81(s，0.5H)9.05(s，0.3H)。MS m/z 725(MH+)。MS m/z 723(M-H)-。
实施例58
(+/-)-8-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-1a-(((顺式)-2，6-二甲基-吗啉-4- 基)羰基)-11-羟基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲 酰胺.
将(+/-)-8-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-1a-(((顺式)-2，6-二甲基-吗啉 -4-基)羰基)-11-((苯基甲基)氧基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2] 苯并氮杂-5-甲酰胺(1.35g，1.87mmol)溶解在75ml甲醇和35ml不含抑制剂 的无水THF的混合物中。将反应混合物置于氮气下，并加入10％钯/炭 (208mg)。将反应混合物置于氢气(1大气压)(气囊)下，并在室温搅拌17小时。 使反应混合物过滤通过硅藻土，用甲醇冲洗，并真空除去滤液中的挥发物， 得到1.18g(97％)产物。1H NMR(500MHz，氯仿-D)δppm 0.29-0.48(m， 0.8H)0.88(s，1.5H)0.94-1.10(m，2.5H)1.12-1.65(m，9.6H)1.62-1.85(m， 3.9H)1.83-2.07(m，5H)2.28-2.64(m，2H)2.69-2.86(m，1.3H)2.85-2.98(m， 1.6H)3.05(s，6H)3.59(d，J＝14.95Hz，0.9H)3.67-4.02(m，1.1H)4.12(d，J＝14.34Hz， 0.8H)4.37(s，0.5H)4.64(d，J＝14.65Hz，0.6H)5.02(d，J＝13.12Hz， 0.3H)6.77-6.93(m，1.1H)6.96-7.09(m，1.2H)7.15(d，J＝8.24Hz，0.8H)7.23(d， J＝9.16Hz，0.6H)7.40(d，J＝8.55Hz，0.6H)7.44-7.53(m，0.3H)7.85(d，J＝8.55Hz， 1.1H)7.98(t，J＝17.70Hz，0.9H)8.86(s，0.6H)9.28(s，0.2H)。MS m/z 635(MH+)。
实施例59和60
(+)-8-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，1a，2，12b-四氢-1a-(吗啉-4-基羰 基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰胺和(-)-8-环己基-N-[(二甲 基氨基)磺酰基]-1，1a，2，12b-四氢-1a-(吗啉-4-基羰基)-环丙并[d]吲哚并 [2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰胺.
将2M草酰氯(0.113mL，0.227mmol)于CH2Cl2中的溶液滴加到(+)或(-)8- 环己基-1，1a，2，12b-四氢-1a-(吗啉-4-基羰基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并 氮杂-5-甲酸(55mg，0.113mmol)于CH2Cl2(10mL)中的溶液(含有一滴DMF) 中。将反应混合物在室温搅拌2小时，之后将其浓缩，并高真空干燥。随后 将残余物溶解在THF(10mL)中，并加入N，N-二甲基硫酰胺(28mg，0.227mmol) 和DIPEA(0.059mL，0.339mmol)于THF(2mL)中的溶液。然后加入 DMAP(10mg)，之后将反应混合物在室温搅拌10分钟，接着在50℃搅拌过夜。 然后将其冷却，并将混合物减压浓缩。所得残余物通过制备性反相HPLC来 纯化，得到产物，其为(+)或(-)异构体。第一个异构体(由从手性AD柱中第 一个出来的酸合成)：灰白色固体(10mg，15％收率)；MS m/z 591(MH+)，保 留时间：3.585分钟。第二个异构体(由从手性AD柱中第二个出来的酸合成)： 浅黄色固体(19mg，28％收率)；MS m/z 591(MH+)，保留时间：3.553分钟。1H NMR(500MHz，溶剂)δppm 0.18(m，0.28H)1.10(dd，J＝9.92，5.95Hz， 0.28H)1.22-1.65(m，5.44H)1.76-1.88(m，2H)1.93-2.22(m，4H)2.58(dd，J＝9.92， 6.26Hz，0.28H)2.68(m，0.72H)2.84-3.05(m，1H)3.03(s，4.32H)3.04(s， 1.68H)3.25-3.83(m，8.72H)4.16(d，J＝14.95Hz，0.28H)4.91(m，0.28H)5.14(d， J＝15.26Hz，0.72H)7.39-7.52(m，3H)7.59-7.69(m，2H)7.96(m，1H)8.06(d， J＝1.22Hz，0.72H)8.12(s，0.28H)。
实施例61
8-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1a-[[4-(1-乙基丙基)-哌嗪-1-基]羰 基]-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰 胺。
在室温和氮气下向酸即8-环己基-5-(((二甲基氨基)磺酰基)氨甲酰 基)-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸 (50mg，90.6μmol)、N，N，N’，N’-四甲基四氟硼酸盐(TBTU，150mg，467μmol) 和1-(戊-3-基)哌嗪(24mg，153μmol)于DMF(2ml)中的混合物中加入N，N-二异 丙基乙基胺(0.11ml，631μmol)。将反应混合物在室温搅拌4小时5分钟，然后 浓缩。残余物用MeOH(4ml)稀释，并通过Shimadzu-VP制备性反相HPLC用 如下分离方法来纯化，所述方法为：溶剂A＝10％MeOH-90％H2O-0.1％TFA， 溶剂B＝90％MeOH-10％H2O-0.1％TFA，起始％B＝0，最终％B＝100，梯度时 间＝6分钟，流速＝30mL/min，柱：Xterra Prep MS C 185μ30×50mm，馏分收 集：6.23-6.82分钟(在220nm进行UV检测)，得到三氟乙酸盐(48.3mg)，其为 灰白色固体。分析性HPLC方法：溶剂A＝10％MeOH-90％H2O-0.1％TFA，溶 剂B＝90％MeOH-10％H2O-0.1％TFA，起始％B＝0，最终％B＝100，梯度时间 ＝2分钟，流速＝5ml/min，柱：Xterra MS C18S73.0×50mm；
LC/MS：(ES+)m/z(M+H)+＝690.56，HPLC Rt＝1.675分钟。分析性HPLC方法： 溶剂A＝5％MeCN-95％H2O-10mM NH4OAc，溶剂 B＝95％MeCN-5％H2O-10mM NH4OAc，起始％B＝0，最终％B＝100，梯度时 间＝2分钟，流速＝5ml/min，柱：Phenomenex Lina C185μm 3.0×50mm；
LC/MS：(ES+)m/z(M+H)+＝690.49，HPLC Rt＝1.690分钟。LC/MS通过使用在 220nm进行UV检测的Shimadzu-VP设备和Waters Micromass来进行。
实施例62
(+/-)-8-环己基-11-甲基-1，1a，2，12b-四氢-1a-(吗啉-4-基羰基)-环丙并[d]吲 哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸甲酯.
在氮气下向微波反应管中装入InCl3(19.5mg，0.039mmol)。然后将其密 封，并加入THF(2mL)。在-78℃加入甲基锂于乙醚(ether)中的溶液(0.074mL， 浓度为1.6M的溶液，0.1185mmol)，并搅拌0.5小时。然后将反应混合物温热 至室温，并加入(+/-)-8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-1a-(吗啉-4-基羰基)-11-[[(三氟 甲基)磺酰基]氧基]-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸甲酯(51mg， 0.079mmol)和PdCl2(PPh3)2(2.7mg，0.0039mmol)于THF(1mL)中的溶液。在微 波条件下将反应混合物在100℃加热2小时。然后其用甲醇淬灭，并浓缩。 通过制备性HPLC柱对残余物进行纯化，得到灰白色固体，其为产物(17mg， 42％收率)。MS m/z 513(MH+)，保留时间：3.978分钟。1H NMR(500MHz， MeOD)δppm 0.21(m，0.25H)1.06(m，0.25H)1.18-1.65(m，5.5H)1.72-2.20(m， 6H)2.44(s，2.25H)2.46(s，0.75H)2.52(m，0.25H)2.61(m，0.75H)2.79-3.88(m， 9.75H)3.96(s，3H)4.13(d，J＝14.95Hz，0.25H)4.87-4.91(m，0.25H)5.10(d， J＝15.26Hz，0.75H)7.21-7.32(m，2H)7.43(s，0.25H)7.49(s，0.75H)7.70-7.78(m， 1H)7.90(d，J＝8.55Hz，1H)8.12(s，0.75H)8.17(s，0.25H)。
实施例63
(+/-)-8-环己基-1a-(吗啉-4-基羰基)-11-乙烯基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d] 吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸甲酯.
向(+/-)-8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-1a-(吗啉-4-基羰基)-11-[[(三氟甲基)磺 酰基]氧基]-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸甲酯(125mg， 0.195mmol)于DMF(3mL)中的溶液中加入LiCl(24.8mg，0.585mmol)、三丁基 (乙烯基)锡(74mg，0.234mmol)和PdCl2(PPh3)2(6.8mg，0.0098mmol)。在氮气气 氛下将反应混合物在100℃加热过夜。然后其用水淬灭，并用CH2Cl2(2×20mL) 萃取。合并有机层，干燥(MgSO4)，并浓缩，得到棕色油状物。然后通过制 备性HPLC对其进行纯化，得到橙色固体，其为最终产物(54mg，53％收率)。 MS m/z 525(MH+)，保留时间：4.090分钟。1H NMR(500MHz，MeOD)δppm 0.21(m，0.26H)1.05(m，0.26H)1.19-1.64(m，5.48H)1.73-1.85(m，2H)1.89-2.16(m， 4H)2.56(m，0.26H)2.62(m，0.74H)2.77-3.86(m，9.74H)3.94(s，3H)4.08(d， J＝15.26Hz，0.26H)4.76-4.80(m，0.26H)5.03(d，J＝15.26Hz，0.74H)5.36(d， J＝10.68Hz，0.74H)5.37(d，J＝10.99Hz，0.26H)5.93(d，J＝17.71Hz，0.74H)5.95(d， J＝17.70Hz，0.26H)6.77-6.87(m，1H)7.32(d，J＝8.24Hz，1H)7.46-7.53(m， 1H)7.63-7.75(m，2H)7.88(d，J＝8.55Hz，1H)8.08(s，0.74H)8.12(s，0.26H)。
一些化合物的分析性数据披露在表4中。
表4.
实施例64
(+/-)-8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-1a-(吗啉-4-基羰基)-11-[[(三氟甲基)磺酰 基]氧基]-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸甲酯.
向(+/-)-8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-1a-(吗啉-4-基羰基)-11-羟基-环丙并[d] 吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸甲酯(250mg，0.486mmol)于二氯甲烷 (20mL)中的溶液中加入三乙胺(0.074mL，0.534mmol)。然后在0℃滴加三氟甲 磺酸酐(151mg，0.534mmol)于CH2Cl2(2mL)中的溶液。将反应混合物温热至室 温，并搅拌过夜。反应混合物用饱和NaHCO3溶液淬灭，然后分离有机层。 然后用盐水对其进行洗涤，并干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到黄色固体，其 为产物(250mg，80％收率)。MS m/z 647(MH+)，保留时间：3.980分钟。
实施例65
(1aR)-[部分]-8-环己基-N5-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，12b-二氢 -N1a-[(2R，3S)-3-羟基-4，7，7-三甲基二环[2.2.1]庚-2-基]-11-甲氧基-环丙并[d] 吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a，5(2H)-二甲酰胺.
将TBTU(437mg，1.36mmol)和DIPEA(0.95mL，5.436mmol)加到(+/-)-8-环 己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d] 吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸(500mg，0.906mmol)于 DMSO(20.0mL)中的溶液中。将反应混合物在室温搅拌15分钟。然后加入 (2S，3R)-3-氨基-1，7，7-三甲基二环[2.2.1]庚-2-醇(280mg，1.36mmol)，并将反应 混合物在室温搅拌过夜。反应混合物用水淬灭，并用1N HCl溶液酸化。分 离出来的棕色固体通过过滤来收集。然后该物质通过制备性HPLC在如下条 件下来分级(fractionate)：柱：Waters Sunfire 19mm×100mm；溶剂A： 10％CH3CN-90％H2O-0.1％TFA；溶剂B：90％CH3CN-10％H2O-0.1％TFA；程 序：起始于65％溶剂B，初始保留时间为5分钟，然后历时30分钟逐渐增加 至90％溶剂B；流速为25mL/min；载量：50-60mg/运行。
在上述HPLC条件下(1aR)-[部分]-8-环己基-N5-[(二甲基氨基)磺酰 基]-1，12b-二氢-N1a-[(2R，3S)-3-羟基-4，7，7-三甲基二环[2.2.1]庚-2-基]-11-甲氧 基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a，5(2H)-二甲酰胺在(1aS)-[部 分]-8-环己基-N5-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，12b-二氢-N1a-[(2R，3S)-3-羟基 -4，7，7-三甲基二环[2.2.1]庚-2-基]-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并 氮杂-1a，5(2H)-二甲酰胺之前洗脱。得到产物，其为浅黄色固体(230mg， 36％收率)。MS m/703(MH+)，保留时间：3.936分钟。1H NMR(500MHz， MeOD)δppm 0.14-0.24(m，2.64H)0.51(s，2.46H)0.72-2.21(m，20.9H)2.49(m， 0.18H)2.62(m，0.82H)2.85(m，0.18H)2.96(m，0.82H)3.03(s，6H)3.39(m， 0.82H)3.49-3.58(m，1.64H)3.71-3.80(m，0.36H)3.90(s，3H)4.17(d，J＝14.65Hz， 0.18H)5.06(d，J＝14.65Hz，0.18H)5.37(d，J＝14.95Hz，0.82H)6.73(d，J＝5.49Hz， 0.82H)6.98-7.05(m，1H)7.08(d，J＝4.58Hz，0.18H)7.10(d，J＝2.44Hz， 0.18H)7.21(d，J＝2.44Hz，0.82H)7.31(d，J＝8.55Hz，0.82H)7.34(d，J＝8.55Hz， 0.18H)7.59-7.64(m，1H)7.87-7.93(m，1H)7.99(s，0.18H)8.09(d，J＝1.22Hz， 0.82H)。
实施例66
(1aS)-[部分]-8-环己基-N5-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，12b-二氢 -N1a-[(2R，3S)-3-羟基-4，7，7-三甲基二环[2.2.1]庚-2-基]-11-甲氧基-环丙并[d] 吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a，5(2H)-二甲酰胺.
将TBTU(437mg，1.36mmol)和DIPEA(0.95mL，5.436mmol)加到(+/-)-8-环 己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d] 吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸(500mg，0.906mmol)于 DMSO(20.0mL)中的溶液中。将反应混合物在室温搅拌15分钟。然后加入 (2S，3R)-3-氨基-1，7，7-三甲基二环[2.2.1]庚-2-醇(280mg，1.36mmol)，并将反应 混合物在室温搅拌过夜。反应混合物用水淬灭，然后用1N HCl溶液酸化。 分离出来的棕色固体通过过滤来收集。然后该物质通过制备性HPLC在如下 条件下来分级：柱：Waters Sunfire 19mm×100mm；溶剂A： 10％CH3CN-90％H2O-0.1％TFA；溶剂B：90％CH3CN-10％H2O-0.1％TFA；程 序：起始于65％溶剂B，初始保留时间为5分钟，然后历时30分钟逐渐增加 至90％溶剂B；流速为25mL/min；载量：50-60mg/运行。
在上述HPLC条件下(1aS)-[部分]-8-环己基-N5-[(二甲基氨基)磺酰 基]-1，12b-二氢-N1a-[(2R，3S)-3-羟基-4，7，7-三甲基二环[2.2.1]庚-2-基]-11-甲氧 基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a，5(2H)-二甲酰胺在(1aR)-[部 分]-8-环己基-N5-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，12b-二氢-N1a-[(2R，3S)-3-羟基 -4，7，7-三甲基二环[2.2.1]庚-2-基]-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并 氦杂-1a，5(2H)-二甲酰胺之后洗脱。得到产物，其为浅黄色固体(215mg， 34％收率)。MS m/703(MH+)，保留时间：4.038分钟。1H NMR(500MHz， MeOD)δppm 0.20(m，0.38H)0.75(s，1.86H)0.76(s，1.86H)0.84(s，1.86H)0.85(s， 1.14H)0.89-2.18(m，18.9H)2.52(m，0.38H)2.70(m，0.62H)2.85(m，0.38H)2.97(m， 0.62H)3.03(s，2.28H)3.04(s，3.72H)3.33-3.39(m，0.62H)3.43-3.51(m， 1.24H)3.73-3.77(m，0.38H)3.78-3.84(m，0.38H)3.90(s，1.86H)3.90(s， 1.14H)4.14(d，J＝14.65Hz，0.38H)5.11(d，J＝14.65Hz，0.38H)5.44(d，J＝15.26Hz， 0.62H)6.68(d，J＝4.88Hz，0.62H)6.96-7.03(m，1H)7.07(d，J＝5.19Hz， 0.38H)7.12(d，J＝2.44Hz，0.38H)7.23(d，J＝2.14Hz，0.62H)7.27(d，J＝8.54Hz， 0.62H)7.33(d，J＝8.54Hz，0.38H)7.55(dd，J＝8.39，1.68Hz，0.62H)7.62(dd，J＝8.55， 1.53Hz，0.38H)7.87(d，J＝8.54Hz，0.62H)7.91(d，J＝8.55Hz，0.38H)8.08(d， J＝1.22Hz，0.38H)8.10(d，J＝1.22Hz，0.62H)。
除非另有说明，用于实施例67-79的实验使用下述一般方法。LCMS数 据：停止时间：梯度时间+1分钟；起始浓度：0％B(除非另有说明)；结束浓 度：100％B(除非另有说明)；洗脱剂A：5％CH3CN/95％H2O(含有10mM NH4OAc)(对于柱A、D和E)，10％MeOH/90％H2O(含有0.1％TFA)(对于柱B和 C)；洗脱剂B：95％CH3CN/5％H2O(含有10mM NH4OAc)(对于柱A、D和E)， 90％MeOH/10％H2O(含有0.1％TFA)(对于柱B和C)；柱A：Phenomenex 10μ 4.6×50mm C18；柱B：Phenomenex C1810μ3.0×50mm；柱C：Phenomenex 4.6×50mm C1810μ；柱D：Phenomenex Lina C185μ3.0×50mm；柱E： Phenomenex 5μ4.6×50mm C18。制备性HPLC数据：针对H2O/CH3CN(含有 10mM NH4OAc缓冲液)的条件：梯度：历时20分钟的线性梯度(除非另有说 明)；起始浓度：15％B(除非另有说明)；结束浓度：100％B；洗脱剂A： 5％CH3CN/95％H2O(含有10mM NH4OAc)；洗脱剂B：95％CH3CN/5％H2O(含 有10mM NH4OAc)；柱：Sunfire Prep C18OBD 5μ30×100mm；针对 H2O/MeOH(含有0.1％TFA缓冲液)的条件：梯度：历时20分钟的线性梯度(除 非另有说明)；起始浓度：30％B(除非另有说明)；结束浓度：100％B；洗脱 剂A：10％MeOH/90％H2O(含有0.1％TFA)；洗脱剂B：90％MeOH/10％H2O(含 有0.1％TFA)；柱：phenomenex 21×100mm C18H2O。
实施例67
8-环己基-5-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d] 吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸甲酯.
在氮气下向搅拌的氢化钠(浓度为60％的矿物油分散液，370mg，9.2mmol) 于DMSO(8mL)中的浆液中加入碘化三甲基氧化锍(2.03g，9.2mmol)。将反应 混合物搅拌45分钟，然后加入13-环己基-10-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-3-甲 氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-6-甲酸甲酯(2.2g，4.0mmol)于 DMSO(5mL)中的溶液(烧瓶用DMSO(2×3mL)冲洗)。将反应混合物搅拌1小 时，倒入0.25N HCl(100mL)中，并用EtOAc(150mL)萃取。有机层用盐水(20mL) 洗涤，并且合并的水层用EtOAc(100mL)萃取。合并的有机层用盐水(～20mL) 洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，并浓缩至干。将残余物与EtOAc/Et2O(1∶3，50mL) 一起搅拌，然后过滤除去固体。浓缩母液，并高真空干燥，得到8-环己基 -5-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并 [2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸甲酯(1.92g，3.4mmol，85％)，其为黄色固体， 所述固体不经进一步纯化即使用。其为旋转异构体或阻转异构体的～2∶1混合 物。1H NMR(300MHz，CD3OD)δ0.19-0.26(m，0.4H)，0.78-2.19(m，15.6H)， 2.64-3.02(m，2H)，3.16-3.28(m，1H)，3.41(d，J＝15.0Hz，0.6H)，3.51(s，1.8H)， 3.80(s，1.2H)，3.88(s，3H)，4.00(d，J＝15.0Hz，0.4H)，5.22(d，J＝15.0Hz，0.4H)， 5.42(d，J＝15.0Hz，0.6H)，6.93-7.01(m，1H)，7.12(d，J＝2.6Hz，0.4H)，7.19(d， J＝2.6Hz，0.6H)，7.25(d，J＝8.8Hz，0.6H)，7.29(d，J＝8.8Hz，0.4H)，7.55(dd，J＝8.8， 1.5Hz，0.6H)，7.63(dd，J＝8.8，1.5Hz，0.4H)，7.85(d，J＝8.8Hz，0.6H)，7.88(d， J＝8.8Hz，0.4H)，8.08(d，J＝1.5Hz，0.4H)，8.31(d，J＝1.5Hz，0.6H)。LCMS：m/e 563(M+H)+，保留时间：3.75分钟，柱B，4分钟梯度。
实施例68
8-环己基-5-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d] 吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸.
将8-环己基-5-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并 [d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸甲酯(1.92g，3.41mmol)溶解在 MeOH/THF(1∶1，40mL)中，并用1M NaOH水溶液(8mL)处理。搅拌反应混合 物，并在60℃加热2小时，然后冷却至室温。透明溶液用1M HCl水溶液(8mL) 中和，然后浓缩，从而除去有机溶剂。所得固体通过过滤来收集，用H2O洗 涤，并真空干燥，得到8-环己基-5-((环丙基磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基 -1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸(1.66g， 3.03mmol，89％)，其为黄色粉末，所述粉末不经进一步纯化即使用。其为旋 转异构体或阻转异构体的1∶1混合物。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ0.32(t， J＝6.2Hz，0.5H)，0.71-2.12(m，15.5H)，2.61-2.94(m，2H)，3.16-3.27(m，1H)， 3.41(d，J＝15.0Hz，0.5H)，3.82(s，1.5H)，3.86(s，1.5H)，3.99(d，J＝15.0Hz，0.5H)， 5.28(d，J＝15.0Hz，0.5H)，5.49(d，J＝15.0Hz，0.5H)，6.85(dd，J＝8.4，2.6Hz，0.5H)， 6.91(dd，J＝8.4，2.6Hz，0.5H)，6.96(d，J＝2.6Hz，0.5H)，7.08(d，J＝2.6Hz，0.5H)， 7.19(d，J＝8.4Hz，0.5H)，7.24(d，J＝8.4Hz，0.5H)，7.61(d，J＝8.4Hz，0.5H)，7.67(d， J＝8.4Hz，0.5H)，7.83(d，J＝8.4Hz，0.5H)，7.85(d，J＝8.4Hz，0.5H)，8.06(s，0.5H)， 8.35(s，0.5H)，9.31-10.35(m，1H)。LCMS：m/e 547(M-H)-，保留时间：2.06分 钟，柱A，4分钟梯度。
实施例69
8-环己基-5-((异丙基磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d] 吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸甲酯.
在氮气下向搅拌的氢化钠(浓度为60％的矿物油分散液，97mg，2.4mmol) 于DMSO(2mL)中的浆液中加入碘化三甲基氧化锍(530g，2.4mmol)。将反应 混合物搅拌45分钟，然后加入13-环己基-10-((异丙基磺酰基)氨甲酰基)-3-甲 氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-6-甲酸甲酯(578g，1.05mmol)于 DMSO(1.5mL)中的溶液(烧瓶用DMSO(2×0.75mL)冲洗)。将反应混合物搅拌 1小时，倒入0.25N HCl(25mL)中，并用EtOAc(40mL)萃取。有机层用盐水 (10ml)洗涤，并且合并的水层用EtOAc(25mL)萃取。合并的有机层用盐水 (～10mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，并浓缩至干。将残余物与EtOAc/Et2O(1∶4， 10mL)一起搅拌，然后过滤除去固体。浓缩母液，并高真空干燥，得到8-环 己基-5-((异丙基磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并 [2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸甲酯(620mg，1.0mmol，定量)，其为黄色固 体，所述固体不经进一步纯化即使用。其为旋转异构体或阻转异构体的～2∶1 混合物。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ0.32-0.39(m，0.4H)，0.77-2.09(m，17.6H)， 2.60-2.96(m，2H)，3.41(d，J＝15.0Hz，0.6H)，3.53(s，1.8H)，3.79(s，1.2H)，3.87(s， 3H)，4.02-4.14(m，1.4H)，5.14(d，J＝15.0Hz，0.4H)，5.39(d，J＝15.0Hz，0.6H)， 6.89(dd，J＝8.4，2.6Hz，0.4H)，6.91(dd，J＝8.4，2.6Hz，0.6H)，7.00(d，J＝2.6Hz， 0.4H)，7.11(d，J＝2.6Hz，0.6H)，7.23(d，J＝8.4Hz，0.6H)，7.25(d，J＝8.4Hz，0.4H)， 7.38(dd，J＝8.4，1.5Hz，0.6H)，7.43(dd，J＝8.4，1.5Hz，0.4H)，7.83(d，J＝8.4Hz， 0.6H)，7.86(d，J＝8.4Hz，0.4H)，7.96(d，J＝1.5Hz，0.4H)，8.20(d，J＝1.5Hz，0.6H)， 8.39(s，0.4H)，8.43(s，0.6H)。LCMS：m/e 563(M-H)-，保留时间：3.00分钟， 柱A，4分钟梯度。
实施例70
8-环己基-5-((异丙基磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d] 吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸.
将8-环己基-5-((异丙基磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并 [d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸甲酯(606mg，1.07mmol)溶解在 MeOH/THF(1∶1，14mL)中，并用1M NaOH水溶液(2.5mL)处理。搅拌反应混 合物，并在60℃加热2小时，然后冷却至室温。透明溶液用1M HCl水溶液 (2.5mL)中和，然后浓缩，从而除去有机溶剂。将残余物与H2O(10mL)一起 搅拌过夜，所得固体通过过滤来收集，用H2O洗涤，并真空干燥，得到8-环 己基-5-((异丙基磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并 [2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸(530mg，0.96mmol，90％)，其为亮黄色固体， 所述固体不经进一步纯化即使用。其为旋转异构体或阻转异构体的～2∶1混合 物。1H NMR(300MHz，CD3OD)δ0.23-0.30(m，0.4H)，0.80-2.24(m，17.6H)， 2.70-3.11(m，2H)，3.46(d，J＝15.0Hz，0.6H)，3.95(s，3H)，3.93-4.10(m，1.4H)， 5.29(d，J＝15.0Hz，0.4H)，5.48(d，J＝15.0Hz，0.6H)，6.98-7.05(m，1H)，7.16(d， J＝2.6Hz，0.4H)，7.23(d，J＝2.6Hz，0.6H)，7.29(d，J＝8.8Hz，0.6H)，7.33(d，J＝8.8Hz， 0.4H)，7.56(dd，J＝8.8，1.5Hz，0.6H)，7.64(dd，J＝8.4，1.5Hz，0.4H)，7.87(d， J＝8.8Hz，0.6H)，7.92(d，J＝8.4Hz，0.4H)，8.13(d，J＝1.5Hz，0.4H)，8.31(d，J＝1.5Hz， 0.6H)。LCMS：m/e 551(M+H)+，保留时间：3.74分钟，柱B，4分钟梯度。
实施例71
5-((氨基磺酰基)氨甲酰基)-8-环己基-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲 哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸甲酯.
在氮气下向搅拌的氢化钠(浓度为60％的矿物油分散液，350mg，8.8mmol) 于DMSO(8mL)中的浆液中分三份加入碘化三甲基氧化锍(1.93g，8.8mmol)。 将反应混合物搅拌0.5小时，然后加入10-((氨基磺酰基)氨甲酰基)-13-环己基 -3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-6-甲酸甲酯(2.0g，3.8mmol)于 DMSO(8mL)中的溶液(烧瓶用DMSO(2×2mL)冲洗)。将反应混合物搅拌1小 时，倒入0.25N HCl(100mL)中，并用CH2Cl2(100mL)稀释。过滤溶液，从而 收集固体，分离母液中的有机层，并浓缩至干。将残余物溶解在 EtOAc(～150mL)中，用H2O(～50mL)和盐水(～50mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过 滤，并浓缩至干。将残余物与EtOAc/Et2O(4∶1，50mL)一起搅拌，过滤收集固 体，并用EtOAc洗涤。将这些固体与最初收集的固体合并，得到5-((氨基磺 酰基)氨甲酰基)-8-环己基-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯 并氮杂-1a(2H)-甲酸甲酯(1.39g，2.6mmol，68％)，其为褐色固体，所述固体 不经进一步纯化即使用。其为旋转异构体或阻转异构体的1∶1混合物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.13-0.21(m，0.5H)，1.06-2.12(m，11.5H)， 2.64-2.94(m，2H)，3.46(s，1.5H)，3.49(d，J＝15.0Hz，0.5H)，3.75(s，1.5H)，3.85(s， 3H)，4.02(d，J＝15.0Hz，0.5H)，5.21(d，J＝15.0Hz，0.5H)，5.42(d，J＝15.0Hz，0.5H)， 6.99-7.09(m，1H)，7.17-7.31(m，1H)，7.41(s，0.5H)，7.43(s，0.5H)，7.66-7.56(m， 1H)，7.82(d，J＝8.4Hz，0.5H)，7.87(d，J＝8.8Hz，0.5H)，8.25(s，0.5H)，8.47(s，0.5H)， 11.62(s，0.5H)，11.69(s，0.5H)。LCMS：m/e 538(M+H)+，保留时间：3.56分钟， 柱B，4分钟梯度。
实施例72
5-((氨基磺酰基)氨甲酰基)-8-环己基-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲 哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸.
将5-((氨基磺酰基)氨甲酰基)-8-环己基-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d] 吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸甲酯(1.1mg，2.0mmol)溶解在 MeOH/THF(1∶1，24mL)中，并用1M NaOH水溶液(5mL)处理。搅拌反应混合 物，并在60℃加热2小时，然后冷却至室温。透明溶液用1M HCl水溶液(5mL) 中和，然后浓缩，从而除去有机溶剂。将残余物与H2O(10mL)一起搅拌1小 时，过滤收集所得固体，用H2O洗涤，并真空干燥，得到5-((氨基磺酰基)氨 甲酰基)-8-环己基-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂 -1a(2H)-甲酸(1.05mg，2.0mmol，98％)，其为浅黄色固体，所述固体不经进 一步纯化即使用。其为旋转异构体或阻转异构体的1∶1混合物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.08-0.17(m，0.5H)，0.79-2.13(m，11.5H)， 2.65-2.94(m，2H)，3.44(d，J＝14.6Hz，0.5H)，3.85(s，3H)，3.96(d，J＝14.6Hz，0.5H)， 5.20(d，J＝14.6Hz，0.5H)，5.40(d，J＝14.6Hz，0.5H)，6.98-7.08(m，1H)， 7.17-7.46(m，4H)，7.58(d，J＝8.1Hz，0.5H)，7.62(d，J＝8.1Hz，0.5H)，7.81(d， J＝8.8Hz，0.5H)，7.87(d，J＝8.8Hz，0.5H)，8.25(s，0.5H)，8.44(s，0.5H)， 11.48-13.19(m，2H)。LCMS：m/e 524(M+H)+，保留时间：3.51分钟，柱B，4 分钟梯度。
实施例73
13-环己基-N6-(2-(二甲基氨基)乙基)-N10-((二甲基氨基)磺酰基)-3-甲氧 基-N6-甲基-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-6，10-二甲酰胺.
将13-环己基-10-(((二甲基氨基)磺酰基)氨甲酰基)-3-甲氧基-7H-吲哚并 [2，1-a][2]苯并氮杂-6-甲酸甲酯(700mg，1.27mmol)溶解在MeOH/THF(1∶1， 14mL)中，并用1M NaOH水溶液(3mL)处理。搅拌反应混合物，并用微波辐 射在80℃加热15分钟，然后冷却至室温。透明溶液用1M HCl水溶液(3mL) 中和，然后浓缩，从而除去有机溶剂。将残余物与H2O(10mL)一起搅拌1小 时，过滤收集所得固体，用H2O洗涤，并真空干燥。向这些固体、N1，N1，N2- 三甲基乙-1，2-二胺(191mg，1.88mmol)和三乙胺(0.700mL)于DMF(5mL)中的 溶液中加入HATU(620mg，1.63mmol)。将反应混合物在室温搅拌1小时，用 H2O(25mL)和1M HCl(水溶液)(5mL)稀释，并搅拌20分钟。过滤收集沉淀物， 用H2O冲洗，并干燥，得到不纯的13-环己基-N6-(2-(二甲基氨基)乙 基)-N10-((二甲基氨基)磺酰基)-3-甲氧基-N6-甲基-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮 杂-6，10-二甲酰胺(960mg)，其为黄色粉末。将13-环己基-N6-(2-(二甲基氨 基)乙基)-N10-((二甲基氨基)磺酰基)-3-甲氧基-N6-甲基-7H-吲哚并[2，1-a][2] 苯并氮杂-6，10-二甲酰胺的粗制样品(100mg)溶解在MeOH/DMF(3∶1，4mL) 中，过滤，并通过制备性HPLC(H2O/CH3CN(含有10mM NH4OAc缓冲液))来 纯化，得到13-环己基-N6-(2-(二甲基氨基)乙基)-N10-((二甲基氨基)磺酰基)-3- 甲氧基-N6-甲基-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-6，10-二甲酰胺(78mg， 0.13mmol，95％)。1H NMR(300MHz，CD3OD)δ1.11-3.07(m，24H)，2.99(s，6H)， 3.50-3.76(m，2H)，3.93(s，3H)，4.27-4.44(m，1H)，5.05-5.25(m，1H)，7.05(s， 1H)7.08(d，J＝2.6Hz，1H)，7.16(dd，J＝8.8，2.6Hz，1H)，7.56(d，J＝8.4Hz，1H)， 7.64(dd，J＝8.8，1.5Hz，1H)，7.88(d，J＝8.4Hz，1H)，8.16(br s，1H)。LCMS：m/e 620(M-H)-，保留时间：2.32分钟，柱A，4分钟梯度。
实施例74
8-环己基-N1a-(2-(二甲基氨基)乙基)-N5-((二甲基氨基)磺酰基)-11-甲氧 基-N1a-甲基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a，5(2H)-二甲 酰胺.
向8-环己基-5-(((二甲基氨基)磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢 环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸(120mg，0.22mmol)和 N1，N1，N2-三甲基乙-1，2-二胺(29mg，0.28mmol)于DMF(2mL)和TEA(0.1mL)中 的溶液中加入HATU(108mg，0.28mmol)。将反应混合物在室温搅拌3小时， 用MeOH稀释，并通过制备性HPLC(H2O/MeOH(含有0.1％TFA缓冲液))来纯 化，得到8-环己基-N1a-(2-(二甲基氨基)乙基)-N5-((二甲基氨基)磺酰基)-11- 甲氧基-N1a-甲基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a，5(2H)- 二甲酰胺(104mg，0.16mmol，74％)，其为黄色固体。其为旋转异构体或阻转 异构体的1∶4混合物。1H NMR(300MHz，MeOD)δppm 8.05-8.12(m，0.2H)， 7.86-7.98(m，1.8H)，7.59(dd，J＝8.4，1.5Hz，0.8H)，7.53-7.64(m，0.2H)，7.34(d， J＝8.4Hz，1H)，7.15-7.22(m，1H)，7.04(dd，J＝8.4，2.6Hz，1H)，5.11(d，J＝15.4Hz， 0.8H)，4.80-4.90(m，0.2H)，4.10-4.20(m，0.2H)，3.92(s，0.6H)，3.91(s，2.4H)， 3.08-3.86(m，4.8H)，3.04(s，4.8H)，3.03(s，1.2H)，2.54-3.05(m，11H)， 1.06-2.21(m，11.8H)，0.13-0.23(m，0.2H)。LCMS：m/e 636(M+H)+，柱A，梯 度时间：2分钟，保留时间：1.20分钟。LCMS：m/e 660(M+H)+，柱C，梯 度时间：2分钟，保留时间：1.91分钟。
实施例75
8-环己基-N1a-(2-(二乙基氨基)乙基)-N5-((二甲基氨基)磺酰基)-11-甲氧 基-N1a-甲基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a，5(2H)-二甲 酰胺.
向8-环己基-5-(((二甲基氨基)磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢 环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸(120mg，0.22mmol)和 N1，N1-二乙基-N2-甲基乙-1，2-二胺(31mg，0.24mmol)于DMF(2mL)和 TEA(0.1mL)中的溶液中加入HATU(90mg，0.24mmol)。将反应混合物在室温 搅拌16小时，用MeOH稀释，并通过制备性HPLC(H2O/MeOH(含有0.1％TFA 缓冲液))来纯化，得到8-环己基-N1a-(2-(二乙基氨基)乙基)-N5-((二甲基氨基) 磺酰基)-11-甲氧基-N1a-甲基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂 -1a，5(2H)-二甲酰胺(87mg，0.13mmol，73％)，其为黄色固体。其为旋转异构 体或阻转异构体的1∶7混合物。1H NMR(300MHz，MeOD)δppm 8.08-8.12(m， 0.12H)，7.98(s，0.88H)，7.93(d，J＝8.4Hz，1H)，7.60(d，J＝8.4Hz，0.88H)， 7.58-7.64(m，0.12H)，7.35(d，J＝8.4Hz，1H)，7.20(s，1H)，7.04(dd，J＝8.4，2.2Hz， 1H)，5.14(d，J＝15.4Hz，0.88H)，4.77-4.91(m，0.12H)，4.13-4.23(m，0.12H)， 3.92(s，0.36H)，3.91(s，2.64H)，3.04(s，6H)，2.52-3.87(m，13.88H)，0.99-2.20(m， 17.88H)，0.16-0.25(m，0.12H)。LCMS：m/e 664(M+H)+，柱A，梯度时间：2 分钟，保留时间：1.28分钟。
实施例76
8-环己基-1a-(((3R)-3-(二甲基氨基)-吡咯烷-1-基)羰基)-N-((二甲基氨基) 磺酰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5- 甲酰胺.
向8-环己基-5-(((二甲基氨基)磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢 环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸(60mg，0.11mmol)和 (R)-N，N-二甲基吡咯烷-3-胺(16mg，0.14mmol)于DMF(1mL)和TEA(0.06mL) 中的溶液中加入HATU(54mg，0.14mmol)。将反应混合物在室温搅拌2小时， 用MeOH稀释，并通过制备性HPLC(H2O/MeOH(含有0.1％TFA缓冲液))来纯 化，得到8-环己基-1a-(((3R)-3-(二甲基氨基)-吡咯烷-1-基)羰基)-N-((二甲基氨 基)磺酰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂 -5-甲酰胺(66mg，0.10mmol，93％)，其为黄色固体。其为非对映异构体的3∶1 混合物。1H NMR(300MHz，MeOD)δppm 8.12(br s，0.25H)，7.86-8.01(m， 1.75H)，7.57-7.65(m，0.25H)，7.59(d，J＝8.4Hz，0.75H)，7.34(d，J＝8.4Hz，0.75H)， 7.27-7.35(m，0.25H)，7.16-7.23(m，1H)，7.04(dd，J＝8.4，2.6Hz，0.75H)， 6.96-7.04(m，0.25H)，5.13(dd，J＝15.4，2.2Hz，0.75H)，4.15-4.24(m，0.25H)， 3.92(s，0.75H)，3.90(s，2.25H)，3.62(dd，J＝15.4，4.4Hz，0.75H)，3.40-4.11(m， 3.25H)，3.14-3.29(m，1H)，3.03(s，1.5H)，3.04(s，4.5H)，2.83-2.98(m，6H)， 2.47-3.09(m，3H)，1.03-2.40(m，13.75H)，0.09-0.22(m，0.25H)。LCMS：m/e 648(M+H)+，柱A，梯度时间：2分钟，保留时间：1.14分钟。
实施例77
8-环己基-1a-(((3S)-3-(二甲基氨基)-吡咯烷-1-基)羰基)-N-((二甲基氨基) 磺酰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5- 甲酰胺.
向8-环己基-5-(((二甲基氨基)磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢 环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸(60mg，0.11mmol)和 (S)-N，N-二甲基吡咯烷-3-胺(16mg，0.14mmol)于DMF(1mL)和TEA(0.06mL) 中的溶液中加入HATU(54mg，0.14mmol)。将反应混合物在室温搅拌1小时， 用MeOH稀释，并通过制备性HPLC(H2O/MeOH(含有0.1％TFA缓冲液))来纯 化，得到8-环己基-1a-(((3S)-3-(二甲基氨基)-吡咯烷-1-基)羰基)-N-((二甲基氨 基)磺酰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂 -5-甲酰胺(66mg，0.10mmol，93％)，其为黄色固体。其为非对映异构体的3∶1 混合物。1H NMR(300MHz，MeOD)δppm 8.13(br s，0.25H)，7.86-8.01(m， 1.75H)，7.57-7.65(m，0.25H)，7.59(d，J＝8.4Hz，0.75H)，7.35(d，J＝8.4Hz，0.75H)， 7.27-7.35(m，0.25H)，7.16-7.23(m，1H)，7.04(dd，J＝8.4，2.6Hz，0.75H)， 6.96-7.04(m，0.25H)，5.14(d，J＝15.4，0.75H)，4.15-4.24(m，0.25H)，3.92(s， 0.75H)，3.91(s，2.25H)，3.62(d，J＝15.4，4.4Hz，0.75H)，3.40-4.11(m，3.25H)， 3.14-3.29(m，1H)，3.03(s，1.5H)，3.04(s，4.5H)，2.83-2.98(m，6H)，2.47-3.09(m， 3H)，1.03-2.40(m，13.75H)，0.09-0.22(m，0.25H)。LCMS：m/e 648(M+H)+，柱 A，梯度时间：4分钟，保留时间：2.13分钟。
实施例78
8-环己基-N1a，N1a-二(2-(二乙基氨基)乙基)-N5-((二甲基氨基)磺酰基)-11- 甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a，5(2H)-二甲酰胺.
向8-环己基-5-(((二甲基氨基)磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢 环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸(60mg，0.11mmol)和 N1-(2-(二乙基氨基)乙基)-N2，N2-二乙基乙-1，2-二胺(31mg，0.14mmol)于 DMF(1mL)和TEA(0.06mL)中的溶液中加入HATU(54mg，0.14mmol)。将反应 混合物在室温搅拌1小时，用MeOH稀释，并通过制备性HPLC(H2O/MeOH(含 有0.1％TFA缓冲液))来纯化，得到8-环己基-N1a，N1a-二(2-(二乙基氨基)乙 基)-N5-((二甲基氨基)磺酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并 [2，1-a][2]苯并氮杂-1a，5(2H)-二甲酰胺(78mg，0.10mmol，93％)，其为黄色固 体。其为旋转异构体或阻转异构体的1∶5混合物。1H NMR(300MHz，MeOD)δ ppm 8.20(d，J＝1.5Hz，0.16H)，8.00(d，J＝1.5Hz，0.84H)，7.93(d，J＝8.4Hz，0.84H)， 7.92-7.98(m，0.16H)，7.63(dd，J＝8.4，1.5Hz，0.16H)，7.58(dd，J＝8.4，1.5Hz， 0.84H)，7.34-7.39(m，0.16H)，7.35(d，J＝8.4Hz，0.84H)，7.24(d，J＝2.6Hz，0.16H)， 7.20(d，J＝2.6Hz，0.84H)，7.05(dd，J＝8.4，2.6Hz，1H)，5.13(d，J＝15.4Hz，0.84H)， 4.86-5.02(m，0.16H)，4.06-4.38(m，2H)，3.94(s，0.48H)，3.91(s，2.52H)，3.70(d， J＝15.4Hz，0.84H)，3.06-3.86(m，11.16H)，3.03(s，6H)，2.48-3.01(m，4H)， 0.85-2.19(m，24.84H)，0.20-0.28(m，0.16H)。LCMS：m/e 749(M+H)+，柱A， 梯度时间：4分钟，保留时间：2.77分钟。
实施例79
外消旋-(1aR，12bS)-8-环己基-1a-(((2S)-2-((二甲基氨基)甲基)-哌啶-1-基) 羰基)-N-((二甲基氨基)磺酰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并 [2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰胺和外消旋-(1aR，12bS)-8-环己基 -1a-(((2R)-2-((二甲基氨基)甲基)-哌啶-1-基)羰基)-N-((二甲基氨基)磺酰 基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰 胺.
向8-环己基-5-(((二甲基氨基)磺酰基)氨甲酰基)-11-甲氧基-1，12b-二氢 环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸(60mg，0.11mmol)、N，N- 二甲基-1-(哌啶-2-基)甲胺(20mg，0.14mmol)于DMF(1mL)和TEA(0.06mL)中 的溶液中加入HATU(54mg，0.14mmol)。将反应混合物在室温搅拌1小时，用 MeOH稀释，并通过制备性HPLC(H2O/MeOH(含有0.1％TFA缓冲液))来纯化， 得到两组非对映异构的产物：
异构体A：第一个洗脱的产物(26mg，0.039mmol，35％)，其为黄色固体。 其为比例为1∶6的旋转异构体或阻转异构体。1H NMR(300MHz，MeOD)δppm 8.03(s，1H)，7.92(d，J＝8.4Hz，1H)，7.57-7.64(m，0.15H)，7.58(dd，J＝8.4，1.5Hz， 0.85H)，7.33(d，J＝8.4Hz，0.85H)，7.29-7.36(m，0.15H)，7.20(d，J＝2.6Hz，0.85H)， 7.18(d，J＝2.6Hz，0.15H)，7.04(dd，J＝8.4，2.6Hz，0.85H)，6.99-7.05(m，0.15H)， 5.06(d，J＝15.4Hz，1H)，4.73-4.80(m，0.15H)，4.47-4.58(m，0.85H)，3.92(s， 0.45H)，3.91(s，2.55H)，3.70(d，J＝15.4Hz，1H)，3.03(s，6H)，2.80-4.18(m，11H)， 2.54-2.66(m，1H)，1.13-2.20(m，17.85H)，0.17-0.26(m，0.15H)。LCMS：m/e 676(M+H)+，柱C，梯度时间：2分钟，保留时间：1.91分钟。
异构体B：第二个洗脱的产物(18mg，0.027mmol，25％)，其为黄色固体。 其为比例为3∶7的旋转异构体或阻转异构体。1H NMR(300MHz，MeOD)δppm 8.15(d，J＝1.5Hz，0.3H)，8.00(d，J＝1.5Hz，0.7H)，7.92(d，J＝8.4Hz，1H)，7.63(dd， J＝8.4，1.5Hz，0.3H)，7.59(dd，J＝8.4，1.5Hz，0.7H)，7.37(d，J＝8.4Hz，0.3H)， 7.33(d，J＝8.4Hz，0.7H)，7.20(d，J＝2.6Hz，0.7H)，7.17(d，J＝2.6Hz，0.3H)，7.04(dd， J＝8.4，2.6Hz，1H)，5.11(d，J＝15.4Hz，1H)，4.66-4.95(m，1H)，4.11(d，J＝15.4Hz， 0.3H)，3.92(s，0.9H)，3.91(s，2.1H)，3.67(d，J＝15.4Hz，0.7H)，3.37-4.15(m，3H)， 3.04(s，6H)，2.52-3.28(m，9H)，1.02-2.20(m，17.7H)，0.10-0.21(m，0.3H)。
LCMS：m/e 676(M+H)+，柱C，梯度时间：2分钟，保留时间：1.95分钟。
实施例80-84通过如下LC/MS方法来分析：柱：PHENOMENNEX-LUNA 3.0×50mm S10；流动相：(A)：10∶90甲醇-水，(B)：90∶10甲醇-水，缓冲液： 0.1％TFA；梯度范围：0-100％B；梯度时间：2分钟；流速：4mL/min；分析 时间：3分钟；检测：检测器1：UV(220nm)，检测器2：MS(ESI+)。
实施例80
(+/-)-8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-(甲氧基羰基)-环丙并[d]吲 哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸叔丁酯.
在氮气下将无水NaH(96mg，4mmol)加到搅拌的氯化三甲基氧化锍 (567mg，4.4mmol)于无水DMSO(10mL)中的悬浮液中。将所得混合物在室温 搅拌30-45分钟，然后分小份加入纯净的烯烃(1.0g，2mmol)。悬浮液用 DMSO(5mL)稀释，并在50℃加热3-4小时。使反应混合物冷却至室温，并加 入水。过滤沉淀的固体，用水洗涤，然后风干过夜，得到1.15g粗制产物， 其通过快速柱色谱法(硅胶，3％MeOH/DCM)来纯化，得到纯的所期望环丙基 化合物(0.96g)，其为灰白色固体。LC/MS：保留时间：3.816分钟；m/e 516(MH+)。1H NMR(400MHz，CDCl3)。观察到产物以相互转化的旋转异构 体的形式存在。LC/MS：保留时间：3.816分钟；m/e 516(MH+)。1H NMR(400MHz，CDCl3)。观察到产物以相互转化的旋转异构体的形式存在。
实施例81
(+/-)-8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-(甲氧基羰基)-环丙并[d]吲 哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酸.
将叔丁酯(515mg，1mmol)和TFA(5mL)于无水DCM(10mL)中的溶液在室 温搅拌，直到水解完成(8-12小时)。将过量的TFA和DCM蒸发至干，得到所 期望的酸(0.47g，100％)，其为浅米色固体。LC/MS：保留时间：2.245分钟； m/e 460(MH+)。1H NMR(400MHz，CDCl3)。观察到产物以相互转化的旋转异 构体的形式存在。保留时间：2.245分钟；m/e 460(MH+)。1H NMR(400MHz， CDCl3)。观察到产物以相互转化的旋转异构体的形式存在。
实施例82
(+/-)-8-环己基-5-(吗啉代磺酰基氨甲酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基- 环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a-甲酸.
将酸(1当量)和羰基二咪唑(1.5当量)于无水THF中的混合物在50℃加热 30分钟，然后使其冷却至室温。然后依次加入1当量的硫酰胺或磺酰胺和 DBU(2当量)。将所得混合物在室温搅拌过夜。用酸性水溶液进行后处理后， 经分离的粗制产物通过制备性HPLC来纯化，得到产物。产物的酯部分(ester moiety)使用1N NaOH于THF-MeOH中溶液来水解，得到相应的酸。酸通过 制备性HPLC来纯化，然后分离。LC/MS：保留时间：1.968分钟；m/e 460(MH+)。1H NMR(400MHz，CDCl3)。观察到产物以相互转化的旋转异构 体的形式存在。
实施例83
(+/-)-8-环己基-5-(4-甲基哌嗪-1-基磺酰基氨甲酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11- 甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a-甲酸.
产物通过制备性HPLC来纯化，然后分离到单TFA盐形式，其为米色固 体。LC/MS：保留时间：1.687分钟；m/e 607(MH+)。1H NMR(400MHz，CDCl3)。 观察到产物以相互转化的旋转异构体的形式存在。
实施例84
(+/-)-8-环己基-5-(环丙基磺酰基氨甲酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基- 环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a-甲酸。LC/MS：保留时间：2.030分 钟；m/e 549(MH+)。1H NMR(400MHz，CDCl3)。观察到产物以相互转化的旋 转异构体的形式存在。
实施例85-97通过如下LC/MS方法来分析：起始％B：0；最终％B：100； 梯度时间：3分钟；停止时间：4分钟；流速：4ml/min；波长：220；溶剂A： 10％MeOH/90％H2O/0.1％三氟乙酸；溶剂B：10％H2O/90％MeOH/0.1％三氟 乙酸；柱：XBridge 4.6×50mm S5。
实施例85
将酸(1.3g，2.83mmol)和CDI(0.64g，3.97mmol)于THF(20mL)中的混合物 在50℃加热0.5小时，冷却下来，然后加入甲磺酰胺(0.4g，4.2mmol)和 DBU(0.264mL，1.77mmol)。将混合物搅拌20小时，用EtOAc稀释，用冷的1N HCl(2×)、盐水洗涤，干燥(MgSO4)，除去溶剂，并通过快速色谱法(Biotage 40M)来纯化，得到化合物1-2(1.28g，85％)，其为浅黄色固体。LC-MS保留时 间：3.51。MS m/z 537(M+H)。观察到产物以相互转化的旋转异构体的形式 存在。主要异构体：1H NMR(400MHz，氯仿-D)δppm 1.11-2.17(m，12H)， 2.84-2.98(m，2H)，3.43(d，J＝14.86Hz，1H)，3.49(s，3H)，3.55(s，3H)，3.89(s，3H)， 5.40(d，J＝15.11Hz，1H)，6.91-6.96(m，1H)，7.13(d，J＝2.52Hz，1H)，7.22-7.27(m， 1H)，7.39(dd，J＝8.31，1.51Hz，1H)，7.85(d，J＝8.81Hz，1H)，8.23(d，J＝1.26Hz， 1H)，8.75(s，1H).
实施例86
向酸(1.28g，2.4mmol)于THF(5mL)和MeOH(5mL)中的溶液中加入 NaOH(1N，12mL，12mmol)。在室温搅拌3小时后，混合物用EtOAc稀释，用 冷的1N HCl、盐水洗涤，干燥(MgSO4)，并真空除去溶剂，得到化合物1-3， 其为米色固体(1.20g，96％)。LC-MS保留时间：3.46。MS m/z 523(M+H)。观 察到产物以相互转化的旋转异构体(～1/1)的形式存在。1H NMR(400MHz，氯 仿-D)。
实施例87
用于胺偶联的典型一般方法：向酸(0.060g，0.11mmol)和含有仲/叔胺的 二胺二盐酸盐(0.034g，0.17mmol)于DMC(1.5mL)中的混合物中加入Et3N(三 乙胺)(0.096mL，0.69mmol)和HBTU(0.065g，0.17mmol)。将混合物在室温搅拌 0.5小时，用MeOH稀释，除去溶剂。将残余物溶解在甲醇中，过滤，并通 过制备性HPLC来纯化，得到胺的TFA盐(0.0378g，82％)。
实施例88
由酸制备(0.47g，44％)。LC-MS保留时间：3.54。MS m/z 551(M+H)。
实施例89
由酯制备(0.43g，94％)。LC-MS保留时间：3.49。MS m/z 537(M+H)。
实施例90
由酸制备(0.96g，59％)。LC-MS保留时间：3.58。MS m/z 578(M+H)。观 察到化合物以相互转化的旋转异构体(3/4)的形式存在。主要异构体：1H NMR(400MHz，氯仿-D)δppm 1.16-1.59(m，4H)，1.72(dd，J＝9.44，4.15Hz，3H)， 1.88-2.12(m，4H)，2.24-2.36(m，2H)，2.75-2.97(m，2H)，3.44(d，J＝14.86Hz，1H)， 3.56(s，3H)，3.89(s，3H)，4.09(d，1H)，4.24-4.37(m，4H)，5.41(d，J＝14.86Hz，1H)， 6.92-6.96(m，1H)，7.13(d，J＝2.01Hz，1H)，7.24-7.30(m，1H)，7.39(dd，J＝8.31， 1.51Hz，1H)，7.84-7.88(m，1H)，8.24(d，J＝1.51Hz，1H)。
实施例91
由酯制备(0.93g，100％)。LC-MS保留时间：3.51。MS m/z 564(M+H)。 观察到化合物以相互转化的旋转异构体(～3/4)的形式存在。主要异构体：1H NMR(400MHz，ppm 0.34-0.42(m，1H)，1.15-2.10(m，11H)，2.22-2.38(m，2H)， 2.65-2.78(m，1H)，2.84-2.94(m，J＝3.02Hz，1H)，3.84(s，3H)，4.03(d，J＝15.11Hz， 1H)，4.21-4.43(m，4H)，5.34(d，J＝14.86Hz，1H)，6.87(dd，J＝8.56，2.77Hz，1H)， 6.98(d，J＝2.52Hz，1H)，7.21(d，J＝8.31Hz，1H)，7.69-7.75(m，1H)，7.86-7.90(m， 1H)，8.13(s，1H)。
实施例92
由酸制备(0.109g，67％)。LC-MS保留时间：3.60。MS m/z 580(M+H)。 观察到化合物以相互转化的旋转异构体(～5/4)的形式存在。主要异构体：1H NMR(400MHz，ppm 1.16-2.09(m，14H)，2.73-2.93(m，2H)，3.07(s，3H)， 3.31-3.52(m，3H)，3.76(s，3H)，3.88(s，3H)，4.05-4.10(m，1H)，5.40(d，J＝15.11Hz， 1H)，6.88-6.93(m，1H)，7.13(d，J＝2.27Hz，1H)，7.22-7.29(m，1H)，7.33-7.42(m， 1H)，7.82-7.86(m，1H)，8.19(d，J＝1.51Hz，1H)。
实施例93
由酯制备(0.108g，100％)。LC-MS保留时间：3.55。MS m/z 566(M+H)。
实施例94
由酸制备(0.127g，67％)。LC-MS保留时间：3.64。MS m/z 594(M+H)。 观察到化合物以相互转化的旋转异构体的形式存在。1HNMR(400MHz，ppm 1.11-2.13(m，18H)，2.64(dd，J＝10.07，6.80Hz，1H)，2.84-2.96(m，1H)， 3.34-3.67(m，4H)，3.75(s，3H)，3.88(s，3H)，4.03-4.10(m，1H)，5.40(d，J＝15.36Hz， 1H)，6.90-6.95(m，1H)，7.13(d，J＝2.01Hz，1H)，7.21-7.29(m，1H)，7.33-7.39(m， 1H)，7.83(d，J＝8.06Hz，1H)，8.20(d，J＝1.26Hz，1H)。
实施例95
由酯制备(0.126g，100％)。LC-MS保留时间：3.57。MS m/z 580(M+H)。
实施例96
(+/-)-8-环己基-N-(环丙基磺酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基 -1a-(((S)-3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基)-羰基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并 氮杂-5-甲酰胺.
制备了TFA盐(0.0249g，36％)。LC-MS保留时间：3.04。MS m/z 645(M+H)。
实施例97
(+/-)-8-环己基-N-(环丙基磺酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-((4-(吡 啶-2-基)哌嗪-1-基)-羰基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰胺.
制备了TFA盐(0.0447g，61％)。LC-MS保留时间：3.06。MS m/z 694(M+H)。LC-MS保留时间：2.99。MS m/z 657(M+H)。观察到化合物以相 互转化的旋转异构体(～2/1)的形式存在。主要异构体：1H NMR(400MHz，ppm 0.92-2.09(m，16H)，2.66(dd，J＝8.94，5.92Hz，1H)，2.87-2.98(m，1H)， 3.01-3.10(m，1H)，3.10-4.09(m，8H)，3.60(d，J＝15.36Hz，1H)，3.90(s，3H)，5.01(d， J＝15.36Hz，1H)，6.86-6.98(m，2H)，7.11(d，J＝2.27Hz，1H)，7.26-7.29(m，1H)， 7.48(d，J＝8.31Hz，1H)，7.81-7.94(m，2H)，7.98-8.07(m，2H)。
实施例98
8-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-1a-((4-(1-乙基丙基)哌嗪-1-基)羰 基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰 胺.
在室温和氮气下向酸即8-环己基-5-(((二甲基氨基)磺酰基)氨甲酰 基)-11-甲氧基-1，12b-二氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-甲酸 (50mg，90.6μmol)、N，N，N’，N’-四甲基四氟硼酸盐(TBTU，150mg，467μmol) 和1-(戊-3-基)哌嗪(24mg，153μmol)于DMF(2ml)中的混合物中加入N，N-二异 丙基乙基胺(0.11ml，631μmol)。将反应混合物在室温搅拌4小时5分钟，然后 浓缩。残余物用MeOH(4ml)稀释，并通过Shimadzu-VP制备性反相HPLC用 如下分离方法来纯化，所述方法为：溶剂A＝10％MeOH-90％H2O-0.1％TFA， 溶剂B＝90％MeOH-10％H2O-0.1％TFA，起始％B＝0，最终％B＝100，梯度时 间＝6分钟，流速＝30mL/min，柱：Xterra Prep MS C185μ30×50mm，馏分收 集：6.23-6.82分钟(在220nm进行UV检测)，得到产物的三氟乙酸盐(48.3mg)， 其为灰白色固体。分析性HPLC方法：溶剂A＝10％MeOH-90％H2O-0.1％TFA， 溶剂B＝90％MeOH-10％H2O-0.1％TFA，起始％B＝0，最终％B＝100，梯度时 间＝2分钟，流速＝5ml/min，柱：Xterra MS C18S73.0×50mm；
LC/MS：(ES+)m/z(M+H)+＝690.56，HPLC Rt＝1.675分钟。分析性HPLC方法： 溶剂A＝5％MeCN-95％H2O-10mM NH4OAc，溶剂 B＝95％MeCN-5％H2O-10mM NH4OAc，起始％B＝0，最终％B＝100，梯度时 间＝2分钟，流速＝5ml/min，柱：Phenomenex Lina C 185μm 3.0×50mm；
LC/MS：(ES+)m/z(M+H)+＝690.49，HPLC Rt＝1.690分钟。
实施例99-102以与实施例98相似的方式来制备。
实施例99
8-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-1a-(((3R)-3-(羟基甲基)-吗啉-4-基)羰 基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰 胺.
分析性HPLC方法：溶剂A＝10％MeOH-90％H2O-0.1％TFA，溶剂 B＝90％MeOH-10％H2O-0.1％TFA，起始％B＝0，最终％B＝100，梯度时间＝2 分钟，流速＝5ml/min，柱：Xterra MS C18S73.0×50mm；
LC/MS：(ES+)m/z(M+H)+＝651.25，HPLC Rt＝1.822分钟。分析性HPLC方法： 溶剂A＝5％MeCN-95％H2O-10mM NH4OAc，溶剂 B＝95％MeCN-5％H2O-10mM NH4OAc，起始％B＝0，最终％B＝100，梯度时 间＝2分钟，流速＝5ml/min，柱：Phenomenex Lina C185μm 3.0×50mm；
LC/MS：(ES+)m/z(M+H)+＝651.45，HPLC Rt＝1.063分钟。
实施例100
8-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-11-甲氧基-1a-(((3R)-3-甲基-吗啉-4- 基)羰基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰胺.
分析性HPLC方法：溶剂A＝10％MeOH-90％H2O-0.1％TFA，溶剂 B＝90％MeOH-10％H2O-0.1％TFA，起始％B＝0，最终％B＝100，梯度时间＝2 分钟，流速＝5ml/min，柱：Xterra MS C18S73.0×50mm；
LC/MS：(ES+)m/z(M+H)+＝635.26，HPLC Rt＝1.867分钟。分析性HPLC方法： 溶剂A＝5％MeCN-95％H2O-10mM NH4OAc，溶剂 B＝95％MeCN-5％H2O-10mM NH4OAc，起始％B＝0，最终％B＝100，梯度时 间＝2分钟，流速＝5ml/min，柱：Phenomenex Lina C185μm 3.0×50mm； LC/MS：(ES+)m/z(M+H)+＝635.63，HPLC Rt＝1.113分钟。
实施例101
8-环己基-1a-((4，4-二氟-哌啶-1-基)羰基)-N-((二甲基氨基)磺酰基)-11-甲 氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰胺.
分析性HPLC方法：溶剂A＝10％MeOH-90％H2O-0.1％TFA，溶剂 B＝90％MeOH-10％H2O-0.1％TFA，起始％B＝0，最终％B＝100，梯度时间＝2 分钟，流速＝5ml/min，柱：Xterra MS C18S73.0×50mm；
LC/MS：(ES+)m/z(M+H)+＝655.26，HPLC Rt＝1.922分钟。分析性HPLC方法： 溶剂A＝5％MeCN-95％H2O-10mM NH4OAc，溶剂 B＝95％MeCN-5％H2O-10mM NH4OAc，起始％B＝0，最终％B＝100，梯度时 间＝2分钟，流速＝5ml/min，柱：Phenomenex Lina C185μm 3.0×50mm；
LC/MS：(ES+)m/z(M+H)+＝655.32，HPLC Rt＝1.212分钟。
实施例102
1a-(((3R)-3-(氨基甲基)-吗啉-4-基)羰基)-8-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰 基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲酰 胺.
由8-环己基-N-((二甲基氨基)磺酰基)-1a-(((3R)-3-(羟基甲基)-吗啉-4-基) 羰基)-11-甲氧基-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-甲 酰胺通过如下反应来制备产物，其为三氟乙酸盐，所述反应为相应的氯化 物与氨在甲醇中在微波辐射下在100℃反应5分钟。分析性HPLC方法：溶剂 A＝10％MeOH-90％H2O-0.1％TFA，溶剂B＝90％MeOH-10％H2O-0.1％TFA，起 始％B＝0，最终％B＝100，梯度时间＝2分钟，流速＝5ml/min，柱：Xterra MS C18 S73.0×50mm；LC/MS：(ES+)m/z(M+H)+＝650.20，HPLC Rt＝1.603分钟。分析 性HPLC方法：溶剂A＝5％MeCN-95％H2O-10mM NH4OAc，溶剂 B＝95％MeCN-5％H2O-10mM NH4OAc，起始％B＝0，最终％B＝100，梯度时 间＝2分钟，流速＝5ml/min，柱：Phenomenex Lina C185μm 3.0×50mm；
LC/MS：(ES+)m/z(M+H)+＝650.02，HPLC Rt＝1.167分钟。
除非另有说明，以下一般操作属于以下实验操作。将酸(0.055mmol，1 当量)溶解在无水DMF中，然后加入HATU(0.083mmol，1.5当量)和 DIPEA(0.083.1.5当量)。将溶液搅拌2分钟，并在室温加到预称重的胺 (0.083mmol，1.5当量)中。将混合物搅拌14小时，并通过制备性HPLC来纯化。 HPLC梯度方法：方法A：柱：Agilent SB CN 4.6×100mm 3.5μm；流动相： 水-10mM NH4OH-ACN；方法B：柱：Phenomenex Gemini 4.6×100mm 5μm C18；流动相：水-10mM NH4OH-ACN；方法C：柱：Waters x-Bidge C18 150×4.6mm 5微米；流动相：水-10mM NH4OH-ACN；方法D：柱：Waters Xbridge 2.1×50mm 5μm C18；流动相：水-10mM NH4OH-ACN。